Etid konparatif sou konstitiyan chimik ak sa ki nan Cistanche Tubulosa (Guanhua Roucongrong) ak pwodwi trete li yo

Résumé

Objektif:Pou envestige varyasyon (modèl chanjman) nan sa ki konstitiyan chimik nan pwodwi trete nanCistanche tubulosa(Guanhua Roucongrong).
Metòd:Yo te chwazi senk kalite moso dekoksyon, ki gen ladan tranch anvan tout koreksyon, tranch diven-vapè, tranch vapè, brase-pwosesis-ak-pwa-nwa tranch, ak nwa-pwa-ji-trache tranch. Yo te etabli yon metòd anprent HPLC ak konbine avèk evalyasyon resanblans, analiz gwoup (CA), ak analiz eleman prensipal (PCA) pou ekran ak konfime eleman diferans ant pwodwi kri ak pwodwi trete. Metòd chimyometrik ak HPLC yo te anplwaye pou detèmine ak konpare diferans ki genyen nan sa ki nan total phenylethanoid glikozid, polisakarid, flavonoid total, ak kat phenylethanoid glikozid nan mitan echantiyon yo anvan tout koreksyon ak trete.
Rezilta:HPLC anprent dwèt nanCistanche tubulosa and its processed products were established. With Mark peak matching, 9 common peaks were assigned for raw slices, whereas 11 common peaks were assigned for the other four processed products. Peaks No. 2 and No. 7 were differential chromatographic peaks. By comparison with reference standards, four chromatographic peaks were identified as echinacoside, cistanoside A, acteoside, and isoacteoside. Fingerprints of the processed products showed similar profiles with the same number of common peaks; similarity values were all >0.9. Sèvi ak echinacoside kòm pik referans, RSD nan tan retansyon relatif nan pik komen nan mitan diferan pwodwi trete varye ant 0.11% ak 0.82%, pandan y ap RSD nan zòn pik relatif yo varye ant 15.46% ak 76.07%. Lè distans ant klas la te fikse a 10, CA klase tranch kri ak pwodwi trete nan twa kategori. PCA te endike diferans konpozisyon ant echantiyon anvan tout koreksyon ak echantiyon trete: 11 varyab pik yo te redwi a twa eleman prensipal; diferan eleman prensipal ki gen rapò ak diferan pik kwomatografik. Ki baze sou matris la eleman ak pondération lineyè, nòt konplè te montre ke nwa-pwa-ji-trete tranch ak jòn-diven-vapè ak dlo-vapè tranch yo klase pi wo. Sa ki nan echantiyon anvan tout koreksyon ak trete yo te jan sa a: total phenylethanoid glikozid 3.80%-7.07%, total polisakarid 5.85%-6.70%, total flavonoid 14.16%-24.26%; echinacoside 4.11%-5.99%, acteoside 0.67%-1.34%, cistanoside A 0.06%-0.36%, ak isoacteoside 0.25%-1.66%. Diferans konsiderab te egziste nan mitan pwodwi trete.
Konklizyon:Metòd anprent HPLC etabli a gen yon espesifik espesifik, efektivman distenge tranch kri ak pwodwi trete nanCistanche tubulosa, epi li apwopriye pou analiz kalitatif ak quantitative nan echinacoside, acteoside, cistanoside A, ak isoacteoside nan dwòg la brit ak pwodwi trete. Profilage konparatif la ak chanjman kontni nan mitan echantiyon diferan ka bay yon baz syantifik pou idantifikasyon ak kontwòl kaliteCistanche tubulosaak divès kalite pwodwi trete li yo.

Mo kle: Cistanche tubulosa; pwosesis; konstitiyan chimik; anprent; Kwomatografi likid segondè-pèfòmans (HPLC)

 

1 Entwodiksyon

Cistanche tubulosa(Schenk) Wight (Guanhua Roucongrong) se yon zèb kontinuèl nan Orobanchaceae e li se yon sous ofisyèlman ki nan lis Cistanches Herba nan Farmakope Repiblik Pèp la nan Lachin (ki refere yo kòm "Farmakope Chinwa"). Pati medsin nan se tij la chèch ak fèy kal. Li se cho nan lanati, dous ak sale nan gou, epi li antre nan ren yo ak gwo trip meridyen, ak fonksyon nan tonifying Yang ren, benefisye esans ak san, ak mwatir trip yo soulaje konstipasyon [1]. Etid farmakolojik modèn yo te konfime plizyè aktivite, tankou anti-aje, amelyorasyon iminitè, efè tonifyan ak afrodizyak nan ren, efè laksatif, ak aktivite anti-ipèrtansif.

Cistanche tubulosase moun rich nan glikozid fenilethanoid, iridoid ak glikozid yo, lignan, oligosakarid ester, poliol, polisakarid, flavonoid, ak lòt konstitiyan [2]. Pami sa yo, glikozid phenylethanoid se pi gwo eleman aktif ak konpoze ki pi abondan; yo se tou eleman makè pou detèminasyon kontni nan farmakope a, epi montre divès kalite byoaktivite tankou efè antioksidan, pwomosyon metabolik, amelyorasyon nan aprantisaj ak memwa, ak amelyorasyon nan fonksyon seksyèl [3].

