htLang
Kay / Konesans / Sanisfè

Konesans

Chrysogenamide A soti nan yon chanpiyon andofitik ki asosye ak Cistanche Deserticola ak efè neropwoteksyon li sou selil SH-SY5Y.

Mar 03, 2022

Kontakte: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Imèl:audrey.hu@wecistanche.com

Entwodiksyon

Cistanche deserticola(YC Ma) se yon plant parazit natif natal nan nòdwès Lachin. Tij la nan plant sa a se yon enpòtan medikaman tradisyonèl Chinwa epi yo itilize pou tretman an nan defisi ren ak neurasthenia ("The Chinese Medicine Dictionary", 1977). Phenylthanoid glikozid soti nanCistanchedeserticolayo te rapòte yo gen aktivite nan anpeche ak trete maladi nè kranyal ak scavenging radikal gratis [1, 2]. Baze sou lefèt ke fongis endophytic ka pwodwi nouvo konpozan medsin ak menm / menm jan ak sa yo ki soti nan plant yo lame, rechèch pou nouvo konpoze aktif soti nan fongis endophytic nan plant medsin enpòtan montre valè a pou devlopman nan nouvo resous medsin. Nan kou a nan rechèch nou an pou nouvo konpoze neuroprotective soti nan fongis andofitik soti nanCistanchedeserticolakolekte nan Inner Mongolia nan nòdwès Lachin, twa tansyon aktif yo te tès depistaj lè l sèvi avèk selil SH-SY5Y. Pami yo, bouyon kilti chanpiyon No 005, otantifye kòm Penicillium chrysogenum, te montre yon efè pwoteksyon neurocyte enpòtan kont lanmò selil oksidatif estrès-induit nan selil SH-SY5Y. Etid sou konstitiyan aktif souch sa a te mennen nan izòlman nan chrysogenamide A (1) (Fig. 1) atravè yon pwosedi izolasyon byoassay-gide. Anplis de sa, yo te izole kat konpoze li te ye epi yo te idantifye kòm circumdat nan G (2) [3], 2-[({2-hydroxypropionyl) amino] benzamid (3) [4], 2- ,3-dihydrosorbicilin (4) [5] ak (9Z,12Z)-2,3-dihydroxypropyl octadeca-9,12-dyenoat (5) [6] , pa konparezon done espektroskopik yo ak done literati. Isit la, nou rapòte sou izolasyon, idantifikasyon, ak efè neropwotektif chrysogenamide A.

Cistanche deserticola

Cistanche deserticola

Materyèl ak Metòd

Materyèl chanpiyon Yon echantiyon Penicillium chrysogenum No 005 te izole nan rasin C. deserticola kolekte nan Inner Mongolia nan nòdwès Lachin. Sou pòmdetè dextrose agar aparans makwoskopik la te gaye, lis, velours, ble-vèt koloni pafwa anvayi ak hyphae limyè; sifas koloni yo souvan te montre anpil ti gout jòn limyè; ranvèse jòn. Yon rechèch GenBank ak sekans jèn ADN ribosomal 18S nimewo 005 (1676 nukleotid; nimewo asansyon Gen-Bank EU203859) te fèt. Rezilta yo endike yon espès Penicillium chrysogenum kòm match ki pi pre. Sou baz aparans makwoskopik li yo ak sekans jèn 18S rDNA, No.005 se yon souch Penicillium chrysogenum.

image

Fèmantasyon ak ekstraksyon

Chanpiyon an te grandi nan kondisyon estatik nan 24 degre pou 3{{10}} jou nan 35 1000-ml flacon konik ki gen yon mwayen likid (30{{2{{22} }}} ml / flask) ki konpoze de glikoz (10 g / lit), maltoz (20 g / lit), mannitol (20 g / lit), glutamat monosodyòm (10 g / lit), KH2PO4 (0.5 g / lit), MgSO4·7H2O (0.3 g/lit), mayi likè apik (1.0 g/lit) ak ekstrè ledven (3.0 g/lit) ak dlo lanmè apre ajiste pH li a 7.0. Bouyon an antye fèrmante (10.5 lit) te ekstrè twa fwa ak EtOAc bay yon soln EtOAc, ki te konsantre anba presyon redwi bay yon ekstrè brit (9.5 g).

