Ki jan Cistanche echinacoside ogmante androjèn nan selil andotelyo yo?

Kontakte: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Imèl:audrey.hu@wecistanche.com

Résumé.

Echinacoside (ECH) se yon konpoze natirèl ki gen yon efè vazodilatwa depandan andotelyòm. Ksid nitrique (NO) se yon vasorelaxant enpòtan ki soti nan selil andotelyo yo. Yo nan lòd yo egzaminen mekanis molekilè pwodiksyon ECH-pwovoke NO nan selil andotelyal yo, etid prezan an te envestige patisipasyon reseptè androjèn (AR) ak chemen fosfatidilinositol 3-kinaz (PI3K) / pwoteyin kinaz B (Akt) nan. fosforilasyon nan endothelial nitrik sintaz oksid (eNOS) nan selil endotelyal venn lonbrit imen (HUVECs). Sèvi ak sond fliyoresan DAF-FM la, yo te jwenn pwodiksyon NO an ogmante anpil, epi eNOS te fosforilé nan Ser1177 nan yon fason ki depann de konsantrasyon anba tretman 0.01-10 µM ECH nan HUVECs. Anplis de sa, NO pwodiksyon ak fosforilasyon eNOS pwovoke pa ECH te diminye lè yo te pretrete ak nilutamid antagonist AR a, oswa lè transfekte ak ti RNA entèfere AR. Anplis de sa, fosforilasyon ECH-pwovoke Akt la nan Ser473 te anile pa 5 µM wortmannin (yon inibitè PI3K). Done sa yo te endike ke ECH te ankouraje NO pwodiksyon atravè aktivasyon AR-depandan eNOS nan HUVECs e ke chemen PI3K/Akt ka patisipe nan fosforilasyon eNOS pwovoke pa ECH.

Cistanche deserticola gen anpil efè, klike isit la pou konnen plis

Entwodiksyon

Cistanche Hoffman. Et Link se yon zèb parazit kontinuèl nan yon genus nan fanmi Orobanchaceae. HerbaCistanche, tij la nanCistanche deserticolaYC MA akCistanche tubulosa(Schenk). Cistanche se yon zèb tonik ki te itilize pou tretedefisi nan ren, fèblès, leukorrhea morbid, ak konstipasyon senil (1), ki ka akòz androjèn ki tankou oswa efè regilasyon òmòn sèks li yo (2). Echinacoside (ECH; C35H46O20; pwa molekilè, 786.73; Fig. 1), se youn nan glikozid fenylethanoid (PhGs) izole nan tij Herba.Cistancheepi montre plizyè pwopriyete byolojik, ki gen ladan efè antioksidan, antiaje, anti-enflamatwa, epatopwotektif, ak neropwotektif (3). Envestigasyon famasi modèn yo te demontre ke plizyè elektè HerbaCistanche, ki gen ladan ECH,acteoside, kankanose, Lankan bò F, akcistanosideF, montre aktivite vasorelaxant (4).

