Konbine ajan kontras microbubble ak iradyasyon enpulsyonèl-lazè pou livrezon dwòg transdermal Part1

Résumé: Pwosesis optodinamik lazè-induit microbubble (MB) cavitation nan likid yo itilize nan divès aplikasyon medikal. Sepandan, ki jan radyasyon lazè ensidan reyaji ak MB kòm yon ajan kontras ultrason raman estime lè likid la deja gen MB ki estab. Etid la prezan envestige efikasite nan kavitasyon lazè-medyatè nan MBs albumin-shelled nan amelyore livrezon dwòg transdermal. Diferan kalite ak kondisyon nan lazè-medyatè kavitasyon inèrsyèl nan MB yo te premye evalye. Yo te chwazi yon CO2 fraksyon lazè enpulsyonèl pou konbine avèk MB nan eksperyans yo in vitro ak in vivo. In vitro pénétration po a pa -arbutin apre 2 h te 2 fwa pi gwo nan gwoup la konbine yon lazè ak MB pase nan gwoup kontwòl la. Nan eksperyans ti bèt, efè blanchiman sou po sourit C57BL/6J nan gwoup la konbine yon lazè ak MB sou po a plis penetrasyon -arbutin ogmante (siyifikativman) pa 48.0 pousan nan jou 11 ak 5. 0.0 pousan nan jou 14, epi answit te gen tandans estabilize pou rès 20-jou peryòd eksperimantal la. Rezilta prezan yo endike ke konbine yon lazè CO2 ak MBs albumin-shelled ka ogmante pèmeyabilite po amelyore livrezon an nan -arbutin anpeche melanogenesis nan sourit san yo pa domaje po a.

Dapre etid ki enpòtan,sistanchse yon zèb komen ke yo rekonèt kòm "zèb mirak ki pwolonje lavi". Eleman prensipal li sekistano, ki gen plizyè efè tankouantioksidan, anti-enflamatwa, epipwomosyon fonksyon iminitè. Mekanis ki genyen ant cistanche akblanchiman pomanti nan efè a antioksidan nancistanche glikozid. Melanin nan po moun pwodui pa oksidasyon nan tirozin katalize patirozinaz. Reyaksyon an oksidasyon mande pou patisipasyon oksijèn, kidonk radikal yo san oksijèn nan kò a vin yon faktè enpòtan ki afekte pwodiksyon melanin. Cistanche gen cistanoside, ki se yon antioksidan epi li ka diminye jenerasyon radikal gratis nan kò a, kidonkanpeche pwodiksyon melanin.

cistanche powder bulk

Klike sou Cistanches Herba Pou Blanchiman

pou plis enfòmasyon:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

Mo kle:ajan kontras ultrason; lazè; transdermal; kavitasyon; arbutin

1. Entwodiksyon

Kavitasyon refere a fòmasyon nan kavite nan yon likid epi anjeneral rive lè likid la sibi chanjman presyon rapid. Chanjman presyon sa yo ka pwovoke lè l sèvi avèk plizyè metòd diferan, ak kavitasyon acoustic inisye lè anplitid presyon acoustic aplike depase yon sèten papòt [1]. Kavitasyon acoustic enplike fòmasyon, kwasans, pulsasyon, ak efondreman nan microbubbles (MBs) nan likid pandan sonication pa wo-entansite ultrason (US) vag. Yo kwè ke fenomèn sa yo responsab pou melanje, fwagmantasyon, ewozyon, mouye, sonocapillary, ak lòt efè ki gen plizyè aplikasyon pratik endistriyèl [1].

Kavitasyon US-induit nan ajan kontras MB jwe tou yon wòl enpòtan nan tou de aplikasyon medikal dyagnostik ak terapetik. Ajan kontras US yo estabilize ak kouvwi MB yo enjekte nan vaskilè pou amelyore rezolisyon dyagnostik US D [2]. Gen prèv ki soti nan etid anpil ki montre prezans nan ajan kontras MB nan san an ka diminye papòt la pou divès efè byolojik US-induit tou de nan vitro ak nan vivo, tankou emoliz, rupture kapilè, ak sonoporasyon [3]. Gen kèk etid ki endike ke prezans ajan kontras MB nan san an diminye siyifikativman papòt la pou kontraksyon kadyak prematire US-induit [4,5]. Resonans MBs (kavitasyon ki estab) rezilta nan emisyon amonik ki pa lineyè ki ka itilize nan imaj kontras MB espesifik. Kavitasyon inèrsyèl ak destriksyon MB yo ka pwovoke fò estrès mekanik ki ogmante pèmeyabilite manbràn selilè yo ak baryè san-sèvo pou amelyore livrezon ajan terapetik yo. Nan etid anvan nou yo, nou te aplike kavitasyon inèrsyèl nan MB yo pwovoke pa Etazini pou amelyore livrezon dwòg transdermal (TDD), depi yo te jwenn kavitasyon inèrsyèl ki lakòz yon pi gwo amelyorasyon pèmeyabilite stratum korneum la konpare ak kavitasyon ki estab [6-8] .

