Èske w konnen estrès oksidatif ka lakòz aksidan nan ren?

Pou plis enfòmasyon:ali.ma@wecistanche.com

Pati Ⅰ: Estrès oksidatif apre aksidan ren egi lakòz dezòd nan sily selil nan poumon ak lage yo nan likid lavaj bronchoalveolaire ak aksidan nan poumon, ki vin pi grav pa efase Idh2.

Yong Kwon Hana, Ji Su Kim, Gwan Beom Leea, Jae Hang Lim, Kwon Moo Park

1. Entwodiksyon

Agi blesi nan ren(AKI) rive nan divès anviwònman klinik, tankou chòk, sepsis, transplantasyon ògàn, ak operasyon vaskilè [1-3]. AKI (Agi blesi nan ren) lakòz domaj nan ògàn byen lwen yo, tankou poumon, fwa, kè, ak sèvo [4-9]. Sa a blesi ògàn byen lwen apre AKI (Agi blesi nan ren)rekonèt kòm yon gwo faktè risk pou move rezilta [5,9]; Se poutèt sa, tretman apwopriye nan blesi ògàn byen lwen enpòtan pou amelyore rezilta pasyan ki gen AKI (Agi blesi nan ren). Sepandan, mekanis egzak ki enplike nan AKI (Agi blesi nan ren)-ki gen rapò ak blesi ògàn byen lwen rete yo dwe defini.

Klike sou Cistanche pou maladi ren egi ak efè segondè cistanche

Cilia yo se pwojeksyon santriòl ki sòti nan sifas selil la ki genyen yon sitoskelèt ki baze sou mikrotubule (axoneme), ki antoure pa yon manbràn silyè. Cilia yo karakterize pa estrikti yo ak mobilite epi yo defini kòm swa sila imòtil (sil prensipal) oswa sila mobil. Sili prensipal yo se solitè, ki pa mobil, ki baze sou mikrotubul 9 plis 0 òganèl axonemal ki sanble ak antèn ki soti nan manbràn selilè a epi transdui siyal ekstraselilè nan selil la atravè kowòdinasyon plizyè chemen siyal [10-12 ]. Cilia mobil, ak yon estrikti axonemal miltip, 9 plis 2, yo sitou jwenn nan aparèy respiratwa a ak oviduct ak fonksyon transpòte materyèl [10,13]. Ogmante prèv yo montre ke defo nan fòmasyon ak fonksyon sily yo asosye ak divès maladi imen, tankoupolikistik maladi renak diskinezi silyè prensipal [14-20]. Anplis de sa, etid resan yo te demontre ke dezòd la nan sily rive anba enfliyans nan kondisyon patolojik e ke dezòd sa a enplike nan medyasyon blesi selil ak malfonksyònman [15-20].

