Itilizasyon Dyetetik Sous Methionine ak Bacillus Amyloliquefaciens CECT 5940 Enfliyanse Pèfòmans Kwasans, Istoloji Epatopankreyas, Dijesyon, Iminite, ak Mikwobiota dijestif Litopenaeus Vannamei Fed Redwi Rejim Farin Pwason.
Oct 30, 2023
Senp Rezime: Ekspansyon akselere nan kiltivasyon kribich la mande pou sous pwoteyin ki gen gwo valè nitrisyonèl pou fòme manje ki satisfè kondisyon nitrisyonèl kribich yo. Farin pwason (FM) se sous prensipal pwoteyin pou fòmilasyon aquafeed. Sepandan, rezèv limite li yo ak gwo pri ankouraje rechèch sou sous pwoteyin altènatif yo fòmile manje ki pi pwofitab ki kontribye nan dirab akwakilti. Yo te itilize repa soya (SBM) ak repa vyann bèt volay (PBM) kòm sous pwoteyin pou ranplase farin pwason, men dezekilib esansyèl asid amine yo kontribye nan pèfòmans ki ba kwasans kribich epi afekte sante kribich yo. Se poutèt sa, objektif etid la se te evalye efè ranplasman FM pa SBM ak PBM nan rejim siplemantè ak DL-Met, MET-MET (AQUAVI®), Bacillus amyloliquefaciens CECT 5940 (ECOBIOL®) ak konbinezon yo sou pèfòmans kwasans ak sante jivenil Litopenaeus vannamei. Rezilta yo te montre ke FM ta ka pasyèlman ranplase ak SBM ak PBM nan manje kribich siplemantè ak 0.19% MET-MET oswa 0.06% MET-MET plis 0.10% B. amyloliquefaciens CECT 5940 san yo pa yon move efè sou pèfòmans kwasans ak byennèt Litopenaeus vannamei. Rezilta sa yo ka enteresan pou devlope manje pwason ki ba ak kontribiye nan dirab akwakilti.
benefis sipleman cistanche-ogmante iminite
Résumé:Yon esè {{0}}semèn pou bay manje te envestige efè ranplasman farin pwason (FM) pa farin soya (SBM) ak repa vyann bèt volay (PBM) nan rejim siplemantè ak DL-Met, MET-MET (AQUAVI). ®), Bacillus amyloliquefaciens CECT 5940 (ECOBIOL®) ak konbinezon yo sou pèfòmans kwasans ak sante jivenil Litopenaeus vannamei. Yon total de sis rejim eksperimantal yo te formul selon kondisyon nitrisyonèl L. vannamei. Yon total de 480 kribich (0.30 ± 0.{04 g) te distribye owaza nan 24 tank (4 repetisyon/chak rejim). , 20 kribich/tank). Yo te manje kribich ak rejim kontwòl (CD; 200 g/Kg farin pwason) ak senk rejim ak 50% ranplasman FM ki te konplete ak diferan sous methionine, probyotik (B. amyloliquefaciens CECT). 5940) ak konbinezon yo: D1 (0.13% DL-MET), D2 (0.{06% MET-MET), D3 ({{ 69}}.19% MET-MET), D4 (0.13% DL-MET plis 0.10% B. amyloliquefaciens CECT 5940 ak D5 (0.06% MET-MET plis 0.10% B. amyloliquefaciens CECT 5940). Kribich manje D3 ak D5 te gen siyifikativman pi wo final, pran pwa chak semèn ak byomas final konpare ak kribich nouri CD (p < 0.05). Kribich manje D2 a D5 ogmante wotè selil epitelyal epatopankreas la (p < 0.05). Aktivite anzimatik dijestif yo te siyifikativman ogmante nan epatopankreyas kribich la manje D3. (p < 0.05). Pandan se tan, kribich manje D1 te gen siyifikatif downregulation nan jèn ki gen rapò ak iminitè (p <0.05). Anplis, kribich manje D3 ak D5 ogmante abondans nan mikwo-òganis prokaryotic benefisye tankou Pseudoalteromonas ak Demequina ki gen rapò ak metabolis idrat kabòn ak iminitè. eksitasyon. Epitou, kribich manje D3 ak D5 ogmante abondans nan mikwo-òganis ekaryotik benefisye kòm Aurantiochytrium ak Aplanochytrium te gen rapò ak pwodiksyon asid eicosapentaenoic (EPA) ak asid docosahexaenoic (DHA) ki jwe yon wòl nan pwomosyon kwasans oswa ranfòse iminite nan òganis akwatik. Se poutèt sa, farin pwason ka pasyèlman ranplase jiska 50% pa SBM ak PBM nan rejim siplemantè ak 0.19% MET-MET (AQUAVI®) oswa 0.06% MET-MET (AQUAVI®) plis 0.10% B. amyloliquefaciens CECT 5940 (ECOBIOL®) epi amelyore pèfòmans pwodiktif, sante, ak iminite kribich blan yo. Plis rechèch nesesè pou mennen ankèt sou efè sinèrjik asid amine ak probiotik nan alimantasyon kribich kiltive yo, osi byen ke pou evalye kijan SBM ak PBM enfliyanse konpozisyon asid gra alimantasyon redwi farin pwason ak bon jan kalite misk kribich la. Men, enfòmasyon sa a ta ka enteresan pou devlope manje pwason ki ba pou akwakilti san yo pa afekte kwasans ak byennèt òganis akwatik yo.
Benefis cistanche tubulosa-ranfòse sistèm iminitè
Klike la a pou w wè pwodwi Cistanche Enhance Immunity
【Mande plis】 Imèl:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
Mo kle: Litopenaeus vannamei; nitrisyon kribich; ranplasman farin pwason; metionin; probiotik; pèfòmans; sante; mikrobyota
1. Entwodiksyon
Agrikilti kribich la te bay prèske 11.2 milyon tòn an 2022 e kribich blan Pasifik (Litopenaeus vannamei) te espès ki pi reprezantatif ak 52% pwodiksyon total [1]. Dirabilite ak rentabilité pwodiksyon akwakilti mande pou bay matyè premyè ki gen gwo valè nitrisyonèl pou fòmilasyon manje ki satisfè bezwen nitrisyonèl kribich kiltive yo [2,3]. Farin pwason se engredyan prensipal nan aquafeed akòz gwo valè nitrisyonèl li yo [4]. Sepandan, rezèv la limite ak pri segondè nan farin pwason mande pou rechèch sou sous altènatif pou manje ki pi pwofitab epi ki kontribye nan dirab akwakilti [5,6]. Etid anvan yo, sitou konsantre sou pèfòmans pwodiktif kribich, te rapòte ke farin pwason ka pasyèlman ranplase pa divès kalite sous bèt ak legim [6]. Pami sous pwoteyin legim, repa soya gen yon kontni segondè pwoteyin. Sepandan, prezans nan faktè anti-nitrisyonèl, dijèstibilite pòv, ak yon dezekilib esansyèl asid amine (EAA) ki afekte mikrobyota dijestif, lakòz yon repons enflamatwa nan ògàn dijestif, pèfòmans pwodiktivite ki ba, ak afekte repons iminitè òganis akwatik la [5,7, 8]. Sous-pwodwi repa bèt volay se yon sous bèt ki gen anpil pwoteyin ki manke nan methionine ak lizin, kidonk, itilizasyon li nan manje ki redwi farin pwason ka afekte kwasans ak byennèt òganis akwatik [9]. Methionine se yon EAA ki ra nan manje akwatik farin pwason ki ba epi li nesesè pou kwasans nòmal [10], sentèz pwoteyin [11], ak fonksyon iminitè [12] nan òganis akwatik. Se poutèt sa, sipleman methionine nan manje pwason ki ba yo oblije balanse asid amine epi redwi enpak negatif sou kwasans ak metabolis òganis akwatik kiltive yo [13]. Gen yon varyete resous methionine ki disponib nan komès, tankou yon melanj rasmik D-Met ak L-Met izomè ki rele DL-methionine (DL-Met) ak yon melanj de kat estereyoizomè methionine diferan (LD-Met-Met, DL-Met). -Met, LL-Met-Met ak DD-Met-Met) komèsyalize kòm AQUAVI® (Met-Met) [10]. Sepandan, AQUAVI® gen pi bon pwopriyete fizikochimik tankou solubilite dlo ki ba anpil ak pi wo absòpsyon pase DL-Met [10,14]. Nan lòt men an, li te rapòte ke sipleman probyotik (Bacillus subtilis) gen efè pozitif sou pèfòmans kwasans ak sante nan kribich blan (L. vannamei) ak Bullfrog (Lithobates catesbeianus) manje manje pwason ki ba [15,16]. Probiotik yo se mikwo-òganis vivan yo itilize nan aquafeeds akòz kapasite yo pou amelyore itilizasyon manje, dijesyon anzimatik, prevansyon patojèn, repons iminitè, ak kwasans [15]. Se poutèt sa, enklizyon probyotik yo nan manje redwi farin pwason ka amelyore sante ak byennèt òganis akwatik [16]. Bakteri Bacillus yo lajman itilize nan akwakilti kòm probyotik paske yo gen kapasite pou pwodui konpoze antimikwòb ak exoenzymes ki amelyore dijesyon eleman nitritif, anpèchman patojèn, modulasyon repons iminitè, antretyen entegrite zantray, ak konsekans pèfòmans kwasans [17]. B. amyloliquefaciens gen aktivite anti-bakteri epi li pwodui anzim dijestif ki sipòte dijesyon [18].
Akòz pi wo a, sous altènatif pou farin pwason, konbine avèk anpil aditif yo te itilize nan aquafeeds pou garanti yon rezèv eleman nitritif esansyèl, amelyore pèfòmans pwodiktif, prezève konpozisyon fizikochimik rejim alimantè a, epi kenbe bon jan kalite anviwònman akwatik la [19]. Pakonsekan, alimantasyon farin pwason ki ba konplete ak diferan sous methionine ak B. amyloliquefaciens te amelyore pèfòmans kwasans ak efikasite manje nan òganis akwatik kiltive [3,7,8,20,21]. Epitou, B. amyloliquefaciens CECT 5940 ak efè li yo te rapòte sou pèfòmans kwasans ak sante poul broiler [22] ak tilapia Nil (Oreochromis niloticus) [21]. Sepandan, kèk etid valide efè rejim alimantè pwason ak aditif ki ba sou sante dijestif ak repons iminitè kribich yo. Se poutèt sa, objektif prensipal etid sa a se te evalye efè ranplasman FM ak SBM ak PBM nan rejim siplemantè ak DL-Met, MET-MET (AQUAVI®), B. amyloliquefaciens CECT 5940 (ECOBIOL®) ak konbinezon yo sou kwasans. pèfòmans, istoloji epatopankreyas, aktivite anzimatik dijestif, repons transkripsyon jèn ki gen rapò ak iminitè, ak konpozisyon mikwòb sistèm dijestif jivenil kribich blan Pasifik la (L. vannamei).
