Vaksen ADN pwovoke iminite pwoteksyon kont SARS CoV-2 enfeksyon nan hamsters

Fig 2. Repons antikò nan sourit apre vaksen ak vaksen SARS-CoV ak SARS-CoV-2 S ADN.

(A) Sourit BALB/c (n=4 pou chak gwoup) te vaksinen nan miskilè de fwa nan yon entèval 3-semèn ak 100 ug plasmid endike, ki te swiv pa elektwoporasyon. Echantiyon serom yo te kolekte nan pwen tan endike yo apre premye vaksinasyon an. (BD, F, G) ELISA te evalye antikò kont SARS-CoV-2 pwoteyin Spike tout longè, rejyon S2, ak RBD. (E, H) Yo te evalye antikò netralizasyon vaksen kont SARS-CoV-2 pa yon tès netralizasyon. Tit antikò yo prezante kòm mwayèn ± SEM, ak tit netralizasyon yo eksprime kòm mwayen jewometrik ak yon entèval konfyans 95%. *p<0.05 by the Mann-Whitney test.

Pou plis envestige si ranplasman sekans dirijan an ka ogmante sekresyon pwoteyin, nou te itilize yon sekans lidè ki soti nan yon activateur plasminojèn tisi pou fusion diferan variants nan SARS-CoV-2 S pwoteyin. Tout variantes genyen rejyon RBD pwoteyin SARS-CoV-2 S la. Apre de dòz vaksinasyon ADN, yo te analize sera yo kolekte nan semèn 4 ak semèn 6 pou antikò IgG ak tit antikò netralize. Vaksinasyon ak ptSARS2-S te pwovoke pi wo tit antikò kont pwoteyin S plen longè nan semèn 4 pase vaksen ptRBD, ptRBDTM, ak ptSdTM (S1A Fig). Tit antikò anti-RBD vaksen ptRBD yo te pi wo pase vaksen ptSARS2-S (1496.2 kont 530.9, p=0.057) nan semèn 4 (S1B Fig). Sepandan, vaksinasyon ptRBD ak ptSARS2-S te pwovoke menm nivo antikò netralize nan semèn 4 (S1C Fig). Menm rezilta yo te obsève nan analiz la semèn 6 sera; Vaksinasyon ptRBD pwovoke pi wo nivo antikò anti-RBD konpare ak vaksen ptSARS2-S (12589.3 vs. 1000.0, p=0}.028) men menm nivo antikò netralize yo (9.3). vs 9.6 (log2)) (Fig 2F, 2G ak 2H). Paske variants sekans sekans lidè tPA yo pa te pwovoke pi gwo tit antikò netralize pase vaksinasyon pSARS2-S, nou te itilize pSARS2-S pou plis envestigasyon.

Konpetitif Liaison Antikò serik ak ACE2 pou SARS-CoV-2 RBD

Pou egzamine kapasite antikò serik yo pou entèfere ak entèraksyon ACE2-RBD, nou te fè yon tès seroloji konpetitif SARS-CoV-2. Nan tès sa a, antikò serik yo te ajoute nan plak ELISA prekouch ak SARS-CoV-2 RBD pwoteyin, ki te swiv pa adisyon nan pwoteyin imen ACE2. Yo te itilize yon antikò netralize espesifik kont SARS-CoV-2 RBD kòm referans. Jan yo montre nanFig 3, antikò serik ki soti nan sourit pSARS2-S iminize ki te mare nan RBD a ak bloke ACE2 obligatwa, ki te ekivalan a apeprè 353 ug/mL antikò referans, tandiske sera pSARS-S yo te ekivalan a 56 ug/mL antikò referans. Kidonk, done nou yo sigjere ke vaksinasyon pSARS2-S te kapab pwovoke antikò konpetitif ki bloke avèk efikasite SARS-CoV-2 RBD ak reseptè ACE2 la. Rezilta sa a te konsistan avèk tit ELISA kont SARS-CoV2 RBD (Fig 2D), ak sipòte pa etid la sou diferans ki genyen nan sekans RBD ant SARS-CoV ak SARS-CoV-2 [24].

