Antioksidan ak Anti-Po aje Potansyèl nan chwazi plant Thai: Evalyasyon in vitro ak nan Silico Prediksyon sib Pati 1

Résumé: Po a se pi gwo ògàn ki fè yon varyete fonksyon esansyèl kò a. Defisyans nan estrikti po ak fonksyon pandan pwosesis la aje ta ka grav enpak sou sante nou ak byennèt. Anpil prèv sijere ke espès oksijèn reyaktif jwe yon wòl fondamantal nan aje po atravè aktivasyon an nan anzim yo degradatif ki gen rapò. Isit la, 16 espès plant medsin Thai yo te teste pou pwopriyete potansyèl anti-po aje yo. Tout ekstrè yo te envestige pou kontni total fenolik ak flavonoid, antioksidan, anti-elastaz, ak aktivite antityrosinase, osi byen ke kapasite nan obligatwa nan konpoze ak anzim sib pa debakadè molekilè. Pami tout plant yo tès depistaj, fèy yo nan A. occidentale ak G. zeylanicum ekspoze antioksidan fò ak anpèchman kont elastase ak tirozinaz. Lòt plant potansyèl yo enkli fèy S. alata ak fwi A. catechu, ak aktivite relativman wo anti-elastaz ak anti-tirozinaz, respektivman. Rezilta sa yo tou konsistan avèk etid debakadè konpoze ki sòti nan plant sa yo. Yo te jwenn aksyon inhibitor yo gen plis trè pozitivman korelasyon ak fenolik pase flavonoid. Ansanm, rezilta nou yo revele kèk plant Thai, ansanm ak konpoze kandida kòm sous natirèl nan antioksidan ak inibitè ki pisan nan elastaz ak tirozinaz, yo ta ka devlope kòm ajan pwomèt ak efikas pou terapi aje po.

Glycoside nan cistanche ka ogmante tou aktivite SOD nan kè ak tisi fwa, ak siyifikativman redwi kontni an nan lipofuscin ak MDA nan chak tisi, efektivman scavenging divès kalite radikal oksijèn reyaktif (OH-, H₂O₂, elatriye) ak pwoteje kont domaj ADN ki te koze. pa OH-radikal. Cistanche phenylethanoid glikozid gen yon kapasite gaya scavenging nan radikal gratis, yon pi wo kapasite diminye pase vitamin C, amelyore aktivite a nan SOD nan sispansyon espèm, redwi kontni an nan MDA, epi yo gen yon sèten efè pwoteksyon sou fonksyon manbràn espèm. Cistanche polisakarid ka amelyore aktivite SOD ak GSH-Px nan eritrosit ak tisi nan poumon nan sourit senesan eksperimantal ki te koze pa D-galaktoz, osi byen ke diminye kontni an nan MDA ak kolagen an nan poumon ak plasma, ak ogmante kontni an nan elastin, gen yon bon efè scavenging sou DPPH, pwolonje tan an nan ipoksi nan sourit senesan, amelyore aktivite a nan SOD nan serom, ak retade koripsyon fizyolojik nan poumon nan sourit senesan eksperimantal Avèk koripsyon selilè mòfolojik, eksperyans yo te montre ke Cistanche gen bon kapasite antioksidan. epi li gen potansyèl pou yo dwe yon dwòg pou anpeche ak trete maladi po aje. An menm tan an, echinacoside nan Cistanche gen yon kapasite enpòtan pou elimine radikal gratis DPPH epi li gen kapasite pou elimine espès oksijèn reyaktif epi anpeche degradasyon kolagen an radikal gratis, epi tou li gen yon efè reparasyon bon sou domaj anyon radikal gratis timin.

Klike sou benefis rou cong rong

【Pou plis enfòmasyon:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Mo kle: fitomedsin; anti-aje; antioksidan; anti-elastaz; anti-tirozinaz; proanthocyanidin; Areca catechu; Anakardium oksidantal; Glochidion zeylanicum; Senna alata