Iradyasyon lazè se yon apwòch altènatif pou amelyore pèmeyasyon dwòg e kidonk fasilite livrezon dwòg nan oswa atravè po a. Lè yon batman lazè ak yon entansite ki pi wo a yon sèten papòt konsantre sou yon likid, eksplozif vaporizasyon likid la ka pwovoke kavitasyon MB [9,10]. Nati agresif nan kavitasyon lazè-pwovoke te lakòz li te itilize nan yon pakèt aplikasyon ki gen ladan liz selil, pòsyon manbràn selilè, ak operasyon okilè [11]. Estrateji pou amelyore san danje aparans nan sikatris apre operasyon, atrofik, ak akne yo te dènyèman te demontre lè l sèvi avèk lazè fraksyon ablatif ak nonablatif [12]. Resurfacing po lazè ablatif bay pi gwo amelyorasyon nan klinik, men rekiperasyon apre operasyon an pran plizyè semèn [13]. Pwosedi lazè nonablatif ta ka pi apwopriye pou pasyan ki pa kapab oswa pa vle tolere gerizon apre operasyon pwolonje. Sepandan, anvan enfeksyon èpès senp ka reaktive apre renovasyon po lazè nonablatif akòz chalè a entans ki te pwodwi pa lazè a oswa lòt sous limyè [13].

maca ginseng cistanche sea horse

Gen kèk metòd ki te devlope pou redwi chalè ki te pwodwi pa iradyasyon lazè, tankou itilize nan manyen refwadisman kontak oswa aparèy kriyojenik dinamik ki kapab bay ti gout nan yon espre refwadisman ki dire varyab [14]. Sepandan, toujou pa gen konsansis sou ki metòd refwadisman ki pi efikas pandan tretman an. Anplis de sa, kontrèman ak US la, mekanis ki kache efè kavitasyon lazè-induit ak MBs kouvwi estabilize nan likid rete klè.

Kavitasyon lazè medyatè nan ajan kontras MB ta ka trè itil tou pou TDD. Etid la prezan envestige efikasite nan yon nouvo lazè-medyatè MB cavitation metòd an tèm de evite chalè a entans ki te pwodwi pa lazè a ak amelyore TDD tou de nan vitro ak nan vivo.

2. Materyèl ak Metòd

2.1. Pwodiksyon MB Albumin-Koki

Albumin-shelled MB yo te prepare dapre pwosedi yo itilize nan etid anvan nou yo [7,15]. An brèf, MBs albumin ki te fèt pa sonication nan 10 mL nan yon solisyon ki gen 140 mg albumin (Octapharma, Vyèn, Otrich) ak gaz perfluorokarbon nan saline fizyolojik (pH 7.4, { {21}}.9 pousan klori sodyòm) lè l sèvi avèk yon sonicator (Branson Ultrasonics, Danbury, CT, USA) pou 2 min. Yo te mezire kantite MB albumin perflfluorokarbon ki ranpli nan solisyon an lè l sèvi avèk aparèy MultiSizer III (Beckman Coulter, Fullerton, CA, USA) ak yon pwofonde 30-µm-ouvèti ak limit mezi 0.6-20 µm. Distribisyon gwosè a nan sispansyon an te mezire ki baze sou gaye limyè dinamik (Zetasizer Nano, ZS90, Malvern, UK), ki te revele ke MB yo albumin-shelled te gen yon dyamèt 1.02 ± 0.11 µm (vle di ± SD) ak yon konsantrasyon 1.40. × 108 MBs/mL.