Fig 3. Aktivite konpetitif nan sera sourit iminize kont entèraksyon RBD/ACE2.

Sourit BALB/c (n=4 pou chak gwoup) te vaksinen nan miskilè de fwa nan yon entèval 3-semèn ak 100 ug vektè, pSARS-S oswa pSARS2-S, ki te swiv pa elektwoporasyon. Yo te ranmase echantiyon serom nan semèn 8 apre premye vaksinasyon an. Antikò serik ki konkirans ak ACE2 pou lyezon RBD yo te evalye pa yon tès seroloji konpetitif SARS-CoV-2. Aktivite konpetitif sera sourit la eksprime kòm nivo ekivalan antikò anti-RBD (SARS-CoV-2 Spike protein) (antikò referans). Tit antikò yo prezante kòm mwayèn ± SEM. *p<0.05 by the Mann-Whitney test.

Vaksen ADN SARS-CoV-2 S ADN pwovoke iminite immoral alontèm epi yo ofri pwoteksyon kwa kont SARS-CoV-2 ak mitasyon D614G.

Miyò, yo te obsève antretyen alontèm nan tit antikò IgG kont tout longè S nan 20 semèn apre premye vaksinasyon an (Fig 4A). Mwayèn jeyometrik (log2) pou antikò netralize SARS-CoV-2 te rive 10,8 nan semèn 8 apre vaksen pSARS2-S, yon ti kras diminye a 9,1 nan semèn 12 ak 8,8 nan semèn 20 (Fig 4B). Rezilta sa yo sigjere ke vaksen pSARS2-S bay yon repons umoral ki dire lontan kont SARS-CoV-2. Anplis de sa, vaksen ADN pSARS2-S ak jenotip D614 la te pwovoke yon repons antikò netralize kont viris ki gen mitasyon D614G la (Fig 4C), ki sanble ak tit netralizasyon kont jenotip D614 la. Se poutèt sa, pSARS2-S kapab bay pwoteksyon kwa kont varyant D614G ki pi dominan ak dominan nan SARS-CoV-2.

Fig 4. Vaksen ADN SARS-CoV-2 S ADN pwovoke iminite umoral alontèm ak pwoteksyon kwa kont SARS-CoV-2 ak mitasyon D614G.

Sourit BALB/c (n=4 pou chak gwoup) te vaksinen nan miskilè twa fwa nan yon entèval 3-semèn ak 100 ug vektè, pSARS-S oswa pSARS2-S, ki te swiv pa elektwoporasyon. Echantiyon serom yo te kolekte nan pwen tan endike yo apre premye vaksinasyon an. (A) ELISA te evalye antikò kont SARS-CoV-2 pwoteyin Spike plen longè. (B, C) Aktivite netralizasyon vaksen kont SARS-CoV-2 ak jenotip D614 oswa G614 te evalye pa tès netralizasyon. Tit antikò yo prezante kòm mwayèn ± SEM, ak tit netralizasyon yo eksprime kòm mwayen jewometrik ak yon entèval konfyans 95%. *p<0.05 by the Mann-Whitney test.