1. Entwodiksyon

Po se pi gwo ak pi konplèks ògàn nan kò imen an. Po a sèvi kòm yon baryè ant kò a ak anviwònman an deyò, epi li sèvi yon varyete de fonksyon [1]. Li gen yon wòl kosmetik enpòtan anplis pwoteje kò a kont pèt dlo ak enfeksyon mikwòb [2]. Anplis de sa, li travay pou sipòte lòt pati nan kò yo, tankou sistèm iminitè, nève, ak andokrin [1]. Gade nan jèn ak bote ka gen yon enpak pozitif sou konpòtman sosyal moun yo ak lavi moun [1,2]. Pakonsekan, pwoblèm nan estrikti po ak fonksyon ki rive lè nou laj ta ka gen yon enpak grav sou sante nou ak byennèt [2,3]. Mens, sechrès, mank de elastisite, teksti ki graj, ondilasyon, ak pigman nwa se tout karakteristik komen nan po ki pi gran [4]. Anpil chèchè yo ap travay kounye a sou jenere potansyèl dwòg anti-aje oswa pwodui chimik, patikilyèman sa yo ki sòti nan sous natirèl pou tretman po aje.

An jeneral, po moun gen laj nan de fason: entèn (kòm rezilta kwonolojik aje) ak ekstèn (kòm rezilta varyab anviwònman enfliyanse pa faktè anviwònman) [5]. Anpil prèv sijere ke estrès oksidatif, atravè fòmasyon nan espès oksijèn reyaktif (ROS), jwe yon wòl fondamantal nan tou de aje intrinsèque ak ekstèn po [6]. ROS lakòz domaj oksidatif nan selil po yo lè yo domaje makromolekil esansyèl tankou asid nikleyik, pwoteyin anzimatik, ak lipid manbràn, sa ki lakòz fonksyone byen selilè ak lanmò selil [7]. Estrès oksidatif tou kontribye nan degradasyon an nan matris la ekstraselilè (ECM) pa siprime sentèz eleman ECM (egzanp, elastin) ak aktive ECM degrade anzim (egzanp, elastase), ki lakòz pèt nan elastisite po [2,8,9]. Anplis, ROS ka lakòz koulè iregilye oswa nwa nan po a lè li pwovoke pwodiksyon yon òmòn -melanocyte-stimulating (-MSH) nan keratinosit, kidonk deklanche deklanchman anzim tirozinaz la ak fè pwomosyon sentèz melanin nan melanosit [10,11]. Se poutèt sa, netwaye ROS ak anpeche aktivite elastaz ak tirozinaz ta ka itil nan tretman an oswa menm prevansyon nan aje po.

Pwodwi natirèl yo kounye a ap resevwa anpil enterè kòm potansyèl medikaman altènatif pou trete plizyè maladi kòm byen ke aje ak laj ki asosye bès [8,12,13]. Plant twopikal yo ta ka enterese yo eksplore potansyèl yo nan tretman pou aje po. Jan nou te rapòte deja, plizyè plant andin ak Himalayan yo te konsidere kòm sous konpoze ak itilizasyon potansyèl kòm engredyan anti-aje [14,15]. Thailand se yon kote li te ye pou kiltive yon gran varyete plant twopikal, anpil nan yo ki pa te etidye anpil. Objektif rechèch sa a se te jwenn sous natirèl potansyèl pou devlope nouvo tretman kont aje po. Ekstrè yo nan 16 espès plant medsin Thai yo te etidye nan vitro pou pwopriyete yo ki gen rapò ak aje anti-po, ki gen ladan total fenolik ak flavonoid sa ki gen ladann, radikal gratis scavenging, anti-elastase, ak aktivite anti-tirozinaz. Nou menm tou nou te fè plis analiz korelasyon ak yon apwòch debakadè molekilè an silico pou revele konpoze fitochimik pwomèt yo nan twa plant ki pi efikas ak gwo anpèchman kont elastase oswa anzim tirozinaz.

2. Rezilta yo

2.1. Ekstraksyon pwodiksyon an

Tablo 1 montre non syantifik, pati yo itilize, sous, metòd ekstraksyon/sòlvan, ak pousantaj pwodiksyon plant Thai yo itilize nan etid sa a. Rendeman pousantaj ekstrè yo te varye ant 2.0 pousan ak 36.3 pousan (Tablo 1). C. kalandriye te gen pi gwo pwodiksyon ekstraksyon (36.3 pousan), ki te swiv pa M. caldera (18.2 pousan) ak A. occidentale (16.0 pousan), tandiske H. undatus te gen pi ba pwodiksyon an (2.{{ 13}} pousan).

