Iminite fòmasyon BCG-induit Amelyore repons vaksen kont koklich akselilè nan yon esè klinik eksploratif owaza

ENTWODIKSYON

Kolich se yon maladi respiratwa egi trè transmisib ki te koze pa bakteri Bordetella koklich e li te re-aparisyon kòm yon pwoblèm sante piblik grav malgre gwo kouvèti vaksen an. Pandan plizyè ane, yo te kontwole maladi a nan peyi endistriyalize yo atravè vaksen ak vaksen kont koklich ki gen selil antye (wPs) ki te aplike nan ane 1940 yo-1950s. Vaksen sa yo te trè efikas ak pwovoke pwoteksyon alontèm.

Sepandan, gwo reyaktojenisite ak enkyetid sekirite te mennen nan ranplasman yo nan ane 1990-2000 yo pa vaksen koklich aselilè (aPs). AP rapèl vaksen, ki gen ladan vaksen konbinezon ki gen tetanòs ak toksoid difteri (Tdap) swa avèk oswa san polioviris inaktive (IPV) (Tdap-IPV), yo te prezante yon ti tan apre sa. Kounye a, vaksen aP yo lajman itilize pou ranfòse iminite nan timoun preskolè, adolesan ak adilt. Malgre mezi sa yo ak pwofil sekirite amelyore yo, plizyè etid te montre ke iminite pwovoke rete pa pi bon2 epi li diminye sou tan3. Anplis de sa, dire a nan pwoteksyon apre dòz repetitif aP piti piti vin pi kout 4-6. Bezwen k ap grandi pou nouvo estrateji vaksinasyon ak amelyore te mennen nan eksplorasyon nan nouvo adjuvant ki vize iminite natirèl ak amelyore iminite espesifik nan aPs7–9.

Vaksen konbinezon ka ranfòse iminite. Vaksen konbinezon yo se yon konbinezon plizyè diferan vaksen pou anpeche maladi ki bay pasyan plizyè pwoteksyon an menm tan, sa ki diminye estrès ak doulè nan resevwa plizyè piki. An menm tan an, vaksen an konbinezon kapab tou amelyore iminite a nan vaksen an, paske li ka estimile plis repons iminitè ak pwodwi plis antikò ak selil iminitè, efektivman amelyore kapasite nan anpeche anpil maladi diferan. Amelyore iminite trè enpòtan nan lavi chak jou nou. Cistanche ka amelyore iminite. Polisakarid yo nan vyann ka kontwole repons iminitè a nan sistèm iminitè imen an, amelyore kapasite nan estrès nan selil iminitè, ak amelyore esterilizasyon nan efè selil iminitè.

Klike pou aprann kisa cistanche ye

Vaksen Bacille Calmette-Guérin (BCG) pwoteje kont enfeksyon mikobakteri tankou tibèkiloz10, ansanm ak pwoteksyon kont enfeksyon segondè ak patojèn ki pa gen rapò nan modèl sourit1. Nan imen, efè benefis ki pa espesifik sa yo te lye nan mòtalite tibebe redwi 11,12 epi yo te valide nan esè klinik owaza 10,13. BCG pwovoke chanjman alontèm nan selil iminitè natirèl yo ki amelyore reyaksyon yo nan eksitasyon ak patojèn ki pa gen rapò. Pwosesis sa a ki rele iminite antrene, enplike nan repwogram epigenetik monosit yo epi li pèsiste pou jiska yon ane apre vaksinasyon BCG14. Yo te demontre enpòtans klinik iminite antrene nan imen atravè etid ki sèvi ak BCG kòm pwototip pou endiksyon iminite fòmasyon ak vaksen oswa enfeksyon eksperimantal imen kòm perturbasyon iminitè segondè15–17. Gen prèv akimile ki montre vaksen BCG modil repons iminitè adaptatif nan vaksen yo. Pami uit etid ki te evalye nan yon revizyon ki sot pase, senk te montre repons umoral espesifik pou vaksen an amelyore18.

Efò pou delimiter efè entèraksyon BCG ak vaksen koklich sijere ke BCG-induit iminite antrene ka gen yon efè pozitif sou repons iminitè a nan koklich. Nan sourit, vaksen anvan ak BCG amelyore repons iminitè Th1 ak umoral apre aP, men pa wP vaksen19. Nan imen, yon etid popilasyon-echèl te montre ke ko-administrasyon BCG ak vaksen koklich redwi mòtalite nan tibebe20 konpare ak resevwa vaksen yo sekans. Dapre sa nou konnen, pa gen okenn etid jiskaprezan ki te envestige nan yon etid owaza kontwole si iminite ki antrene modil repons iminitè a vaksen koklich oswa ki te konpare tan an nan administrasyon vaksen BCG parapò ak yon dezyèm vaksen oswa defi.

Isit la, nou teste si vaksen BCG gen enpak sou repons iminitè adaptatif nan yon vaksen, epi si iminite ki antrene ki asosye ak repons sa yo. Nou montre ke BCG-induit iminite antrene amelyore aP-espesifik antikò, aP-espesifik repons selil Th1, ak total memwa repons selil B 2 semèn apre vaksinasyon Tdap-IPV. Ogmantasyon sa yo te gen rapò pozitivman ak ogmantasyon biomaketè iminite ki antrene, ki gen ladan IL-1 ak IL-6. Konklizyon nou yo mete aksan sou yon wòl pou iminite antrene pwovoke pa vaksinasyon BCG nan potansyèl iminite nan vaksen koklich.

REZILTA

Etidye konsepsyon

Seventy-five healthy female volunteers were randomized to one of three cohorts to receive BCG and Tdap-IPV vaccines in different orders21. We chose to enroll only women since gender-specific effects of pertussis vaccines have been reported 22. The median age of the volunteers was 23, with no significant difference in age between cohorts (Kruskal–Wallis test; P = 0.6), as previously reported21. Two subjects were excluded from analysis for having a high anti-pertussis toxin IgG concentration before Tdap-IPV vaccination (>100 IU / ml), endike dènye enfeksyon ak koklich23,24 (Fig. 1a).

Pou idantifye chanjman ki fèt nan repons vaksen TdapIPV ki asosye ak iminite ki antrene, kòwòt "BCG-trained" te resevwa BCG 3 mwa anvan TdapIPV. Nou te enkli tou de kowòt kontwòl pou rann kont tan vaksinasyon BCG la. Kowòt "BCG plis Tdap" te resevwa tou de vaksen nan manm opoze an menm tan, ak gwoup "Tdap-IPV" te resevwa Tdap-IPV an premye ak BCG 3 mwa apre (Fig. 1b). Yo te kolekte san nan plizyè pwen anvan ak apre vaksen yo. Yo defini timestamps parapò ak debaz vaksen Tdap-IPV (-M3=3 mwa anvan, -M3 plis W{2 = 3 mwa anvan plis 2 semèn, D0=debaz Tdap-IPV oswa vaksinasyon konkouran BCG ak Tdap-IPV, W2=2 semèn apre sa, M3 plis W2=3 mwa plis 2 semèn apre sa, Y1=1 ane apre sa). Rezilta prensipal yo te espesifye kòm ogmantasyon nan repons iminitè adaptatif 2 semèn oswa 1 ane apre vaksinasyon Tdap-IPV.