Endiksyon Th1- Oswa Th2-Repons Patipri

Selil T Efektè CD4+ yo ka divize an de sous-ansanm prensipal fonksyonèl, Th1 ak Th2, ki baze sou sitokin yo sekrete lè yo aktive yo. Selil Th1 yo pwodui sitokin enflamatwa (IFN-) epi yo patisipe nan repons iminitè medyatè selilè yo nan direksyon bakteri ak viris intraselilè, tandiske selil Th2 sekrete sitou ede selil B yo pwodui antikò, men tou ankouraje iminite eozinofil yo (IL-5 ak IL{). {9}}), sa ki lakòz repons imoral oswa alèjik [25, 26]. Anplis de sa, mekanis ki depann de selil Th2 yo ka kontribye nan maladi respiratwa améliorée ki asosye ak vaksen (VAERD), jan yo montre etid kandida pou vaksen SARS-CoV.27, 28[29]. Pou rezoud pwoblèm sa a, sourit BALB/c ak C57BL/6 yo te pran vaksen ak vektè, pSARS-S ak pSARS2-S de fwa nan yon entèval 3-semèn. Sourit yo te sakrifye 7 jou apre dezyèm vaksinasyon an, epi splenosit yo te ankouraje ak pwoteyin SARS-CoV-2 S (5 ug/mL) pou 3 jou. Nan sourit BALB/c (Figi 5A–5D), sekresyon Th1 cytokines IFN- (19641.3 pg/mL ± 8823.5) ak IL-2 (599.5 pg/mL ± 37.7) te wo apre eksitasyon ak pwoteyin S nan pSARS2-S la. gwoup vaksen yo, men nivo ki ba anpil nan cytokines tip Th2 IL-5 (18.1 pg/mL ± 11.8) ak IL-13 (567.2 pg/mL ± 166.2) yo te detekte. Rezilta menm jan an te obsève nan sourit C57BL/6, gwoup vaksen pSARS2-S pwovoke pi gwo kantite IFN- (33918.8 pg/mL ± 11646.1) ak IL-2 (800.3 pg/mL ± 109.5) pase sa. nan IL-5 (4.6 pg/mL ± 2.9) ak IL-13 (545.7 pg/mL ± 117.4) (Figi 5E-5H). Done sa yo sigjere ke pSARS2-S te kapab pwovoke Th1-repons iminitè patipri.

Fig 5. Repons selil T nan sourit apre vaksen pSARS-S ak vaksen ADN SARS2-S.

Sourit BALB/c (AD) ak C57BL/6 (EH) (n=4 pou chak gwoup) te vaksinen nan miskilè de fwa nan yon entèval 3-semèn ak 100 ug vektè, pSARS-S oswa pSARS{{ 8}}S, ki te swiv pa elektwoporasyon. Splenosit yo te kolekte nan semèn 4 apre premye vaksinasyon an, ak nivo sekrete IFN- (A, E), IL-2 (B, F), IL-5 (C, G), ak IL. Yo te evalye -13 (D, H) apre restimulasyon ak pwoteyin recombinant SARS-CoV-2 S. Tit antikò yo prezante kòm mwayèn ± SEM. *p<0.05 by the Mann-Whitney test.

Efikasite pwofilaktik Vaksen ADN kont defi SARS-CoV-2

Pou eksplore efikasite pwoteksyon vaksen pSARS2-S, hamstè siryen yo te vaksinen de fwa ak 100 ug ADN nan yon 3-semenn entèval epi yo te defye nan nasal viris SARS-CoV-2 nan semèn 7. (Figi 6A). Apre vaksinasyon, yo te kolekte seri semèn 4 ak semèn 6 pou tit antikò anti-spike (IgG) ak analiz tit antikò netralize. Vaksinasyon ak pSARS2-S te pwovoke pi wo nivo tit antikò anti-Spike pase vaksen ptRBD nan semèn 4 (1584.9 kont 50.1) ak semèn 6 (1995.3 vs. 63.1) nan hamster (Fig 6B). Konfòm ak tit antikò anti-Spike yo, sera hamster pSARS2-S-iminize yo te ogmante tit antikò netralize trè wo (6.5 nan semèn 4 ak 6.4 nan semèn 6 (log2)), men sera nan vektè oswa Amstè iminize ptRBD pa t '(Fig 6C). Apre defi a ak SARS-CoV-2, yo te kontwole pwa kò amstè a chak jou. Etid anvan yo te revele ke tit viral nan poumon amstè te rive nan yon nivo segondè nan 3 jou apre defi.30]. Se poutèt sa, mwatye nan hamster yo nan chak gwoup yo te sakrifye nan jou 3 ak chaj viral la nan poumon yo te analize. Pwa kò a nan vektè-vaksen hamster diminye piti piti, ak pousantaj nan pwa kò pèdi te 11.1% nan 6 jou apre defi. Kontrèman, vaksen pSARS2-S te pwoteje hamster kont pèdi pwa kò yo (Fig 6D). Anplis de sa, tit viris enfektye yo ak kantite kopi RNA viral nan gwoup pSARS2-S la te montre 2.29 ak 1.37 rediksyon log10 konpare ak gwoup kontwòl vektè a (Figi 6E ak 6F). Rezilta sa yo sigjere ke vaksen pSARS2-S bay pwoteksyon kont enfeksyon SARS-CoV-2 nan hamster siryen yo.

