Eksplore potansyèl Ekstrè alg Icelandic ki te pwodwi pa ekstraksyon akeuz ak enpulsyon elektrik jaden-asistans pou aplikasyon kosmetik Pati 2

Tanpri kontakteoscar.xiao@wecistanche.compou plis enfòmasyon

2.4. Kapasite antioksidan nan Ekstrè alg Icelandic

A.esculenta te gen aktivite DPPH ki pi fò nan mitan ekstrè brit twa espès alg yo (p.<0.05), with="" scavenging="" effects="" higher="" than="" 90%(table="" 3).="" compared="" with="" the="" different="" standard="" solutions,="" a.esculenta="" showed="" comparable="" scavenging="" activity="" as="" 100ug/ml="" of="" ascorbic="" acid="" (87.9%),="" gallic="" acid="" (91.0%),="" and="" α-tocopherol="" (87.9%).="" our="" results="" were="" in="" agreement="" with="" recent="" studies="" [50],="" which="" also="" reported="" a="" positive="" antioxidant="" activity="" of="" a.esculenta="" extracts.="" surprisingly,="" no="" significant="" differences="" in="" antioxidant="" activity="" were="" observed="" between="" the="" different="" extraction="" methods="" tested="" (p="">0.05). Li te espere ke ekstrè PEF ta montre pi bon valè antioksidan pase ekstrè yo pwodwi ak ekstraksyon tradisyonèl cho a depi lòt etid yo te montre ke teknik vèt (tankou ekstraksyon mikwo ond ki ede oswa ekstraksyon anzimatik) ka efektivman evite dekonpozisyon nan konpoze bioaktif, ki montre pi wo. aktivite antioksidan [59,60].

Kapasite nan ekstrè alg yo diminye ferrik (Fe8 #) nan fer (Fe2 plis) ion ak kapasite nan scavenge radikal ABTS la te etidye tou, pa metòd la FRAP ak ABTS, respektivman. Rezilta FRAP yo te montre tandans menm jan ak DPPH, ki montre A. esculenta te gen pi fò kapasite pou diminye iyon ferrik (Fe3 plis ) nan iyon fèr (Fe2 plis ) nan mitan ekstrè brit twa espès alg yo (p.<0.05). however,="" a="" different="" behavior="" was="" found="" for="" the="" abts.="" all="" seaweed="" extracts="" showed="" a="" similar="" ability="" to="" scavenge="" the="" radical="" abts="" (p="">0.05), ki endike ke espès sa yo pwobableman genyen kèk konpoze efikas ki responsab aktivite dechaj yo.

Tanpri klike la a pou w konnen plis

An jeneral, yo konnen alg mawon yo prezante pi gwo potansyèl antioksidan an konparezon ak fanmi wouj ak vèt [61]. Rezilta nou yo te montre tou ke ekstrè akeuz soti nan A. esculenta ekspoze aktivite antioksidan efikas ki gen rapò ak scavenging nan radikal gratis ak diminye pouvwa, sijere ke A. esculenta ta ka potansyèlman yon resous pou antioksidan natirèl. Aktivite antioksidan segondè yo obsève pou ekstrè A.esculenta ta ka lye ak kontni an wo nan konpoze fenolik detèmine nan ekstrè yo alg mawon. Nan anpil etid, aktivite antioksidan ekstrè alg yo te atribiye nan konpoze fenolik yo, ki montre korelasyon pozitif ant kontni fenolik ak kapasite scavenging sitou ak DPPH [62,63]. Rezilta korelasyon menm jan yo te jwenn nan etid aktyèl la pou ekstrè A.esculenta (gade yon pi bon diskisyon nan Seksyon 2.6. Korelasyon ant konpoze chimik ak pwopriyete byoaktif).

2.5.Enzumatic Inhibitory Aktivite nan Ekstrè alg Icelandic

Ekstrè alg Icelandic ekspoze efè inhibitor pozitif nan direksyon pou tout anzim yo teste (Tablo 4), louvri nouvo avni pou eksplwatasyon an nan inibitè natirèl anzimatik ki soti nan resous alg. Dapre sa nou konnen, sa a se premye fwa ke aktivite inhibition anzimatik nan ekstrè alg Icelandic ki te pwodwi pa PEF yo te teste.

achte cistanche

2.5.1. Aktivite anpèchman kolagenaz

Ekstrè A.esculenta te montre anpèchman kolagenaz pozitif sòti nan 68 a 91 pousan, pandan y ap P. palmaria ak U. Lactuca ekstrè ekspoze aktivite anpèchman ensiyifyan kont kolagenaz (Tablo 4).A.esculenta ekstrè dlo cho ekspoze 71.1 pousan aktivite anpèchman kolagenaz, ki te pi wo pase epigallocatechin-3-gallate(EGCG)solusyon estanda (63.2 pousan) ak konparab ak estanda pozitif ki bay twous anzimatik komèsyal la (74.9 pousan). Yon konklizyon enpòtan te ke ekstrè yo A.esculenta ki te pwodwi pa PEF a te montre yon anpèchman kolagenaz nan 91 pousan, montre aktivite menm pi wo pase inibitè a bay nan twous komèsyal la. Li ta dwe mete aksan sou ke aktivite sa a te sèlman obsève nan ekstrè yo dlo ki te pwodwi pa PEF epi yo pa nan konbinezon an nan PEF plis HW. Konpòtman sa a ka eksplike pa posiblite pou pwosesis dlo cho a ta ka gen yon efè negatif sou konpoze ki responsab pou anpeche aktivite kolagenaz. Sepandan, etid adisyonèl yo bezwen eksplike rezilta sa yo akòz konpleksite nan ekstrè alg brit. Gwoup rechèch susmansyone a ap travay kounye a sou idantifikasyon molekil anpèchman nan ekstrè A.esculenta pou pi byen konprann efè pozitif PEF ki te pwodwi.