2. Materyèl ak Metòd
2.1. Preparasyon Rejim eksperimantal
Yon total de sis alimantasyon eksperimantal yo te fòmile dapre kondisyon yo nitrisyonèl L. vannamei [23] ak rekòmandasyon manifakti (Evonik Aqua R & D gwoup). Rejim kontwòl (CD) te fòme pou genyen yon melanj de pwoteyin FM (39%), pwoteyin SBM (53%), ak pwoteyin PBM (8%) tankou yon rejim alimantè tipik komèsyal kribich. SBM ak PBM se te pi gwo sous pwoteyin altènatif pou ranplase FM, pandan ke yo te itilize farin ble kòm yon lyan ak engredyan filler. Lwil pwason yo te itilize kòm pi gwo sous lipid pou satisfè n-3 kondisyon esansyèl asid gra kribich yo. CD te gen 2{{10}}0 g/Kg farin pwason san okenn sipleman. Lòt senk rejim (D1–D5) kote SBM ak PBM ranplase FM nan 50% yo te konplete ak diferan sous methionine, B. amyloliquefaciens, ak konbinezon yo. D1: 0.13% DL-MET, D2: 0.06% MET-MET (AQUAVI®), D3: 0.19% MET-MET (AQUAVI®), D4 : 0.13% DL-MET plis 0.10% B. amyloliquefaciens CECT 5940 (ECOBIOL®) ak D5: 0.06% MET-MET (AQUAVI®) plis 0.10% B. amyloliquefaciens CECT 5940 (ECOBIOL®). Anplis de sa, yo te evalye rapò estabilite dlo a kòm karakteristik fizik yon rejim alimantè pa yon metòd ki dekri deja [24]. Tablo 1 montre fòmilasyon, konpozisyon pwòch ak valè estabilite dlo rejim eksperimantal yo.
Tablo 1. Engredyan ak konpozisyon apwoksimatif nan rejim eksperimantal yo (g / kg pwa sèk).
Tablo 1. Kont.
2.2. Kribich, esè pou manje ak koleksyon echantiyon
Jivenil L. vannamei te jwenn nan yon fèm kribich nan Sonora, Meksik. Kribich la te san patojèn dapre pwosedi ki dekri nan Manyèl Tès dyagnostik pou bèt akwatik Òganizasyon Mondyal pou Sante Animal [25]. Anvan esè manje a, tout kribich yo te aklimate nan laboratwa akwakilti a nan tank 1500-L ak dlo lanmè nan kondisyon kontwole (tanperati 30 ± 0.5 ◦C, oksijèn ki fonn pi gran pase oswa egal a 4 mg/L, salinite 37 g/L, pH Pi gran pase oswa egal a 7 ak fotoperyod 12 èdtan limyè) epi yo manje ak yon manje komèsyal pou 7 jou. Nan kòmansman an, 480 kribich ki an sante ak (0.30 ± 0.02 g) yo te jene pou 24 èdtan epi yo te distribye owaza nan 24 tank sikilè (volim se 150 L) nan yon dansite 20 kribich pou chak tank (ekivalan a yon dansite. nan 133 kribich/m3). Te gen kat tank replike ki te plase owaza pou chak tretman dyetetik. Yo te manje kribich yo nan satiyasyon ak yon premye rasyon 12% nan byomass yo divize an twa rasyon pandan jounen an (8:00, 13:00, ak 16:00 h) pou 56 jou, ajiste chak jou depann sou prezans manje rezidyèl oswa absans. Tanperati (27.84 a 28.36 ◦C), salinite (36.98 a 37.07 g/L), oksijèn ki fonn (4.00 a 5.17 mg/L), ak pH (7.41 a 7.84) te anrejistre. Chak jou, 30% nan dlo a te chanje. Yo te retire manje ki pa manje a, poupou, mu, ak kribich ki mouri a chak jou. Apre yon esè manje ak yon peryòd jèn 24 èdtan, twa kribich yo te pran echantiyon owaza nan chak replike pou jwenn 400 µL emolinf pou analiz ekspresyon jèn [26]. Yo te diseke kribich ki te deja senyen pou jwenn trip yo ak epatopankreyas yo, epi yo te estoke nan -80 ◦C jiskaske aktivite dijestif anzimatik ak analiz mikrobyom yo. Anplis de sa, douz (twa kribich / replike) kribich antye yo te pran echantiyon owaza nan chak tretman ak fiks nan solisyon AFA Davidson pou analiz histolojik.
2.3. Pèfòmans kwasans
Tout kribich yo te peze epi konte pou kalkile pèfòmans kwasans lan dapre ekwasyon yo te rapòte pa etid anvan yo [27-29].
Pwa final=(Σ Pwa final endividyèl) / Kantite final kribich. Pran pwa chak semèn=(Pwa final - Pwa inisyal)/Kantite semèn. To kwasans espesifik=100 × (ln pwa final - nan pwa inisyal)/jou eksperyans nan. Pousantaj siviv=100 × (Final kantite kribich/Inisyal kantite kribich). Byomas final=Pwa final × Kantite final kribich. Konsomasyon manje=Antre manje (pwa sèk) − Manje kolekte (pwa sèk). Pousantaj konvèsyon manje=Konsomasyon manje/Biomass final.
2.4. Istoloji epatopankreyas
Yo te trete echantiyon epatopankreyas kribich ki te fikse nan solisyon Davidson a dapre metòd Bell ak Lightner [30 ki dekri a. Seksyon istolojik ak yon epesè 4 µm, yo te koupe lè l sèvi avèk yon mikrotom rotary (LEICA RM2115RT). Tach tisi a, obsèvasyon glisad la, ak nimerik imaj yo te reyalize dapre metòd Casillas-Hernández [31] dekri. Imaj tisi yo te itilize pou mezire wotè selil epatopankreyas yo lè l sèvi avèk sistèm imaj dijital Image-Pro Premier lojisyèl v9.0 (Media Cyvernetics Inc., Rockville, MD, USA).
cistanche tubulosa-amelyore sistèm iminitè
2.5. Aktivite anzim dijestif yo
Yo te separe entesten ak epatopankreyas omojènize nan yon rapò 10% ak 0.9% solisyon saline epi santrifuje a 3500 rpm pou 10 min nan 4 ◦C, epi yo te analize surnatant la imedyatman pou tès anzim dijestif ak yon lektè microplate (Bio. -Rad, Hercules, CA, USA). Pwoteaz ak aktivite lipaz yo te teste pa yon twous komèsyal (Sigma-Aldrich®, Louis, MO, USA). Aktivite amilaz te mezire lè l sèvi avèk lanmidon idrosolubl kòm substra [32]. Konsantrasyon total de pwoteyin idrosolubl te detèmine pa prensip la nan pwoteyin-lank obligatwa lè l sèvi avèk albumin serom bovin kòm yon estanda [33]. Tout tès yo te kouri nan twa echantiyon replike. Aktivite anzim dijestif yo eksprime kòm U/mg nan pwoteyin.
2.6. Repons transkripsyon jèn ki gen rapò ak iminitè
Yo te santrifize emolinf la a 3500 rpm pou 10 min nan 4 ◦C pou separe emosit yo ak plasma a. RNA total ki soti nan emosit yo te ekstrè ak TRIzol Reagent (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) ak trete ak RNA-gratis DNase (Promega®, Madison, WI, USA). cDNA te sentèz ak Total RNA (500 ng) lè l sèvi avèk ImProm-II™ Reverse Transcription System (Promega®) ak oligo d(T)20 (T4OLIGO). Sentèz cDNA a te reyalize pa transkripsyon ranvèse nan 42 ◦C pou 60 min; Lè sa a, transkriptaz ranvèse te inaktive nan 70 ◦C pou 15 minit pou sispann reyaksyon an. Yo te dilye cDNA a ak 80 µL dlo ultrapur, epi yo te itilize 5 µL kòm yon modèl pou reyaksyon PCR quantitative an tan reyèl (qPCR). Yo te analize repons transkripsyonèl soti nan senk jèn ki gen rapò ak iminitè ak -aktin kòm yon jèn referans (Tablo 2) [34]. qPCR la te fèt sou yon sistèm StepOne an tan reyèl PCR (Thermo Fisher Scientific) lè l sèvi avèk SensiFAST™ SYBR® Hi-ROX Kit (Bioline™, London, UK). Kondisyon qPCR yo te denaturasyon inisyal nan 95 ◦C pou 10 min, ki te swiv pa 40 sik denaturasyon nan 95 ◦C pou 15 s, ak annealing / ekstansyon nan 60 ◦C pou 1 min. Yo te fè yon analiz koub disosyasyon (60-95 ◦C) nan yon vitès tranzisyon tanperati 0.5 ◦C/s pou chak pè primè. Yo te itilize metòd quantification relatif la pou analiz ekspresyon jèn dapre Rodriguez-Anaya [35] ak Casillas-Hernández [36].
Tablo 2. Jadendanfan espesifik yo itilize pou repons transkripsyon jèn ki gen rapò ak iminitè nan L. vannamei.
2.7. Ekstraksyon ADN ak analiz sekans
ADN jenomik ki soti nan epatopankreyas ak trip 12 kribich pou chak tretman te ekstrè lè l sèvi avèk Quick-DNA™ Fecal/Soil Microbe (Zymo Research, Irvine, CA, USA), swiv enstriksyon manifakti a. Konsantrasyon ADN yo te mezire lè l sèvi avèk yon espektrofotomèt NanoDrop 2000 (Thermo-Fisher Scientific, Waltham, MA, USA), ak bon jan kalite ADN te evalye pa elektwoforèz jèl agarose (1%, w / v). Lè sa a, echantiyon ADN jenomik yo te tretans nan Laboratwa Microbial Genomics (CIAD, Meksik) pou preparasyon bibliyotèk ADN ak sekans lè l sèvi avèk pwotokòl estanda Illumina pou anplifikasyon [37]. Yon ti tan, rejyon varyab V4 nan jèn 16S rRNA ak 18S rRNA yo te anplifye pa PCR ak primè sa yo lè l sèvi avèk adaptè Illumina: 16S-V4_515F (50 - GTG CCA GCM GCC GCG GTA A{{ 13}}), 16S-V4_806R (50 -TAA TCT WTG GGV HCA TCA GG-30), 18S-V9_Euk_1391F ( 50 -GTA CAC ACC GCC CGT C-30), ak 18S-V9_EukBr ({50 -TGA TCC TTC TGC AGG TTC ACC TAC-30 ). Finalman, anplikon yo te quantifye nan Qubit, melanje nan yon pisin ekimolar, ak sekans sou platfòm Illumina Miniseq nan kondisyon estanda (300 sik, 2 × 150).
