Polisakarid brit ki soti nan Cistanche Deserticola YC Ma kòm yon iminoregulatè ak yon adjuvan pou vaksen kont maladi aftye-bouch.

Pou plis tanpri kontakteoscar.xiao@wecistanche.compou plis

Résumé

Cistanche deserticola YC Ma (CD) se remèd fèy ideyal pou pwoblèm sante. Nan etid sa a, aktivite modulateur nan CPCD sou aktiveselil dendritik(DCs) ak potansyèl adjuvant pou vaksen maladi pye ak bouch (FMDV) te evalye. CPCD san yo pasitotoksisitepwovoke deklanchman DC atravè upregulating makè yo fenotip ak absorption antijèn. Antikò TLR{-2 oswa TLR{-4 siprime nivo CD40 ak CD86 ki te medyatè CPCD ak IL-6 ak IL-1 nan DCs. CPCD pwovoke fosforilasyon molekil ki gen rapò ak MAPK yo ak NF-κB. Lè ko-enjekte nan miskilè ak FMDV nan sourit, CPCD ogmante antikò FMDV-espesifik, pwopagasyon lenfosit, efektè T-selil. Espesyalman, CPCD te pwovoke repons Th1, jan sa endike nan pi wo ekspresyon CD4 plis IFN-, CD8 plis IFN-, ak repons CTL. CPCD amelyore ekspresyon MHC-II, CD80, CD86, ak CD40 nan DCs ak bese frekans Tregs. Se poutèt sa, CPCD ta ka efektivman estimile pi fò repons umoral ak selilè pa modulation deklanchman DC atravè MAPK ki gen rapò ak TLR-2/TLR{-4 ak chemen NF-κB.

Tanpri klike la a pou w konnen plis

Entwodiksyon

Pifò nan yopolisakaridsòti nan remèd fèy medsin yo te atire ogmante enterè nan jaden an nan adjuvant akòz toksisite ki ba yo ak gwo spectre rapèl iminitè a (Chen & Huang, 2018; He et al., 2020). Anpil envestigatè te itilize avèk siksè remèd fèy medsin kòm kandida adjuvant pou anpil vaksen. Polisakarid tipik ki gen ladan polisakarid Astragalus, polisakarid Panax ginseng, polisakarid Poria cocos, ak lentinan yo te lajman itilize kòm adjuvant pou vaksen plizyè maladi enfeksyon (P. Li & Wang, 2015; Rey Ladino, Ross, Cripps, McManus, & Quinn). 2011; B. Solèy et al., 2018). Cistanche deserticola YC Ma (C. deserticola, "Rou Cong-Rong" nan Chinese) te tradisyonèlman itilize kòm yon sipleman èrbal tonik pou tretman maladi nan Medsin Tradisyonèl Chinwa (TCM) dapre Chinwa Pharmacopeia pou syèk (S. Li). , Wu, & Le, 2021; Yong & Tu, 2009). An vivo ak in vitro etid yo te revele ke C. deserticola extraits ekspoze anpilfonksyon famasiki gen ladan soulaje fatig akanti-enflamatwa, neuroprotective, anti-viral, ak fonksyon imunomodulateur (Fu, Fan, Wang, & Gao, 2018; Tian Wang, 2012). Polisakarid ki soti nan C. deserticola, eleman aktif nan C. deserticola, yo te pwouve yo gen gwo aktivite byolojik ki gen ladan modulation nan repons iminitè ak antioksidatif anti-enflamatwa, ak fonksyon anti-fatig (Dong, Yao, Fang, & Ding). , 2007; W. Zhang et al., 2016). Nan 2018 ak 2019, nou te demontre ke polisakarid brit nan C. deserticola (CPCD) te aji kòm yon adjuvant pou antijèn OVA favorize repons iminitè Th1/Th2. CPCD ta ka pwovoke deklanchman DC atravè reseptè Toll-like 4 (TLR-4) (Zhang et al., 2018). Yo te jwenn CPCD tou pou pwovoke repons iminitè Th1, ki gen ladan sekresyon IFN ak jenerasyon IgG2a kont vaksen grip nan sourit (Zhao, Lian, Wang, Li, & Zhang, 2019). Se poutèt sa, li nesesè dekouvwi mekanis ki kache nan repons iminitè CPCD-elicite ak efè a iminopotentiating nan CPCD sou inaktive FMDV.