Cistanche ka anti-aje

Rezilta konsènan anpèchman kolagenaz pa ekstrè A.esculenta yo an akò ak done anvan yo, nan ki A.esculenta yo te itilize nan ekstrè komèsyal akòz efè antiaging li yo. Degradasyon nan kolagen an rive ak aje akòz aktivite kolagenaz, sa ki lakòz ondilasyon sou po a. Anpèchman nan kolagenaz pa konpoze ki fèt natirèlman se yon opòtinite enteresan pou pwodwi anti-aje. Pou egzanp, SEPPIC, yon founisè engredyan pou endistri kosmetik, ap ofri yon ekstrè lipofil nan A.esculenta (Kalpariane AD) [64].

2.5.2. Aktivite anpèchman elastaz

Only the crude extracts of A.esculenta inhibited elastase, exhibiting activities higher than 70% of inhibition (Table 4). However, the anti-elastase activities of A.esculenta extracts did not statistically differ among extraction methods (p>{{0}}.05). Konpare ak solisyon quercetin, yon inibitè elastase byen koni ki te montre 100 pousan anpèchman nan 1 mM ak 58.7 pousan nan 0.5 mM, pèfòmans nan ekstrè soti nan A. esculenta te wo.

Elastase se yon anzim proteinaz ki ka diminye elastin pa kraze lyezon peptide espesifik. Kontinwe, anpèchman nan aktivite elastase nan kouch dèrm la ka itilize pou kenbe elastisite po [65]. Anpil ekstrè plant yo te idantifye kòm inhibiteur elastase [17]; sepandan, gen kèk envestigasyon ki te fèt sou anpèchman elastase nan resous alg yo. Dapre done literati yo, polifenol ekstrè nan plant yo konnen yo dwe fò elastaz ak inhibiteur hyaluronidase [66]. Yon etid resan te rapòte ke phlorotannins yo, ki kalite tanen nan alg mawon, ekstrè nan lanmè varech bisiklèt Eisenia, ak alg mawon Ecklonia cava, benefisye po a lè yo diminye aktivite elastase siyifikativman [67]. Ekstrè A.esculenta yo te pwodwi nan etid sa a te montre valè TPC ak TFC ki pi wo yo an konparezon ak lòt espès yo etidye (Tablo 4), kidonk sa a ta ka rezon ki fè ekstrè akeuz ki soti nan P. palmaria ak U. Lactuca pa t montre anti- aktivite elastase. Pou konfime ipotèz sa a, yo te fè yon analiz korelasyon Pearson, ki sijere ke aktivite anti-enzymatik yo pozitivman korelasyon ak kontni an nan sibstans fenolik (gade yon diskisyon plis nan Seksyon 2.6.Korelasyon ant konpoze chimik ak pwopriyete byoaktif).

2.5.3. Aktivite Anpèchman Tirozinaz

Ekstrè A.esculenta te montre pozitif anpèchman tirozinaz pi wo pase 90 pousan pou tout metòd ekstraksyon yo itilize, pandan y ap ekstrè P.palmaria ak U. Lactuca pa t montre efè inhibition tirosinaz (Tablo 4). Sepandan, aktivite anti-tirozinaz ekstrè A.esculenta pa t diferan (p<0.05) with="" extraction="" methods.="" comparing="" the="" effect="" of="" a.esculenta="" extracts="" with="" the="" quercetin="" solutions="" tested,="" the="" crude="" extracts="" of="" the="" brown="" algae="" showed="" better="" inhibitory="" activities="" than="" these="" solutions(88="" and75%="" for="" the="" 0.5="" and="" 1="" mm="" quercetin="" solutions,="" respectively).="" based="" on="" the="" literature,anti-tyrosinase="" activities="" of="" plants,="" bacteria,="" and="" fungi="" have="" been="" reported="" by="" several="" researchers="" i68i.="" however,="" though="" different="" studies="" suggest="" that="" bioactive="" compounds="" derived="" from="" marine="" algae="" have="" a="" good="" potential="" to="" be="" utilized="" as="" skin="" whitening="" agents="" [13],="" this="" is="" still="" an="" unexplored="" domain="" and="" only="" a="" few="" studies="" have="" been="" carried="" out.="" most="" of="" the="" studies="" performed="" in="" this="" area="" have="" been="" focused="" on="" brown="" algae,="" agreeing="" with="" the="" results="" of="" the="" present="" study="" in="" which="" a.esculenta="" extracts="" exhibited="" the="" best="" anti-tyrosinase="" activities.="" for="" instance,="" phloroglucinol="" derivatives="" and="" phlorotannins,="" common="" secondary="" metabolites="" found="" in="" brown="" algae,="" have="" shown="" inhibitory="" activity="" against="" tyrosinase="" due="" to="" their="" ability="" to="" chelate="" copper="" [69].="" in="" a="" recent="" study,="" the="" extract="" of="" the="" brown="" algae="" lessonia="" trabeculate="" produced="" by="" microwave-assisted="" extraction="" inhibited="" a="" tyrosinase="" activity="" of="" 33.73%[60].in="" another="" study,="" the="" extract="" of="" the="" brown="" algae="" turbinaria="" conoides="" showed="" activity="" as="" an="" antioxidant="" and="" tyrosinase="" inhibitor,="" however,="" in="" this="" case,="" ethanol="" was="" used="" as="" solvent="" [70].="" a="" significant="" correlation="" between="" the="" inhibitory="" potency="" of="" polyphenols="" extracted="" from="" plants="" on="" mushroom="" tyrosinase="" has="" been="" reported="" in="" previous="" studies="" [68].="" likewise,="" the="" results="" of="" this="" study="" suggest="" that="" the="" inhibitory="" activity="" towards="" tyrosinase="" was="" positively="" correlated="" with="" flavonoid="" and="" phenolic="" content="" (see="" section="" 2.6.="" correlations="" between="" chemical="" compounds="" and="" bioactive="">

