Analiz eleman ak aktivite antioksidan nan polisakarid soti nan Cistanche Deserticola

Résumé: nan papye sa a, polisakarid sont extraits deCistanche deserticola, Cistanche deserticolabritpolisakaridCLP se pirifye pa DEAE seluloz kolòn chromatografi, ak sik net CLP ak sik asid CLP2 nan Cistanche deserticola yo jwenn, kontni an nan sik total, asid uronik ak pwoteyin nanCistanche deserticola brut polisakaridCLP, Cistanche deserticola net sik CLPl akCistanche deserticola sik asidCLP2 detèmine pa optik UV espèk, epi yo detèmine pwa molekilè ak konpozisyon monosakarid polisakarid yo. An menm tan an, DPPH radikal scavenging kapasite ak total antioksidan kapasite Cistanche deserticola brut polisakarid CLP, Cistanche deserticola net sik CLP1 ak Cistanche deserticola asid sik Cl.P2 yo analize. Done yo mezire montre ke eleman yo nan Cistanche deserticola crud polisakarid CLP, Cistanche deserticola net sik CLP1 ak Cistanche deserticola asid sugarCLP2 yo sanble, men gen gwo diferans nan kontni yo, Pik elisyon miltip ka jwenn lè Cistanche deserticola net sik CLP1 ak Cistanche. deserticola asid sik CLP2 yo separe ak pirifye pa kolòn chromatographic DEAE seluloz, ak distribisyon pwa molekilè se 0 ~ 10 000 Da, ki endike ke eleman prensipal yo nan polisakarid Cistanche deserticola yo se ti sik molekilè. Rezilta yo detèminasyon monosakarid nan Cistanche deserticola sik net CLPl montre ke monosakarid yo nan Cistanche deserticola sik net CLP1 se sitou mannoz, asid galakturonik, glikoz, galaktoz, ak arabinoz. sik asid ClP2 yo se sitou rhamnose, asid galakturonik, glikoz ak galaktoz, rezilta yo nan DPPH radikal scavenging eksperyans ak total kapasite antioksidan eksperyans nan polisakarid soti nan Cistanche deserticola montre ke kapasite nan antioksidan nan Cistanche deserticola net sugarCLPl pi wo pase sa yo ki nan Cistanche deserticola polisakarid brit. CLP ak Cistanche deserticola sik asid CLP2.

Mo kle:Cistanche deserticola; polisakarid; analiz eleman;aktivite antioksidan; absorbans.

cistanche tubulosa

Jwenn Cistanche Tubulosa ekstrè pou yon efè vize

Cistanchese yon plant èrbeuz parazit ki gen yon gwo kantiteglikozid fenoliks, byosentèz,glikozid feniletanoid, sik, ak alkòl. Glikan yo sitou nan fòm polisakarid. Polisakarid Cistanche gen yon gwo fonksyon iminitè ki kontwole aktivite [1-2].

Kòm metabolit entèmedyè nan aktivite lavi moun, radikal gratis yo nan yon eta enstab ki estab epi yo gen gwo entansite nan aktivite oksidatif, ki ka lakòz makromolekil byolojik, Se poutèt sa, itilize nan antioksidan natirèl Se poutèt sa, itilize nan sibstans ki sou antioksidan natirèl pou retire radikal gratis. vin direksyon prensipal rechèch manje aktyèl la. Konpozisyon an polisakarid nanCistanchegen yon kapasite antioksidan fò, sa ki ka ankouraje scavenging nan radikal gratis nan kò imen an. Konpozisyon polisakarid Cistanches gen yon gwo kapasite antioksidan epi li ka ankouraje elimine radikal gratis nan kò imen an [3].

Nan papye sa a, lapolisakaridnan Cistanche stannic yo te ekstrè ak klase pa pèmeyasyon jèl segondè-efikasite. Pwa molekilè polisakarid nan Cistanche te detèmine pa kwomatografi segondè-pèfòmans jèl permeation. Pwa molekilè nan polisakarid yo nan Cistanche te detèmine pa chromatografi segondè-pèfòmans jèl permeation, ak konpozisyon nan polisakarid yo te tou Pwa molekilè nan polisakarid yo nan Cistanche te detèmine pa segondè-pèfòmans jèl permeation chromatografi, ak konpozisyon an nan polisakarid yo te. analize.

