Evalye Antioksidan, Blanchiman ak Pwopriyete Antiaje nan idrolysat pwoteyin diri

Kontakte:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Hui-Ju Chen 1,2, Fan-Jhen Dai 2, Cheng-You Chen 3, Siao-Ling Fan 2, Ji-Hong Zheng 4, Yu-Chun Huang 2,Chi-Fai Chau 1, Yung-Sheng Lin 3, 4,5,* ak Chin-Shuh Chen 1,*

Résumé:Idrolizat pwoteyin ki sòti nan plant yo gen aplikasyon potansyèl nan nitrisyon. Rice proteinhydrolysates (RPHs), yon sous ekselan nan pwoteyin, te atire atansyon pou devlopman nan kosmeceuticals. Sepandan, kèk etid te rapòte aplikasyon potansyèl RPH inanalysis, ak etid sa a egzamine yoantioksidanaktivite ak aktivite inhibition nan anzim skinaging. Rezilta yo te endike ke total fenolik ak flavonoid konsantrasyon yo te 2.06 ± 0.13 mg asid galik ekivalan/g RPHs ak 25.96 ± 0.52 µg quercetin ekivalan/g RPHs, respektivman. RPH yo te demontre aktivite ki depann de dòz la pou elimine radikal gratis ki soti nan 1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl [demi-maksimòm konsantrasyon inhibitor (IC50)=42.58 ± 2.1 mg/g RPH] ak 2. ,20-azino-bis (3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (IC50=2.11 ± 0.88 mg/g RPHs), kapasite rediksyon ki depann de dòz la (6.95 ± 1.40). mg vitamin C ekivalan/g RPHs) ak kapasite absorpsyon radikal oksijèn (473 µmol Trolox ekivalan/g RPHs). Konsantrasyon yo nan solisyon an RPH oblije reyalize 50 pousan anpèchman nan hyaluronidase aktirozinazaktivite yo te detèmine pou 8.91 ak 107.6 mg/mL, respektivman. Etid sa a te demontre ke RPH yo genyenantioksidan,antihyaluronidase, ak aktivite antityrosinase pou aplikasyon kosmetik nan lavni.

Mo kle:idrolizat pwoteyin diri;antioksidan; yaluronidaz;tirozinaz; kosmetik

sistanchblanchimanefèsou po a pouanti-oksidasyon

1. Entwodiksyon

Ekspozisyon radyasyon iltravyolèt responsab pou aje foto (oswa aje ekstèn); Kontrèman, espès oksijèn reyaktif ki pwodui nan metabolis selilè ak deteryorasyon fonksyon byolojik yo responsab pou aje intrinsèques [1,2]. Manje trete souvan gen natirèlantioksidantankou katechin, asid ascorbic, tokoferol, asid rosmarinic, ak ekstrè fenolik ki soti nan divès plant. Rechèch ki fèt nan antioksidan natirèl kounye a konsidere provenances ki pa tradisyonèl yo. Sous natirèlantioksidanyo pi dezirab pase pwodui chimikantioksidandepi kèk antioksidan sentetik yo te rapòte kòm kanserojèn [3]. Diri (Oryza sativa) se yon pi gwo elemantè dyetetik pou moun atravè lemond, patikilyèman moun k ap viv nan pwovens Lazi. Pwodiksyon diri anyèl mond lan se apeprè 741 milyon tòn [4]. Nan peyi Azyatik yo, diri se sous 75 pousan nan konsomasyon enèji plis pase 2 milya moun [5]. Pwodiksyon diri anpil rezilta nan yon kantite korespondan nan pwodiksyon by-pwodwi. Pwodui rezidyèl nan pwosesis pwodiksyon diri a genyen majorite pwoteyin grenn nan (~60–85 pousan), men yo jete oswa itilize pou bay bèt [6–8]. Peptides yo jwenn nan divès idrolysat pwoteyin yo rapòte aji kòm potansyèlantioksidan[9]. Se poutèt sa, antioksidan natirèl ak ki pa toksik yo ka ekstrè nan idroliz pwoteyin manje. Anpil entelektyèl te anplwaye modèl ki gen anpil lipid e yo rapòte idrolizat pwoteyin ansanm ak lèt, zein, ak peptides pwoteyin soya pou yo gen karakteristik antioksidan enpòtan, tankou elimine radikal gratis, anpèchman manje ak peroksidasyon lipid in vitro, ak chelation metal tranzisyon [10–. 12].

Asid yaluronik (HA) ede rajenisman po a paske li ogmante viskozite, li gen imidite, epi li fè likid ekstraselilè mwens pèmeyab. Akòz ekselan kapasite li kenbe dlo, HA ogmante jèn, idratasyon, ak lis nan po a epi redwi degre ondilasyon an [13,14]. Malerezman, nivo HA nan po a natirèlman diminye ak laj. Hyaluronidase se yon anzim ki detwi HA, sa ki lakòz pèt nan fòs po, fleksibilite, ak imidite, ki an vire, mennen nan aje po. Anzim ki pwodui melanintirozinazkontribye vitalman nan etap ki limite vitès nan pwosesis ki pwodui melanin. Se poutèt sa, maladi pigmantasyon yo souvan trete ak eklere po reyalize pa inhibiting oswa downregulating.tirozinazaktivite [17,18].

Nan plizyè etid, idrolysate pwoteyin grenn jaden ak peptides ki ka jwenn nan yo te dekouvri yo gen antioksidan, antihypertansive, ak antitumoralactivities [19,20]. Kontribisyon pozitif nan sante moun nan peptides ak pwoteyin ki soti nan manje yo piti piti rekonèt [21]. Konsomatè de pli zan pli mande ke endistri kosmetik ak swen sante yo sèvi ak konpoze natirèl byoaktif. Rice proteinhydrolysates (RPHs) te atire atansyon kòm yon sous ekselan nan pwoteyin. Sepandan, kèk etid te rapòte karakterizasyon ak analiz fonksyonèl RPH yo. Se poutèt sa, etid sa a evalye aktivite antioksidan ak hyaluronidase aktirozinaz-aktivite inhibitor RPH yo.

2. Rezilta ak Diskisyon

2.1. Konsantrasyon total fenolik (TPC) ak kontni total flavonoid (TFC)

Estanda nan tès TPC a se asid galik nan plizyè konsantrasyon. Higherabsorbance endike yon TPC ki pi wo. TPC echantiyon RPH yo te jwenn lè w mete valè absòbe optik echantiyon RPH yo nan koub kalibrasyon asid galik la. Byplotting konsantrasyon RPH a kont konsantrasyon fenolik la (Figi 1a), yo te jwenn yon mwayèn TPC de 2.06 ± 0.13 mg GAE/g RPHs. Yon TFC nan 25.96 ± 0.52 µg QE/gRPHs te jwenn nan swiv yon pwosedi menm jan an (Figi 1b). Figi 1c gen plis rapò ak TPC ak TFC nan echantiyon RPH yo. Li revele ke relasyon ki genyen ant TPC ak TFC ka eksprime kòm y=0.0121x plis 0.0659, kote x ak y se TPC ak TFC, respektivman.

TPC RPH yo enkli konsantrasyon fenolik asid amine ak konpoze fenolik peptides yo. Pwoteyin-fenolik entèraksyon konpoze jeneralman enplike lyezon scovalent ak noncovalent. Konpoze fenolik yo lage pandan enzymatichydrolysis. Anzim espesifik yo ka pi anmezi pou detwi konplèks pwoteyin-polifenol; sa lakòz yon pi gwo kantite konpoze fenolik ak peptides ak gwoup fenolik, tankou tirozin, yo te lage [22]. Yo te rapòte yon gwo korelasyon ant kontni total polifenol grenn yo ak aktivite byolojik yo. Polifenol yo byen konnen yo gen aktivite antioksidan fò [23]. Malgre ke yo jwenn nan mwens kantite, terpèn [24] oswa tèrpèn [25] nan diri ta ka kontribye tou nan aktivite antioksidan.