An total, nou te evalye 31 rezilta iminolojik atravè twa gwoup vaksinasyon yo. Nou te itilize yon immunoassay multiplex ki baze sou pèl pou mezire konsantrasyon antikò IgG kont antijèn koklich toksin koklich (PT), haemagglutinin filaman (FHA), pertactin (PRN), osi byen ke toksin difteri (DIPH) ak toksin tetanòs (TET)25. Total B-selil ak PRN-espesifik B-selil yo te mezire dirèkteman nan san antye pa sikometri koule lè l sèvi avèk PRN ki gen etikèt fluorescent (Siplemantè Fig. 1). Repons selil T Th1 ak Th17 kont antijèn koklich yo te mezire lè yo ankouraje selil mononikleyè san periferik (PBMCs) ak swa PRN, PT, oswa FHA pandan 7 jou epi ELISA26 mezire IFN, IL22, ak IL-17 sekrete.

Vaksen BCG amelyore repons cytokine selil iminitè a stimuli ki pa gen rapò, yon fenomèn ki te eksplike pa de mekanis byolojik diferan. Premye pwosesis la rele iminite eterològ epi li depann de aktivasyon ki pa espesifik nan selil T27,28. Dezyèm pwosesis la ki rele iminite antrene, rezilta nan ogmante pwodiksyon cytokine pro-enflamatwa pa selil iminitè natirèl14. Nou te defini rezilta segondè pou kòwòt BCGtrained la kòm chanjman nan pwodiksyon sitokin nan PBMC apre eksitasyon ak Candida albicans (C_alb), Staphylococcus aureus (S_aur), Bordetella koklich (Bp). , oswa lipopolisakarid (LPS). Menm jan ak etid anvan yo16,21, nou te mezire Th1/17 sitokin IFN, IL-22, oswa IL-17 apre 7 jou kòm yon lekti pou iminite eterològ, oswa sitokin ki sòti nan monosit IL-10 , IL-6, IL{-1, oswa TNF apre 24 èdtan kòm yon lekti pou iminite antrene (Fig. 1b). Pwodiksyon Cytokine an repons a sonicated Mycobacterium tibèkiloz (Mtb) te mezire pou quantifier anti-mycobacterial iminite.

Vaksinasyon BCG anvan yo amelyore repons iminitè adaptab Tdap-IPV pwovoke

Pou evalye efè iminite antrene sou vaksen Tdap-IPV, pou chak pwen final prensipal, nou te konstwi yon modèl lineyè efè melanje ak echantiyon tan, manm kòwòt, ansanm ak entèraksyon tan ak kòwòt kòm kovarye. Nou te egzamine de diferans: (i) diferans konpare ak debaz (D0) nan chak kòwòt (efè apre vaksinasyon an, Tablo siplemantè 1), ak (ii) diferans ant kòwòt nan grandè chanjman sa yo (diferansyèl). efè, Tablo siplemantè 2). Tout kowòt monte ogmantasyon enpòtan nan repons antikò nan senk antijèn yo apre vaksinasyon Tdap-IPV. Konsantrasyon antikò yo te rete pi wo pase debaz jiska yon ane apre vaksinasyon (Y1), eksepte TET, ki te diminye nan kowòt BCGtrained ak BCG plis Tdap (figi siplemantè 2a).

Tout kowòt yo te siyifikativman ogmante kantite sikile PRN plis selil B 2 semèn apre vaksinasyon, ki te sitou selil B memwa (MBCs) (figi siplemantè 3a). Nou pa t 'obsève diferans ki genyen ant kowòt (Tablo Siplemantè 2 ak Figi Siplemantè 3b). Konpare ak kowòt Tdap-IPV la, kowòt ki resevwa fòmasyon BCG a te montre chanjman pliye log1{{10}} (W2/D0) pou repons IgG pou PT, FHA, ak PRN. Yo te obsève yon modèl ki sanble lè w konpare repons sa yo ak kòwòt BCG plis Tdap (Fig. 2a). Nou te obsève tou elve konsantrasyon IgG espesifik koklich nan kòwòt BCG ki te antrene 2 semèn apre vaksinasyon an (figi siplemantè 2b), byenke diferans ki genyen nan valè absoli yo te mwens pwononse pase diferans ki genyen nan ogmantasyon yo ki parapò ak debaz la nan. D0.

Anplis de sa, sijè nan kòwòt BCG ki resevwa fòmasyon yo te montre siyifikativman ogmante repons MBC total, ki gen ladan MBC IgG ki chanje klas (figi 2b ak Figi siplemantè 4). Sijè nan kòwòt BCG ki antrene yo te montre tou sekresyon IFN ki wo an repons a eksitasyon ak tout twa antijèn koklich. Kontrèman, yo te obsève ogmantasyon enpòtan pou yon sèl antijèn koklich nan kòwòt Tdap-IPV (PT) ak de antijèn koklich nan kòwòt BCG plis Tdap (PT ak FHA, Fig. 2c ak Figi Siplemantè 5). Nou menm tou nou te obsève yon tandans kote ogmantasyon nan pwodiksyon IFNg yo te pi wo nan kòwòt BCG ki antrene pase nan lòt kòwòt yo, byenke sa a pa t rive nan siyifikasyon estatistik (Tablo Siplemantè 2 ak Figi Siplemantè 5b). Repons IL-22 ak IL-17 espesifik pou Kolich yo te fèb pou tout kòwòt (Tablo Siplemantè 1). Ansanm, rezilta sa yo montre repons antikò améliorée espesifik Kolich, repons MBC total IgG-chanje, ak pi laj repons IFN espesifik Kolich nan kòwòt BCG ki antrene konpare ak de lòt kòwòt yo.

Nou te eksplore relasyon ki genyen ant ogmantasyon nan rezilta prensipal yo ki te amelyore nan kòwòt BCG ki resevwa fòmasyon an. Pou analiz eksplorasyon sa a, yo te kalkile korelasyon ant antikò, selil B, ak sitokin pou chak kòwòt. Kowòt ki resevwa fòmasyon BCG a te montre anpil korelasyon pozitif enpòtan ak quantitatively pi fò ant repons sa yo, pandan y ap Tdap-IPV ak BCG plis Tdap kowòt yo te montre korelasyon pi fèb oswa envès, ak modèl ki pi fò ki koresponn ak chanjman nan repons IFN (Fig. 3a). Koefisyan korelasyon ant repons nan BCGtrained yo te siyifikativman pi gran pase sa yo ki nan kowòt kontwòl yo, tout ansanm lonje dwèt sou endiksyon an nan yon repons iminitè adaptive ki pi byen kowòdone Kolich-espesifik nan kòwòt BCG-ki resevwa fòmasyon (Fig. 3b).

