Efè antioksidan ak antikoagulant nan glikozid fenilpropanoid
Mar 18, 2022
pou plis enfòmasyon:ali.ma@wecistanche.com
Bartosz Skalski, et al
Résumé
Plant oloparazit nan Orobanchaceae yo, ki gen ladan Cistanche, Orobanche, ak Phelipanche spp, yo konnen pou richès yo nanfenilpropanoidglikozid(PPGs). Anpil konpoze PPG yo te jwenn yo posede yon pakèt aktivite, tankou antimikwòb, anti-enflamatwa, antioksidan, ak amelyore memwa. Pou pi byen eksplore potansyèl bioaktivite Ewopeyen an broomrapes (O. Caryophyllaceae - OC, P. Arenaria - PA, P. ramosa - PR) ak dis sèl konstitiyan izole fenilpropanoid, nou envestige aksyon antiradikal yo, efè pwoteksyon kont oksidasyon nan plasma nan sistèm vitro. , ak enfliyans sou paramèt coagulation. Ekstrè yo teste yo te montre yon aktivite scavenging nan 50-70 pousan nan pouvwa Trolox la. Ekstrè OC a, ki rich ak acteoside, te gen plis pase 20 pousan pi bon potansyèl antiradikal pase ekstrè PR ki te youn nan sèlman ki gen PPGs ki manke yon moyete B-bag catechol nan inite acil la. Anplis, li te jwenn ke sèlman uit PPG teste(phenylpropanoidglikozid)demontre potansyèl antioksidan nan plasma imen trete ak H2O2/Fe; sepandan, twa PPG teste yo(phenylpropanoidglikozid)posede potansyèl anticoagulant anplis pwopriyete antioksidan. Li parèt ke estrikti PPG yo, espesyalman prezans nan moyets acil ak catekol, se sitou ki gen rapò ak pwopriyete antioksidan yo. Potansyèl anticoagulant konpoze sa yo tou gen rapò ak estrikti chimik yo. Chwazi PPG montre potansyèl pou trete maladi kadyovaskilè ki asosye akoksidatifestrès.
Mo kle:Broomrape, glikozid fenilpropanoid, estrès oksidatif, emostaz plasma

CistanchegenFenilpropanoidglikozid
1. Entwodiksyon
Oksidatifestrèsse lajman li te ye pou enpak negatif li sou sante a nan òganis vivan, ki gen ladan aje akselere ak kèk kansè. Ensidan an nanoksidatifestrèsse asosye ak yon balans detounen ant mekanis oksidatif ak antioksidatif (ki gen ladan anzimatik (katalaz, glutatyon peroksidaz) ak defans ki pa anzimatik (glutatyon) nan selil yo nan kò a [1]. Pwodiksyon twòp nan espès oksijèn reyaktif (ROS), ki gen ladan radikal oksidan ak espès fèmen-koki, se youn nan mekanis prensipal yo dèyè fòmasyon nan estrès oksidatif. Sepandan, efè byolojik ki te koze pa ROS depann lajman sou konsantrasyon, tan ekspoze, ak kote. Nan kondisyon nòmal (konsantrasyon ki ba), radikal oksijèn/azòt ka jwe wòl mesaje segondè yo, men nan nivo ki pi wo yo, yo ka kòmanse reyaji ak estrikti byolojik, tankou manbràn selilè [2]. Pami tout espès ROS, yon radikal hydroxyl (HO.) ap lakòzOksidatifestrèsse konnen yo jwe yon wòl enpòtan nan yon seri de maladi, ki gen ladan maladi kadyovaskilè. Twoub nan sistèm san an te korelasyon ak / oswa anvan pa chanjman nan paramèt divès kalite emostaz ak biomarkers plasma [1,3].
Nan lòt men an, anpil sibstans natirèl, tankou polifenol ak asid gra poliensature, yo te idantifye kòm antioksidan ki pisan ki kapab anpeche fòmasyon an ak / oswa diminye espès oksijèn reyaktif. Konpoze ak pwopriyete sa yo yo jwenn nan anpil pwodwi manje ak preparasyon pharmaceutique ki gen orijin plant. Yon rejim anrichi ak legim fre ak fwi, ak terapi antioksidan ki baze sou antioksidan natirèl, se poutèt sa lajman rekòmande paske yo ka diminye nivo nanoksidatifestrèsak anpeche divès pwosesis fizyolojik [4,5]. Polifenol plant yo se yon gwoup divès metabolit segondè, pami ki asid fenolik okipe yon plas enpòtan, paske yo lajman distribiye ak montre yon varyete efè byolojik, tankou antimikwòb, antioksidan, ak anti-enflamatwa.Fenilpropanoidglikozid(PPG) se dérivés ester nan asid hydroxycinnamic epi yo se klas prensipal / sèlman nan metabolit segondè ki prezan nan plant oloparazit Orobanchaceae, ki gen ladan Cistanche, Orobanche, ak Phelipanche spp. Plizyè espès nan fanmi sa a se ensèk nuizib grav nan rekòt ke kiltivatè yo vle debarase m de nan jaden yo (egzanp Phelipanche ramosa), kèk yo itilize nan famasi, pandan ke pifò yo pa gen anpil enpòtans pou moun. Herba Cistanche yo itilize anpil nan medikaman tradisyonèl Azyatik nan tretman defisyans ren ak kòm yon ajan iminite ak amelyore memwa, anti-aje, ak antifatig [6]. Analiz fitochimik nan divès gwoup rechèch te demontre safenilpropanoidglikozid, tankou acteoside, echinacoside, ak bò podium, se youn nan prensipal engredyan aktif nan Herba Cistanche [7]. Yon etid resan sou plizyè espès broomrape yo te jwenn nan Polòy pa Jedrejek et al. [8] te montre ke materyèl plant sa a gen yon konpozisyon kalitatif menm jan an (dominasyon nan PPGs)(phenylpropanoidglikozid), Anplis, li egal oswa menm depase Cistanche spp la. an tèm de kontni an nan sibstans aktif [8]
Etid la prezan te vize pou evalye potansyèl antiradikal ak antioksidan, osi byen ke enfliyans sou paramèt emostaz nan twa ekstrè broomrape yo (Orobanche caryophyllacea - OC, Phelipanche Arenaria - PA, ak P. ramosa - PR) rich nan divès kalite fenilpropanoid, kòm byen ke elektè sèl PPG yo. Kapasite antiradikal la te mezire lè l sèvi avèk 2,2′-azinobis-3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonic acid/Trolox ekivalan (ABTS/TE) ak 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH). ) tès yo. Laoksidatifestrèsnan sistèm tès plasma a te pwovoke lè l sèvi avèk yon radikal idroksil (H2O2/Fe), Lè sa a, peroksidasyon lipid (espès asid-reyaktif thiobarbituric (TBARS) tès), ak nivo nan pwoteyin kabònil ak gwoup thiol yo te mezire. Pami paramèt yo detèmine nan emostaz yo te: aktive tan tronboplastin pasyèl (APTT), tan prothrombin (PT), ak tan tronbobin (TT).

