Paramèt ekstraksyon ak metòd siye nan Cistanche Deserticola

Cistanche se Cistanche deserticola YC Ma orCistanche tubulosa (Schenk) Wighttij chèch chèch ak fèy kal nan plant OrobanchiaceaeCistanche deserticola YC Ma[1]. Prensipal engredyan aktif nan Cistanche deserticola se glikozid feniletanòl [2-4]. Etid farmakolojik yo te montre ke li gen fonksyon yo nanafrodizyak, amelyore iminite, epiamelyore memwa[4-9].

Nan dènye ane yo, metodoloji sifas repons yo te lajman itilize nan ekstraksyon medikaman tradisyonèl Chinwa [{{0}}]. Metòd sifas repons lan gen avantaj nannan nan presizyon deteksyon segondè, mwens kantite eksperyans ki nesesè, prediksyon egzat nan modèl fonksyon, ak kapasite pou reflete relasyon ki genyen ant faktè ak valè prevwa [15-17]. Se poutèt sa, eksperyans sa a sèvi ak nòt konplè nan kontni an nan senk glikozid phenylethanol kòm valè repons lan, epi li sèvi ak lojisyèl Design-Expert 8.0.6.1 pou konsepsyon eksperyans lan, optimize pwosesis ekstraksyon Cistanche deserticola, epi bay enfòmasyon pou idantifikasyon ak etablisman estanda kaliteCistanche deserticola.

Kounye a, endèks lakonpozan echinaceaside ak verbascosidese sijè rechèch cho nan fè ekstraksyon ak pwosesis teknoloji nanCistanche deserticola. Edisyon 2015 Pharmacopeia Chinwa a endike ke metòd pwosesis Cistanche deserticola se "retire enpurte, lave, mouye, koupe an tranch epè, epi sèk." [1], pa gen okenn règleman klè sou metòd la siye. Se poutèt sa, eksperyans sa a te itilize uit metòd siye diferan, ki gen ladan siye solèy, siye lonbraj, siye fou (40, 60, 80, 100, 120 degre), ak siye friz, nan pwosesis Cistanche deserticola [18], ki te bay baz teyorik pou la. pwosesis siye nan Cistanche deserticola.

Sou gidans.

EXTRÈ CISTANCHE AK 30% ECHINCAOSIDE

1 Materyèl ak enstriman

Fresh Cistanche deserticola te rekòlte nan mwa Oktòb 2018. Kote ki gen orijin se Mitan Township, Konte Minqin, Baiyin, Pwovens Gansu. Pwofesè Asosye Guo Yehong nan Gansu Agricultural University idantifye li kòm Cistanche deserticola YC Ma, yon tij charnèl ak fèy echèl. Sibstans referans echinaceaside (nimewo pakèt 82854-37-3, fraksyon mas ki pi gran pase oswa egal a 98%), cistancheaside A (nimewo pakèt 93236-42-1, fraksyon mas ki pi gran pase oswa egal a 95%), verbascoside (nimewo pakèt 93236-42-1 {5}}, fraksyon mas ki pi gran pase oswa egal a 98%), izomurabasin (nimewo pakèt 61303-13-7, fraksyon mas ki pi gran pase oswa egal a 98%), 2′-acetyl verbascoside (nimewo pakèt 94492-24-7 , fraksyon mas Pi gran pase oswa egal a 95%) yo te achte nan men Chengdu Pu. Feide Biotechnologie co, Ltd.; asid fòmik ak metanol yo nan klas kwomatografi, Merck Company of Germany; dlo se dlo pirifye, ak lòt reyaktif yo nan klas analyse.

Waters Acquity likid chromatograph, detektè PDA, Empower kwomatografi estasyon travay ak sistèm jesyon sòlvan kwatènè; KQ-100E à cleaner, Kunshan à enstriman co, Ltd.

Konpayi; AL104 balans analyse, Mettler-Toledo Instruments co, Ltd.; LyoQuest-85 seche rad friz, Telstar, Espay.

2 Metòd ak rezilta

2.1 Preparasyon solisyon referans

Jis peze kantite ki apwopriye yo nanechinaceaside, cistancheoside A, verbascoside, isorbascoside, ak estanda referans 2'-acetyl verbascoside, epi ajoute 70% metanol pou fè konsantrasyon mas yo 1.04, 0.61, 0.63, 0.39, ak 0.48 mg / mL nan solisyon referans melanje.