Endothelium a se yon regilatè kritik nan vaskilè a, ak oksid nitrique (NO) se yon faktè enpòtan ap detann pibliye paselil andotelyo yo.Pa difize nan selil misk lis, NO aktive guanylate cyclase, ogmante nivo siklik guanosine monofosfat (cGMP), ak Lè sa a, aktive cGMP-depandan pwoteyin kinas (PKGs) ankouraje detant nan misk lis (5). Li te deja demontre ke ECH nan 350-400 µM dirèkteman aji sou misk vaskilè lis ak inibit pwopagasyon ipoksi pwovoke nan rat pulmonè selil misk lis (6), tandiske 30-300 µM ECH te lakòz vasorelaxation egi nan andotelyòm-. bag entak nan yon fason konsantrasyon-depandan, ak amelyore pwodiksyon cGMP nan misk kò lis kavènoz nan bag aortik kontrakte pa phenylephrine (7). Lè yo louvri chanèl NO-cGMP-PKG-BKCa yo nan selil misk lis, 100 oswa 300 µM ECH siprime kontraksyon noradrenalin pwovoke nan atè poumon rat yo, patikilyèman nan bag andotelyo-denuded (8).Selil endothelialyo regilatè kle nan fonksyon kadyovaskilè epi, nan plizyè ka, li te jwenn ke detant nan andotelyo-depandan te akòz yon sibstans transferable, tankou NO, lage nan andotelyo a (9). Sepandan, mekanis nan molekilè en nan ECH-induit NO pwodiksyon nan vaskilèselil andotelyo yomande plis envestigasyon. Nan endothelium vaskilè a, NO jenerasyon prensipalman medyatè pa endothelial NO synthase (eNOS). Plizyè gwoup te demontre ke phosphatidylinositol 3-kinase (PI3K) chemen aktive serine-threonine pwoteyin kinaz B (Akt), ki lakòz dirèk fosforilasyon eNOS nan serin 1177 (Ser1177) (10). Reseptè androjèn nan (AR) se yon manm nan subfanmi reseptè nikleyè s3, ki kanonikman modifye ekspresyon jèn. Lokalizasyon AR nan caveolae yo nan manbràn selilè a enplike nan règleman ki pa genomik nan fonksyon selil andotelyal oswa ekspresyon jèn pa deklanche kaskad c-Src/PI3K/Akt, ki finalman rezilta nan fosforilasyon eNOS ak NO pwodiksyon (11). Nan aortik imenselil andotelyo yo, yo te rapòte testostewòn aktive PI3K / Akt siyal ak rapidman pwovoke NO pwodiksyon akòz entèraksyon an dirèk nan AR ak subunit p85 nan PI3K sou sistèm nan kadyovaskilè (12). Li te rapòte ke ECH agrave sentòm ki gen rapò ak defisi òmòn ak egzèse efè androjèn li yo akòz lyezon konpetitif nan AR a olye pou yo testostewòn (2). Se poutèt sa, etid la prezan ipotèz ke chemen an PI3K / Akt ka patisipe nan NO pwodiksyon atravè AR-depandan fosforilasyon eNOS pwovoke pa ECH. Objektif etid la se te evalye efè ECH sa yo: i) Endiksyon pwodiksyon NO ak fosforilasyon eNOS; ii) patisipasyon AR nan fosforilasyon eNOS, ak iii) deklanchman chemen PI3K/Akt nan selil endothelial venn lonbrit imen (HUVECs), yon modèl eksperimantal byen koni pou etidye règleman fonksyon selil andotelyal ak anjojenèz (13).

Materyèl ak metòd

Pwodwi chimik ak reyaktif. ECH (pite, 92.5 pousan) te jwenn nan Nòm Nasyonal Referans Dwòg nan Enstiti Nasyonal pou Kontwòl Manje ak Dwòg. Antikò kont p-Akt (Ser473; cat. No. ab8805), Akt (cat. No. ab81283), p-eNOS (Ser1177; Cat. No. ab184154), ak eNOS (cat. No. ab76198) te achte nan men Abcam. . Inibitè yo nan nilutamide ak ICI 182780 yo te jwenn nan Sigma-Aldrich; Merck KGaA. L-NAME te achte nan men Adamas-Beta, Ltd., epi wortmannin te achte nan men Pribolab.

Kilti selil ak tretman dwòg.

HUVEC yo te jwenn nan ScienCell Research Laboratories Inc. ak kiltive nanselil andotelyalmwayen (ECM; ScienCell Research Laboratories) ak 5 pousan (v/v) serom fetal bovine (FBS; Gibco, Thermo Fisher Scientific, Inc.) ak 1 pousan sipleman kwasans selil endothelial (ECGS) nan 37˚C (5 pousan CO2 ak 95 pousan imidite) (14). Lè yo rive nan konfluans, selil yo te dijere ak tripsin ak plake nan ECM ak 1 pousan FBS ak 1 pousan ECGS. Pou tout eksperyans, HUVEC yo te plake nan yon konsantrasyon 1x104/ml epi yo te grandi jiskaske yo rive nan konfluans. Anvan tretman ak ECH oswa lòt stimulateur, selil yo te enkube nan fenol wouj-gratis ECM san FBS ak ECG pou 6 èdtan pou pwovoke arè kwasans. Nan eksperyans inhibitor yo, HUVEC yo te pre-enkube ak divès kalite antagonist oswa inhibiteur, ki gen ladan 10 µM nilutamid, 10 µM ICI 182780, 0.5 mM L-NAME oswa 5 µM wortmannin, pou 30 minit, avèk oswa san ECH, nan 37˚C. Nan tout gwoup, ki gen ladan kontwòl la, yo te itilize DMSO kòm yon sòlvan nan konsantrasyon egal nan 0.001 pousan.

Mezi pwodiksyon NO intraselilè.