Pwodiksyon cytokine IL-1 ak IL-6 ki asosye ak repons iminitè adaptab espesifik koklich

Kowòt ki resevwa fòmasyon BCG a te montre MBC total ki chanje ak IgG ak repons IFN espesifik pou koklich. Anplis de sa, konpare ak kowòt Tdap-IPV ak BCG plis Tdap, kowòt ki resevwa fòmasyon BCG te montre tou pi wo repons antikò koklich. Depi vaksinasyon BCG nan imen ka ogmante pwodiksyon cytokine nan sikile selil iminitè an repons a eksitasyon eterològ, semèn rive mwa apre vaksinasyon27, nou evalye si repons cytokine BCG-induit sa yo te asosye ak chanjman nan repons iminitè espesifik koklich apre vaksen Tdap-IPV. De semèn ak 3 mwa apre vaksinasyon BCG, te gen yon repons anti-mycobacterial siyifikativman amelyore ki karakterize pa ogmante IL-22 ak pwodiksyon IFN konpare ak vaksen debaz BCG (figi siplemantè 6a, b).

An jeneral, kòwòt ki resevwa fòmasyon BCG a pa t montre ogmante pwodiksyon iminite eterològ oswa sitokin ki asosye ak iminite ki fòme, jan yo te obsève deja (figi siplemantè 6 ak 8)21. Sepandan, depi endiksyon pwodiksyon cytokine varye ant moun, nou kalkile chanjman ant 2 semèn apre BCG ak 3 mwa apre BCG konpare ak BCG debaz (figi siplemantè 7 ak 9). Yo te kalkile korelasyon Pearson pou detèmine fòs asosyasyon ki genyen ant mezi sa yo nan chak pwen. Twa mwa apre vaksinasyon BCG, sa vle di nan debaz Tdap-IPV, repons sitokin nan eksitasyon vitro yo te trè korelasyon. Repons cytokine ki asosye ak iminite eterològ yo te gen rapò negatif ak repons cytokine ki asosye ak iminite ki antrene, e pami sa yo, korelasyon ant IL-6 ak IL{-1 te pi fò (figi 4), jan yo te dekri deja16. Modèl korelasyon 2 semèn apre vaksinasyon BCG yo te sanble ak sitokin eterològ ki asosye ak iminite men korelasyon ant sitokin ki asosye ak iminite ki fòme yo te pi fèb, eksepte repons IL-10. Ansanm, rezilta sa yo montre aktivasyon iminitè natirèl kowòdone 3 mwa, men se pa 2 semèn apre vaksinasyon BCG nan kòwòt BCG ki resevwa fòmasyon an.

Apre sa, nou te eksplore si wi ou non varyasyon nan repons cytokine nan kòwòt ki resevwa fòmasyon BCG yo te asosye ak chanjman nan pwen iminitè adaptatif TdapIPV. Nou egzamine chanjman nan pwodiksyon cytokine 2 semèn ak 3 mwa apre vaksinasyon BCG. Nou te jwenn ke ogmantasyon nan sitokin ki asosye ak iminite eterològ yo te gen tandans fèb, ak negatif, ki gen rapò ak pwen final prensipal yo nan tou de semèn 2 (figi siplemantè 10) ak 3 mwa apre vaksen BCG (figi 5a). Okontrè, ogmantasyon nan cytokines ki asosye ak iminite ki antrene 3 mwa apre vaksinasyon BCG, patikilyèman IL-1 /IL{{-6 an repons a eksitasyon LPS, te gen yon relasyon siyifikativman pozitif ak repons antikò PRN ak FHA, pwodiksyon IFN nan repons a eksitasyon PT, ak repons total IgG-chanje MBC (figi 5b, c).

Nan liy ak sa a, nou pa t obsève chanjman ki fèt nan abondans relatif nimewo selil san periferik (figi siplemantè 11a), ni chanjman nan abondans selilè 3 mwa apre vaksen BCG yo te korelasyon pozitivman ak pwen final koklich (figi siplemantè 11b). Ogmantasyon nan pwodiksyon IL-1 an repons a eksitasyon LPS (IL1b. LPS) 3 mwa apre vaksinasyon BCG te montre yon asosyasyon solid ak repons miltip Tdap-IPV epi yo te chwazi pou detèmine konbyen nan varyasyon chak repons yo te kapab eksplike. . Yo te kalkile divèjans total yo eksplike (prevwa Rsq) pou chak rezilta epi chanjman nan IL-1 te kapab eksplike jiska 60 pousan varyasyon repons lan (Fig. 5d). An jeneral rezilta sa yo mete aksan sou repons cytokine ki asosye ak iminite fòmasyon 3 mwa apre vaksinasyon BCG yo gen rapò ak ogmantasyon nan repons antikò espesifik koklich ak pwodiksyon IFN, ansanm ak repons MBC total IgG-chanje.

DISKISYON

Endiksyon iminite antrene nan imen rive semèn rive mwa apre vaksinasyon BCG14 epi li ka afekte repons nan vaksen ki vin apre nan imen16,17. Isit la, nou montre ke iminite antrene ki pwovoke pa vaksinasyon BCG 3 mwa anvan, men pa konkouran ak, yon dòz rapèl nan Tdap-IPV, ogmante repons IgG koklich ak modil repons selilè espesifik koklich. Plizyè etid yo te envestige efè kominike BCG ak lòt vaksen, ak pi fò nan etid sa yo rapòte yon efè pozitif nan BCG sou repons iminitè koklich20,21,29,30. Sepandan, dapre sa nou konnen, pa gen okenn etid jiskaprezan ki te mennen ankèt sou tan vaksinasyon BCG sou repons a koklich oswa ki te etidye ki karakteristik repons iminite fòmasyon BCGinduced ki gen rapò ak repons vaksen amelyore.

Sijè nan tout twa kowòt te monte repons anti-kolich umoral ak PRN plis selil B 2 semèn apre vaksinasyon ak TdapIPV. Malgre ke repons antikò PRN yo te pi wo nan kòwòt BCG ki resevwa fòmasyon an, nou pa t obsève yon modèl menm jan an nan repons selil B PRN espesifik yo. Sa a ta ka eksplike pa yon endiksyon pi vit nan antikò nan kòwòt BCG-ki resevwa fòmasyon, ki akimile sou tan akòz mwatye lavi yo long.

Sepandan, piske konsantrasyon antikò yo pa te mezire anvan 2 semèn apre vaksinasyon an, li pa t posib pou estime diferans ki genyen nan sinetik ant kòwòt yo. Ansanm ak ogmante repons antikò PRN, nou te jwenn tou ke repons antikò FHA ak PT yo te pi wo nan kòwòt BCG ki resevwa fòmasyon an. Malerezman, nou pa t kapab mezire repons selil B espesifik PT ak FHA akòz gwo lyezon ki pa espesifik nan FHA ak PT nan selil B yo. Toujou, li pwomèt ke repons total IgG MBC yo te ogmante nan kòwòt ki resevwa fòmasyon BCG a e ke ogmantasyon sa yo te korelasyon ak ogmantasyon nan repons antikò. Nou te jwenn tou ke repons IFN an repons a re-estimulasyon antijèn koklich yo te amelyore nan kòwòt BCG ki resevwa fòmasyon an. Malgre ke chanjman sa yo te relativman ti, nou te obsève yon tandans kote W2–D0 chanjman yo te pi wo pase nan lòt kowòt yo. Plis etid ak plis matyè ka ede valide modèl sa a, ki te konfime nan yon etid sourit19. Menm jan an tou, vaksen BCG neonatal yo te montre tou potensyalize repons Th1 a toxoid tetanòs31.

