Efè polisakarid Cistanche Deserticola sou selil iminitè ak aktivite telomeraz nan sourit ki aje

Zhang Hongquan, Li Yuan, Song Yuanyuan (Enstiti Medsin, Yangzhou University, Yangzhou 225001, Jiangsu)

Résumé: Objektif yo etidye efè polisakarid Cistanche deserticola (PCD) sou kontni malondialdehyde (MDA), aktivite telomeraz, ak fonksyon iminitè nan tisi sourit ki aje subegi. Metòd D-galaktoz te pwovoke modèl sourit ki aje subak. Kontni MDA te detekte pa kolorimetri asid thiobarbituric; Telomerase aktivite te detekte pa PCR-ELISA; Reyaksyon pwopagasyon lenfosit la te mezire pa metòd MTT la; Fonksyon fagositik makrofaj peritoneal sourit yo te mezire pa tès wouj net; Kontni IL-2 nan serom yo te detèmine pa tès imunosorban ki lye ak anzim (ELISA). Rezilta Kontni MDA nan kè, fwa, ak sèvo gwoup modèl la ogmante anpil, pandan y ap aktivite telomeraz, reyaksyon pwopagasyon lenfosit, fagositoz macrophage peritoneal, ak kontni IL-2 nan san periferik diminye anpil. Apre administrasyon PCD, kontni MDA nan kè, fwa, ak sèvo sourit yo te siyifikativman diminye, ak aktivite telomerase nan kè ak tisi nan sèvo, reyaksyon pwopagasyon lenfosit, fagositoz macrophage peritoneal ak kontni IL-2 nan. san periferik yo te ogmante anpil. Konklizyon PCD ka antagonize domaj radikal gratis, amelyore aktivite telomeraz nan kè ak tisi nan sèvo ak fonksyon iminitè nan sourit ki aje, ak amelyore aje a pwovoke pa D-galaktoz.

Mo kle yo: Cistanche deserticolapolisakarid; Malondialdehyde; telomeraz;Vaksinasyon; dwe senil

Sipleman Cistanche tou pre mwen- Amelyore iminite

Klike la a pou w wè pwodwi Cistanche Enhance Immunity

【Ask for more】 Email: xue122522@foxmail.com /  Whats App:  0086 18599088692 /  Wechat:  18599088692

Klasifikasyon bibliyotèk Chinwa No.: R284 Kòd Dokiman: A No. Atik: 1001-2494 (2011) 14-1081-05

Cistanche deserticola se yon tij chèch chèch ak fèy fosfò nan Cistanche deserticola, ki gen fonksyon pou tonifye fwa a ak ren ak benefisye sans ak qi [1]. Cistanche deserticola polisakarid se yon polisakarid brit ki separe ak Cistanche deserticola, ki retire nan dlo-idrosolubl ti enpurte molekilè, deproteinized pa metòd Sevag la, epi repete trete ak dlo ak alkòl pou jwenn PCD [2]. Eksperyans sa a kòmanse ak teyori iminitè a ak teyori telomèr nan aje epi li adopte modèl sourit ki aje D-galaktoz la pou obsève efè PCD sou kontni malondialdehyde (MDA) ak aktivite telomeraz nan kè, fwa, ak sèvo, epi eksplore alavans. mekanis li yo.

1.Materyèl ak metòd

1.1 Bèt, dwòg, reyaktif, ak enstriman

3-sourit ICR ki gen yon mwa, klas pwòp, 26-32g, mwatye gason ak mwatye fi [Yangzhou University Experimental Animal Center, Experimental Animal Quality Certificate No.: SCXK (Su) 2002-0009] . Tanperati chanm lan se 20 ~ 25 degre, ekleraj natirèl la, ak anviwònman an apwopriye pou manje pou yon semèn anvan eksperyans lan. Nanjing Wildlife Research Institute bay PCD epi li fonn nan dlo distile; D-galaktoz (D-Gal, Shanghai Dezyèm faktori reyaktif); Twous tès aktivite Telomerase (MB Company, USA); Twous deteksyon MDA ak twous IL-2 ELISA sourit (Nanjing Jiancheng Biological Engineering Research Institute). ELX800UV makè anzim (BIO-TEK, USA); PT-MR3100D tisi homogenizer (Polytron, Swis); MODEL550 santrifujeur konjelasyon Desktop (Eppendorf, Almay); BP110S echèl elektwonik (Sartorius, Almay).