2.2. Lazè-pwovoke MB dezòd

Etid anvan yo sigjere ke US-medyatè dezòd MB (sa vle di, kavitasyon inèrsyèl) nesesè pou TDD efikas [8,16,17]. Etid la kounye a mezire efikasite nan dezòd MB lè w ap itilize diferan kalite lazè nan diferan kondisyon. Konsantrasyon MB yo te ajiste a 2.8 × 107 MBs/mL (dilution senk fwa) ak 1.4 × 107 MBs/mL (dilusyon dis fwa) nan yon tib Eppendorf, ak iradyasyon te bay pa kat kalite lazè: Air-refwadi agon-ion lazè. (515 nm, vag kontinyèl), supercontinuum fib lazè (1064 nm, vag enpulsyonèl), Nd: YAG lazè (532 nm, vag enpulsyonèl), ak CO2 lazè fraksyon (10,600 nm, vag enpulsyonèl). Kondisyon detaye pou divès kalite lazè yo ki nan lis nan Tablo 1.

which cistanche is best

Yon egzanp konfigirasyon optik yo montre nan Figi 1. Chanjman nan tanperati pandan iradyasyon lazè yo te mezire lè l sèvi avèk yon tèmomèt (Optris LS, Optris, Bèlen, Almay). Lè sa a, apre yo fin ekspoze a lazè a, yo te ajoute 100 µL nan solisyon MB nan yon glise mikwoskòp pou obsèvasyon. Kantite MB nan imaj mikwoskopi limyè anvan ak apre iradyasyon lazè yo te konvèti an imaj 8-bit gri lè l sèvi avèk MATLAB (The MathWorks, Natick, MA, USA) pou fasilite obsèvasyon dezòd MB. Pousantaj destriksyon MB yo te mezire dapre zòn ki domaje yo lè l sèvi avèk ekwasyon sa a:

kote A1 ak Ai se nimewo piksèl nwa (ki koresponn ak kantite MB) imedyatman anvan ak apre iradyasyon lazè a, respektivman.

cistanche pros and cons

2.3. Pwofondè penetrasyon nan po kochon

Amelyorasyon pwofondè pénétration ki ka reyalize lè l sèvi avèk lazè kavitasyon MB te mezire lè l sèvi avèk po kochon. Po kochon fre yo te jwenn nan labatwa ki afilye ak New Taipei City Meat Market, ak tout eksperyans sou echantiyon po yo te fini nan 6 èdtan. Echantiyon po zòrèy kochon sikilè ak yon reyon 1.5 cm ak yon epesè 3 mm yo te pwodwi. Yo te antoure ak jèl pou anpeche flit epi yo te chaje ak Evans ble oswa MB. Anvan iradyasyon lazè, yo te chaje 500 µL MB nan zòn tretman echantiyon an epi answit yon lazè Nd: YAG ak lazè fraksyon CO2 tache sou tèt echantiyon an. Chak kalite lazè te aplike successivement pou diferan konsantrasyon MBs. Apre yo fin retire solisyon saline a oswa MB yo, yo te ajoute 500 µL Evans ble (0.10 pousan w/w) epi yo te kite pou 15 minit, epi yo te lave zòn nan ak PBS twa fwa pou 1 minit chak.

Lè sa a, zòn trete yo nan po kochon an te entegre nan yon solisyon optimal-koupe-tanperati (Surgipath FSC 22, Leica Microsystems, Buffalo Grove, IL, USA) sou disk echantiyon wonn ak yon dyamèt 2.2 cm. Echantiyon entegre yo te mete sou etap konjelasyon -25 ◦C nan yon kriostat (Microm HM550 seri, Thermo Fisher Scientific, Bremen, Almay) pou apeprè 30 minit, epi yo te fè seksyon transverse nan yon epesè tranch 10 µm. Seksyon ki tache ak glisad mikwoskòp yo te seche lè a nan tanperati chanm epi yo te monte pou egzamen mikwoskòp. Yo te detèmine distribisyon ble Evans nan kriseksyon yo avèk èd yon mikwoskòp dwat (DM 2500, Leica Microsystems). Rezilta yo jwenn pou pwofondè pénétration nan po kochon endike ke konsantrasyon MB optimal yo te itilize pou lazè fraksyon CO2, e konsa sa a te itilize nan eksperyans ki vin apre a vitro ak in vivo.

