Cistanche Tubulosa pwovoke oksijèn reyaktif espès-medyatè apoptoz nan selil prensipal ak metastaz kansè nan kolon imen

Afnan Saleh Al-Menhali, Safia Ali Jameela, Aishah A. Latiff, Mohamed A. Elrayess, Mohammed Alsayrafi, Morana Jaganjac

Laboratwa Anti Dopaj Katar, Toksikoloji ak Multipurpose, Doha, Katar.

Laboratwa Anti Dopaj Katar, Rechèch Syans Lavi, Doha, Katar.

Kontakte:joanna.jia@wecistanche.com

REZIME

Kansè nan kolon se twazyèm kansè ki pi komen atravè lemond. Terapi konvansyonèl yo te montre efikasite modere ak efè negatif grav, kidonk gen yon bezwen ijan pou altènativ ki pi an sekirite. Nan etid sa a,Cistanchetubulosa, yon non lokal Thanoon, te konsidere kòm yon potansyèl estrateji phytotherapeutic paske li te ye gwo potansyèl terapetik nan medikaman tradisyonèl ak abondans lajè nan rejyon Mwayen Oryan an. Konpoze byoaktif yo te ekstrè nan an poudCistanchetubulosaepi teste pou pwopriyete antikansè yo kont kat kolonkansèliy selilè ki gen ladan de ki sòti nan timè prensipal la (CaCo2 ak HCT116) ak de ki sòti nan sit la metastatik (LoVo ak SW620). Efè a nanCistanchetubulosasou endiksyon apoptoz ak omeyostaz redox selilè te envestige tou.Cistanchetubulosate montre yon konsantrasyon ak tan-depandan anpèchman nan pwopagasyon nan tout liy selil kansè yo teste pa plis pase 60 pousan sou 72 èdtan nan tretman ak 1 mg / mL nan ekstrè brit. Anpèchman pwopagasyon te make pa endiksyon apoptoz, pwodiksyon espès oksijèn reyaktif entraselilè, ak supèroksid mitokondriyo. Done sa yo sijere ke Cistanche tubulosa se yon kandida pwomèt pou terapi aditif anti-kolon kansè. Sa a se premye etid ki montre bioaktivite antikansè Cistanche tubulosa kont selil kansè nan kolon.

Engredyan aktif nanCistanchegen yonanti-kansèefè

Abreviyasyon:

7-AAD, 7-Amino-Actinomycin D;

CTE,Cistancheekstrè tubuloza;

EMEM, Mwayen Esansyèl Minimòm Eagle;

FBS, serom fetis bovin; DCF, 2,7-diklorofluorescein;

DCFH-DA, 2,7-dichlorodihydrofluorescein diacetate;

DMEM, Dulbecco's Modified Eagle's Medium;

DMSO, dimethylsulfoxide; MTT, 3-[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium;

PE, Phycoerythrin; RFU, inite fluoresans relatif;

ROS, espès oksijèn reyaktif

ENTWODIKSYON

Kansè kolorektal se youn nan kansè ki pi komen atravè lemond (Brenner et al., 2014), ak ensidans li yo toujou ap ogmante ak yon estime 2.4 milyon ka nan 2035, akòz rejim modèn ak fòm, ansanm ak aktivite fizik redwi. Efò aktyèl yo pa ase pou konbat epidemi aktyèl kansè kolorektal la e se poutèt sa yo bezwen nouvo apwòch pou prevansyon ak tretman efikas ki gen ladan chanjman nan fòm nan konbinezon ak entèvansyon altènatif ki pi an sekirite tankou Phytotherapeutics (Weidner et al., 2015). Fitoterapi, itilizasyon plant medsin pou trete maladi, se yon pati inevitab nan istwa imen ansyen. Plant medsin yo te itilize depi lontan kòm sous tretman altènatif pou kansè, ki reprezante plis pase swasant pousan nan ajan antikansè yo itilize nan medikaman konvansyonèl (Balunas and Kinghorn, 2005; Saibu et al., 2015). Gen kèk nan egzanp ki pi koni yo enkli ekstrè nan Catharanthus roseus G. Don. (Apocynaceae), Taxus baccata L. (Taxaceae) ak Camptotheca acuminate Decne (Nyssaceae) (Cragg and Newman, 2005; da Rocha et al., 2001). Plizyè ekstrè èrbal ak phytochemicals yo te montre fè egzèsis efè antitumoral nan kansè kolorektal atribiye a endiksyon an nan pwodiksyon espès oksijèn reyaktif (ROS) ak asosye apoptoz nan selil kansè tankou ka a nan ekstrè soti nan Melissa officinalis (Weidner et al., 2015).