cistanche แอ ม เว ย์

Tirozinaz jwe yon wòl enpòtan nan byosentèz pigman melanin nan po a. Melanin responsab pou pwoteksyon kont iradyasyon iltravyolèt danjere, ki ka lakòz plizyè kondisyon patolojik [71]. Anplis de sa, li ka kreye pwoblèm ayestetik lè melanin akimile kòm tach hyperpigmented [72]. Kidonk, enkòpore inibitè tirozinaz nan pwodui kosmetik ka atire akòz blanchiman ak oswa efè eklèsi.

2.5.4. Aktivite Anpèchman Hyaluronidase

Tout ekstrè alg yo montre siyifikativman wo aktivite anti-hyaluronidase (Tablo 4), ki montre rezilta konparab ak solisyon asid tannik yo (yon inibitè byen li te ye nan hyaluronidase). Espesyalman, ekstrè A.esculenta te montre 100 pousan nan anpèchman pou tout metòd yo teste. Anplis, U. Lactuca extraits ekspoze aktivite ki pi wo pase 90 pousan nan anpèchman, kote anpèchman nan ekstrè yo ki te pwodwi pa PEF(96.8 pousan o) ak konbinezon an nan PEF plis HW (97.3 pousan) te pi wo pase anpèchman ki te pwodwi pa cho tradisyonèl la. metòd dlo 93.4 pousan )(p<0.05). all="" p.palmaria="" extracts="" exhibited="" similar=""><0.05), the="" inhibition="" of="" the="" extracts="" produced="" by="" pef="" was="" (91.9="" %)and="" the="" combination="" of="" pef+hw="" (89.5%)="" and="" the="" traditional="" hot="" water="" method="">

Lòt otè te dekri tou aktivite anti-hyaluronidase nan diferan ekstrè alg, espesyalman ekstrè rich nan phlorotannins soti nan alg mawon [73,74]. Sepandan, nan pi bon nan konesans nou an, sa a se premye fwa ke aktivite inhibition hyaluronidase nan P.palmata ak U. Lactuca ekstrè ki te pwodwi pa PEF yo te rapòte.

Asid yaluronik se yon eleman enpòtan nan dèrm la, kote li enplike nan reparasyon tisi, li kraze ak aje, sa ki lakòz ondilasyon ak pèt nan fèm po. Nan sans sa a, inibitè hyaluronik ogmante nivo asid hyaluronik nan matris la po ekstraselilè pou amelyore aparans nan po figi aje [13].sistanchSe poutèt sa, rezilta yo nan etid sa a ta ka louvri nouvo avni pou eksplwatasyon an nan inibitè natirèl hyaluronidase soti nan resous alg ak itilizasyon potansyèl nan pwodwi kosmetik.

An rezime, done yo te rasanble pèmèt nou konkli ke ekstrè A.esculenta te montre an jeneral pi bon aktivite inhibition pase P.palmaria ak U.lactuca nan direksyon anzim yo teste. Kidonk, yo te espès alg ki pi pwomèt ak ekselan aktivite anti-enzymatik ak Se poutèt sa li te chwazi pou plis etid nan laboratwa nou an. Malgre ke ekstrè brit soti nan A. esculenta parèt yo dwe bon kandida pou eksperyans nan vitro, plis etid bezwen yo dwe te pote soti nan elicide idantite a nan metabolit yo ki responsab pou efè byolojik sa yo.

2.6.Correlations ant konpoze chimik ak pwopriyete byoaktif

Rezilta yo nan analiz prensipal eleman (PCA), te montre ke separasyon prensipal la nan gwoup yo te defini pa PC1 ak PC2, ki matirite pou 71.9 pousan nan ak 14.5 pousan nan divèjans nan done yo, respektivman (Figi 2). Ekstrè yo A.esculenta yo te karakterize pa sa ki pi wo nan flavonoid ak konpoze fenolik, efè inhibition sou anzim (kolagenase, tirozinaz, ak elastase), ak valè DPPH ak FRAP, pase lòt espès yo, P. palmata, ak U.lactuca. Nan lòt men an, A.esculenta te gen pi ba kontni idrat kabòn, espesyalman konpare ak P. palmitate (ki te sitiye nan bò opoze a nan PC1 la). Varyasyon nan done ansanm PC2 a te sitou ki gen rapò ak ABTS ak anpèchman hyaluronidase. Kòm endike nan kote a sou trase a, P. palmitate te gen yon korelasyon pi fò ak ABTS tandiske U.lactuca te gen plis ki gen rapò ak efè anpèchman hyaluronidase, an konparezon ak de espès sa yo.