2.8. Analiz byoenfòmatik
Yo te analize fichye FASTQ ki soti nan lekti pè yo lè l sèvi avèk pake DADA2 v1.24.0 [38]. Workflow analiz sekans la te gen ladann filtraj, dereplication, enferans echantiyon, idantifikasyon chimè, ak fusion pè-fen (PE) lekti pou gwoupe yo nan ASVs (variante sekans anplikon). DADA2 gen ladan metòd "naïf Bayezyen" lè l sèvi avèk baz done SILVA yo pou tou de rejyon 16S-V4 (silva_nr99_v138.1_train_set.fa) ak rejyon 18S-V9 (silva_132.18s.99_rep_set.dada2.fa). Enfòmasyon taksonomi yo te analize ak Phyloseq V1.40.0 ak pake mikrobyom v1.18.0 pou jwenn divèsite alfa ak beta ak valè òdinasyon [37]. Divèsite beta a te fèt ki baze sou distans UniFrac unweighted ak visualized lè l sèvi avèk yon PCoA ki te bati ak ggplot nan R. Finalman, diferans ki genyen nan nivo kominote miltivarye ant gwoup yo te quantifye pa analiz multivariante permutasyonèl nan divèjans (PERMANOVA) [39]. Tablo final ASVs soti nan sekans 16S yo te itilize tou kòm yon opinyon pou prediksyon metagenomic fonksyonèl lè l sèvi avèk PICRUSt [40]. Kontni chemen KEGG yo te jwenn pa PICRUSt te nòmalize epi answit itilize pou jwenn prediksyon fonksyonèl metagenomik nan diferan nivo KEGG yerarchize (1, 2, ak 3) [41]. Sekans Illumina lè l sèvi avèk primè pou rejyon hypervariable V4 nan jèn rRNA 16S la te bay 976,065 lekti PE nan 150 bp ki koresponn ak trip ak epatopankreyas L. vannamei ak yon mwayèn de 81,338 lekti pou chak echantiyon. Apre bon jan kalite filtraj pwosesis la ak eliminasyon chimè yo, yo te kenbe yon mwayèn de 58,235 sekans pou chak echantiyon, ekivalan a 71.6%, epi yo te asiyen nan 709 ASV. Nan lòt men an, nan sekans V9-18S rDNA a, yo te jwenn 871,699 lekti PE nan 150 bp ak yon mwayèn de 72,642 pou chak echantiyon. Apre workflow analiz sekans, lekti yo te redwi apeprè 12.7%. Sepandan, lè yo te fè idantifikasyon taksonomik ak gwoupman ASV, pi fò nan sekans yo te koresponn ak ADN lame a (L. vannamei), elimine echantiyon yo nan epatopankreyas la. Se poutèt sa, done yo prezante sou karakterizasyon mikrobiota ekaryotik koresponn ak mikwo-òganis ki prezan nan trip la. Ansanm done yo te itilize a se 12,970 sekans ki te asiyen nan 43 ASVs.
2.9. Analiz estatistik
Rezilta pèfòmans kwasans yo, wotè selil epatopankreyas la, aktivite anzimatik dijestif yo, ak repons transkripsyon jèn ki gen rapò ak iminitè yo te evalye pa yon fason analiz de divèjans (ANOVA). Si yo te obsève nenpòt siyifikasyon, yo te fè tès Tukey a pou konparezon mwayen. Analiz estatistik te fèt ak Statgraphics Centurion XVI. Siyifikasyon te fikse nan nivo pwobabilite 95%.
3. Rezilta yo
3.1. Pèfòmans kwasans
Valè pèfòmans kwasans yo prezante nan Tablo 3. Konpare ak CD, valè ki pi wo nan pèfòmans kwasans (pwa final, pran pwa, ak byomas final) yo te obsève ak kribich manje D3 ak D5, ki te siyifikativman pi wo pase kribich manje D1 (p < 0.05), men san diferans estatistik ak kribich manje D2 ak D4 ak (p > 0.05). Yo te obsève valè ki pi ba nan pousantaj konvèsyon manje ak kribich ki te manje D3, men yo pa te jwenn okenn diferans enpòtan nan FCR nan mitan tout tretman rejim alimantè (p > 0.05). Pandan ke konsomasyon manje siyifikativman (p <0.05) diminye nan kribich manje D1 ak siyifikativman ogmante (p <0.05) nan kribich manje D5. Pa gen okenn diferans enpòtan yo te jwenn nan pousantaj siviv nan mitan tout tretman rejim alimantè (p> 0.05).
Tablo 3. Efè rejim eksperimantal sou pèfòmans kwasans Litopenaeus vannamei.
3.2. Istoloji epatopankreyas
Epatopankreyas kribich la te gen yon estrikti ki byen òganize (Figi 1A). Eksepte pou kribich D1 nouri, tout kribich nouri rejim redwi farin pwason te gen pi wo (p <{3}}.05) wotè selil epitelyal epatopankreyas yo pase CD kribich manje (Figi 1B).
Figi 1. Istoloji epatopankreyas kribich L. vannamei te manje kontwòl rejim alimantè ak 50% rejim ranplasman farin pwason. (A) Mikrograf limyè nan seksyon longitudinal (4 µm) nan epatopankreyas tache ak ematoksilin ak eozin, montre yon estrikti byen òganize. Flèch yo endike estrikti nòmal nan selil epitelyal tubul yo ki gen ladan selil sekretè (selil B). Ba echèl: 100 µm. (B) Selil wotè epitelyal epatopankreyas nan kribich la. Done yo prezante kòm mwayen ± SE, valè ak lèt diferan yo diferan anpil (p < 0.05). Abreviyasyon: Tubules (Tb), selil epitelyal (EC), ak selil B (HpB). CD (20{{30}} g/Kg FM), D1 (0.13% DL-MET), D2 (0.06% MET-MET), D3 (0.19% MET-MET) , D4 (0.13% DL-MET plis 0.10% B. amyloliquefaciens CECT 5940) ak D5 (0.06% MET-MET plis 0.10% B. amyloliquefaciens CECT 5940).
3.3. Aktivite anzim dijestif
Efè diferan sous methionine dyetetik ak Bacillus amyloliquefaciens sou aktivite anzim dijestif trip la ak epatopankreyas ki soti nan rejim alimantè L. vannamei-manje redwi farin pwason yo montre nan Tablo 4. Amylase, proteaz, ak aktivite lipase nan epatopankreyas ki soti nan kribich manje D3 yo te siyifikativman. pi wo (p < 0.0 5) pase CD kribich manje, tandiske aktivite anzim dijestif yo nan trip la pa te enfliyanse (p > 0.05). Nan epatopankreyas ki soti nan kribich manje D1 yo te obsève valè ki pi ba nan amilaz ak lipaz, pandan y ap nan trip aktivite yo anzim dijestif yo te gen valè ki pi ba yo men pa gen okenn diferans enpòtan (p> 0.05) yo te obsève konpare ak kribich manje CD.
Tablo 4. Efè rejim eksperimantal sou aktivite anzim dijestif Litopenaeus vannamei.
3.4. Repons transkripsyon jèn ki gen rapò ak iminitè
Repons transkripsyon jèn ki gen rapò ak iminitè nan kribich blan manje alimantasyon farin pwason redwi ak aditif yo te detèmine epi konpare ak CD kribich la manje (Figi 2). Eksepte pou kribich manje D1, tout jèn ki gen rapò ak iminitè analize nan etid sa a te gen pi wo ekspresyon pase kribich manje CD. Hc ak pPO te siyifikativman (p <0.05) upregulated nan kribich manje D3 ak D5. LGBP te siyifikativman (p <0.05) ogmante nan kribich manje D2 ak D3. MnSOD te siyifikativman (p <0.05) upregulated nan kribich manje D2, D3 ak D5. HSP60 te siyifikativman (p <0.05) upregulated nan kribich manje D5. Valè ki pi ba nan repons transkripsyon jèn ki gen rapò ak iminitè yo te obsève nan kribich manje D1 konpare ak tout tretman dyetetik.
Figi 2. Repons transkripsyon jèn ki gen rapò ak iminitè nan rejim alimantè kontwòl kribich manje ak 50% rejim ranplasman farin pwason. (A) hemocyanin (Hc), (B) prophenoloxidase (pPO), (C) lipopolysaccharide ak -glucan-binding protein (LGBP), (D) cytosolic manganèz superoxide dismutase (MnSOD), ak (E) chalè chòk pwoteyin 6{ {11}} (HSP60). Done yo prezante kòm mwayen ± SE, valè ak lèt diferan yo diferan anpil (p < 0.05). Abreviyasyon: CD (20{{30}} g/Kg FM), D1 (0.13% DL-MET), D2 (0.06% MET-MET), D3 (0.19% MET- MET), D4 (0.13% DL-MET plis 0.10% B. amyloliquefaciens CECT 5940) ak D5 (0.06% MET-MET plis 0.10% B. amyloliquefaciens CECT 5940).
3.5. Analiz mikrobyota dijestif ak prediksyon fonksyonèl
Analiz koub rarefaksyon an te montre ke espès yo obsève pou chak echantiyon te ase pou tou de 16S-V4 (Figi 3A) ak 18S-V9 sekans (Figi 4A). Konsènan divèsite alfa, rezilta 16S yo te montre ke endis Chao1, Shannon, ak senpzon nan epatopankreyas la te pi wo pase trip (Figi 3B). Nan lòt men an, rezilta 18S yo te montre ke tout endis divèsite alfa diminye nan trip kribich yo te manje alimantasyon farin pwason ki ba konpare ak kontwòl (Figi 4B). Sepandan, pa te gen okenn diferans enpòtan ant tretman dyetetik nan tou de rezilta 16S ak 18S.