2.2. Total kontni fenolik nan plant Thai

Ekstrè plant yo te montre yon varyete total de kontni fenolik sòti nan 14.06 ± 1.55 a 320.14 ± 7.95 mg ekivalan asid galik (GAE) pou chak g ekstrè pwa sèk (Tablo 2). G. zeylanicum (320.14 ± 7.95 mg GAE pou chak g ekstrè pwa sèk) te gen pi wo kontni fenolik nan tout ekstrè, ki te swiv pa A. catechu (295.79 ± 11.97 mg GAE pou chak g ekstrè pwa sèk) ak M. caldera (210.99 ± 10.40 mg). nan GAE pou chak g ekstrè pwa sèk), respektivman. Nivo ki pi ba yo te jwenn nan C. kalandriye nan 14.06 ± 1.55 mg GAE pou chak g ekstrè pwa sèk.

2.3. Kontni total flavonoid nan plant Thai

Kontni total flavonoid ekstrè plant yo varye nan mitan espès plant yo, sòti nan 2.61 ± 0.42 a 84.48 ± 18.32 mg ekivalan quercetin (QE) pou chak g ekstrè pwa sèk (Tablo 2). Nan tout ekstrè, yo te jwenn kontni flavonoid ki pi wo a nan M. caldera (84.48 ± 18.32 mg QE pou chak g ekstrè pwa sèk), ki te swiv pa G. zeylanicum (52.54 ± 7.25 mg QE pou chak g ekstrè pwa sèk) ak P. dulce (28.01 ± 4.39 mg QE pou chak g ekstrè pwa sèk), respektivman. Nan lòt men an, nivo ki pi ba yo te jwenn nan E. Americana nan 2.61 ± 0.42 mg nan QE pou chak g ekstrè pwa sèk.

2.4. Aktivite DPPH Radical Scavenging nan plant Thai

Tès DPPH la baze sou kapasite pou bay idwojèn konpoze an pou elimine radikal DPPH ki estab [16]. Kapasite antioksidan ekstrè plant yo te eksprime kòm pousantaj aktivite DPPH radikal scavenging, mg nan vitamin C ekivalan kapasite antioksidan (VCEAC) pou chak g ekstrè pwa sèk, ak konsantrasyon an demi-maksimòm inhibitor (IC50) (Tablo). 3). Nan 0.1 mg / mL nan ekstrè, pousantaj yo nan aktivite DPPH scavenging varye ant 6.40 ak 93.18 pousan. Kat ekstrè plant: G. zeylanicum (93.18 pousan), M. caldera (90.61 pousan), A. occidentale (89.01 pousan), ak A. catechu (88.12 pousan), ekspoze DPPH aktivite scavenging pi gran pase 80 pousan. Kontrèman, C. ternatea te montre aktivite scavenging ki pi ba a nan 6.40 pousan. Lòd ran sa a te menm lè yo konpare yo dapre valè relatif VCEAC yo. Sepandan, dapre valè IC50 yo, yo te chanje kapasite antioksidan kat ekstrè plant yo nan lòd sa a: G. zeylanicum > A. catechu > A. occidentale > M. caldera. Rezilta yo jwenn nan tès DPPH la montre ke G. zeylanicum montre potansyèl antioksidan ki pi fò ak pousantaj ki pi wo nan aktivite scavenging ak valè IC50 ki pi ba a.

2.5. ABTS Radical Scavenging Aktivite nan plant Thai

Egzamen ABTS la baze sou kapasite konpoze an pou transfere atòm idwojèn pou netralize yon kasyon radikal ABTS ki estab. Kapasite antioksidan ekstrè plant yo te eksprime kòm pousantaj aktivite radikal ABTS, mg VCEAC pou chak g ekstrè pwa sèk, ak IC5 0 (Tablo 4). Nan 0.1 mg/mL nan ekstrè, pousantaj yo nan aktivite scavenging ABTS te varye ant 13.93 pousan ak 99.37 pousan. Uit ekstrè plant: G. zeylanicum (99.37 pousan), A. catechu (99.31 pousan), A. occidentale (99.23 pousan), M. caldera (98.88 pousan), E. Americana (95.62 pousan), Z. officinale (94.07 pousan). ), P. dulce (83.99 pousan), ak H. undatus (82.16 pousan) te montre aktivite scavenging ABTS ki pi gran pase 80 pousan. Kontrèman, kalandriye C. te montre aktivite scavenging ki pi ba a nan 13.93 pousan. Kapasite antioksidan nan kat ekstrè plant ki pi wo yo, dapre VCEAC a, ak valè IC50 yo te jwenn nan yon lòd ran menm jan an jan sa a: G. zeylanicum > A. catechu > A. occidentale > M. caldera. Remakab, rezilta tès ABTS yo te montre tou ke ekstrè a ak aktivite antioksidan ki pi fò se te G. zeylanicum fèy, jan yo reprezante pa pousantaj ki pi wo nan aktivite scavenging ak pi ba valè IC50 la.