Akimilasyon prèv te demontre sarenischemi-reperfusion (IR), yon kòz AKI (Agi blesi nan ren), pwovoke blesi ògàn byen lwen [6-8,21]. Blesi ògàn byen lwen asosye ak repons enflamatwa, chanjman nan chemen siyal ki asosye ak lanmò selil ak siviv, akestrès oksidatif [8,22-24]. Estrès oksidatifse dirèkteman lye ak malfonksyònman nan eleman selilè, ki ka lakòz maladi ògàn, epi li rekonèt kòm youn nan kòz prensipal yo nanrenIR-pwovoke blesi ògàn byen lwen [21,25,26]. Nou te deja montre sarenIR-ak cisplatin-induit AKI (Agi blesi nan ren)chanje longè sily prensipal yorenselil epitelyal yo atravè asanblaj, demonte, ak dezòd (desilyasyon, koule, oswa fwagmantasyon) sily [17-19]. Pwosesis sa yo asosye ak espès oksijèn reyaktif (ROS) akestrès oksidatif. depann sou konsantrasyon nan oksijene idwojèn ak degre nanoksidatifestrès; ba konsantrasyon H2O2 pwovoke elongasyon nan longè sily prensipal, tandiske gwo H, O, konsantrasyon pwovoke dezòd [17-20]. Anplis de sa, nou te jwenn ki deranje sila prensipal nan bleserenselil epitelyal tubulaires yo elimine nan pipi a epi yo ka anpeche dezòd ak ekskresyon sa a pa tretman antioksidan [17-20]. Rodriguez-Ribera et al. tou rapòte ke reyaktif carbonyl konpoze tankou malondialdehyde, yon pwodwi nanestrès oksidatif, pwovoke pèt sily prensipal nan imenrenselil tubul proximal [27]. Se poutèt sa, nou ipotèz ke AKI (Agi blesi nan ren)-induced blesi nan poumon egi (ALD) ak blesi selil yo asosye ak sila ak selil nan poumonoksidatifestrèsak sa prevansyon deoksidatifestrèsdiminye AKI (Agi blesi nan ren)-pwovoke blesi nan poumon. Nan etid sa a, nou te envestige si wi ou nonrenIR-induit AKI (Agi blesi nan ren)lakòz dezòd nan sily ak selil nan poumon yo, epi si se konsa, si wi ou non dezòd sa yo asosye akoksidatifB. Pou sa ka fèt, nou te anplwaye apwòch farmakolojik ak jenetik, ki gen ladan itilizasyon isocitrate dehydrogenase 2(Idh2)-efase sourit. IDH2 se yon anzim lokalize nan mitokondri yo [28]. Nan mitokondri yo, IDH2 katalize dekarboksilasyon oksidatif isocitrate nan -ketoglutarate, akonpaye pa rediksyon NADP nan NADPH, ki se yon faktè enpòtan nan sistèm antioksidan thioredoxin ak glutatyon [29-32]. Anplis de sa, nou te envestige si prezans nan pwoteyin silyè ak fragman nan likid lavaj bronchoalveolar (BALF) se indicative de aksidan nan poumon. Nou rapòte isit la, pou premye fwa, ke AKI (Agi blesi nan ren)lakòz dezòd nan sily selil nan poumon ak lage yo nan BALF la kòm byen ke blesi nan poumon, ki se vin pi grav pa sipresyon IDH2.

estrès oksidatif lakòz blesi nan ren

2. Materyèl & metòd

Preparasyon bèt.

Tout eksperyans yo te fèt lè l sèvi avèk 8-10-sourit gason C57BL/6 ki gen yon semèn (Koatech, Pyeongtaek, Gyeonggi-do, Kore), sourit fi Idh2 ki efase jèn (Idh2~/), ak kalite sovaj (dh2 plis / )sourit [28]. Sourit yo te pèmèt aksè gratis nan dlo ak manje sourit estanda. Etid bèt la te apwouve pa Komite Enstitisyonèl Swen ak Itilizasyon bèt nan Kyungpook National University, Repiblik Kore di. Pou pwovoke ischemi ren bilateral, larenyo te ekspoze atravè ensizyon flan yo anba anestezi ak pentobarbital sodyòm (60 mg/kg BW), epi answit, pedikul yo nanrenyo te konplètman sere pou 35 min lè l sèvi avèk kranpon mikroaneurism. Pwosedi a menm, san konterenPedicle blocage, yo te fèt nan operasyon an simulation. Tanperati kò a te kenbe nan 36.5 degre -37 degre C pandan tout pwosedi chirijikal lè l sèvi avèk yon aparèy chofaj tanperati kontwole (FHC, Bowdoin, ME, USA).Gen kèk sourit yo te administre {{4 }}(2,2,6,6-Tetramethylpiperidin-1-oks-yl-4-arylamino)-2-oxoethyl triphenylphosphonium klori (Mito--TEMPO,{{14} }}.7 mg/kg BW; Sigma, St.Louis, MO, USA) nan swa 17 ak 1 èdtan anvan operasyon (pretretman) oswa 6 èdtan apre operasyon (post-tretman).

Nan fen eksperyans yo, nan poumon akrentisi yo te jele nan nitwojèn likid oswa perfusion fiks ak PLP (4 pousan paraformaldehyde, 75 mM L-lysine, 10 mM sodyòm periodate: Sigma) solisyon pou etid byochimik ak histolojik, respektivman. Tisi nan frizè yo te estoke nan -70 degre jiskaske yo mande yo.

Koleksyon BALF.