Chanjman relatif nan konsantrasyon cytosolic NO nan HUVEC yo te kontwole lè l sèvi avèk fliyoresan NO pwofonde DAF-FM (Kayman Chemical Company), jan yo te rapòte deja (12). Yon ti tan, selil yo te chaje ak 5 µM DAF-FM diacetate pou 20 min nan 37˚C nan yon plak mikrotiter nwa epi rense plizyè fwa ak PBS (pH 7.4). Yo te detèmine fliyoresans nan longèdonn eksitasyon ak emisyon 495 ak 515 nm, respektivman, lè l sèvi avèk yon lektè microplate fliyoresan (Biotek Synergy H4; BioTek Instruments, Inc.) ak yon mikwoskòp kontra envèse (Nikon eclipse Ts2R; Nikon Corporation).

Analiz Western blot.

Kòm deja rapòte (15), monokouch konfluyan selil yo te lave de fwa nan PBS glas frèt ak lysed ak tanpon RIPA (P0013D; Beyotime Institute of Biotechnology). Konsantrasyon pwoteyin nan supernatant la te mezire lè l sèvi avèk metòd tès asid bicinchoninic (16). Apre sa, yo te chaje 30 µg pwoteyin pou chak liy, yo te separe lè l sèvi avèk 10 pousan jèl poliakrilamid, epi yo te transfere sou manbràn polyvinylidene difluoride. Manbràn yo te bloke ak 5 pousan lèt ekreme pou 1 èdtan nan 25˚C. Apre enkubasyon ak antikò monoklonal kont Akt (1:1, 000 dilution), p-Akt (1:500 dilution), eNOS (1:2,000 dilution), oswa p-eNOS (1 :1,000 dilution) nan 4˚C lannwit lan, manbràn yo te lave ak TBST (ki gen 0.1 pousan Tween-20) 4 fwa pou ~ 15 min pou chak lave nan 25˚C. Apre sa, manbràn yo te enkube ak antikò segondè ki konjige ak peroksidaz refor (1:5, 000 dilution; antikò sourit, nimewo chat A0216, oswa antikò anti lapen, nimewo chat A0208, Beyotime Institute). of Biotechnology) pou 1 èdtan nan 25˚C, epi detekte lè l sèvi avèk yon twous kimiluminesans amelyore (chat No. 32209, Thermo Fisher Scientific, Inc.). Bann entansite yo te mezire lè l sèvi avèk Image J jèl analiz lojisyèl, vèsyon 1.8.0_112 (National Institutes of Health).

Ti entèferans (si) RNA preparasyon ak transfèksyon.

RNAs doub-cheche long yo te sentèz pa mRNA sib AR ak reseptè estwojèn (ER) ak sekans yo montre nan Tablo I. Kondisyon yo pou knockdown siRNA yo te enplike transfekte HUVECs nan 70 pousan konfluans kenbe nan ki pa antimikwòb. mwayen kilti nan asyèt kilti kolagen an 60 mm. Transfèksyon 5 nM AR-siRNA oswa 10 nM ER -siRNA ak reyaktif Lipofectamine 3000 (Invitrogen; Thermo Fisher Scientific, Inc.) te fèt separeman, dapre pwotokòl manifakti a. Efikasite transfèksyon te evalye pa ranvèse transkripsyon quantitative-PCR analiz (RT-qPCR), jan yo te deja rapòte (17). Kondisyon thermocycling yo te jan sa a: 10 min nan 95˚C; 40 sik 95˚C pou 5 sec ak 60˚C pou 1 min, ak yon koub k ap fonn nan 95˚C pou 15 sec, 60˚C pou 1 min ak 95˚C pou 15 sec; yo te fè twa kopi byolojik endepandan pou chak echantiyon. Eksperyans ki vin apre yo te fèt 48 èdtan apre transfèksyon. Premye pè yo te fèt lè l sèvi avèk lojisyèl Primer Premier v5.0 (PREMIER Biosoft) ak sekans sa yo: AR devan, 5'-GGTTACACCAAAGGGCTAGAA-3' ak ranvèse, 5'-GACTTGTAGAGAGACAGGGTAGA-3'; ER pi devan, 5'-CCAGTACCAATGACAAGGGAAG-3' ak ranvèse, 5'-TCACAGGACCAGACTCCATAA-3'; ak GAPDH pi devan, 5'-CAGGGCTGCTTTTAACTCTGGTAA-3' ak ranvèse, 5'-GGGTGGAATCATATTGGAACATGT-3

Analiz estatistik.

Tout done yo prezante kòm mwayèn ± devyasyon estanda. Konparezon estatistik ant gwoup yo te fèt lè l sèvi avèk tès Kruskal-Wallis oswa ANOVA de-fason ak tès post hoc Tukey a pou konparezon miltip. P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">

Rezilta yo

ECH pwovoke NO pwodiksyon ak fosforilasyon eNOS.