2.2. Aktivite nan antioksidan

2.2.1. Aktivite Radical Scavenging Radikal Gratis DPPH

Figi 2 dekri aktivite DPPH lib radikal scavenging nan solisyon RPH la. Pi gwo konsantrasyon solisyon an te dekouvri pou rezilta nan pi wo aktivite. Demi-maksimòm konsantrasyon inhibitory (IC50), ki se konsantrasyon ekstrè pou ki mwatye nan tout radikal gratis DPPH ka scavenged, te 42.58 ± 2.1 mg / mL nan peptides diri.

2.2.2. Aktivite pou netwaye radikal ABTS gratis

Aktivite scavenging ABTS lib radikal RPH yo, ilistre nan Figi 3, te pi wo lè yo te itilize yon pi gwo konsantrasyon ekstrè. IC50 te 2.11 ± 0.88 mg/mL peptides diri. Rezilta sa a te endike ke RPH yo te gen gwo aktivite ABTS radikal gratis. Asid amine ki gen souf, ki gen ladan Met ak Cys, ak asid amine idrofob, tankou Ala, Val, Ile, Leu, Met, Cys, Tyr, Phe, Try, ak Pro, ta ka faktè enpòtan anrapò ak radikal lib ABTS. aktivite dechaj.

Nan etid sa a, valè IC50 ABTS lib radikal scavenging aktivite te pi ba pase DPPH lib radikal scavenging aktivite, dakò ak rezilta Jatropha curcas L. grenn kal ak du [28] ak jujube fwi pitit pitit ak kale kaka [29]. Konklizyon sa a koresponn tou ak rapò sou idroliz pwoteyin bran diri ak 43.98-66.25 µmoL Trolox ekivalan/g echantiyon ak 403.28-430.12 µmoL Trolox ekivalan/g echantiyon pou aktivite DPPH lib radikal ak aktivite ABTS lib radikal, respektivman [27].

Youn nan rezon posib se diferans ki genyen nan solubility ant DPPH radikal gratis (lwil oliv idrosolubl) ak ABTS radikal gratis (lwil oliv / dlo idrosolubl) [30,31]. Potansyèl antioksidan idrolysat pwoteyin bran diri yo te enfliyanse pa pwofil pwa molekilè li yo, konpozisyon asid amine ak idrofobisite [32].

2.2.3. Kapasite Rediksyon

Konklizyon tès kapasite rediksyon pou RPH yo prezante nan Figi 4. Kapasite rediksyon an ogmante ak konsantrasyon RPH yo. Kapasite rediksyon an te 6.95 ± 1.40 mg VCE/g RPH, ki endike ke RPH yo se yon antioksidan efikas.

2.2.4. Kapasite Radikal Absòbsyon Oksijèn (ORAC)

Egzamen ORAC la gen avantaj sou lòt apwòch nan detèminasyon aktivite antioksidan, ki gen ladan reyaktif yo itilize yo se radikal peroxy ak yon mekanis menm jan an reyaksyon ak potansyèl redox nan oksidan fizyolojik; chaj la an jeneral ak protonationstate ak ki laantioksidanreyaji sanble ak moun ki nan kò imen an [33]. Metòd ORAC la tou gen enpòtans byolojik nan efikasite nan antioksidan nan kò imen an.Figi 5 pentire rezilta yo nan analiz ORAC nan RPHs ak estanda Trolox la nan divès konsantrasyon. ORAC a te sòti nan ekwasyon regresion koub kalibrasyon an ki gen rapò ak AUC nèt ak konsantrasyon Trolox la. Rezilta yo te endike ke RPH te gen yon ORAC de 473 µmol TE/g RPHs.

Peptid antioksidan oswa asid amine yo ka jwenn pa idroliz pwoteyin anzimatik, sa ki lakòz trè aktif kont oksidan [34]. Chelation iyon metal la, anpèchman peroksidasyon lipid, ak elimine radikal gratis nan peptides byolojik aktif yo responsab pou aktivite antioksidan yo. Radikal gratis yo ka etenn epi ekspresyon pwoteyin oksidatif-estrès-diminye ak anzim regilasyon pa peptides antioksidan. Efikasite antioksidan nan idroliz pwoteyin ak peptides yo rapòte depann sou sekans asid amine ak gwosè peptide a, ki afekte pa kondisyon idroliz yo, sous pwoteyin, ak kalite proteaz [35]. Dapre Adebiyi et al. [36], pi gwo pwoteyin bran diri dijèstibl yo ka kase an pi piti moso pa subtilisin, sa ki lakòz pi gwo pwodiksyon pwoteyin ak kontni. TPC ak aktivite antioksidan yon idrolysate petèt afekte pa espesifik anzim yo. Se poutèt sa, aktivite antioksidan yon peptide kapab enfliyanse pa karakteristik sous pwoteyin yo, espesifik anzim nan, ak nivo idwoliz [37].

Gen anpil rapò ki itilize proteaz (tankou Alcalase, yon non komèsyal asubtilisin A ki soti nan espès Bacillus) pou idrolize pwoteyin ki sòti nan plant yo pou jwenn antioksidan peptides. Nan sans sa a, pwoteyin soya se youn nan pwoteyin ki pi rapòte [38]. Anplis de sa, yo jwenn idroliz Alcalase nan pwoteyin bran diri tou. Anba kondisyon optimal, Alcalasehydrolysis nan diri glutinous bran te pwodwi idrolyse pwoteyin ak valè IC50 0.87 ± 0.02 mg/mL nan DPPH gratis radikal scavenging [39]. Nan etid nou an, valè IC50 nan RPHs te 42.58 ± 2.1 mg/mL. Malgre ke valè IC50 nan DPPH radikal gratis scavenging nan etid sa a pa t 'tan efikas tankou sa ki soti nan pwoteyin bran diri, ABTS gratis radikal scavenging (IC50=2.11 mg/mL) te pi efikas pase idrolysat pwoteyin soya te jwenn pa Alcalasehydrolysis ( IC50=2.93 mg/mL) [40].

2.3. Aktivite Inhibition Hyaluronidase

Yo jwenn yon anzim pwoteolitik, hyaluronidase, nan dèrm la epi li katalize degradasyon HA nan matris ekstraselilè [41]. Etid sa a te anplwaye asid tannik kòm yon kontwòl pozitif pou rezon konparezon. Figi 6 revele ke asid tannik te gen yon anpèchman aktivite hyaluronidase ki pi wo; IC50 te 0.14 mg/mL, menm jan ak valè Nishida et al. (0.121 mg/mL; 71.1 mM) [42]. Kontrèman, yon IC50 nan 8.91 mg/mL te kalkile pou solisyon an RPH. Rezilta sa a nan solisyon an RPH koresponn ak valè IC50 nou an anvan, 7.61 mg / mL [43]. Pwoteyin, polisakarid, ak konpoze ki soti nan plant ak sentetik se yo ki pami seri a nan konpoze nan ki hyaluronidaseinhibitors yo prezan. Inibitè sa yo ede kenbe balans sentèz-degradasyon HA [44]. Ba konsantrasyon HA nan po a lakòz sechrès ak ondilasyon. Se poutèt sa, anpèchman aktivite hyaluronidase se yon wout nan ki mòfoloji po a ka amelyore ak aje li an reta.