CistanchegenFenilpropanoidglikozid
2. Materyèl ak metòd
2.1. Pwodwi chimik yo
2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl radikal (DPPH), 2,2′-azinobis-3-ethylbenzthiazoline-6-sulphonic acid (ABTS), potasyòm persulfate, 6- hydroxy-2,5,7,8-tetramethylchroman-2-asid karboksilik (Trolox), dimethylsulfoxide (DMSO), asid thiobarbituric (TBA), asid fòmik (klas LC-MS), ak H2O2 yo te achte nan men Sigma-Aldrich (St. Louis, MO., USA). Methanol (klas gradyan HPLC) ak asetonitrile (klas LC-MS) te akeri nan Merck (Darmstadt, Almay). Dis konpoze phenylpropanoid yo teste nan travay sa a, ki gen ladan 2′-O-acetylatteoside (97 pousan), 2′-O-acetylpoliumoside (98 pousan), 3-O-methylpoliumoside (96 pousan), acteoside (99 pousan), tèren andedan (97 pousan), crenatoside (98 pousan), teniposide (99 pousan), poliumoside (99 pousan), tubuloside A (96 pousan), ak wiede mannioside D (96 pousan) te deja izole pa nou nan plant anba a bay. materyèl [8]. Pite konpoze yo te evalye lè l sèvi avèk yon analiz UHPLC-PDA-MS. Dlo ultrapure te prepare nan kay lè l sèvi avèk yon sistèm pirifikasyon dlo Milli-Q (Millipore Co.). Lòt reyaktif yo te nan klas analyse epi yo te bay pa founisè komèsyal domestik.
2.2. Materyèl plant
Plant flè nan twa espès broomrape, ki gen ladan Orobanche Caryophyllaceae Sm., Phelipanche Arenaria Pomel, ak P. ramosa (L.) Pomel te idantifye pa prof. Renata Piwowarczyk (Jan Kochanowski Uni versity, Kielce, Polòy) ak kolekte nan yon sous natirèl nan Polòy. Espesimèn bon (O. Caryophyllaceae – Chomentowek ´ (50.3349◦N, 20.4000◦E), savann xerothermic, parazit Galium boreale, Me 2014; P. Arenaria – Zwierzyniec (50.3652◦N, 22.3652◦N, p. Artemisia campestris, jen 2014, P. ramosa – Szewce (50.3553◦N, 22.3038◦E), jaden, parazit Solanum Lycopersicum, septanm 2014) yo depoze nan èrbyòm nan Jan Kochanowski University nan Kielce (KTC). Materyèl plant la te lyofilize ak tise byen mouye anvan ekstraksyon.
2.3. Preparasyon ekstrè broomrapes '
Materyèl plant an poud (O. Caryophyllaceae (OC) - 2 g, P. Arenaria (PA) - 3 g ak P. ramosa (PR) - 3 g) te ekstrè ak 80 pousan MeOH nan 40 ◦C ak 1500 psi (presyon sòlvan). ) lè l sèvi avèk yon ekstrè sòlvan akselere ASE 200 (Dionex, Sunnyvale, CA, USA). Ekstrè yo te evapore ak friz-seche (Gamma 2-16 LSC friz seche rad, Kris la, Almay). Efikasite ekstraksyon pou OC, PA, ak PR te 55 pousan, 37 pousan, ak 43 pousan pa pwa materyèl plant la, respektivman. Akòz kontni an wo nan idrat kabòn (done yo pa montre), ekstrè yo anvan tout koreksyon yo te pirifye plis pa ekstraksyon solid-faz (SPE) sou Oasis HLB mikwo-kolòn (500 mg; Waters, Milford, MA, USA). Sik yo te retire ak 1 pousan MeOH, Lè sa a, konpoze nan enterè yo te eliye ak 80 pousan MeOH. Apre yo fin retire sòlvan an, ekstrè OC, PA, ak PR yo te liyofilize (Gamma 2-16 LSC friz seche rad), ak pwodiksyon SPE pou pirifye yo te 53 pousan (OC), 67 pousan (PA), ak 51 pousan (PR) .