Cistanchedeserticola gen efè pou anpecheselilapoptoz

Pami kandida fitoterapi,Cistanchetubulosa, yon plant dezè parazit Orobanchaceae (Jiang et al., 2009) ki lajman distribiye nan rejyon arid ak semi-arid nan Lafrik di, Azi, ak rejyon Mediterane a, yo te montre yo gen pwopriyete valab medsin.Cistanchetubulosa te itilize anpil nan medikaman tradisyonèl ak sijere yo gen efè gerizon nan deficiency ren, leukorrhea morbid, metrorrhagia, sterilite fi, ak konstipasyon senil (Jiang et al., 2009). Anplis itilizasyon medsin tradisyonèl li yo, pwopriyete medsin enpòtan nan Cistanche Tubulosa yo te etidye entansif pandan dènye dekad la ki gen ladan vasorelaxant (Yoshikawa et al., 2006), epatoprotective (Morikawa et al, 2010), efè anti-ipèglisemi ak ipolipidemi (Xiong et al., 2013). Cistanche Tubulosawas tou sijere kòm yon pisan amelyore sistèm iminitè a, pwomotè nan fòmasyon zo, ak yon ajan anti-aje ak anti-fatig (Xu et al., 2014). Anplis de sa, yo te montre ekstrè Cistanche tubulosa bloke depo amiloid nan modèl maladi alzayme a (Wu et al., 2015). Malgre plizyè itilizasyon ki ka geri li yo, efè Cistanche Tubulosa kòm yon potansyèl ajan antikansè poko te etidye.

Nan travay la prezan, nou te envestige efè a antikansè nanCistancheTubulosa sou de prensipal ak de liy selil kansè nan kolon metastatik ak mekanis potansyèl ki kache efè sa a.

MATERYÈL AK METÒD

Koleksyon ak preparasyon ekstrè plant

Echantiyon yo nanCistanchetubulosa yo te kolekte nan zòn dezè yo nan Katar pandan 2014 ak otantisite nan plant la te konfime pa yon èpètològ. Yo achive echantiyon bon yo nan Depatman Toksikoloji ak Multipurpose nan ADLQ. Echantiyon plant yo cheche solèy yo te piye ak Retsch Knife Mill Grindomix GM300 nan yon poud amann. Ven gram poud yo te ekstrè ak 200 mL dlo ultrapure lannwit lan nan 37 degre sou yon shaker rotary nan 200 pm. Brit laCistancheEkstrè tubulosa (CTE) yo te santrifuje pou 30 minit nan 8000 rpm nan granules konpoze ki pa idrosolubl, sipènatant kolekte, ak friz-seche lè l sèvi avèk Labconco Freezone 6 plis Freeze dryer. Ekstrè sèk la te rekonstitye nan Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM, SIGMA, Almay) nan yon konsantrasyon 20 mg/mL ak esteril filtre atravè yon filtè manbràn 0.2-mikwon.

Liy selilè ak antretyen selil yo

Liy selil kansè nan kolon imen CaCo2, SW620, ak LoVo yo te jwenn nan Cell Lines Service (CLS, Eppelheim, Almay) pandan y ap liy selil HCT 116 te yon kado kalite nan Syans Byolojik ak Anviwònman, Depatman Katar University. CaCo2 ak HCT11 te sòti nan sit prensipal la nan kansòm kolon pandan y ap SW620 ak LoVo te sòti nan sit la metastatik. Selil SW620, HCT116, ak LoVo yo te kiltive epi konsève nan DME Medium pandan y ap selil CaCo2 yo te konsève nan Mwayen Esansyèl Minimòm Eagle (EMEM, SIGMA, Almay). Selil yo te grandi kòm monokouch kiltive nan 37 degre nan mwayen respektif complétée ak 10 pousan fetal serom bovine (FBS, SIGMA, Almay) ak 1 pousan penisilin / Streptomycin (SIGMA, Almay) nan yon atmosfè imidite ki gen 5 pousan gaz kabonik.