2.4. Tirozinaz-Inhibitory Aktivite

Hydrolysates pwoteyin ki soti nan sous natirèl gen potansyèl pou anpecheaktivite tirozinaz. Anjeneral, tès anpèchman tirozinaz in-vitro yo itilize pou evalye kijan ajan blanchiman po afekte dirèkteman aktivite tirozinaz [45]. Lè yo patisipe nan etap limitasyon pousantaj melaninsentèz la, tirosinaz katalize L-tirosin idroksilation nan L-DOPA ak Lè sa a, oksidasyon lèt la nan o-dopaquinone. Lè li se dezirab yo anpeche byosentèz la nan melanin, anpèchman nan aktivite L-tirozinaz ka kritik. Isit la,tirozinazte itilize pou evalye aktivite antitirozinaz RPH. Jan sa montre nan Figi 7, konsantrasyon107.6 mg/mL reyalize 50 pousan anpèchman aktivite tirozinaz. Ascorbic asid ekspoze hightyrosinase-inhibitory aktivite (IC50=0.098 mg/mL), ki te sanble ak 0.102 mg/mL ki Seo et al. rapòte [46].

Diri bran pwoteyin hydrolysates ekspoze siyifikativman wotirozinaz-aktivite inhibition [47,48]. Aktivite tirozinaz-inhibition nan solisyon RPH a ka soti nan pwofil asid amine nan peptides. Schurink et al. dekri sa efikastirozinaz-inhibitorypeptides konpoze de résidus arjinin ak fenilalanin [49]. Tirozinaz-enibisyon aktivite ka amelyore pa rezidi asid amine idrofob (egzanp, alanin), ak pwodiksyon an ofmelanin ka deranje pa alanine [50]. Anplis de sa, Zhang et al. te rapòte tou ke idrolysat pwoteyin diri ta ka diminye kontni melanin ak aktivite tirozinaz nan modèl selil UVB-inducedcell [51].

cistanche kulturism

2.5. Pwofil asid amine ak MW nan RPHs

Kontni pwoteyin diri a apre yo fin retire lanmidon nan etid la prezan te 23.56 pousan byweight, ak degre nan idroliz nan echantiyon an idrolize pa proteaz te 9.36 pousan .Tablo 1 detay konpozisyon sa a nan asid amine nan RPH yo. Nan echantiyon an, chak 100 g te genyen 5.18 g asid amine. Konsènan eleman asid amine yo, RPH yo te richin alanine, leucine, arjinin, asid glutamik, ak asid aspartik. Chak 100 g echantiyon an genyen 1.73 g asid amine idrofob (alanin, valin, lesin, izoleucin, prolin, fenilalanin, ak sistein) an total. Rezilta sa a te konplètman diferan de rapò anvan nou an [43] nan solisyon an amilaz ak tanperati tretman li yo retire lanmidon. Kontni asid amine idrofob yo te 1.90 fwa pi wo pase rapò anvan nou an. Tanperati tretman ki pi ba (60 ◦C) nan etid sa a ka anpeche denaturasyon pwoteyin nan gwo kantite, pou aktivite asid amine yo ka pi byen konsève. Anplis de sa, yon konklizyon menm jan an jwenn tou nan lòt amilaz chanpiyon ak glukoamilaz tosaccharify lanmidon nan bran diri blan [52].

Rechèch te jwenn asid amine idrofob yo sanbleantioksidanpa ogmante solubilite ki baze sou lipid nan idroliz pwoteyin ak peptides ki soti nan divès sous pwoteyin, kidonk ankouraje entèraksyon an ak radikal gratis [38,53]. Gen kèk asid amine yo te rapòte pa Chen et al. [54] jeneralman dweantioksidan; asid yo mansyone enkli triptofan, sistein, methionine, tirozin, ak histidine. Nan etid la prezan, asid amine aromat (fenilalanin, tirozin, ak triptofan) te gen ladan 0.53 g/100 g RPH. Se poutèt sa, asid amine peptide-orijin sa yo te pwobableman responsab pou aktivite antioksidan RPH yo.

Anplis de sa, pwoteyin ki idrolize nan pi kout peptides gen yon MWdistribution diferan, ak kèk gwoup idrofob ki plwaye nan enteryè a nan molekil konplè natirèlprotein yo anjeneral ekspoze a faz akeuz la. Sa a gen rapò ak molekil pwoteyin yo te ranje estriktirèl ak Se poutèt sa ak pwopriyete fonksyonèl pwoteyin nan [55,56]. Done tricine-SDS-PAGE yo endike ke MW nan RPH yo te nan ranje 5-35 kDa (Figi 8a).

Figi 8b dekri kontni relatif divès MW nan RPH. An jeneral, 45.24 pousan nan tout pwoteyin yo te nan gwoup prensipal la (MW ≈ 2.4 kDa). Yo te jwenn rezilta menm jan an konsènan peptide idrolizat pwoteyin bran diri yo. Aktivite antioksidan ki pi wo a te jwenn pa Thamnarathip et al. [37] se pou peptides MW=6–50 kDa. Anplis de sa, gen yon relasyon ant fonksyon idrolizat pwoteyin yo ak distribisyon MW ak konpozisyon asid amine [57]. Sa a eksplike aktivite antioksidan RPH yo obsève nan etid prezan an.

2.6. Tès Toksisite Selil

Ba toksisite selil obligatwa pou aplikasyon nan lavni. Pou evalye sitotoksisite ak biocompatibility RPH yo, yo te mezire viabilite selil kri 264.7 selil nan solisyon RPH atravè metòd MTT. Jan yo montre nan Figi 9, viabilite selil la te pi wo pase 100 pousan lè yo te trete ak 25-2000 µg/mL RPH pou 24 èdtan ak 48 èdtan. Rezilta yo endike konsiderableman lowcytotoxicity RPH yo. Se poutèt sa, RPH yo ka potansyèlman itilize kòm aplikasyon kosmetik ak sitotoksisite ki ba anpil.

3. Materyèl ak Metòd

3.1. Reyaktif

Klori fè (III), 2,20-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic acid) (ABTS), Trolox(6-idwoksi{-2,5 ,7,8-tetramethylchroman-2-asid karboksilik), l-3,4-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA), 1,1-diphenyl-2- Picrylhydrazyl (DPPH), ak asid trichloroacetic te jwenn nan Alfa Aesar (Tewksbury, MA, USA). 2, 20-azobis ({2-methylpropionamidine) dihydrochloride (AAPH), reyaktif fenol Folin-Ciocalteu, asid galik, asid ascorbic, djondjon.tirozinaz, ak fluorescein sodyòm yo te akeri nan Sigma-Aldrich (St Louis, MO, USA). Yo te jwenn kabonat sodyòm nan Riedel-de Haën (Seelze, Almay). Finalman, ferricyanide potasyòm, fosfat idwojèn sodyòm, ak fosfat diidwojèn sodyòm yo te jwenn nan Showa Chemical (Tokyo, Japon).