Jan yo montre nan Fig. 2A ak B, 1 µM ECH ogmante siyifikativman pwodiksyon NO intraselilè nan HUVEC yo konpare ak selil kontwòl negatif yo, pandan y ap efè stimulation ECH te diminye nan nivo kontwòl pa pretreatman ak L-NAME. Pou jwenn pi bon konsantrasyon, yo te teste fosforilasyon eNOS nan 60 minit apre tretman ak ECH nan konsantrasyon 0, 0.01, 0. 1, 1, ak 10 µM. Rezilta yo te revele ke ECH nan konsantrasyon 0.01-10 µM ka siyifikativman pwovoke eNOS fosforilasyon nan Ser 1177 nan yon fason ki depann de konsantrasyon, ak maksimòm fosforilasyon eNOS obsève nan 10 µM ECH endiksyon (Fig. 2C ak D). Anplis de sa, fosforilasyon eNOS nan Ser1177 te egzamine pa analiz Western blot nan 0, 5, 15, 30, 60, ak 120 minit apre enkubasyon ak 1 µM ECH. Li te obsève ke fosforilasyon eNOS te rapidman deklanche pa ECH nan 5 min, e li kontinye ogmante jiska 30 min nan enkubasyon (Fig. 2E ak F). Imedyatman, malgre tretman ECH, grandè relatif fosforilasyon eNOS rete estab soti nan 30 min ivè; Se poutèt sa, ECH pa te afekte ekspresyon total eNOS (figi 2C ak E).

AR medyatè ECH-induit NO pwodiksyon ak fosforilasyon eNOS.

Egzamen RT-qPCR la te demontre ke efè entèferans AR-siRNA-1 ak ER -siRNA-2 te gen plis siksè nan anpeche ekspresyon AR ak ER nan HUVEC nan etid prezan (figi 3). ). Imedyatman, yo te aplike yon antagonis pou analiz AR anpèchman fonksyon ak siRNA pou analiz pèt fonksyon AR pou evalye patisipasyon AR nan deklanchman eNOS ECH-induit ak pwodiksyon NO. Jan yo montre nan Fig. 4A, 1 µM ECH ogmante siyifikativman NO pwodiksyon nan HUVECs (P<0.05). pretreatment="" with="" the="" ar="" antagonist="" nilutamide="" (10="" µm)="" abolished="" ech-induced="" no="" production,="" whereas="" ici182789="" (an="" er="" antagonist)="" did="" not="" exert="" the="" same="" effects.="" furthermore,="" the="" effects="" of="" sirna-mediated="" ar="" knockdown="" on="" no="" production="" were="" examined="" in="" cultured="" cells,="" indicating="" that="" no="" production="" was="" diminished="" by="" transfection="" with="" ar="" sirnas;="" however,="" it="" was="" not="" affected="" by="" er="" sirnas="" or="" control="" random="" sirnas="" (fig.="" 4b).="" representative="" western="" blots="" and="" semi-quantitative="" analysis="" (fig.="" 4c="" and="" d)="" revealed="" that="" the="" phosphorylation="" of="" enos="" induced="" by="" ech="" was="" inhibited="" by="" nilutamide="" and="" ici182789="" and="" that="" the="" inhibitory="" effect="" of="" nilutamide="" on="" ech-induced="" enos="" activation="" was="" significantly="" higher="" compared="" with="" that="" of="" ici182789,="" which="" indicated="" that="" inhibition="" of="" ar="" function="" had="" a="" greater="" impact="" than="" er="" on="" enos="" phosphorylation="" induced="" by="" ech.="" similarly,="" the="" phosphorylation="" of="" enos="" induced="" by="" ech="" was="" reduced="" significantly="" in="" cells="" transfected="" with="" ar-sirna="" and="" er-sirna="" compared="" with="" the="" control="" random="" sirna;="" the="" inhibitory="" effect="" of="" ar‑sirna="" on="" ech‑induced="" enos="" activation="" was="" significantly="" stronger="" compared="" with="" that="" of="" er-sirna="" (fig.="" 4e="" and="" f).="" therefore,="" the="" aforementioned="" results="" suggested="" that="" ech="" may="" cause="" ar-dependent="" activation="" of="" enos="" to="" induce="" no="" production="" in="">

ECH aktive chemen PI3K/Akt.