Fig 6. Efikasite pwofilaktik vaksen ADN SARS-CoV-2S nan hamster ki enfekte SARS-CoV{-2-.

(A) Kou tan vaksinasyon ADN ak defi SARS-CoV-2. Hamster siryen yo te vaksinen nan miskilè de fwa nan yon entèval 3-semèn ak 100 ug nan kontwòl, pSARS-S oswa pSARS2-S, ki te swiv pa elektwoporasyon. Echantiyon serom yo te kolekte pa echantiyon san retroorbital nan semèn 4 ak 6 apre premye vaksinasyon an. Nan 4 semèn apre dezyèm vaksinasyon an, hamster siryen yo te defye nan nen ak 105 TCID50 SARS-CoV-2. (B) ELISA te evalye antikò kont SARS-CoV-2 pwoteyin Spike plen longè. (C) Yo te evalye aktivite netralizasyon vaksen kont SARS-CoV-2 pa yon tès netralizasyon. (D) Chanjman pwa kò (%) hamster yo te anrejistre chak jou apre defi SARS-CoV-2 la. Tit viris (E) ak kopi RNA viral (F) nan poumon hamster ki enfekte SARS-CoV-2-nan 3 jou apre defi yo te detèmine pa tès TCID50 ak qRT-PCR, respektivman. Tit antikò yo prezante kòm mwayèn ± SEM, ak tit netralizasyon yo eksprime kòm mwayen jewometrik ak yon entèval konfyans 95%. *p<0.05, ***p<0.001 by the Mann-Whitney test.