3.2. Preparasyon RPH yo

RPH yo te prepare jan sa dekri deja, eksepte ke yo te adopte amilaz chanpiyon pou sakcharifye lanmidon nan farin diri, evite domaj nan asid amine ki te koze pa idroliz bakterialamylaz nan tanperati ki wo [43,58]. Yo te tranpe 100 gram farin diri nan 1000 mL dlo distile ki gen 0.5 pousan amilaz chanpiyon (Genencor, NY, USA); answit yo te chofe melanj lan pou 24 èdtan jiska 60 ◦C ( pH 4.2), apre sa li te pèmèt yo refwadi nan tanperati chanm. Santrifugasyon te fèt pou 10 minit nan 1968 × g pou retire surnatant ki rete a. Apre 20-pliye dlo ak 2 mL 0.1 pousan hydrolyticprotease (Healthmate, Changhua, Taiwan) te ajoute nan pòsyon ki pa ka fonn nan, solisyon an te souke epi enkube pou 4 èdtan nan 55 ◦C. Metòd pH-stat la te anplwaye pou kenbe pH solisyon an nan nivo optimal, epi yo te fè chofaj 85 ◦C pou 10 min inactivation anzim. Fraksyon ki pa ka fonn ki rete a te retire nan santrifujasyon pou 15 min nan 3075 × g. Yo te fè lyofilizasyon sou supernatant la, ki te estoke nan -20 ◦C anvan ou itilize.

3.3. Aktivite antioksidan nan RPH yo

3.3.1. Konsantrasyon fenolik total (TPC)

Yo te itilize metòd Folin-Ciocalteu pou dekouvri TPC RPH yo [59].Premyèman, yo te melanje 200 µL reyaktif fenol Folin-Ciocalteu a (0.3M) yon fason ki inifòm nan 5-min souke ak 200. µL solisyon RPH, ak melanj sa a, yo te ajoute 400 µL dlo deyonize (DI) ak 200 µL solisyon 10 pousan (w/v) carbonate sodyòm. Solisyon melanje a te sibi 60 minit nan enkubasyon nan fènwa nan tanperati chanm. Lè sa a, li te santrifuje pou 15 minit nan 3000 rpm. Mezi a te itilize 100 µL supernatant. Pou detèmine TPC (inite: mg) ekivalan asid galik (GAE) pou chak gram sèk RPHsample (inite: mg GAE/g RPHs), done absòbe optik yo te antre nan yon koub estanda ki reprezante asid galik. Absorbans la te jwenn nan 700 nm lè l sèvi avèk EpochMicroplate Spectrophotometer (BioTek, VT, USA).

3.3.2. Kontni Flavonoid Total (TFC)

TFC te jwenn apre apwòch Wathoni et al. ak ti modifikasyon [60]. Premyèman, yo te melanje 500 µL chak nan echantiyon an ak 2 pousan (w/v) solisyon klori aliminyòm. Solisyon reyaksyon an te melanje byen epi kite pou 10 min, epi yo te evalye absorpsyon nan 415 nm. Yo rapòte rezilta a an mikrogram ekivalan quercetin (QE) pou chak gram echantiyon RPH sèk la (µg QE/g RPH).

cistanche kulturism

3.3.3. DPPH Aktivite gratis Radikal Scavenging

Premyèman, 198 µM DPPH etanòl solisyon (50 µL) ak solisyon RPH a oswa dlo DI (0.5 µL; echantiyon an ak kontwòl, respektivman) yo te melanje ak Lè sa a, kite yo kanpe pou 30 min inerkness nan tanperati chanm. Apre sa, absòbe solisyon an nan 517 nm te jwenn. Relatif aktivite scavenging te kalkile pa detèmine absorptiondifference ant echantiyon an ak kontwòl. Segondè DPPH radikal gratis aktivite scavenging te reflete pa absorpsyon ki ba optik. Nan evalyasyon aktivite scavenging DPPH nan solisyon RPH a, estanda a te anplwaye se vitamin C [61-63].

3.3.4. Aktivite pou netwaye radikal ABTS gratis

Apwòch la rapòte pa Wu et al. te anplwaye pou evalye aktivite antioksidan solisyon RPH la [64]. Premyèman, yo te reyaji 7 mM solisyon stock ABTS (250 µL) ak 2.45 mM persulfat potasyòm (250 µL) pou bay kasyon radikal lib ABTS (ABTS• plus), ak melanj lan te kenbe. pou 16 h nan 4 ◦C nan fènwa anvan li te anplwaye. Apre ekilib nan fènwa nan tanperati chanm nan, 0.1 M fosfat-tampon saline (PBS; pH 7.4) te itilize pou delye solisyon an nan 0.70 ± 0.02 absorption nan 734 nm. Lè sa a, nan 180 µL solisyon ABTS dilye, yo te ajoute 20 µL Trolox (kontwòl pozitif) oswa solisyon RPH (echantiyon). Lè sa a, melanj lan te sibi 10 min nan enkubasyon nan tanperati chanm. Etid sa a detèmine absorpsyon optik nan 734 nm; pi ba absorption koresponn tohigher ABTS lib radikal aktivite scavenging. Estanda ki te itilize pou evalye aktivite RPHsolution ABTS lib radikal scavenging se te Trolox antioksidan.

3.3.5. Kapasite Rediksyon

Te fè tès pouvwa antioksidan ki diminye ferrik la te anplwaye pou detèmine aktivite antioksidan total RPHsolution a. Kòm rapòte pa Lin et al. [29], solisyon RPH a (200 µL) te melanje inifòm ak 1 pousan (w/v) K3Fe(CN)6 ak 0.2 M PBS tanpon (pH 6.6; 100 µL chak) .Pou 20 min, yo te itilize yon beny dlo 50 ◦C pou chofe melanj lan; apre yo fin retire melanj lan nan beny lan, li te byen vit refwadi pou 3 min. Apre sa, yo te fè yon adisyon 10 pousan (w/v) asid trichloroacetic (100 µL) ak 10-min santrifugasyon nan 3000 rpm. Sa a te swiv pa ekstraksyon supernatant la (400 µL) ak inifòm melanje ak 0. 1 pousan (w/v) FeCl3 (100 µL) ak dlo DI (400 µL). Fe4[Fe(CN)6]3 te jwenn nan 10-min reyaksyon melanj sa a nan fènwa. Imedyatman, yon pi wo absòbe optik (mezire nan 700 nm) endike pi wo kapasite rediksyon. Vitamin C estanda a te itilize pou detèmine kontni ekivalan vitamin C (VCE) pou chak gram RPH.

3.3.6. Kapasite Radikal Absòbsyon Oksijèn (ORAC)

Etid sa a te jwenn ORAC lè li modifye yon metòd ki te deja rapòte [65]. Apre disolisyon echantiyon RPH la nan dlo distile, yo te melanje solisyon RPH a (50 µL) ak fluorescein (10 µM) nan yon 96-plak microtiter byen. Solisyon an te sibi 15-min enkubasyon nan 37 ◦C ki te swiv pa adisyon 50 µL AAPH (500 mM). Chak 5 min ak plis pase yon total de 120 min, yo te anrejistre fliyoresans lan (λex ak λem=485 ak 528 nm, respektivman). Kapasite antioksidan RPH yo te dekouvri nan sinetik pouri fliyoresan yo lè yo kalkile zòn ki anba koub la (AUC). ). Nan kalkile RPH ORAC, estanda a te 15-250 µM Trolox. Yo rapòte ORAC la kòm mikromol ekivalan Trolox (TE) pergram echantiyon RPH sèk (µmol TE/g RPH).

3.4. Aktivite Inhibition Hyaluronidase

Yo te fè tès anpèchman hyaluronidaz la lè l sèvi avèk yon {{0}}mikwoplak byen ak yon metòd ki te rapòte deja ak yon ti modifikasyon [40]. N-acetylglucosamine te pibliye pa reyaji hyaluronidase ak substra HA a. Nan prezans nenpòt inibitè, lage N-acetylglucosamine la te redwi, ak liberasyon sa a detekte pa jwenn absorpsyon nan 600-nm. HA te presipite ak solisyon albumin asid ki konpoze de 0.1 M tanpon acetate (pH 3.9) ak albumin serom bovin (1 mg / mL). Solisyon echantiyon an ak 5 mg/mL hyaluronidase te sibi 20-min enkubasyon nan 37 ◦C. Nan melanj enkubasyon an, yo te ajoute HA (1{{20}}0 µL; 5.0 mg/mL nan 0.1 M tanpon acetate). Yo te fè plis enkubasyon nan 37 ◦C pou 40 min. Yo te ajoute 0.1 mL 0.4 M solisyon alkalin borat pou sispann reyaksyon anzimatik la.