Nan etid sa a, yo te teste fosforilasyon Akt nan Ser473 60 minit apre enkubasyon ECH nan konsantrasyon 0, 0.01, 0.1 , 1, ak 10 µM. Rezilta yo endike ke ECH (0.01-10 µM) ka siyifikativman pwovoke Akt fosforilasyon. Nivo ekspresyon relatif p-Akt te monte nan 1 ak 10 µM nan tretman ECH (Fig. 5A ak B). Anplis de sa, fosforilasyon Akt te egzamine pa analiz Western blot nan 0, 5, 15, 30, 60, ak 120 min apre adisyon a nan 1 µM ECH nan kilti HUVEC. Jan yo montre nan Figi 5C ak D, ECH rapidman ogmante fosforilasyon Akt apre 5 min nan enkubasyon, ak nivo maksimòm pwoteyin p-Akt yo te obsève nan 60 min. Kontrèman, ECH pa t afekte ekspresyon total Akt (figi 5A ak C). Anplis, pou mennen ankèt sou efè potansyèl chemen PI3K sou fosforilasyon eNOS, yo te trete HUVEC yo ak wortmannin inibitè PI3K anvan aplikasyon ECH. Wortmannin te jwenn pou redwi pwodiksyon ECH-induit NO nan nivo debaz (Fig. 5E). Yon fenomèn menm jan an te obsève lè l sèvi avèk mikwoskospi fliyoresan lè w ap egzamine fliyoresans DAF-FM ECH-induit (figi 5F). Anplis de sa, wortmannin ka gen kapasite pou aboli rapid fosforilasyon eNOS nan HUVECs (figi 5G ak H). Rezilta yo mansyone pi wo a sijere ke ECH ka aktive fosforilasyon eNOS ak NO pwodiksyon atravè chemen PI3K/Akt.

Diskisyon

ECH se yon konpoze natirèl izole nan HerbaCistanche, ak divès kalite pwopriyete famasi. Li te deja demontre ke ECH egzèse yon efè detant vaskilè depandan andothelium pa louvri NO-cGMP-PKG-BKCachannels nan veso sangen selil misk lis (7,8). Konklizyon aktyèl yo bay prèv ke ECH te egzèse deklanchman AR-depandan eNOS pou pwovoke NO pwodiksyon ak patisipasyon chemen siyal PI3K/Akt nan vaskilè.selil andotelyo yo.

Kòm kouch ki pi entèn nan miray la veso, andotelyom la ka byen vit santi epi reponn a chanjman nan sikilasyon san, an vire sa ki lakòz transmisyon siyal nan selil misk ki kache yo nan lòd yo kontwole ton vaskilè (18). Li te lajman rapòte ke plizyè konpoze vazodilatory ki sòti andothelial egziste, ak sibstans ki pi pwototip.

ke yo te NON, ki te fòme nan izofòm andotelyal eNOS, ki lakòz fosforilasyon (19). Nan kondisyon nòmal, eNOS rete inaktif lè mare nan caveolin, epi li aktive ak siksesyon sa a nan evènman nanselil andotelyo yo: i) eNOS separe de caveolin-1 epi asosye ak Ca2 plis /CaM; ii) pwoteyin chòk chalè (HSP) 90 ankouraje eNOS.

Anplis de sa, yon nimewo ogmante nan etid yo te demontre ke AR eksprime nanselil andotelyo yonan yon kantite tisi imen, ki sijere yon wòl potansyèl pou androjèn ak analòg yo, ki aji atravè pwosesis AR-medyatè, nan modulation nan omeyostazi selil andotelyal imen (21). Nan chemen PI3K/Akt ki pa klasik, AR ka aktive PI3K lè li kominike dirèkteman ak sousinite regilasyon PI3K p85 (22). Etid la te demontre ke yon antagonist AR oswa AR siRNA diminye pwodiksyon NO ak fosforilasyon eNOS pwovoke pa ECH nan HUVEC yo. Li te deja rapòte ke estwojèn pwovoke eNOS fosforilasyon ak estimile NO pwodiksyon atravè klasik ER aktivasyon nan selil andotelyo (23), ak administrasyon an nan ECH siyifikativman amelyore ekspresyon an nan ER nan matris la (24). Sepandan, nan etid la prezan, efè AR a te pi enpòtan konpare ak ER sou deklanchman eNOS ECH-induit ak pwodiksyon NO. Anplis de sa, li te obsève ke ECH te lakòz pwodiksyon egi NO nan kèk minit atravè aktivasyon eNOS AR ki enplike nan HUVECs, ki se ki konsistan avèk nati a ki pa genomik nan repons lan nan selil endothelial. AR a asosye ak pwoteyin echafodaj, ki gen ladan HSP90, HSP70, ak kinaz Src, nan sitoplasm la, epi li ka transpòte nan manbràn ki soti nan konplèks AR a nan 5 min nan tretman testostewòn (23). Baze sou estrateji 'lapèch la sib', HSP90 te idantifye kòm sib la PhGs-makonnen, ki endike ke ECH ka fasilite disosyasyon nan AR soti nan pwoteyin yo echafodaj (25). Yon lòt etid sijere ke, nan ipotalamus la, ECH ka konbine avèk pòch AR nan asid amine Met-894 ak Val{-713 epi anpeche transpò AR sitoplasmik nan nwayo a (26). Sepandan, mekanis ki kache nan ki ECH medyatè sitoplasmik AR translokasyon nan manbràn nan mande pou plis envestigasyon. Se poutèt sa, gen plis rechèch obligatwa pou elicide mekanis nan ki ECH reyalize AR-depandan aktivasyon eNOS ak ki jan li ka asosye ak obligatwa nan HSP90 nan selil andothelial vaskilè.