Cistanche tubulosapwefere saline-alkali peyi ak Gobi dezè rejyon yo, parazit sou rasin nanTamarixspp., epi li sitou distribye nan Inner Mongolia, Xinjiang, ak Gansu nan Lachin [4]. Zòn sovaj ak kiltive geo-otantik yo enkli Minfeng County, Yutian, Pishan, ak Moyu nan Hotan Prefecture, Xinjiang. Pwosesis li yo sitou devlope nan moso dekoksyon tranche, materyèl èrbal brit, ekstrè, pwodwi sante, ak manje fonksyonèl; pami sa yo, moso komèsyal dekoksyon rete endikap. Sepandan, nan mache a, diferan pwodwi trete-tankou tranch anvan tout koreksyon, tranch diven-trete, tranch segondè-tanperati anzim-inaktive, ak tranch dlo-vapè-yo souvan melanje ak difisil yo fè distenksyon ant.

Pwosesis la nan Cistanches Herba te evolye sou tan, ki soti nan ansyen dosye tankouTaiping Shenghui Fang, Zhenglei Bencao, epiPuji Fang[5–7] (egzanp, lave ak diven, brase-fri ak diven, vapeur / kwit ak diven, tranpe / boulanjri sèk ak diven, bouyi nan dlo, trip vapeur, ak bè brase-fri) nan metòd modèn tankou maserasyon diven (vapè), sèl vapè, "kat-vapè ak kat-sunning", ak [8-bean]. Diferan metòd pwosesis ka afekte kontni an nan elektè aktif, sekirite, ak aktivite byolojik. Cai Hong et al. [9] te jwenn ke inaktivasyon anzim nan materyèl fre ak 70 degre dlo cho pou 6 min a nan echinacoside ak acteoside kontni yo te 7.3-pliye ak 6.5-pliye sa yo ki nan siye solèy dirèk, respektivman. Tie Xiaoyan et al. [10] rapòte ke pwosesis vapeur ansibleman amelyore kalite moso dekoksyon konpare ak materyèl fre. Chen Weijun et al. [11] te obsève ke kontni betaine diminye apre diven-, sèl-, ak vapè-pwosesis konpare ak pwodwi fre. Zhang Chao et al. [12] te montre ke pandan diven-vapeur, ak tan pi long vapeur, echinacoside, acteoside, cistanoside A, ak 2′-acetylatteoside diminye piti piti, tandiske isoacteoside ogmante anpil.

Aktyèl 2025 edisyon Farmakope Chinwa a sèlman fikse limit pou echinacoside ak acteoside nan tranch anvan tout koreksyon ak tranch diven-vapè, men li pa presize eleman makè pou lòt pwodwi trete, epi li manke metòd kontwòl kontni efikas. Se poutèt sa, analize ak konpare konstitiyan karakteristik ak eksplore modèl chanjman konpozisyon yo patikilyèman enpòtan pou idantifikasyon kalitatif ak kontwòl quantitative nan pwodwi kri ak trete.

Anprent medikaman tradisyonèl Chinwa (TCM) se yon reprezantasyon holistic konstitiyan chimik yo. Avèk avantaj entegrite, espesifik, ak enfòmasyon rich, li lajman itilize nan evalyasyon kontwòl kalite dwòg ak preparasyon, aliyman ak estanda entènasyonal, idantifikasyon otantisite, siveyans pwosesis fabrikasyon, ak rechèch sou sibstans farmakodinamik [13]. Ki baze sou HPLC anprent, etid sa a te chwazi echinacoside, acteoside, cistanoside A, ak isoacteoside kòm makè kalite, epi li te travay analiz resanblans, CA, ak PCA konbine avèk detèminasyon kontni pou konpare konstitiyan chimik ak modèl chanjman kontni nan mitan diferan pwodwi trete, bay yon baz syantifik pou idantifikasyon ak kontwòl kalite.

 

2 Enstriman ak Materyèl

2.1 Enstriman

U3000 sistèm HPLC (Thermo Fisher); UPL-111-20R sistèm dlo ultrapur (Sichuan Youpu); AB 265-S balans elektwonik (Mettler Toledo); KQ-5200DA ekstrè ultrasons / netwayaj (Kunshan Ultrasonic); GZX-9240MBE elektrik siye fou (Shanghai Boxun); UV-2600 UV–Vis spectrophotometer (Shimadzu, Lachin).

2.2 Dwòg ak reyaktif

FreCistanche tubulosa(Pakèt No . 20241008) te apwovizyone pa Xinjiang Congrongtang Biotechnology Co, Ltd ak otantifye pa chèchè Wang Guoping (Xinjiang Uygur Rejyon Otonòm Enstiti nan Materia Medica) kòm tij la charnèl nanCistanche tubulosa(Schenk) Wight (Orobachaceae).