Pirifikasyon

Ekstrè brit la (9.5 g) te separe an 15 fraksyon sou yon kolòn jèl silica lè l sèvi avèk yon elisyon gradyan etap nan etè petwòl/Me2CO. Fraksyon 2 a, elite ak 8: 2 etè petwòl/Me2CO, te rekristalize nan MeOH, ki bay 3 kòm zegwi san koulè (8.{{10}} mg). Fraksyon 3 (19.{{30}} mg), ki te eliye ak 7:3 etè petwòl/Me2CO, te separe pi lwen pa kolòn faz ranvèse (RP18, 40 6{{38). }} mm, Merck; MeOH - H2O 3:2→4:1→MeOH) pou peye fr. 3 7 (8.0 mg), ki te pirifye pa anpil PHPLC (60 pousan MeOH ki gen {{70}}.1 pousan TFA, 4.{{77} } ml/minit) pou bay 4 (2.{{80}} mg). Fraksyon 4 (26.0 mg), eliye ak 6: 4 etè petwòl/Me2CO, te separe plis pa kolòn faz ranvèse (RP18, 40 60 mm, Merck; MeOH - H2O 3:2→4:1→MeOH) pou peye. fr. 4-3 (5.4 mg) ak fr. 4-9 (7.6 mg). Lè sa a, fr. 4-3 te separe pa anpil PHPLC [YMC-pake ODS (A), 10 250 mm, 5 mm, 4.0 ml / minit] (60 pousan MeOH, 4.0 ml / minit) bay 2 (1.0 mg), ak fr. 4-9 te separe pa PHPLC vaste (80 pousan MeOH, 4.0 ml / minit) bay 1 (4.0 mg) ak 5 (2.6 mg). 1: jwenn kòm solid jòn pal; [a] D 25 24.5 degre (c 0.155, MeOH); UV (MeOH) l max 208, 251 nm; CD (MeOH) (gade Fig. 4); IR (KBr) n max 3433, 3200, 3076, 2928, 2862, 1677, 1440, 1370, 1324, 1188, 1029 cm 1 ; 1H- ak 13C-NMR (gade Tablo 1); HRESI-MS m/z 448.2951 [MH] (kalki pou C28H38N3O2, 448.2964)

DPPH Radical Scavenging Efè

Yo te ajoute yon solisyon MeOH (160 ml) nan diferan konsantrasyon echantiyon (1.0 mg/ml 0.0001 mg/ml) nan 40 ml DPPH (1,1- difenil{{8). }}picrylhydrazil; Sigma) MeOH soln (1.5 10 4 M). Apre melanje dousman epi kite pou 30 minit nan tanperati chanm, yo te mezire dansite optik la nan 520 nm lè l sèvi avèk yon espektrofotomèt. Aktivite antioksidan chak echantiyon yo te eksprime an tèm de IC50 (mg/ml oswa mM oblije anpeche fòmasyon radikal DPPH pa 50 pousan) ak kalkile nan koub anpèchman log-dòz la.

neuroprotective of cistanche deserticola

neuroprotective nan cistanche deserticola

Kilti Selil ak Tretman Dwòg

Selil neuroblastoma SH-SY5Y imen yo te kiltive nan yon mwayen DMEM epi yo te kenbe nan 37 degre nan yon atmosfè imidite ak 5.0 pousan CO2. Sispansyon selil sa yo (180 ml) nan yon dansite 5*104 ml selil-1 yo te plake nan 96- plak mikrotiter byen epi yo te enkube pou 24 èdtan nan pi wo a kondisyon. Chrysogenamide Yon solisyon (2.0 ml nan DMSO) nan diferan konsantrasyon te ajoute nan chak pi eksepte gwoup kontwòl ak modèl yo ak plis enkubasyon pou 1 èdtan nan menm kondisyon yo. H2O2 (Sigma Chemical Co., MO, USA) te ajoute pou pwovoke apoptoz nan selil SH-SY5Y nan yon konsantrasyon final 200 mM pou 24 èdtan. Yo te detèmine viabilite selil yo lè l sèvi avèk yon tès MTT. MTT ki fonn nan saline tanpon fosfat te ajoute nan fen enkubasyon nan yon konsantrasyon final nan 5.0 mg / ml (PBS), ak Lè sa a, enkubasyon nan 37 degre pou 4 èdtan. Jete supernatant la, yo te fonn pwodwi formazan rezilta a.