Ogmantasyon nan antikò koklich, repons total IgG MBC, ak repons IFNg koklich yo te fòtman korelasyon youn ak lòt nan kòwòt ki resevwa fòmasyon BCG, ki sijere deklanchman kowòdone fonksyon efèktè ak memwa. Anplis de sa, ogmantasyon nan antikò koklich, repons total IgG-chanje MBC, ak IFN an repons a restimulasyon PT nan kòwòt BCG ki antrene yo te asosye ak repons natirèl, an patikilye IL-1 ak IL-6. Rezilta sa yo nan liy ak yon etid imen anvan nan gwoup nou an kote nou etidye efè a nan BCG sou vaksen kont grip17. Enpòtans chemen IL-1/IL{-6 kòm yon biomarker iminite ki antrene yo te make tou nan yon modèl enfeksyon viral eksperimantal apre vaksinasyon lafyèv jòn16. An jeneral, nou pa t 'obsève korelasyon ant patikilye stimuli mikwòb yo ak rezilta prensipal yo, ki sijere ke chanjman jeneral nan chemen repons cytokine epi yo pa nenpòt kondisyon eksitasyon patikilye yo lye nan reyaksyon amelyore nan vaksinasyon koklich. Pandan ke nou espere repons IL-6 ak IL-1 ki pi fò nan eksitasyon mikwòb yo dwe sòti nan monosit ak selil dendritik16, selil B yo ka kontribye tou nan pwodiksyon sitokin32 epi nou pa ka eskli kontribisyon potansyèl yo.
Yon kesyon kle se konbyen tan iminite fòmasyon BCG-induit pèsiste apre vaksinasyon an. Nan vitro, yo te idantifye siyati iminite fòmasyon BCG ki te pwovoke nan imen yo depi 2 semèn e jiska 1-ane apre vaksinasyon an14. Etid klinik sou imen ki te vize pou tradui rezilta sa yo nan repons in vivo te limite fenèt obsèvasyon an jiska 5 semèn apre vaksinasyon BCG15–17. Nou te obsève yon endiksyon ki pi fèb nan cytokines IL-6 ak IL-1 ki asosye ak iminite ki antrene pase nan etid anvan yo16, jan yo te rapòte deja21. Varyasyon pakèt a pakèt nan pwodiksyon vaksen BCG a ka enfliyanse endiksyon iminite ki antrene epi yo ka eksplike efè nou te obsève nan etid sa a 33.

Anplis de sa, varyasyon ant tansyon BCG yo te obsève tou ki gen enpak sou iminojenisite yo ak efikasite klinik34-36. Malgre sa, nou toujou demontre ke repons eterològ IL-1 ak IL{-6 3 mwa apre vaksinasyon BCG, sa vle di nan moman vaksinasyon Tdap-IPV, men se pa 2 semèn apre vaksinasyon BCG ki asosye ak koklich ranfòse. iminite umoral ak selilè. Konklizyon sa yo vle di ke iminite antrene kontinye devlope 2 semèn ki sot pase yo apre vaksinasyon BCG, epi mete aksan sou 'repons' fonksyonèl debaz selil iminitè natirèl sikile yo ka kritik pou devlopman yon repons vaksen ki pi pisan.

Etid sa a demontre ke vaksen BCG anvan yo ka amelyore repons a antijèn vaksen aP. Etonan, nou pa t obsève efè sa a pou TET ak DIPH. Sa ka eksplike pa lefèt ke tout adilt te resevwa yon vaksen rapèl anvan ak Td-IPV men pa ak aP a laj de 9 ane, jan yo rekòmande nan pwogram vaksinasyon nasyonal la. Nan liy ak sa a, nou te jwenn ke konsantrasyon antikò debaz yo nan antijèn aP yo te trè korelasyon atravè matyè yo nan etid nou an, men yo pa te korelasyon ak DIPH ak TET, sijere ke iminite umoral nan eleman sa yo pa senkronize ak antijèn yo aP (Siplemantè. Fig. 12). Nivo antikò debaz DIPH ak TET yo te trè korelasyon, ki konsistan avèk ko-administrasyon yo nan vaksen yo. Kidonk, varyasyon nan iminite ki te deja egziste kont diferan eleman vaksen yo ka jwe yon wòl nan kapasite vaksen BCG ak iminite antrene pou enfliyanse repons a yon Tdap-IPV.

Although our study was not designed to investigate vaccine efficacy, a major question is whether the enhanced antibody response that we observed in the BCG-trained cohort may translate into better clinical protection. There is much debate about the correlates of protection against pertussis37. Nonetheless, PT antibodies have previously been used to correlate with clinical protection against disease (>25 IU/ml)29. Sèvi ak papòt sa a, seroprotection tou pre-konplè te reyalize 2 semèn apre TdapIPV nan kowòt BCG-ki resevwa fòmasyon ak BCG plis Tdap, pandan y ap yon fraksyon nan matyè nan kòwòt Tdap-IPV yo pa te seroprotected (figi siplemantè 13).

Anplis antikò, iminite selil T ak an patikilye repons Th1 ak Th17 yo te make tou kòm enpòtan pou pwoteksyon kont koklich nan modèl bèt2,38. Nou te jwenn ke kòwòt ki resevwa fòmasyon BCG la te montre IFN ogmante an repons a re-estimulasyon antijèn koklich, ki se yon lekti pou iminite Th1 epi ki ka sijere amelyore pwoteksyon klinik kont koklich. Finalman, pwen final iminolojik aktyèl ki vize pou quantifier iminite adaptab espesifik koklich, tankou T-selil, B-selil, oswa repons umoral, poko valide kòm korelasyon iminolojik nan pwoteksyon. Gen plizyè posiblite pou fèmen diferans konesans sa a, pa egzanp, lè w fè etid epidemyolojik oswa lè w itilize modèl enfeksyon imen kontwole ki fèk etabli pou B. pertussis39.