Sibstans referans: D-glikoz anidrid (pakèt No . 361810, 100.00%, Shenzhen Jinhui Biotechnology co, Ltd.); echinakozid (pakèt No . 111670-201907), rutin (pakèt No . 100080-202012), acteoside (pakèt No . 11530-202315), cistanoside A (pakèt No . 313512), ak izoakteozid (pakèt No {. 313413), ak pite tès HPLC Pi gran pase oswa egal a 91.8%, 92.2.6%,%, 97.2. 98.09%, respektivman, nan Enstiti Nasyonal pou Kontwòl Manje ak Dwòg (Lachin).(Remak: yon liy pite tronke nan tèks yo bay la; sa ki pi wo a swiv pòsyon lizib la.)

Diven jòn diri (kalite semi-sèk, alkòl 16%; Zhejiang Guyuelongshan Shaoxing Wine Co., Ltd.); metanol ak asetonitrile (klas HPLC, Fisher Scientific, USA). Lòt reyaktif yo te nan klas analyse.

3 Metòd ak rezilta

3.1 Preparasyon nan tranch kri ak pwodwi trete nanCistanche tubulosa

Metòd sa yo te itilize pou prepare tranch kri ak pwodwi trete, yo chak nan 6 lo.

Tranch kri:FreCistanchete koupe an tranch 3 mm epi sèk nan 60 degre.

Metòd vapeur:Dapre literati [14], yo te melanje 20 g tranch pwòp ak 6 mL dlo distile nan yon veso ki fèmen, yo te mouye pou 4 èdtan [12], yo te kwit sou dlo pou 12 èdtan, yo te refwadi, epi yo te seche a 60 degre.

Metòd pou trete diven:Prepare dapre metòd diven-koute oswa diven-vapè (Règleman Jeneral 0213, Farmakope Chinwa).

Brase-pwosesis ak pwa nwa:Prepare selonChinwa Materia Medica(Zhonghua Bencao) anba Cistanches Herba; pwa nwa yo te ajoute nan 1 kg pou chak 10 kg nanCistanchemateryèl.

Pwosesis ji pwa nwa:Tranch yo te melanje ak ji pwa nwa ak Lè sa a, trete pa metòd la vapè pi wo a; dòz pwa nwa a te menm jan ak pi wo a.

3.2 Detèminasyon atik enspeksyon yo

Imidite te detèmine pa fou-seche (Règleman Jeneral 0832, Chinwa Pharmacopeia); total sann pa Règ Jeneral 2302; ekstrè ki ka fonn nan alkòl pa metòd maserasyon frèt anba Règ Jeneral 2201. Yo montre rezilta yo nan Tablo 1.

 

3.3 Analiz comparative HPLC Fingerprints deCistanche tubulosaak pwodwi trete li yo

3.3.1 Kondisyon kwomatografik

Waters Xterra RP18 kolòn (250 mm × 4.6 mm, 5 µm). Faz mobil: asetonitrile (A)-0.1% asid fòmik (B) ak elisyon gradyan: 0-12 min, 14% A → 17% A; 12-30 min, 17% A → 19% A; 30-35 min, 19% A → 14% A; 35-50 min, 14% A. Pousantaj koule: 1.0 mL·min⁻¹. Tanperati kolòn: 30 degre. Deteksyon longèdonn: 330 nm. Volim piki: 10 µL.

3.3.2 Preparasyon solisyon yo

Solisyon referans:Echinacoside, acteoside, cistanoside A, ak isoacteoside sibstans referans yo te byen peze ak fonn nan 50% metanol nan 10 mL flakon volumetrik pou jwenn solisyon nan 1.1301, 0.2294, 0.2255, ak 0.2109 mg·mL⁻, respektivman; filtre pou jwenn solisyon final yo.

Egzanp solisyon:0.5 g nan 80-may poud nan echantiyon anvan tout koreksyon ak trete yo te byen peze, ekstrè ak 50% metanol nan yon flakon volumetrik 25 mL, ultrasonicated (200 W, 40 kHz) pou 40 min, refwadi, melanje, pèmèt yo kanpe, ak filtre nan yon manbràn 0.22 µm; yo te itilize filtraj la.

3.3.3 Metòd Validasyon (Anprent)

3.3.3.1 Presizyon

Yo te enjekte menm solisyon echantiyon an sis fwa youn apre lòt. Sèvi ak echinacoside kòm pik referans, RSD nan tan retansyon relatif nan pik komen yo te<0.48% and the RSD of relative peak areas was <2.86%, indicating good instrumental precision.

3.3.3.2 Repetebilite

Sis solisyon echantiyon paralèl yo te prepare nan menm pakèt la (tranch anvan tout koreksyon S1). Sèvi ak echinacoside kòm pik referans, RSD nan tan retansyon relatif yo te<0.07% and the RSD of relative peak areas was <2.77%, indicating good method repeatability.