2.4. Karakteristik fitochimik ekstrè broomrapes yo
Analiz kalitatif ak quantitative nan ekstrè broomrape yo te fèt lè l sèvi avèk yon sistèm ACQUITY UPLC (Waters) ki konekte nan yon detektè fotodyode etalaj (PDA) ak yon espektwomèt mas kwadwiplè tandem (TQD-MS/MS). Ekstrè OC, PA, ak PR seche yo te fonn nan 50 pousan metanol nan yon konsantrasyon 0.50 mg/mL epi answit chromatographed sou kolòn BEH C18 (1{ {21}}0 × 2.1 mm, 1.7 µm, Dlo). Kondisyon kwomatografik yo te jan sa a: tanperati fou a - 25 ◦C, lineyè-gradyan 10→25 pousan nan faz mobil B (0.1 pousan asid fòmik nan asetonitrile) nan faz mobil A (0.1 pousan asid fòmik nan H2O) sou 12 min, to koule. - 0.4 mL / min, volim piki - 2 μL, ranje UV - 190-490 nm (3.6 nm rezolisyon). Analiz MS la te fèt nan mòd ion negatif ak ionizasyon electrospray (ESI), lè l sèvi avèk paramèt sa yo: ranje eskanè 100-1200 m / z; vòltaj kapilè 2.8 kV; kòn vòltaj 35 V; tanperati sous 150 ◦C; tanperati desolvasyon 450 ◦C; koule gaz desolvasyon 900 L / h, ak koule gaz kòn 100 L / h. Akizisyon done ak pwosesis yo te fèt lè l sèvi avèk Waters MassLynx 4.1 lojisyèl.
Phenylpropanoid glycoside (PPG) pik yo te idantifye pa konparezon done yo jwenn LC-MS ak sa yo ki te deja izole konpoze [8]. Kantite PPG yo(phenylpropanoidglikozid)nan ekstrè broomrape te baze sou metòd UPLC-UV ak deteksyon nan 330 nm, ak yon kalibrasyon estanda ekstèn lè l sèvi avèk acteoside (Sigma-Aldrich, Greater than or equal to 99 pousan, HPLC) kòm estanda gwoup. Yo te prepare yon koub kalibrasyon lineyè nan sis konsantrasyon nan ranje 1-200 ug/mL epi li te montre bon lineyè (R2 pi gran pase oswa egal a 0.999). Rezilta kantitatif reprezante mwayèn ± SD valè twa piki epi yo te eksprime kòm miligram ekivalan actoside (eq) pou chak gram ekstrè (mg acteoside eq/g).

CistanchegenFenilpropanoidglikozid
2.5. Aktivite antiradikal nan vitro
2.5.1. ABTS esè scavenging radikal
Tès antiradikal ABTS la te fèt ak metòd Kontek et al. [9], ak ti modifikasyon jan sa a: yo te itilize 20 pousan MeOH pou prepare reyaktif (7 mM ABTS ak 4.9 mM persulfat potasyòm); solisyon yo nan ekstrè OC, PA, ak PR, nan kat nivo konsantrasyon nan seri a nan 100− 400 ug/mL, ak solisyon Trolox, nan sis nivo konsantrasyon nan seri a nan 10− 250 ug/mL, yo te prepare ak 50 pousan. MeOH. Pwopòsyon de echantiyon pou ABTS plis travay solisyon te 1:25 (v/v). Yo te mezire absorbans nan 734 nm apre 30 minit enkubasyon nan fè nwa lè l sèvi avèk yon espektrofotomèt UV-vis (Evolution 260 Bio, Thermo Fisher Scientific Inc., Waltham, MA, USA).
Anpèchman absorbans (pousan) te kalkile jan sa a: [(Abscontrol–Abssample)/Abscontrol] ×100.
Ekivalan Trolox (TE) ekstrè broomrapes yo te kalkile lè l sèvi avèk fòmil TE {{0}} echantiyon/estanda, kote m se pant koub liy dwat yo (anpèchman absorpsyon kont konsantrasyon). Valè TE echantiyon an dekri aktivite nòmal li kont Trolox (TEstandard =1.0). Valè IC50 yo pou ekstrè OC, PA, ak PR ak Trolox yo te jwenn eksperimantal, Lè sa a, yo te kalkile nan koub liy dwat yo (anpèchman absorpsyon vs konsantrasyon) epi yo eksprime nan ug/mL.
Yo te fè tès la an triple, epi rezilta yo prezante kòm mwayen ± devyasyon estanda (SD).
2.5.2. DPPH esè scavenging radikal
Tès antiradikal DPPH la te fèt ak metòd Jedrejek et al. [8] ak Brand-Williams et al. [10], ak ti modifikasyon jan sa a: solisyon yo nan ekstrè OC, PA, ak PR, nan kat nivo konsantrasyon nan seri a nan 50-250 ug/mL, ak solisyon Trolox, nan sis nivo konsantrasyon nan ranje 10-. 250 ug/mL, yo te prepare ak 50 pousan MeOH. Pwopòsyon echantiyon an nan DPPH te 1:19 (v / v). Yo te mezire absorbans nan 517 nm apre 30 min enkubasyon nan fè nwa lè l sèvi avèk yon espektrofotomèt UV-vis (Evolution 260 Bio).
Anpèchman absorbans (pousan) te kalkile jan sa a: [(Abscontrol–Abssample)/Abscontrol] ×100.
Valè Trolox Ekivalan (TE) ak IC50 echantiyon tès yo te kalkile menm jan ak tès ABTS (Seksyon 2.5.1). Yo te fè tès la an triple, epi rezilta yo prezante kòm vle di ± SD.