Chemen PI3K/Akt se youn nan kaskad siyal ki pi enpòtan yo, se deklanchman ki pwovoke pa pwodui fosfatidilinositol-3,4,5-trisfosfat pou mare domèn omoloji N-terminal pleckstrin nan Ser/. Thr kinase Akt. Sa a fasilite rekritman Akt nan manbràn plasma a (27). Chemen PI3K/Akt ka jwe yon wòl enpòtan nan kontwòl detant NO-depandan pwovoke pa ECH. Etid la prezan te revele ke pwodiksyon ECH-pwovoke NO te siyifikativman redwi lè selil yo te enkubate ak wortmannin inibitè PI3K la. Yon rapò anvan te demontre ke 15 mg / kg ECH aktive chemen siyal PI3K / Akt nan selil mwèl zo ki te siprime 5-fluorouracil (28). Nan etid la prezan, inibitè PI3K diminye siyifikativman fosforilasyon eNOS ECH-induit nan Ser1177. Anplis, Akt aktivite te majorite reglemante pa en wout regilasyon, patikilyèman PI3K-depandan fosforilasyon nan Ser473 (20). Nan etid la prezan, ECH pwovoke Akt fosforilasyon nan Ser473 nan yon fason ki depann de dòz la; menm jan an tou, yon etid anvan te demontre ke 5, 10, oswa 20 µM ECH egzèse yon efè kardyopwotektif kont tretman anoksi/repèfizyon nan yon fason ki depann de dòz pa potansyèlman upregulating p-Akt ak SLC8A3 (29). Regilasyon transkripsyon jèn Akt rete lajman enkoni (30); Se poutèt sa, etid la prezan konsantre sou efè regilasyon pòs-transcription ECH sou Akt. Lè w pran konklizyon ki endike anwo yo an konsiderasyon, li te dedwi ke aplikasyon ECH nan HUVEC yo ka mennen nan aktivasyon an nan chemen an PI3K / Akt, ki fosforil eNOS epi, imedyatman, ogmante pwodiksyon NO.

An konklizyon, ECH se yon pwodwi natirèl ki se sitou izole nanHerba Cistanche. Mekanis potansyèl ki kache ECH-induit NO pwodiksyon anselil andotelyo yoka gen ladan sa ki annapre yo (Fig. 6): i) ECH aji kòm yon ligand fonksyonèl nan AR ki lokalize nan caveolae yo nan manbràn selilè a; ii) PI3K mare nan domèn idrofob Akt nan Ser473 epi li fasilite rekritman Akt nan manbràn selilè a; iii) rekritman nan kaskad PI3K/Akt deklanche fosforilasyon eNOS ki depann de AR, epi iv) jenerasyon NO a se medyatè eNOS nanselil andotelyo yo. Obsèvasyon ke ECH pwovoke NO pwodiksyon atravè fosforilasyon AR-depandan eNOS ak patisipasyon chemen PI3K/Akt ka kontribye nan plis konpreyansyon sou efè vasorelaxant ECH. Anplis de sa, ECH ki vize chemen NO ki sòti nan andothelial yo ka akòz efè ki pa genomik. Se poutèt sa, etid prezan an ka ede elicide mekanis yo nan ki ECH egzèse efè famasi li yo pou anpeche maladi kadyovaskilè.

