Eksplore potansyèl Ekstrè alg Icelandic ki te pwodwi pa ekstraksyon akeuz ak enpulsyon elektrik jaden-asistans pou aplikasyon kosmetik Pati 2

Tanpri kontakteoscar.xiao@wecistanche.compou plis enfòmasyon

2.5.4. Aktivite Anpèchman Hyaluronidase

Tout ekstrè yo alg ekspoze siyifikativman woanti-hyaluronidaseaktivite (Tablo 4), ki montre rezilta konparab ak solisyon yo asid tannik (yon inibitè byen li te ye nan hyaluronidase). Espesyalman, ekstrè A.esculenta te montre 100 pousan nan anpèchman pou tout metòd yo teste. Anplis, U. Lactuca ekstrè te ekspoze aktivite ki pi wo pase 90 pousan nan anpèchman, kote anpèchman nan ekstrè yo ki te pwodwi pa PEF (96.8 pousan) ak konbinezon an nan PEF plis HW (97.3 pousan) te pi wo pase anpèchman ki te pwodwi pa dlo cho tradisyonèl la. metòd 93.4 pousan )(p<0.05). all="" p.palmaria="" extracts="" exhibited="" similar="" activities="" (p=""><0.05), the="" inhibition="" of="" the="" extracts="" produced="" by="" pef="" was="" (91.9="" %)="" and="" the="" combination="" of="" pef+="" hw="" (89.5%)="" and="" the="" traditional="" hot="" water="" method="">

Tanpri klike la a pou w konnen plis

Lòt otè te dekri tou aktivite anti-hyaluronidase nan ekstrè diferan alg, espesyalman pou ekstrè ki rich nanflorotaninsoti nan alg mawon [73,74]. Sepandan, nan pi bon nan konesans nou an, sa a se premye fwa ke aktivite inhibition hyaluronidase nan P. palmitate ak U.lactuca ekstrè ki te pwodwi pa PEF yo te rapòte.

Cistanche ka amelyore iminite

Asid yaluronik se yon eleman enpòtan nan dèrm la, kote li enplike nan reparasyon tisi, li kraze ak aje, sa ki lakòz ondilasyon ak pèt nan fèm po. Nan sans sa a, inhibiteurs hyaluronik ogmante nivo asid hyaluronik nan matris la po ekstraselilè pou amelyore aparans nan aje.po figi[13]. Se poutèt sa, rezilta yo nan etid sa a ta ka louvri nouvo avni pou eksplwatasyon an nan inibitè natirèl hyaluronidase soti nan resous alg ak itilizasyon potansyèl nan pwodwi kosmetik.

An rezime, done yo te rasanble pèmèt nou konkli ke ekstrè A.esculenta ekspoze an jeneral pi bon aktivite inhibition pase P.palmaria ak U. Lactuca nan direksyon pou anzim yo teste. Kidonk, yo te espès ki pi pwomèt alg ak ekselananti-enzymatikaktivite yo ak Se poutèt sa li te chwazi pou plis etid nan laboratwa nou an. Malgre ke ekstrè brut soti nan A.esculenta parèt yo dwe bon kandida nan eksperyans vitro, plis etid bezwen yo dwe te pote soti nan elicide idantite nan metabolit yo ki responsab pou efè byolojik sa yo.

2.6.Correlations ant konpoze chimik ak pwopriyete byoaktif

Rezilta yo nan analiz prensipal eleman (PCA), te montre ke separasyon prensipal la nan gwoup yo te defini pa PC1 ak PC2, ki matirite pou 71.9 pousan nan ak 14.5 pousan nan divèjans nan done yo, respektivman (Figi 2). Ekstrè yo A.esculenta yo te karakterize pa pi wo sa ki nan flavonoid ak konpoze fenolik, efè inhibition sou anzim (kolagenase, tirozinaz ak elastase), ak valè DPPH ak FRAP, pase nan lòt espès yo, P. palmata ak Ul. Lactuca. Nan lòt men an, A.esculenta te gen pi ba kontni idrat kabòn, espesyalman konpare ak P. palmitate (ki te sitiye nan bò opoze a nan PC1 la). Varyasyon nan done ansanm PC2 a te sitou ki gen rapò ak ABTS akhyaluronidazanpèchman. Kòm endike nan pozisyon an sou trase a, P. palmata te gen yon korelasyon pi fò ak ABTS tandiske U. Lactuca te gen plis relasyon akhyaluronidazefè anpèchman, an konparezon ak de espès sa yo.