3.5. Tirozinaz-Inhibitory Aktivite

Etid la te evalye aktivite antityrosinase RPH yo lè l sèvi avèk yon pwotokòl deja rapòte ak modifikasyon [66]. Yon solisyon anzim (135 U/mL) te prepare pa fonn tirozinaz nan 20 mM tanpon fosfat (pH 6.8). Anplis de sa, DIwater te anplwaye pou preparasyon solisyon 1.25 mM L-DOPA. Lè sa a, 40 µL nan divès konsantrasyon nan solisyon echantiyon RPH yo te melanje ak 40 µL nan solisyon tirozinaz ak 120 µL nan solisyon L-DOPA. Pou 30 min, melanj sa a te kenbe nan 37 ◦C nan tès la nan anpèchman RPHs nan.tirozinazaktivite. Yo te itilize yon espektrofotomètr (FLUOstar Omega MicroplateReader, BMG Labtech GmbH, Almay) pou jwenn 475-nm absorbans. Yo te fè tout mezi twa fwa. Absòbsyon gwoup korespondan a lètirozinazpa te prezan te soustraksyon. To anpèchman anzim yo te detèmine kòm

3.6. Karakterizasyon RPH yo

3.6.1. Pwofil asid amine

Etid sa a te dekouvri konpozisyon asid amine RPH yo. Premyèman, pou 24 èdtan ak nan 115 ◦C, yo te itilize 4 M asid metansulfonik pou idrolize echantiyon yo nan tib evakye sele. De Waters 510 sistèm livrezon sòlvan ak yon analizè asid amine (L 8900; Hitachi, Tokyo, Japon) yo te anplwaye pou separasyon asid amine derivatize sou kolòn aSpherisorb ODS2 ki mezire 25 m. × 64.6 mm. Etid sa a te anplwaye solvants sa yo: (a) sodyòm acetate (0.14 M) ak triethylamine (850 µL/L; pH 5.6) ak (b) 60 pousan acetonitrile, pou ki gradyan an te 0 pousan pou 2 min; 0–42 pousan pou 15.5 min (kob konvèks); ak 100 pousan pou 4 min. Yo te pran echantiyon kopi pou mezi asid amine nan 254 nm [67,68].

3.6.2. Pwa molekilè (MW) nan pwoteyin

An akò ak metòd Schägger a [69] ak nan kondisyon rediksyon, etid sa a te jwenn distribisyon an MW atravè tricine-sodyòm dodecyl sulfat (SDS)-polyacrylamidegel elektwoforèz (PAGE) ak modifikasyon ti tay. Yon echantiyon tanpon (30 g/L SDS, 0.375 MTris-HCl, 0.125 g/L Coomassie Brilliant Blue G-250, ak 75 g/ L glycerol; pH 7) yo te itilize pou dispèse echantiyon an friz-seche, ak santrifujasyon Lè sa a, fè anvan chajman. Yo te ajoute yon total de 20 µL 2-mercaptoethanol nan 1 mL echantiyon tricine-SDS-PAGE. Yo te chofe echantiyon an nan 100 ◦C pou 90 s. Yo te chaje yon echantiyon byen ak chak echantiyon ak Pwoteyin ki pa tache Standard Broad Range (Bio-Rad Laboratories, Almay) lè l sèvi avèk yon mikrosering. Lè sa a, elektwoforèz te fèt-premye nan yon konstan 30 mV jiskaske tout echantiyon an te genyen nan jèl la anpile epi apre sa jiskaske fini nan yon konstan 100 mV. Apre sa, 0.02 pousan solisyon Coomassie Brilliant Blue R-250 te aplike pou tach jèl. Absoli background detaining nan jèl yo te fè pa souke jèl yo nan 10 pousan asid acetic lannwit lan. Finalman, yo te analize imaj jèl la pou idantifye bann pwoteyin nan liy yo; analiz sa a te fèt nan ImageJ (USNational Institutes of Health, Bethesda, MD, USA). Yo te itilize makè estanda pou jwenn yon koub kalibrasyon ki te estime MW la. Yon ti tan, premye etap la sete detèmine longè migrasyon chak gwoup (Rf) soti nan tèt jèl separasyon an. Dezyèm etap la se te kalkil koub kalibrasyon an lè w itilize Rf ak log (MW) pou yon makè estanda ak yon MW bay. Detèminasyon MW te fèt lè l sèvi avèk bann Rf nan pwoteyin nan RPH yo.

3.7. Esè sitotoksisite

Selil kri 264.7 yo te kiltive nan gwo glikoz Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) ki gen 10 pousan serom fetal bovine (FBS), 4.5 g/L Glikoz, 1 pousan solisyon antibyotik (100 inite/). mL penisilin ak 100 µg/mL Streptomycin), 4 mM L-Glutamin ak 1.5 g/Lsodium bikabonat nan 37 ◦C ak 5 pousan CO2. Toksisite selil anvan tout koreksyon selil 264.7 pou RPHs te mezire pa yon 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5 diphenyl-tetrazolium bromur (MTT)proliferasyon metòd tès . Apeprè 1 × 104 selil pou chak pi yo te plake nan 96-plak byen. Apre 24 èdtan, yo te ajoute divès kalite konsantrasyon RPHs (0-2000 µg/mL) nan selil yo. Apre 24 ak 48 èdtan nan enkubasyon, yo te ajoute 100 µL nan solisyon MTT (0.5 mg / mL). Ble formazancrystals te obsève lè tcheke anba yon mikwoskòp. Yo te retire DMEM epi yo te ajoute 100 µL dimethyl sulfoxide (DMSO) pou chak pwi. Absorbans la te mezire ak yon lektè plak mikrotiter. Lè sa a, yo te kalkile viabilite selil (pousan) kòm [A570 (selil trete) - A570 (background)] / [A570 (selil ki pa trete) - A570 (background)] × 100 pousan [70].

3.8. Analiz estatistik

Rapò a pou chak echantiyon idrolysat te valè an mwayèn nan twa eksperyans endepandan repete ak detèminasyon. Rezilta ki eksprime an mwayèn ± devyasyon estanda (SD) yo te analize pa yon sèl-fason ANOVA ak tès post hoc Duncan a lè l sèvi avèk StatisticalAnalysis System (vèsyon 20.0; SPSS, Armonk, NY, USA). Valè p <0.05 yo="" te="" konsidere="" kòm="" siyifikasyon="">

4. Konklizyon

Etid sa a te egzamine fonksyon RPH yo. Rezilta eksperimantal yo te revele ke RPH yo te genyen konpoze fenolik ak flavonoid epi yo te montre yon seri de aktivite antioksidan, tankou aktivite DPPH ak ABTS, kapasite rediksyon, ak ORAC. Anplis de sa, RPH yo efektivman anpechetirozinazak aktivite hyaluronidase. Proteaz la se te yon faktè kritik ki afekte modèl MW nan RPH yo. Analiz RPH yo montre potansyèl yo pou itilize kòm yon engredyan nan pwodui kosmetik.

cistanche kulturism

Referans

1. Ichihashi, M.; Ando, ​​H.; Yoshida, M.; Niki, Y.; Matsui, M. Photoaging nan po a. Anti-Aging Med. 2009, 6, 46–59. [CrossRef]

