Analiz de sibstans byoaktif ak diferans orijin nan Cistanche Tuberosa nan Xinjiang

Résumé: Sis zòn pwodwi yo nanCistanche tubulosanan dezè a Taklamakan yo te chwazi kòm objè rechèch la, ak sibstans ki sou byoaktif ak aktivite antioksidan nan diferan pati (rasin, mitan ak tèt) yo te detèmine ak analiz estatistik miltivarye te pote soti. Rezilta yo te montre ke diferans ki genyen nan zòn pwodiksyon yo te gen efè enpòtan sou sibstans byoaktif nan Cistanche tubulosa (total polifenol,

Kontni total flavonoid, triterpenes total, total polisakarid, total proanthocyanidins, echinacoside ak verbascoside) akaktivite antioksidantout te gen yon enpak siyifikatif, e te gen diferans enpòtan nan lasibstans byoaktifnan diferan pati.Cistanche tubulosasoti nan diferan orijin gen fòaktivite antioksidanan vitro, IC50 nan DPPH gratis radikal scavenging pousantaj (IC50 DPPH) se mwens pase 7 mg / mL, ak IC50 nan ABTS nan to scavenging radikal gratis (IC50 ABTS) se mwens pase 3 mg / mL mL. Analiz korelasyon te montre ke IC50 DPPH nan Cistanche tubulosa te siyifikativman negatif korelasyon ak polifenol total akekinaokontni; IC50 ABTS te trè siyifikativman korelasyon negatif ak total polifenol, total polisakarid, echinacoside akverbascosidekontni. Analiz eleman prensipal yo ekstrè 3 eleman prensipal, ki gen to kontribisyon kimilatif divèjans yo te 80. 57 pousan ; analiz gwoup divize echantiyon yo an 3 gwoup. Lòd nòt konplè nan Cistanche tubulosa ki soti nan diferan zòn pwodiksyon se Kashi Jiashi County (0. 445), Alar City (0. 313), Hotan Moyu County (0. 051), Turpan Shanshan County. (-0. 057), Konte Hotan Yutian (-0. 071), Konte Bayingolengolengqiemo (-0. 680).

Mo kle: Cistanche tubulosa; sibstans byoaktif; diferans ki genyen nan zòn pwodiksyon; evalyasyon konplè

Klike pou konnen plis Cistanche Tubulosa Extrait Entwodiksyon

Entwodiksyon

Cistanche tubulosa(Schrenk) Wight, ke yo rele tou Wouj Willow Dayun[1], ansanm ak Cistanche deserticola, te enkli nan Farmakope Repiblik Pèp la Lachin kòm plant sous Cistanche deserticola, e li te enkli nan katalòg "Manje ak Medsin". Omològ" pa Komisyon Sante Nasyonal la nan 2018[2].Cistanche tubulosaGen yon varyete sibstans biyolojik aktif, tankou polifenol, polisakarid, glikozid feniletanòl, iridoid ak glikozid yo, elatriye. Diminye grès nan san [6], règleman iminitè [7], pwoteksyon nè [8], prevansyon osteyopowoz [{{3] }}], laksatif [11-12], amelyorasyon memwa [13] ak lòt aktivite fonksyonèl, li gen repitasyon "ginseng dezè".