BALF te kolekte apre euthanize sourit yo pa piki surdozaj nan pentobarbital sodyòm. Fuites nan poumon yo te evalye pa detèmine konsantrasyon nan pwoteyin ak nimewo selil nan BALF la. Pou kolekte BALF, yo te sere bronch nan poumon gòch la nèt lè l sèvi avèk kranpon mikroaneurism. Yo te mete yon zegwi nan trachea a epi yo te enjekte 0.8 ml saline frèt ak fosfat tanpon (PBS) tou dousman nan lòb poumon dwat yo. BALF te kolekte lè w retire piston sereng la yon fwa. Nimewo total selilè ak konsantrasyon pwoteyin nan BALF yo te analize imedyatman lè l sèvi avèk yon ematositomèt ak twous tès BCA (Thermo Fisher Scientific, Waltham, Massachusetts, USA), respektivman. BALF te kenbe nan -70 degre jiskaske yo te mande pou analiz Western blotting.

renfonksyon. Yo te kolekte san nan sourit lè l sèvi avèk yon sereng eparinize. Konsantrasyon azòt ure nan san (BUN) nan plasma yo te detèmine lè l sèvi avèk yon analizeur chimi Vitros 250 (Johnson & Johnson, New Brunswick, NJ, USA).

Peryodik asid-Schiff (PAS) ak ematoksilin ak eozin (H&E) tach.

PLP-fiksrenak tisi nan poumon yo te entegre nan parafin, koupe an 3-μm seksyon epè lè l sèvi avèk yon mikrotom （Leica, Bensheim, Alman-anpil), epi monte sou glisad an vè.renak seksyon poumon yo te tache ak PAS ak H&E. Larendomajnòt te evalye avèg pa envestigatè jan sa dekri deja [3,19].

Analiz Western blot.

Western blotting te fèt jan sa dekri deja [3]. Antikò yo te itilize pou Western blot te jan sa a: anti-4-idwoksi nominal (4-HNE; Abcam, Cambridge, MA, USA), anti- -tubulin (Santa Cruz, CA, USA) , anti-acetylated -tubulin (ac- -tubulin, Sigma), anti-manganèz-depandan superoksid dismutase (MnSOD; Calbiochem, San Diego, CA, USA), anti-catalase (Fitzgerald, Concord, MA, USA) , anti-ADP-ribosylation faktè ki tankou pwoteyin 13B (Arl13B, Proteintech, Chicago, IL, USA), anti-isocitrate dehydrogenase 2 (IDH2; Santa Cruz), anti-optik atrofi 1 (Opal; BD Bioscience, San Diego, CA). ), anti-fisyon 1(Fis1; Sigma), anti-dinamin ki gen rapò ak pwoteyin 1 (Drpl; Cell Signaling Technology, Danvers, MA, USA), ak anti-glyceraldehyde 3-fosfat dehydrogenase (GAPDH; NOVUS, Littleton, CO, USA).

Tach imunofluoresan.

Apre deparafinizasyon, seksyon yo te enkube nan PBS ki gen {{0}}.2 pousan Triton X-100(Sigma) pou 1 minit epi lave nan PBS pou 10 minit. Pou ekspoze epitop antijèn an, seksyon yo te bouyi nan 10 mm tanpon sitrat sodyòm (pH 6.0) pou 10 min, refwadi pou 20 min, ak Lè sa a, lave twa fwa ak PBS pou 5 min sou chak lave. Seksyon yo te bloke ak 3 pousan albumin serik bovine nan PBS (tanpon bloke) pou 30 min ak Lè sa a, enkube ak anti-Arll3b anti-kò nan 4 degre lannwit lan. Apre lave, seksyon yo te enkube ak FITC-konjige kabrit anti-lapen IgG (Vector Laboratories, Burlingame, CA, USA) pou 60 minit epi apre sa lave 3 fwa ak PBS pou 5 minit chak. Nwayo selil yo te tache lè l sèvi avèk 4'-6-diamidino-2-phenylindole (DAPI; Sigma).

Mezi superoksid nan tisi nan poumon.

Nivo superoksid yo te mezire lè l sèvi avèk dihydroethidium (DHE; Sigma) jan sa dekri deja 【33,34】. Yon ti tan, yo te ajoute 10 μM DHE nan 1 ml PBS pre-chofe (37 degre) nan yon plak 96-byen ki gen 20 ul tisi lisat nan poumon. Plak la te li chak 10 minit pou yon total de 30 min nan eksitasyon / filtè emisyon nan 530 nm / 620 nm.

Mezi IL-6.

Nivo IL-6 nan plasma ak BALF yo te detèmine atravè tès ELISA lè l sèvi avèk twous tès ELISA dapre enstriksyon manifakti a (BD Bioscience).