2. Kim, J.-S.; Kim, D.; Kim, H.-J.; Jang, A. Pwoteksyon efè bourik kache jelatin hydrolysates sou UVB-induit photoaging ofhuman fibroblasts po. Pwosesis. Byochim. 2018, 67, 118–126. [CrossRef]

3. Carocho, M.; Ferreira, IC Yon revizyon sou antioksidan, prooksidan ak konfli ki gen rapò: konpoze natirèl ak sentetik, metodoloji tès depistaj ak analiz ak pèspektiv nan lavni. Manje Chem. Toksik. 2013, 51, 15–25. [CrossRef]

4. Guo, X.; Zhang, J.; Ma, Y.; Tian, ​​S. Optimizasyon nan idroliz limite nan pwoteyin nan rezidi diri ak karakterizasyon nan pwopriyete thefunctional nan pwodwi yo. J. Food Proc. Prezève. 2013, 37, 245–253. [CrossRef]

5. Park, H.-Y.; Lee, K.-W.; Choi, H.-D. Konstitiyan Bran diri: Aktivite imunomodulateur ak terapetik. Fonksyon Manje. 2017, 8,935–943. [CrossRef] [PubMed]

6. Zhou, K.; Canning, C.; Solèy, S. Efè hydrolysates pwoteyin diri prepare pa proteaz mikwòb ak ultrafiltrasyon sou freeradicals ak oksidasyon lipid vyann. LWT 2013, 50, 331–335. [CrossRef]

7. Piu', LD; Tassoni, A.; Serrazanetti, DI; Ferri, M.; Babini, E.; Tagliazucchi, D.; Gianotti, A. Eksplwatasyon nan endistri lanmidon likidby-product yo pwodwi peptides byoaktif soti nan diri idrolize pwoteyin. Manje Chem. 2014, 155, 199–206. [CrossRef]

8. Ferri, M.; Graen-Heedfeld, J.; Bretz, K.; Guillon, F.; Michelini, E.; Calabretta, MM; Lamborghini, M.; Gruarin, N.; Roda, A.;Kraft, A.; et al. Fraksyon peptide yo jwenn nan sous-pwodwi diri pa mwayen yon Pwosesis ki zanmitay anviwònman an montre nan byoaktivite ki gen rapò ak VitroHealth. PLOS ONE 2017, 12, e0170954. [CrossRef]

9. Wen, C.; Zhang, J.; Zhang, H.; Duan, Y.; Ma, H. Plant pwoteyin ki sòti antioksidan peptides: Izolasyon, idantifikasyon, mekanis aksyon ak aplikasyon nan sistèm manje: Yon revizyon. Tandans Manje Sci. Teknoloji. 2020, 105, 308–322. [CrossRef]

10. Phelan, M.; Aherne, A.; FitzGerald, RJ; O'Brien, NM Peptid byoaktif ki sòti nan kazein: Efè byolojik, itilizasyon endistriyèl, aspè sekirite ak sitiyasyon regilasyon. Ent. Dairy J. 2009, 19, 643–654. [CrossRef]

11. Udenigwe, CC; Aluko, RE Peptides bioaktif ki sòti nan pwoteyin manje: Pwodiksyon, pwosesis, ak benefis sante potansyèl yo. J.Food Sci. 2012, 77, 11–24. [CrossRef] [PubMed]

12. Fardet, A.; Rock, E. In vitro ak in vivo potansyèl antioksidan nan lèt, yogout, lèt fèrmante ak fwomaj: Yon revizyon naratif prèv. Noutr. Res. Rev. 2018, 31, 52–70. [CrossRef]

13. Leach, JB; Kathryn, AB; Charles, WPJ; Christine, ES Photocrosslinked hydrogel asid hyaluronik: Natirèl, biodegradabletissue echafodaj jeni. Biotechnol. Bioeng. 2003, 82, 578–589. [CrossRef]

14. Jegasothy, SM; Zabolotniaia, V.; Bielfeldt, S. Efikasite nan yon nouvo asid nano-yaluronik aktualite nan imen. J. Clin. Aesthet.Dermatol. 2014, 7, 27–29.

15. Ndlovu, G.; Fouche, G.; Tselanyane, M.; Cordier, W.; Steenkamp, ​​V. In vitro detèminasyon nan potansyèl la anti-aje nan foursouthern plant medsin Afriken yo. BMC Konpleman. altènatif. Med. 2013, 13, 304. [CrossRef]

16. Jiratchayamaethasakul, C.; Ding, Y.; Hwang, O.; Mwen, S.-T.; Jang, Y.; Myung, S.-W.; Lee, JM; Kim, H.-S.; Ko, S.-C.; Lee, S.-H.In vitro tès depistaj elastase, kolagenaz, hyaluronidase, ak tyrosinase inhibition ak aktivite antioksidan nan 22 ekstrè halophyteplant pou cosmeceuticals roman. Pwason. Aquat. Sci. 2020, 23, 1–9. [CrossRef]

17. Kang, M.; Park, S.-H.; Oh, SW; Lee, SE; Yoo, JA; Non, YH; Lee, S.; Han, BS; Cho, JY; Lee, J. Efè anti-melanogenic ofresorcinol medyatè pa repwesyon nan siyal cAMP ak aktivasyon nan siyal p38 MAPK. Biosci. Biotechnol. Biochem.2018, 82, 1188–1196. [CrossRef]

18. Chatatikun, M.; Yamauchi, T.; Yamasaki, K.; Aiba, S.; Chiabchalard, A. Antimelanogenic efè Croton roxburghii ak Crotonsublyratus fèy nan -MSH stimulé B16F10 cellules. J. Tradit. Konpleman. Med. 2019, 9, 66–72. [CrossRef] [PubMed]

19. Rizzello, CG; Nionelli, L.; Coda, R.; Gobbetti, M. Sentèz Lunasin Peptid Prevansyon Kansè pa Bakteri Asid Laktik Pandan Fermentasyon Sourdough. Noutr. Kansè 2012, 64, 111–120. [CrossRef] [PubMed]

20. Rizzello, CG; Tagliazucchi, D.; Babini, E.; Rutella, GS; Saa, DLT; Gianotti, A. Peptides bioaktif ki soti nan matris manje legim: tandans rechèch ak nouvo bioteknoloji pou sentèz ak rekiperasyon. J. Fonksyon. Foods 2016, 27, 549–569. [CrossRef]

21. Coscueta, ER; Campos, DA; Osório, H.; Nerli, BB; Pintado, M. Enzymatic soya protein hydrolysis: A tool for biofonctional foodingredient production. Manje Chem. X 2019, 1, 100006. [CrossRef]

22. Aydemir, LY; Yemenicioglu, A. Èske Antioksidan Fenolik ki gen Pwoteyin nan Puls yo pa wè yon pati nan Iceberg? J. Plant. Biochem.Physiol. 2013, 1, 1–3. [CrossRef]

23. Huang, SH; Ng, LT Quantification nan kontni polifenolik ak konstitiyan byoaktif nan kèk varyete diri komèsyal nan Taiwan. J. Konpozisyon Manje. Anal. 2012, 26, 122–127. [CrossRef]

24. Yoshitomi, K.; Taniguchi, S.; Tanaka, K.; Uji, Y.; Akimitsu, K.; Gomi, K. Rice terpene synthase 24 (OsTPS24) kode yon jasmonate ki reponn monoterpene synthase ki pwodui yon anti-bakteri -terpinene kont patojèn diri. J. Plant. Fizyol. 2016, 191,120–126. [CrossRef]