Diskisyon

Yo te lanse plis pase 80 esè klinik vaksen COVID-19, epi etid iminojenisite ak defi viral sou bèt yo se etap enpòtan nan pwosesis devlopman vaksen yo. Vaksen ADN pou enfeksyon SARS-CoV-2 yo te devlope anpil pou diferan apwòch livrezon. Elektwoporasyon se yon apwòch pwomèt ki ka amelyore livrezon ADN ak antijenisite nan imunojèn nan vivo. Yo te rapòte de etid vaksen ADN, pa Yu et al. [13] ak Smith et al. [12]. Yu et al. found that rhesus macaques immunized with naked DNA encoding full-length S protein (without electroporation) exhibited >3.1 log10 rediksyon nan chaj viral nan lavaj bronchoalveolar apre defi konpare ak kontwòl. Smith et al. te jwenn ke vaksinasyon sourit ak kochon Gine ak INO-4800 (kode pwoteyin plen longè S) ak elektwoporasyon te kapab pwovoke antikò netralize kont enfeksyon SARS-CoV-2 epi bloke pwoteyin S ki lye ak reseptè ACE2 la men li te fè. pa bay done defi bèt yo. Nan rapò sa a, nou te evalye diferan varyant pou kandida vaksen ADN epi nou te jwenn pwoteyin S plen longè (pSARS2-S) ki pi apwopriye pou plis etid iminolojik. Malgre ke SARS-CoV ak SARS-CoV-2 pataje 76% omoloji nan pwoteyin S yo [31, 32], vaksinasyon pSARS-S pa ka pwovoke antikò kont RBD nan pwoteyin SARS-CoV-2 S oswa netralize tit antikò kont enfeksyon SARS-CoV-2 (Fig 2). Vreman vre, antikò anti-RBD jwe wòl enpòtan nan bloke enfeksyon viral. Sepandan, vaksinasyon ak RBD pou kont li (ptRBD) te pwodwi gwo tit antikò netralize nan sourit men pa nan hamster (figi.2Hepi6C). Nou te espekile ke rezilta sa a ka akòz peptide siyal la (tissu-plasminogen activator) li pap fasilite sekresyon nan pwoteyin RBD nan hamster. Mekanis detaye a mande plis etid nan tan kap vini an. Nou te note tou ke ptRBDTM (kode yon fragman ki soti nan RBD nan domèn transmembran S la) vaksinasyon pwovoke pi ba tit antikò netralize pase vaksinasyon ptRBD (figi.2HepiS1C). Rezilta yo ka reflete estrikti enstab pwoteyin RBD-TM la. Pou plis envestige repons iminitè Th1/Th2 yo, yo te ankouraje splenosit ki soti nan sourit vaksen yo ak pwoteyin SARS-CoV-2 S. Nou te jwenn vaksen pSARS2-S pwovoke gwo repons iminitè Th{1-patial ak pi wo nivo sekresyon IFN- -apre eksitasyon (Fig 5), men vaksinasyon pSARS-S pwovoke sèlman yon nivo ki ba nan sekresyon IFN- -. Done sa yo endike ke kwa-reaktivite repons selil T ant pwoteyin Spike SARS-CoV ak SARS-CoV-2 pa wo (Fig 5). Anplis de sa, tès IFN-ELISPOT te revele ke yo te detekte mwens repons selil T kont rejyon S1 nan sourit C57BL/6 ak BALB/c vaksinen ak pSARS-S (S2 Fig), ki sipòte tou pa etid Smith la [12]. Done sa yo montre vaksen SARS la ka pa bay tout efè pwoteksyon kont enfeksyon SARS-CoV-2. Devlopman vaksen ADN enpòtan pou yon repons rapid nan enfeksyon coronavirus pandemi an. Kidonk, siksè vaksen ADN kont SARS-CoV-2 ta ka aplike nan lòt maladi enfektye ki parèt.

Diferan konstriksyon yo itilize nan vaksen ADN SARS-SoV-2 yo pwovoke diferan nivo tit antikò netralize. Yo te itilize sekans lidè tPA a pou ogmante ekspresyon antijèn ak sekresyon nan vaksen ADN.21, 33–35]. Sepandan, sekans lidè tPA a pa t ogmante siyifikativman tit antikò nan rapò sa a. Pou ogmante efikasite vaksen an plis, yo ka itilize diferan sekans lidè pou ranplase sekans lidè natif natal pwoteyin Spike a. Yo te itilize sekans dirijan IgE nan vaksen ADN INO-4800 ak vaksen MERS-CoV [5, 12]. Anplis de sa, sekans pwoteyin Spike modifye a ka ogmante iminojenisite vaksen an tou. Yo te fèt yon pwoteyin Spike estabilize pa mitasyon sit la furin ak lòt rejyon yo jenere yon estrikti prefizyon (S-2P) ki ka ogmante ekspresyon nan pwoteyin Spike ~10-pliye [36]. Yon vaksen ADN ideyal ta dwe optimize konstriksyon ADN plasmid ak sistèm livrezon pou ogmante nivo ekspresyon pwoteyin.