Figi 3. Sekans jèn 16S rRNA nan trip ak epatopankreyas ki soti nan rejim kontwòl manje kribich ak 50% rejim ranplasman farin pwason. (A) Koub Rarefaksyon, (B) Alpha divèsite, ak (C) Estrikti Mikwobyo vizyalize lè l sèvi avèk analiz prensipal kowòdone (PCoA). Abreviyasyon: Entestinal (I) ak epatopankreyas (H). CD (200 g/Kg FM), D1 (0.13% DL-MET), D2 ({{20}}.{{27 }}6% MET-MET), D3 (0.19% MET-MET), D4 (0.13% DL-MET plis 0.10% B. amyloliquefaciens CECT 5940) ak D5 (0.06% MET-MET plis 0.10% B. amyloliquefaciens CECT 5940) ).
Efè rejim eksperimantal la sou estrikti mikrobyota yo te detèmine lè l sèvi avèk distans UniFrac ak vizyalize lè l sèvi avèk simit PCoA. Rezilta yo te revele separasyon klè nan mitan rejim eksperimantal, men san diferans enpòtan nan kominote prokaryotic soti nan trip oswa epatopankreas (Figi 3C) osi byen ke mikrobiota ekaryotic soti nan trip (Figi 4C). Sepandan, analiz divèsite beta te montre yon separasyon klè ant kominote prokary otik soti nan trip ak epatopankreas (Figi 3C).
Figi 4. Sekans jèn rRNA 18S nan trip nan rejim alimantè kontwòl kribich manje ak 50% rejim ranplasman farin pwason. (A) Koub Rarefaksyon, (B) Alpha divèsite, ak (C) Estrikti Mikwobyo vizyalize lè l sèvi avèk analiz prensipal kowòdone (PCoA). Abreviyasyon: Entestinal (I). CD (200 g/Kg FM), D1 (0.13% DL-MET), D2 ({{20}}.{{27 }}6% MET-MET), D3 (0.19% MET-MET), D4 (0.13% DL-MET plis 0.10% B. amyloliquefaciens CECT 5940) ak D5 (0.06% MET-MET plis 0.10% B. amyloliquefaciens CECT 5940) ).
Dapre rezilta mikrobiota prokaryotik, yo te idantifye yon total de 19 diferan phyla bakteri. Proteobacteria te phylum dominan nan trip kribich, tandiske Pro teobacteria ak Aktinobacteria te phyla dominan nan epatopankreas kribich la. Nan trip kribich manje D3 ak D5, yo te obsève yon ogmantasyon nan abondans relatif Actinobacteria pandan y ap abondans relatif Bacteroidota te yon ti kras diminye. Nan kribich hep trovancreas manje D1, D2 ak D4, yo te obsève yon ti ogmantasyon nan abondans relatif Bacteroidota, pandan y ap nan epatopancreas kribich manje D3 ak D5 aktinobakteri abondans relatif te ogmante (Figi 5A). Nan nivo genus, Pseudoalteromonas te pi répandus nan trip kribich pandan y ap Demequina te pi répandus nan epatopankreyas kribich la. Demequina te gen yon ogmantasyon ki ba nan trip kribich manje D3 ak D5, tandiske Lysinimicrobium ak Ruegeria te ogmante nan epatopankreyas kribich manje D3 ak D5 (Figi 5B). Rezilta kategori fonksyonèl yo (KEGG nivo 2) te montre ke sekans bakteri yo te asosye ak pwosesis selilè ak chemen metabolis (Figi 5C ak Tablo Siplemantè S1). Metabolis asid amine, metabolis idrat kabòn, kofaktè ak metabolis vitamin yo te pi abondan nan chemen metabolis, tandiske motilite selil yo te pi abondan nan pwosesis selilè yo. Apre yo fin retire lekti sekans nan ADN lame a, yo te obsève twa phyla sou mikrobyota ekaryotik. Filòm SAR (Stramenopiles, Alveolate y Rhizaria) te pi souvan nan tout trip kribich la, sepandan yo te obsève yon ogmantasyon nan filòm Opisthokonta nan trip kribich ki te manje D5 (Figi 6A). Nan nivo genus, Aplanochytrium te pi abondan nan trip kribich manje D2 a D5, men abondans la te miyò pi wo nan D5. Uncultured Alveolate te rich nan trip kribich manje CD. Auranti ochytrium te pi répandus nan D2 a D4 ak pi gwo abondans nan D3. Finalman, Ebria te pi abondan nan trip kribich manje D1 (Figi 6B).
Figi 5. Miwowot pwokaryotik trip ak epatopankreyas ki soti nan rejim kontwòl manje kribich ak 50% rejim ranplasman farin pwason. (A) Top dis nan abondans phyla. (B) Heatmap analiz de 4 0 pi gwo jener, ak (C) Heatmap analiz prediksyon fonksyon ki baze sou analiz chemen KEGG. Abreviyasyon: entesten (I) ak epatopankreyas (H). CD (200 g/Kg FM), D1 ({{20}}.13% DL-MET), D2 (0.06% MET -MET), D3 (0.19% MET-MET), D4 (0.13% DL-MET plis 0.10% B. amyloliquefaciens CECT 5940) ak D5 (0.06% MET-MET plis 0.10% B. amyloliquefaciens CECT 5940).
Figi 6. Miwowot ekaryotik trip ki soti nan rejim kontwòl manje kribich ak 50% rejim ranplasman farin pwason. (A) Abondans Phyla. (B) Heatmap analiz abondans jenera. Abreviyasyon: trip (I). SAR (Stramenopiles, Alveolate y Rhizaria). CD (200 g/Kg FM), D1 (0.13% DL-MET), D2 (0.06% MET -MET), D3 (0.19% MET-MET), D4 (0.13% DL-MET plis 0.10% B. amyloliquefaciens CECT 5940) ak D5 (0.06% MET-MET plis 0.10% B. amyloliquefaciens CECT). 5940).
4. Diskisyon
4.1. Pèfòmans kwasans
Etid anvan yo te evalye efè alimantasyon redwi farin pwason ki te konplete ak diferan sous metyonin dyetetik sou pèfòmans kwasans L. vannamei, tankou manje kribich ak 5% a 10% farin pwason ak konplete ak yon nivo ant {{15 }}.15% ak 1.7% nan MET-MET (AQUAVI®) oswa 3% nan DL-MET [2,3,8,20,42,43]. Men, yon etid ak kondisyon kilti menm jan an ki te itilize kribich jivenil (L. vannamei) ak yon premye pwa 0.98 ± 0.02 g, sijere 0 .20% MET-MET (AQUAVI®) pou pi bon pèfòmans kwasans lè kribich yo te manje manje ki redwi farin pwason [20]. Yo pwouve DL-MET sou kribich jivenil ak yon pwa inisyal 3.0 g ki sijere nivo ant 0.{{50}}6–0.3 0% pou yon bon repons pwodiktif lè kribich yo te manje manje ki redwi farin pwason [2]. Yon lòt bò, efè B. amyloliquefaciens (104 ak 1{{90}}3 UFC/mL) te fonn nan dlo nan yon sistèm flok bio pou L. vannamei kiltivatè yo te. rapòte [44,45], men pa gen okenn rapò sou efè probyotik sa a complétée nan manje redwi farin pwason sou pèfòmans kwasans L. vannamei. Se poutèt sa, etid sa a evalye efè ranplasman FM pa SBM ak PBM nan alimantasyon kribich siplemantè ak 0.13% nan DL-MET (D1), 0.06% nan MET-MET (D2), 0.19% nan MET-MET (D3), ak dapre rekòmandasyon manifakti yo nou te itilize konbinezon 0.13% DL-MET plis 0.1% B. amyloliquefaciens CECT 5940 (ekivalan a 109 UFC/g) (D4) ak 0.06% MET-MET plis 0.1% B. amyloliquefaciens CECT 5940. (D5). Tout rejim alimantè ki redwi farin pwason ki te konplete ak sous methionine ak probiotik te montre bon valè estabilite dlo. Se poutèt sa, rejim alimantè ki redwi farin pwason yo evalye nan etid sa a an akò ak rapò anvan yo ak tout tretman dyetetik te montre yon bon repons nan pèfòmans kwasans kribich yo. Men, kribich manje D1 te gen pi ba paramèt pèfòmans, pandan y ap kribich manje D3 ak D5 te gen pi wo paramèt pèfòmans. Pèfòmans siyifikatif kwasans ki ba nan kribich manje D1 ka gen rapò ak konsomasyon manje pòv akòz defisi methionine ki lakòz rediksyon palatabilite nan redwi aquafeeds farin pwason [20]. Pèfòmans kwasans segondè nan kribich D3 konpare ak kribich manje D1 ak D2 ta ka akòz deficiency nan methionine ak sous. Pi wo a ka paske li te rapòte ke MET MET dipeptide gen solubilite dlo ki ba ak gwo byodisponibilite, ki ka itilize avèk efikasite pa kribich ankouraje pi bon valè pèfòmans kwasans [2,10,14]. Kribich manje D5 tou te gen gwo kwasans pèfòmans menm ak menm nivo methionine ak sous nan D2, men ak adisyon a nan 0.10% B. amyloliquefaciens CECT 5940. Pèfòmans nan kwasans segondè ta ka akòz pwopriyete benefisye probyotik la, ki gen ladan aktivite antimikwòb ak pwodiksyon -amylase, cellulase, ak proteaz ki ogmante dijèstibilite ak absòpsyon eleman nitritif la [46]. Epitou, yon etid anvan te rapòte ke B. amyloliquefaciens se yon pwodiktè methionine [47] e sa ta ka kontribye nan kenbe balans lan nan EAA sa a nan D5. Anplis, yo te rapòte ke yon melanj de aditif manje ta ka amelyore efikasite nan pèfòmans nan kwasans nan òganis akwatik [48-50] ak griyaj [51]. Se poutèt sa, 50% FM ranplasman pa SBM ak PBM nan rejim siplemantè ak 0.19% MET-MET ak 0.06% MET-MET plis 0.10% B. amyloliquefaciens CECT 5940 te kapab amelyore itilizasyon eleman nitritif ak konsekans pèfòmans kwasans kribich la. Li enpòtan pou sonje ke SBM ak PBM gen nivo segondè nan asid gra, men n-3 asid gra poliensature ki gen yon chèn long yo manke nan sous pwoteyin sa yo [52]. Nan kontèks sa a, gen plis rechèch ki nesesè pou detèmine kijan itilizasyon SBM ak PBM enfliyanse konpozisyon asid gra nan rejim redwi farin pwason ak bon jan kalite misk kribich la.