Otè:

LI GU, DANHONG LIAN, YIMEI ZHENG, WEI ZHOU, JINLEI GU ak XIN LIU

Sant Rechèch Jeni Manje ak Sante nan Ministè Edikasyon Eta a, Lekòl Syans Lavi,

Sun Yat-sen University, Guangzhou, Guangdong 510275, PR Lachin

Resevwa 1ye me 2019; Aksepte 10 desanm 2019

Referans

1. Chinwa Pharmacopeia komisyon:Cistanche Herba. Nan: Farmakope Repiblik Pèp la Lachin 1. manton. Med. Sci. Press, Beijing, pp 135, 2015.

2. Jiang Z, Wang J, Li X, ak Zhang X:EchinacosideepiCistanche tubulosa(Schenk) R. wight amelyore bisphenol A-pwovoke tèstikul ak domaj espèm nan rat nan aks gonad reglemante anzim steroidojèn. J Ethnopharmacol 193: 321-328, 2016.

3. Liu J, Yang L, Dong Y, Zhang B, ak Ma X:Echinacoside, yon pwodwi natirèl inestimab nan tretman maladi newolojik ak lòt. Molekil 23: piiE1213, 2018.

4. Yoshikawa M, Matsuda H, Morikawa T, Xie H, Nakamura S ak Muraoka O: Phenylethanoid aminoglycosides ak acylated oligosugars ak aktivite vasorelaxant soti nanCistanche tubulosa. Bioorg Med chem 14: 7468-7475, 2006.

5. Arnold WP, ​​Mittal CK, Katsuki S ak Murad F: oksid nitrique aktive guanylate cyclase ak ogmante nivo guanosine 3':5'-cyclic monofosfat nan divès kalite preparasyon tisi. Proc Natl Acad Sci USA 74: 3203-3207, 1977.

6. Gai XY, Tang F, Ma J, Zeng KW, Wang SL, Wang YP, Wren TN, Lu dX, Zhou Y ak Ge RL: efè antiproliferatif nanechinacosidesou rat pulmonè selil misk lis anba ipoksi. J Pharmacol Sci 126: 155-163, 2014.

7. Li WJ, Fang TH, Ma X, Zhang K, Ma ZZ, ak Tu PF:Echinacosidepwovoke detant andotelyo-depandan nan bag aortik rat atravè yon chemen NO-cGMP. Planta Med 75: 1400-1404, 2009.

8. Gai XY, Wei YH, Zhang W, Wren TN, Wang YP, Li ZQ, Liu S, Ma L, Lu dX, Zhou Y ak Ge RL:Echinacosidepwovoke vazorelaxasyon atè pulmonè rat pa louvri chanèl NO-cGMP-PKG-BKca yo epi redwi ka intraselilè.^{2 plis}nivo. Acta Pharmacol Sin 36: 587-596, 2015.

9. Maruhashi T, Kihara Y, ak Higashi Y: Evalyasyon vazodilatasyon endothelium-endepandan: Soti nan metodoloji nan pèspektiv klinik. J Hypertens 36: 1460-1467, 2018.

10. Ahmad KA, Ze H, Chen J, Khan FU, Chen X, Xu J, ak ding K: Efè pwoteksyon yon nouvo eleman sentetik derive sou venn lonbrit imen.selil andotelyo yokont aksidan oksidatif estrès-induit: Patisipasyon nan antioksidasyon ak PI3k / Akt / eNOS / NO chemen siyal. Biomed Pharmacother 106: 1734-1741, 2018.

11. Yu J, Akishita M, Eto M, Koizumi H, Hashimoto R, Ogawa S, Tanaka K, Ouchi Y ak Okabe T: Src kinase-medyatè androjèn reseptè-depandan aktivasyon ki pa genomik nan siyal kaskad ki mennen nan endothelial nitrik oksid sentaz . Biochem Bioph Res Commun 424: 538-543, 2012.

12. Yu J, Akishita M, Eto M, Ogawa S, Pitit B, Kato S, Ouchi Y ak Okabe T: Androgen reseptè-depandan aktivasyon nan endothelial nitrik oksid sentaz nan vaskilèselil andotelyo yo: Wòl phosphatidylinositol 3-kinase/Akt pathway. Andokrinoloji 151: 1822-1828, 2010.

13. Pittarella P, Squarzanti dF, Molinari c, Invernizzi M, Uberti F ak Reno F: NO-depandan pwopagasyon ak migrasyon pwovoke pa vitamin d nan HUVEc. J Steroid Biochem 149: 35-42, 2015.

14. Li Y, Luan Z, Fu X, ak Xu X: Ekspresyon twòp nan pwoteyin dekoupling 2 inibit apoptoz segondè glikoz pwovoke nan venn lonbrit imen an.selil andotelyo yo. Int J Mol Med 37: 631-638, 2016.