Estatistik.

Tout done yo te analize lè l sèvi avèk lojisyèl GraphPad Prism 7 (San Diego, CA, USA). Rezilta yo eksprime kòm mwayèn ± erè estanda nan mwayen an (SEM). Yo te fè analiz estatistik lè l sèvi avèk tès t Elèv la ak analiz yon sèl nan divèjans ak pwosedi post hoc Tukey a. Diferans yo te konsidere estatistik enpòtan lè p-valè yo te<>

3. Rezilta yo

1. Kidney IR lakòz blesi nan poumon.

Kòm espere, siyifikatif domaj mòfolojik nan laren(Fig.1A ak B) ak ogmantasyon nan plasma BUN (Fig.1C) yo te obsève 4 ak 24 èdtan apre 35 min nan bilateral.reniskemi. Nan poumon, yo te obsève yon ogmantasyon nan netrofil ak epesman miray alveola 4 ak 24 èdtan apre.reniskemi (figi 1D). Anplis de sa, yo te obsève ogmantasyon nan ekspresyon lenfosit antijèn 6 konplèks G6D (Ly6G, yon makè pou monosit, granulosit, ak netrofil) nan tisi nan poumon nan yon fason ki depann de tan (Fig.1E ak F). Konsantrasyon entèleukin-6 (IL{-6) nan plasma ogmante aprerenIR, pik nan 4 èdtan apre iskemi (Fig. 1G). I-6 ak konsantrasyon pwoteyin ak kantite selil total nan BALF ogmante piti piti nan 4 ak 24 èdtan apre iskemi ren (Fig.1H-J). Pousantaj siviv nan 24 èdtan apre 35 min nanrenIR te apeprè 92 pousan (done yo pa montre).

Kilèrentan ischemic te pwolonje a 45 min, ogmantasyon pòs-iskemi nan konsantrasyon BUN nan plasma ak konsantrasyon total pwoteyin ak nimewo selil nan BALF te pi gran pase sa yo apre 35 min nan iskemi (Fig.1K-M). Done sa yo endike ke blesi nan poumon pwovoke parenBlesi IR depann sou degre nanrenblesi.

Fig. 1. Domaj istolojik ak fonksyonèl nan poumon apre ren IR. C57BL / 6 sourit gason yo te sibi 35 (A-M) ak 45 (K-M) min nan iskemi ren bilateral oswa operasyon simulation. ren, poumon, san, ak BALF yo te kolekte 4 ak 24 èdtan apre operasyon. BALF te kolekte jan sa dekri nan Materyèl ak Metòd yo. (A-J) Sourit yo te sakrifye swa 4 oswa 24 èdtan apre 35 min nan iskemi. (A, B)renseksyon (3 μm) yo te tache ak PAS, epirendomaj tubulaires te bay nòt. (C, K) Konsantrasyon BUN yo te mezire nan plasma. (D) Seksyon nan poumon (3 μm) yo te tache ak H & E. (E, F) Ekspresyon Ly6G nan tisi nan poumon te analize pa Western blotting. GAPDH te itilize kòm yon kontwòl chajman. Dansite bann yo te mezire lè l sèvi avèk lojisyèl ImageJ la. (G, H) Yo te mezire konsantrasyon IL-6 nan plasma ak BALF. (I, J, L, M) Yo te mezire konsantrasyon pwoteyin ak kantite selil total nan BALF. (K-M) Sourit yo te sakrifye 4 èdtan apre swa 35 oswa 45 min nan iskemi. Rezilta yo eksprime kòm mwayen ± SEM (n=3–6). *p < 0.05="" kont="" sham.="" †p=""><0.05 vs="" 4="" èdtan="" apre="" iskemi="" oswa="" iskemi="" pou="" 35="">

2. ren IRlakòz dezòd nan sily nan selil epitelyal nan poumon ak fragman sa yo lage nan BALF.