Tès viabilite selilè

Yo te itilize {{0}}[4,5-dimethylthiazol-2-yl]-2,5-diphenyltetrazolium (MTT) pou evalye aktivite sitotoksik CTE menm jan sa dekri pi bonè (Jaganjac et al., 2010). Dansite simen CaCo2, HCT116, SW620, ak selil LoVo ki te kiltive nan 96-plak byen yo te 104 selil pou chak pi. Selil yo te plake nan mwayen respektif complétée ak 10 pousan FBS 24 èdtan anvan tretman an. Apre 24 èdtan, yo te retire mwayen an epi yo te trete selil yo ak 0, 0.25, 0.5, 1, ak 2 mg/mL CTE pou 24, 48, ak 72 èdtan nan 37 degre nan yon atmosfè imidite ki gen 5 pousan CO2. Apre tretman CTE, yo te retire mwayen an epi yo te ajoute 40 µL solisyon MTT (0.5 mg/mL) nan chak pi.

Apre 3 èdtan nan enkubasyon, yo te retire solisyon MTT, pwodwi formazan fonn nan dimethylsulfoxide (DMSO, SIGMA, Almay), epi yo te mezire absorpsyon nan 590 nm ak yon lektè microplate (Infinite 200 PRO NanoQuant, Tecan Trading AG, Swis).

Esè apoptoz

Apoptoz nan selil CaCo2, HCT116, SW620, ak LoVo yo te detekte lè l sèvi avèk PE Annexin V Apoptosis Detection Kit I ak 7-Amino-Actinomycin D ({7-AAD) kòm yon lank vital (Becton). Dickinson International, Bèljik) dapre enstriksyon manifakti a. Yon ti tan, selil yo te simen nan 24-plak byen nan yon dansite 5 × 1{0 4 selil/byen nan yon medya respektif ki te konplete ak 10 pousan FBS pou 24 èdtan anvan adisyon CTE (0, 0.5, oswa 1 mg/mL). Apre enkubasyon 24 CTE, selil yo te rekòlte, lave de fwa ak saline frèt ki gen tanpon fosfat, epi tache ak Phycoerythrin (PE) Annexin V ak 7-AAD pou 15 minit nan tanperati chanm nan fè nwa a. Selil tache yo te analize nan 1 èdtan pa sikometri koule lè l sèvi avèk FACS. Sitomèt koule Aria III ak lojisyèl FACSDiva (Becton Dickinson) nan yon pousantaj koule ki ba ak yon minimòm de 104 selil. Tretman selil yo pou 4 èdtan ak 6 µM camptothecin (SIGMA) te itilize kòm yon kontwòl pozitif pou tès la.

Pwodiksyon entraselilè ROS

Pwodiksyon entraselilè ROS yo te egzamine lè l sèvi avèk 2,7-dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCFH-DA, SIGMA, Almay). DCFH-DA se yon pwofonde ki pa fliyoresan, ki soksid ak ROS intraselilè nan konpoze fliyoresan 2, 7-dichlorofluorescein (DCF) (Poljak-Blazi et al., 2011). Yo te fè tès DCFH DA a menm jan nou te dekri anvan an (Cindric et al, 2013; Poljak-Blazi et al., 2011). Yon ti tan, dansite simen nan selil CaCo2, HCT116, SW620 ak LoVo ki te kiltive nan 96-plak nwa byen yo te 104 selil pou chak pi. Selil yo te plake nan mwayen respektif complétée ak 10 pousan FBS pou 24 èdtan. Anvan selil tretman yo te enkube ak 10 µM DCFH-DA nan 37 degre pou 30 min nan 5 pousan CO2 / 95 pousan lè. Lè sa a, selil yo te lave ak trete ak 0, 0.5, ak 1 mg / mL nan CTE nan medyòm nan san fenol wouj. Fòmasyon ROS intraselilè a te kontwole kontinyèlman pandan 25 èdtan nan 37 degre ak 5 pousan CO2 lè l sèvi avèk yon lektè microplate ak modil fluoresans siperyè ak kontwòl gaz (Infinite 200 PRO, Tecan Trading AG, Swis). Entansite fluoresans la te mezire ak yon longèdonn eksitasyon 500 nm ak deteksyon emisyon nan 529 nm. Inite abitrè yo, inite fluoresans relatif (RFU), yo te baze dirèkteman sou entansite fliyoresans.