3.3.3.3 Estabilite

Yo te analize menm solisyon echantiyon an nan 0, 3, 6, 9, 12, ak 24 èdtan. Sèvi ak echinacoside kòm pik referans, RSD nan tan retansyon relatif yo te<0.11% and the RSD of relative peak areas was <2.33%, indicating stability within 24 h.

3.3.4 Etablisman anprent dwèt

Trant loCistanche tubulosaak pwodwi trete yo te analize. Yo te itilize "Sistèm Evalyasyon Resanblans pou Anprent Chromatografik Medsin Tradisyonèl Chinwa" (edisyon 2012). Yo te itilize tranch kri S1 ak tranch jòn-diven-vapè J1 kòm anprent referans; metòd la vle di ak yon lajè fenèt tan nan 0.1 min yo te aplike pou koreksyon miltipwen ak Mark pik matche jenere anprent dwèt (Figi 1-2), ak kromatogram kouvri ak estanda referans melanje yo te jwenn (Figi 3).

Rezilta yo te montre ke kat pwodwi yo trete te gen pwofil anprent ki sanble ak sa yo ki nan tranch anvan tout koreksyon. Tranch kri yo te gen 9 pik komen, pandan y ap diven-vapè, vapè, brase-pwosesis-ak-pwa-nwa, ak nwa-pwa-ji-trete tranch te gen 11 pik komen. Nèf pik komen yo te pataje pa tou de. Pik No. 2 ak No. 7 se te pik karakteristik ki fè distenksyon ant tranch kri ak pwodwi trete. Des anprent nan mitan kat pwodwi yo trete yo te menm jan an, epi yo pa t 'reflete klèman diferans nan mitan yo.

3.3.5 Analiz resanblans

Using J1 as the reference fingerprint, similarity analysis was performed for different processed products (Table 2). Similarities were all >0.9, ki endike karakteristik anprent menm jan an nan mitan diferan pwodwi trete.

3.3.6 Idantifikasyon pik komen yo

Lè yo konpare tan retansyon ak estanda referans melanje ak kwomatogram kri-tranch la, yo te idantifye kat pik kwomatografik: Peak 4, echinacoside; Pik 9, cistanoside A; Pik 10, acteoside; Pik 11, isoacteoside (Figi 2). Avèk pik 4 (echinacoside) kòm pik referans, valè RSD nan tan retansyon relatif nan pik komen nan mitan diferan pakèt kat pwodwi yo trete yo te varye ant 0.11% a 0.82%, ak valè RSD nan zòn pik relatif yo te varye ant 15.46% ak 76.07%.

3.3.7 Analiz Cluster

SPSS 27.0 te itilize pou analiz gwoup nan tranch anvan tout koreksyon ak pwodwi trete. Yo te aplike lyen ant gwoup yo epi yo te itilize distans kare Euclidean (Figi 4). Lè distans entè-klas la te<5, water-steamed slices and wine-steamed slices clustered together. When the inter-class distance was 10, raw slices and the four processed products were classified into three categories: raw materials (S1–S6) as one category; black-bean-juice-processed slices (H1–H6) as one category; and wine-steamed slices (J1–J6) together with water-steamed slices (Q1–Q6) and stir-processed-with-black-beans slices (C1–C6) as one category. When the inter-class distance was between 15 and 25, black-bean-juice-processed slices formed a separate cluster from the other samples.

3.3.8 Analiz Prensipal Konpozan

Apre normalisation nan zòn pik yo, PCA te fèt lè l sèvi avèk SPSS 27.0. Valè KMO a te 0.679 ak siyifikasyon tès Bartlett la te<0.001, indicating suitability for PCA. With eigenvalues >1, twa eleman prensipal yo te ekstrè ak pwòp valè 6.815, 1.987, ak 1.105. Pousantaj kontribisyon divèjans yo te 61,954%, 18,063%, ak 10,047%, respektivman, ak yon pousantaj kontribisyon kimilatif 90,064% (Tablo 3). Sa a endike ke premye eleman prensipal la se endikatè ki pi enpòtan pou nòt konplè a.

Matris eleman an te montre ke nan premye eleman prensipal la, koyefisyan absoli varyab zòn pik yo pou Pik 2–9 ak Pik 11 yo te relativman gwo, sa ki sijere gwo enfliyans sou F1. Dezyèm eleman prensipal la te gen rapò ak enfòmasyon Pik 1 ak 10, epi twazyèm eleman prensipal la te gen rapò ak Pik 1. Yo montre matris la nan Tablo 4; yo montre trase scree la ak trase loading nan Figi 5 ak 6. Sèvi ak nòt twa konpozan prensipal yo ak pousantaj kontribisyon divèjans yo kòm pwa pou ponderasyon lineyè, yo te kalkile nòt konplè (Tablo 5), ki endike ke nwa-pwa-ji-traite tranch, tranch dlo-vapè, ak diven-tranch ki pi wo.