benefis cistanche pou gason-ranfòse sistèm iminitè
4.2. Istoloji epatopankreyas
Epatopankreyas kribich la se yon ògàn dijestif epi li jwe yon wòl enpòtan nan sekresyon anzim dijestif, transpò eleman nitritif, depo, ak absòpsyon, kidonk, fonksyon li se kle nan pèfòmans kwasans kribich ak sante [30,53]. Sepandan, yo te rapòte ke alimantasyon farin pwason redwi ka chanje mòfoloji estriktirèl ògàn dijestif yo ak afekte kondisyon fizyolojik nan òganis akwatik ki lakòz reta kwasans [54]. Istoloji epatopankreyas la te analize kòm yon endikatè nan pèfòmans kwasans kribich la, sante, ak estati nitrisyonèl. Domaj nan estrikti epatopankreyas yo pa te obsève, selil B yo te selil epatopankreyas ki pi répandus ak wotè epitelyal yo te ogmante siyifikativman nan tout tretman dyetetik eksepte kribich manje D1, ki te gen yon repons menm jan ak rejim alimantè kontwòl la. Rezilta yo sijere ke epatopankreyas la sansib a enklizyon diferan sous methionine dyetetik ak B. amyloliquefaciens nan rejim alimantè redwi farin pwason, ogmante selil B, enfliyanse sekresyon anzim dijestif, absòpsyon eleman nitritif, ak asimilasyon, ak itilizasyon manje jan yo rapòte nan lòt etid lè yo itilize. sous altènatif farin pwason ak aditif [53,55-58]. Anplis, yo te rapòte ke sipleman methionine ta ka diminye chanjman epatopankreyas akòz deficiency li yo nan rejim alimantè pwason ki ba [8]. Se poutèt sa, dapre analiz istolojik la, pa gen okenn prèv ki montre toksisite ki te koze pa alimantasyon farin pwason redwi complétée ak diferan sous methionine dyetetik ak B. amyloliquefaciens nan L. vannamei hepatopancreas.
4.3. Analiz anzim dijestif
Aktivite dijestif anzim la se yon pwosesis fizyolojik ki amelyore dijesyon ak absòpsyon eleman nitritif, e se poutèt sa, se yon faktè kle pou fè pwomosyon pèfòmans kwasans kribich [59]. Men, etid anvan yo te rapòte ke aktivite anzim dijestif diminye anpil ak alimantasyon farin pwason redwi san sipleman aditif [60,61]. Aktivite anzim dijestif yo te itilize kòm yon endikatè nan fonksyon dijestif kribich la. Nan etid la prezan, kribich manje D3 amelyore (p <0.05) nan aktivite anzim dijestif epatopankreyas konpare ant tout gwoup yo, epi pa gen okenn diferans enpòtan yo te jwenn nan aktivite anzim dijestif entesten an. An jeneral, aktivite anzim dijestif ki ba yo te remake nan tou de ògàn nan kribich manje D1. An akò ak rezilta sa yo, sipleman methionine ogmante aktivite anzim dijestif nan dorad wouj (Pagrus major) [62], karp zèb (Ctenopharyngodon idella) [63], kribich blan (L. vannamei) [2,3,20], ak pwason rohu (Labeo rohita) [59]. Efè manje ki konplete ak B. amyloliquefaciens sou aktivite anzim dijestif kribich yo pa te rapòte nan L. vannamei men li konnen ke probiotik ogmante aktivite anzim dijestif yo ak amelyore itilizasyon manje ak dijesyon [64]. Anplis de sa, plizyè travay evalye diferan manje akwakilti complétée ak aditif konbine avèk probiotik epi yo montre yon ogmantasyon nan pwosesis dijestif la. [48,50]. Men, enkonsistans nan aktivite anzim dijestif yo te pwouve lè poul griyaj ak asid òganik, probiotik, ak konbinezon, petèt akòz nivo endiksyon aditif manje ak konbinezon yo te nan nivo ki pa pi bon [51]. Etid sa a tou rapòte enkonsistans nan aktivite anzim dijestif epatopankreyas nan kribich manje D3, D4, ak D5. Sepandan, rezilta yo sijere ke sipleman yo mansyone deja pa afekte fonksyonalite dijestif kribich la.
4.4. Repons transkripsyon jèn ki gen rapò ak iminitè
Repons transkripsyon jèn ki gen rapò ak iminitè a trè enpòtan pou jwenn done konsènan eta sante kribich la [35]. Sepandan, yo te rapòte ke alimantasyon farin pwason ki ba afekte repons iminitè ak antioksidan kribich akòz eleman nitritif dezekilib, gwo faktè anti-nitrisyonèl, ak kontni fib ki afekte konsomasyon manje, palatabilite, ak dijèstibilite [56,65-67]. Précédemment, nou te envestige efè sous pwoteyin ak nivo sou jèn ki gen rapò ak iminitè (Hc, pPO, LGBP), kapasite antioksidan (MnSOD), ak tolerans estrès (HSP60) epi nou te sijere ke mekanis defans yo pa te afekte. lè yo te manje kribich alimantasyon ki gen pwoteyin ki baze sou plant (30-35%) nan nivo mwayen [35]. Nan lòt men an, yo te rapòte ke rejim ki ba farin pwason gen efè negatif sou repons iminitè kribich la lè farin pwason an redwi soti nan 250 g / kg a 100 g / kg [68]. Sepandan, repons antioksidan an te modile san yo pa afekte fwa ak entesten estati oksidatif lè bas Ewopeyen an (Dicentrarchus labrax) te manje manje pwason ki ba ak yon nivo DL-Met 12% pi ba pase egzijans yo etabli [69]. Epitou, repons iminitè a ak kapasite antioksidan yo te amelyore lè kribich blan (L. vannamei) [8] ak tilapia Nil (O. niloticus) [14] yo te manje yon rejim alimantè ki ba ak farin pwason ak 0.15% MET-MET. Anplis, yon etid endike ke tilapia larivyè Nil (O. niloticus) te manje alimantasyon farin pwason ki ba ak Spirulina platensis ak B. amyloliquefaciens te amelyore repons iminitè ak kapasite antioksidan, men diminye tolerans estrès [21]. Rezilta etid sa a te jwenn repons transkripsyon jèn ki gen rapò ak iminite, kapasite antioksidan, ak tolerans estrès yo te amelyore lè kribich yo te manje D2, D3, D4, ak D5, ki enteresan paske sa a endike ke methionine ak sipleman probyotik ka modil pozitivman. mekanis defans yo, diminye afektasyon ki te koze pa manje pwason ki ba. Kontrèman, repons ki ba transkripsyon jèn ki gen rapò ak iminitè yo obsève nan kribich manje D1 ta ka akòz yon defisi methionine. Sepandan, konsidere pèfòmans pwodiktif la, pi bon tretman dyetetik yo ta ka D3 ak D5 san yo pa afekte kwasans ak sante kribich yo.
4.5. Analiz mikrobyota dijestif ak prediksyon fonksyonèl
Sistèm dijestif kribich la òganize kominote mikwo-òganis ki domine pa bakteri, men mikwo-òganis ekaryotik ka prezan tou, ki bati yon gwo ekosistèm mikwòb ki rele mikrobyota [70]. Microbiota sistèm dijestif kribich la enfliyanse iminite oswa rezistans, pwodiksyon metabolit benefisye, ak dijesyon eleman nitritif ak asimilasyon [71,72]. Rejim se youn nan prensipal faktè anviwònman ki afekte mikrobiota sistèm dijestif kribich la [73]. Etid sa a evalye efè rejim alimantè pwason ki ba sou divèsite, estrikti, ak abondans relatif mikwo-òganis prokaryotik ak ekaryotik ki soti nan trip ak epatopankreyas L. vannamei lè l sèvi avèk sekans 16S ak 18S. Rezilta etid yo sigjere ke divèsite ak estrikti mikrobiota a (prokaryotic ak eukaryotic) pa t diferan ant tretman dyetetik. Sepandan, konparezon divèsite beta te detèmine ke mikrobyota prokaryotik entesten gwoupe separeman ak mikrobiota epatopankreyas, ki sijere yon nich inik ekolojik dapre ògàn dijestif kribich [74]. Se poutèt sa, mikwo-òganis espesyalize nan tou de trip la ak epatopankreas yo ede amelyore enèji lame a jwenn avèk efikasite ak pwosesis metabolik ki nesesè pou kwasans, repons iminitè, dijesyon eleman nitritif, ak asimilasyon [75]. Kòm yo pral eksplike pi ba a, rezilta etid yo sijere ke abondans nan tou de mikwo-òganis prokaryotic ak ekaryotik ta ka ogmante epi ede kribich yo sèvi ak efikasman nitritif ki soti nan rejim alimantè pwason ki ba pou pwosesis metabolik ki nesesè pou jwenn enèji, kwasans, iminite, dijesyon, ak nitrisyon. Dapre abondans nan prokaryot nan tout entesten ak echantiyon epatopankreyas, filyòm ki pi répandus se Proteobacteria pandan y ap filòm Actinobacteria te gen yon prezans pi wo nan echantiyon epatopankreyas. Rezilta sa yo an akò ak yon etid anvan [36], epi li te dekri tou ke phyla sa yo te dominan nan jivenil ak adilt kribich (Penaeus monodon) [76]. Pseudoalteromonas ki fè pati filòm Proteobacteria se yon anzim dijestif (proteaz, amilaz, -galaktozidaz, ak fosfolipas) ki pwodui mikwo-òganis ki kontribye nan dijesyon eleman nitritif kribich la [77–79]; li te rapòte tou ke li kontribye nan asid gra poliensature (PUFA) ak asid gra kout chèn (SCF) sentèz [80,81]. Ruegeria, ki fè pati filòm Proteobacteria, pwodui aktivite triesteraz, kontribye nan lame pwosesis dijestif ak aktivite anti-bakteri kont Vibrio anguillarum [82]. Demequina ki fè pati filòm Actinobacteria ka pwodui -amylase, xylanase, ak cellulase, ki patisipe nan absòpsyon ak itilizasyon idrat kabòn [83–86]. Dapre pwofil chemotaxonomic ak jenomik, Lysinimicrobium ka konsidere kòm yon sinonim subjectif nan Demequina [87] epi kidonk li ka gen menm kontribisyon nan aktivite anzim dijestif ak dijesyon idrat kabòn. Wòl mikwo-òganis prokaryotik nan sistèm dijestif kribich la gen rapò ak prediksyon fonksyon nan baz done KEGG, ki te asid amine, idrat kabòn, kofaktè, ak metabolis vitamin ak motilite selil. Pwodiksyon anzim dijestif la ak sentèz esansyèl asid gra endike wòl nan benefik mikrobiota nan sante ak eksitasyon iminitè nan sistèm dijestif kribich la. Anplis, pwosesis mobilite selilè tankou chemotaxis bakteri ak asanble flagellar, ta ka sipòte mikwo-òganis prokaryotik yo nan adapte yo ak anviwònman dijestif lame a [88]. Se poutèt sa, rejim alimantè ki ba pwason, complétée ak 0.19% MET-MET oswa 0.06% MET-MET plis probiotik (B. amyloliquefaciens) ta ede wòl yo benefisye nan kominote prokaryotic nan sistèm dijestif kribich la.