Yon limit nan etid eksplorasyon nou an se ke popilasyon etid la te konpoze de adilt ki te prime nan anfans ak vaksen an antye selil DTP, ki se li te ye pou enfliyanse repons adaptasyon an nan koklich dè dekad apre priming epi ki afekte endiksyon nan iminite selil T nan. repons a yon vaksen rapèl40. Kidonk, li pral enpòtan pou detèmine si rezilta nou yo tradui nan timoun ki fèt nan epòk vaksinasyon woutin aP pedyatrik la. Anplis de sa, piske nou enkli sèlman fi, li pral enpòtan pou detèmine si diferans ki egziste ak gason. Nan etid eksplorasyon sa a, nou mezire pwen final iminojenisite anti-kolich ki gen ladan repons antikò, total ak PRN plis repons selil B, ak repons antijèn espesifik selil T. P-valè yo pa te korije pou tès miltip akòz nati a vize nan repons iminitè yo evalye. Sa ki enpòtan, etid sa a te fèt sou volontè nan lwès Ewopeyen (Olandè) desandan, ak etid nan lavni ta dwe mennen ankèt sou si efè menm jan yo ka jwenn nan popilasyon ki gen diferan orijin jenetik. Yon lòt limit se ke se sèlman yon sous-ensemble de cytokines te mezire. Pandan ke sa a te apwopriye pou ipotèz espesifik nou te vize teste, yon pwofil plis konplè, san patipri nan sitokin ak lòt repons ka bay nouvo lide.

An konklizyon, nan etid sa a, nou rapòte ke vaksen BCG yo administre 3 mwa anvan vaksen Tdap-IPV siyifikativman amelyore iminite anti-kolich e ke biomake iminite ki antrene yo se korel ki pi serye nan repons sa yo vaksen amelyore. Lòt etid validation ap nesesè pou evalye rezilta sa yo nan divès popilasyon etid yo, epi plis etid iminolojik ak jenetik yo bezwen pou valide mekanikman wòl IL-1 ak IL-6 chemen yo. Ansanm, delimitasyon fonksyon iminitè natirèl debaz, ki ka modile pa BCG, pral esansyèl pou konprann ki jan yo gide repons iminitè adaptasyon vaksen an nan direksyon iminojenisite siperyè ak pwoteksyon kont maladi.

METÒD

Esè klinik

Yo te fè esè owaza ak yon sèl sant sa a nan Sant Medikal Radboud University (Nijmegen, Netherlands) soti 2015 mas rive 2 jiyè01621. Pwotokòl etid la anrejistre nan esè klinik yo. gov (NCT02771782) e li te apwouve pa Komite Etik Medikal Arnhem-Nijmegen. Yo te rekrite volontè lè l sèvi avèk tablo afichaj yo ak nan Radboud University nan Nijmegen epi yo te resevwa konpansasyon modere. Yo te enkli volontè ki pa te pran vaksen anvan ak BCG oswa dènyèman ak vaksen koklich. Kritè eksklizyon yo te (i) vaksen BCG anvan oswa dènye vaksen ak vaksen koklich, (ii) alèji ak neomicin, polymyxin, oswa reyaksyon alèjik nan vaksen anvan ak vaksen kont difteri, tetanòs, koklich, oswa polyo, (iii) itilizasyon sistemik. medikaman lòt pase dwòg kontraseptif oral, ak (iv) gwosès oswa istwa maladi ki soti nan iminodefisyans. Gwosè kòwòt yo te detèmine dapre etid anvan gwoup nou an te fè kote nou te envestige efè vaksen BCG sou repons iminitè natirèl yo16. Randomization atravè bra etid yo te fèt ak yon algorithm lojisyèl ki baze sou. Tout matyè yo te gen yon istwa nan priming ak selil antye koklich nan premye ane a nan lavi yo. Yo te enkli swasannkenz fi volontè. Apre yo te jwenn konsantman enfòme alekri, yo te kolekte san nan asid ethylenediaminetetraacetic (EDTA) oswa ityòm eparin (LiHep), epi yo te bay vaksen. Yo te jwenn konte san konplè lè l sèvi avèk yon analizè ematoloji Sysmex XN-450. Sijè yo te resevwa BCG Danish 1331 (Staten Serum Institut, Copenhagen, Denmark; 0.1 ml intradermally) ak Tdap-IPV (Boostrix Polio, GlaxoSmithKline; 0.5 ml intramuscularly). Sera yo te estoke nan -20 degre jiskaske analiz, epi yo te trete san antye pou plis analiz jan sa dekri anba a. Yo te itilize direktiv Konsolidasyon Estanda Rapò Esè yo (CONSORT) pou prepare maniskri sa a (figi siplemantè 14).

Analiz serolojik

Sera yo te analize pou PT-, FHA-, PRN-, TET-, ak DIPH-espesifik konsantrasyon antikò IgG lè l sèvi avèk yon fliyoresan-pèl ki baze sou multiplex imunoassay25. Antijèn yo te makonnen kovalans ak distenk koulè ki kode aktive carboxylated MicroPlex Microspheres (pèl) (Luminex, Austin, Texas, USA). Yo te itilize antijèn sa yo pou kouple: PT ki pirifye anpil (Enstiti Vaksen Oland), FHA (Kaketsuken, Kumamoto, Japon), P.69 PRN eksprime ak pirifye nan yon konstwi E. coli41, toxoid difteri (Enstiti Vaksen Netherlands), ak tetanòs. toksin (T3194, Sigma-Aldrich, Saint Louis, Missouri, USA). Apre yon etap lave nan PBS, yo te aktive 12.5 × 106 pèl carboxylated/mL nan PBS ki gen 2.5 mg 1-etil3-({{20}} dimethyl aminopropyl)-karbodiimid idroklorid (Thermo Fisher Scientific, Waltham, Massachusetts, USA) ak 2.5 mg N-hydroxysulfosuccinimide (Thermo Fisher Scientific, Waltham, Massachusetts, USA). Antijèn yo pou kouple yo te dilye nan PBS nan yon konsantrasyon nan 10 ug nan PT, FHA, oswa PRN, 100 ug nan DT, oswa 25 ug nan TET pou chak 12.5 × 106 pèl aktive ak enkube pou 2 èdtan nan tanperati chanm nan fè nwa a anba. wotasyon konstan. Apre twa etap lave, pèl antijèn makonnen yo te estoke nan fè nwa a nan PBS ki gen 0.03 pousan (wt/vol) azid sodyòm ak 1 pousan (wt/vol) albumin serom bovin nan 4 degre jiskaske yo itilize. Sera dilye 1/200 ak 1/4000 nan PBS ki gen 0.1 pousan (vol/vol) Tween 20 ak 3 pousan (wt/vol) BSA yo te enkube ak pèl antijèn makonnen nan yon plak filtre byen 96-pou 45 min. nan tanperati chanm nan 750 pm nan fè nwa a. Sere referans nan yon seri dilution, sera kontwòl kalite, ak espas vid yo te enkli sou chak plak.

Yo te kalibre estanda referans andedan kay la pou koklich kont WHO 1st IS Part 06/140 epi yo te dilye seri 4-pliye sou 6 pwi (1/200 jiska 1/204800). Yo te kalibre estanda referans anndan kay la pou DIPH ak TET kont WHO NIBSC DI-3 ak TE-3 epi yo te dilye seri 4-pliye plis pase 8 pwi (1/50 rive 1/819200). Apre enkubasyon, pwi yo te lave 3 fwa ak PBS, enkubasyon ak antikò kabrit anti-moun IgG ki make R-phycoerythrin (Jackson Immunoresearch Laboratories, West-Grove, PA, USA) pou 30 min, epi lave. Pèl yo te enkli nan PBS ak entansite fluoresans medyàn (MFI) te akeri sou yon Bio-Plex LX200. MFI te konvèti nan IU/mL pa entèpolasyon soti nan yon 5-koub estanda lojistik paramèt lè l sèvi avèk Bioplex Manager 6.2 lojisyèl (Bio-Rad Laboratories, Hercules, Kalifòni, USA) ak ekspòte nan Microsoft Excel.