cistanche tubulosa-amelyore sistèm iminitè

Modèl bèt yo enpòtan anpil pou devlopman vaksen COVID-19. Plizyè modèl bèt yo te itilize pou evalye efikasite vaksen COVID-19, tankou primat ki pa imen [13, 37], sourit transjenik imen ACE2 [38], ak hamster moun lavil Aram [39]. Amstè siryen ACE2 gen yon gwo resanblans ak ACE2 imen, e li te prevwa afinite lyan ak pwoteyin S SARS-CoV-2 pi wo pase sourit ACE2 [40]. Sa a se rezon ki fè sourit transjenik ACE2 imen yo te itilize kòm modèl defi SARS-CoV-2, men se pa sourit sovaj. Etid transmisyon SARS-CoV-2 yo montre ke viris la ka enfekte hamster nayif avèk efikasite atravè kontak dirèk oswa atravè ayewosòl [41]. Enfeksyon nan nasal SARS-CoV-2 ka repwodui epi pwovoke patojèn nan poumon hamstè siryen yo.30]. This study and previous reports also showed that SARS-CoV-2 infection caused approximately a 10% reduction in the initial body weight of hamsters. Clinical manifestations of patients with COVID-19, including changes in smell and taste, and severe respiratory distress, might be accompanied by weight loss (>5% rediksyon nan debaz), ki te asosye ak dire pi long maladi a [42]. Konklizyon sa yo endike ke amstè siryen an se tou yon modèl bèt apwopriye pou evalyasyon vaksen COVID-19. Dapre disponiblite modèl bèt yo, nou te chwazi hamster kòm modèl defi SARS-CoV-2 pou evalye efikasite vaksen an. Done nou yo te montre ke vaksinasyon ak pSARS2-S, men pa ptRBD, ka pwovoke tit segondè nan antikò IgG anti-Spike ak tit antikò netralize (Fig 6B ak 6C). An konsekans, hamstè pSARS2-S-iminize yo, men se pa hamstè iminize ptRBD, te pwodwi repons iminitè kont defi SARS-CoV-2. Nou te note ke vaksinasyon ptRBD te kapab pwovoke nivo segondè nan netralize tit antikò nan sourit men se pa nan hamster. Rezilta yo konfli yo ka paske RBD pou kont li pa eksprime estab nan hamster. Yo te itilize modèl amstè a tou pou evalye vaksen COVID-19 adenoviris serotip 26 (Ad26). Yon sèl vaksen ak vaksen ki baze sou vektè Ad26 ki eksprime yon pwoteyin estabilize SARS-CoV-2 ki te pwovoke repons antikò netralize epi ki pwoteje kont enfeksyon SARS-CoV-2 pwovoke pèdi pwa, mòtalite pasyèl, ak replikasyon viral. nan poumon [39]. Rezilta sa yo endike ke modèl amstè a apwopriye pou evalye efikasite vaksen COVID-19 yo.

Anpil efò devlopman vaksen SARS-CoV-2 baze sou eksperyans rechèch MERS-CoV ak SARS-CoV. Globalman, plizyè vaksen COVID-19 yo te apwouve pou itilize ijans an Desanm 2020, tankou vaksen RNA ak adenoviris ki baze sou vektè COVID-19. Avantaj ak dezavantaj diferan platfòm vaksen yo te diskite [43]. Vaksen vektè adenoviris yo ka pwovoke pi fò repons iminitè pase vaksen ADN ak mRNA, men efikasite vaksen yo ta ka redwi grasa iminite ki te deja egziste kont vektè Ad.44]. Konpare ak vaksen ADN, vaksen mRNA bezwen tanperati ki ba anpil pou depo ak transpò.45]. Pakonsekan, vaksen ADN an ta ka yon platfòm vaksen potansyèl, espesyalman pandan itilizasyon ijans.