Li te difisil pou karakterize abondans mikwo-òganis ekaryotik ak sekans jèn 18S paske yo te detekte yon gwo kantite ADN L. vannamei nan etid sa a. Anplis de sa, li komen nan metabarcoding ADN fekal ke ADN mikwo-eukaryot yo nan poupou degrade pi rapid pase ADN lame a ak etap adisyonèl tankou klivaj oswa bloke ADN lame lè l sèvi avèk anzim restriksyon oswa primè bloke anvan oswa apre anplifikasyon [89]. ]. Men, rezilta etid yo bay yon insight sou kominote mikwoukaryotik nan sistèm dijestif kribich la. Filòm SAR la te pi abondan nan trip kribich yo ki te manje alimantasyon farin pwason ki ba. Aurantiochytrium te gen pi gwo abondans nan trip kribich manje D3 pandan y ap Aplanochytrium te pi abondan nan trip kribich manje D5. Anplis de sa, Ebria te pi souvan nan trip kribich manje D1. Aurantiochytrium se yon pwodiktè asid eicosapentaenoic (EPA) [90] tandiske Aplanochytrium pwodui asid docosahexaenoic (DHA) [91]. Asid gra sa yo jwe yon wòl esansyèl nan ankouraje kwasans oswa ranfòse iminite òganis akwatik yo; tou, EPA ak DHA ede òganis akwatik diminye faktè enflamatwa ak diminye enflamasyon [90]. Nan lòt men an, Ebria gen yon eskèlèt entèn solid siliceuz, ki ta ka lakòz dijesyon pòv pa òganis akwatik [92], ki ta ka diminye pèfòmans nan kwasans nan kribich manje D1. Mikwo-òganis ekaryotik yo viv kòm kòmansal oswa mutualist nan sistèm dijestif la ak tisi envètebre maren yo, men li posib ke yo soti nan dlo kotyè yo te itilize pou irige letan kribich la, jan sa te dekri anvan [93]. Sepandan, itilizasyon alimantasyon ki zanmitay anviwònman an ak complétée ak aditif ak probiotik ka kontwole kwasans mikwoalg danjere nan sistèm dijestif kribich la ak anviwònman li yo [94]. Sa a dakò ak rezilta etid yo, ki endike ke yon rejim alimantè ki ba farin pwason ki konplete ak 0.13% DL-MET ogmante abondans Ebria ki afekte pèfòmans pwodiktif ak sante kribich yo, pandan y ap rejim siplemantè ak 0.19% METMET oswa 0.06% MET-MET plis 0.10% B. amyloliquefaciens ta ede wòl benefisye kominote ekaryotik nan sistèm dijestif kribich la.
benefis cistanche pou gason-ranfòse sistèm iminitè
5. Konklizyon
SBM ak PBM ta ka ranplase farin pwason an pasyèl jiska 50% nan manje kribich ki konplete ak MET-MET ak/oswa B. amyloliquefaciens CECT 5940 san efè negatif sou pèfòmans kwasans. An konparezon ak rejim alimantè kontwòl la, kribich yo te manje redwi rejim farin pwason ak 0.19% MTE-MET ak 0.06% MET-MET plis 0.10% B. amyloliquefaciens CECT 5940 te gen 43% ak 40% plis byomas final, respektivman. Anplis, kribich yo te manje alimantasyon farin pwason ki te konplete ak MET-MET ak/oswa B. amyloliquefaciens CECT 5940 te gen pi bon wotè selil epitelyal epatopankreyas, aktivite anzim dijestif, repons transkripsyon jèn ki gen rapò ak iminitè, ak mikrobyota benefisye pou sistèm dijestif la. Plis rechèch nesesè pou mennen ankèt sou nivo gradye nan sous methionine ak efè sinèrjik asid amine ak probiotik nan rejim redwi farin pwason pou kribich kiltive yo. Epitou, li ta enteresan pou evalye kijan SBM ak PBM enfliyanse konpozisyon asid gra nan rejim redwi farin pwason ak bon jan kalite misk kribich la. Men, enfòmasyon sa a ta ka enteresan pou devlope manje pwason ki ba pou akwakilti san yo pa afekte kwasans ak byennèt òganis akwatik yo.
Referans
1. FAO. Eta Mondyal lapèch ak akwakilti 2022. Nan direksyon pou transfòmasyon ble; FAO: Wòm, Itali. [CrossRef]
2. Xie, J.-J.; Lemme, A.; Li, J.-Y.; Yin, P.; Figueiredo-Silva, C.; Liu, Y.-J.; Xie, S.-W.; Niu, J.; Tian, L.-X. Nivo farin pwason ka redwi avèk siksè nan kribich blan (Litopenaeus vannamei) si yo konplete ak DL-Methionine (DL-Met) oswa DL-MethionylDL-Methionine (Met-Met). Aquac. Noutr. 2017, 24, 1144–1152. [CrossRef]
3. Lu, J.; Zhang, X.; Zhou, Q.; Cheng, Y.; Luo, J.; Masagounder, K.; Li, S.; Zhu, T.; Yuan, Y.; Shi, B.; et al. Sipleman DL-methionyl-DLmethionine dyetetik ta ka amelyore pèfòmans kwasans anba estrateji farin pwason ki ba pa modulation chemen siyal TOR nan Litopenaeus vannamei. Aquac. Noutr. 2021, 27, 1921–1933. [CrossRef]
4. Cho, JH; Kim, IH Pwason repa-valè nitritif. J. Anim. Fizyol. Anim. Noutr. 2011, 95, 685–692. [CrossRef] [PubMed]
5. Chante, X.; Wi, H.; Jin, F.; Li, H.; Kim, Y.-S.; Xiao, J.; Guo, Z. Efè fèrmante repa soya ak guanosine 50 -monofosfat sou kwasans, sante entesten ak kapasite anti-estrès Penaeus vannamei nan rejim alimantè pwason ki ba. Aquaculture 2022, 548, 737591. [CrossRef]
6. Yao, W.; Yang, P.; Zhang, X.; Xu, X.; Zhang, C.; Li, X.; Leng, X. Efè ranplase farin pwason dyetetik ak pwoteyin Clostridium autoethanogenum sou kwasans ak bon jan kalite vyann nan kribich blan Pasifik (Litopenaeus vannamei). Aquaculture 2022, 549, 737770. [CrossRef]
7. Zhang, J.; Yang, H.; Yan, Y.; Zhang, C.; Wi, J.; Solèy, Y. Efè pwobiotik orijin pwason sou pèfòmans kwasans, repons iminitè ak sante entesten nan kribich (Litopenaeus vannamei) alimantasyon manje ak repa pwason ki pasyèlman ranplase pa repa soya. Aquac. Noutr. 2020, 26, 1255–1265. [CrossRef]
8. Ji, R.; Wang, Z.; Li, J.; Masagounder, K.; Xu, W.; Mai, K.; Ayi, Q. Efè sipleman DL-methionyl-DL-methionine sou pèfòmans kwasans, repons iminitè ak antioksidatif nan kribich janm blan (Litopenaeus vannamei) manje rejim alimantè pwason ki ba. Aquac. Rep. 2021, 21, 100785. [CrossRef]
9. Chaklader, R.; Siddik, MAB; Fotedar, R. Ranplasman total de farin pwason ak repa bèt volay pa-pwodwi afekte kwasans lan, bon jan kalite nan misk, estrikti istolojik, kapasite antioksidan ak repons iminitè nan barramundi jivenil, Lates calcarifer. PLoS ONE 2020, 15, e0242079. [CrossRef]
10. Niu, J.; Lemme, A.; Li, J.-Y.; Li, H.-Y.; Xie, S.-W.; Liu, Y.-J.; Yang, H.-J.; Figueiredo-Silva, C.; Tian, L.-X. Evalye byodisponibilite pwodwi Novel Met-Met (AQUAVI®Met-Met) konpare ak dl-methionine (dl-Met) nan kribich blan (Litopenaeus vannamei). Aquaculture 2018, 484, 322–332. [CrossRef]
11. Skiba-Cassy, S.; Geurden, I.; Panserat, S.; Seiliez, I. Dezekilib methionine dyetetik chanje règleman transkripsyon jèn ki enplike nan metabolis glikoz, lipid ak asid amine nan fwa Twit lakansyèl (Oncorhynchus mykiss). Aquaculture 2016, 454, 56–65. [CrossRef]
12. Machado, M.; Serra, CR; Oliva-Teles, A.; Costas, B. Methionine ak triptofan jwe diferan wòl modulatwa nan Repons iminitè innati (Dicentrarchus labrax) Ewopeyen an ak siyal apoptoz—yon etid in vitro. Devan. Imunol. 2021, 12, 660448. [CrossRef]
13. Zhou, Y.; Li, J.; Su, N.; Masagounder, K.; Xu, M.; Chen, L.; Liu, Q.; Wi, H.; Solèy, Z.; Ye, C. Efè DL-methionine ak yon analogique hydroxy methionine (MHA-Ca) sou kwasans, pwofil asid amine ak ekspresyon jèn ki gen rapò ak taurin ak sentèz pwoteyin nan karp komen (Cyprinus carpio). Aquaculture 2021, 532, 735962. [CrossRef]
14. Guo, T.-Y.; Zhao, W.; Li, J.-Y.; Liao, S.-Y.; Xie, J.-J.; Xie, S.-W.; Masagounder, K.; Liu, Y.-J.; Tian, L.-X.; Niu, J. Dietary dl-methionyl dl-methionine sipleman ogmante pèfòmans kwasans, kapasite antioksidan, kontni an nan asid amine esansyèl ak amelyore divèsite nan mikrobiota entesten nan tilapia Nil (Oreochromis niloticus). Br. J. Nutr. 2020, 123, 72–83. [CrossRef]
15. Lin, J.; Zeng, Q.; Zhang, C.; Song, K.; Lu, K.; Wang, L.; Rahimnejad, S. Efè sipleman Bacillus subtilis nan rejim soya ki baze sou repa sou pèfòmans kwasans, dijèstibilite rejim alimantè, ak sante zantray nan Bullfrog Lithobates catesbeianus. Aquac. Rep. 2020, 16, 100273. [CrossRef]
16. Dao, X.; Li, J.; Lu, J.; Chen, Z.; Jin, M.; Jiao, L.; Masagounder, K.; Liu, W.; Zhou, Q. Efè Bacillus subtilis DSM 32315 (Gutcare®) sou pèfòmans kwasans, estati antioksidan, kapasite iminitè, ak fonksyon entesten pou jivenil Litopenaeus vannamei ki te manje ak alimantasyon ki gen anpil/ba-farin pwason. Aquac. Rep. 2022, 26, 101282. [CrossRef]