Maladi pye ak bouch (FMD) se yon maladi viral enpòtan nan bèt paske li ka mennen nan gwo pèt ekonomik ak konsekans sosyal. Vaksen FMD inaktive (FMDV) se mezi kontwòl ki pi efikas nan FMD. Aktyèl FMDV inaktive yo san danje, men mal iminojenik akòz pwodiksyon antikò ki ba, dire kout nan pèsistans yap ogmante jiska antikò ak repons iminitè pòv nan kochon (Y. Cao, Lu, & Liu, 2016; Doel, 2003). Pi wo dòz vaksen oswa ogmante tan tretman, diferan wout piki (entramiskilè kont vaksen entradèrm), ak pwogram dòz akselere yo te itilize kòm estrateji enpòtan pou amelyore efikasite pwoteksyon vaksen yo. Ogmante prèv te demontre ke adjuvant yo ka ranfòse efikasite vaksen kont maladi enfeksyon (Steven G. Reed, Orr, & Fox, 2013; N. Zhang et al., 2010). Nouvo adjuvant ak enkòporasyon yo nan FMDV ka ogmante iminojenisite e menm amelyore dire pwoteksyon an (Y. Cao, 2014; Dar, Kalaivanan, Sied, Mamo, & Kondabattula, 2013). Kounye a, anpil efò yo ap konsakre pou devlope adjuvant ki san danje epi ki efikas ki ka maksimize iminojenisite ak yon repons iminitè ki adapte (Pulendran & O'Hagan, 2021). Yo mande divès adjuvant pou vaksen yo. Konpare ak adjuvant tradisyonèl yo, adjuvant polisakarid ki soti nan TCM ka itil pou egzèse efè imunopotentiating sou FMDV nan modil lenfosit, sitokin, ak nivo antikò ak jenere pi fò repons iminitè selilè ak umoral.

Aktivasyon selil dendritik (DCs) yo te pwouve yo kòmanse repons iminitè adaptasyon ak kontwole balans iminite Th1/Th2 (Kapsenberg, 2003). Efè nouvo adjuvant yo sou DCS bezwen elisidé. Polisakarid TCM ta ka amelyore ekspresyon molekil sifas sou DC, tankou MHC II, CD80, CD86, ak CD40, epi ogmante nivo cytokin pro-enflamatwa, tankou IL-6 ak IL{{ 8}} (J. Li, Li, & Zhang, 2015). Aktivite imunomodulateur polisakarid TCM yo reyalize atravè reseptè manbràn dirèkteman obligatwa sou DCs (Jiang, Zhu, & Jiang, 2010). Nan lòt mo, aktivite imunoadjuvant CPCD asosye ak efè imunomodulateur sou DC yo. Anplis de sa, TLR yo se reseptè santinèl ki ankouraje deklanchman ak rekritman DC yo epi deklanche repons selil B ak selil T. Mitogen-aktive pwoteyin kinaz (MAPK) ak faktè nikleyè kappa-B (NF-κB) chemen yo se chemen kritik en nan TLR yo ak aktive wout sa yo ka pwovoke pwodiksyon an nan sitokin proenflamatwa ki gen ladan IL-6 ak IL{{15} } (Akira & Takeda, 2004). Se poutèt sa, li nesesè pou mennen ankèt sou chemen an ki gen rapò ak TLR nan bi pou yo konprann repons selil iminitè yo nan enfeksyon.

Nan etid sa a, sourit ICR te anjeneral chwazi kòm bèt modèl nan laboratwa a pou FMDV pou detèmine yon relasyon ant adjuvant ak pisans vaksen akòz itilizasyon an enkonvenyan nan bèt vize, ak CPCD kòm yon adjuvant FMDV te envestige nan vitro ak nan vivo yo eksplore. wòl li nan deklanchman DCs pa TLR-2/TLR{-4-ki gen rapò ak MAPKs en ak chemen NF-κB. Etid sa a bay baz pou konprann mekanis endiksyon aktivite imunomodulateur pa CPCD ak potansyèl CPCD kòm yon adjuvant polisakarid pou FMDV nan bèt sible yo.