 

3.4 Detèminasyon HPLC nan plizyè konstitiyan nanCistanche tubulosaak pwodwi trete li yo

3.4.1 Kondisyon kwomatografik ak spesifik

Kondisyon kwomatografik yo te menm jan ak sa yo itilize pou anprent. Solisyon echantiyon, solisyon referans, ak solisyon vid negatif (diven jòn diri, dlo pirifye, ji pwa nwa) yo chak te sou fòm piki (10 µL). Tan retansyon yo te konpare. Solisyon vid negatif yo pa montre okenn entèferans ak echinacoside, cistanoside A, acteoside, ak isoacteoside.[Tèks ki manke nan sous]

3.4.2 Linearite

Solisyon referans nan echinacoside, acteoside, cistanoside A, ak isoacteoside nan konsantrasyon nan 1.1301, 0.2294, 0.2255, ak 0.2109 mg·mL⁻¹ yo te byen pipete nan 1, 2, 4, 8, 10, ak 16µL injected. Regression lineyè te fèt ak zòn pik XXX kont konsantrasyon sou fòm piki YYY (mg·mL⁻¹). Ekwasyon lineyè ak chenn yo montre nan Tablo 6.

3.4.3 Presizyon

Yo te enjekte menm solisyon echantiyon an sis fwa youn apre lòt. Valè RSD nan kontni pou kat analit yo (echinacoside, cistanoside A, acteoside, isoacteoside) te 0.23%, 2.71%, 0.53%, ak 2.08%, respektivman (Tablo 7), tout<3%, indicating good instrumental precision.

3.4.4 Repetebilite

Sis solisyon echantiyon paralèl yo te prepare nan menm pakèt la (tranch anvan tout koreksyon S1). Valè RSD nan kontni pou kat analit yo te 0.22%, 2.46%, 0.50%, ak 2.46%, respektivman (Tablo 7), tout<3%, indicating good repeatability.

3.4.5 Estabilite (Antrajou)

Yo te analize menm solisyon echantiyon an nan 0, 3, 6, 9, 12, ak 24 èdtan. Valè RSD nan kontni pou kat analit yo te 0.80%, 1.62%, 1.72%, ak 1.49%, respektivman (Tablo 7), tout<2.0%, indicating stability within 24 h.

3.4.6 Estabilite (Entè-jou)

Yo te analize menm solisyon echantiyon an pandan senk jou youn apre lòt. Valè RSD nan kontni pou kat analit yo sou senk jou yo te 2.80%, 2.53%, 3.53%, ak 2.88%, respektivman (Tablo 7), ki endike estabilite nan senk jou.

3.4.7 Rekiperasyon

Yon kantite lajan apwopriye nanCistanche tubulosaechantiyon yo te peze, ak estanda referans nan echinacoside, acteoside, cistanoside A, ak isoacteoside te spiked nan yon rapò 1: 1. Yo te prepare sis solisyon echantiyon paralèl ak analize (10 µL piki). Rekiperasyon mwayen yo te 99.29%, 98.75%, 99.45%, ak 96.13% (n=6), ak valè RSD nan 2.51%, 0.38%, 1.71%, ak 0.49%, respektivman.

3.4.8 Rezilta Detèminasyon

Pou chak echantiyon, yo te peze 0.5 g poud avèk presizyon; Yo te enjekte 10 µL pou detèmine ak kalkile kontni pousantaj kat eleman yo. Rezilta yo montre nan Figi 7–10.

 

3.5 Detèminasyon total glikozid feniletanoid, total polisakarid, ak total flavonoid

3.5.1 Detèminasyon Total Phenylethanoid Glikozid

3.5.1.1 Preparasyon Solisyon Referans

Yon kantite apwopriye sibstans referans echinacoside te byen peze epi fonn nan metanol nan yon flakon volumetrik 10 mL pou jwenn yon solisyon ak yon konsantrasyon 0.32 mg·mL⁻¹. Dapre literati a [15], 0.1, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, 1.0, ak 1.2 mL nan solisyon referans yo te pipette, dilye nan 10 mL ak metanol, ak absorpsyon (A) te mezire nan 333 nm. Ekwasyon koub estanda ki adapte a se te Y=24.7596X+0.0147Y=24.7596X + 0.0147Y=24.7596X{+0.0147, R2=0.9995R^2=0.9995R2=0.9995, ak yon seri lineyè 0.0029–0.0359 mg.·mL.

3.5.1.2 Preparasyon Egzanp Solisyon

Yo te peze 100 mg echantiyon poud (pase nan yon Van 100 may) avèk presizyon, ekstrè ultrasons ak metanol pou 30 min (200 W, 40 kHz), dilye a 10 mL, epi filtre nan yon manbràn 0.22 µm. Lè sa a, 0.2 mL nan filtrate te plis dilye nan 10 mL ak metanol ak melanje pou analiz.