Cistanche tubulosaparazit sèlman sou rasin yo nan plant Tamarix, epi li distribye nan Hetian, Kashgar, Aksu ak lòt zòn alantou dezè a Taklamakan nan Xinjiang, peyi mwen an. Rechèch [14] te jwenn ke diferan kote jeyografik gen diferan limyè, lapli, tanperati ak kondisyon tè, ki pral gen diferan degre nan enpak sou kwasans lan, devlopman ak kalite intrinsèques nan plant yo."Farmakope Repiblik Pèp la nan Lachin" sitou itilize a. kontni nan echinacoside ak verbascoside kòm endèks la evalye bon jan kalite a nan Cistanche tubuloside [2], men sibstans ki sou byoaktif nan Cistanche tubatus yo pi konplike. , flavonoid total, total polisakarid, triterpenes total, total proanthocyanidins, elatriye gen yon pakèt efè famasi. Se poutèt sa, metòd evalyasyon kalite milti-endèks la ka pi konplè evalye bon jan kalite a nan materyèl Cistanche tubulosa medsin [1]. Ki baze sou sa a, papye sa a gen entansyon konsantre sou dezè Taklamakan nan Xinjiang TakingCistanche tubulosakòm objè rechèch la, kalite, kontni ak aktivite antioksidan nan sibstans ki sou bioaktif nanCistanche tubulosasoti nan diferan zòn pwodwi yo te envestige, ak analiz korelasyon, analiz eleman prensipal ak analiz sistematik clustering yo te itilize pou evalyasyon konplè, yo nan lòd yo klarifye diferan zòn yo pwodwi nan Xinjiang. Diferans bon jan kalite nan Cistanche tubulosa bay sipò teyorik ak referans pou ranfòse kontwòl kalite Cistanche tubulosa ak pwodwi li yo, osi byen ke pwomosyon pwosesis la gwo twou san fon ak devlopman konplè ak itilizasyon Cistanche tubulosa.

1. 1. 3 Enstriman prensipal yo ak ekipman Pilòt3-6 m tip siye lèzèl

Santrifij, ki te pwodwi pa Beijing Boyikang eksperimantal enstriman co, Ltd.; TGL-20B santrifujeur, ki te pwodwi pa Shanghai Anting Scientific Instrument Co., Ltd.; 756 kalite UV-vizib spectrophotometer, ki te pwodwi pa Shanghai Qinghua Teknoloji Instrument Co., Ltd.; LC-20AB segondè-efikasite likid chromatography te pwodwi pa Shimadzu Corporation nan Japon; Lektè microplate Synergy H1 te pwodwi pa Porton Instruments Co., Ltd.

1.2 Detèminasyon sibstans byolojik aktif

1. 2. 1 Detèminasyon kontni total polifenol Gade metòd FH Li et al. [17]. Preparasyon echantiyon solisyon: Peze 0.50 g echantiyon, sèvi ak 70 pousan (si yo pa espesifye, pousantaj yo nan tèks la refere a fraksyon volim) solisyon etanòl kòm sòlvan an ekstraksyon, ak rapò a nan solid ak likid se 1. :40 (g/mL, menm pi ba pase.), extrait nan 60 degre, 250 W à aparèy pou 40 min, refwadi ak santrifuje nan 4000 r/min pou 10 min, kolekte supernatant a ak dilye pou 50 mL, mete sou kote. Pran 1 mL nan solisyon echantiyon an, ajoute 5 mL nan 10 pousan solisyon folinol, osile ak souke byen, apre yo fin kanpe pou 15 min, ajoute 4 mL nan 7.5 pousan solisyon Na2CO3, osile ak souke byen, epi kite l kanpe nan fè nwa a pou 20 minit. Apre 1 min, mezire absorpsyon li (A765), epi rezilta a eksprime nan ekivalan asid galik (mg GAE/g DW).

1. 2. 2 Detèminasyon kontni total flavonoid

Gade nan metòd Zhang Wenye et al. [18]. Pran 1 mL nan echantiyon solisyon an (menm jan ak 1.2.1) nan yon flacon volumétrique 10 mL, ajoute 0.3 mL nan solisyon NaNO2 ak yon fraksyon mas de 5 pousan, osile ak souke. byen, kite kanpe pou 15 min, apresa ajoute 0.3 mL Fè mL nan 10 pousan solisyon Al(NO3)3 ak 4 mL nan 4 pousan solisyon NaOH, delye a 10 mL ak 50 pousan solisyon etanòl, souke.

Souke byen, epi apre w fin kanpe nan fè nwa a pou 20 minit, mezire absorpsyon li (A510), rezilta a.