Mitokondriyo jenerasyon supèroksid

Kapasite CTE pou pwovoke jenerasyon supèroksid pa mitokondri yo te estime lè l sèvi avèk selil pèmeyab, mitokondri yo vize MitoSOX Red sond (Life Technologies) ak Hoechst 33342 pou tach nikleyè (Life Technologies). Selil CaCo2, HCT116, SW620, ak LoVo yo te simen nan 96-plak byen nan yon dansite 104 selil pou chak pi nan yon mwayen respektif ki te konplete ak 10 pousan FBS pou 24 èdtan. Lè sa a, selil yo te chaje ak 4 µM MitoSOX ak 2 µM Hoechst 33342 pou 20 min, depase koloran lave, ak pwi trete ak 0, 0.5, ak 1 mg/mL CTE pou 24 èdtan nan 37 degre ak 5 pousan CO2. Entansite fliyoresans lan te mezire ak yon longèdonn eksitasyon 510 nm ak deteksyon emisyon nan 580 nm pou MitoSOX ak yon longèdonn eksitasyon 350 nm ak deteksyon emisyon nan 461 nm pou Hoechst 33342 lè l sèvi avèk yon lektè mikwoplak ki gen gwo fluoresans nan PROfinite 2000. AG, Swis).

Analiz estatistik

Estatistik deskriptif yo te montre kòm mwayen plis /- SD. Yo te evalye siyifikasyon diferans ki genyen ant gwoup yo lè l sèvi avèk Tès Student ak tès Chi-kare. Lè yo te konpare plis pase de gwoup, nou te itilize ANOVA yon sèl-side ak tès post hoc apwopriye. Yo te itilize SPSS 11.01 pou Microsoft Windows. Diferans ak P mwens pase 0.05 yo te konsidere kòm estatistik enpòtan.