Cistanche deserticola- Amelyore iminite

1.2 Gwoup bèt, preparasyon modèl, ak administrasyon

Yo te prepare modèl sourit aje selon metòd ki nan literati [3]. Yo te prepare 10 pousan D-Gal ak dlo pou piki, epi yo te enjekte 10 mL · kg-1 anba lar nan kou ak do sourit yon fwa pa jou pandan 6 semèn. Sourit yo te owaza divize an senk gwoup: gwoup kontwòl nòmal, gwoup kontwòl modèl, PCD25, 50 ak 100mg · kg -1 gwoup (PL, PM, PH gwoup), ak 12 sourit nan chak gwoup. Sourit yo nan gwoup modèl la ak gwoup administrasyon PCD yo te etabli dapre lalwa, epi yo te bay PCD25, 50, ak 100 mg · kg-1 ak yon volim 20 mL · kg-1 pa gavage. chak jou. Sourit gwoup kontwòl nòmal yo te enjekte ak menm volim dlo pou piki epi yo te bay menm volim saline nòmal pa gavage.

1.3 Detèminasyon kontni MDA ak aktivite telomeraz

24 èdtan apre dènye administrasyon an, yo te retire glob je a epi yo te pran san, yo te touye sourit yo, yo te retire kè a, fwa ak sèvo yo byen vit, epi yo te fè omojèn tisi fre anba tanperati ki ba, santrifujasyon, epi yo te pran supernatant la. Kontni MDA te detèmine pa kolorimetri asid thiobarbituric. Aktivite telomeraz la te detekte pa PCR-ELISA. Etap operasyon yo te fèt dapre enstriksyon ki sou twous la. Yo te mezire valè A nan 450nm makè anzim la.

1.4 Detèminasyon reyaksyon pwopagasyon lenfosit [4]

Retire larat sourit aseptik nan ultra-pwòp workbench la, prepare sispansyon selil larat sourit la, epi ajiste dansite selil la a 1 × 109 · L-1, konkanavalin A (ConA) te kiltive kòm yon stimulateur in vitro pou 48 èdtan, epi yo te mezire reyaksyon pwopagasyon selil pa metòd MTT. Valè A a te mezire nan longèdonn 570 nm mezire pa linker anzim la, epi rezilta a te eksprime kòm valè an mwayèn nan twa twou konplèks A.

1.5 Detèminasyon fonksyon fagositik makrofaj peritoneal pa metòd net wouj la

Cistanche gason benefis—Impwouve iminite

24 èdtan apre dènye administrasyon an, sourit yo te dekapite ak touye. Likid peritoneal sourit yo kolekte aseptik epi santrifuje nan 1000r · min-1, selil yo te lave ak solisyon Hanks twa fwa, epi sispansyon selil la te prepare ak solisyon kilti 1640. Pran 3mL epi mete l nan yon plat kilti, kilti a 37 degre ak 5 pousan CO2 pou 2h. Makrofaj yo konfòme yo ak sifas veso a, soufle ak souse ak solisyon Hanks 4 degre, kolekte selil aderan yo, konte sou plak la konte selil san, epi ajiste dansite selil la a 2 × 109 selil · L-1, kiltive nan yon enkibatè 37 degre pou 2 èdtan, supernatant yo ak selil ki pa aderan yo te jete. Pran makrofaj aderan, ajoute 0.1 pousan net wouj fizyolojik saline, kontinye nan kilti a nan 37 degre pou 30min, jete net wouj, repete lave makrofaj ak PBS nan 37 degre, delye ak 50 pousan asid acetic ak 50 pousan etanòl pa volim, epi mezire. valè A.