Seksyon tisi nan poumon yo ak glisad ki chaje ak BALF yo te immunostained ak anti-ADP-ribosylation faktè ki tankou pwoteyin 13B (Arl13B, yon makè nan sily) antikò. Arll3B siyal pozitif yo te obsève sou pati nan luminal nan alveoli yo ak bronchioles tèminal yo nan poumon (Fig.2A). Pèt siyal Arl13B-pozitif te obsève nan poumon nanrenIR-sijè sourit (Fig.2A). Pèt sa a nan siyal Arll13B-pozitif piti piti ogmante aprerenischemi sou tan (Fig. 2A). Nan BALF, plizyè longè patikil Arl13B-pozitif yo te obsève apre iskemi ren, ak kantite patikil Arl13B-pozitif nan BALF piti piti ogmante sou tan apre iskemi (Fig.2B ak C). Ekspresyon Arl13B, acetylated -tubulin (ac- -tubulin, granulosit, ak neutrophils) nan tisi poumon yo te obsève nan yon fason ki depann de tan (Fig.1E ak F). Konsantrasyon entèleukin-6 (IL{-6) nan plasma ogmante aprerenIR, pik nan 4 èdtan apre iskemi (Fig. 1G). I-6 ak konsantrasyon pwoteyin ak kantite selil total nan BALF ogmante piti piti nan 4 ak 24 èdtan apre iskemi ren (Fig.1H-J). Pousantaj siviv nan 24 èdtan apre 35 min nan ren IR te apeprè 92 pousan (done yo pa montre).

Kilèrentan ischemic te pwolonje a 45 min, ogmantasyon pòs-iskemi nan konsantrasyon BUN nan plasma ak konsantrasyon total pwoteyin ak nimewo selil nan BALF te pi gran pase sa yo apre 35 min nan iskemi (Fig.1K-M). Done sa yo endike ke blesi nan poumon pwovoke parenBlesi IR depann sou degre nanrenblesi.

Fig. 2. Dezòd nan sily selil nan poumon ak fragman yo ak pwoteyin lage nan BALF apre ren IR.C57BL/6 sourit gason yo te sibi swa 35 min nan iskemi ren bilateral oswa operasyon simulation Tisi nan poumon ak BALF yo te kolekte 4 ak 24 èdtan apre operasyon an jan sa dekri nan Materyèl yo ak Metòd. (A) Seksyon nan poumon (5 μm) yo te sibi tach imunofluoresan lè l sèvi avèk yon antikò anti-Arl13B; vèt endike Arl13B-pozitif. Yo te itilize tach DAPI (4′,6-diamidino-2-phenylindole; ble) pou vizyalize nwayo selil yo. Flèch yo endike sila. (B) Yo te mete BALF (10 ul) sou yon glisad vè ki te tache imunofluoresan lè l sèvi avèk yon antikò anti-Arl13B; vèt endike Arl13B-pozitif (n=3). (C) Kantite patikil Arl13B-pozitif yo te konte anba yon mikwoskòp fliyoresan (n=3). (D-G) Arl13B, acetylated- -tubulin (ac- -tub), ak ekspresyon -tubulin (-tub) nan BALF te analize pa Western blotting. Dansite bann yo te mezire lè l sèvi avèk lojisyèl ImageJ la. Rezilta yo eksprime kòm mwayen ± SEM (n=3). *p < 0.05="" kont="" sham.="" †p=""><0.05 vs="" 4="" èdtan="" apre="" iskemi.="" a:="" alveoli,="" tb:="">

3. Kidney IR ogmante nivo superoksid ak estrès oksidatif nan tou de tisi nan poumon ak BALF.

renIR ogmante nivo super-oksid nan tisi nan poumon (Fig.3A), tandiske li redwi ekspresyon nan IDH2 (Fig.3B ak C), men se pa MnSOD ak katalaz (Fig, 3B.DE). Konklizyon sa yo endike ke blesi nan poumon ki pwovoke nan ren yo asosye ak ogmantasyon nan nivo ROS akestrès oksidatifnan poumon yo. Pou sipòte sa a, nivo 4-idwoksi nominal (4-HNE), yon pwodwi peroksidasyon lipid, nan tisi nan poumon ogmante siyifikativman 4 ak 24 èdtan apre.reniskemi(Fig.3F-D). 4-HNE yo te obsève nan prèske tout zòn nan tisi poumon yo, ki gen ladan alveoli yo ak bwonchiol yo (Fig. 3H ak D. Anplis de sa, ekspresyon 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine ({{ 7}}OhdG), yon mak byen li te ye nan oksidasyon ADN kòm yon derive oksidize nan deoxy-guanosine, ogmante nan tou de sitosol la ak nwayo nan selil epitelyal poumon aprerenischemi (Fig.3J ak K. Nan BALF, 4-HNE ekspresyon tou ogmante aprereniskeminan yon fason ki depann de tan-repèfizyon (Fig. 3L, M). Anplis de sa, lè tan iskemik ren yo te pwolonje a 45 minit, ogmantasyon apre iskemik nan 4-HNE ekspresyon nan poumon yo te pi gran pase sa apre 35 minit nanrenischemi (Fig.3N, O). Rezilta sa yo endike ke tou de ADN mitokondriyo ak ADN nikleyè yo oksidatif blese pa ogmante fòmasyon ROS ak andikap nan sistèm retire, sijere ke domaj nan sily selil epitelyal poumon yo asosye akestrès oksidatif.