2.6. Stock solisyon nan konpoze plant teste ak ekstrè pou eksperyans ak plasma imen
Solisyon stock nan konpoze tès yo ak ekstrè plant yo te prepare nan 50 pousan DMSO. Konsantrasyon final la nan DMSO nan echantiyon yo teste yo te pi ba pase 0.05 pousan ak efè li yo te detèmine nan tout eksperyans.
2.7. Izolasyon plasma imen
San imen, oswa plasma, yo te jwenn nan sis donatè regilye (gason ak fanm ki pa fimen) nan yon bank san (Lodz, Polòy) ak yon sant medikal (Lodz, Polòy). Yo te kolekte san kòm yon solisyon CPD (citrate/fosfat/dextrose; 9:1; v/v san/CPD) oswa solisyon CPDA (citrate/fosfat/dextrose/adenine; 8.5:1; v/v; san/CPDA). Donatè yo pa t pran okenn medikaman oswa sibstans depandans (tankou tabak, alkòl, ak sipleman antioksidan) pou omwen de semèn anvan yon don. Analiz nou an nan echantiyon san yo te fèt dapre direktiv yo nan Deklarasyon an èlenki pou rechèch imen ak apwouve pa Komite a sou etik la nan rechèch nan eksperimantasyon imen nan University of Lodz. Plasma te prepare pa santrifuge san fre moun nan 4500x g pou 25 min nan tanperati chanm. Konsantrasyon pwoteyin lan te kalkile lè w mezire absorpsyon echantiyon yo teste nan 280 nm, dapre pwosedi Whitaker ak Granum [11].

CistanchegenFenilpropanoidglikozid
2.8. Makè estrès oksidatif nan plasma imen
2.8.1. Mezi peroksidasyon lipid
Peroksidasyon lipid Plasma te mezire lè yo mezire konsantrasyon sibstans reyaktif asid thiobarbituric (TBARS). Konsantrasyon TBARS yo te kalkile lè l sèvi avèk koyefisyan disparisyon molè (ε =156, 000 M− 1cm− 1). Yo dekri metòd la pi byen yon lòt kote [12,13].
2.8.2. Mezi gwoup karbonil
Nivo gwoup karbonil yo te kalkile lè l sèvi avèk koyefisyan disparisyon molè (ε=22, 000 M− 1 cm− 1) epi yo te eksprime kòm nmol gwoup karbonil/mg nan pwoteyin plasma, dapre Bartosz [13 ] ak Levine et al. [14].
2.8.3. Detèminasyon gwoup Thiol
Kontni gwoup thiol nan pwoteyin plasma yo te mezire spectrophotometrically lè l sèvi avèk yon SPECTROstar Nano Microplate Reader (BMG LABTECH, Almay) pa absòbe nan 412 nm ak 5,5′-dithiol-bis-(2- asid nitrobenzoik). Metòd la dekri an plis detay yon lòt kote [15–17].
2.9. Paramèt emostaz
2.9.1. Mezi tan prothrombin (PT)
PT te detèmine koagulometrik lè l sèvi avèk yon analizè optik koagulasyon (modèl K-3002, Kselmed, Grudziadz, Polòy) dapre Malinowska et al. [18].
2.9.2. Mezi tan tronbin (TT)
TT a te detèmine koagulometrik lè l sèvi avèk yon analizè optik koagulasyon (modèl K-3002, Kselmed, Grudziadz, Polòy), dapre metòd ki dekri pa Malinowska et al. [18].
2.9.3. Mezi tan aktive tronboplastin pasyèl (APTT)
APTT a te detèmine koagulometrik lè l sèvi avèk yon K-3002 Optik Coagulation Analyzer (Kselmed, Grudziadz, Polòy) dapre Malinowska et al. [18].
2.10. Analiz done
Yo te fè tès Q-Dixon pou elimine done ki pa sèten. Done yo te teste pou distribisyon nòmal ak tès Shapiro-Wilk ak egalite divèjans ak tès Levene a. Diferans estatistik enpòtan yo te idantifye lè l sèvi avèk ANOVA, ki te swiv pa tès konparezon miltip Tukey a oswa tès Kruskal-Wallis la. Konparezon yo te konsidere kòm enpòtan nan p < 0.05.="" valè="" yo="" prezante="" kòm="" vle="" di="" ±="">
3. Rezilta ak diskisyon
Dis deja izole pa noufenilpropanoidglikozid[8], ki gen ladan 2′-O-acetylatteoside, 2′-O-acetylpoliumoside, 3-O-methylpoliumoside, acteoside, tèren andedan, krenatoside, pheliposide, bò podium, tubuloside A, ak wiedemannioside D, ansanm ak twa. Ekstrè broomrape (Orobanche Caryophyllaceae (OC), Phelipanche se naria (PA), ak P. ramosa (PR)) yo te kounye a etidye pou soulajmanoksidatifestrèsak pwopriyete antikoagulan nan yon sistèm plasma imen. Estrikti chimik nan fenilpropanoid yo teste yo prezante nan Fig. 1, epi, jan yo ka wè, yo tout yo bati dapre yon modèl menm jan an, ak menm/menm jan sub-inite: hydroxytyrosol, monosakarid (glikoz, ramnose, ak / oswa). ksiloz), ak asid idroksicinamik. Pifò nan konpoze PPG yo egzamine yo ranplase ak asid kafeyik, men sa a ka ranplase ak swa koumarik oswa asid ferulic.