3.5.1.3 Detèminasyon

Pou chak echantiyon, yo te itilize 100 mg poud pou prepare solisyon echantiyon an. Yo te mezire absorpsyon nan 333 nm epi yo te kalkile kontni pousantaj total glikozid feniletanoid (Tablo 9).

Ekwasyon (1):
Kontni (%) =C×V×Dm×100%= \\dfrac{C \\times V \\times D}{m} \\times 100\\%{=mC×V×D​×100%
kote CCC se konsantrasyon analit la nan solisyon echantiyon an, VVV se volim dilution, DDD se faktè dilution, ak mmm se mas echantiyon an (mg).

3.5.2 Detèminasyon total polisakarid

3.5.2.1 Preparasyon Solisyon Referans

Yo te peze yon kantite apwopriye nan sibstans referans anidrid D-glikoz ak presizyon, fonn nan dlo pirifye, epi dilye a 10 mL pou jwenn yon solisyon 0.190 mg·mL⁻¹. Apre melanje ak filtraj (0.22 µm), 0.2, 0.4, 0.6, 0.8, ak 1.0 mL yo te pipette. Devlopman koulè te fèt pa metòd anthrone-asid silfirik [16]. Absorbans te mezire nan 625 nm. Ekwasyon koub estanda ekipe a te Y=35.1316X−0.0079Y=35.1316X - 0.0079Y=35.1316X−0.0079, R{2=0.9957R^{2=0.9957R{2=0.9957, ak yon seri lineyè 0.0038–0.0190¹·m.

3.5.2.2 Preparasyon Egzanp Solisyon

40 mg echantiyon poud te byen peze, ultrasons fonn nan dlo pirifye pou 30 min (200 W, 40 kHz), dilye a 10 mL, epi filtre nan yon manbràn 0.22 µm.

3.5.2.3 Detèminasyon

Pou chak echantiyon, yo te itilize 40 mg pou prepare solisyon echantiyon an. Lè sa a, 0.1 mL filtraj te pipette ak konplete ak dlo pirifye a 2.00 mL. Apre devlopman koulè pa metòd anthrone-asid silfirik, yo te mezire absorbans epi yo te kalkile kontni pousantaj total polisakarid (Tablo 8).

3.5.3 Detèminasyon Flavonoid Total

3.5.3.1 Preparasyon Solisyon Referans

Yon kantite apwopriye nan sibstans referans rutin te byen peze, fonn nan 70% etanòl, ak dilye nan 25 mL; filtre atravè yon manbràn 0.22 µm. Lè sa a, 0.5, 1.0, 2.0, 3.0, ak 4.0 mL yo te pipette. Devlopman koulè yo te fèt lè l sèvi avèk metòd la nitrite sodyòm - nitrat aliminyòm - idroksid sodyòm [17]. Absorbans te mezire nan 510 nm. Ekwasyon koub estanda adapte a te Y=11.5699X+0.0684Y=11.5699X + 0.0684Y=11.5699X{+0.0684, R2=0.9989R^2=0.9989R{2=0.9989, ak yon seri lineyè 0.0097–0.07386 mg¹ L⻁¹.

3.5.3.2 Preparasyon Egzanp Solisyon

50 mg poud te byen peze, ultrasons fonn nan etanòl 70% pou 30 min (200 W, 40 kHz), dilye a 10 mL, epi filtre nan yon manbràn 0.22 µm.

3.5.3.3 Detèminasyon

Pou chak echantiyon, yo te itilize 50 mg pou prepare solisyon echantiyon an. Lè sa a, 0.5 mL filtraj yo te transfere nan yon flakon volumetrik 10 mL ak reyaktif koulè yo te ajoute nan sekans jan pi wo a. Dlo pirifye te sèvi kòm vid la. Yo te mezire absorpsyon epi yo te kalkile kontni pousantaj total flavonoid (Tablo 8).

 

4 Diskisyon

Nan etid sa a, HPLC anprent dwèt nanCistanche tubulosa and its various processed products were established. Peak matching across different batches confirmed 9 common peaks in raw slices and 11 common peaks in processed products. By comparison with reference standards, four common peaks were identified as echinacoside, cistanoside A, acteoside, and isoacteoside. Similarity analysis showed that similarity values among four processed products were all >0.9, ak pwofil anprent yo an jeneral yo te menm jan an, ki endike ke kalite konstitiyan yo te fèmen. Sepandan, gwo diferans ki genyen nan RSD nan zòn pik relatif yo sijere diferans remakab nan kontni konstitiyan yo.

Konpare ak tranch anvan tout koreksyon, kat pwodwi yo trete ekspoze de pik adisyonèl (Pik 2 ak 7), ki endike ke konstitiyan chimik chanje apre diven-vapeur, dlo-vapè, oswa pwosesis nwa-pwa. Pik sa yo ki fèk pwodwi yo sipoze fòme pandan pwosesis la; karakterizasyon eleman yo pral adrese nan etid ki vin apre yo.