1.6 Detèminasyon nivo serik IL-2

Pran san nan boul je a, santrifuje (3000r · min-1, 10min) pou separe serom la, epi detèmine kontni IL-2 nan serik la pa tès iminosorban ki lye ak anzim (ELISA). Operasyon espesifik la se dapre enstriksyon yo nan twous la. Nivo IL-2 nan serom sourit nan chak gwoup detekte nan 450nm makè anzim la.

1.7 Analiz estatistik

Done yo te trete ak SPSS11.0, epi done mezi yo te eksprime ak mwayen ± devyasyon estanda (x ± s), lè l sèvi avèk yon sèl-fason ANOVA ak entè-gwoup t-tès.

ginseng dezè-Mwenpwouve iminite

2.Rezilta yo

2.1 Efè PCD sou kontni MDA nan kè, sèvo, ak fwa sourit ki aje.

Li te siyifikativman pi wo pase gwoup kontwòl nòmal la (P<0.01). After intragastric administration of PCD25, 50 and 100 mg · kg-1, the content of MDA in the heart, brain, and liver of mice decreased in a dose-dependent manner compared with the model group (P<0.01, P<0.05), and the content of MDA in the high-dose group was close to the normal level (Table 1).

2.2 Efè PCD sou aktivite telomeraz nan kè, sèvo, ak tisi fwa sourit ki aje

Compared with the normal control group, the telomerase activity of the heart, liver, and brain tissue in the model group was significantly reduced. After intragastric administration of PCD, the activity of telomerase in heart and brain tissue was increased in a dose-dependent manner, and the level of the high dose group was close to that of the normal control group. There was no significant effect on telomerase activity in the liver tissue of aging mice (P>0.05) (Tablo 2). 2.3 Efè PCD sou reyaksyon pwopagasyon lenfosit, fagositoz makrofaj peritoneal, ak kontni IL-2 serik nan sourit ki gen laj yo te siyifikativman pi ba pase sa yo nan gwoup kontwòl nòmal la (P).<0.01). After intragastric administration of PCD, the lymphocyte proliferation reaction, peritoneal macrophage phagocytosis and serum IL-2 content of aging mice increased in dose dependence, which was significantly different from the model group (P<0.01, P<0.05) (Table 3).

3.Diskisyon

Mekanis egzak la nan aje se toujou klè. Pandan ane yo, entelektyèl nan kay ak aletranje te mete devan plizyè douzèn teyori aje, tankou teyori radikal gratis. Oksijèn molekilè nesesè pou siviv òganis yo, ak eleman nitritif nan òganis yo lage enèji atravè oksidasyon. Eta a oksidatif nan selil jwe yon wòl enpòtan nan aje, ensidan timè, ak devlopman. Sepandan, radikal gratis yo pral fòme nan kèk pwosesis oksidasyon, ak aje se pre relasyon ak reyaksyon nòmal radikal gratis. Lè radikal gratis akimile twòp nan kò a, li pral lakòz peroksidasyon asid gra enstore nan kò a, espesyalman nan manbràn byolojik la, sa ki lakòz chanjman nan estrikti manbràn selilè a, domaj nan fonksyon manbràn, ak pwodiksyon MDA. ak lipofuscin (LPF) [5].

MDA se yon ajan kwaze trè aktif. Li ka kovalans kwaze ak pwoteyin, anzim, ak asid amine gratis sou asid nikleyik yo fòme baz Schiff. Akòz lyezon nòmal li yo, li pa ka dijere pa idrolaz apre li fin vale pa lizozom, epi li ka rasanble nan selil yo fòme lipofuscin, ki ka anpwazonnen selil yo, bloke transmisyon sibstans ak mesaj nan selil yo, epi mennen nan yon akselerasyon nikleyè. aje selil ak lanmò.