Yon gwo ak enpòtan korelasyon pozitif ant TPC, TFC, DPPH, FRAP, ak efè inhibition sou kolagenaz, elastase, aktirozinazte demontre pa analiz Pearson korelasyon (Tablo 5).

Figi 2. Analiz prensipal eleman (PCA) Biplot nan chaj faktè (sèk nwa) ak nòt pou ekstrè yo alg (P. palmata: pwen mawon (anwo adwat); U. Lactuca: triyang vèt (sitou nan anwo gòch la); A .esculenta: kare ble (pati ki pi ba nan trase).

Sa a te nan yon akò ak etid anvan yo, rapòte ke konpoze fenolik (ki gen ladan flavonoid) se kontribitè prensipal yo nan aktivite antioksidan divès kalite move zèb lanmè [75-77]. Aktivite antioksidan segondè nan ekstrè soti nan makroalg mawon te gen rapò ak yon gwoup espesifik nan polifenol, phlorotannins, ak estrikti inik molekilè yo. Yo rapòte ke Phlorotannis soti nan alg mawon yo gen jiska uit bag fenol konekte ki aji kòm pyèj elèktron [78,79]. Li te espere ke ABT yo ta korelasyon ak TPC, lòt paramèt antioksidan. Rezon ki posib yo ta ka ke metòd yo baze sou kondisyon reyaksyon diferan e ke reyaksyon diferan tou de konsènan tan ak seri eleman yo. Pou egzanp, reyaktif ABTS reyaji ak yon seri pi laj deantioksidanpase radikal DPPH [80]. Nan lòt men an, youn nan limit yo mansyone pou ABTS se yon reyaksyon long ak tan an reyaksyon jeneral ka pa pèmèt rive nan yon pwen final.

Rezilta yo endike ke gen yon gwo korelasyon pozitif nan TPC ak TFC nan aktivite inhibition kolagenaz, elastase, ak tirozinaz ({{0}}.93-0.99), tandiske relasyon an nan anpèchman. nan hyaluronidase pa t 'tankou fò (r=0.42 ak 0.54, respektivman). Sa a endike ke lòt konpozan ka kontribye nan efè a inhibition nan ekstrè yo. Lòt etid te rapòte ke polisakarid gen aktivite hyaluronidase-inhibitory, pou egzanp asid aljinik nan alg mawon [81,82]. Plis etid sou konpozisyon chimik espès makroalg yo pou efè konpoze izole yo sou anzim la nesesè pou evalye kontribisyon chak eleman chimik tankou nan etid sa a konsantre sou ekstrè brit.

Konklizyon yo te ann amoni ak etid anvan yo, ki deklare ke konpozisyon chimik la ak nivo byoaktivite ekstrè yo varye anpil ant twa linyon yo (wouj, vèt, ak alg mawon) ak ant diferan espès ki fè pati menm filòm epi yo enfliyanse pa laj. ak kalite tisi. Anplis de sa, konpozisyon ak karakteristik yo depann de anpil faktè anviwònman ki afekte distribisyon ak kwasans makroalg yo. Pou egzanp, limyè (radyasyon UV), tanperati, disponiblite eleman nitritif, ekspoze a lè, mouvman dlo, ekspoze vag, ak salinite. Tanperati a te dekri kòm faktè ki gen efè ki pi fò sou fòmasyon pigman ak konsantrasyon eleman nitritif, salinite, ak radyasyon UV kòm faktè ki enfliyanse konsantrasyon TPC [83].

