2 Metòd tès yo

2.1 Analiz famasi rezo

2.1.1 Engredyan aktif nan Cistanche deserticola

Sou baz etid ki deja egziste [7, 22], "Echinacoside", "Verbascoside", "Cistanoside A", "Tubuloside A", "Isoacteoside", "2-Asetilakteozid"ak"Tibuloside B" yo te chwazi kòm eleman bioaktif pou analiz. Jwenn done twa dimansyon estrikti chimik sèt engredyan ki anwo yo atravè Pubchem (https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov/) epi sove yo nan fòma sdf.

2.1.2 Prediksyon ak tès depistaj sib potansyèl yo

Enpòte dosye yo estrikti ki genyen twa dimansyon nan laengredyan aktif nan baz done PharmMapper(http://lilab-ecust.cn/pharmmapper/index.html). Chwazi "sib pwoteyin imen sèlman" kòm espès sib yo, epi kenbe lòt opsyon yo kòm default pou jwenn done korespondan yo nan engredyan diferan. Objektif korespondan.

Yo te itilize baz done UniProt (https://www.uniprot.org/) pou jwenn enfòmasyon sou non pwoteyin ak non jèn ki koresponn ak chak sib. Rantre pwen sib ki koresponn ak 7 eleman yo.

Nan baz done GeneCards (https://www.genecards.org/), sèvi ak "maladi entesten enflamatwa" kòm mo kle pou chèche jèn ki gen rapò ak maladi entesten enflamatwa, epi òganize rezilta rechèch yo.

Sipleman Cistanche sipleman sipò anti-enflamatwa PhGs75% Ech 30% Lwa 12%

2.1.3 Pwoteyin-pwoteyin entèraksyon (PPI)

Konstriksyon rezo Sèvi ak jvenn (https:/jvenn.toulouse.inrae.fr/app/example.html) pou trase yon dyagram Venn sou entènèt pou jwenn entèseksyon sib engredyan aktif Cistanche deserticola ak sib IBD. Voye sib entèseksyon yo jwenn nan baz done String pou analiz depistaj PPI. Telechaje dosye TSV rezo PPI a, enpòte li nan Cytoscape 3.8.0, kalkile valè degre rezo entèraksyon pwoteyin, epi anbeli dyagram rezo PPI a ki baze sou valè degre.

2.1.4 Ontoloji Gene (GO)

Anrichisman fonksyonèl ak analiz anrichisman chemen Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) yo te fèt lè l sèvi avèk baz done DAVID (https://david.ncifcrf.gov/) pou idantifye objektif efè pwoteksyon Cistanche deserticola engredyan aktif sou IBD. Yo te fè analiz GO sou pwen yo, epi yo te itilize baz done DAVID pou fè analiz anrichisman chemen KEGG sou objektif kote engredyan aktif Cistanche deserticola jwe yon wòl pwoteksyon nan IBD.

2.1.5 Konstriksyon rezo "engredyan aktif-sib-chemen" Cistanche deserticola

Engredyan aktif Cistanche deserticola, sib entèseksyon engredyan aktif Cistanche deserticola ak IBD ak chemen anrichi pa KEGG yo te itilize pou konstwi yon rezo aktif engredyan-sib-chemen.

2.2 Validasyon modèl bèt

2.2.1 Etablisman modèl bèt

SPF klas gason BALB/c sourit (5 ~ 8 semèn, 18 ~ 21 g) yo te itilize, ki te founi pa Sant pou Tès Manje Sante nan Lekòl la nan Aplike Arts ak Syans, Beijing Union University [Esperimantal Animal Itilizasyon Nimewo Lisans: SYXK (Beijing) ) 2017-0038], Yo te kenbe yo nan yon chanm bèt SPF-klas ak yon tanperati (23±2) degre, yon imidite relatif nan 50% a 70%, ak 12 èdtan nan limyè fliyoresan ekspoze altène lajounen ak lannwit. . Pwotokòl eksperyans bèt yo te apwouve pa Laboratwa Animal nan Sant Tès Manje Sante a, Lekòl Aplike Arts ak Syans, Beijing Union University. Apre manje adaptive pou 3 jou, 20 sourit yo te owaza divize an 4 gwoup dapre pwa kò, ak 5 sourit nan chak gwoup. ①Gwoup kontwòl (CZ): bwè dlo esteril lib epi bay dlo esteril pou 7 jou youn apre lòt; ②DSS gwoup kontwòl

(DZ): Gratis pou bwè 3% solisyon DSS ki prepare chak jou pou 7 jou youn apre lòt; ③ Gwoup dòz ki ba nan glikozid total Cistanche deserticola (LZ) (konsantrasyon likid: 0.1 g/mL): gratis pou bwè 3% solisyon DSS prepare chak jou pou 7 jou; , gavage likid pou 7 jou youn apre lòt; ④ Cistanche deserticola total glikozid gwo dòz gwoup (HZ) (konsantrasyon likid 0.4 g/

mL): Bwè solisyon 3% DSS ki fèk prepare chak jou lib, epi bay solisyon an pa gavage pandan 7 jou youn apre lòt. Apre 7 jou nan modèl kontinyèl, yo te jèn pou 12 èdtan epi yo te sakrifye pa debwatman nan matris. Poul globil wouj yo te enjekte intraperitoneally 4 èdtan anvan ekzekisyon. Touswit apre ekzekisyon, yo te retire boul je yo pou kolekte san. Likid peritoneal la te ekstrè epi yo te louvri kavite nan vant. Yo te mezire longè kolon an, epi yo te retire larat sourit la, ne Peyer ak lòt ògàn yo.

Cistanche sipleman Sipleman sipò anti-enflamatwa

2.2.2 Endis aktivite maladi (DAI)

Sourit yo te peze anvan administrasyon entragastric nan yon tan fiks chak jou, epi yo te obsève eta mantal ak pwopriyete fekal sourit yo. San occult fekal te mezire ak bay nòt kòmsadwa. Nòt nòt yo montre nan Tablo 1. Nòt DAI=(nòt pwa kò + nòt karaktè fekal + nòt nan san kache nan fekal)/3 (1)

Tablo 1 Kritè ki fè nòt DAI

2.2.3 Deteksyon an tan reyèl fluoresans quantitative PCR deteksyon iminitè chemen siyal (qRT-PCR) deteksyon

Larat sourit yo te kolekte, koupe an 0.5 cm blòk tisi, ak tranpe nan tisi RNA estabilize solisyon pou estoke. Retire tisi a epi koupe l an miyèt moso, ajoute solisyon ekstraksyon RNA epi moulen an moso pou ekstrè RNA total la. Apre transkripsyon ranvèse ak anplifikasyon PCR, yo te detekte deklanchman de chemen iminitè kle yo, mTOR ak TGF-, nan larat sourit. Sekans premye yo itilize nan qRT-PCR yo montre nan Tablo 2.

Tablo 2 Primer tablo sekans