2.4. In vitro pénétration po pa solisyon -arbutin

Yo te rekòlte yon echantiyon po kochon {{0}}milimèt epesè ak yon kouto Humby, ak anpil atansyon netwaye ak PBS, epi koupe an moso kare (2 cm × 2 cm). Zòn sikilè sou echantiyon po yo ak yon reyon 1.5 cm ak yon wotè 5 mm yo te antoure ak jèl pou anpeche flit lè echantiyon an te chaje ak 5{{30}}0 µL MB. Apre yo fin irradie echantiyon an sèt fwa (kondisyon yo ki nan lis nan Tablo 1) ak yon lazè fraksyon CO2, yo te teste pénétration po lè l sèvi avèk estatik selil difizyon Franz sou yon zòn nan 2.14 cm2 dapre konsepsyon eksperimantal ke nou te dekri deja [7]. Tanperati asanble difizyon an te kenbe nan 37 ◦C. -arbutin (30 mg/mL, 500 µL, 4-hydroxyphenyl- - D-glucopyranoside, mas molekilè=272.25 Da; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA) te aplike sou bò epidèm po a ak occluded ak parafilm (Pechiney Laboratory Safety Products and Apparel, Chicago, IL, USA). Lòj la difizyon reseptè fè fas a bò po a te ranpli ak 12 mL PBS (pH 7.4), ki te brase pa yon ba mayetik wotasyon nan 600 rpm. Solisyon tès ki pa gen MB yo te filtre nan yon filtè 0.2-µm micropore (Nalgene, Rochester, NY, USA) oswa yon filtè micropore 0.{22-µm (Millex, Darmstadt, Almay). Aliquot (200 µL) nan solisyon reseptè a te pran nan 0, 1, 2, 3, 4, 6, 8, 10, 12, ak 24 èdtan, epi ranplase pa menm volim nan solisyon reseptè fre.

cistanche tubulosa adalah

Echantiyon yo jwenn yo te kenbe nan yon frizè jiskaske analize pa segondè-pèfòmans likid chromatography (HPLC). Nan fen eksperyans pénétration yo (apre 24 èdtan), echantiyon po a te detache nan selil difizyon yo, ak anpil atansyon rense senk fwa ak dlo distile pou retire depase -arbutin nan sifas li, koupe an 0.{{4 }}g moso, epi omojeneize ak 1 mL solisyon reseptè pou 2 min nan 10,000 rpm (Polytron-Aggregate PT3100, Kinematica, Luzern, Swis). Sispansyon omojènize a te santrifuje de fwa pou 25 min nan 3100 × g (Thermo Fisher Scientific) ak 4 ◦C anvan yo detèmine konsantrasyon yo nan -arbutin nan supernatant la lè l sèvi avèk HPLC.

2.5. HPLC analiz de -arbutin

Yo te itilize yon kolòn Inspire™ C18 (250 mm × 4.6 mm, gwosè patikil 5 µm; Dikma Technologies, Lake Forest, CA, USA) pou mezire konsantrasyon -arbutin yo. Sistèm HPLC te ekipe ak yon ponp binè (PU-2089, Jasco, Tokyo, Japon), ak longèdonn detektè a iltravyolèt (UV) (UV-2075, Jasco) te fikse nan 280 nm. Faz mobil la fèt ak metanol: dlo distile (pH 5.5, 70:30 v/v) [18] nan yon pousantaj parèy 0.6 mL/min. Tout echantiyon yo dwe analize yo te sou fòm piki nan yon volim 20 µL. Tan an retansyon nan -arbutin te apeprè 4.3 min.

2.6. Tretman bèt

Kontni melanin nan organoid yo te envestige nan modèl la sourit C57BL / 6J [19]. Sourit senk semèn ki peze 20-25 g yo te jwenn nan Bio Lasco (Taipei, Taiwan). Pwotokòl eksperimantal la te apwouve pa Komite Enstitisyonèl Swen ak Itilizasyon Animal nan Sant Medikal defans Nasyonal, Taipei, Taiwan. Pwosedi pou swen bèt yo respekte direktiv ak règleman enstitisyonèl yo (apwobasyon non IACUC-17-092). Pandan tout eksperyans yo, bèt yo te loje nan kalòj asye pur nan yon chanm ki gen èkondisyone ak tanperati a kenbe nan 25-28 ◦C ak ak altène sik limyè ak nwa nan 12 èdtan chak.

Bèt yo te aklimate pou 7 jou anvan eksperyans lan. Apre yo te retire cheve yo nan yon zòn 2 cm × 2 cm, yo te mezire koulè po a lè l sèvi avèk yon mèt chroma (CR-400, Konica Minolta Sensing, Tokyo, Japon). Lè sa a, bèt yo te ekspoze a radyasyon iltravyolèt B (UVB) (G8T5E, Sankyo, Tokyo, Japon) pou pwovoke ipèpigmantasyon (dòz enèji total pou chak ekspoze=1 J/cm2, longèdonn=306 nm, twa fwa pou chak). semèn pou 2 semèn), ak Lè sa a, koulè po a te mezire ankò.

