Ekspresyon Clr-f kontwole omeyostaz iminitè ren ak metabolik Ⅱ

Echafodaj ren ak blesi glomerulaire nan sourit Clr-f-defcient.

Premye egzamen an nanClr-f−/− seksyon ren yo revele plizyè chanjman nan cortical ren yo. Pou evalyeblesi istopatolojik, Seksyon ren ki tache PASsoti nan kat 12-semèn WT akClr-f-/- sourit yo te evalye nan yon mòd avèg (Fig.2A). Yo te obsève yon prezans varyab nan blesi tubulaires proximal ak distal nanClr-f−/− ren ki enkli, angrese selil epitelyal tubulaires, deplasman nikleyè, ak pèt fwontyè bwòs (Fig.2A; panno anwo yo). Nan ka ki ra, yo te jwenn necrosis tubulaires nan fòm akimilasyon debri nèkrotik luminal ak pèt epitelyal konplè nan kèk nan zòn egzamine yo. LaClr-f−/− ren tou ekspozepatoloji glomerulèr(Fig.2A; panno anba), ak zòn nan epesman fokal nan glomerular tufs, minimòm periglomerular fibroblast pwopagasyon ki asosye ak fibwoz entèrstisyal modere, ak blesi pi grav ak mesangiolysis, anevrism kapilè ki pwogrese nan pwononse dezòd nan glomerul ak yon prezans konstan nan nèkwotize debri selilè nan espas Bowman a. . Nòt patoloji glomerulè revele yon kantite siyifikatifblesi glomerulèrnan sourit Clr-f-defisi an konparezon ak littermates WT (Fig.2B). Mikwoskòp elèktron te revele gwo domaj podosit, efasman pwosesis pye podosit, ak epesman enpòtan nansousòl glomerulèrmanbràn (GBM) (Fig.2C,D).

Klike sou cistanche herba pou maladi ren

Pou evalye si depo imunoglobulin nan ren yo te prezan, ki karakteristik yo ki asosye ak patoloji yo obsève, nou tache seksyon cortical ren nan ren WT ak Clr-f-/- pou prezans nan IgA, IgM, ak IgG antikò pa IF (Fig. 2E). ). Clr-f-/- ren yo montre klè dominan IF tach nan depo glomerulaire IgA akonpaye pa pwononse depo IgM ak yon prezans pi piti men konsistan nan depo IgG. Menm jan an tou, nou te detekte modèl ki sanble nan depo tubulointerstitial IgA, IgM ak IgG nan ren Clr-f-/-. Konpleman pwoteyin C3 te tou lajman detekte nan ren Clr-f-/- men se pa nan ren WT (Fig. 2F).

Clr-f obligatwa pou bon fonksyon ren.

Pou evalye enpak Clr-f-/- pathologies sou fonksyon ren, nou analize san ak pipi konpozisyon nan 12-semenn gason Clr-f-/- ak WT littermates. Nou te jwenn yon ogmantasyon modès, men estatistik siyifikatif, nan rapò pipi-pwoteyin-a-kreyatinin (UP/CR) nan sourit Clr f -/- konpare ak sourit WT, ak ogmante kreyatinin serik, men menm nivo pwoteyin pipi konpare ak WT. sourit, osi byen ke ekskresyon fraksyon ki sanble nan sodyòm (FENa) (Fig. 2G). Bay ekspresyon tubulaires Clr-f, nou te evalye si Clr-f−/− tansyon sourit nan 12-semèn ak 24-semèn Clr-f−/− sourit yo te afekte. Clr-f-/-sourit montre yon diminisyon majinal men ki pa estatistik siyifikatif nan san presyon konpare ak WT littermates (Fig. 2H). Rezilta sa yo montre ke filtraj ren nòmal yo chanje nan absans Clr-f, men Clr-f pa montre okenn wòl enpòtan nan omeyostazi elektwolit ren oswa règleman san presyon.

Clr-f-/- transcriptome ren montre yon disregulation nan metabolis.