Se poutèt sa, MDA ka itilize kòm yon endikatè serye nan aje ògàn ak selil. Teyori telomè a kwè ke longè kwomozòm nan (telomere) nan tèt la nan kwomozòm la gen rapò ak aje ak lavi. Longè telomè a se apeprè 2 a 15 kb. Akòz pwoblèm replikasyon tèminal la, ADN telomè a ap pèdi 50 a 200 bp chak fwa ADN nan kopye. Avèk ogmantasyon nan kantite divizyon selilè, ADN telomè yo ap diminye piti piti. Lè li vin pi kout nan yon sèten limit, li pa pral kenbe estabilite nan tach, ak selil la ap pèdi kapasite nan divizyon ak pwopagasyon ak mouri nan aje, Mantèg sa a se yon siy aje [6]. Selil la antre nan etap echèk proliferasyon an, epi selil la kontinye siviv men li pa ka divize ak pwopagasyon [7]. Se poutèt sa, telomè yo konnen tou kòm "revèy byolojik" nan selil yo, ak aje selil detèmine aje nan tout kò a. Rechèch Bryma a te jwenn ke longè telomèr la gen rapò ak aktivite telomeraz la. Plis aktivite telomeraz la pi wo, plis telomèr la pi long, pi bon estabilite ak entegrite kwomozòm yo, plis fwa divizyon selilè yo, ak lavi a pi long.

Sipleman Cistanche toupre mwen—Amelyore iminite

Sistèm iminitè a, kòm yon sistèm konplè ak otonòm, jwe yon wòl enpòtan nan antretyen ak ajisteman nan aktivite lavi, ak n bès nan fonksyon iminitè se karakteristik ki pi enpòtan nan aje. Malfonksyònman iminitè ka akselere aje nan kò a[8]. Rezilta eksperyans sa a te montre saPCD ta ka siyifikativman redwi kontni MDA nan kè, sèvo, ak tisi fwa, ogmante aktivite telomerase nan kè ak tisi nan sèvo nan sourit modèl ki aje, osi byen ke reyaksyon an pwopagasyon lenfosit, fagositoz macrophage peritoneal ak kontni IL{{0 }} nan san periferik sourit ki aje. Li ka konkli ke PCD gen yon bon wòl nan antagonize domaj radikal gratis, ka ankouraje pwopagasyon lenfosit, amelyore iminite selilè ki pa espesifik ak fonksyon règleman iminitè nan kò a, epi jwe yon wòl nan reta aje nan kò a.

REFERANS

[1] MAZG.Diferan nan trete Cistanche sinensis G.Beck ak Herba Cistanche pa anprent HPLCF [J] .ChinPharmJ, 2011, 46 (12): 899-902.

[2] SHIHF, LINAP, ZHANGHQ,etal.Thee efè polysaccgrides nan Cistanche deserticola YCMa sou sendwòm defisyans larat [J] .Chin Wild Plant Res, 2000, 19 (6): 49-51.

[3] XUSY, BIANRL, CHENX.Methodoldgy of Pharmacological Experiments)[ M] .Vol3.Beijing:People's Medical Publishing House, 2002:1465-1466.

[4] LIUYQ, SUW, WUJJ, etal.Efè ekstraksyon cynomorium coccineum sou fonksyon iminite ak metabolis radikal gratis nan agingmice [J] .JCell MolI mmunol=, 2009, 25(1):1155-1157 .

[5] YANGHJ, WANGZL, XUESH.Pwogrè nan etid mekanis aje [J] .Chin J Kontwòl Endem Dis=, 2008, 23(1):35-37.

[6] YANGJ, ZHANXH, SUNY, etal.Efè sijunzidecoction sou kontni malondialdehyde ak aktivite telomerase nan kè, fwa ak tisi nan sèvo yoD-galaktoz pwovoke aje modèl sourit [J] .ChinJ Integr Tradit Chin West Med=, 2005, 22 (6):531-533.

[7] ZHANGXH, ZHANGJN.Telomere, telomerase, agingand cancer[ J] .IntJGenetics=, 2007, 30(1):69-71.

[8] SONGSX, LVZJ.Research progress of T,B cell senescence and its mo lecularm echanism[ J] .JCell MolI mmunol, 2002, 18(3):306-308.