Distribisyon diferan espès makroalg varye selon pwofondè dlo. Pozisyon ki pi wo sou rivaj la nan zòn entèrtid oswa littoral yo gen plis estrès paske espès k ap grandi la yo dwe kenbe tèt ak plizyè chanjman nan faktè abyotik akòz chanjman mare yo. Pou egzanp, efè a siye nan lè a, gwo irradiances solè (nan mare ba), chanjman nan salinite ak tanperati ak, nan kondisyon nan tanperati lè ki ba, ki gen ladan lè w konjele. Anba mak dlo ki ba a, ogmante pwofondè rezilta nan yon diminisyon trè rapid nan entansite limyè ak mwens ekspoze a irradiance.

Alg k ap grandi nan ranje mare yo gen pi ba sansiblite nan radyasyon UV epi refè pi rapid nan estrès solè. Lè nou konsidere ke alg k ap grandi nan zòn sublitoral yo pi sansib a radyasyon UV epi yo gen pi ba rekiperasyon nan estrès solè [84]. An menm tan an, kolòn dlo a bay pwoteksyon. Nan etid la prezan, ekspoze a limyè solèy la te prezimableman pi fò pou P. palmata, konpare ak lòt espès yo. Lòt etid yo montre ke fòmasyon MAA yo dirèkteman gen rapò ak limyè solèy la [85], pwoteje òganis yo kont UV-A ak UV-B radyasyon. Anplis, li te montre ke kantite espesifik MAAs diminye ak ogmante pwofondè kolekte. Kelp tankou A.esculenta, yo konnen yo grandi nan zòn nan sublitoral anwo a, men tou pwolonje nan entèrtid ki pi ba a jis pi wo a filigran ki ba a. Sa vle di kolòn dlo a bay pi fò pwoteksyon pase pou P.palmata. Anplis de sa, karakteristik mòfolojik yo diferan, lam A.esculenta yo pi epè konpare ak de lòt espès yo. UI. Lactuca, k ap grandi sitou nan entèrtid la ak sublittoral se kapab fotosentèz ak grandi anba irradiances ki ba anpil. Te ekspoze a UVB limyè yo te deklare akselere rekiperasyon an nan paramèt fotosentetik nan U. Lactuca soti nan efè negatif nan UVA limyè. Li pi piti, pi senp nan estrikti, epi li pi kout (3 mwa) pase tou de A.esculenta (5-7 vear) ak P. palmata ki gen yon nouvo kwasans chak ane.

An rezime, sipozisyon yo ka trase ke diferans prensipal yo nan pwopriyete yo nan ekstrè yo se varyasyon nan dire lavi, karakteristik mòfolojik, ak kondisyon kwasans nan espès alg yo.

3. Materyèl ak Metòd 3.1.Materyèl

Icelandic alg U.lactuca (vèt alg), A.esculenta (mawon alg), ak P. palmitate (wouj alg) te bay pa Icelandic Blue moules ak alg, ki te rekòlte move zèb nan Breidafjordur (West-Island). Apre rekòlte alg yo te cheche (a apeprè 90 pousan materyèl sèk), moulen, epi yo te delivre vakyòm chaje. Yo te kenbe echantiyon yo nan yon kote ki sèk ak nwa nan tanperati chanm jiskaske yo itilize yo.

Tirozinaz ki soti nan djondjon, L-3,4-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA), elastaz ki soti nan pankreyas porsin, asid ascorbic, N-Succinyl-Ala-Ala-Ala-p-nitroanilide (AAAPVN), hyaluronidase soti nan tèstikul bèf, quercetin, -tokoferol, asid tannik, 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH), 24,6-Tripyridyl-s-Triazine (TPTZ), Trolox, Folin-Ciocalteu reyaktif, asid galik, ak yon twous tès kolorimetri aktivite kolagenaz (MAK293) yo te achte nan men Sigma-Aldrich Co.(St. Louis, MO, USA). Sèl sodyòm asid hyaluronik te achte nan men MakingCosmetics (Redmond, WA, USA). Tout lòt pwodui chimik ak reyaktif yo te itilize yo te klas analyse epi yo te jwenn nan VWR International, LLC. Dlo deyonize (ElixEssential, Merck, Darmstadt, Almay) te itilize pou fè ekstraksyon ak preparasyon solisyon ki baze sou dlo.