Pou envestige pwosesis transkripsyon ki kache ki responsab pou Clr-f−/−patofenotip ren, nou te fè RNA-sekans sou ren sourit 7-, 13-, ak 24-ki gen yon semèn WT ak Clr-f−/−. Diferans eksprime jèn (DEGs) nan Clr-f-/-sourit konpare ak sourit WT yo te envestige pa analiz anrichisman fonksyonèl ak analiz patotip transcriptional (Fig. 3A). Nou te trase rezo entèraksyon nan pwosesis byolojik anrichi nan analiz anrichisman seri jèn (GSEA) nan DEG yo idantifye nan chak laj (figi 3B). Analiz nou an te montre yon anrichisman jèn ki gen rapò ak sik selil yo ki te kontwole nan ren 7-sourit Clr-f−/− ki gen yon semèn. Nan 13 semèn, pwosesis metabolik, transpò, lanmò selil, ak repons a sibstans toksik yo te rich nan DEG ak ekspresyon ogmante nan ren Clr-f-/-, pandan y ap asanble sily ki pa mobil, transkripsyon ADN, ak pwosesis yo te rich nan DEG ak diminye ekspresyon. Ren nan sourit 24-ki gen yon semèn Clr-f-/- te montre tou yon anrichisman nan pwosesis metabolik yo, ak transpò nan mitan DEG yo ak ekspresyon ogmante, osi byen ke pwosesis ki kontwole.sikilasyon san, pandan y ap lanmò selil, iminite, ak Transforming kwasans faktè-beta (TGF) pwosesis règleman siyal yo te rich nan DEGs ak ekspresyon diminye.

Pou kaptire pwosesis ki asosye ak laj ki kache domaj nan ren Clr-f-/-, nou analize jèn ki fè pati kat modèl dinamik nan ekspresyon diferans: DEG ki ogmante ak laj, diminye ak laj, oswa transiently ogmante oswa diminye nan 13 semèn ki gen laj. Analiz anrichisman fonksyonèl nan pwosesis byolojik, fonksyon molekilè, ak chemen defini nan mitan gwoup sa yo te revele ke DEG ak ogmante ekspresyon soti nan 7 a 24 semèn nan laj nan ren Clr-f-/- yo te surreprezante nan chemen metabolik lipid, pandan y ap DEG ki gen rapò ak selil-. Adhesion substrate diminye nan ekspresyon soti nan 7 a 24 semèn ki gen laj (figi 3C). DEG ak yon ogmantasyon pasajè nan ekspresyon nan 13 semèn ki gen laj yo te sitou asosye ak respirasyon mitokondriyo, pandan y ap DEG ak yon diminisyon pasajè nan ekspresyon trase nan chemen sik selil yo. Nan kat kategori ekspresyon dinamik sa yo te genyen twa gwoup ki reprezante modèl ekspresyon diferans kote grandè chanjman nan ekspresyon ant 7 ak 13 semèn te swa menm jan, pi wo oswa pi ba pase degre chanjman ant 13 ak 24 semèn. , respektivman (figi 3C). Pwosesis byolojik rich ak fonksyon molekilè ki soti nan chak sous-gwoup jèn yo te lajman diferan atravè kat modèl ekspresyon dinamik prensipal yo te idantifye men yo te reflete sipèpoze oswa pwosesis selilè ki gen rapò nan chak gwoup. An jeneral, pwofil transkripsyon ren Clr-f-/- revele yon dysregulation dinamik ak evolye nan metabolis selilè, fonksyon, ak omeyostazi.

Clr-f−/− sourit akimile grès.

Ogmantasyon ki asosye ak laj yo idantifye nan DEG ki gen rapò ak metabolis lipid te mennen nou nan pwofonde done ekspresyon sourit WT ak Clr-f-/- pou jèn lipid li te ye. Pifò nan transkripsyon jèn sa yo te elve nan sourit Clr-f-/- (Fig. 4A) ak aliyen ak ogmantasyon nan depo adipoz nan vant ak perirenal nan sourit Clr-f-/- nan 24 semèn ki gen laj (Fig. 4B). Malgre ke sourit Clr-f-/- ak WT montre pwa kò ki sanble (figi 4C), pwa adipoz nan vant nan sourit Clr-f-/- te siyifikativman pi wo, ki endike ke tisi adipoz te reprezante yon pwopòsyon ogmante nan Clr-f. −/− pwa kò sourit (figi 4D). Nou menm tou nou te detekte akimilasyon lipid ektopik nan ren yo nan sourit Clr-f-/-, jan sa pwouve pa ogmante tach ORO nan ren sourit Clr f -/- (Fig. 4E). Kòm grès perirenal ak prezans grès entèrstisyèl nan ren yo asosye ak faktè risk metabolik nan CKD21, nou te fè ipotèz si Clr-f se pwoteksyon kont.etyoloji nan dyabètoswamaladi metabolik ki gen rapòasosye avèkZÈK.

Clr-f−/− ren sourit gen resanblans pwofil transkripsyon ak diferans ak maladi ren moun.