Cistanchegenanti-kansèpwopriyete ak amelyoreiminite

REZILTA

Efè CTE sou pwopagasyon liy selil kansè nan kolon imen yo montre nan Figi 1. Tout konsantrasyon CTE yo teste yo te montre yon gwo efè inhibition sou liy selil CaCo2 nan yon konsantrasyon ak fason ki depann de tan (Figi 1A). Swasanndisèdtan tretman CTE anpeche kwasans selil CaCo2 yo pa plis pase 60 pousan konpare ak kontwòl (p <{15}}.05 pou="" tout="" konsantrasyon).="" enpak="" siyifikatif="" nan="" tretman="" cte="" sou="" kwasans="" selil="" hct116="" te="" detekte="" tou="" nan="" pwen="" tout="" tan="" nan="" de="" konsantrasyon="" ki="" pi="" wo="" yo="" (1="" mg/ml="" ak="" 2="" mg/ml),="" rive="" nan="" yon="" rediksyon="" ki="" pi="" gran="" pase="" 70="" pousan="" nan="" yon="" lèt.="" konsantrasyon="" (figi="" 1b,="" p=""><0.05). malgre="" ke="" de="" pi="" ba="" konsantrasyon="" cte="" yo="" (0.25="" ak="" 0.5="" mg/ml)="" siyifikativman="" redwi="" kwasans="" hct116="" nan="" selil="" apre="" 24="" èdtan=""><0.05), they="" had="" no="" significant="" effect="" following="" 72="" hours="" treatment="" compared="" to="" control="" (p="">{{0}}.{{10}}5). Tan ak konsantrasyon depandan anpèchman nan pwopagasyon ak CTE te konfime plis nan selil LoVo pa plis pase 60 pousan nan konsantrasyon ki pi wo a (p <0.05) (figi="" 1c)="" ,="" ak="" tout="" kat="" konsantrasyon="" cte="" yo="" teste="" redwi="" kwasans="" selil="" sw620="" apre="" 48="" èdtan="" (figi="" 1d,="" p=""><0.05 pou="" tout).="" apre="" 72="" èdtan="" nan="" tretman="" yo="" te="" obsève="" menm="" efè="" sèlman="" pou="" de="" konsantrasyon="" ki="" pi="" wo="" yo="" (p=""><0.05) pandan="" ke="" konsantrasyon="" 0.25="" ak="" 0.5="" mg/ml="" pa="" te="" montre="" okenn="" efè="" enpòtan="" konpare="" ak="" kontwòl="" (p=""> 0.05). Enpak tretman CTE 0.5 ak 1 mg/mL sou endiksyon apoptoz te teste plis nan tout kat liy selil yo (Figi 2). Ogmantasyon kantite selil nan apoptoz bonè te detekte nan HCT116 ak LoVo apre tretman 24 èdtan ak 0.5 mg/mL (p<0.05, figure="" 2b="" and="" 2c)="" and="" in="" all="" cell="" lines="" at="" 1="" mg/ml=""><0.05). a="" significant="" increase="" in="" necrotic="" or="" late="" apoptotic="" cell="" number="" was="" further="" observed="" in="" caco2="" and="" sw620="" cell="" lines=""><0.05, figure="" 2a="" and="" 2d).="" the="" ability="" of="" cte="" to="" induce="" intracellular="" ros="" production="" is="" demonstrated="" in="" figure="" 3.="" three="" hours="" following="" cte="" treatment="" there="" was="" a="" strong="" increase="" in="" intracellular="" ros="" production="" in="" all="" cell="" lines=""><0.05). the="" intracellular="" ros="" production="" increased="" progressively="" throughout="" the="" 25="" hours="" of="" treatment="" in="" a="" time="" and="" concentration-dependent="" manner.="" furthermore,="" staining="" of="" cells="" with="" mitochondria-targeted="" probe="" revealed="" a="" strong="" impact="" of="" cte="" on="" mitochondrial="" superoxide="" production="" in="" a="" concentration-dependent="" manner="" (figure="" 4).="" the="" highest="" increase="" in="" superoxide="" production="" by="" mitochondria="" was="" observed="" in="" hct116="" (69%,="" figure="" 4b)="" and="" lovo="" cells="" (82%,="" figure="" 4c)="" following="" 24="" hours="" of="" treatment="" with="" 1="" mg/ml="" of="">

DISKISYON

Malgre ke etid pi bonè yo te rapòte anpil pwopriyete medsin nanCistanchetubulosa, sa a se premye rapò sou efè anti-proliferatif li yo nan selil malfezan. Konpoze bioaktif Cistanchetubulosa ekstrè ak dlo, yon sòlvan trè polè, te montre gwo byoaktivite antikansè. Nou te deja konpare efikasite nanCistanchetubulosa solubilize nan dlo a kont lòt solvang tankou metanol ak acetate etil, men ekstrè dlo te montre aktivite antikansè ki pi pwomèt (done yo pa montre).

Nou te demontre kapasite CTE nan 1 mg/mL ak 2 mg/mL pou anpeche 60 pousan nan kwasans tou de liy selil kansè nan kolon prensipal ak metastatik, revele yon wòl potansyèlman enpòtan nan Cistanche tubulosa kòm yon tretman kansè nan kolon. Konpare ak selil nòmal, selil kansè yo jeneralman karakterize pa yon twoub nan omeyostazi redox ak yon estrateji komen nan terapi aktyèl anti-kansè se ogmante estrès oksidatif selilè (Yang et al, 2013). Malgre ke nivo fizyolojik ki ba nan ROS yo gen yon wòl enpòtan kòm molekil siyal, twòp pwodiksyon ROS ka kontribye nan enstabilite kansè ak maliyans (Liou and Storz, 2010). Paradoksal, move balans sa a nan omeyostazi redox selilè rann selil kansè yo pi vilnerab a lanmò selil ROS-induit (Jaganjac et al., 2008; Nogueira and Hay, 2013). Efè anti-proliferatif CTE rapòte nan etid sa a ka medyatè pa plizyè mekanis siplemantè ak entraselilè nan konpoze li te ye ak enkoni nan ekstrè a, vize plizyè chemen ki jwe wòl esansyèl nan apoptoz. Pou fè diferans ant diferan mòd lanmò selil, nou te envestige mekanis potansyèl ki responsab sitotoksisite obsève CTE-induit la.