2.2 Kondisyon kwomatografik Cistanche deserticola

Dlo Simetri C18 (250 mm × 4.6 mm, 5 μm); tanperati kolòn 30 degre, koule volim 1.0 mL/min; faz mobil se metanol -0.1% asid fòmik solisyon akeuz, gradyan elisyon: 0 ~ 12 min, 29% ~ 34% Methanol; 12-40 min, 34%-40% metanol; 30-35 min, 40%-35% metanol; 35-40 min, 30% metanol;

1-echinacoside 2-cistanche A 3-verbascoside 4-isoacteoside 5-2′-acetylatteoside

Fig. 1 HPLC referans melanje (A) ak echantiyon C. deserticola (B)

2.3 Preparasyon solisyon tès la

Egzakteman peze 1 g nan poud Cistanche deserticola sèk nan yon flakon Erlenmeyer (pase nan yon 65-si may), ajoute 50 mL nan 50% metanol, peze mas la, ultrasons nan 40 kHz nan 150 W, fre nan tanperati chanm. , ak fè moute mas la jwenn li.

2.4 Ankèt sou relasyon lineyè

Pran {{0}}.1, {{20}}.5, 1, 2, 4, ak 8 mL nan solisyon referans melanje pi wo a nan yon 10 mL flakon volumetrik, epi ajoute 70% metanol nan mak la. Jis trase 10 μL epi mezire selon kondisyon kwomatografik "2.2". Konsantrasyon mas la se absis (X) ak zòn pik la se òdone (Y). Fè regression lineyè ak ekwasyon regresion yo se: Echinase Y=128 049 X -830 189, r=0.999 5, ranje lineyè 10.4~832.0 ug/mL; Cistancheside AY=87 980 -447 963, r＝0.999 8, ranje lineyè 6.3-504.0 ug/mL; Isomurabasin Y＝92 831 Glikozid Y=79 207 X-304 428, r=0.999 4, ranje lineyè 4.8 ~ 384.0 ug/mL.

2.5 Revizyon metodolojik

2.5.1 Enspeksyon presizyon

Pran 20 μL nan solisyon referans melanje nan atik "2.1" epi enjekte 6 fwa kontinyèlman pou mezire zòn pik yo nan echinaceaside, cistancheaside A, verbascoside, isorebascoside, ak 2'-acetylverbascoside. RSD yo se 0.23% respektivman. , {{10}}.71%, 0.59%, 0.41%, 0.29%, ki endike ke enstriman an gen bon presizyon.

2.5.2 Tès repetibilite

Pran 6 pòsyon nan menm echantiyon Cistanche deserticola a, prepare solisyon tès la dapre atik "2.3", enjekte echantiyon an anba kondisyon kwomatografik atik "2.2", epi mezire zòn pik la. Rezilta Fraksyon mas mwayèn echinaceaside, cistancheoside A, verbascoside, isorebascoside, ak 2′-acetyl verbascoside te 1.83%, 0.21%, 2.34%, 0.13%, ak {{15 }}.68% respektivman, ak RSD yo te 1.32 respektivman. %, 0.83%, 1.24%, 2.19%,

0.78%, ki endike ke metòd la gen bon repetibilite.

2.5.3 Tès estabilite

Detèmine estabilite menm solisyon tès la (ki prepare dapre "2.3") nan 0, 2, 4, 8, 12, 24, ak 48 èdtan pou jwenn echinaseaside, cistancheoside A, verbascoside, ak isolebascoside. , 2′-acetyl verbascoside zòn pik, RSD yo te 0.58%, 0.21%, 1.58%, 1.46%, 2.19% respektivman, ki endike ke solisyon tès la te estab nan 48 èdtan.

2.5.4 Egzanp rekiperasyon tès

Pran 1 g nan 6 echantiyon Cistanche deserticola ak kontni li te ye, epi ajoute avèk presizyon yon sèten kantite solisyon referans melanje (Echinaceaside 1.06 mg/mL, Cistancheoside A 0.86 mg /mL, Verbascoside 2.17 mg/mL, Isolebascoside 0.79 mg /mL, 2′-acetyl verbascoside 0.91 mg/mL), ajoute 70% metanol pou fè jiska 50 mL, epi enjekte echantiyon yo dapre kondisyon kwomatografik "2.2". Mwayèn rekiperasyon yo mezire se 101.52%, 99.21%, ak 102.62% respektivman. , 98.62%, 97.36%, RSD yo se 1.64%, 1.95%, 0.87%, 1.59%, 1.13% respektivman, ak pousantaj rekiperasyon echantiyon an bon.

Cistanche se yon zèb tonik byen koni ki ka nouri ak pwoteje ren yo. Nan teyori medikaman tradisyonèl Chinwa, Cistanche se pi bon zèb pou ren.Cistanche se moun rich nan echinacoside, acteoside, ak flavonoids.Sa yo engredyan efikas nan Cistanche ka diminye apoptoz selil ren ak ogmante pwopagasyon selil ren. Se poutèt sa, Cistanche se yon sipleman natirèl nan ren.