Materyèl ak metòd

C. deserticola (No CD17042001) te bay idantifikasyon an pa Pwofesè Jiang He. Tecon Biology Co., Ltd. (Lachin) te ofri antijèn inaktive FMD viral O-serotype 146S ak adjuvant ISA-206. Serom fetal bovine (FBS) te soti nan endistri byolojik. RPMI 1640 mwayen yo te achte nan men GIBCO (USA). polymyxin B (PMB), Lipopolysaccharide (LPS), 3-(4,5-dimethyl thiazol-2-yl)-2,5- bromur diphenyltetrazolyom (MTT) te Sigma pwodwi. Twous konte selil-8 (CCK-8) te soti nan Biosharp (Lachin). Murine gran ulocyte-macrophage koloni-stimulan faktè (GM-CSF) te soti nan PeproTech (USA). IL-6 ak IL-1 twous yo te soti nan Boster (Lachin).

Golgistop, Cytofix/Cytoperm, Perm/Lave tanpon ak antikò kont CD3, CD4, CD8, CD44, CD11c, MHC-II, CD80, CD86, CD40 te soti nan BD Biosciences (USA). Twous ekstraksyon nikleyè ak sitoplasmik ak twous kantite pwoteyin BCA yo te soti nan Cwbiotech (Lachin). Antikò anti-TLR-2 ak anti-TLR-4 yo te achte nan Novus Biologicals (USA). MAPKs ak twous chemen NF-κB yo te soti nan Teknoloji Siyal Selilè (USA). Antikò anti-sourit/lapen ki gen etikèt peroksidaz refor (IgG/IgG1/IgG2a) ki soti nan Southern Biotech (USA). Twous tach Tregs soti nan eBiosciences (USA).

rezilta

Kontni idrat kabòn net te detèmine se 50.53 pousan ± 1.28 pousan ak kontni idrat kabòn asid te 17.81 ± 0.51 pousan. Pwa molekilè mwayèn (Mw) nan CPCD te kalkile yo dwe 46.77 kDa ak tan retansyon (Fig. 1A). Konpozisyon monosakarid CPCD revele ke pi gwo konpozan sik nan CPCD yo se Glc, Ara, Gal, Rha, GlaA ak Man nan pousantaj molè 33.17 pousan, 28.98 pousan, 16.39 pousan, 10.97 pousan, 8.05 pousan, 2.42 pousan (Fig. ). Fig. 1C montre spectre FT-IR CPCD. Mak yo nan 3383.64 cm− 1 te akòz gwoup hydroxyl la. Gwoup absòpsyon gwoup alkil yo te obsève nan 2926.97 cm− 1 ak 1417.99 cm− 1 . Gwoup absòpsyon gwoup carbonyl yo te obsève nan 1635.56 cm− 1 . Siyal yo soti nan 1257.06 a 1032.02 cm− 1 endike prezans nan bag pyranose. Pou plis envestige si wi ou non MAPKs ak chemen NF-κB yo te aktive pa tretman CPCD, DC yo te ankouraje ak CPCD nan yon tan diferan epi ekspresyon yo nan pwoteyin kle ki enplike nan de wout yo te egzamine. CPCD pwovoke fosforilasyon JNK, ERK ak p38 nan yon fason ki depann de tan ak nivo fosforilasyon JNK, ERK, ak p38 yo te pi wo apre 15-30 min (Fig. 5A D). Anplis de sa, fosforilasyon sitoplasmik NF-κB p65, IκB, IKK / ak nikleyè NF-κB p65 tou te pwovoke nan yon fason ki depann de tan. Nivo fosforilasyon cytoplasmic p65, IκB, ak IKK / , ak pwopòsyon p65 nan nwayo a te pi wo a apre diferan tan: 15-30 min pou p65, 30 min pou IκB, 60 min pou IKK / , ak 20 min pou pwopòsyon p65 nan nwayo a (Fig. 5E-5 J).

Ekstrè soti nanJournal of Functional Foods 87 (2021) 104800 paj dakèy jounal: www.elsevier.com/locate/jff