3.2. Konsepsyon eksperimantal

Yo te itilize yon konsepsyon faktorial pou evalye efè Icelandicseaweedspecies(U.lactuca, A.esculenta, P. palmata) ak tretman ekstraksyon (ekstraksyon dlo cho (HW, 95 degre C), PEF-assisted extraction (PEF) ak konbinezon an nan tou de teknik (PEF plis HW), sou konpozisyon ekstrè ak byoaktivite (Tablo 6). Ekstraksyon an te pote soti nan triple pou chak gwoup ak chak replike ekstrè analize an triple.

3.3. Ekstraksyon nan byoaktif soti nan alg yo Icelandic

Eksplwatasyon biomass makroalgal nan diferan nivo te motive syantis yo pou yo eksplore teknik ekstraksyon ki pi zanmitay ekolojik, efikas ak pri-efikas, ki baze sou apwòch ekstraksyon vèt. Nan travay sa a, yo te evalye ekstraksyon ki ede PEF kòm yon metòd roman ak vèt pou pwodwi ekstrè fonksyonèl, pandan y ap tradisyonèl ekstraksyon dlo cho te itilize pou konparezon. Anplis, efè a nan konbinezon an nan tou de teknik, PEF tretman nan macroalgae ki te swiv pa tradisyonèl ekstraksyon nan dlo cho, sou rekiperasyon an byoaktif te etidye. Akòz elektwoporasyon espere ki pwodui nan manbràn selilè yo apre tretman fizik la, ekstraksyon sa a ak dlo cho te kapab plis fasilite liberasyon materyèl entraselilè [86], ogmante pwodiksyon ekstraksyon an. Yon tan apre tretman nesesè pou materyèl yo gaye soti nan selil yo [87,88], ak nan eksperyans sa a, sispansyon yo te tann lannwit lan jiskaske separasyon likid (ekstrè) nan kaka a.

Konsènan mwayen ekstraksyon, dlo distile yo te itilize pou pwodui ekstrè alg yo pou simonte limit konsènan itilizasyon toksik ak solvang òganik yo. Dlo te pwouve se yon bon sòlvan pou fè ekstraksyon plizyè konpoze bioaktif nan alg [46,89-91] epi li zanmitay anviwònman an. Anplis de sa, dlo se souvan itilize pou PEF-asistans ekstraksyon kòm li se yon bon kondiktè pou elektrisite.

3.3.1. Pwosedi Ekstraksyon

Pou chak replike nan chak gwoup, alg (15 g) yo te tranpe lannwit lan nan tanperati chanm (22 degre) nan dlo deyonize (300 mL). Lè sa a, sispansyon an te trete ak PEF (PEF), chofe (HW), oswa tou de PEF-trete ak chofe (PEF plis HW). Sispansyon yo te kenbe lannwit lan nan yon frijidè ki te swiv pa filtraj ak yon papye filtre koryas （20 μm）. Lè sa a, filtraj yo (ekstrè) yo te estoke nan 4 degre jiskaske analiz yo.

Te fè ekstraksyon enpulsyonèl jaden elektrik-asistans te pote soti lè l sèvi avèk yon dèlko batman kè ki te bati andedan kay la. Li te gen yon kondansateur FuGHCK-200-2000 (Fu.G.Elektronik GmbH, Rosenheim, Almay) ak espas etensèl (18.5 kV OG75, Perkin-Elmer Optoelectronics, GMBH, Wiese-baden, Almay). Ekipman PEF a te pwodwi pulsasyon eksponansyèl dekonpozisyon ak yon lajè 0.96 us ak yon anplitid 18 kV. Yon chanm tretman plexiglass ak dimansyon yo (L × H × W) 20 × 8 × 2.5 cm, ak distans ki pi kout la ant elektwòd plak yo te itilize trete sispansyon yo ak yon jaden elektrik 8 kV / cm nan 1.2 Hz pou 10 min. Ekstrè HW yo te prepare lè yo chofe sispansyon an nan yon beaker nan yon beny dlo tèrmostatik epi yo te kenbe nan 95 degre pou 45 min. Pou konbine jaden elektrik enpulsyonèl la ak tretman chofaj, sispansyon yo te trete PEF ak Lè sa a, mete yo nan yon bèk, chofe nan yon beny dlo, epi kenbe nan 95 degre pou 45 min.

