Efè anti-aje nan ekstrè Piper Cambodianum Cistanche sou selil nòmal Fibroblast po imen ak yon modèl gerizon blesi nan sourit Ⅱ

Sispannekstrè selil pwoteje NHDF soti nan efè iradyasyon UV

Selil po yo reponn byen vit lè yo ekspoze a UV oswa sitokin tankou interleukin (IL)-4 ak IL-13.19Lè ekspoze UV, plizyè faktè yo ankouraje, tankou EGFR,20,21 TNFR% 2c22mitogen-aktive pwoteyin (MAP) kinaz, ERK, ak c-Jun amino-tèminal kinaz (JNK).23Tou de JNK ak p38 phosphorylate ak aktive faktè transcription c-Jun, ki, nan vire, elve c-Fos ak ogmante nivo pwoteyin aktivatè faktè transkripsyon -1,24ki nesesè pou transkripsyon MMP yo. Reseptè sa yo aktive pa fosforilasyon MAP kinaz ak lòt pwoteyin en.25MAP kinaz yo aktive pa fosforilasyon treonin espesifik ak rezidi tirozin.24,26Ekspozisyon UV mennen nan ekspresyon segondè nan eterodimè c-Jun ak c-Fos, anpil sitokin, ak faktè kwasans, ki fosforilasyon pa JNK ak p38.27,28Menm jan an tou, nivo pwoteyin p53 yo te elve, kòmanse soti nan 2.5 èdtan jiska 24 èdtan apre ekspoze UV.29Nou demontre ke selil ki ekspoze a iradyasyon UV pou 24 èdtan eksprime nivo pwoteyin TNFR1 ak EGFR, ki diminye nan yon fason ki depann de dòz lè selil yo te trete akSispann. Nou egzamine efè radyasyon UV sou fosforilasyon ak aktivite p38 (Thr180/Tyr182). Nivo pwoteyin nan c-Jun ak p53 yo te downregulated dramatikman nanSispann-selil trete (Figi 4A ak B).

Klike La a Pou Jwenn Plis Enfòmasyon Sou Cistanche Pou Tretman Anti-Aging

Cistanche ekstrè pwoteje selil NHDF iradyasyon UV ki soti nan ROS

Limyè UVB stimul pwodiksyon ROS,30,31ak UV ekspoze sou po a pwodui ROS tankou O2 ⋅−, H2 O2, epi1 O2. 32Ki pa trete akSispann-selil trete yo te sibi iradyasyon UV pou 24 èdtan, epi jenerasyon ROS te mezire pa klasman selil fluoresans aktive (FACS).

Figi 3Règleman nan pwoteyin ECM nanSispann-selil trete.Nòt: (A) Selil NHDF yo te trete avèk yoSispannpou 24 èdtan. Lisat selil yo te analize pa imunoblotting lè l sèvi avèk antikò anti-kolagen, anti-elastin, anti-MMP-3, ak anti-ERK-2. Rezilta yo reprezante twa eksperyans endepandan. (B) Aktin, kolagen an, elastin, MMP-3, ak ERK{-2 nan imunoprecipitates yo te quantifye pa Western blotting. Wotè ba yo se vle di respektif la± SD nan twa eksperyans endepandan. *P,0.05; **P,0.01. Abreviyasyon:Conc, konsantrasyon; ECM, matris ekstraselilè; ERK, kinaz kinaz ki kontwole siyal ekstraselilè; MMP, matris metaloproteinase; NHDF, nòmal fibroblast po imen;Sispann, Piper CambodianumP. Fourn.; SD, devyasyon estanda.

Figi 4Sispann ekstrè anpèchman nan pwodiksyon ROS nan selil UV-iradyasyon.Nòt: (A) Selil NHDF yo te ekspoze a iradyasyon UV nan 40 J pou 180 segonn epi yo te trete akSispannpou 24 èdtan. Lysates selil yo te analize pa immunoblotting lè l sèvi avèk anti-TNFR6, anti-c-Jun, anti-c-Fos, anti-pp38, oswa anti-p-JNK. Rezilta yo reprezante twa eksperyans endepandan. (B) Total ak tyrosine-phosphorylated p38, JUK, actin, ak TNFR6 nan imunoprecipitates yo te quantifier pa analiz Lwès yo. Wotè ba yo vle di± SD nan twa eksperyans endepandan. *P,0.05; **P,0.01. Abreviyasyon:Conc, konsantrasyon; EGFR, reseptè faktè kwasans epidèm; JNK, c-Jun amino-tèminal kinaz; JNK, c-Jun N-tèminal kinaz; NHDF, nòmal fibroblast po imen;Sispann, Piper CambodianumP. Fourn.; ROS, espès oksijèn reyaktif; SD, devyasyon estanda; TNFR, reseptè faktè necrosis timè; UV, iltravyolèt.