Fwi yo eksprime nan ekivalan rutin (mg RE/g DW).

1. 2. 3 Detèminasyon kontni total triterpenes

Gade metòd He Ce et al. [19]. Pran 0.4 mL nan echantiyon solisyon an (menm jan ak 1.2.1), evapore li nan sechrès nan yon beny dlo, apresa ajoute 0.4 mL nan 1.5 pousan solisyon vanilin-glasyal asid acetic ak 1.6 mL asid asid pèklorik, beny dlo 70 degre pou 15 min, apre refwadisman, ajoute 5 mL acetate etil, apre kanpe pou 10 min, mezire absorpsyon li (A560), ak rezilta a eksprime nan ekivalan asid oleanolik (mg OAE). /g DW).

1. 2. 4 Detèminasyon kontni total polisakarid

Gade nan metòd Zhang Yadan et al. [20]. Preparasyon echantiyon likid: 1. 00 g echantiyon te peze, dlo deionized yo te itilize kòm sòlvan ekstraksyon, rapò a nan solid nan likid te 1:30, ekstrè nan 60 degre, 250 W aparèy ultrasons pou 50 min, refwadi ak Lè sa a, ekstrè anba kondisyon an nan 4000 r/min Santrifij pou 10 min, kolekte supernatant la, ajoute 4 fwa volim nan 95 pousan solisyon etanòl, kite kanpe nan 4 degre pou 12 èdtan, Lè sa a, santrifuje nan 5000 r/min, kolekte a. presipite, epi lave ak asetòn, etè, epi pa gen okenn Lave ak dlo ak etanòl de fwa, ajoute yon kantite apwopriye nan dlo deyonize pou refonn, Lè sa a, fè deproteinization (metòd Sevage) ak depigmantasyon (metòd kabòn aktive) tretman, epi delye nan 10 mL pou tès. Pran 1 mL nan solisyon echantiyon an, ajoute 0.6 mL nan 6 pousan solisyon fenol ak 3 mL nan H2SO4 konsantre nan sekans, osile ak souke byen, mete yo nan yon beny dlo bouyi pou 10 min, epi apre refwadisman, mezire absòbe li (A490) , epi rezilta a eksprime kòm ekivalan glikoz (mg DE / g DW) te di.

1.2.5 Detèminasyon kontni proanthocyanidin

Gade metòd Lu Xiao et al. [21]. Preparasyon echantiyon solisyon: Peze 0.50 g echantiyon, ajoute 80 pousan etanòl.

Solisyon an te itilize kòm sòlvan ekstraksyon ak yon rapò solid-likid nan 1:30. Li te ekstrè nan yon aparèy ultrasons nan 50 degre ak 250 W pou 40 min. Apre refwadisman, li te santrifuje nan 4000 r / min pou 10 min. Yo te kolekte supernatant la epi yo te ajiste volim nan a 50 mL. , rezèv.

Pran 0.5 mL nan echantiyon solisyon an, ajoute 3 mL nan 4 pousan solisyon vanilin-metanòl ak 1.5 mL nan HCl konsantre an sekans, epi reyaji pou 15 min, Lè sa a, mezire absorpsyon li (A500), ak rezilta yo. yo eksprime kòm ekivalan proanthocyanidin (mg PCE / g DW) eksprime.

1. 2. 6 Detèminasyon kontni echinacoside ak verbascoside

Gade nan metòd Xu Mingjun et al. [22]. Preparasyon echantiyon likid: Peze 1.00 g echantiyon, sèvi ak 80 pousan solisyon etanòl kòm sòlvan ekstraksyon, rapò solid ak likid se 1:30, ekstrè nan 60 degre, 250 W ultrasons. aparèy pou 40 min, apre refwadisman, ekstrè nan 4000 r Santrifije pou 10 min nan kondisyon 1/min, kolekte supernatant la, delye nan 50 ml, epi mete sou kote. Kolòn kwomatografik la se te yon kolòn Alltima C18 (4.6 mm × 250 mm × 5 μm), faz mobil lan te 0.4 pousan akeuz asid fòmik (A)-acetonitrile (B), tanperati kolòn lan te 25 degre, ak to koule a te 1.00. mL / min, volim piki a te 10 μL, ak longèdonn deteksyon an te 330 nm. Te analiz quantitative te pote soti nan metòd ekstèn estanda.