3.3.2. Kondiktif, pH, ak Mezi Tanperati

Yo te mezire konduktiviti elektrik ak pH nan sispansyon alg yo apre yo fin tranpe ak apre tretman ekstraksyon yo, nan tanperati chanm, lè l sèvi avèk yon pH-mèt (Orion StarTM A215 pH/Conductivity Benchtop Meter, Thermo Scientific, Waltham, MA, USA) ekipe ak yon konduktiviti. Capteur ak pH/ARC triyod konbinezon elektwòd. Anplis de sa, chanjman tanperati akòz tretman yo te anrejistre.

3.4. Spectral pwofil nan ekstrè yo alg

Spectre absòpsyon UV-VIS nan ekstrè diferan alg yo te mezire pou ranje 200 a 450 nm lè l sèvi avèk yon gwo bout bwa Thermo Scientific Evolution 350 UV-Vis Spectrophotometer (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA) ak kivèt kwatz 1 cm. Yo te fè twa analiz pou chak ekstrè alg. 3.5. Detèminasyon kontni total polifenolik

Kontni total fenolik (TPC) nan ekstrè alg yo te detèmine lè l sèvi avèk reyaktif Folin-Ciocalteu apre yon metòd yon ti kras modifye dekri pa Zhang [92] lè l sèvi avèk yon espektwofotomètr Multiskan Sky Microplate (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA). 20 μL nan ekstrè alg oswa seri solisyon estanda yo te melanje ak 100 μL nan reyaktif Folin-Ciocalteu (10 pousan nan dlo distile). Apre 5 min, yo te ajoute 80 μL nan 7.5 pousan (o/w) solisyon kabonat sodyòm. Melanj reyaksyon an. te enkube nan tanperati chanm ak fènwa pou 30 min.Absorbans te mezire nan longèdonn 760 nm.Dlo distile yo te itilize kòm vid.Yo te itilize yon koub estanda nan asid galik pou detèmine kontni fenolik total la epi eksprime kòm ug ekivalan asid galik. (GAE) pou chak gram materyèl sèk (ug GAE/g dw).

3.6. Detèminasyon Kontni Flavonoid Total

Kontni total flavonoid (TFC) nan ekstrè alg yo te detèmine pa metòd ki dekri pa Kamtekar 【93】 ak adapte a 96-byen mikroplak yo. Yon ti tan, yo te melanje yon volim 25 μL ekstrè alg oswa seri solisyon estanda ak 100 μL nitrit sodyòm （0.375 pousan w/v）. Apre 5 min, 25 μL klori aliminyòm (3 pousan w/v) te ajoute nan melanj lan epi enkube pou 6 min nan tanperati chanm. Lè sa a, 100 uL idroksid sodyòm (2 pousan w/v) te ajoute nan melanj lan ak melanje. Menm lè a, yo te mezire absorbans nan longèdonn 510 nm. Yo te itilize dlo distile ak etanòl kòm vid. Yo te itilize yon koub estanda nan quercetin (fonn nan etanòl) pou detèmine kontni fenolik total la epi eksprime kòm ug nan ekivalan quercetin (QE) pou chak gram materyèl sèk (ug QE/g do). 3.7. Detèminasyon kontni idrat kabòn

Kontni sik gratis yo te mezire dapre metòd ki dekri nan [94], ak modifikasyon ti tay. Yon 50 μL nan solisyon fenol (4 pousan) ak 250 μL nan asid silfirik (96 pousan) yo te ajoute nan 100μL nan echantiyon oswa solisyon estanda. Apre 10 min enkubasyon nan tanperati chanm, yo te li absòbe melanj lan nan 490 nm. Yo te itilize yon koub estanda glikoz pou detèmine kontni total idrat kabòn epi eksprime kòm mg ekivalan glikoz (GluE) pou chak gram materyèl sèk (mg GluE/g dw).