UV iradyasyon ogmante pwodiksyon ROS, pandan y apSispann ekstrè diminye pwodiksyon ROS nan selil NHDF. Nivo ROS nan H2 O2 yo te mezire lè l sèvi avèk pèmanan selil yo 2′,7′-Dichlorodihydrofluorescein diacetate (CM-H2 DCFDA) (Figi 5A). UV iradyasyon ogmante nivo ROS nan H2 O2 , Lè nou konsidere ke nivo ROS yo te redwi paSispann ekstrè nan yon fason ki depann de dòz (Figi 5B). Rezilta sa yo te endike saSispannekstrè pwoteje fibroblasts po soti nan iradyasyon UV pa diminye jenerasyon ROS.

Obsèvasyon makroskopik nan geri blesi nan sourit

Blesi yo te kreye sou do yo nan sourit ak Lè sa a, trete akSispannekstrè (0, 1, 10, ak 50µg/mL); zòn blesi yo te mezire chak jou pou 4 jou. Nan 4 jou, zòn ki antoure blesi yo nanSispann-trete sourit te montre diminye wouj nan yon fason ki depann de dòz konpare ak zòn blesi ki pa trete (Figi 5). Zòn blesi yo trete ekstrè yo te pi piti pase zòn blesi ki pa trete yo, ki montre yon modèl ki depann de dòz la. Nan 4 jou, zòn blesi yo trete ak 50µg/mL nanSispannyo te konplètman kouvri pa nouvo epitelyal. Pa gen okenn zòn blesi ki te enfekte (Figi 6A ak B). Yo te kalkile rapò zòn blesi yo nan jou 0 ak 4 (Figi 6C).

Diskisyon

Itilizasyon materyèl èrbal ak diferan pati plant yo te ogmante ak pwogrè koncomitan nan fitoterapi. Materyèl èrbal yo te itilize nan divès fòm tankou dwòg mono-oswa polyherbal, sipleman dyetetik, ak engredyan dyetetik, e anpil yo te vin byen koni ak an sekirite negosyan komèsyal yo.33Plant divès kalite, ki gen ladanSispann, yo te envestige pou pwopriyete potansyèl famasi yo, men pa gen okenn etid konparatif te fè deja akSispann ekstrè. Etid sa a te fèt pou detèmineefè yo nanSispann ekstrè sou aktivite geri blesi lè l sèvi avèk modèl blesi ensizyon nan sourit. Gerizon blesi enplike nan retabli entegrite tisi atravè pwosesis ki asosye ak enflamasyon, pwopagasyon, ak etap renovasyon.34 Se etap nan renovasyon po karakterize pa refòmilasyon ak refòm nan eleman fib kolagen an ki amelyore fòs rupture.35Pwosesis gerizon an kontwole sitou pa biosentèz ak depozisyon nouvo kolagen an ak spirasyon ki vin apre.36Nan etid blesi nou an,Sispann ekstrè te montre ogmante efè geri blesi konpare ak kontwòl la (Figi 1C ak 6). Gerizon sa yo ta ka akòz ogmante konsantrasyon kolagen an ak estabilizasyon fib yo. Nan pwosesis reparasyon tisi a, selil enflamatwa amelyore migrasyon ak pwopagasyon selil andotelyal yo, ki mennen nan neovaskularizasyon selil tisi konjonktif yo ki fè sentèz matris ekstraselilè, ki gen ladan kolagen an ak keratinosit, sa ki lakòz reepitelyalizasyon tisi blese yo.37Pousantaj nan kontraksyon blesi pi vit ka ogmante espas kominikasyon intraselilè junctional nan fibroblast ak amelyore spirasyon an pi vit nan tisi granulasyon.38Nan modèl la blesi ensizyon, sourit trete akSispannekstrè te montre pi vit geri blesi konpare ak kontwòl (Figi 6). Anpil etid te revele ke downregulation nan chemen p38 kinaz la pwoteje divès kalite sovaj p53-liy selil ki eksprime soti nan estrès jenotoksik.39,40Done nou yo te montre ke ekspresyon p38 nan selil UV-iradyasyon te downregulated paSispann tretman. Se poutèt sa,Sispann ekstrè jwenn nan fèy ak tij demontre tretman efikas nan geri blesi.Sispannekstrè diminye pwodiksyon ROS soti nan iradyasyon UV pa scavenging ROS nan selil NHDF (Figi 5A ak B). Anplis,Sispannekstrè akselere gerizon blesi apre iradyasyon po ((Figi 6A–C). Rezilta sa yo sijere keSispann ekstrè pwoteje po kont domaj iradyasyon UV, epi li ta ka itil kòm yon matyè premyè roman nan aplikasyon kosmetik.