Done nou yo endike ke CTE ogmante pwodiksyon entraselilè ROS ak konsekans lanmò selil ROS-induit. Eta Redox selil la jwe yon wòl enpòtan tou nan reglemante apoptoz ak chèn transpò elèktron mitokondriyo a se youn nan pi gwo sit jenerasyon selilè ROS (Trachootham et al., 2008). Anplis de sa, ROS intraselilè a ka lakòz apoptoz selilè atravè tou de mitokondri-depandan ak endepandan chemen (Sinha et al., 2013). Vreman vre, done nou yo tou endike ke CTE pwovoke ekstènasyon fosfatidylserin, yon efè komen nan apoptoz, nan tou de liy selil kansè prensipal ak metastatik, sijere ke mekanis nan lanmò CTE-induit se medyatè pa apoptoz olye ke nekwoz. Aktivasyon nan apoptoz nan selil kansè yo se yon estrateji korektif ak anpil dwòg antikansè ka egzèse efè apoptotik nan selil kansè yo.

Konpoze oswa ekstrè ak aktivite pro-apoptotik nan selil kansè yo Se poutèt sa potansyèlman itil nan rechèch dwòg antikansè (Wong, 2011). Pou detèmine si CTE pwovoke efè pro-apoptotik medyatè pa mekanis ROS mitokondri yo pwovoke, nou mezire pwodiksyon supèroksid lè l sèvi avèk sond fliyoresan mitokondri yo vize nan selil CTE trete. Done nou yo montre klèman ke CTE stimul pwodiksyon mitokondriyo supèroksid ki sijere ke aktivite antikansè Cistanche tubulosa se omwen an pati medyatè atravè mekanis ROS mitokondriyo-induit.

Cistanchegenanti-kansèepifwapwoteksyonefè

KONKLIZYON

An konklizyon, done nou yo sijere ke ekstrè dlo nan plant dezè Cistanche tubulosa ka reprezante yon kandida pwomèt pou yon apwòch antikansè an konbinezon ak lòt terapi konvansyonèl pou prevansyon ak tretman kansè nan kolon. Nou demontre tou ke toksisite nan ekstrè plant la kont selil kansè yo medyatè pa ogmante pwodiksyon entraselilè ROS ak, omwen an pati, pa apoptoz mitokondriyo-depandan. Plis etid yo ap kontinye izole ak karakterize elektè endividyèl yo biyolojik aktif ki responsab pou aktivite antikansè.

Gen plis rechèch ki nesesè pou evalye itilizasyon potansyèl ekstrè sa a kòm yon ajan chemopreventive efikas ak konprann mekanis aksyon sou selil kansè nan kolon nan nivo molekilè. Plis etid preklinik ak klinik yo bezwen tou konfime efè sante benefisye obsève Cistanche tubulosa pou prevansyon kansè.

REKONÈS

Sipò finansye ak parennaj

Etid sa a te sipòte pa Anti-Doping Lab Qatar.

Konfli enterè:

Otè yo pa deklare okenn konfli enterè.

REFERANS

Balunas MJ, Kinghorn, AD. Dekouvèt dwòg soti nan plant medsin. Lavi Sci. 2005;78:431-41.

Brenner H, Kloor M, Pox CP. Kansè kolorektal. Lancet 2014;383,1490-502.

Cindric M, Cipak A, Zapletal E, Jaganjac M, Milkovic L, Waeg G, Stolc S, Zarkovic N, Suzana Borovic S. Stobadine atténue andikap nan yon modèl baryè entesten ki te koze pa 4-hydroxynonenal. Toxicol in vitro. 2013;27:426-32.

Cragg GM, Newman DJ. Plant kòm yon sous ajan antikanse.J Ethnopharmacol. 2005;100:72-9.da

Rocha AB, Lopes RM, Schwartsmann G. Pwodwi natirèl nan terapi antikanse. CurrOpinPharmacol. 2001;1:364-9.