Yon gwo ak enpòtan korelasyon pozitif ant TPC, TFC, DPPH, FRAP, ak efè inhibition sou kolagenaz, elastase, ak tirozinaz te demontre pa analiz korelasyon Pearson (Tablo 5).

konbyen cistanche pou pran

Sa a te nan yon akò ak etid anvan yo, rapòte ke konpoze fenolik (ki gen ladan flavonoid) se kontribitè prensipal yo nan aktivite antioksidan divès alg [75-77]. Aktivite antioksidan segondè nan ekstrè soti nan makroalg mawon te gen rapò ak yon gwoup espesifik nan polifenol, phlorotannins, ak estrikti inik molekilè yo. Yo rapòte ke Phlorotannis soti nan alg mawon yo gen jiska uit bag fenol konekte ki aji kòm pyèj elèktron [78,79]. Li te espere ke ABT yo ta korelasyon ak TPC ak lòt paramèt antioksidan. Rezon posib yo ta ka ke metòd yo baze sou kondisyon reyaksyon diferan e ke reyaksyon diferan tou de konsènan tan ak seri a nan eleman. Pou egzanp, ABTSreagent reyaji ak yon seri pi laj nan antioksidan pase radikal la DPPH [80]. Nan lòt men an, youn nan limit yo mansyone pou ABTS se yon reyaksyon long ak tan an reyaksyon jeneral ka pa pèmèt rive nan yon pwen final.

Rezilta yo endike ke gen yon gwo korelasyon pozitif ant TPC ak TFC nan aktivite inhibition kolagenaz, elastase, ak tirozinaz ({{0}}.93-0.99), tandiske relasyon an nan anpèchman. nan hyaluronidase pa t 'tankou fò (r=0.42 ak 0.54, respektivman). Sa a endike ke lòt konpozan ka kontribye nan efè a inhibition nan ekstrè yo. Lòt etid te rapòte ke polisakarid gen aktivite hyaluronidase-inhibitory, pou egzanp, asid aljinik nan alg mawon [81,82]. Plis etid sou konpozisyon chimik espès makroalg yo pou efè konpoze izole yo sou anzim la nesesè pou evalye kontribisyon chak eleman chimik tankou nan etid sa a konsantre sou ekstrè brit. Konklizyon yo te ann amoni ak etid anvan yo, ki deklare ke konpozisyon chimik la ak nivo byoaktivite ekstrè yo varye anpil ant twa linyon yo (wouj, vèt, ak alg mawon) ak ant diferan espès ki fè pati menm filòm epi yo enfliyanse pa laj. ak kalite tisi. Anplis de sa, konpozisyon ak karakteristik yo depann de anpil faktè anviwònman ki afekte distribisyon ak kwasans makroalg yo. Pou egzanp, limyè (radyasyon UV), tanperati, disponiblite eleman nitritif, ekspoze a lè, mouvman dlo, ekspoze vag, ak salinite. Tanperati a te dekri kòm faktè ki gen efè ki pi fò sou fòmasyon pigman ak konsantrasyon eleman nitritif, salinite, ak radyasyon UV kòm faktè ki enfliyanse konsantrasyon TPC [83].

Distribisyon diferan espès makroalg varye selon pwofondè dlo. Pozisyon ki pi wo sou rivaj la nan zòn entèrtid oswa littoral yo gen plis estrès paske espès k ap grandi la yo dwe kenbe tèt ak plizyè chanjman nan faktè abyotik akòz chanjman mare yo. Pou egzanp, efè a siye nan lè a, gwo irradiances solè (nan mare ba), chanjman nan salinite ak tanperati, ak, nan kondisyon nan tanperati lè ki ba, ki gen ladan lè w konjele. Anba mak dlo ki ba a, ogmante pwofondè rezilta nan yon diminisyon trè rapid nan entansite limyè ak mwens ekspoze a irradiance.

ki sa ki yon cistanche

Alg k ap grandi nan ranje mare yo gen pi ba sansiblite nan radyasyon UV epi refè pi rapid nan estrès solè. Lè nou konsidere ke alg k ap grandi nan zòn sublitoral yo pi sansib a radyasyon UV epi yo gen pi ba rekiperasyon nan estrès solè [84]. An menm tan an, kolòn dlo a bay pwoteksyon. Nan etid la prezan, ekspoze a limyè solèy la te prezimableman pi fò pou P. palmitate, konpare ak lòt espès yo. Lòt etid yo montre ke fòmasyon MAA yo dirèkteman gen rapò ak limyè solèy la [85], pwoteje òganis yo kont UV-A ak UV-B radyasyon. Anplis, li te montre ke kantite espesifik MAAs diminye ak ogmante pwofondè kolekte. Varech tankou A.esculenta, yo konnen yo grandi nan zòn sublitoral anwo a, men tou pwolonje nan entèrtid ki pi ba jis anlè mak dlo ki ba a. Sa vle di kolòn dlo a bay pi fò pwoteksyon pase pou P. palmitate. Anplis de sa, karakteristik mòfolojik yo diferan, lam A.esculenta yo pi epè konpare ak de lòt espès yo. UI. lactuca, ap grandi sitou nan entèrtid la ak sublitoral se kapab fotosentèz ak grandi anba irradiances ki ba anpil. Te ekspoze a UVB limyè yo te deklare akselere rekiperasyon an nan paramèt fotosentetik nan U.lactuca soti nan efè negatif nan UVA limyè. Li pi piti, pi senp nan estrikti, epi li pi kout (3 mwa) pase tou de A.esculenta (5-7 ane) ak P. palmata ki gen yon nouvo kwasans chak ane.

An rezime, sipozisyon yo ka trase ke diferans prensipal yo nan pwopriyete yo nan ekstrè yo se varyasyon nan dire lavi, karakteristik mòfolojik, ak kondisyon kwasans nan espès alg yo.