2.6. Aktivite anti-elastaz nan plant Thai

Aktivite anpèchman elastaz ekstrè plant yo te evalye lè l sèvi avèk tès anpèchman elastase ak N-succinyl-trialanyl-paranitroanilide (SANA) kòm substra a. Epigallocatechin gallate (EGCG) (0.1 mg/mL), ki te itilize kòm yon kontwòl pozitif, te montre yon nivo anpèchman 45.27 pousan. Aktivite inhibition elastase ekstrè yo prezante nan Tablo 5 (gade tou Tablo S1). Nan 0.5 mg/mL nan ekstrè, pousantaj yo nan anpèchman elastase varye ant 1.33 pousan ak 88.31 pousan. A. catechu te gen pi gwo efè inhibition elastase nan 88.31 pousan, ki te swiv pa G. zeylanicum (87.43 pousan), A. occidentale (84.78 pousan), ak S. alata (73.95 pousan), pandan y ap S. asper jape te gen pi ba elastase inhibitory. efè nan 1.33 pousan. Akòz gwo absorpsyon background, kèk ekstrè plant ki pa gen okenn aktivite detekte yo te reesaye nan 0.1 mg/mL. Yo te jwenn ke M. caldera, P. nigrum, Z. cassumunar, ak S. asper fèy, eksepte Z. officinale, te montre aktivite inhibition ki ba a modere sòti nan 3.46 pousan a 35.74 pousan. Men, efè C. kalandriye, C. asiatica, C. ternatea, E. americana, ak H. undatus pa te obsève menm nan pi gwo konsantrasyon.

2.7. Aktivite anti-tirozinaz nan plant Thai

Yo te evalye aktivite inhibitor Tirozinaz nan ekstrè plant lè l sèvi avèk metòd dopachrome ak 3,4-dihydroxy-L-phenylalanine (L-DOPA) kòm substra a. Asid kojik (KA) (0.{02 mg/mL), yon kontwòl pozitif, te montre yon nivo anpèchman 68.35 pousan. Aktivite inhibition tirozinaz ekstrè yo prezante nan Tablo 6 (gade tou Tablo S2). Nan 1 mg / mL nan ekstrè, pousantaj yo nan anpèchman tirozinaz varye ant 4.80 pousan ak 91.51 pousan. G. zeylanicum te gen pi gwo efè inhibition tirozinaz nan 91.51 pousan, ki te swiv pa A. occidentale (81.01 pousan), M. caldera (76.12 pousan), ak A. catechu (75.38 pousan), tandiske P. nigrum te gen pi ba efè inhibition tirozinaz. nan 4.80 pousan. De ekstrè plant ki pa gen okenn aktivite detekte akòz gwo absorpsyon background yo te reesaye nan 0.1 mg / mL, ak aktivite yo te jwenn nan 3.98 pousan (Z. cassumunar) ak 21.28 pousan (Z. officinale). Sepandan, P. dulce pa t montre okenn efè, menm lè konsantrasyon ogmante.

2.8. Analiz korelasyon

Lè ou konsidere plizyè rapò anvan yo sou potansyèl elastaz ak tirozinaz aksyon inhibition nan ekstrè plant [8,16,17], li te gen anpil chans ke ekstrè yo posede yon gwo potansyèl antioksidan epi yo gen tandans gen gwo elastase ak tirozinaz aksyon inhibition. Kidonk, pou verifye relasyon sa yo nan etid sa a, nou te fè analiz korelasyon Pearson pou mennen ankèt sou relasyon ki genyen ant aktivite inhibition tou de anzim ak nivo kontni antioksidan ak kapasite antioksidan nan mitan ekstrè yo itilize. Fòs korelasyon an distribye pa koyefisyan korelasyon (valè r) jan sa a: r=0.91{{10}} a 1.000 endike yon korelasyon trè fò, r=0.710 a 0.900 endike yon gwo korelasyon, r=0.410 a 0.700 endike yon korelasyon modere, r=0.210 a 0.400 endike yon ti korelasyon, epi r=0.000 rive 0.200 endike yon ti korelasyon [18]. Anpèchman elastaz la te gen yon gwo korelasyon pozitif nan kontni fenolik total, DPPH, ak aktivite radikal ABTS, jan yo montre nan Figi 1a, c, ak d, respektivman. Menm jan an tou, anpèchman tirozinaz la te montre yon korelasyon pozitif trè fò nan kontni fenolik total ak aktivite radikal ABTS (Figi 2a, d), pandan ke li te montre yon gwo korelasyon pozitif ak aktivite DPPH radikal (Figi 2c). Sepandan, kontni total flavonoid la te modéré pozitivman korelasyon ak tou de elastase ak anpèchman tirozinaz (Figi 1b ak 2b). Rezilta sa yo demontre ke konpoze fenolik ak aktivite antioksidan ta ka gen yon kontribisyon enpòtan nan anpèchman elastaz ak anzim tirozinaz.