Etid nou an sijere posiblite pou yon vaksen ADN pou itilizasyon imen. Plis etid yo ka mennen ankèt sou efikasite vaksen ADN sa a ki te delivre lè l sèvi avèk piki intradermal (ID), ki pi pratik pou aplikasyon klinik, paske zegwi pou piki IM se apeprè 18 mm pwofondè nan imen e li afekte plis tisi pase piki ID pa EP. Anplis, yo ta dwe teste efikasite vaksen an sou sourit ki gen laj kòm yon modèl pou moun ki aje, paske popilasyon sa a afekte grav anpil lè yo enfekte pa SARS-CoV-2. Etid anvan yo te montre ke repons selil Th2 yo te asosye ak maladi respiratwa améliorée (VAERD) apre vaksinasyon an nan vaksen viris inaktive kont RSV.46], viris lawoujòl [47], ak SARS-CoV [27, 48]. Kontrèman, gen ka mwens grav nan SARS-CoV ki soti nan endiksyon nan repons selil Th1 yo te rapòte.49]. Se poutèt sa, gwo repons iminitè Th1-prejije vaksen ADN pwovoke yo sijere ke efè segondè yo pa gen anpil chans pou yo yon gwo pwoblèm [50]. Anplis de sa, enkyetid sou vaksen ki baze sou pwoteyin yo te leve akòz itilizasyon sèl aliminyòm oswa adjuvant kalite emulsyon lwil nan dlo, ki mennen nan Th2-repons iminitè patipri ak ogmante efè segondè potansyèl yo.51, 52]. An rezime, vaksen ADN COVID-19 ka jwe yon gwo wòl nan kontwole pandemi COVID-19 nan fiti prè.