3. Materyèl ak Metòd

3.1. Materyèl

Alg Icelandic U.lactuca (alg vèt), A.esculenta (alg mawon), ak P. palmitate (alg wouj) te bay pa Icelandic Blue moules ak alg, ki rekòlte move zèb nan Breidafjordur (West-Island).Apre rekòlte. alg yo te seche (a apeprè 90 pousan materyèl sèk), moulen, epi yo te lage vakyòm chaje. Yo te kenbe echantiyon yo nan yon kote ki sèk ak nwa nan tanperati chanm jiskaske yo itilize yo.

Tirozinaz ki soti nan djondjon, L-3,4-dihydroxyphenylalanine (L-DOPA), elastaz ki soti nan pankreyas porsin, asid ascorbic, N-Succinyl-Ala-Ala-Ala-p-nitroanilide (AAPVN), hyaluronidase soti nan tèstikul bèf, quercetin, a-tokoferol, asid tannik, 2,2-diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH), 2.4,6-Tripyridyl-s-Triazine (TPTZ), Trolox, Folin- Yo te achte reyaktif Ciocalteu, asid galik, ak yon twous tès kolorimetrik aktivite kolajnaz (MAK293) nan men Sigma-Aldrich Co. (St. Louis, MO, USA). Sèl sodyòm asid hyaluronik te achte nan men MakingCosmetics (Redmond, WA, USA). Tout lòt pwodui chimik ak reyaktif yo te itilize yo te klas analyse epi yo te jwenn nan VWR International, LLC. Dlo deyonize (Elix Essential, Merck, Darmstadt, Almay) te itilize pou fè ekstraksyon ak preparasyon solisyon ki baze sou dlo.

3.2.Experimental Design

Yo te itilize yon konsepsyon faktori pou evalye efè espès alg Icelandic (U. Lactuca, A. esculenta, P. palmitate) ak tretman ekstraksyon (ekstraksyon dlo cho (HW, 95 degre), PEF-assisted extraction (PEF) ak konbinezon an. nan tou de teknik (PEF plis HW), sou konpozisyon ekstrè ak byoaktivite (Tablo 6) Ekstraksyon an te pote soti nan triple pou chak gwoup ak chak replike ekstrè analize an triple.

bioflavonoid

3.3. Ekstraksyon nan byoaktif soti nan alg yo Icelandic

Eksplwatasyon biomass makroalgal nan diferan nivo te motive syantis yo pou yo eksplore teknik ekstraksyon ki pi zanmitay ekolojik, efikas ak pri-efikas, ki baze sou apwòch ekstraksyon vèt. Nan travay sa a, yo te evalye ekstraksyon ki ede PEF kòm yon metòd roman ak vèt pou pwodwi ekstrè fonksyonèl, pandan y ap tradisyonèl ekstraksyon dlo cho te itilize pou konparezon. Anplis, efè a nan konbinezon an nan tou de teknik, PEF tretman nan macroalgae ki te swiv pa tradisyonèl ekstraksyon nan dlo cho, sou rekiperasyon an byoaktif te etidye. Akòz elektwoporasyon espere ki pwodui nan manbràn selilè yo apre tretman fizik la, ekstraksyon sa a ak dlo cho te kapab plis fasilite liberasyon materyèl entraselilè [86], ogmante jaden ekstraksyon an. Yon tan apre tretman nesesè pou materyèl yo gaye soti nan selil yo [87,88], ak nan eksperyans sa a, sispansyon yo te tann lannwit lan jiskaske separasyon likid (ekstrè) nan kaka a.

Konsènan mwayen ekstraksyon, dlo distile yo te itilize pou pwodui ekstrè alg yo pou simonte limit konsènan itilizasyon toksik ak solvang òganik yo. Dlo te pwouve li se yon bon sòlvan pou fè ekstraksyon plizyè konpoze bioaktif nan alg [46,89-91], epi li zanmitay anviwònman an. Anplis de sa, dlo se souvan itilize pou PEF-asistans ekstraksyon kòm li se yon bon kondiktè pou elektrisite.

3.3.1. Pwosedi Ekstraksyon

Pou chak replike nan chak gwoup, alg (15 g) yo te tranpe lannwit lan nan tanperati chanm (22 degre) nan dlo deyonize (300 mL). Lè sa a, sispansyon an te trete ak PEF (PEF), chofe (HW), oswa tou de PEF-trete ak chofe (PEF plis HW). Sispansyon yo te kenbe lannwit lan nan yon frijidè ki te swiv pa filtraj ak yon papye filtre koryas (20 um). Lè sa a, filtraj yo (ekstrè) yo te estoke nan 4 degre jiskaske analiz yo.

Te fè ekstraksyon enpulsyonèl ak asistans nan jaden elektrik te pote soti lè l sèvi avèk yon dèlko batman kè bati nan kay la. Li te gen yon kondansateur FuGHCK-200-2000 (Fu.G.Elektronik GmbH, Rosenheim, Almay) ak espas etensèl (18.5 kV OG75, Perkin-Elmer Optoelectronics, GMBH, Wiese-baden, Almay). Ekipman PEF a te pwodwi pulsasyon eksponansyèl dekonpozisyon ak yon lajè 0.96 us ak yon anplitid 18 kV. Yon chanm tretman plexiglass ak dimansyon yo (L × H × W) 20 × 8 × 2.5 cm, ak distans ki pi kout la ant elektwòd plak yo te itilize pou trete sispansyon yo ak yon jaden elektrik 8 kV / cm nan 1.2 Hz pou 10 min. . Ekstrè HW yo te prepare nan chofe sispansyon an nan yon bèk nan yon beny dlo thermostatique epi kenbe nan 95 degre pou 45 min. Pou konbine jaden elektrik enpulsyonèl la ak tretman chofaj, sispansyon yo te trete PEF ak Lè sa a, mete yo nan yon bèk, chofe nan yon beny dlo, epi kenbe nan 95 degre pou 45 min.