25. Kamolsukyeunyong, W.; Sukhaket, W.; Pitija, K.; Thorngkham, P.; Mahatheeranont, S.; Toojinda, T.; Vanavichit, A. RiceSesquiterpene jwe wòl enpòtan nan antixenoz kont Brown Planthopper nan diri. Plants 2021, 10, 1049. [CrossRef][PubMed]

26. Liu, Y.; Wang, Z.; Li, H.; Liang, M.; Yang, L. In vitro aktivite antioksidan nan pwoteyin diri ki afekte nan dijesyon alkalin degre andgastrointestinal proteaz. J. Sci. Manje Agrik. 2016, 96, 4940–4950. [CrossRef] [PubMed]

27. Phongthai, S.; D'Amico, S.; Schoenlechner, R.; Homthawornchoo, W.; Rawdkuen, S. Fractionnement ak antioxydant propriétés de diri bran protéines hydrolysates stimulé pa in vitro dijesyon gastwoentestinal. Manje Chem. 2018, 240, 156–164. [CrossRef][PubMed]

28. Huang, S.-L.; Wang, W.-H.; Zhong, X.-Y.; Lin, C.-T.; Lin, W.-S.; Chang, M.-Y.; Lin, Y.-S. Pwopriyete antioksidan nan Jatropha curcas L.Grenn Shell ak ekstrè Kernel. Appl. Sci. 2020, 10, 3279. [CrossRef]

29. Lin, Y.-S.; Lin, W.-S.; Tung, J.-W.; Cheng, Y.-C.; Chang, M.-Y.; Chen, C.-Y.; Huang, S.-L. Kapasite antioksidan nan Jujube FruitSeeds ak Peel Pulp. Appl. Sci. 2020, 10, 6007. [CrossRef]

30. Shahi, Z.; Sayyed-Alangi, SZ; Najafian, L. Efè kalite anzim ak tan pwosesis sou degre idroliz, elektwoforèz bandsand pwopriyete antioksidan nan idrolize pwoteyin ki sòti nan degrass Bunium persicum Bioss. peze gato. Heliyon 2020, 6,e03365. [CrossRef] [PubMed]

31. Xie, H.; Huang, J.; Woo, mw; Hu, J.; Xiong, H.; Zhao, Q. Efè dezaktivasyon frèt ak cho anzim sou pwopriyete estriktirèl andfunctional idrolysat pwoteyin dreg diri. Manje Chem. 2021, 345, 128784. [CrossRef]

32. Rani, S.; Pooja, K.; Pal, GK Eksplorasyon idrolizat pwoteyin diri ak peptides ak referans espesyal nan potansyèl antioksidan: Apwòch konputasyonèl ki sòti pou detèminasyon biyo-aktivite. Tandans Manje Sci. Teknoloji. 2018, 80, 61–70. [CrossRef]

33. Bisby, RH; Brooke, R.; Navaratnam, S. Efè potansyèl oksidasyon antioksidan nan tès kapasite absòpsyon radikal oksijèn (ORAC). Manje Chem. 2008, 108, 1002–1007. [CrossRef]

34. Eli, RJ; Kellerby, SS; Decker, E. Aktivite antioksidan nan pwoteyin ak peptides. Kritik. Rev Manje Sci. Noutr. 2008, 48, 430–441.[CrossRef] [PubMed]

35. Min, Y.; Li-Chan, E.; Jiang, B. (Eds.) Pwoteyin byoaktif ak Peptid kòm Manje Fonksyonèl ak Nutraceuticals; Wiley-Blackwell: Hoboken, NJ, USA, 2010; paj 29–42.

36. Adebiyi, AP; Adebiyi, AO; Yamashita, J.; Ogawa, T.; Muramoto, K. Pirifikasyon ak karakterizasyon peptides antioksidan ki sòti nan idroliz pwoteyin bran diri. Lajan ewo. Manje Res. Teknoloji. 2008, 228, 553–563. [CrossRef]

37. Thamnarathip, P.; Jangchud, K.; Nitisinprasert, S.; Vardhanabhuti, B. Idantifikasyon pwa molekilè peptide soti nan diri branprotein hydrolysate ak aktivite antioksidan segondè. J. Sereyal Sci. 2016, 69, 329–335. [CrossRef]

38. Tacias-Pascacio, VG; Morellon-Sterling, R.; Siar, E.-H.; Tavano, O.; Berenguer-Murcia, Á.; Fernandez-Lafuente, R. Sèvi ak Alcalasein pwodiksyon an nan peptides byoaktif: Yon revizyon. Ent. J. Biol. Macromol. 2020, 165, 2143–2196. [CrossRef] [PubMed]

39. Sarringkarin, W.; Laokuldilok, T. Optimizasyon kondisyon pwodiksyon glutinous diri bran pwoteyin idrolyse ak pwopriyete antioksidatif. CMU J. Nat. Sci. 2017, 16, 1–18. [CrossRef]

40. Zhang, Q.; Tong, X.; Qi, B.; Wang, Z.; Li, Y.; Sui, X.; Jiang, L. Chanjman nan aktivite antioksidan nan Alcalase-hydrolyzed soybeanhydrolysate anba simulation dijesyon gastwoentestinal ak transpò transepitelial. J. Fonksyon. Manje 2018, 42, 298–305. [CrossRef]

41. Tu, PTB; Tawata, S. Anti-oksidan, Anti-aje, ak Anti-Melanogenic Pwopriyete nan lwil esansyèl yo soti nan de varyete nan Alpinia zerumbet. Molekil 2015, 20, 16723–16740. [CrossRef]

42. Nishida, Y.; Sugahara, S.; Wada, K.; Toyohisa, D.; Tanaka, T.; Ono, M.; Yasuda, S. Efè inhibition nan ekstrè acetate etil soti nan anpoul Scilla scilloides sou aktivite lipoksigenase ak hyaluronidase. Pharm. Biol. 2014, 52, 1351–1357. [CrossRef]

43. Chen, H.-J.; Dai, F.-J.; Fan, S.-L.; Huang, Y.-C.; Chau, C.-F.; Lin, Y.-S.; Chen, C.-S. Sinetik nan Hyaluronidase Anpèchman pa Rice(Oryza sativa L.) Pwoteyin Hydrolysate. Appl. Sci. 2020, 10, 9087. [CrossRef]

44. Girish, K.; Kemparaju, K. Hyaluronan lakòl majik la ak hyaluronidase gonm li yo: Yon BECA byolojik. Lavi Sci. 2007, 80,1921–1943. [CrossRef] [PubMed]

45. Zolghadri, S.; Bahrami, A.; Khan, MTH; Munoz-Munoz, J.; Garcia-Molina, F.; Garcia-Canovas, F.; Saboury, AA Yon revizyon konplè sou inibitè tirozinaz. J. Anzim. Inhib. Med. Chem. 2019, 34, 279–309. [CrossRef] [PubMed]

46. ​​Seo, EJ; Hong, ES; Choi, MH; Kim, KS; Lee, SJ Antioksidan ak efè blanchiman nan Rhamnus yoshinoi ekstrè. Koreyen J. Manje Sci. Teknoloji. 2010, 42, 750–754.