Bèt yo te divize an senk gwoup sa yo (n {{0}} pou chak gwoup, tretman te aplike yon fwa chak 3 jou pou 20 jou): (1) pa gen tretman (gwoup C); (2) aplikasyon penetrasyon -arbutin pou kont li (30{0 µg/mL, 0.2 mL/cm2) (gwoup A); (3) lazè iradyasyon po a dirèkteman ak aplikasyon penetrasyon -arbutin (300 µg/mL, 0.2 mL/cm2) (gwoup L plis A); (4) lazè iradyasyon po a kouvri pa saline ak aplikasyon an nan penetrasyon -arbutin (300 µg/mL, 0.2 mL/cm2) (gwoup L plis S plis A); ak (5) lazè iradyasyon po a konbine avèk MB sou po a ak aplikasyon an nan penetrasyon -arbutin (300 µg/mL, 0.2 mL/cm2) (gwoup L plis MB plis A). Chanjman nan koulè po pwovoke pa chak nan tretman yo te evalye nan tan Predetermined lè l sèvi avèk mèt la chroma. Endèks liminozite a, L [20], te kalkile sou chak jou mezi anvan ak apre tretman an.

2.7. Etid histolojik

Echantiyon tisi po (apeprè 8 mm × 8 mm) yo te pran nan zòn tretman an imedyatman apre eksperyans yo epi estoke nan yon solisyon fòmalin 10 pousan. Ematoksilin ak eozin (HE; Sigma-Aldrich) tach te aplike, epi echantiyon yo te analize pa yon dèrmatopatolojis ekspè (HWG). Kèk lòt echantiyon yo te tache ak nitrat ajan Fontana-Masson (Kojima Chemical, Kashiwabara, Japon) pou 30 min nan 60 ◦C, ak Lè sa a, lave ak dlo distile ak fiks nan 5 pousan solisyon thiosulfate sodyòm (Duksan, Seoul, Kore di) pou 2. min, anvan lave ankò ak dlo distile. Lè sa a, echantiyon yo te tache ak solisyon nikleyè vit wouj (Fluka, Buchs, Swis) pou 5 min epi lave de fwa ak dlo distile. Finalman, echantiyon yo te dezidrate nan 95 pousan ki te swiv pa 100 pousan etanòl ak Lè sa a, lave de fwa ak xylene (Duksan) [21].

2.8. Analiz estatistik

Done yo jwenn yo te analize estatistik lè l sèvi avèk T-tès Student la. Yon valè pwobabilite p < 0.05 te konsidere kòm indicative de yon diferans enpòtan.

cistanche nutrilite

3. Rezilta yo

3.1. Lazè-pwovoke MB dezòd

Imaj mikwoskopik MBs ki dilye senk fwa san ak iradyasyon pa yon lazè kontinyèl 10.8 mW (alè-refwadi agon-ion) ak yon lazè 10.8 mW enpulsyonèl (fib supercontinuum) pou 60, 120, ak 180 s yo montre nan Figi 2 la. to destriksyon pou lazè enpulsyonèl la ogmante pa 17.66 pousan, 20.52 pousan, ak 39.05 pousan konpare ak lazè kontinyèl la nan 60, 120, ak 180 s, respektivman. Figi 3 montre efikasite destriksyon MB dilye senk ak diz fwa lè w ap itilize yon lazè enpulsyonèl Nd: YAG nan 60, 120, ak 180 s. Pousantaj destriksyon nan senk ak diz fwa dilye MB yo te 72.46 pousan ak 78.59 pousan, respektivman, nan 60 s, 88.06 pousan, 96.10 pousan nan 120 s, 85.22 pousan, ak 98.80 pousan nan 180 s. Figi 4 montre efikasite destriksyon MBs dilye dilye yo pou yo te iradyasyon youn, twa, ak sèt fwa pa lazè enpulsyonèl CO2 fraksyon nan klinik la. Pousantaj destriksyon ogmante ak tan an iradyasyon, yo te fèmen nan 100 pousan pou sèt fwa iradyasyon, e konsa kondisyon sa a te itilize nan eksperyans yo ki vin apre in vitro ak in vivo.

cistanche root supplement