1.2.7 Detèminasyon aktivite antioksidan an vitro Preparasyon echantiyon solisyon: peze

1. 20 g echantiyon yo te ekstrè ak 60 pousan solisyon etanòl kòm sòlvan an ekstraksyon, ak rapò a nan solid ak likid te 1:25. Yo te ekstrè nan yon aparèy ultrasons nan 60 degre ak 250 W pou 40 min. Apre refwadisman, yo te santrifuje nan 4500 r / min pou 15 min. , kolekte supernatant la; pran plizyè kantite apwopriye nan supernatant, delye ak 60 pousan solisyon etanòl nan echantiyon konsantrasyon likid nan 1 mg / mL, 3 mg / mL, 5 mg / mL, 10 mg / mL, 20 mg / mL, 30 mg / mL, 40 mg. /mL, yo dwe teste.

1) DPPH lib radikal scavenging kapasite. Gade nan metòd Xu Chunping [23]. Pran 1{{10}} μL nan solisyon echantiyon an, ajoute 250 μL nan solisyon DPPH, melanje byen, ajoute nan plak la mikrotiter, kenbe lwen limyè nan tanperati chanm pou 25 min, sèvi ak 60 pousan solisyon etanòl. kòm kontwòl vid la, mezire absòbe li yo (A517), epi kalkile DPPH dapre fòmil sa a To scavenging radikal gratis. To DPPH radikal gratis=1-A1-A2A0( ) × 100 pousan Nan fòmil la: A0 se absòbe 60 pousan solisyon etanòl olye pou yo echantiyon solisyon (kontwòl vid); A1 se absòbe solisyon echantiyon melanje ak solisyon DPPH; A2 se Absorbans etanòl absoli olye pou yo solisyon DPPH.

2) ABTS lib radikal scavenging kapasite. Gade metòd Kong Yuting et al. [24]. Likè manman ABTS se te yon solisyon melanje nan persulfate potasyòm (konsantrasyon final: 2.45 mmol / L) ak ABTS (konsantrasyon final la: 7 mmol / L) prepare nan dlo deyonize, epi li te kanpe nan 25 degre pou 12 èdtan nan fè nwa a. Anvan w itilize solisyon manman ABTS la, delye li ak dlo deyonize pou absòbe a (A734) se 0.7{{{0}}±0.05, ki se solisyon travay ABTS la. Pran 10 μL solisyon echantiyon (1 ~ 40 mg / mL), ajoute li nan plak la mikrotiter, Lè sa a, ajoute 200 μL ABTS solisyon k ap travay, kenbe li nan fè nwa a pou 30 min nan tanperati chanm, sèvi ak 60 pousan solisyon etanòl kòm kontwòl la vid. , epi mezire A734 li yo dapre fòmil sa a pou kalkile pousantaj absolisyon radikal lib ABTS. Pousantaj absòbe radikal lib ABTS=1-A′1-A′2A0( ) × 100 pousan kote: A′1 se absorpsyon apre melanje solisyon echantiyon an ak solisyon ABTS; A′2 se absòbe dlo deyonize olye pou yo solisyon ABTS.

1.3 Analiz done

Tout done yo te mezire nan paralèl twa fwa, ak rezilta yo te eksprime kòm (mwayèn ± devyasyon estanda). Yo te itilize Orijin 2019 pou analiz eleman prensipal ak analiz sistematik gwoup, epi SPSS Statistics 26 te itilize pou analiz divèjans. P<0. 05 indicated a significant difference.