PBMC Izolasyon, eksitasyon, ak deteksyon sitokin

PBMC yo te izole pa santrifujasyon gradyan dansite Ficoll epi yo te resuspend nan 5 × 106 / ml nan mwayen kilti RPMI (Roswell Park Memorial Institute medyòm; Invitrogen, CA, USA) complétée ak gentamycin, Glutamax (GIBCO), ak piruvat. Nan tout, 100 ul te aliquote pou chak pi nan plak ki anba wonn 96-byen (Corning) ak ankouraje ak youn nan RPMI (kontwòl negatif), Escherichia coli lipopolysaccharide (LPS; 10 ng/ml, Sigma-Aldrich), Sonicated Mycobacterium tibèkiloz H37Rv (5 ug/ml), Staphylococcus aureus ki te mouri nan chalè (1 × 106 /ml, izole klinik), Candida albicans ki te touye chalè (1 × 106 /ml, souch UC820), ak Bordetella koklich ki te mouri nan chalè ( 1 ug/ml, souch B1917), PT (2 ug/ml), PRN (4 ug/ml, ReagentProteins, PFE-031), ak FHA (2 ug/ml). AM Buisman te bay PT ak FHA dousman nan Enstiti Nasyonal pou Sante Piblik ak Anviwònman (RIVM, Bilthoven, Netherlands). Selil yo te enkube a 37 degre ak 5 pousan CO2 pou 24 èdtan pou deteksyon IL-1, IL-6, IL-10, ak TNF oswa 7 jou pou IFN, IL{{31} }, ak IL-17. Supernatant yo te estoke nan -20 degre. Sitokin yo te mezire nan supernatant kilti PBMC lè l sèvi avèk twous tès imunosorban ki lye ak anzim (ELISA) ki soti nan sistèm R&D (IL-1, TNF, IL17, IL-22) oswa Sanquin (IL-6, IL). -10, IFN ) dapre enstriksyon manifakti a.

Sitometri koule selil B

Tach selil B yo te fèt dirèkteman sou san antye ak yon panèl tach antikò (Tablo Siplemantè 3) ki gen ladan PRN ki gen etikèt fluorescent pou deteksyon selil B espesifik antijèn yo. Pou make PRN-espesifik selil B yo, PRN (ReagentProteins, PFE-031) te konjige ak fluorescein (FITC Antibody Labeling Kit, Pierce) dapre pwotokòl manifakti a (PRN-FITC). An total, 1-2 ml san antye ki te fèk pran nan tib LiHep te dilye nan tanpon FACS (PBS plis 0.{{10}}9 pousan NaN3 plis 0.2 pousan albumin serom bovin, Calbiochem) ak selil yo te pellet ak Lè sa a, lave de fwa ak tanpon FACS. Selil yo te resuspend nan tanpon FACS ak Lè sa a, tache ak bwason antikò fenotip selil B pou 15 min, fiks (FACSLysing, BD Biosciences), epi apre yon lòt lave ak tanpon FACS yo te analize nan 1 èdtan nan tach. Sitometri koule nan PRN-antijèn-espesifik selil B nan san antye te fèt sou yon sitomèt koule LSRII (BD Biosciences) ak anviwònman enstriman estanda42. Done sikometri koule yo te analize ak Infinicyte (Vèsyon 2.0, Cytognos). Pou chak echantiyon, 2 × 106 selil yo te akeri nan pòtay lenfosit la (figi siplemantè 1a). Lenfosit yo te fèmen apre yo retire doubt ak debri. Selil B yo te idantifye kòm CD45 plis CD19 plis ak selil B PRN-FITC-espesifik yo te idantifye. Selil B yo te idantifye lè l sèvi avèk yon estrateji gating adapte43. Nou te eseye detekte selil B PT-espesifik pa sikometri koule, men nou pa t reyisi akòz background nan segondè ki te koze pa tach ki pa espesifik.

Estatistik

Valè cytokine ak antikò yo te transfòme 10- an kont pou distribisyon defòme yo. Analiz repons rezilta prensipal oswa segondè yo te analize nan yon modèl regresyon efè melanje lè l sèvi avèk pake 'lme4' 44 R la. Pou chak rezilta, fòmil pou modèl la (nan notasyon R) se:

Konparezon yo te kalkile ak pake 'vle di' 45 R la epi nou egzamine de kontras. Premyèman, nou te egzamine si pwen final prensipal yo te siyifikativman diferan konpare ak debaz vaksen Tdap-IPV nan chak kòwòt (efè apre vaksinasyon yo te defini kòm W2–D0 nan chak kòwòt, Tablo siplemantè 1). Apre sa, nou te egzamine diferans ant kòwòt nan grandè chanjman sa yo (efè diferans, Tablo siplemantè 2, defini kòm (W2c1 – D{{10}}c1) – ​​(W2c2 – D0 c2) kote c1 ak c2 refere a diferan kowòt pou yon konparezon bay). Chanjman nan sitokin iminite eterològ oswa ki resevwa fòmasyon nan kòwòt BCG ki resevwa fòmasyon yo te analize menm jan an. Yo rapòte valè P yo lè l sèvi avèk metòd Kenward-Roger degre libète. Paramèt estatistik yo rapòte dirèkteman nan figi yo ak lejand figi yo. Akòz konsepsyon etid eksploratif la ak repons iminitè vize yo evalye, pa gen okenn koreksyon tès miltip fèt. Yo te fè korelasyon pa pè ak valè chanjman ki gen rapò 10-pliye sou liy debaz. Estimasyon divèjans ki eksplike pa mezi cytokin yo sou varyab rezilta prensipal yo te fèt lè l sèvi avèk pake R 'caret' 46 la. Pou kontablite potansyèl surfitting, 10 fwa repete, 4-pliye validasyon kwa yo te fèt. Nou analize tit antikò seroprotektif kont PT, TET, oswa DIPH ak yon tès egzak Fisher. Asosyasyon ant estati seropwoteksyon ak kòwòt yo te detèmine pa ekzamine rès nan yon tès chi-kare. Valè papòt pou seroprotection pou PT yo te 25 IU/ml18 ak 0.1 IU/ml pou DIPH ak TET37).

Rezime rapò

Gen plis enfòmasyon sou konsepsyon rechèch ki disponib nan rezime rapò rechèch la nati ki lye nan atik sa a.

DISPONIBITE DONE

Done ki sipòte rezilta etid sa a disponib nan men otè ki koresponn lan sou demann rezonab.

KÒD DISPONIBlite

Kòd R ki sipòte rezilta etid sa a disponib nan men otè ki koresponn lan sou demann rezonab.