17. De Oliveira, MJK; Sakomura, NK; Dorigam, JCDP; Doranalli, K.; Soares, L.; Viana, G. Bacillus amyloliquefaciens CECT 5940 pou kont li oswa nan konbinezon ak pwomotè kwasans antibyotik amelyore pèfòmans nan griy anba defi patojèn enterik. Poult. Sci. 2019, 98, 4391–4400. [CrossRef]
18. Silva, TFA; Petrillo, TR; Yunis-Aguinaga, J.; Marcusso, P.; Claudiano, GDS; de Moraes, FR; de Moraes, JRE Efè probiotik Bacillus amyloliquefaciens sou pèfòmans kwasans, ematoloji, ak mòfometri entesten nan tilapia Nil elve nan kaj. Lat. Am. J. Aquat. Res. 2015, 43, 963–971. [CrossRef]
19. Bai, S.; Katya, K.; Yun, H. Aditif nan aquafeed. Nan Feed and Feeding Practices in Aquaculture; Woodhead Publishing: Sawston, UK, 2015; paj 171–202. [CrossRef]
20. Wang, L.; Wi, L.; Hua, Y.; Zhang, G.; Li, Y.; Zhang, J.; Li, J.; Liu, M.; Shao, Q. Efè dietarydl-methionyl-dl-methionine (Met-Met) sou pèfòmans kwasans, konpozisyon kò ak paramèt ematolojik nan kribich blan (Litopenaeus vannamei) nouri ak alimantasyon ki baze sou pwoteyin plant. Aquac. Res. 2019, 50, 1718–1730. [CrossRef]
21. Al-Deriny, SH; Dawood, MA; Zaid, AAA; El-Tras, WF; Paray, BA; Van Doan, H.; Mohamed, RA Efè sinèrji Spirulina platensis ak Bacillus amyloliquefaciens sou pèfòmans kwasans, istomorfoloji entesten, ak repons iminitè tilapia Nil (Oreochromis niloticus). Aquac. Rep. 2020, 17, 100390. [CrossRef]
22. Solèy, Y.; Zhang, Y.; Liu, M.; Li, J.; Lai, W.; Geng, S.; Yuan, T.; Liu, Y.; Di, Y.; Zhang, W.; et al. Efè sipleman dyetetik Bacillus amyloliquefaciens CECT 5940 sou pèfòmans kwasans, estati antioksidan, iminite, ak aktivite anzim dijestif pou griyaj manje manje mayi-ble-soya. Poult. Sci. 2022, 101, 101585. [CrossRef]
23. NRC (National Research Council). Kondisyon eleman nitritif pwason ak kribich; National Academic Press: Washington, DC, USA, 2011. [CrossRef]
24. Guo, J.; Davis, R.; Starkey, C.; Davis, DA Efikasite divès kalite materyèl kouvwi yo anpeche lesivaj eleman nitritif pou Pasifik kribich blan Litopenaeus vannamei alimantasyon komèsyal yo. J. World Aquac. Soc. 2020, 52, 195–203. [CrossRef]
25. Biwo Entènasyonal Epizootik; Komisyon Estanda Sante Animal Akwatik. Manyèl tès dyagnostik pou bèt akwatik. Office international des épizooties. 2022. Disponib sou Entènèt: https://www.woah.org/en/what-we-do/standards/codes-andmanuals/aquatic-manual-online-access/ (aksede sou 1 septanm 2022).
26. Martinez-Porchas, M.; Ezquerra-Brauer, M.; Mendoza-Cano, F.; Higuera, JEC; Vargas-Albores, F.; Martinez-Cordova, LR Efè sipleman eterotwofik ak fotoototwofik bio flok, sou repons pwodiksyon an, kondisyon fizyolojik ak kalite apre-rekòlte nan kribich la whiteleg, Litopenaeus vannamei. Aquac. Rep. 2020, 16, 100257. [CrossRef]
27. Peña-Rodríguez, A.; Elizondo-González, R.; Nieto-López, MG; Ricque-Marie, D.; Cruz-Suárez, LE Rejim pratik pou pwodiksyon dirab kribich mawon, Farfantepenaeus californiensis, jèn nan prezans makroalg vèt Ulva clathrata kòm manje natirèl. J. Appl. Phycol. 2017, 29, 413–421. [CrossRef]
28. Piérri, V.; Valter-Severino, D.; Goulart-De-Oliveira, K.; Manoel-Do-Espírito-Santo, C.; Nascimento-Vieira, F.; Quadros-Seiffert, W. Kiltivasyon kribich maren nan sistèm biofloc teknoloji (BFT) anba diferan alkalinite dlo. Braz. J. Biol. 2015, 75, 558–564. [CrossRef] [PubMed]
29. Gonzalez-Galaviz, JR; Casillas-Hernández, R.; Flores-Perez, MB; Lares-Villa, F.; Bórquez-López, RA; Gil-Núñez, JC Efè jenotip ak sous pwoteyin sou pèfòmans kribich blan Pasifik (Litopenaeus vannamei). Ital. J. Anim. Sci. 2020, 19, 289–294. [CrossRef]
30. Bell, TA; Lightner, DV A Handbook of Normal Penaeid Shrimp Istology; Òganizasyon Nasyonzini pou Manje ak Agrikilti: Wòm, Itali, 1988.
31. Casillas-Hernández, R.; Arévalo-Sainz, KJ; Gonzalez-Galaviz, JR; Rodríguez-Jaramillo, MDC; Bórquez-López, RA; Gil Núñez, JC; Flores-Pérez, MB; Lares-Villa, F.; Ibarra-Gámez, JC; Barrios, RMM Efè konsantrasyon segondè nan gaz kabonik sou pèfòmans ak istoloji tisi nan kribich Litopenaeus vannamei. Aquac. Res. 2021, 52, 3991–3996. [CrossRef]
32. Xiao, Z.; Tanpèt, R.; Tsang, A. Yon metòd quantitative lanmidon-yod pou mezire aktivite alfa-amilaz ak glikoamilaz. Anal. Byochim. 2006, 351, 146–148. [CrossRef]
33. Bradford, MM Yon metòd rapid ak sansib pou kantite mikwogram kantite pwoteyin ki itilize prensip lyezon pwoteyin ak lank. Anal. Byochim. 1976, 72, 248–254. [CrossRef]
34. Zhang, S.-P.; Li, J.-F.; Wu, X.-C.; Zhong, W.-J.; Xian, J.-A.; Liao, S.-A.; Miao, Y.-T.; Wang, A.-L. Efè diferan nivo lipid dyetetik sou kwasans, siviv ak ekspresyon jèn ki gen rapò ak iminitè nan kribich blan Pasifik, Litopenaeus vannamei. Pwason kristase. Imunol. 2013, 34, 1131–1138. [CrossRef]
35. Anaya, LR; Casillas-Hernández, R.; Flores-Pérez, MB; Lares-Villa, F.; Lares-Jiménez, LF; Luna-Nevarez, P.; Gonzalez-Galaviz, JR Efè liy jenetik, sous pwoteyin, ak nivo pwoteyin sou kwasans, siviv, ak ekspresyon jèn ki gen rapò ak iminitè nan Litopenaeus vannamei. J. World Aquac. Soc. 2020, 51, 1161–1174. [CrossRef]
36. Casillas-Hernández, R.; Arévalo-Sainz, KJ; Flores-Pérez, MB; Garcia-Clark, JG; Rodriguez-Anaya, LZ; Lares-Villa, F.; BórquezLópez, RA; Gil-Núñez, JC; Gonzalez-Galaviz, JR Repons transkripsyon jèn ki gen rapò ak iminitè nan Litopenaeus vannamei kiltive nan sistèm akwakilti resikle ak CO2 ki wo. Rev Bras. de Zootec. 2021, 50, 20200197. [CrossRef]
37. Guzmán-Villanueva, LT; Escobedo-Fregoso, C.; Barajas-Sandoval, DR; Gomez-Gil, B.; Peña-Rodríguez, A.; Martínez-Diaz, SF; Balcazar, JL; Quiroz-Guzmán, E. Evalyasyon dinamik mikwòb ak ekspresyon jèn anzim antioksidan apre administrasyon probyotik nan kiltive kribich blan Pasifik (Litopenaeus vannamei). Aquaculture 2020, 519, 734907. [CrossRef]
38. Callahan, BJ; Mcmurdie, PJ; Rosen, MJ; Han, AW; Johnson, AJA; Holmes, SP DADA2 : Enferans echantiyon wo rezolisyon ki soti nan done anplikon Illumina. Nat. Metòd 2016, 13, 581–583. [CrossRef]
39. Lahti, L.; Shetty, S. Microbiome R pake; Lage (3.16); Bioconductor: Boston, MA, USA, 2017. [CrossRef]
40. Langille, MGI; Zaneveld, J.; Caporaso, JG; McDonald, D.; Knights, D.; Reyes, JA; Clemente, JC; Burkepile, DE; Vega Thurber, RL; Knight, R.; et al. Prediksyon fonksyonèl pwofil nan kominote mikwòb lè l sèvi avèk sekans jèn makè 16S rRNA. Nat. Biotechnol. 2013, 31, 814–821. [CrossRef]
41. Cornejo-Granados, F.; Lopez-Zavala, AA; Gallardo-Becerra, L.; Mendoza-Vargas, A.; Sánchez, F.; Vichido, R.; Brieba, LG; Viana, MT; Sotelo-Mundo, RR; Ochoa-Leyva, A. Mikwòbòm nan kribich Whiteleg Pasifik la revele diferan konpozisyon kominote bakteri ant kondisyon epidemi sovaj, akwakilti ak AHPND/EMS. Sci. Rep. 2017, 7, 1–15. [CrossRef]
42. Façanha, FN; Oliveira-Neto, AR; Figueiredo-Silva, C.; Nunes, AJ Efè dansite chosèt kribich ak nivo klasman methionine dyetetik sou pèfòmans kwasans Litopenaeus vannamei elve nan yon sistèm dlo vèt. Aquaculture 2016, 463, 16–21. [CrossRef]
43. Nunes, AJP; Sabry-Neto, H.; Masagounder, K. Pwoteyin brit nan alimantasyon manje ki ba-pwason pou jivenil Litopenaeus vannamei ka redwi atravè yon sipleman ki byen balanse nan asid amine esansyèl. J. World Aquac. Soc. 2019, 50, 1093–1107. [CrossRef]
44. Llario, F.; Falco, S.; Sebastiá-Frasquet, M.-T.; Escrivá, J.; Rodilla, M.; Poersch, LH Wòl Bacillus amyloliquefaciens sou Litopenaeus vannamei Pandan Matirite yon Sistèm Biofloc. J. Mar. Sci. Eng. 2019, 7, 228. [CrossRef]
45. Llario, F.; Romano, LA; Rodilla, M.; Sebastiá-Frasquet, MT; Poersch, LH Aplikasyon Bacillus amyloliquefaciens kòm probiotik pou Litopenaeus vannamei (Boone, 1931) kiltive nan yon sistèm biofloc. Iran. J. Pwason. Sci. 2020, 19, 904–920.