15. Xiao-Hong d, chang-Qin X, Jian-Hua H, Wen-Jiang Z ak Bing S: Icariin retade homocysteine-induitendothelial selilèsenesans ki enplike aktivasyon chemen siyal PI3K/AKT-eNOS la. Pharm Biol 51: 433-440, 2013.

16. Smith PK, Krohn RI, Hermanson GT, Mallia AK, Gartner FH, Provenzano Md, Fujimoto EK, Goeke NM, Olson BJ, ak Klenk dc: Mezi pwoteyin lè l sèvi avèk asid bicinchoninic. Anal Biochem 150: 76-85, 1985.

17. Gu L, Zhong X, Lian d, Zheng Y, Wang H, ak Liu X: Triterpenoid byosentèz ak repons transkripsyon an pwovoke pa oksid nitrique nan submergé fèrmante Ganoderma lucidum.Pwosesis Biochem 60: 19-26, 2017.

18. Ellingsworth dc, Sandow SL, Shukla N, Liu Y, Jeremy JY ak Gutterman dd: Endothelium-derived hyperpolarization and coronary vasodilation: wòl divès ak entegre nan asid epoxyeicosatrienoic, oksijene idwojèn, ak junctions gap. Mikwosikilasyon 23: 15-32, 2016.

19. Freed JK ak Gutterman dd: kominikasyon se kle: Mekanis siyal entèselilè nan vazodilatasyon. J Cardiovasc Pharm 69: 264-272, 2017.

20. Quillon A, Soti nan B ak deba R: Endothelium microenvironment sensing ki mennen nan oksid nitrique-medyatasyon vazodilatasyon: Yon revizyon nan siyal nève ak byomekanik. Oksid nitrique 45: 20-26, 2015.

21. Torres-Estay V, Carreno V, Francisco IF, Sotomayor P, Godoy AS ak Smith GJ: reseptè androjèn nan imenselil andotelyo yo. J Endocrinol 224: 131-137, 2015.

22. Deng Q, Zhang Z, Wu Y, Yu WY, Zhang J, Jiang ZM, Zhang Y, Liang H, ak Gui YT: Aksyon ki pa genomik nan androjèn se medyatè pa fosforilasyon rapid ak règleman nan trafik reseptè androjèn. Cell Physiol Biochem 43: 223-236, 2017.

23. de Oliveira TS, de Oliveira LM, de Oliveira LP, costa RMd, Tostes Rc, Georg Rc, costa EA, Lobato NS, Filgueira FP, ak Ghedini Pc: Aktivasyon nan chemen PI3K/Akt medyatè pa reseptè estwojèn kont pou estrone- pwovoke aktivasyon vaskilè nan siyal cGMP. Vascul Pharmacol 110: 42-48, 2018.

24. Li F, Yang X, Yang Y, Guo c, Zhang c, Yang Z ak Li P: aktivite antiosteyopowotik nanechinacosidenan rat ovariectomized. Phytomedicine 20: 549-557, 2013.

25. Zeng KW, Liao LX, Wan YJ, Jiang Y, ak Tu PF: sib farmakolojik idantifikasyon ak analiz efikasite nan glikozid phenylethanoid soti nanCistanchesHerba baze sou estrateji 'lapèch sib'. chin Tradit Herbal drugs 49: 173-178, 2018.

26. Jiang Z, Zhou B, Li X, Kirby GM, ak Zhang X:Echinacosideogmante kantite espèm nan rat pa vize reseptè androjèn ipotalamik la. Sci Rep 8: 3839-3850, 2018.

27. coffer PJ, Jin J, ak Woodgett JR: Pwoteyin kinaz B (c-Akt): Yon medyatè miltifonksyon nan aktivasyon fosfatidilinositol 3-kinaz. Biochem J 335, 1-13, 1998.

28. Wang S, Zheng G, Tian S, Zhang Y, Shen L, Pak Y, Shen Y, ak Qian J:Echinacosideamelyore fonksyon ematopoyetik nan 5-FU-induit myelosuppression sourit. Life Sci 123: 86-92, 2015.

29. Chen M, Wang X, Hu B, Zhou J, Wang X, Wei W, ak Zhou H: efè pwoteksyon nanEchinacosidekont blesi anoksi/reperfusion nan selil H9c2 atravè p-AKT ak SLc8A3. Biomed Pharmacother 104: 52-59, 2018.

30. Abeyrathna P ak Su Y: Wòl kritik Akt nan fonksyon kadyovaskilè. Vascul Pharmacol 74: 38-48, 2015.