Aktivite antioksidan Cistanche te analize pa detèmine pouvwa a radikal gratis scavenging ak total kapasite antioksidan nan eleman yo polisakarid. Nou te detèmine tou kapasite pou retire radikal gratis ak kapasite total antioksidan nan konpozan polisakarid Cistanch, epi nou te bay yon baz teyorik pou devlopman ak itilizasyon Cistanche ak valè te ajoute li yo.

cistanche tubulosa

1 Egzanp preparasyon ak ekstraksyon sibstans polisakarid nan Cistanche

Peze 2.5kg Cistanche, koupe li, ajoute 12.5L dlo distile epi bouyi li pou 3h. Apre yo fin bouyi pou 3h, yo te kolekte filtraj la ak ajoute nan etanòl 75 pousan, epi kite kanpe pou 24h. Apre yo fin bouyi, yo te kolekte filtraj la nan filtraj, ajoute nan 75 pousan etanòl epi kite kanpe pou 24 èdtan, santrifuje nan 4000r / min pou 30min, epi yo te presipite a kolekte. Te presipite a kolekte, jele epi sèk pou jwenn Cistanche polisakarid bit CLP [4]. Te presipite a seche friz pou jwenn polisakarid brit CLP nan Cistanche [4]. Yo te pran DEAE seluloz, tranpe ak anfle, degaze Li te chaje sou yon kolòn echanj aniyon DEAE seluloz epi ekilibre ak dlo distile ak solisyon NaCl. Yo te itilize dlo ak solisyon NaCl pou ekilib. Peze 100 mg nan polisakarid brit nan Cistanche tubulosa CLP te fonn nan 10 mL nan dlo distile, epi yo te eluate a kolekte apre elisyon ak dlo distile.

Eluate a te kolekte apre elisyon ak dlo distile ak friz-seche pa konsantrasyon jwenn sik net CLP1 nan Cistanche; Eluate a te kolekte apre elisyon ak solisyon NaCl, ak Lè sa a, konsantre ak friz-seche apre dyaliz yo jwenn Cistanche asid sik CLP1. Apre elisyon ak solisyon NaCl, eluate a te kolekte epi konsantre pa dyaliz ak friz-seche pou jwenn Cistanche asid sik CLP2 [5].

Sik net CLP1 ak sik asid CLP2 nan Cistanche tubulosa yo te prepare nan yon konsantrasyon 1 mg / kg, respektivman. Solisyon polisakarid yo te prepare nan yon konsantrasyon 1 mg/mL, epi polisakarid yo te analize pa espektroskopi UV lè l sèvi avèk yon espektrofotomèt nan 210-600 nm. Yo te analize spectre UV yo lè l sèvi avèk yon espektrofotomèt nan 210-600 nm, epi lè pik la parèt nan 260-280 nm Lè pik la parèt nan 260-280 nm, yo te pwouve solisyon an gen pwoteyin ak asid nikleyik. [6].

2 Detèminasyon konpozisyon sibstans polisakarid Cistanche

Metòd asid fenol-sulfurik te itilize pou detèmine kontni total sik nan echantiyon Cistanche yo. Yo te mezire solisyon glikoz 0.1 mg/mL, 0.2, 0.4, 0.6, 0.8 ak 1 mL. an vè tib tès, ak dlo distile te ajoute pou ranje volim nan 1 mL. Lè sa a, 0.5 mL reyaktif fenol ak 2.5 mL asid silfirik konsantre ak 6 pousan konsantrasyon yo te ajoute nan tib tès yo, byen souke epi refwadi nan tanperati chanm. Yo te mezire absorpsyon an nan 490 nm lè l sèvi avèk yon espektrofotomèt, epi yo te trase koub estanda a ak kontni an sik kòm kowòdone orizontal la ak absorpsyon kòm kowòdone vètikal la, epi yo te kalkile ekwasyon an regression [7-8].

Kontni pwoteyin echantiyon Cistanche yo te detèmine ak metòd Komas Brilliant Blue. Kontni pwoteyin echantiyon yo te mezire pa espektrofotomèt la nan 495 nm epi yo te kalkile kontni an pwoteyin dapre ekwasyon koub estanda a [9].

Kontni glyoxalate nan echantiyon Cistanche yo te detèmine lè l sèvi avèk metòd m-hydroxyphenyl la. Diferan konsantrasyon estanda a ak 0.4 mL nan solisyon echantiyon an ak yon konsantrasyon 0.1 mg/mL yo te ajoute nan tib tès la ak 2.5 mL nan asid silfirik konsantre, souke.

Yo te ajoute konsantrasyon m-hydroxybiphenyl ak 0.5 pousan solisyon idroksid sodyòm nan tib tès la, byen souke epi kite pou 30 min. Yo te mezire absorbans nan 525 nm pa espektwofotomèt, epi yo te kalkile kantite glyoxalate nan echantiyon an dapre ekwasyon koub estanda a [10-11]. Pwa molekilè relatif nan polisakarid Cistanche te detèmine pa kwomatografi jèl segondè-pèfòmans, ak konpozisyon monosakarid nan Cistanche te detèmine pa segondè pèfòmans likid kromatografi. Konpozisyon monosakarid Cistanche te detèmine pa segondè-pèfòmans likid chromatografi [12].

cistanche tubulosa

3 Rezilta ak analiz konpozisyon polisakarid Cistanche Tubulosa

Soti nan Fig. 1, li ka wè ke sik net CLP1 nan Cistanche Tubulosa te montre yon pik absòpsyon evidan nan 280nm, pandan y ap sik la asid CLP2 nan Cistanche Tubulosa pa t 'gen yon pik absòpsyon evidan nan 260-280 nm, men an. UV absòpsyon spectre te pi wo. Depi triptofan ak tirozin ki genyen nan pwoteyin yo te gen pi gwo valè absòpsyon pou UV nan 280 nm, li ta ka jije ke Cistanche net sik CLP1 te genyen glikoprotein, men li pa t 'kapab jije si Cistanche asid sik CLP2 genyen asid nikleyik ak pwoteyin.