3.3.2. Kondiktif, pH, ak Mezi Tanperati

Yo te mezire konduktiviti elektrik ak pH nan sispansyon alg apre yo fin tranpe ak apre tretman ekstraksyon yo, nan tanperati chanm, lè l sèvi avèk yon mèt pH (Orion StarTM A215 pH/Conductivity Benchtop Meter, Thermo Scientific, Waltham, MA, USA) ekipe ak yon Capteur konduktivite. ak pH/ARC triode konbinezon elektwòd. Anplis de sa, chanjman tanperati akòz tretman yo te anrejistre.

3.4. Spectral pwofil nan ekstrè yo alg

Spectre absòpsyon UV-VIS nan ekstrè diferan alg yo te mezire nan ranje 200 a 450 nm lè l sèvi avèk yon gwo bout bwa Thermo Scientific Evolution 350 UV-Vis Spectrophotometer(Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA, USA) ak 1 cm kuvèt kwatz. Yo te fè twa analiz pou chak ekstrè alg.

3.5. Detèminasyon kontni total polifenolik

Kontni total fenolik (TPC) nan ekstrè alg yo te detèmine lè l sèvi avèk reyaktif Folin-Ciocalteu apre yon metòd yon ti kras modifye dekri pa Zhang [92] lè l sèvi avèk yon espektwofotomètr Multiskan Sky Microplate (Thermo Fisher Scientific, Waltham, MA USA). 20 μL nan ekstrè alg oswa seri solisyon estanda yo te melanje ak 100 μL nan reyaktif Folin-Ciocalteu (10 pousan nan dlo distile). Apre 5 min, yo te ajoute 80 μL nan 7.5 pousan (/w) solisyon kabonat sodyòm. Melanj reyaksyon an te ajoute. enkubasyon nan tanperati chanm ak fènwa pou 30 min.Absorbans mezire nan longèdonn 760 nm.Dlo distile te itilize kòm vid.Yon koub estanda asid galik yo te itilize pou detèmine kontni fenolik total la epi eksprime kòm ug ekivalan asid galik（ GAE）pa gram materyèl sèk (ug GAE/g do).

3.6. Detèminasyon Kontni Flavonoid Total

Kontni total flavonoid (TFC) nan ekstrè alg yo te detèmine pa metòd ki dekri pa Kamtekar 【93】 ak adapte a 96-byen mikroplak yo. Yon ti tan, yo te melanje yon volim 25 μL nan ekstrè alg oswa seri solisyon estanda ak 100 μL nan nitrite sodyòm (0.375 pousan w/o). Apre 5 min, 25 μLof klori aliminyòm (3 pousan w/o) te ajoute nan melanj lan epi enkube pou 6 min nan tanperati chanm. Lè sa a, 100 μL idroksid sodyòm (2 pousan w/ø) te ajoute nan melanj lan epi melanje. Menm lè a, yo te mezire absorbans nan longèdonn 510 nm. Yo te itilize dlo distile ak etanòl kòm vid. Yo te itilize yon koub estanda nan quercetin (fonn nan etanòl) pou detèmine kontni fenolik total la epi eksprime kòm ug nan ekivalan quercetin (QE) pou chak gram materyèl sèk (ug QE / g do). 3.7.Detèminasyon Kontni idrat kabòn

Yo te mezire kontni sik gratis dapre metòd [94] ki dekri a, ak ti modifikasyon. Yon 50 μL solisyon fenol (4 pousan) ak 250 μL asid silfirik (96 pousan) yo te ajoute nan 100 μL echantiyon oswa solisyon estanda. Apre 10 min enkubasyon nan tanperati chanm, yo te li absòbe melanj lan nan 490 nm. Yo te itilize yon koub estanda glikoz pou detèmine kontni total idrat kabòn epi eksprime kòm mg ekivalan glikoz (GluE) pou chak gram materyèl sèk (mg GluE/g fè).

3.8. Pwopriyete antioksidan nan ekstrè alg

3.8.1.2,2 Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) Esè pou elimine radikal gratis

Aktivite antioksidan (DPPH) nan ekstrè alg yo te detèmine apre metodoloji ki dekri deja 【94】 ak kèk modifikasyon. Yon ti tan, 200 μL nan 10.825 × 10-5 M DPPH solisyon te ajoute nan 100 uL echantiyon (1:1 nan metanol) nan yon plak 96-byen. Menm volim DPPH te melanje ak 50μL estanda plis 50μL metanol. Lè sa a, echantiyon yo ak estanda yo te enkube nan yon kote ki fè nwa nan tanperati chanm pou 30 min. Absorbans la te mezire nan longèdonn 517 nm. Dlo distile te itilize kòm yon vid. Kapasite pou retire radikal DPPH la te kalkile lè l sèvi avèk ekwasyon sa a: kote kontwòl se absòbe kontwòl la (solisyon DPH san echantiyon), echantiyon A se absòbe echantiyon tès la (solisyon DPPH plis echantiyon tès la), ak A. Echantiyon vid se absorbans echantiyon an sèlman (echantiyon san solisyon DPPH) ak vid Amethanol se absorpsyon metanol sèlman. Antioksidan komèsyal (asid ascorbic, asid galik, ak -tokoferol) yo te itilize kòm kontwòl pozitif.