2.9. Docking molekilè

Apre sa, nou evalye kapasite konpoze fitochimik nan twa plant ki pi efikas ak gwo anpèchman kont anzim elastase oswa tirozinaz. Molekilè debakadè jeneralman itilize pou predi afinite obligatwa konpoze ak reseptè pwoteyin oswa anzim konpare ak inibitè li te ye. Dapre rezilta nou yo nan tès tès depistaj in vitro, nou te jwenn ke A. occidentale se inibitè elastase ki pi pisan, ki te swiv pa G. zeylanicum ak S. alata, nan lòd ran nan valè IC50. Kidonk, nou chwazi konpoze fitochimik ki sòti nan twa plant sa yo pou evalye kapasite yo pou anpeche elastaz. Rezilta entèraksyon ant elastase (3HGP) ak konpoze yo prezante nan Tablo S4 kòm enèji obligatwa, konstan anpèchman, kantite lyezon idwojèn, entèraksyon asid amine, ak longè lyezon. Enèji obligatwa ant 3HGP ak konpoze montre nòt ki sòti nan -2.26 a -11.95 kcal / mol (Tablo S4). EGCG, yon kontwòl pozitif, te montre enèji obligatwa a nan -9.69 kcal / mol. Dapre rezilta debakadè yo, senk konpoze te montre pi ba enèji obligatwa pase kontwòl pozitif la. Tetramer nan proanthocyanidin ekspoze pi ba enèji obligatwa (-11.95 kcal / mol), ki endike ke li gen pi bon afinite konpare ak lòt konpoze nan anpèchman elastase, ki te swiv pa amentoflavon, rutin, agathisflavone, ak kaempferol 3- O-gentiobioside. , ak enèji yo obligatwa nan -11.81, -10.12, -9.92, ak -9.73, respektivman.

Anplis de sa, lòd ran nan valè IC50 pou ekstrè plant ak anpèchman tirozinaz te byen sanble ak anpèchman elastase. Nou te jwenn ke G. zeylanicum posede pi gwo efè inhibition, ki te swiv pa A. catechu, ak A. occidentale. Pakonsekan, yo te chwazi konpoze ki sòti nan twa plant sa yo pou mennen ankèt sou kapasite yo pou anpeche tirozinaz. Rezilta entèraksyon ant tirozinaz (2Y9X) ak konpoze yo prezante nan Tablo S5 kòm enèji obligatwa, konstan anpèchman, kantite lyezon idwojèn, entèraksyon asid amine, ak longè lyezon. Enèji obligatwa ant 2Y9X ak konpoze te montre nòt ki sòti nan -4.56 a -10.42 kcal / mol (Tablo S5). KA, yon inibitè byen li te ye nan tirozinaz, te montre enèji nan obligatwa nan -4.59 kcal / mol. Dapre rezilta debakadè yo, asid o-koumarik (-10.42 kcal / mol) ak tetramer nan proanthocyanidin (-10.42 kcal / mol) te montre pi ba enèji obligatwa kont elastase lè yo konpare ak lòt konpoze, ki te swiv pa asid kafeyik, asid ferulik, ak areka tanen A1 ak enèji lyezon yo nan −10.10, −10.00, ak −9.94, respektivman. Figi 3 ak 4 reprezante dyagram 2D ​​entèraksyon ligand-pwoteyin pou elastaz ak tirozinaz, pou kontwòl pozitif, ak senk konpoze ki gen pi ba enèji obligatwa.

【Pou plis enfòmasyon:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】