3.8. Pwopriyete antioksidan nan ekstrè alg

3.8.1.2,2 Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) Esè pou elimine radikal gratis

Aktivite antioksidan (DPPH) nan ekstrè alg yo te detèmine apre metodoloji ki dekri deja 【94】 ak kèk modifikasyon. Yon ti tan, 200 μL nan 10.825 × 10-5 M DPPH solisyon yo te ajoute nan 100 μLof echantiyon （1∶1 nan metanol） nan yon plak 96-byen. Menm volim DPPH te melanje ak 50μL estanda plis 50 μL metanol. Lè sa a, echantiyon yo ak estanda yo te enkube nan yon kote ki fè nwa nan tanperati chanm pou 30 min. Absorbans la te mezire nan longèdonn 517 nm. Dlo distile te itilize kòm yon vid. Kapasite pou retire radikal DPPH la te kalkile lè l sèvi avèk ekwasyon sa a:

kote A kontwòl se absòbe kontwòl la (solisyon DPPH san echantiyon), echantiyon A se absòbe echantiyon tès la (solisyon DPPH plis echantiyon tès), echantiyon A se absòbe echantiyon an sèlman (echantiyon san solisyon DPPH). ) ak Amethanol vid se absorpsyon nan metanol sèlman. Antioksidan komèsyal (asid ascorbic, asid galik, ak -tokoferol) yo te itilize kòm kontwòl pozitif.

3.8.2. Ferric Ion Diminye Antioksidan Power(FRAP) Assay

Aktivite FRAP te mezire selon metòd Benzie ak Strain[95]. Yon ti tan, tanpon acetate (300 mM, pH3.6), 2,4, 6-tripyridyl-s-triazine (TPTZ) 10 mM nan 40 mM HCl, ak FeCl3 · 6H2O (20 mM) yo te melanje nan rapò a. nan 10:1:1 pou jwenn reyaktif FRAP k ap travay la. Te melanj reyaksyon an enkube nan 37C pou 10 min. Yo te melanje yon echantiyon A50μL ki soti nan chak ekstrè ak 150μL solisyon FRAP k ap travay pou 8 min nan tanperati chanm. Absorbans pwodwi ki gen koulè pal, Ferrous-TPTZ te mezire nan longèdonn 593 nm. Valè FRAP nan ekstrè alg yo te eksprime kòm μM nan ekivalan Trolox （TE） pou chak gram materyèl sèk.

3.8.3.2,2 Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic asid)(ABTS) Assay

Analiz la te fèt lè l sèvi avèk pwotokòl dekolorizasyon ABTS [76] ak kèk modifikasyon. Yon kasyon radikal ABTS (ABTS plis) te pwodui lè yo reyaji ABTS (66 mg) ak 10 mL solisyon persulfat potasyòm (2.45 mM). Yo te kite melanj lan nan fè nwa nan tanperati chanm pou 12-16 h anvan ou itilize. Solisyon ABTS plus la te dilye ak dlo nan yon absorpsyon 0.700 nan 734 nm. Te melanj reyaksyon an (200 ul) transfere nan yon mikroplak, yo te ajoute 50 ul echantiyon ak Lè sa a, 150 ul nan solisyon an reyaktif. Plak la te souke pou 10 s nan vitès mwayen, epi yo te mezire absorbans nan 734 nm apre 5 min nan enkubasyon nan tanperati chanm. Yo te prepare yon koub estanda pa trase anpèchman A734nm nan estanda Trolox kòm yon fonksyon nan konsantrasyon yo. Valè kapasite antioksidan ekivalan Trolox (TEAC) echantiyon yo te kalkile lè l sèvi avèk ekwasyon ki te jwenn nan regression lineyè koub estanda ki ranplase valè A734nm pou chak echantiyon:

Aktivite antioksidan an te eksprime an tèm de TEACconcentration, umol/g alg pwa sèk.

3.9. Aktivite anti-enzymatic nan ekstrè alg 3.9.1. Esè anpèchman kolagenaz

Yo te itilize yon twous tès kolorimetri aktivite kolagenaz (MAK293), ki te achte nan men Sigma-Aldrich, pou detèmine anpèchman kolagenaz nan ekstrè alg. Twous la mezire aktivite kolagenaz lè l sèvi avèk yon peptide sentetik (FALGPA) ki imite estrikti kolagen an. Pwosedi a te fèt dapre enstriksyon yo pou twous yo.