47. Ochiai, A.; Tanaka, S.; Tanaka, T.; Taniguchi, M. Rice Bran Pwoteyin kòm yon Sous Pisan nan Peptid Antimelanogenic ak Aktivite Tyrosinase Inhibitory. J. Nat. Prod. 2016, 79, 2545–2551. [CrossRef] [PubMed]

48. Kubglomsong, S.; Theerakulkait, C.; Reed, RL; Yang, L.; Maier, CS; Stevens, JF Izolasyon ak Idantifikasyon nan Tyrosinase Inhibitory ak Copper-Chelating Peptides soti nan idrolize Rice-Bran-Derived Albumin. J. Agric. Manje Chem. 2018, 66, 8346–8354.[CrossRef]

49. Schurink, M.; van Berkel, WJ; Wichers, H.; Boeriu, CG Novel peptides ak aktivite inhibition tirozinaz. Peptides 2007, 28,485–495. [CrossRef]

50. Ishikawa, M.; Kawase, mwen .; Ishii, F. Konbinezon asid amine diminye pigmantasyon nan selil B16F0 Melanoma. Biol. Pharm.Bull. 2007, 30, 677–681. [CrossRef] [PubMed]

51. Zhang, R.; Wei, Y.; Li, M.; Cai, M.; Gu, R.; Ma, Y.; Chen, L.; Wang, J. Melanogenesis efè hydrolyzate pwoteyin diri ak itscharacteristic peptides Leu-Leu-Lys, Leu-Pro-Lys, ak pyroGlu-Lys sou UVB-induit selil epidèm melanosit imen. FoodFunct. 2020, 11, 8757–8767. [CrossRef]

52. Wang, Y.; Cai, D.; Li, M.; Wang, Z.; Qin, P.; Tan, T. Louvri pwodiksyon fèmantasyon nan asid l -laktik lè l sèvi avèk bran diri blan bysimultaneous saccharification ak fèmantasyon. Bioresour. Teknoloji. 2015, 198, 664–672. [CrossRef] [PubMed]

53. Pan, M.; Jiang, TS; Pan, JL Aktivite antioksidan nan idrolysat pwoteyin kolza. Bioprosesis manje. Teknoloji. 2009, 4, 1144–1152.[CrossRef]

54. Chen, HM; Muramoto, K.; Yamauchi, F.; Nokihara, K. Aktivite antioksidan nan peptides ki fèt ki baze sou antioksidatif peptide izole nan dijere nan yon pwoteyin soya. J. Agric. Manje Chem. 1996, 44, 2619–2623. [CrossRef]

55. Liu, Q.; Kong, B.; Xiong, YL; Xia, X. Aktivite antioksidan ak pwopriyete fonksyonèl nan idroliz pwoteyin porsin plasma kòm enfliyanse pa degre nan idroliz. Manje Chem. 2010, 118, 403–410. [CrossRef]

56. Lemes, A.; Sala, L.; Minrè, JDC; Braga, ARC; Egea, MB; Fernandes, KF Yon Revizyon sou Dènye Avans yo nan Peptid EncryptedBioactive ki soti nan fatra ki rich nan pwoteyin. Ent. J. Mol. Sci. 2016, 17, 950. [CrossRef] [PubMed]

57. Wang, J.-S.; Zhao, M.-M.; Zhao, Q.-Z.; Jiang, Y.-M. Pwopriyete antioksidan nan idroliz papain nan gluten ble nan diferan sistèm oksidasyon. Manje Chem. 2007, 101, 1658–1663. [CrossRef]

58. Gao, M.-T.; Kaneko, M.; Hirata, M.; Toorisaka, E.; Hano, T. Itilizasyon bran diri kòm sous eleman nitritif pou pwodiksyon asid laktik fèmantasyon. Bioresour. Teknoloji. 2008, 99, 3659–3664. [CrossRef] [PubMed]

59. Huang, WY; Lin, YR; Ho, RF; Liu, HY; Lin, YS Efè solisyon dlo sou èkstraksyon fèy te vèt. Sci. World J. 2013,2013, 368350. [CrossRef]

60. Wathoni, N.; Shan, CY; Shan, WY; Rostinawati, T.; Indradi, RB; Pratiwi, R.; Muchtaridi, M. Karakterizasyon ak antioksidan aktivite pèktin soti nan mangosteen Endonezyen (Garcinia mangostana L.) krout. Heliyon 2019, 5, e02299. [CrossRef]

61. Tsai, C.-C.; Chan, C.-F.; Huang, W.-Y.; Lin, J.-S.; Chan, P.; Liu, H.-Y.; Lin, Y.-S. Aplikasyon pou Lactobacillus rhamnosus SpentCulture Supernatant nan antioksidasyon kosmetik, blanchiman ak aplikasyon pou retansyon imidite. Molecules 2013, 18, 14161–14171.[CrossRef]

62. Huang, W.-Y.; Lee, P.-C.; Hsu, J.-C.; Lin, Y.-R.; Chen, H.-J.; Lin, Y.-S. Efè Kalite Dlo sou Dissolution nan Yerba Mate ExtraitPowders. Sci. World J. 2014, 2014, 1–6. [CrossRef] [PubMed]

63. Chan, C.-F.; Wu, C.-T.; Huang, W.-Y.; Lin, W.-S.; Wu, H.-W.; Huang, T.-K.; Chang, M.-Y.; Lin, Y.-S. Antioksidasyon ak Melanogenesis Inhibition nan divès kalite ekstrè Dendrobium tosaense. Molecules 2018, 23, 1810. [CrossRef] [PubMed]64. Wu, C.-T.; Agrawal, DC; Huang, W.-Y.; Hsu, H.-C.; Yang, S.-J.; Huang, S.-L.; Lin, Y.-S. Analiz Fonksyonalite nan Ekstrè CoffeeGround yo te jwenn pa Metòd Hydrothermal la. J. Chem. 2019, 2019, 1–8. [CrossRef]

65. Dorta, E.; Rodríguez-Rodríguez, EM; Jiménez-Quezada, A.; Fuentes-Lemus, E.; Speisky, H.; Lissi, E.; López-Alarcón, C. Sèvi ak Esè Kapasite Radikal Absòbsyon Oksijèn (ORAC) Pou Predi Kapasite Mango (Mangifera indica L.) Sou-pwodwi pou Enpeche Oksidasyon Pwoteyin Vyann yo. Manje Anal. Metòd 2016, 10, 330–338. [CrossRef]

66. Lin, Y.-S.; Chen, H.-J.; Huang, J.-P.; Lee, P.-C.; Tsai, C.-R.; Hsu, T.-F.; Huang, W.-Y. Kinetics nan Tirozinaz Inhibitory Aktivite Sèvi ak Vitis vinifera Leaf Extraits. BioMed Res. Ent. 2017, 2017, 5232680. [CrossRef] [PubMed]

67. Bidlingmeyer, BA; Cohen, SA; Tarvin, TL Rapid analiz de asid amine lè l sèvi avèk derivatizasyon pre-kolòn. J. Chromatogr. BBiomed. Sci. Appl. 1984, 336, 93–104. [CrossRef]

68. Asai, TT; Oikawa, F.; Yoshikawa, K.; Inoue, N.; Sato, K. Peptides Kolagen ki sòti nan Manje, Prolyl-Hydroxyproline (Pro-Hyp), andHydroxyprolyl-Glycine (Hyp-Gly) Amelyore kwasans Fibroblast po sourit kiltive prensipal lè l sèvi avèk serom fetal bovine Freefrom Hydroxyprolyl Peptide. Ent. J. Mol. Sci. 2019, 21, 229. [CrossRef]

69. Schägger, H. Tricine–SDS–PAGE. Nat. Pwotok. 2006, 1, 16–22. [CrossRef]

70. Diao, J.; Chi, Z.; Guo, Z.; Zhang, L. Mung pwa pwoteyin idrolysat modul repons iminitè atravè NF-kB chemen inlipopolysaccharide-stimulé RAW 264.7 macrophages. J. Manje Sci. 2019, 84, 2652–2657.[CrossRef]