CA rezilta te montre ke lè distans ant klas la te<5, wine-steamed and water-steamed slices clustered together, suggesting similar chemical composition and content. At an inter-class distance of 10, raw slices could be separated from black-bean-juice-processed slices, stir-processed-with-black-beans slices, and wine/water-steamed slices. At inter-class distances of 15–25, differences between black-bean-juice-processed slices and other samples became more prominent. PCA results indicated that three principal components had substantial influence on comprehensive evaluation.

Diferan metòd pwosesis dirèkteman afekte nivo divès elektè yo. Ki baze sou detèminasyon chimyometrik, glikozid fenilethanoid total yo klase kòm: nwa-pwa-ji-trete > tranch kri > dlo-vapè > diven-vapè > brase-pwosesis-ak-pwa-nwa. Total polisakarid klase kòm: dlo-vapè > diven-vapè > brase-pwosesis-ak-pwa-nwa > nwa-pwa-ji-trete > tranch kri. Flavonoid total klase kòm: ji pwa nwa-trete > dlo-vapè > brase-pwosesis-ak-pwa-nwa > diven-vapè > tranch kri. Konpare ak tranch anvan tout koreksyon, pwosesis nwa-pwa-ji ogmante glikozid feniletanoid total, tandiske lòt metòd pwosesis diminye li; tout kat metòd pwosesis siyifikativman ogmante total de polisakarid ak flavonoid total. Ant de metòd nwa-pwa yo, pwosesis ji nwa-pwa-pwodwi pi gwo ogmantasyon nan glikozid phenylethanoid total ak flavonoid total pase brase-pwosesis ak pwa nwa, ak diferans estatistik.

 

Tablo 8. Rezilta detèminasyon total glikozid feniletanoid, total polisakarid, ak total flavonoid nanCistanche tubulosaak pwodwi trete li yo

Pwodui trete (moso dekoksyon)	Total glikozid feniletanoid (%)	Total polisakarid (%)	Flavonoid total (%)
Tranch kri	6.81 ± 0.06	5.85 ± 0.10	14.16 ± 0.24
Diven-vapè tranch	5.10 ± 0.05***	6.61 ± 0.05***	20.84 ± 0.33***
Tranch dlo-vapè	5.23 ± 0.05***	6.70 ± 0.15***	21.59 ± 0.37***
Brase-trete ak tranch pwa nwa	3.80 ± 0.02***	6.56 ± 0.09***	21.02 ± 0.35***
Nwa-pwa-ji-trete tranch	7.07 ± 0.09****	6.09 ± 0.03****	24.26 ± 0.18****

Nòt: Konpare ak tranch anvan tout koreksyon: * P < 0.05, ** P < 0.01, *** P < 0.001; konpare ak brase-trete-ak-nwa-pwa tranch: *P <0.05, **P <0.01, ***P <0.001.

Echinacoside, acteoside, cistanoside A, ak isoacteoside se kle phenylethanoid glikozid kontribye nan efè ren-tonifying ak sans-benefis nan.Cistanche tubulosa. Konparezon HPLC nan kat elektè sa yo te montre ke diferans pik-zòn nan mitan pik komen yo ta ka sèvi kòm yon baz yo fè distenksyon ant diferan pwodwi trete. Konpare ak tranch anvan tout koreksyon, echinacoside, cistanoside A, ak isoacteoside ogmante nan diferan degre nan pwodwi trete, ak ogmantasyon pi pwononse nan pwodwi ji nwa pwa. Acteoside diminye nan twa pwodwi trete men ogmante nan pwodwi brase-trete-ak-pwa-nwa. Sa a ka gen rapò ak estabilite nannan nan acteoside: kòm yon diglycoside phenylethanoid ak yon moety caffeoyl, li ka sibi klivaj kosyon ester anba chanjman nan tanperati chofaj, tan, ak pH jenere asid kafeyik, ak pasyèlman izomerize nan isoacteoside. Diminisyon yo obsève nan acteoside ak ogmantasyon nan isoacteoside nan kat pwodwi yo trete yo ka asosye ak wo-tanperati vapeur, ki konsistan avèk modèl yo rapòte pou pwosesis Rehmanniae Radix [18].

Echinacoside ogmante apre diven/dlo vapeur ak pwosesis nwa-pwa nan etid sa a, ki se kontrè ak Zhang Chao et al. [12]. Konpare pwosesis brase-pwosesis ak pwa nwa ak pwosesis nwa-pwa-ji, lèt la te montre siyifikativman pi wo sa ki nan echinacoside ak cistanoside A ak yon tandans konvèsyon pi pwononse soti nan acteoside isoacteoside. An jeneral, etid sa a revele chanjman konpozisyon ak kontni apre plizyè metòd pwosesis epi verifye chanjman ki genyen ant acteoside ak isoacteoside. Anprent HPLC yo bay yon metòd syantifik pou idantifye tranch anvan tout koreksyon ak pwodwi trete, epi yo ofri yon referans pou etabli estanda kontwòl kalite ak pou analiz kalitatif ak quantitative.