Figi 5Sispann-medyatè anpèchman pwodiksyon ROS nan selil UV-iradyasyon.Nòt: (A) Selil yo te trete ak UVB iradyasyon (40 J) pou tan ki endike a epi apre yo te enkube ak 2′,7′-dichlorodihydrofluorescein diacetate pou 30 minit. Jenerasyon ROS te mezire pa FACS. (B) Selil yo te ekspoze a UVB (40 J) pou 180 segonn epi yo te trete ak konsantrasyon ki endike nanSispannpou 24 èdtan. Pwodiksyon ROS yo te estime ak tach la nan 2′,7′-dichlorodihydrofluorescein diacetate ak analize pa FACS.Abreviyasyon:FACS, klasman selil ki aktive fluoresans; FITC, fluorescein isothiocyanate; NHDF, nòmal fibroblast po imen;Sispann, Piper CambodianumP. Fourn.; ROS, espès oksijèn reyaktif; UV, iltravyolèt; UVB, iltravyolèt B.

Figi 6Efè geri blesi sou po sourit ki gen pwoblèm.Nòt: (A) Yo te kreye blesi 5-mm dyamèt sou po dorsal 7-sourit gason C57Bl/6 ki gen yon semèn (n=3). Rekiperasyon an nan blesi te evalye akSispanntretman nan diferan konsantrasyon (kontwòl negatif ak tretman apre blesi akSispannnan 1, 10, ak 50µg/mL). (B) Yo te detèmine zòn blesi a lè w mezire dyamèt blesi ki louvri yo. (C) Yo te kalkile zòn blesi a lè l sèvi avèk dimansyon blesi ouvè yo; *P,0.05; **P,0.01. Abreviyasyon:Sispann, Piper CambodianumP. Fourn; Conc, konsantrasyon.

Konklizyon

Etid sa a te envestigepotansyèl anti-aje ak blesi-geri efè nan tij Cistanche ak ekstrè fèynan selil NHDFak yon modèl sourit nan geri blesi. Latretman selil NHDF ak Cistanche ekstrèankouraje rekiperasyon an nan zòn nan gratenan yon fason ki depann de dòz kòm byen ke amelyorasyon nan ekspresyon jèn ECM. Anplis de sa, Cistancheekstrèyo te kapabpwoteje selil la kont ekspoze UV ​​lè w diminye pwodiksyon ROS. Finalman, obsèvasyon sa yo plis evalye ak konfime nan sourit modèl yo pou geri blesi in-vivo. Se poutèt sa,Ekstrè Cistanche reprezante yon nouvo ajan terapetik pwomèt pou tretman anti-aje ak geri blesi..

Rekonesans:Etid sa a te sipòte pa Pwogram Rechèch Syans Debaz atravè Fondasyon Nasyonal Rechèch Kore di (NRF), ki finanse pa Ministè Edikasyon (NRF-2014R1A1A3050752). Otè yo ta renmen remèsye Korea Research Institute of Bioscience & Biotechnology (KRIBB) paske li baySispannekstrè.

Divilgasyon Otè yo pa rapòte okenn konfli enterè nan travay sa a.

Referans

1. Slominski AT, Zmijewski MA, Semak I, et al. Sitokrom p450 ak kansè po: wòl wout andokrin lokal yo.Ajan Antikanse Med Chem. 2014;14(1):77–96. 

2. Gilchrest BA. Aje po ak fotoaging.Enfimyè Dermatol. 1990; 2(2):79–82. 

3. Ha TY. Devlopman materyèl manje fonksyonèl pou lavi an sante.Koreyen J Crop Sci. 2006;51:26–39.

4. Makrantonaki E, Zouboulis CC. Mekanis molekilè nan aje po: eta nan atizay la.Ann NY Acad Sci. 2007;1119:40–50. 

5. Seo MY, Chung SY, Choi WK, et al. Efè anti-aje diven diri nan fibroblast imen kiltive ak keratinosit.J Biosci Bioeng. 2009; 107(3):266–271. 

6. Kligman AM. Bonè efè destriktif nan limyè solèy la sou po moun.JAMAYAK. 1969;210(13):2377–2380. 

7. Oikarinen A, Karvonen J, Uitto J, Hannuksela M. Tisi konjonktif chanjman nan po ekspoze a UV-radyasyon natirèl ak terapetik.Fotomatol. 1985;2(1):15–26. 

8. Bech-Thomsen N, Wulf HC. Efè kanserojèn ak melanogenic yon sous filtre UVA alogen metal ak yon tubulèr fluorescent sous bwonzaj UVA avèk oswa san radyasyon UV anplis solè-simule nan sourit san cheve.Photochem Photobiol. 1995;62(4):773–779.

9. De MS, Lahiri SC. Etid sou fèy Piper betle.Toro Calcutta Sch Trop Med. 1971;19(3):69–72.

10. Ferreres F, Oliveira AP, Gil-Izquierdo A, Valentão P, Andrade PB. Piper betle fèy: profilage konpoze fenolik pa HPLC/DAD-ESI/MS(n) ak aktivite anti-cholinesterase.Fitochem Anal. 2014;25(5): 453–460.