3.9.2. Elastase anpèchman tès

Anpèchman elastase ekstrè alg yo te envestige nan solisyon tanpon TRIS ak metòd modifye jan sa dekri pi bonè 【96】. Yon ti tan, 1 00μL nan 0.1 M TRISbuffer solisyon （pH8.0）, 25 μL nan elastase (1 U/mL nan TRISbuffer) ak 25μL ekstrè echantiyon yo te melanje ak enkube pou 15 min nan 30. C anvan ou ajoute substra a pou kòmanse reyaksyon an. Apre tan enkubasyon, yo te ajoute 50 uL nan 2 mM solisyon AAAPVN. Lè sa a, absòbe a nan 420nm te kontwole pou 20 min lè l sèvi avèk yon lektè microplate anba yon tanperati konstan nan 30 C. Finalman, anpèchman elastase yo te kalkile nan pousantaj lè l sèvi avèk ekwasyon an:

kote Abs kontwòl se absorpsyon nan tès la lè l sèvi avèk tanpon an olye pou yo inibitè (echantiyon) ak Abssampleis absorpsyon nan ekstrè echantiyon yo. Quercetin te itilize kòm yon kontwòl pozitif. Tris tanpon te itilize kòm vid.

3.9.3. Egzamen anpèchman tirozinaz

Yo te fè tès inhibitor tirozinaz dapre metòd ki te deja dekri pa 【66】 lè l sèvi avèk L-DOPA kòm substra. Yon 20 μL nan echantiyon an, 10 μL nan solisyon tirozinaz djondjon (50 U/mL nan tanpon fosfat) ak 80 μL nan tanpon fosfat （pH =6.8) yo te melanje nan yon mikroplak ak pre-enkube nan 37 degre. pou 5 min. Lè sa a, yo te ajoute 90 μL nan L-DOPA (2 mg / mL). Yo te kontwole fòmasyon dopachrome imedyatman pou 20 minit nan 475 nm nan yon lektè microplate anba yon tanperati konstan 37 degre. Pousantaj anpèchman anzim tirozinaz la te kalkile lè l sèvi avèk ekwasyon an:

kote Abs kontwòl se absorpsyon nan tès la lè l sèvi avèk tanpon an olye pou yo inibitè (echantiyon) ak echantiyon Abs se absorpsyon nan ekstrè echantiyon yo. Quercetin te itilize kòm yon kontwòl pozitif. Yo te itilize tanpon fosfat kòm vid.

3.9.4. Hyaluronidase anpèchman tès

Aktivite inhibitor Hyaluronidase te mezire jan [66] te dekri anvan ak kèk modifikasyon. Yon volim 100 ulof tip-1-Sbovine testicules hyaluronidase（2100 U/mL）fonn nan 0.1 M tanpon acetate (pH 3.5) te melanje ak 100 μL ekstrè ak enkubasyon nan 37 degre pou 20 min. Yo te ajoute yon volim 200 μL 6mM nan klori kalsyòm nan melanj reyaksyon an, ak Lè sa a, melanj lan te enkube nan 37 degre pou 20 min. Sa a Ca2 plis aktive hyaluronidase te trete ak 250 μL nan hyaluronate sodyòm (1.2 mg / mL) fonn nan 0.1 M tanpon acetate (pH 3.5) ak Lè sa a, enkube nan yon beny dlo nan 37 degre pou 40min.A 50 μL nan idrode 0. ak 100 μL nan 0.2 M sodyòm borat yo te ajoute nan melanj reyaksyon an, ak Lè sa a, enkube nan yon beny dlo bouyi pou 5 min. Apre refwadisman nan tanperati chanm, yo te ajoute 250 μL solisyon p-dimethylaminobenzaldehvde （DAMB） nan melanj reyaksyon an. Solisyon DAMB la te prepare pa fonn 0.25 g DAMB nan 21.88 mL 100 pousan asid acetic ak 3.12 ml asid 10N asid. Gwoup kontwòl la te trete ak 100μL de 5 pousan dlo olye de extrait. Yo te mezire absorpsyon an nan longèdonn 585 nm apre 45 min. Yo te kalkile pousantaj anpèchman anzim nan lè l sèvi avèk ekwasyon sa a:

kote Abs kontwòl se absorpsyon nan tès la lè l sèvi avèk tanpon an olye pou yo inibitè (echantiyon) ak echantiyon Abs se absorpsyon nan ekstrè echantiyon yo. Yo itilize asid tannik kòm yon estanda referans.