Li pa posib pou detèmine si sik asid CLP2 nan Cistanche gen asid nikleyik ak pwoteyin.

DEAE cellulose negatif ion echanj chromatografi kolòn analiz ka adsorb sibstans iyonik ak enpurte sou kolòn nan reyalize separasyon an nan sibstans ki sou polisakarid, epi apre yo fin konsantre ak siye eluate dlo a distile, yo te jwenn yon total de 34.68 mg nan Cistanche net sik CLP1, epi apre yo fin lè l sèvi avèk NaCl solisyon pou elite ak konsantre epi sèk, yo te jwenn yon total de 16.52 mg Cistanche asid sik CLP2. Ekwasyon koub estanda nan kontni total sik, kontni pwoteyin ak ekwasyon koub estanda glyoxylate. Yo te jwenn mezi sik total, pwoteyin ak glyoxylate nan Cistanche. Yo te mezire total sik, pwoteyin ak asid glukuronik nan Cistanche epi yo montre nan Tablo 1.

Koub optik spectre UV fotomèt la soti nan 210 a 600 nm montre nan Figi 1.

cistanche tubulosa

Soti nan Fig. 1, li ka wè ke Cistanche sik netrofil CLP1 te montre yon pik absòpsyon klè nan 280 nm, pandan y ap Cistanche sik asid CLP2 te montre yon pik absòpsyon nan 260-280 nm. ak sik asid CLP2 nan Cistanche Tubulosa te montre yon pik absòpsyon klè nan 260-280 nm. Malgre ke pa te gen okenn pik absòpsyon evidan nan 260-280 nm, spectre absòpsyon UV la te pi wo. Depi triptofan ak tirozin ki genyen nan pwoteyin yo te gen yon pi gwo valè absòpsyon nan 280 nm pou valè absòpsyon UV, li ka jije ke Cistanche netrofil sik CLP1 te genyen glikoprotein, men li pa t posib pou detèmine si Cistanche asid sik CLP2 te genyen asid nikleyik ak pwoteyin. . Prezans asid nikleyik ak pwoteyin nan Cistanche CLP2 pa t 'kapab detèmine.

DEAE cellulose negatif ion echanj chromatografi kolòn analiz ka adsorb sibstans iyonik ak enpurte nan kolòn nan. Separasyon an nan sibstans ki sou polisakarid yo te reyalize pa adsorbing sibstans yo iyonik ak enpurte sou kolòn nan. Eluate dlo distile a te konsantre epi seche pou jwenn sik net nan Cistanche Apre konsantre ak siye eluate dlo distile a, yo te jwenn yon total de 34.68 mg CLP1, epi apre konsantre ak siye ak solisyon NaCl, yo te jwenn sik asid CLP1. Sik asid CLP2 nan Cistanche te jwenn kòm 16.52 mg. Yo te jwenn ekwasyon koub estanda nan kontni total sik, kontni pwoteyin ak kontni glyoxylate nan Cistanche. ak ekwasyon koub estanda glyoxylate. Yo te jwenn mezi sik total, pwoteyin ak glyoxylate nan Cistanche. Yo te mezire total sik, pwoteyin ak asid glukuronik nan Cistanche epi yo montre nan Tablo 1.

Tablo 1 Kontni sik total, pwoteyin ak asid uronik nan Cistanche deserticola

cistanche tubulosa

Yo ka detèmine pwa molekilè ak zòn pik echantiyon estanda a, epi yo ka jwenn ekwasyon regresyon an regression pa ranplase siyal emisyon limyè echantiyon an pou teste nan ekwasyon regresyon an. Ou ka jwenn pwa molekilè echantiyon yo dwe teste a. Pwa molekilè echantiyon yo dwe teste yo ka jwenn lè w ranplase valè siyal emisyon limyè echantiyon yo dwe teste nan ekwasyon regression. Pwa molekilè mwayèn, pwa mwayèn lou molekilè ak koyefisyan dispèsyon nan Cistanche Tubulosa CLP1 ak Cistanche Tubulosa CLP2 yo te jwenn. Cistanche net sik CLP1 ak Cistanche asid CLP2 yo te detèmine pa kwomatografi segondè-pèfòmans jèl permeation. Rezilta yo nan tan an retansyon ak kalkil pwa molekilè yo montre nan Tablo 2. Yo te itilize rapò a nan pwa a lou mwayèn molekilè ak kantite mwayèn pwa molekilè a pou endike lajè a nan distribisyon an molekilè. Rapò pwa molekilè mwayèn lou ak pwa molekilè mwayèn nimewo yo itilize pou endike lajè distribisyon molekilè a.

cistanche tubulosa