REFERANS

1. Tan, T. et al. Kolich atravè lemond: dènye tandans epidemyolojik soti nan 2000 a 2013. Pediatr. Enfekte. Dis. J. 34, e222–e232 (2015).

2. Warfel, JM, Zimmerman, LI & Merkel, TJ Vaksen koklich aselilè pwoteje kont maladi men yo pa anpeche enfeksyon ak transmisyon nan yon modèl primat ki pa imen. Pwosedi. Natl Acad. Sci. USA 111, 787–792 (2014).

3. Huang, LM et al. Repons a premye ak yon dòz rapèl nan vaksen aselilè, konpozan, ak selil antye vaksen koklich inisye a 2 mwa. Vaccine 14, 916–922 (1996).

4. Klein, NP, Bartlett, J., Rowhani-Rahbar, A., Fireman, B. & Baxter, R. Waning pwoteksyon apre senkyèm dòz vaksen koklich aselilè nan timoun yo. Nouvo Engl. J. Med. 367, 1012–1019 (2012).

5. Misegades, LK et al. Asosyasyon koklich timoun ak resevwa 5 dòz vaksen koklich pa tan depi dènye dòz vaksen an, Kalifòni, 2010. JAMA 308, 2126–2132 (2012).

6. Hendrikx, LH, Berbers, GA, Veenhoven, RH, Sanders, EA & Buisman, AM IgG repons apre vaksen rapèl ak diferan vaksen koklich nan timoun Olandè 4 ane ki gen laj: efè kontni antijèn vaksen an. Vaksen 27, 6530–6536 (2009).

7. Misiak, A. et al. Ajoute yon agonist TLR7 nan yon vaksen koklich aselilè amelyore repons Th1 ak Th17 ak iminite pwoteksyon nan yon modèl sourit. Vaksen 35, 5256–5263 (2017).

8. Dunne, A. et al. Yon agonist TLR2 roman ki soti nan Bordetella koklich se yon adjuvant ki pisan ki ankouraje iminite pwoteksyon ak yon vaksen koklich aselilè. Imunol mukozal. 8, 607–617 (2015).

9. Sugai, T. et al. Yon oligodeoxynucleotide ki gen CpG kòm yon adjuvant efikas kontrebalans repons iminitè Th1/Th2 nan vaksen difteri-tetanòs-kolich la. Vaksen 23, 5450–5456 (2005).

10. Colditz, GA et al. Efikasite vaksen BCG nan prevansyon tibèkiloz la. Meta-analiz de literati ki te pibliye a. JAMA 271, 698–702 (1994).

11. Kristensen, I., Aaby, P. & Jensen, H. Vaksen woutin ak siviv timoun: yon etid swivi nan Gine-Bissau, Afrik Lwès. BMJ 321, 1435–1438 (2000).

12. Hirve, S. et al. Efè ki pa espesifik ak sèks-diferansyèl nan vaksen sou siviv timoun nan seksyon riral lwès peyi Zend. Vaksen 30, 7300–7308 (2012).

13. Aaby, P. et al. Esè owaza nan vaksen BCG nan nesans timoun ki pa gen anpil pwa: efè benefisye non espesifik nan peryòd neonatal la? J. Enfekte. Dis. 204, 245–252 (2011).

14. Netea, MG et al. Iminite ki antrene: yon pwogram memwa iminitè natirèl nan sante ak maladi. Syans 352, aaf1098 (2016).

15. Walk, J. et al. Rezilta enfeksyon malarya imen kontwole apre vaksinasyon BCG. Nat. Komin. 10, 874 (2019).

16. Arts, RJW et al. Vaksen BCG pwoteje kont enfeksyon viral eksperimantal nan imen atravè endiksyon nan sitokin ki asosye ak iminite grenn. Cell Host Microbe 23, 89–100 e105 (2018).

17. Leentjens, J. et al. Vaksen BCG amelyore iminojenisite nan vaksen grip ki vin apre nan volontè ki an sante: yon etid pilòt owaza, ki kontwole plasebo. J. Enfekte. Dis. 212, 1930–1938 (2015).

18. Zimmermann, P. & Curtis, N. Enfliyans BCG sou repons vaksen yo - yon revizyon sistematik. Ekspè Rev Vaccines 17, 547–554 (2018).

19. Broset, E. et al. Vaksen BCG amelyore repons iminitè DTaP nan sourit epi li asosye ak pi ba ensidans koklich nan etid epidemyolojik ekolojik. EBioMedicine 65, 103254 (2021).

20. Aaby, P., Andersen, A., Ravn, H. & Zaman, K. Ko-administrasyon BCG ak vaksen kont difteri-tetanòs-koquelch (DTP) ka diminye mòtalite tibebe a plis pase orè OMS nan BCG an premye ak Lè sa a, DTP. Yon re-analiz done siveyans demografik ki soti nan seksyon riral Bangladèch. EBioMedicine 22, 173-180 (2017).

21. Blok, BA et al. Entèaksyon, ki pa espesifik, efè iminolojik nan vaksen polio inaktive bacillus calmette-guerin ak tetanòs-difteri-kolich: yon esè eksploratif, owaza. Clin. Enfekte. Dis. 70, 455–463 (2020).

22. Aaby, P., Ravn, H., Fisker, AB, Rodrigues, A. & Benn, CS Èske difteri-tetanòs-kolich (DTP) asosye ak ogmante mòtalite fi? Yon meta-analiz teste ipotèz yo nan sèks-diferans efè ki pa espesifik nan vaksen DTP. Trans. R. Soc. Trop. Med. Hyg. 110, 570–581 (2016).

23. van der Lee, S. et al. Amelyore pousantaj akizisyon Bordetella koklich nan adolesan pandan epidemi 2012 la nan Netherlands ak prèv pou pèsistans antikò pwolonje apre enfeksyon. Siveyans Euro. https://doi.org/10.2807/1560-7917. ES.2017.22.47.17-00011 (2017).

24. Berbers, G. et al. Sikilasyon koklich ak pòv pwoteksyon kont difteri nan mitan granmoun ki gen laj mwayen nan 18 peyi Ewopeyen yo. Nat. Komin. 12, 2871 (2021). 25. van Gageldonk, PG, van Schaijk, FG, van der Klis, FR & Berbers, GA Devlopman ak validation yon imunoessai multiplex pou detèminasyon an similtane nan serik antikò Bordetella koklich, difteri, ak tetanòs. J. Immunol. Metòd 335, 79–89 (2008).

26. Schure, RM et al. Repons selil T yo anvan ak apre senkyèm vaksen kont koklich aselilè youn apre lòt nan 4-timoun Olandè ki gen lane. Clin. Vaksen Imunol. 19, 1879–1886 (2012).

27. Mathurin, KS, Martens, GW, Kornfeld, H. & Welsh, RM CD4 T-selil-medyatè eterològ iminite ant mikobakteri ak poxvirus. J. Virol. 83, 3528–3539 (2009).