Akimilasyon lipid ektopik nan ren an asosye ak enfamasyon, fibwoz, malfonksyònman mitokondriyo, ak lanmò selil22,23. Pou evalye si ren Clr-f-/- sanble ak maladi ren ki defini, nou te konpare pwofl transkripsyon ren Clr-f-/- ak pwofl ekspresyon ki pibliye tisi ren ak/oswa san ki soti nandonatè imen ki gen CKD, nefropati dyabetik(DN), lupus nefrit (LN), oswaNefropati IgA(IgAN) (Fig. 5A). Clr-f-/- ren transkripsyon profles gwoupe ak san ki soti nan pasyan IgAN ak tisi glomerulaire nan pasyan DN (Fig. 5B). Konparezon pwofil ekspresyon pasyan Clr-f-/- ak IgAN pa analiz anrichisman fonksyonèl te montre ogmantasyon paralèl nan ekspresyon jèn ki gen rapò ak repons oksid reyaktif selilè, lanmò selil, proteoliz, ak metabolis amid, osi byen ke diminisyon pataje nan ekspresyon jèn ki asosye ak manbràn. pwosesis trafcking, òganizasyon sitoskelèt, siyal PI3K-AKT, sikilasyon selilè, ak metabolis ADN / RNA (figi 5C). Kontrèman, seri ekspresyon ren Clr-f-/- diferan de IgAN, ak ogmante ekspresyon jèn ki fè pati chemen siyal AGE-RAGE, ErbB, TNF/MAPK, ak Rap1, ak pwosesis reabsòpsyon dlo vazopresin reglemante, ak aktivite lizozom, ak diminye ekspresyon de jèn ki te fè pati adherens junction, ki pa-motile cilium asanble, bisiklèt selil, metabolis ADN, ak TGF-siyal. Konklizyon sa yo sijere ke menm jan ak IgAN, pwosesis selilè kontwòl kwasans, omeyostazi, ak reparasyon, yo tou dysregulated nan ren Clr-f-/-, pandan y ap chanje metabolis, siyal estrès, akestrikti epitelyalak fonksyon yo inik nan ren Clr-f−/−.

Clr-f-defcient ren montre enfamasyon ak enfiltrasyon selil iminitè yo.

Bay wòl imunomodulateur yo konnen pou pwoteyin Clr, nou egzamine kontribisyon selil iminitè a nanClr-f−/− patoloji ren. Nou analize konpozisyon selil iminitè 12-WT ki gen yon semèn ak Clr-f-/- ren antye sourit pa sikometri koule. Analiz nou an revele yon ogmantasyon siyifikatif nan kantite neutrofil, selil T, ak selil B, men pa gen okenn diferans nan selil ren NK, ILC oswa nimewo macrophage (Fig. 6A). Analiz de distribisyon periglomerular nan selil iminitè nan cortical ren WT ak Clr-f-/- ren pa IF, nou obsève akimilasyon glomerulè nan selil CD 45+ (Fig. 6B). Etikèt CD11c, F4/80, NKp46, ak CD3, makè ki endike DCs, macrophages, NK/ILCs, ak selil T respektivman, revele yon akimilasyon intraglomerular nan selil CD11c + (figi 6C), ak akimilasyon periglomerular nan F4/{{ 16}}, NKp46+, ak CD3+ selil nan ren Clr-f-/- (figi 6D). Kantifikasyon vizyèl nan popilasyon selil iminitè yo detekte nan glomeruli yo te konfime yon ogmantasyon siyifikatif nan prezans chak nan popilasyon selil iminitè sa yo nan ren sourit Clr-f-/- konpare ak sourit WT (Fi.g 6E). Enfiltre iminitè nan maladi ren otoiminitè ogmante pa sekresyon tubulaire IL-12 ki lakòz blesi nan selil IFN ki sekrete24–26. Se poutèt sa, nou te egzamine ren WT ak Clr-f-/- pou prezans sitokin sa yo epi nou te obsève tach nan tou de IL-12 ak IFN nan selil tubulointerstitium nan ren Clr-f-/- (Fig. 6F, G).