Apa de konpoze endividyèl PPG, twa ekstrè broomrape - OC, PA, ak PR, ki se melanj plizyè PPG.(phenylpropanoidglikozid)ak te sèvi deja kòm materyèl kòmanse pou izolasyon konpoze, yo te enkli tou nan etid la byolojik. Yon lòt rezon pou chwazi twa espès diferan se te gwo diferans nan pwofil la fitochimik nan mitan yo, jan yo ka wè nan Fig. 2. Yon konparezon pi detaye nan ekstrè yo OC, PA, ak PR, ki gen ladan done yo quantitative, prezante nan Tablo. 1. Acteoside te konstitiyan prensipal la nan ekstrè O. Caryophyllaceae (690 mg / g), teniposide, ak tèren andedan domine nan P. Arenaria (ansanm 550 mg / g), pandan y ap poliumosid ak derive acetylated li yo te metabolit ki pi enpòtan nan P. ramosa ekstrè (ansanm 640 mg / g). Ekstrè yo egzamine tou diferan nan kontni an jeneral nan phenylpropanoids, kantite lajan ki pi wo yo te jwenn nan OC (810 mg / g), yon ti kras pi ba nan PR (795 mg / g), ak pi ba nan PA (685 mg / g). Anplis, li merite sonje ke prezans nan PPG ki gen lòt pase moyet kafeyil, tankou koumaroyl oswa feruloyl, te detekte sèlman nan ekstrè P. ramosa, kote konpoze sa yo konstitye apeprè yon sizyèm nan total PPG yo (apeprè 120 mg / g) (Tablo 1).


Etid anvan yo nan aktivite a antiradikal nanfenilpropanoidglikozidpa Heilmann et al. [19] ak Jedrejek et al. [8], ki gen ladan apeprè 30 PPG diferan(phenylpropanoidglikozid)tankou acteoside, isoacteoside, ak crenatoside, te revele relasyon solid li yo ak estrikti nan moeties acil (asid fenolik ak tirosol). An jeneral, modifikasyon an oswa sibstitisyon nan kategori katekol nan inite acil te lakòz yon diminisyon enpòtan nan aktivite a scavenging kont espès oksijèn reyaktif (ROS) ak radikal DPPH. Nan etid aktyèl la, yo te egzamine potansyèl antiradikal en vitro twa ekstrè broomrape (OC, PA, ak PR) ak analiz ABTS ak DPPH, ak rezilta yo te konpare tou de youn ak lòt ak aktivite konpozan phenylpropanoid endividyèl yo mezire nan. etid anvan nou an [8]. Rezilta yo te eksprime kòm ekivalan Trolox (TE) ak valè IC50 (Tablo 2). An jeneral, tout twa ekstrè yo te bon scavengers nan tou de radikal ABTS ak DPPH, men tou yo te obsève diferans ki genyen nan mitan echantiyon yo teste (te estime TE nan seri a nan 0.5-0.7; 1.0 te ekivalan a nan Trolox). Aktivite antiradikal nan echantiyon yo te nan lòd sa a: Trolox > OC > PA > PR. Ekstrè Orobanche Caryophyllaceae (IC50=155–275 µg/mL) te gen plis pase 20 pousan pi gwo aktivite pase ekstrè Phelipanche ramosa (IC{50=200-320 µg/mL).

Yo rapòte pi wo aktivite scavenging radikal nan ekstrè OC a ka eksplike pa PPG ki pi wo yo(phenylpropanoidglikozid)kontni nan echantiyon sa a, osi byen ke nan opinyon nan acteoside, engredyan dominan li yo, ki dapre rechèch anvan an [8,19] se youn nan pi fò scavengers yo radikal gratis nan mitan metabolit yo nan gwoup sa a (TEDPPH=0 .87; [4]). Sepandan, konsidere relasyon mityèl aktivite antiradikal ak kontni fenilpropanoid nan ekstrè OC, PA ak PR, pa gen okenn korelasyon senp yo te jwenn ant de faktè sa yo (r < 0.5),="" ki="" endike="" yon="" opinyon="" enpòtan="" nan="" pwofil="" kalitatif.="" sa="" a="" se="" sitou="" ki="" gen="" rapò="" ak="" ekstrè="" nan="" p.="" ramosa,="" ki="" malgre="" nivo="" a="" wo="" nan="">(phenylpropanoidglikozid)({{0}}.8 g/g) te karakterize pa aktivite ki pi ba byolojik nan mitan echantiyon yo teste (TE ~ 0.5). Ekstrè PR a, jan mansyone pi wo a, se sèl echantiyon ki genyen phenylpropanoids yo ak asid koumarik oswa ferulic, sibstans ki manke yon moyete B-bag catechol, ki te rapòte ke yo te diminye potansyèl anti-oksidatif. Kat konpoze PPG ki gen asid kafeyik modifye, ki gen ladan 3-O-methylpoliumoside, ramose A, ak wiedemannioside D, nou te teste deja te gen TEDPPH a anviwon 0.3 [8]. Kidonk, rezilta aktyèl yo an akò ak konfime rezilta yo nan eksperyans anvan yo antiradikal nan vitro sou phenylpropanoids.