28. Lertmemongkolchai, G., Cai, G., Hunter, CA & Bancroft, GJ Bystander aktivasyon nan CD8 plis selil T kontribye nan pwodiksyon an rapid nan IFN-gamma an repons a patojèn bakteri. J. Immunol. 166, 1097–1105 (2001).

29. Zimmermann, P. et al. Enfliyans vaksen neonatal Bacille Calmette-Guerin (BCG) sou repons vaksen eterològ nan tibebe. Vaccine 37, 3735–3744 (2019).

30. Ritz, N., Mui, M., Balloch, A. & Curtis, N. Efè ki pa espesifik nan vaksen Bacille CalmetteGuerin sou repons iminitè a vaksen woutin. Vaksen 31, 3098–3103 (2013).

31. Libraty, DH et al. Vaksen BCG neonatal asosye avèk repons iminitè T-helper 1 améliorée pou vaksen eterològ tibebe. Esè Vaccinol. 3, 1–5 (2014). 32. du Plessis, WJ et al. Repons fonksyonèl selil B nan eksitasyon antijenik: yon rapò preliminè sou tibèkiloz inaktif. PLoS ONE 11, e0152710 (2016).

33. Biering-Sorensen, S. et al. Varyasyon nan kwasans nan pwodiksyon an nan vaksen an BCG ak asosyasyon an ak repons iminitè a. Yon etid obsèvasyon nan yon esè owaza. Vaksen 33, 2056–2065 (2015).

34. Ru, H. et al. Enpak Rejyon Genome Diferans 4 (RD4) sou virilans Mikobakteri ak efikasite BCG. Devan. Selil. Enfekte. Microbiol. 7, 239 (2017). 35. Cho, T. et al. Yon revizyon sou vaksen BCG a ak lòt apwòch nan direksyon eradikasyon tibèkiloz. Hum. Vaksen. Immunother. 17, 2454–2470 (2021).

36. Brosch, R. et al. Plastisite genòm BCG ak enpak sou efikasite vaksen an. Pwosedi. Natl Acad. Sci. USA 104, 5596–5601 (2007).

37. Plotkin, SA Korele nan pwoteksyon vaksinasyon pwovoke. Clin. Vaksen. Imunol. 17, 1055–1065 (2010).

38. Ross, PJ et al. Kontribisyon relatif nan selil Th1 ak Th17 nan iminite adaptasyon nan Bordetella koklich: nan direksyon pou konsepsyon rasyonèl nan yon vaksen amelyore acellular koklich. PLoS Pathog. 9, e1003264 (2013).

39. de Graaf, H. et al. Ankèt Bordetella koklich kolonizasyon ak iminite: pwotokòl pou yon pasyan ki entène kontwole modèl enfeksyon imen. BMJ Open 7, e018594 (2017).

40. da Silva Antunes, R. et al. Polarizasyon Th1/Th17 pèsiste apre vaksinasyon kòlich tout selil malgre repete rapèl aselilè. J. Clin. Investig. 128, 3853–3865 (2018).

41. Hijnen, M., van Gageldonk, PG, Berbers, GA, van Woerkom, T. & Mooi, FR Bordetella pertussis virulence factor P.69 pertactin konsève pwopriyete iminolojik li yo apre twòp pwodiksyon nan Escherichia coli. Pwoteyin Ekspr. Purif. 41, 106–112 (2005).

42. Kalina, T. et al. EuroFlow normalisation nan anviwònman enstriman sitomèt koule ak pwotokòl imunofenotip. Lesemi 26, 1986-2010 (2012).

43. Blanco, E. et al. Distribisyon ki asosye ak laj nan selil B nòmal ak selil plasma nan san periferik. J. Allergy Clin. Imunol. 141, 2208–2219. e2216 (2018).

44. Bates, D., Machler, M., Bolker, BM & Walker, SC Fitting lineyè modèl efè melanje lè l sèvi avèk lme4. J. Stat. Softw. 67, 1–48 (2015).

45. Lenth, R. Emmeans: estime majinal vle di, aka pi piti kare, vle di (2018).

46. ​​Kuhn, M. Bati modèl prediksyon nan R lè l sèvi avèk Pake Caret la. J. Stat. Softw. 28, 1–26 (2008).

REKONÈS

Nou ta renmen remèsye Anne-Marie Buisman (RIVM) paske li te bay antijèn PT ak FHA yo te itilize pou eksperyans re-estimulasyon PBMC yo. Nou remèsye tout volontè ki te patisipe nan pwosè a. Travay sa a te sipòte pa Enstiti Nasyonal Sante Piblik ak Anviwònman an (RIVM), Netherlands (SPR pwojè S112200). MGN te sipòte pa yon ERC Avanse Grant (#833247) ak yon sibvansyon Spinoza nan Òganizasyon Netherlands pou Rechèch Syantifik.

KONTRIBYON OTÉ

Konsepyalizasyon: BAB, MGN, RvC, ak DAD; metodoloji: ES, MJE, GAMB, PGMvG, BAB, ak LCJdB; ankèt: ES, MJE, GAMB, PGMvG, BAB, LCJdB, ak JG; analiz fòmèl: JG; ekri-orijinal bouyon: JG ak DAD; ekri revizyon ak koreksyon: tout.

ENTERÈ KONPETISYON

MGN gen yon patant nan Nanobiologics pou anpeche iminite antrene ki gen lisans TTxD, ak yon patant nan nanobiyoloji pou ankouraje iminite antrene ki gen lisans TTxD. Tout lòt otè pa rapòte okenn konfli potansyèl. Tout otè yo te soumèt Fòm ICMJE pou Divilgasyon Konfli Enterè Potansyèl yo.

ENFÒMASYON ADIsyonèl

Enfòmasyon siplemantè Vèsyon sou entènèt la gen materyèl siplemantè ki disponib nan https://doi.org/10.1038/s41541-022-00438-4.

Korespondans ak demann pou materyèl yo ta dwe adrese a Dimitri A. Diavatopoulos.

Reprints ak enfòmasyon sou pèmisyon yo disponib nan http://www.nature.com/reprints

Nòt Piblikatè Springer Nature rete net sou reklamasyon jiridiksyon nan kat pibliye ak afilyasyon enstitisyonèl.

Aksè Louvri

Atik sa a gen yon lisans Creative Commons Attribution 4.0 Entènasyonal Lisans, ki pèmèt itilizasyon, pataje, adaptasyon, distribisyon, ak repwodiksyon nan nenpòt mwayen oswa fòma, toutotan ou bay otè orijinal la (yo) kredi apwopriye. ) ak sous la, bay yon lyen ki mennen nan lisans Creative Commons, epi endike si yo te fè chanjman. Imaj yo oswa lòt materyèl twazyèm pati nan atik sa a enkli nan lisans Creative Commons atik la sof si yo endike otreman nan yon liy kredi nan materyèl la. Si materyèl pa enkli nan lisans Creative Commons atik la epi itilizasyon ou gen entansyon pa otorize pa règleman lalwa oswa depase itilizasyon otorize a, w ap bezwen jwenn pèmisyon dirèkteman nan detantè copyright la.

For more information:1950477648nn@gmail.com