 

Konfli enterè

Otè yo pa deklare okenn konfli enterè.

Kontribisyon otè

XU Xiaoqin: sipò pwojè, konsepsyon etid, detèminasyon eksperimantal, ak ekri maniskri;
QING Degang: kowòdinasyon jeneral ak koleksyon materyèl medsin;
ZHANG Juan ak ZHAO Peng'an: detèminasyon konstitiyan ak analiz done;
WANG Guoping: otantifikasyon materyèl medsin.

 

Faktori echantiyon Cistanche:

https://www.xjcistanche.com/about-us

 

 

Referans

[1] Komisyon Farmakope nan Ministè Sante nan Repiblik Pèp la nan Lachin.Farmakope Repiblik Pèp la nan Lachin[M]. Beijing: Chemical Industry Press, 2025.
[2] Jia Xiaoguang, Ni Hui, Zhang Juan, et al. Rechèch ak devlopman endistriyèl estati nanCistanche tubulosa [J]. Jounal Inivèsite Medikal Xinjiang, 2012, 35(7): 876–880.
[3] Liu Yuewen. Pwogrè rechèch sou glikozid phenylethanoid nanCistanche tubulosa [J]. Machin agrikòl kontanporen, 2020(11): 60–62.
[4] Tu Pengfei. Re-egzamen nan prèv la tèks èrbal pou Cistanches Herba [J].Lachin Journal of Chinese Materia Medica, 2022, 47(20): 5670–5679.
[5] Zhu Su, Teng Shuo, Liu Chun.Puji Fang[M]. Beijing: People's Medical Publishing House, 1959.
[6] Wang Huaiyin.Taiping Shenghui Fang[M]. Beijing: People's Medical Publishing House, 1959.
[7] Tang Shenwei.Chongxiu Zhenghe Jingshi Zhenglei Beiyong Bencao[M]. Beijing: People's Medical Publishing House, 1957.
[8] Zhang Yong, Wu Huan. Evolisyon istorik nan metòd pwosesis pou Cistanches Herba [J].Lachin Journal of Chinese Materia Medica, 1992, 17(4): 213–214.
[9] Cai Hong, Bao Zhong, Jiang Yong. Teknoloji pwosesis pou freCistanche tubulosa [J]. Lachin Journal of Chinese Materia Medica, 2007, 32(13): 1289–1291.
[10] Tie Xiaoyan, Feng Yinping, Ma Dongni. Efè orijin-zòn pwosesis vapeur sou bon jan kalite a nan dezè Cistanches Herba [J].Journal of Tradisyonèl Chinwa Veterinè Medsin, 2021, 40(2): 54–56.
[11] Chen Weijun, Jia Cuiyu, Li Lianjiang. Efè metòd pwosesis diferan sou kontni betaine nan XinjiangCistanche tubulosa [J]. Medikaman Reklamasyon Agrikòl, 2009, 31(5): 400–402.
[12] Zhang Chao, Hua Yue, Lian Jing, et al. Etid sou varyasyon kontni规律 nan glikozid phenylethanoid pandan pwosesis Cistanches Herba [J].Chinese Journal of Enfòmasyon sou Medsin Tradisyonèl Chinwa, 2022, 29(4): 92–97.
[13] Wu Chunxing, Yang Yang, Meng Mei, et al. Estati rechèch ak analiz tandans nan anprent TCM nan deseni ki sot pase a [J].Journal of Minzu University of China (Edisyon Syans Natirèl), 2024, 33(4): 63–72.
[14] Jiang Yong, Bao Zhong, Sun Yongqiang. Etid sou teknoloji pwosesis Cistanches Herba tranch [J].Chinwa famasetik jounal, 2011, 46(14): 1074–1076.
[15] Zhang Leihong, Du Niansheng, Wang Qing. Detèminasyon glikozid phenylethanoid nan Cistanches Herba total glycoside kapsil pa UV spectrophotometry [J].Jounal Inivèsite Medikal Xinjiang, 2002, 25(4): 407–408.
[16] Ailadan·Maimaiti Aili, Yang Ting, Yuan Jie. Pwosesis ekstraksyon ak in vitro aktivite antioksidan nan polisakarid soti nan résidus nanCistanche tubulosa [J]. Jeni chimik ak byochimik chak trimès(Tradui non jounal ki baze sou Chinwa), 2020, 37(2): 36–41.
[17] Luo Yan. Optimizasyon nan pwosesis ekstraksyon nan flavonoid total soti nanCistanche tubulosa[D]. Shihezi: Inivèsite Shihezi, 2015.
[18] Shan Guoshun, Zhao Qimiao, Li Rui, et al. Etid dinamik nan kontni acteoside pandan pwosesis laRehmannia glutinosa [J]. Azi-Pasifik Medsin Tradisyonèl, 2019, 15(3): 37–39.