Fig. 3. Estrès oksidatif nan tisi nan poumon apre ren IR. C57BL / 6 sourit gason yo te sibi 35 (A-O) ak 45 (N, O) min nan iskemi ren bilateral oswa operasyon simulation.Poumon akrenyo te rekòlte 4 ak 24 èdtan apre swa 35 min oswa 45 min nan iskemi. (A-M) Sourit yo te sakrifye swa 4 oswa 24 èdtan apre 35 min nan iskemi. (A) Nivo superoksid nan tisi nan poumon yo te mezire jan sa dekri nan Materyèl ak Metòd yo (n=3-5). (B-E) IDH2, katalaz, ak ekspresyon MnSOD nan tisi nan poumon yo te analize pa Western blotting (n {{10}}). GAPDH te itilize kòm kontwòl chajman an. (C–E) Dansite bann yo te mezire lè l sèvi avèk lojisyèl ImageJ. (F, G) 4-Ekspresyon HNE nan poumon an te analize pa Western blotting, epi yo te mezire dansite gwoup la lè l sèvi avèk ImageJ (n=4). (H–K) Seksyon nan poumon yo (3 μm) yo te tache imunohistochimik lè l sèvi avèk anti-4-HNE ak 8-OHdG antikò ak kontrepilasyon lè l sèvi avèk ematoksilin; mawon endike 4-HNE- ak 8-OHdG-pozitif (n {{20}}). (I, K) Yo te mezire entansite 4-HNE- ak 8- OHdG-pozitif siyal yo lè l sèvi avèk pwogram i-Solution (n=3). (L, M) 4- Ekspresyon HNE nan BALF te analize pa Western blotting, epi yo te mezire dansite gwoup la lè l sèvi avèk ImageJ (n=3). (N, O) Sourit yo te sakrifye 4 èdtan apre swa 35 min oswa 45 min nan iskemi. 4-Ekspresyon HNE nan poumon an te analize pa Western blotting, epi yo te mezire dansite gwoup la lè l sèvi avèk ImageJ (n=3). Rezilta yo eksprime kòm mwayen ± SEM (n =3–5). *p < 0.05="" kont="" sham.="" †p=""><0.05 vs="" 4="" èdtan="" apre="" iskemi="" oswa="" 35="" min="" nan="" iskemi.="" (pou="" entèpretasyon="" referans="" yo="" sou="" koulè="" nan="" lejand="" figi="" sa="" a,="" yo="" refere="" lektè="" a="" nan="" vèsyon="" entènèt="" atik="" sa="">

Nan selil yo, mitokondri. yon gwo òganèl entraselilè ki pwodui ROS nòmalman sibi fizyon ak fisyon pou adapte yo ak kondisyon fizyolojik ak patolojik. Defisyans nan pwosesis fizyon ak fizyon sa yo ka pwovoke malfonksyònman selilè ak domaj[36]. Etid anvan yo te demontre saoksidatifestrèsandikape dinamik nòmal fizyon mitokondriyo ak fisyon, sa ki lakòz malfonksyònman mitokondriyo ak blesi selil [32,36-38]. Nou t ap chèche evalye dinamik mitokondriyo yo lè nou detèmine ekspresyon pwoteyin mitokondriyo ki kontwole fizyon ak fizyon. Ekspresyon yo nan Fis1 ak Drp1, ki kontwole fisyon mitokondriyo, yo te ogmante siyifikativman nan poumon yo nan sourit akreniskemi(Fig.4A-C). Sepandan, ekspresyon nan OPA1, ki kontwole fizyon mitokondriyo, pa te siyifikativman chanje pa ren IR (Fig.4A, D). Done sa yo endike ke balans nan fizyon mitokondriyo ak fisyon nan selil nan poumon yo deranje kòm yon rezilta nan AKI. (Agi blesi nan ren).