Rezilta ak Diskisyon

1 te jwenn kòm solid jòn pal. Fòmil molekilè a te detèmine kòm C28H37N3O2 pa HRESI-MS (obsève [MH] nan m/z 448.2951, ki rele [MH] C28H38N3O2, 448.2964). Spectre IR a te sigjere prezans NH (3433 ak 3200 cm 1 ) ak gwoup carbonyl (yo) (1677 cm-1 ). Spectre 1 H-NMR (Tablo 1) ki anrejistre nan DMSO-d6 te revele twa gwoup methyl (d H 0.62, 0.87, 0.98), ak de siyal proton echanjable (d H 10.36 ak 8.29). Anplis, twa orthos makonnen siyal aromat (d H 6.90 dd, J 7.3, 7.3 Hz, 6.94 d, J 7.3 Hz, ak 7.18 J 7.3 Hz) endike yon bag benzèn 1,2,{3-trisubstituted. Pwoton methylene yo (d H 3.23) makonnen ak yon pwoton olefinik (d H 5.27), ansanm ak de methyls vinil (d H 1.67 ak 1.70), endike prezans nan yon 3-methyl-2- gwoup butenyl. nan 1. Koneksyon yon sèl-kosyon pwoton sa yo ak yon lòt 14 metin ak oswa pwoton methylene te etabli pa yon eksperyans HMQC. Spectre 13C-NMR ak DEPT (Tablo 1), ki te divilge 28 siyal yo, te konfime tou prezans de fragman sa yo [trisubstituted benzèn bag (dC 123.6 CH, 120.8 CH, 127.7 CH, 122.1 QC, ak 140.4 QC) ak {a}. {79}}metil-2-butenil (dC 28 CH2, 121.9 CH, 132.3 QC, 25.5 CH3, ak 17.7 CH3)]; nplis de sa, de carbonyls (dC 183.1 ak 172.3), kat sp3 katènè kabòn (dC 46.5, 58.7, 60.4, ak 62.3), de sp3 methines (dC 46.1 ak 58.7), ak sis sp3 methylene (dC 34.3, 34.3, 34.3, 58.7). 35.2, 39.9 ak 64.9) yo te obsève tou. Depi 6 soti 12 ensaturasyon yo te konte pou, yo te dedwi 1 ki genyen sis bag. Plis evalyasyon done espèk sa yo, ansanm ak rezilta 1 H-1 H COSY ak HMBC, te revele ke 1 gen rapò ak gwoup metabolit chanpiyon marcfortine [7]. Entèpretasyon korelasyon HMBC (figi 2) te endike prezans estrikti pasyèl A (korelasyon HMBC 1-NH ak C-8 ak C-9; H-6 pou C{{ 136}}; H-5 pou C{-7 ak C-9; H-26 pou C{-28 ak C-8 ak H{{143 }} pou C-29 ak C-30) ak B (HMBC korelasyon H-10 pou C{-3, C-22, C-21, C-11, C-12; H-20 pou C-13, C-18, C-22, C-11 ak { {157}}NH rive nan C-13, C{-10), ak C, yon bag G ki gen sis manm [8] ak yon kabòn methylate nan C-17 (HMBC korelasyon H{{ 163}} pou C-17, C{-16). Koneksyon substrikti A a B jiska C-3 te sipòte pa korelasyon kle HMBC soti nan H-4 ak 1-NH rive C-3; H-10 pou C{-2 ak C-9. Koneksyon ant estrikti B ak C ak yon atòm nitwojèn te dedwi pa kle korelasyon HMBC yo soti nan H-12 C-17 ak C{-13 epi konpare chanjman chimik korespondan yo nan C{{176. }} ak C-17 (dC 64.9 ak 58.7). Analiz ki pi wo a te endike ke 1 te gen yon estrikti ki sanble ak marcfortine A eksepte pou diferans ki genyen nan chèn bò kote nan bag benzèn ak methyl nan C-17 nan bag G a sis manm. Se konsa, estrikti brit nan 1 te asiyen jan yo montre nan Fig. 1

Stereochimi relatif nan 1 te elisid sou baz done NOESY (figi 3). Etid anvan yo te revele ke konpoze ki kalite alkaloid 2-oxindol yo te adopte yon konfòmasyon kote bag santral senk-manb lan orthogonal ak plan subunite oxindole [9].