Kòm Chen et al. [20] dekri, li asosye ak pi gwo H-donasyon kapasite oswa estabilizasyon nan radikal la pa divès gwoup fonksyonèl nan yon melanj de konpoze. Plizyè eleman estriktirèl yo te idantifye kòm amelyore aktivite antioksidan dirèk nan polifenol, espesyalman sa ki asosye ak kantite ak pozisyon nan gwoup hydroxyl. Yo kwè ke aktivite scavenging radikal gratis ogmante ak nimewo a ogmante nan gwoup -OH. Sepandan, pozisyon nan gwoup sa yo, nan yon molekil, gen yon enpak menm pi gwo sou aktivite a egzèse. Konpoze ki pisan relativman ki estab se moun ki genyen 3,4-dihydroxy moety nan estrikti yo, osi byen ke moun ki posede plis pase de gwoup idroksil [21]. Estrikti chimik sibstans antioksidan an pèmèt yon konpreyansyon sou mekanis reyaksyon antioksidan an. Lopez-Munguía et al. [22] baze sou kalkil teyori fonksyonèl dansite (DFT) te detèmine ke PPG yo(phenylpropanoidglikozid)mekanis antioksidan pwogrese atravè yon sekans transfè yon sèl elèktron pèt pwoton (SPLET). Sepandan, Li et al. [23] eseye eksplore mekanis yo nan antioksidan fenolik phenylpropanoid, konkli, ke PPGs (acteoside, forsythoside B, ak poliumosid) ka patisipe nan plizyè chemen pou egzèse aksyon an antioksidan, amelyore wòl nan sik-résid.
Etid yo montre ke antioksidan ki sòti nan plant yo se modulateur efikas nan emostaz nan maladi kadyovaskilè [24-26]. Plizyè plant yo itilize nan medikaman tradisyonèl gen yon nivo enpòtan nan PPG [27,28]. Anplis de sa, PPGs(phenylpropanoidglikozid)yo konnen yo gen yon seri de aktivite byolojik, ki gen ladan pwopriyete anti-enflamatwa, anti-nefritik, ak anti-epatoksik [29-33].
Nan etid resan yo, Jedrejek et al. [8] te dekri izolasyon PPG yo(phenylpropanoidglikozid)soti nan twa broomrapes Polonè ak evalye aktivite antioksidan yo pa tès la DPPH. Ki baze sou sa, etid la prezan evalye si dis PPG yo chwazi izole nan plant sa yo ta ka diminyeoksidatifestrèsnan plasma imen trete ak yon oksidan byolojik fò, sa vle di donatè a radikal idroksil H2O2 / Fe, ak modile pwopriyete koagulasyon nan plasma nan vitro. Pwopriyete antioksidan dis PPG izole yo te detèmine dapre paramèt chwazi yooksidatifestrès: Nivo TBARS kòm yon makè nan peroksidasyon lipid, ansanm ak gwoup karbonil ak nivo gwoup thiol, kòm makè domaj nan pwoteyin oksidatif.
Tou de peroksidasyon lipid plasma ak nivo karbonylation pwoteyin nan plasma pwovoke pa H2O2 / Fe yo te siyifikativman redwi nan prezans uit konpoze teste, viz. acteoside, krenatoside, 2′-O-acetylatteoside, pheliposide, tèren andedan, tubuloside A, poliumoside ak 3- O-methylpolimuoside, nan tout konsantrasyon teste (1, 5 ak 50 µg/mL); sepandan, ni efè yo te obsève pou de nan konpoze yo teste, viz. 2′-O-acetylpoliumoside ak wiedemannioside D, oswa nenpòt nan ekstrè yo teste nan nenpòt konsantrasyon (1, 5, ak 50 µg/mL). Anplis de sa, pa gen youn nan konpoze tès yo oswa ekstrè teste yo te jwenn pwoteje plasma a kont H2O2 / Fe - pwovoke oksidasyon gwoup thiol nan pwoteyin (figi 3-5). Sepandan, ekstrè yo teste yo ka sous la nan konpoze ak divès kalite pwopriyete byolojik.



Pou la pwemye fwa, rezilta yo nan etid la prezan endike ke uit nan PPG yo teste(phenylpropanoidglikozid)demontre potansyèl antioksidan nan plasma imen an nan prezans espès oksijèn reyaktif ekzojèn pa anpeche peroksidasyon lipid ak karbonylation pwoteyin nan plasma trete ak H2O2/Fe. Anplis de sa, 2′-O-acetylpoliumosid ak wiedemannioside D pa t prezante okenn efè sa yo. An jeneral, rezilta nou yo ki konsistan avèk eksperyans anvan an vitro sou PPG yo. Heilmann et al. [19] ak Jedrejek et al. [8] rapòte yon korelasyon ant estrikti chimik PPG yo ak aktivite yo. Pwopriyete antioksidan nan PPG(phenylpropanoidglikozid)parèt prensipalman ki gen rapò ak estrikti nan moyets acil yo, sa vle di asid fenolik ak inite phenylpropanoid, ki gen ladan prezans ak/oswa modifikasyon nan moyete katekòl. Pou egzanp, wiedemannioside D te jwenn pèdi potansyèl antioksidatif li anvè plasma trete ak H2O2 / Fe apre ranplasman nan mwatye kafeoyl li yo ak yon mwatye feruloyl.
Chanjman nan pwosesis coagulation la souvan lakòzoksidatifestrès; chanjman sa yo ka modile fonksyon yo nan sistèm nan kadyovaskilè epi yo ka mennen nan devlopman nan maladi kadyovaskilè [1]. Soti nan dis konpoze plant yo ak twa ekstrè plant yo teste nan etid la prezan, tubuloside, bò podium, ak 3-O-methylpoliumoside ak tout ekstrè teste yo demontre siyifikativman pwolonje tan tronbin nan tout konsantrasyon teste, viz. 1, 5, ak 50 µg/mL (figi 6B). Sepandan, okenn nan ekstrè sa yo, ni okenn nan konpoze tès yo, chanje PT oswa APTT (Fig. 6A ak C).