3.8.2.Ion Ferrik Diminye Antioksidan Pouvwa (FRAP) Assay

Aktivite FRAP te mezire selon metòd Benzie ak Strain [95]. Yon ti tan, acetate tanpon (300mM,pH3.6),2.4,6-tripyridyl-s-triazine (TPTZ) 10mM nan 40mMHCl, ak FeCl; 6H-O (20 mM) yo te melanje nan rapò 10:1 pou jwenn reyaktif FRAP k ap travay la. Te melanj reyaksyon an enkube nan 37 degre pou 10min. A50 μL echantiyon ki soti nan chak ekstrè te melanje ak 150 μL nan solisyon FRAP k ap travay pou 8 min nan tanperati chanm. Absorbans pwodwi ki gen koulè pal, Ferrous-TPTZ te mezire nan longèdonn 593 nm. Valè FRAP nan ekstrè alg yo te eksprime kòm uM nan ekivalan Trolox (TE) pou chak gram materyèl sèk.

3.8.3.2,2 Azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6-sulfonic asid)(ABTS) Assay

Analiz la te fèt lè l sèvi avèk pwotokòl dekolorizasyon ABTS [76] ak kèk modifikasyon. Yon kation radikal ABTS (ABTS plis) te pwodwi lè yo reyaji ABTS (66mg) ak 1 0 mL solisyon persulfat potasyòm (2.45 mM). Yo te kite melanj lan nan fè nwa nan tanperati chanm pou 12-16 èdtan anvan ou itilize. Solisyon ABTS plus la te dilye ak dlo nan yon absorpsyon 0.700 nan 734 nm. Te melanj reyaksyon an (200 ul) transfere nan yon microplate, 50 μL nan echantiyon an te ajoute ak Lè sa a, 150 μL nan solisyon an reyaktif. Plak la te souke pou 10 s nan vitès mwayen, epi yo te mezire absorbans nan 734 nm apre 5 min nan enkubasyon nan tanperati chanm. Yo te prepare yon koub estanda pa trase anpèchman A734nm nan estanda Trolox kòm yon fonksyon nan konsantrasyon yo. Valè kapasite antioksidan ekivalan Trolox (TEAC) echantiyon yo te kalkile lè l sèvi avèk ekwasyon ki te jwenn nan regression lineyè koub estanda ki ranplase valè A734nm pou chak echantiyon:

3.9. Aktivite anti-enzymatic nan Ekstrè alg

3.9.1. Esè anpèchman kolagenaz

Yo te itilize yon twous tès kolorimetri aktivite kolagenaz (MAK293), ki te achte nan men Sigma-Aldrich, pou detèmine anpèchman kolagenaz nan ekstrè alg. Twous la mezire aktivite kolagenaz lè l sèvi avèk yon peptide sentetik (FALGPA) ki imite estrikti kolagen an. Pwosedi a te fèt dapre enstriksyon yo pou twous yo.

3.9.2. Elastase anpèchman tès

Anpèchman elastase ekstrè alg yo te envestige nan solisyon tanpon TRIS ak metòd modifye jan sa dekri pi bonè 【96】. Yon ti tan, 1 00 μL nan solisyon 0.1 M TRISbuffer (pH8.0), 25 μL elastaz (1 U/mL nan tanpon TRIS) ak 25μL ekstrè echantiyon yo te melanje ak enkube pou 15 min nan 30 C anvan ou ajoute substra a kòmanse reyaksyon an. Apre tan enkubasyon, yo te ajoute 50μL nan 2 mM solisyon AAAPVN. Lè sa a, absòbe a nan 420 nm te kontwole pou 20 min lè l sèvi avèk yon lektè microplate anba yon tanperati konstan nan 30 C. Finalman, anpèchman elastase yo te kalkile nan pousantaj lè l sèvi avèk ekwasyon an: kote Abs kontwòl se absòbe nan tès la lè l sèvi avèk tanpon an olye pou yo. inhibitor(echantiyon) ak Absmpleis absòbe nan ekstrè echantiyon yo. Quercetin te itilize kòm yon kontwòl pozitif. Tris tanpon te itilize kòm vid.

3.9.3. Egzamen anpèchman tirozinaz

Yo te fè tès inhibiteur tirozinaz dapre metòd 【66】 ki te deja dekri ak L-DOPA kòm substra. Yon 20 μL echantiyon an, 10 μL solisyon tirozinaz djondjon (50 U/mL nan tanpon fosfat), ak 80 μL tanpon fosfat （pH =6.8) yo te melanje nan yon mikroplak ak pre-enkube nan 37C pou 5 min. Apre sa, yo te ajoute 90 uL L-DOPA (2 mg/mL). Yo te kontwole fòmasyon dopachrome imedyatman pou 20 minit nan 475 nm nan yon lektè microplate anba yon tanperati konstan 37 degre. Anpèchman an pousantaj nan anzim tirosinaz te kalkile lè l sèvi avèk ekwasyon an: kote Abs kontwòl se absòbe nan tès la lè l sèvi avèk tanpon an olye pou yo inibitè (echantiyon) ak Yon echantiyon se absòbe nan ekstrè echantiyon yo. Quercetin te itilize kòm yon kontwòl pozitif. Yo te itilize tanpon fosfat kòm vid.