image

Korelasyon NOESY ant H{{0}} ak H-10a, H-25, ak ant 19-NH ak H{-10a te endike ke yo te tou de. sou fas bag siklopentanòn ki oryante yo nan direksyon H-4, fikse stereochimi relatif la nan C-3 jan yo montre. Entèaksyon NOESY ant H-21, H-12a, H-10b, H{-23, ak H{-24 te plase substituants korespondan yo ansanm sou fas devan an. bag cyclopentanon la. Estereochimi relatif yo pwopoze pou 1 an akò ak karakteristik ki enpòtan nan estereochimi relatif marcfortine A [7]. Efè koton nan 200-250 nm rive nan yon tranzisyon np* nan lyezon amid diketopiperazine, ki se dyagnostik pou nwayo bicyclo-[2.2.2] diazaoctane diketopiperazine [10, 11]. Spectre CD a nan 1 (Fig. 4) Koehle ak rejyon ki enpòtan nan sa yo ki nan -brevianamide A [11]. Se konsa, stereochimi absoli nan 1 yo ta dwe 3S, 11S, 13S, 17S, 21R epi yo te bay non an nan chrysogenamide A. Evalyasyon preliminè nan efè a pwoteksyon nan chrysogenamide A sou nerosit yo te evalye lè l sèvi avèk oksidatif estrès-pwovoke lanmò selil nan SH-SY5Y. selil pa yon tès MTT. Aktivite scavenging radikal gratis nan chrysogenamide A te premye egzamine lè l sèvi avèk DPPH kòm yon donatè radikal gratis. Kontrèman ak vitamin C (IC50: 29.0 mM), chrysogenamide A pa t montre okenn kapasite (IC50 pi gran pase oswa egal a 100 mM) pou elimine radikal gratis DPPH nan yon konsantrasyon jiska 100 mM. Pandan se tan, nou teste si chrysogenamide A pwoteje selil kont lanmò selil oksidatif estrès pwovoke nan neuroblastom imen SH-SY5Y.

selil yo. Estrès oksidatif pa oksijene idwojèn te lakòz yon diminisyon nan viabilite selil la pa 43 pousan konpare ak gwoup kontwòl la. Chrysogenamide A te anpeche lanmò selil ki pwovoke pa oksijene idwojèn nan amelyore viabilite selil yo a 59.6 pousan nan yon konsantrasyon 1*10-4 mM. Done sa yo sigjere ke krizojèn amid A te montre yon efè pwoteksyon nerosit kont lanmò selil oksidatif estrès, pa atravè aktivite antioksidan li yo. Alkaloid endol ki genyen yon sistèm bag dyazaoktane ki pa nòmal bicyclo [2.2.2] yo te izole nan diferan jenera fongis tankou Aspergillus [12, 9, 13], Penicillium [14 16], ak Malbranchea [17]. 1 se te yon nouvo manm nan gwoup sa a nan konpoze, li posede yon skelèt espere yo dwe yon entèmedyè nan byosentèz la nan administratè citrin A ak B yo te rapòte kòm yon klas roman pentacyclic spiroin dolinone alkaloid nan 2005 [18]. Soti nan pwen de vi estriktirèl la, li enpòtan pou fè remake ke 1 se yon estrikti inik ak metilasyon nan pozisyon C-17 ak yon 2- moyet oksindol ki posede yon inite izoprene nan C-7. Gen kèk nan alkaloid endol sa yo izole jiska dat montre yon aktivite antiparazit ki pisan [19], anpèchman nan selil timè imen [13], ak sitotoksisite [10]. Pou pi bon nan konesans nou an, li se premye rapò nan neropwoteksyon pa sa a ki kalite alkaloid.

RekonesansTravay sa a te finansyèman sipòte pa Chinwa Nasyonal Syans Natirèl Fon an (No 30472136).

Prevent Alzheimer's disease

neuroprotective nan cistanche deserticola: maladi anti-alzayme a

Cistanche deserticola gen anpil efè, klike isit la pou konnen plis

Referans

  1. Li LL, Wang XW, Wang XF. Antilipid peroksidasyon ak aksyon antiradyasyon nan glikozid nanherba Cistanches. Lachin J Chin Mater Med 22: 364–367 (1997)

  2. Xie JH, Wu CF. Efè ekstrè etanolik nanCistanche deserticolasou sa ki nan nerotransmeteur monoamine nan sèvo rat. Chin Trad Herb Drugs 24: 417–419 (1993)

  3. Dai JR, Carte BK, Sidebottom PJ, Yew ALS, Ng SB, Huang Y, Butler MS. Circumdatin G, yon nouvo alkaloid ki soti nan chanpiyon Aspergillus ochraceus. J Nat Prod 64: 125–126 84 Fig. 2 Kle HMBC ak 1 H-1 H COZY korelasyon nan 1. Fig. 3 NOESYs nan 1. Fig. 4 CD spectre nan 1. (2001)