Fig. 6. Efè konpoze tès yo (akteozid, krenatozid, 2′-O-acetylatteoside, pheliposide, arenarioside, tubuloside A, poliumosid, 3-O-methylpoliumoside, 2′-O-cetylpolimuoside, wiedemannioside D) ak plant Ekstrè (P. arenaria ekstrè - PA, P. ramosa ekstrè - PR, ak O. caryophyllacea ekstrè - OC) (1–5 0 µg/mL) sou paramèt emostatik seleksyone nan plasma: PT (A), TTn (B) ak APTT (C). Done reprezante vle di ± SEM nan sis eksperyans endepandan.n* p <0.05 (vs.="" kontwòl),="" ns="" -="" p=""> 0.05 (vs. kontwòl).0.05>

Tablo 3 konpare efè PPG yo (5 µg/mL) sou biomarqueurs deoksidatifestrèsnan plasma trete ak H2O2/Fe ak enfliyans yo sou coagulation. Uit nan PPG yo teste yo(phenylpropanoidglikozid)demontre potansyèl antioksidan sèlman nan plasma imen an trete; sepandan, twa PPG teste yo te genyen tou de pwopriyete antioksidan ak potansyèl antikoagulan. Enteresan, rezilta yo nan tès DPPH la pa t kowenside ak sa yo te jwenn nan modèl la byolojik lè l sèvi avèk plasma imen trete ak H2O2 / Fe: potansyèl la antioksidan nan ekstrè yo teste yo ka bloke pa sèten konpoze prezan nan plasma a.
An konklizyon, rezilta prezan nou yo bay nouvo limyè sou potansyèl antioksidan ak pwopriyete antikoagulan PPG yo(phenylpropanoidglikozid). Li parèt ke estrikti nan PPGs(phenylpropanoidglikozid), espesyalman prezans nan moyets acil ak catekol, se sitou ki gen rapò ak pwopriyete antioksidan ak anticoagulant yo. Chwazi PPG yo ka byen gen potansyèl pou tretman maladi kadyovaskilè ki asosye akoksidatifestrès. Sepandan, plis eksperyans yo bezwen detèmine konsantrasyon yo nan konpoze sa yo ki nesesè pou modèl in vivo.
Deklarasyon konfli enterè
Otè yo deklare ke yo pa gen okenn enterè finansye konkiran oswa relasyon pèsonèl ki ta ka parèt enfliyanse travay yo rapòte nan papye sa a.
Referans
[1] A. Daiber, S. Chlopicki, Revisiting pharmacology ofoksidatifestrèsak malfonksyònman andotelyal nan maladi kadyovaskilè: prèv pou terapi ki baze sou redox, Free Radic. Biol. Med. 157 (2020) 15–37.
[2] J.-J. Sauvain, A. Setyan, P. Wild, P. Tacchini, G. Lagger, F. Storti, S. Deslarzes, MJ Guillemin, M. Rossi, M. Riediker, Biomarkers ofoksidatifestrèsak asosyasyon li yo ak kapasite nan diminye urin nan travayè antretyen otobis yo, J. Occupat. Med. Toksik. 6 (2011) 18–23.
[3] P. Nowak, B. Olas, B. Wachowicz,Oksidatifestrèsak emostaz, Post. Byochim. 56 (2010) 239–247.
[4] M. Martinez-Huelamo, J. Rodriguez-Morato, A. Boronat, R. de la Torre, Modulation of Nrf2 by oil and wine polyphenols and neuroprotection, Antioksidan 6 (2017) 73.
[5] S. Amor, P. Chalons, V. Aires, D. Delmas, Ekstrè polifenol soti nan diven wouj ak rezen: efè potansyèl sou kansè, Maladi 6 (2018) 1–12.
[6] Z. Li, H. Lin, L. Gu, J. Gao, CM Tzeng, Herba Cistanche (Rou Cong-Rong): youn nan pi bon kado pharmaceutique nan medikaman tradisyonèl Chinwa, Front. Pharmacol. 7 (2016) 41–49.
[7] Y. Jiang, P.-F. Tu, Revizyon: analiz de konstitiyan chimik nan espès Cistanche, J. Chromatogr. 1216 (2009) 1970–1979.
[8] D. Jedrejek, S. Pawelec, R. Piwowarczyk, L. Precio, A. Stochmal, Idantifikasyon ak ensidan glikozid phenylethanoid ak iridoid nan sis broomrapes Polonè (Orobanche spp. ak Phelipanche spp., Orobanchaceae), Phytochemistry (170). 2020), 112189.
[9] B. Kontek, D. Jedrejek, W. Oleszek, B. Olas, Aktivite antiradikal ak antioksidan in vitro nan ekstrè ki sòti nan oublions ki rich nan asid anmè ak xanthohumol, Ind. Crops Prod. 161 (2021) 1–9.
[10] W. Brand-Williams, ME Cuvelier, C. Berset, Use of a free radical method to evaluate antioxidant activity, Lebensm. Wiss. Teknoloji. 28 (1995) 25–30.
[11] JR Whitaker, PE Granum, Yon metòd absoli pou detèminasyon pwoteyin ki baze sou diferans ki genyen nan absorpsyon nan 235 ak 280 nm, Anal. Byochim. 109 (1980) 156–159.
[12] B. Wachowicz, Adenine nukleotid nan tronbosit zwazo, Cell Biochem. Fonksyon. 2 (1984) 167–170.
[13] G. Bartosz, Druga twarz tlenu, Warsz. PWN 1 (2008) 7.