Piske Clr-f poze kòm yon siyal sante selil nan selil ki eksprime NKR-P1G, nou te sipoze ke enfiltrasyon iminitè ren nan sourit Clr-f-/- se an pati akòz yon prezans ogmante nan lenfosit ki eksprime NKR-P1G. nan ren an. Analiz ekspresyon NKR-P1G sou selil TCR + T nan ren yo ak selil NK1.1+ NK selil yo nan sourit WT ak Clr f -/- pa sikometri koule pa montre okenn diferans nan entansite fluoresans mwayen NKR-P1G tach sou ren NK. selil yo, men yon ogmantasyon nan tach NKR-P1G nan selil T ren nan sourit Clr-f-/- (Fig. 6H)

Figi 5. Konparezon ant pwofil transkripsyon sourit Clr-f-/- ak CKD imen. (A) Tablo seri done pwofil ekspresyon jèn 15 maladi ren imen kont sourit Clr-f−/− 13-semèn. Sous referans pou sous yo ansanm done pwofil ekspresyon imen yo endike nan kolòn Etid la. (B) Matris resanblans ki montre gwoupman yerachik pwofil ekspresyon jèn diferans nan panèl (A). Liy wouj-tire ki nan dendrogram nan endike nivo separasyon gwoup matris la. (C) Konparezon 4531 DEG (Log2 FC; Padj.<0.05) of 13-week-old Clr-f−/− mice (group 0) and IgAN patients. Gene set enrichment from 4 DEG clusters: (I) upregulated in both Clr-f−/− mice and IgAN patients, (II) upregulated in Clr-f−/− mice and downregulated IgAN patients, (III) downregulated in Clr-f−/− mice, and upregulated IgAN patients, and (IV) downregulated in both Clr-f−/− mice and IgAN patients. Heat maps were constructed using Morpheus (https://sofware.broadinstitute. org/morpheus).

Defisi Clr-f lakòz otoiminite ak patojèn endepandan T- ak B-. Pou klarifye kontribisyon iminitè a nan patoloji ren sourit Clr-f-/-, nou te egzamine sourit Clr-f-/- ki te tou defisyan nan selil T- ak B-, lè l sèvi avèk souch sourit Rag1-defisyan. (Rag1−/−Clr-f−/−). Kòm sourit Rag1-/-Clr-f-/- manke antikò, nou ta ka evalye patojèn Clr-f-asosye nan absans depozisyon imunoglobulin. Analiz de ren Rag1-/-Clr-f-/- te revele blesi glomerulè ki endike glomerulopathy proliferatif twò grav ak zòn fibwoz glomerulèr (Fig. 7A). Nòt patoloji glomerulè te montre yon kantite siyifikativman pi wo nan glomeruli ak blesi nan Rag1-/-Clr-f-/- konpare ak Rag1-/- sourit (Fig. 7B). Nòt nan seksyon ren Rag1-/-Clr-f-/- idantifye ogmantasyon nan pwopagasyon andokapilè, kwasan, glomerulosclerosis oswa paralezi segmantal fokal, ak fibwoz entèrstisyèl ak atrofi tubulèr, ak yon ogmantasyon siyifikatif nan prezans selularite mezanjyal (figi 7C). .

Pou evalye kontribisyon selil T ak B nan akimilasyon lipid yo obsève nan sourit Clr-f-/-, nou mezire pwa total kò ak pwa adipoz nan vant nan Rag1-/-Clr-f-/- parapò ak sourit Rag1-/-. Te Rag1−/−Clr-f−/− pwa kò te siyifikativman pi ba pase kontwòl Rag1−/− (Fig. 7D), pandan y ap pwa lipid nan vant yo te siyifikativman ogmante (Fig. 7E), byenke nan yon limit pi piti pase sa yo obsève nan Clr-f−/− sourit konpare ak sourit WT (174 mg grès te genyen kont 274 mg an mwayèn).

Finalman, pou mennen ankèt sou kontribitè iminitè yo nan domaj ren sa yo, nou egzamine ren Rag1-/-Clr-f-/- pou prezans IL-12 ak IFN ak selil iminitè ki enfiltre ren yo. Analiz IF nan ren Rag1-/-Clr-f-/- revele yon prezans ogmante nan IL -12 ak IFN (figi 7F, G). Nou te obsève tou yon gwo akimilasyon periglomerular nan selil CD45+ nan ren Rag1-/-Clr-f-/- (Fig. 7H), ki te jwenn ki konpoze de CD11c+, F4/80+, ak Nkp46+ selil yo. Konklizyon sa yo sijere ke mekanis T ak B selil endepandan yo se medyatè prensipal nan patoloji ren nan sourit ki pa gen Clr-f.

Sèvis sipò Wecistanche-Pi gwo ekspòtatè cistanche nan Lachin nan:

Imèl:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel:+86 15292862950

Achte pou plis detay espesifikasyon:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

JWENN NATIRÈL ÒGANIC ÈKSÈ CISTANCHE AK 25% ECHINACOSIDE AK 9% ACTEOSIDE POU ENFEKSYON REN