  4. Kettering M, Sterner O, Anke T. Antibyotik nan kominikasyon chimik fongis. Zeitschrift fuer Naturforschung, C: Journal of Biosciences 59: 816–823 (2004)

  5. Trifonov LS, Bieri JH, Prewo R, Dreiding AS, Hoesch L, Rast DM. Izolasyon ak estrikti estrikti twa metabolit ki soti nan Verticillium intertextum: sorbisilin, dihydrosorbicilin ak bisvertinoquinol. Tetraèd 39: 4243–4256 (1983)

  6. Zhang GL, Xing QY, Zhang MZ. Glycolipid soti nan Mirabilis Himalaya. Phytochemistry 45: 1213–1215 (1997)

  7. Polonsky J, Merrien MA, Prange T, Pascard C, Moreau S. Izolasyon ak estrikti (analiz radyografi) nan marcfortine A, yon nouvo alkaloid soti nan Penicillium roqueforti. JCS Chem Comm 13: 601–602 (1980)

  8. Lee BH, Kornis GI, Cialdella JI, Clothier MF, Marshall VP, Martin DG, McNally PL, Mizsak SA, Whaley HA, Wiley VH. Idwoksilasyon mikrobyolojik nan sis atòm kabòn endividyèl marcfortine A. J Nat Prod 60: 1139–1142 (1997)

  9. Whyte AC, Gloer JB, Wicklow DT, Dowd PF. Sclerotiamide: Yon nouvo manm nan klas paraherquamide ak aktivite antiinsectan ki pisan ki soti nan sclerotia Aspergillus sclerotiorum. J Nat Prod 59: 1093–1095 (1996)

  10. Kato H, Yoshida T, Tokue T, Nojiri Y, Hirota H, Ohta T, Williams RM, Tsukamoto S. Notoamides AD: Prenylated alkaloid endol izole nan yon chanpiyon ki sòti nan maren, Aspergillus sp. Angew Chem Int Ed 46: 2254–2256 (2007)

  11. Williams RM, Kwast E, Coffman H, Glinka T. Remakab, enantio-divergent byogenesis brevianamide A ak B. J Am Chem Soc 111: 3064-3065 (1989)

  12. Banks RM, Blanchflflower SE, Everett JR, Manger BR, Reading C. Nouvo metabolit anthelmintic ki soti nan yon espès Aspergillus: aspergillimides yo. J Antibiot 50: 840–846 (1997)

  13. Qian-Cutrone J, Haung S, Shu YZ, Vyas D, Fairchild C, Menendez A, Krampitz K, Dalterio R, Klohr SE, Gao Q. J Am Chem Soc 124: 14556–14557 (2002)

  14. Wilson BJ, Yang DTC, Harris TM. Pwodiksyon, izolasyon, ak etid toksisite preliminè nan brevianamide A ki soti nan kilti Penicillium Viridicatum. Appl Microbiol 26: 633–635 (1973)

  15. Birch AJ, Russell RA. Etid ki gen rapò ak byosentèz XLIV. Elisid estriktirèl nan brevianamides B, C, D ak F. Tetrahedron 28: 2999-3008 (1972)

  16. Liesch JM, Wichmann CF. Nouvo ajan antinematodal ak antiparazit soti nan Penicillium Charles. II. Detèminasyon estrikti paraherquamides B, C, D, E, F, ak G. J Antibiot 43: 1380–1386 (1990) 17. Martinez-Luis S, Rodriguez R, Acevedo L, Gonzalez MC, Lira-Rocha A, Mata R Malbrancheamide, yon nouvo inibitè kalmodulin ki soti nan chanpiyon Malbranchea aurantiaca. Tetrahedron 62: 1817–1822 (2006)

  17. Mishima T, Tsuda M, Kasa Y, Ishiyama H, Fukushi E, Kawabata J, Watanabe M, Akao K, Kobayashi J. Absoli stereochemistry nan citrinadins A ak B soti nan yon chanpiyon maren ki sòti. J Org Chem 70: 9430–9435 (2005)

  18. Lopez-Greta MP, Gonzalez MC, Ciavatta L, Ayala I, Moya P, Primo J. Aktivite ensektisid nan paraherquamides, paraherquamides, ki gen ladan paraherquamide H ak paraherquamide I, De nouvo alkaloid izole nan Penicillium cluniae. J Agric Food Chem 54: 2921–2925 (2006)

neuroprotective of cistanche deserticola: anti-Alzheimer's disease

neuroprotective nan cistanche deserticola: maladi anti-alzayme a ak maladi Parkinson la


Non
Ou ka renmen tou