[14] RL Levine, D. Garland, CN Oliver, A. Amici, I. Climent, AG Lenz, BW Ahu, S. Shaltier, ER Stadtman, Detèminasyon kontni carbonyl nan pwoteyin modifye oksidatif, Metòd Enzym. 186 (1990) 464–478.
[15] DM Joel, J. Gressel, LJ (Eds.), Musselman, Parazit Orobanchaceae: Parazit Mekanis ak Estrateji kontwòl, Springer, Heidelberg, Almay, 2013, pp 1-10.
[16] Y. Ando, M. Steiner, Sulphydryl ak gwoup disulfide nan manbràn plakèt: detèminasyon gwoup disulfide, Biochim. Biophys. Acta 311 (1973) 26–37.
[17] Y. Ando, M. Steiner, Sulphydryl ak gwoup disulfide nan manbràn plakèt: detèminasyon gwoup sulphydryl, Biochim. Biophys. Acta 311 (1973) 38–44.
[18] J. Malinowska, J. Kołodziejczyk-Czepas, M. Moniuszko-Szajwaj, I. Kowalska, W. Oleszek, A. Stochmal, B. Olas, Fraksyon fenolik soti nan Trifolium pallidum ak Trifolium scabrum pati ayeryen nan plasma imen pwoteje kont chanjman ki pwovoke pa hyperhomocysteinemia, Food Chem. Toksik. 50 (2012) 4023–4027.
[19] J. Heilmann, I. Calis, H. Kirmizibekmez, W. Schuhly, S. Harput, O. Stiher, Radical scavenger activity offenilpropanoidglikozidnan FMLP stimulé leukocytes polimorfonukleè: relasyon estrikti-aktivite, Planta Med. 66 (2000) 746–748.
[20] H. Chen, Y. Zhou, Y. Shao, F. Chen, Asid fenolik gratis nan vinèg Shanxi ki gen laj: chanjman pandan aje ak aktivite sinèrjetik antioksidan, Int. J. Pwopozisyon Manje 19 (2015) 1183–1193.
[21] CA Rice-Evans, NJ Miller, G. Paganga, Relasyon aktivite estrikti-antioksidan nan flavonoid ak asid fenolik, Free Radic. Biol. Med. 20 (1996) 933–956.
[22] A. Lopez-Munguía, ´ Y. Hernandez-Romero, ´ J. Pedraza-Chaverri, A. MirandaMolina, I. Regla, A. Martínez, E. Castillo, Phenylpropanoid glycoside analogs: anzimatik sentèz, aktivite antioksidan ak teyorik etid sou mekanis gratis radikal yo, PloS One 6 (2011) 20115.
[23] X. Li, Y. Xie, K. Li, A. Wu, H. Xie, Q. Guo, P. Xue, Y. Maleshibek, W. Zhao, J. Guo, D. Chen, Antioksidasyon ak cytoprotection nan acteoside ak dérivés li yo: konparezon ak chimi mekanik, Molecules 23 (2018) 498.
[24] SE Kulling, HM Rawel, Chokeberry (Aronia melanocarpa) - yon revizyon sou konpozan karakteristik yo ak efè potansyèl sante, Planta Med. 74 (2008) 1625–1634.
[25] BJ Mc Even, Enfliyans rejim alimantè ak eleman nitritif sou fonksyon plakèt, Semin. Tronc. Hemost. 40 (2008) 214–226.
[26] B. Olas, The multifonctionality of berries toward blood platelets and role of berry phenolics in the cardio-disorders, Platelets 5 (2016) 1-10.
[27] UB Ismailoglu, I. Saracoglu, US Harput, I. Sahin-Eredemli, Efè phenylpropanoid ak iridoid glikozid sou andikap radikal gratis ki pwovoke nan detant andotelyo-depandan nan bag aortik rat, J. Ethnopharmacol. 79 (2002) 193–197.
[28] ZF Bai, Y. Liu, XQ Wang, Envestigasyon nan plant medsin etnik Orobanche, Cistanche ak Boschniakia, Zhongguo Zhong Yao Zhi 93 (2014) 4548-4552.
[29] K. Hayashi, T. Nagamatsu, M. Ito, H. Yagita, Y. Suzuki, Acteoside, yon eleman nan Stachys sieboldii MIQ, ka yon ajan antinefritik pwomèt (3): efè acetonide sou ekspresyon sou entèselilè. molekil adezyon -1 nan glomeruli nefritik eksperimantal nan rat ak selil andotelyo kiltive, Jpn. J. Pharmacol. 70 (1996) 157–168.
[30] Q. Xiong, K. Hase, Y. Tezuka, T. Tani, T. Namba, S. Kadota, Hepatoprotective aktivite nan phenylpropanoids soti nan Cistanche deserticola, Planta Med. 64 (1998) 120–125.
[31] WF Chiou, LC Lin, CF Chen, Acteoside pwoteje selil andotelyo kont radikal gratis ki pwovoke.oksidatifestrès, J. Pharm. Pharm. 56 (2004) 743–748.
[32] S. Sahpaz, N. Garbacki, M. Tits, F. Bailleul, Izolasyon ak aktivite famasi nan ester fenilpropanoid soti nan Marrubium vulgare, J. Ethnopharmacol. 79 (2002) 389–392.
[33] L. Lie-Chwen, W. Yea-Hwey, H. Yu-Chang, Ch Shiou, L. Kuo-Tong, Ch Yueh-Ching, W. Wen-Yen, S. Yoh-Chiang, The inhibitory effect nanfenilpropanoidglikozidak glikozid iridoid sou pwodiksyon radikal gratis ak 2 ekspresyon integrin nan leukosit imen, J. Pharm. Pharmacol. 58 (2006) 129–135.