Fig. 4. Chanjman nan dinamik mitokondriyo nan poumon apre ren IR. C57BL / 6 sourit gason yo te sibi swa 35 min nan ischemi ren bilateral oswa operasyon simulation.Poumon yo te rekòlte 4 ak 24 èdtan apre iskemi. (A-D) Ekspresyon Drp1, Fis1, ak OPA1 nan tisi nan poumon yo te analize pa Western blotting. GAPDH te itilize kòm kontwòl chajman an. Dansite bann yo te mezire lè l sèvi avèk lojisyèl ImageJ la. Rezilta yo eksprime kòm mwayen ± SEM (n=4). *p < 0.05="" kont="" sham.="" †p=""><0.05 vs="" 4="" èdtan="" apre="">

4. Tretman antioksidan espesifik mitokondri yo diminye blesi nan poumon IR-pwovoke nan ren ak dezòd sily nan poumon.

Pou konfime wòl nan mitokondriyooksidatifestrèssourenIR-pwovoke blesi nan poumon ak dezòd selil epitelyal sily nan poumon, nou teste si pretreatment (Fig.5A-D oswa apre-tretman (Fig. 5J-L) ak Mito-TEMPO, yon antioksidan mitokondri espesifik, inibit ren IR-induit).oksidatifestrès, I-6 pwodiksyon, ak desilyasyon nan poumon sourit gason C57BL/6. Pretretman (Fig, 5A-D), men se pa apre tretman (Fig. 5J-L), ak Mito-TEMPO, siyifikativman anpeche ogmantasyon nan BUN ak IL-6 konsantrasyon nan plasma (Fig.5A ak B) kòm byen ke IL-6 konsantrasyon, konsantrasyon total pwoteyin, ak kantite selil total nan BALF (figi, 5C-E). Ekspresyon Arl13B, ac- -tubulin, ak -tubulin nan BALF sourit Mito-TEMPO-pre-trete yo te mwens pase sa yo nan sourit machin-trete (Fig.5F-I).Nan etid sa a, yon 6-h apre tretman an pa t pwoteje poumon yo kontrenIR(Fig.5J-L). Rezilta sa yo endike ke byen bonè pwodiksyon ROS, akimilasyon li, akoksidatifestrèska kontribiye anpil nan AKI (Agi blesi nan ren)-pwovoke blesi nan poumon. Nivo superoksid ak 4- ekspresyon HNE nan tisi poumon (Fig.6A-C) ak nan BALF (Fig.6D ak E) te mwens nan sourit Mito-TEMPO-pretrete pase nan sourit machin-trete. Rezilta sa yo endike sarenIR-induit blesi nan poumon ak deciliation selil epitelyal nan poumon yo asosye ak mitokondriyooksidatifestrès.

Fig. 5. Prevansyon nan ren IR-pwovoke aksidan nan poumon ak dezòd sily pa Mito-TEMPO, yon antioksidan mitokondri yo vize. C57BL/6 sourit gason yo te sibi 35 min nan iskemi ren bilateral.Gen kèk sourit yo te administre ak Mito-TEMPO (Mito-T, 0.7 mg/kg BW, ip) swa 17 ak 1 èdtan anvan iskemi, de fwa, (A-I) oswa 6 èdtan apre iskemi (J-). L). Poumon, BALF, ak san yo te rekòlte 24 èdtan apre iskemi. (A, J) Yo te mezire konsantrasyon BUN nan plasma. (B, C) Konsantrasyon IL-6 nan plasma ak BALF yo te mezire lè l sèvi avèk twous tès ELISA. (D, E, K, L) Yo te mezire konsantrasyon pwoteyin ak nimewo selil nan BALF. (F-I) Arl13B, acetylated{{10}}tubulin (ac- -tub), ak ekspresyon -tubulin (-tub) nan BALF te analize pa Western blotting. Dansite bann yo te mezire lè l sèvi avèk lojisyèl ImageJ la. Rezilta yo eksprime kòm mwayen ± SEM (n=4). *p <0.05 kont="">

KLIKE LA POU PATI Ⅱ