3.10. Analiz estatistik

Mwayèn nan analiz la triple nan chak ekstrè yo te kalkile epi itilize yo jwenn valè yo mwayèn ak devyasyon estanda pou chak gwoup (n=3). Modèl lineyè jeneral (GLM) pou faktè fiks yo te aplike pou evalye efè prensipal yo ak entèraksyon de-fason nan faktè eksperimantal yo (espès ak metòd ekstraksyon) sou varyab mezire. Anplis de sa, yo te itilize ANOVA ak tès Tukey-Kramer pou idantifye siyifikatif (p<0.05)differences between="" the="" groups.="" pearson="" correlation="" was="" used="" to="" evaluate="" the="" linear="" relationship="" between="" the="" variables.="" principal="" component="" analysis(pca)was="" used="" to="" detect="" structure="" in="" the="" relationship="" between="" measured="" variables="" and="" experimental="" factors.="" the="" pca="" reduces="" voluminous="" data="" to="" a="" small="" set="" of="" linear="" combinations="" of="" related="" variables="" (i.e.,="" factors)="" based="" on="" patterns="" of="" correlation="" among="" the="" original="" variables.="" the="" resulting="" linear="" attribute="" combinations="" can="" be="" used="" for="" profiling="" specific="" product="" characteristics="" based="" on="" the="" variables="" studied.="" all="" statistical="" analyses="" were="" performed="" using="" ncss="" 2020="" statistical="" software="" (2020)="" (ncss,="" llc.,="" kaysville,="" ut,="">

4. Konklizyon

Rezilta yo nan premye eksperyans tès depistaj sa a te montre potansyèl twa espès alg Icelandic nan bay efè benefisye efikas atravè plizyè chemen. Apwòch vèt la devlope lè l sèvi avèk akeuz jaden elektrik enpulsyonèl ekspoze rezilta ki sanble ak ekstraksyon tradisyonèl dlo cho a, ki montre plizyè avantaj tankou nati ki pa tèmik li yo ak pi kout tan ekstraksyon (10 min vs 45 min). Pami twa espès alg yo, makroalg mawon A.esculenta a te montre kontni ki pi wo nan TPC ak TFC montre tou pi gwo kapasite antioksidan Anplis, ekstrè dlo A. esculenta te montre pi bon aktivite inhibition pase P. palmaria ak U. Lactuca nan direksyon kolagenaz, elastase, tirozinaz, ak hyaluronidase yo se espès alg ki pi pwomèt ak ekselan aktivite anti-enzymatik pou itilize yo nan blanchiman po, anti-aje ak sante po. Enteresan, ekstrè yo A. esculenta ki te pwodwi pa metòd la PEF te montre yon anpèchman kolagenaz nan 91 pousan, pi wo pase aktivite a anpèchman yo montre nan ekstraksyon an dlo cho tradisyonèl e menm pi wo pase inibitè a bay nan twous komèsyal la. An konklizyon, etid preliminè nou an sijere ke ekstrè ki baze sou alg Icelandic, espesyalman ekstrè ki soti nan makroalg mawon A.esculenta, ki te pwodwi pa ekstraksyon akeuz enpulsyonèl jaden elektrik-asistans, se engredyan potansyèl fonksyonèl ki ta ka itilize kòm konpoze aktif pou fòmilasyon kosmetik ak kosmetik. nan fiti prè.

Atik sa a soti nan Mas Medikaman 2021, 19, 662. https://doi.org/10.3390/md19120662 https://www.mdpi.com/journal/marinedrugs