46. Gharib-Naseri, K.; Dorigam, JCDP; Doranalli, K.; Kheravii, S.; Swick, RA; Choct, M.; Wu, S.-B. Modilasyon jèn ki gen rapò ak entegrite zantray, apoptoz, ak iminite kache efè benefik Bacillus amyloliquefaciens CECT 5940 nan griy ki te manje alimantasyon ak diferan nivo pwoteyin nan yon modèl defi enterit nekrotik. J. Anim. Sci. Biotechnol. 2020, 11, 104. [CrossRef]
47. Ajogwu, TMC; Ekwealor, CC; Mbah, AN; Madukwe, EJ; Ekwealor, IA Depistaj Methionine-pwodwi Espès Bacillus soti nan Nijeryen kondiman manje fèrmante ak efè kèk paramèt kiltirèl sou akimilasyon Methionine. Am. J. Manje Nutr. 2020, 9, 16–22. [CrossRef]
48. Yu, M.-C.; Li, Z.-J.; Lin, H.-Z.; Wen, G.-L.; Ma, S. Efè Bacillus dyetetik ak remèd fèy medsin sou kwasans lan, aktivite anzim dijestif, ak paramèt byochimik serom nan kribich Litopenaeus vannamei. Aquac. Ent. 2008, 16, 471–480. [CrossRef]
49. Yılmaz, S.; Ergun, S.; Yigit, M.; Çelik, E. Efè konbinezon de Bacillus subtilis dyetetik ak asid trans-cinnamic sou repons iminitè natirèl ak rezistans nan Twit lakansyèl, Oncorhynchus mykiss Yersinia ruckeri. Aquac. Res. 2020, 51, 441–454. [CrossRef]
50. Zare, R.; Kenari, AA; Sadati, MWEN Enfliyans asid acetic dyetetik, pwoteyin (probyotik), ak konbinezon yo sou pèfòmans kwasans, mikrobyota entesten, anzim dijestif, paramèt iminolojik, ak konpozisyon asid gra nan Siberian Sturgeon (Acipenser baerii, Brandt, 1869). Aquac. Ent. 2021, 29, 891–910. [CrossRef]
51. Rodjan, P.; Soisuwan, K.; Thongprajukaew, K.; Theapparat, Y.; Khongthong, S.; Jeenkeawpieam, J.; Salaeharae, T. Efè asid òganik oswa probiotik pou kont li oswa nan konbinezon sou pèfòmans kwasans, dijèstibilite eleman nitritif, aktivite anzim, mòfoloji entesten ak mikwoflor zantray nan poul broiler. J. Anim. Fizyol. Anim. Noutr. 2018, 102, e931–e940. [CrossRef] [PubMed]
52. Hong, Y.; Chu, J.; Kirby, R.; Sheen, S.; Chien, A. Efè ranplase pwoteyin repa pwason ak yon melanj de repa bèt volay pa-pwodwi ak repa soya fèrmante sou pèfòmans nan kwasans ak tisi konpozisyon nitrisyonèl nan bas Azyatik (Lates calcarifer). Aquac. Res. 2021, 52, 4105–4115. [CrossRef]
53. Burri, L.; Berge, K.; Chumkam, S.; Jintasataporn, O. Efè diferan nivo enklizyon manje kril repa sou kwasans ak mòfoloji epatopankreyas nan Litopenaeus vannamei. Aquac. Res. 2020, 51, 4819–4823. [CrossRef]
54. Murashita, K.; Matsunari, H.; Fukada, H.; Suzuki, N.; Furuita, H.; Oku, H.; Rønnestad, I.; Yoshinaga, H.; Yamamoto, T. Efè yon rejim alimantè ki ba pwason ki baze sou plant sou fizyoloji dijestif nan yellowtail Seriola quinqueradiata. Aquaculture 2019, 506, 168–180. [CrossRef]
55. Rahimnejad, S.; Yuan, X.; Wang, L.; Lu, K.; Song, K.; Zhang, C. Sipleman chitooligosaccharide nan rejim alimantè ki ba pwason pou kribich blan Pasifik (Litopenaeus vannamei): Efè sou kwasans, iminite natirèl, istoloji zantray, ak ekspresyon jèn ki gen rapò ak iminitè. Pwason kristase. Imunol. 2018, 80, 405–415. [CrossRef]
56. Peña-Rodríguez, A.; Pelletier-Morreeuw, Z.; García-Luján, J.; Rodríguez-Jaramillo, MDC; Guzmán-Villanueva, L.; Escobedo regoso, C.; Tovar-Ramírez, D.; Reyes, AG Evalyasyon nan Agave lechuguillaby-pwodwi ekstrè brit kòm yon aditif manje pou jivenil kribich Litopenaeus vannamei. Aquac. Res. 2019, 51, 1336–1345. [CrossRef]
57. Ray, GW; Liang, D.; Yang, Q.; Tan, B.; Dong, X.; Chi, S.; Liu, H.; Zhang, S.; Rimei, L. Efè ranplase farin pwason ak konsantre pwoteyin soya dyetetik (SPC) sou kwasans, endis byochimik serom, ak fonksyon antioksidatif pou jivenil kribich Litopenaeus vannamei. Aquaculture 2020, 516, 734630. [CrossRef]
58. Ambasankar, K.; Dayal, JS; Vasagam, KK; Sivaramakrishnan, T.; Sandeep, KP; Panigrahi, A.; Ananda Raja, R.; Burri, L.; Vijayan, KK Growth, konpozisyon asid gra, ekspresyon jèn ki gen rapò ak iminitè, endis istoloji ak ematoloji Penaeus vannamei te manje nivo klasman kril Antatik nan de konsantrasyon farin pwason diferan. Aquaculture 2022, 553, 738069. [CrossRef]
59. Noor, Z.; Noor, M.; Khan, SA; Younas, W.; Ualiyeva, D.; Hassan, Z.; Yousafzai, AM Sipleman dyetetik nan methionine amelyore pèfòmans kwasans, iminite natirèl, anzim dijestif, ak aktivite antioksidan nan rohu (Labeo rohita). Pwason Physiol. Byochim. 2021, 47, 451–464. [CrossRef]
60. Yun, H.; Shahkar, E.; Hamidoghli, A.; Lee, S.; Won, S.; Bai, SC Evalyasyon repa soya dyetetik kòm ranplasman repa pwason pou kribich jivenil blan, Litopenaeus vannamei elve nan sistèm biofloc. Ent. Aquat. Res. 2017, 9, 11–24. [CrossRef]
61. Hu, X.; Yang, H.-L.; Yan, Y.-Y.; Zhang, C.-X.; Wi, J.-D.; Lu, K.-L.; Hu, L.-H.; Zhang, J.-J.; Ruan, L.; Solèy, Y.-Z. Efè fruktooligosakarid sou kwasans, iminite, ak mikrobyota entesten kribich (Litopenaeus vannamei) alimantasyon manje ak repa pwason an pati ranplase pa repa soya. Aquac. Noutr. 2019, 25, 194–204. [CrossRef]
62. Mamauag, REP; Gao, J.; Nguyen, BT; Ragaza, JA; Koshio, S.; Ishikawa, M.; Yokoyama, S. Sipleman dl-Methionine ak Methionine Dipeptide nan alimantasyon yo efikas pou devlopman ak kwasans lav ak jèn dorad Lanmè Wouj, Pagrus major. J. World Aquac. Soc. 2012, 43, 362–374. [CrossRef]
63. Wu, P.; Tang, L.; Jiang, W.; Hu, K.; Liu, Y.; Jiang, J.; Kuang, S.; Tang, W.; Zhang, Y.; Zhou, X.; et al. Relasyon ki genyen ant methionine dyetetik ak kwasans, dijesyon, absòpsyon, ak estati antioksidan nan tisi entesten ak epatopankreyas nan karp zèb sub-adult (Ctenopharyngodon idella). J. Anim. Sci. Biotechnol. 2017, 8, 1–14. [CrossRef]
64. Encarnação, P. Functional Feed Additives in Aquaculture Feeds. Nan fòmilasyon Aquafeed; Laprès akademik: Cambridge, MA, USA, 2016; paj 217–237. [CrossRef]
65. Xie, S.; Wei, D.; Yin, P.; Zheng, L.; Guo, T.; Liu, Y.; Tian, L.; Niu, J. Ranplasman dyetetik nan sentèz pwoteyin ki gen pwoblèm manje pwason ak repons iminitè nan jivenil kribich blan Pasifik, Litopenaeus vannamei nan salinite ki ba. Konp. Byochim. Fizyol. Pati B Biochem. Mol. Biol. 2018, 228, 26–33. [CrossRef]
66. Ayiku, S.; Shen, J.; Tan, B.-P.; Dong, X.-H.; Liu, H.-Y. Efè diminye farin pwason dyetetik ak sipleman ledven sou kwasans Litopenaeus vannamei, repons iminitè ak rezistans maladi kont Vibrio harveyi. Microbiol. Res. 2020, 239, 126554. [CrossRef]