Jaganjac M, Matijevic T, Cindric M, Cipak A, Mrakovcic L, Gubisch W, Zarkovic N. Endiksyon CMV-1 pwomotè pa 4-idwoksi-2-nominal nan selil ren anbriyon imen yo. Acta Biochim Pol. 2010;57:179-83.

Jaganjac M, Poljak-Blazi M, Zarkovic K, Schaur RJ, Zarkovic N. Patisipasyon granulosit nan regresyon espontane nan Walker 256 karsinom. Kansè Lett. 2008;260:180-6.

Jiang Y, Tu PF. Analiz de konstitiyan chimik nan espès Cistanche. J Chromatogr A. 2009;1216:1970-9.Liou GY, Storz P. Espès oksijèn reyaktif nan kansè. Gratis Radic Res. 2010;44:479-96.

Morikawa T, Pan Y, Ninomiya K, Imura K, Matsuda H, Yoshikawa M, Yuan D, Muraoka O. Acylated phenylethanoid oligoglycosides ak aktivite epatoprotective soti nan plant la dezè Cistanche tubulosa. Bioorg Med Chem. 2010;18:1882-90.

Nogueira V, Hay N. Molekilè chemen: omeyostaz espès oksijèn reyaktif nan selil kansè yo ak enplikasyon pou terapi kansè. Clin Cancer Res. 2013;19:4309-14.

Poljak-Blazi M, Jaganjac M, Sabol I, Mihaljevic B, Matovina M, Grace M. Efè iyon ferrik sou fòmasyon espès oksijèn reyaktif, kwasans liy selil kansè nan matris ak ekspresyon onkogene E6/E7. Toxicol in vitro. 2011;25:160-6.

Saibu GM, Katerere DR, Rees DJG, Meyer M. In vitro cytotoxik ak pro-apoptotik efè nan ekstrè dlo nan fèy Tulbaghia violacea ak anpoul. J Etnopharmacol. 2015;164:203-9.

Sinha K, Das J, Pal PB, Sil PC. Estrès oksidatif: mitokondri-depandan ak mitokondri-endepandan chemen yo nan apoptoz. Arch Toxicol.2013; 87:1157-80.

Trachootham D, Lu W, Ogasawara MA, Nilsa RD, Huang P. Redox règleman sou siviv selil. Antioksid Redox siyal. 2008;10:1343-74.

Weidner C, Rousseau M, Plauth A, Wowro SJ, Fischer C, Abdel-Aziz H, Sauer S. Melissa officinalis ekstrè pwovoke apoptoz ak anpeche pwopagasyon nan selil kansè nan kolon atravè fòmasyon espès oksijèn reyaktif. Fitomedsin. 2015;22:262-70.

Wong RS. Apoptoz nan kansè: soti nan patojèn nan tretman. J Exp Clin Cancer Res. 2011;30:87.

Wu SH, Chou FP, Chyau CC, Chen JH, Tu SF, Lin HH. Efè anti-kansè nan ekstrè Wasabia japonica nan selil kansè nan fwa Hep3B atravè akimilasyon ROS, domaj ADN, ak p73-medyatè apoptoz. J Funct Manje. 2015;14:445-55.

Xiong WT, Gu L, Wang C, Sun HX, Liu X. Efè antihyperglycemic ak ipolipidemi Cistanche tubulosa nan sourit DB / DB dyabetik tip 2. J Etnopharmacol. 2013;150:935-45

Xu R, Sun S, Zhu W, Xu C, Liu Y, Shen L, Shi Y, Chen J. Multi-etap enfrawouj makro-anprent karakteristik nan ekstrè etanòl ki soti nan diferan espès Cistanche nan Lachin konbine avèk anprent HPLC. J Mol Struct. 2014;1069:236-244.

Yang Y, Karakhanova S, Werner J, Bazhin AV. Espès oksijèn reyaktif nan byoloji kansè ak terapi antikansè. Curr Med Chem. 2013;20:3677-92.

Yoshikawa M, Matsuda H, Morikawa T, Xie H, Nakamura S, Muraoka O. Phenylethanoid oligoglycosides ak acylated oligosugars ak aktivite vasorelaxant soti nan Cistanche tubulosa. Bioorg Med Chem. 2006;14:7468-75.