Referans

1. Pak A, Adegboye OA, Adekunle AI, Rahman KM, McBryde ES, Eisen DP. Konsekans ekonomik epidemi COVID-19: Bezwen pou preparasyon pou epidemi. Devan Sante Piblik. 2020;8:241. pmid:325743072. Sant pou Syans Sistèm ak Jeni (CSSE) [Entènèt]. COVID-19 tablodbò. Inivèsite Johns Hopkins. [site 11 fevriye 2021]. Disponib nan:
2. 3.Buchholz UJ, Bukreyev A, Yang L, Lamirande EW, Murphy BR, Subbarao K, et al. Kontribisyon nan pwoteyin estriktirèl nan kowonaviris sendwòm respiratwa egi grav nan iminite pwoteksyon. Proc Natl Acad Sci US A. 2004;101(26):9804–9. pmid:15210961
3. 4. Yang ZY, Kong WP, Huang Y, Roberts A, Murphy BR, Subbarao K, et al. Yon vaksen ADN pwovoke netralizasyon coronavirus SARS ak iminite pwoteksyon nan sourit yo. Lanati. 2004;428(6982):561–4. pmid:15024391
4. 5. Muthumani K, Falzarano D, Reuschel EL, Tingey C, Flingai S, Villarreal DO, et al. Yon konsansis sentetik anti-spike pwoteyin ADN vaksen pwovoke iminite pwoteksyon kont coronavirus sendwòm respiratwa Mwayen Oryan nan primat ki pa imen. Sci Transl Med. 2015;7(301):301ra132. pmid:26290414
5. 6. Krammer F. Vaksen SARS-CoV-2 nan devlopman. Lanati. 2020;586(7830):516–27. pmid:32967006
6. 7. Khalaj-Hedayati A. Iminite Pwotektif kont Kandida Vaksen Sou-Inite SARS ki baze sou Spike Pwoteyin: Leson pou Devlopman Vaksen Coronavirus. J Immunol Res. 2020;2020:7201752. pmid:32695833
7. 8.Lu B, Tao L, Wang T, Zheng Z, Li B, Chen Z, et al. Repons iminitè umoral ak selilè pwovoke pa vaksen 3a ADN kont sendwòm respiratwa egi grav (SARS) oswa coronavirus ki sanble ak SARS nan sourit yo. Clin Vaccine Immunol. 2009;16(1):73–7. pmid:18987164
8. 9.Bower JF, Yang X, Sodroski J, Ross TM. Pwodiksyon antikò netralize ak vaksen ADN ki eksprime viris iminodefisyans imen soluble estabilize kalite 1 anvlòp glikoprotein trimers konjige ak C3d. J Virol. 2004;78(9):4710–9. pmid:15078953
9. 10. Zakhartchouk AN, Viswanathan S, Moshynskyy I, Petric M, Babiuk LA. Optimizasyon yon vaksen ADN kont SARS. ADN selil Biol. 2007;26(10):721–6. pmid:17665998
10. 11.Gary EN, Weiner DB. Vaksen ADN: prime time se kounye a. Curr Opin Immunol. 2020;65:21–7. pmid:32259744
11. 12. Smith TRF, Patel A, Ramos S, Elwood D, Zhu X, Yan J, et al. Iminojenisite yon kandida vaksen ADN pou COVID-19. Nat Commun. 2020;11(1):2601. pmid:32433465
12. 13.Yu J, Tostanoski LH, Peter L, Mercado NB, McMahan K, Mahrokhian SH, et al. Pwoteksyon vaksen ADN kont SARS-CoV-2 nan makak rhesus. Syans. 2020;369(6505):806–11. pmid:32434945
13. 14.Jorritsma SHT, Gowans EJ, Grubor-Bauk B, Wijesundara DK. Metòd livrezon pou ogmante absorption selilè ak iminojenisite vaksen ADN. Vaksen. 2016;34(46):5488–94. pmid:27742218
14. 15. Kudchodkar SB, Choi H, Reuschel EL, Esquivel R, Jin-Ah Kwon J, Jeong M, et al. Repons rapid nan yon maladi enfektye k ap parèt — Leson yo aprann nan devlopman yon vaksen ADN sentetik ki vize viris Zika. Mikwòb Enfekte. 2018;20(11–12):676–84. pmid:2955534516.Adam L, Tchitchek N, Todorova B, Rosenbaum P, Joly C, Poux C, et al. Siyati Molekilè ak Selilè Inaktif nan Po a anvan repons Selil T ki dire lontan apre vaksinasyon ADN Electroporated. J Immunol. 2020;204(12):3375–88. pmid:32385135
15. 17. Lin F, Shen X, McCoy JR, Mendoza JM, Yan J, Kemmerrer SV, et al. Yon nouvo aparèy pwototip pou livrezon vaksen ADN ak elektwoporasyon an menm tan sou po ak nan misk. Vaksen. 2011;29(39):6771–80. pmid:21199706
16. 18. Williams M, Ewing D, Blevins M, Sun P, Sundaram AK, Raviprakash KS, et al. Amelyore iminojenisite ak efikasite pwoteksyon yon vaksen ADN tetravalent deng lè l sèvi avèk elektwoporasyon ak livrezon intradermal. Vaksen. 2019;37(32):4444–53. pmid:31279565
17. 19. Ramakrishnan MA. Detèminasyon 50% tit pwen final lè l sèvi avèk yon fòmil senp. Mondyal J Virol. 2016;5(2):85–6. pmid:27175354
18. 20.Corman VM, Landt O, Kaiser M, Molenkamp R, Meijer A, Chu DK, et al. Deteksyon nouvo coronavirus 2019 (2019-nCoV) pa RT-PCR an tan reyèl. Siveyans Euro. 2020. pmid:31992387
19. 21. Kou Y, Xu Y, Zhao Z, Liu J, Wu Y, Ou Q, et al. Sekans siyal activateur plasminojèn tisi (tPA) amelyore iminojenisite vaksen ki baze sou MVA kont tibèkiloz. Immunol Lett. 2017;190:51–7. pmid:28728855
20. 22. Xia S, Zhu Y, Liu M, Lan Q, Xu W, Wu Y, et al. Mekanis fizyon 2019-nCoV ak inibitè fizyon ki vize domèn HR1 nan pwoteyin Spike. Selil Mol Immunol. 2020;17(7):765–7. pmid:32047258