3.9.4. Hyaluronidase anpèchman tès

Aktivite inhibitor Hyaluronidase te mezire jan [66] te dekri anvan ak kèk modifikasyon. Yon volim 100 ulof tip-1-Sbovine testicules hyaluronidase（2100 U/mL）fonn nan 0.1 M tanpon acetate (pH 3.5) te melanje ak 100 μL ekstrè ak enkubasyon nan 37 degre pou 20 min. Yo te ajoute yon volim 200 μL 6mM nan klori kalsyòm nan melanj reyaksyon an, ak Lè sa a, melanj lan te enkube nan 37 degre C pou 20 min. Sa a Ca2 plis aktive hyaluronidase te trete ak 250 uL nan hyaluronate sodyòm (1.2 mg / mL) fonn nan 0.1 M tanpon acetate (pH 3.5) ak Lè sa a, enkube nan yon beny dlo nan 37 degre pou 40 min. Yon 50 μL nan idroksid sodyòm 0.9 M ak 100 μL nan 0.2 M sodyòm borat yo te ajoute nan melanj reyaksyon an ak Lè sa a, enkube nan yon beny dlo bouyi pou 5 min. Apre refwadisman nan tanperati chanm, yo te ajoute 250 uL solisyon p-dimethylaminobenzaldehyde (DAMB) nan melanj reyaksyon an. Solisyon DAMB la te prepare pa fonn 0.25 g DAMB nan 21.88 mL 100 pousan asid acetic ak 3.12 ml asid 10N asid. Gwoup kontwòl la te trete ak 100 μL nan 5 pousan nan dlo olye pou yo ekstrè. Yo te mezire absorpsyon an nan longèdonn 585 nm apre 45 min. Anpèchman anzim pousantaj yo te kalkile lè l sèvi avèk ekwasyon sa a: kote Abs kontwòl se absorpsyon nan tès la lè l sèvi avèk tanpon an olye pou yo inibitè (echantiyon) ak echantiyon Abs se absorpsyon nan ekstrè echantiyon yo. Yo itilize asid tannik kòm yon estanda referans.

3.10.Estatistik analiz

Mwayèn nan analiz la triple nan chak ekstrè yo te kalkile epi itilize yo jwenn valè yo mwayèn ak devyasyon estanda pou chak gwoup (n=3). Modèl lineyè jeneral (GLM) pou faktè fiks yo te aplike pou evalye efè prensipal yo ak entèraksyon de-fason nan faktè eksperimantal yo (espès ak metòd ekstraksyon) sou varyab mezire. Anplis de sa, yo te itilize ANOVA ak tès Tukey-Kramer pou idantifye siyifikatif (p<0.05)differences between="" the="" groups.="" pearson="" correlation="" was="" used="" to="" evaluate="" linear="" relationships="" between="" the="" variables.="" principal="" component="" analysis="" (pca)="" was="" used="" to="" detect="" structure="" in="" the="" relationship="" between="" measured="" variables="" and="" experimental="" factors.="" the="" pca="" reduces="" voluminous="" data="" to="" a="" small="" set="" of="" linear="" combinations="" of="" related="" variables(i.e.,="" factors)="" based="" on="" patterns="" of="" correlation="" among="" the="" original="" variables.="" the="" resulting="" linear="" attribute="" combinations="" can="" be="" used="" for="" profiling="" specific="" product="" characteristics="" based="" on="" the="" variables="" studied.="" all="" statistical="" analyses="" were="" performed="" using="" ncss="" 2020="" statistical="" software="" (2020)="" (ncss,="" llc.,="" kaysville,="" ut,="">

4. Konklizyon

Rezilta yo nan premye eksperyans tès depistaj sa a te montre potansyèl twa espès alg Icelandic nan bay efè benefisye efikas atravè plizyè chemen. Apwòch vèt la devlope lè l sèvi avèk akeuz jaden enpulsyonèl elektrik ekspoze rezilta menm jan ak ekstraksyon tradisyonèl dlo cho a, ki montre plizyè avantaj tankou nati ki pa tèmik li yo ak pi kout tan ekstraksyon (10 min vs 45 min). Pami twa espès alg yo, makroalg mawon A.esculenta te montre kontni ki pi wo nan TPC ak TFC tou ki montre pi gwo kapasite antioksidan Anplis, ekstrè dlo A.esculenta montre pi bon aktivite inhibition pase P. palmaria ak U. Lactuca nan direksyon kolagenaz, elastase, tirozinaz, ak hyaluronidase yo se espès alg ki pi pwomèt ak ekselan aktivite anti-enzymatik pou itilize yo nan blanchiman po, anti-aje ak sante po. Enteresan, ekstrè yo A.esculenta ki te pwodwi pa metòd la PEF te montre yon anpèchman kolagenaz nan 91 pousan, pi wo pase aktivite a anpèchman yo montre nan ekstraksyon nan dlo cho tradisyonèl e menm pi wo pase inibitè a bay nan twous komèsyal la. An konklizyon, etid preliminè nou an sijere ke ekstrè ki baze sou alg Icelandic, espesyalman ekstrè yo soti nan makroalg mawon A. esculenta, ki te pwodwi pa akeuz enpulsyonèl jaden elektrik-asistans ekstraksyon yo se engredyan potansyèl fonksyonèl ki ta ka itilize kòm konpoze aktif pou fòmilasyon kosmetik ak kosmetik. nan fiti prè.

Atik sa a soti nan Mas Medikaman 2021, 19, 662. https://doi.org/10.3390/md19120662 https://www.mdpi.com/journal/marinedrugs