Efè ipoglisemi ak ipolipidemi nan glikozid total nan Cistanche Tubulosa nan rejim alimantè / streptozotocin-induit rat dyabèt

Kontakte: Audrey Huaudrey.hu@wecistanche.com

Kuiniu Zhu, et al

REZIME

Enpòtans etnofarmakolojik: Cistanche tubulosa(Schrenk) R. Wight (Orobanchaceae) se yon eleman souvan preskri nan anpil preskripsyon èrbal tradisyonèl ki itilize pou trete dyabèt nan Lachin. Nan etid resan yo, aktivite antidyabetik laCistanchetubulosaekstrè yo te konfime. Sepandan, pa gen okenn envestigasyon sistematik te rapòte sou glikozid total deCistatnche tubulosa(TGCT). Objektif etid la: Etid sa a te vize pou mennen ankèt sou efè ipoglisemi ak ipolipidemi TGCT ak mekanis potansyèl yo nan rat dyabèt rejim alimantè / streptozotocin (STZ) pwovoke, ak chimikman karakterize eleman prensipal yo nan TGCT.glikozid total deCistanchetubulosa).

Materyèl ak metòd:Pi gwo konstitiyan TGCT(glikozid total deCistanchetubulosa)yo te karakterize pa HPLC/Q-TOF-MS epi yo te fè quantification analyse ak HPLC-DAD. Rat dyabetik tip 2 te pwovoke pa yon rejim alimantè ki gen anpil grès ak sikwoz (HFSD) ak yon sèl piki STZ (30 mg / kg). TGCT (50 mg / kg, 100 mg / kg ak 200 mg / kg) oswa metformin (200 mg / kg) yo te administre oralman pou 6 semèn. Pwa kò ak konsomasyon kalori yo te kontwole pandan tout eksperyans la. Jèn glikoz plasma (FPG), tès tolerans glikoz oral (OGTT), zòn ki anba koub glikoz (AUC-G), emoglobin glikozile (HbA1c), ensilin jèn, serik C-peptide, kontni glikojèn, ak endèks sansiblite ensilin. teste. Nivo fosforilasyon pwoteyin kinaz B ak fosforilasyon glikojèn synthase kinaz 3, aktivite hexokinase ak pyruvate kinase yo te teste. Pandan se tan, chanjman ki fèt nan pwofil lipid serom, superoksid dismutase, glutatyon peroksidaz, malondialdehyde, ak faktè enflamatwa yo te mezire. Istolojik pankreyas yo te evalye tou pa tach ematoksilin-eozin la.

Rezilta:Ankèt nou an te revele prezans glikozid phenylethanoid (PhGs): echinacoside (500.19 ± 11.52 mg/g), acteoside (19.13 ± 1.44 mg/g) ak isoacteoside (141.82 ± 5.78 mg/g) nan TGCT.(glikozid total deCistanchetubulosa). Tès farmakolojik yo endike ke TGCT ranvèse siyifikativman pèdi pwa STZ-induit (11.1 pousan, 200 mg / kg); diminye FPG (56.4 pousan, 200 mg / kg) ak HbA1c (37.4 pousan, 200 mg / kg); amelyore OGTT, AUC-G, ak sansiblite ensilin; ogmante kontni glikojèn (40.8 pousan nan fwa ak 52.6 pousan nan misk, 200 mg / kg) ak aktivite yo nan anzim metabolize idrat kabòn; chanjman pwofil lipid reglemante ak aktivite anzim antioksidan; diminye makè serik estrès oksidatif ak enflamasyon nan yon fason ki depann de dòz (p <>

Konklizyon:Etid sa a konfime ke TGCT(glikozid total deCistanchetubulosa) se te yon ajan nitrisyonèl efikas pou amelyore ipèglisemi ak ipèlipidemi nan rejim alimantè / rat dyabèt STZ-induit, ki ta ka lajman atribiye nan aktivite yo nan TGCT.(glikozid total deCistanchetubulosa)sou anpèchman estrès oksidatif ak enflamasyon.

Mo kle:Total glikozid nanCistanche tubulosaTip 2 dyabèt melitus Hypoglycemic Hypolipidemic Anti-oksidan Anti-enflamatwa

1. Entwodiksyon

Dyabèt melitu konsidere kòm yon maladi metabolik, ki karakterize pa ipèglisemi ki soti nan pwodiksyon ensilin andikape oswa / ak rezistans ensilin (IR) (American Diabetes Association, 2019). Ipèglisemi kwonik asosye ak plizyè konplikasyon grav tankou nefropati, retinopati, neropati, ak pwoblèm kadyak (Ekoe, 2019). Kantite moun dyabetik mondyal yo nan 2019 yo estime a 463 milyon dola (9.3 pousan), k ap monte a 578 milyon dola (10.2 pousan) pa 2030 ak 700 milyon dola (10.9 pousan) pa 2045 (Saeedi et al., 2019). Plizyè dwòg tankou metformin (Met, ki ogmante pwodiksyon glikojèn epatik), ensilin (siprime pwodiksyon glikoz ak ogmante itilizasyon glikoz), ak sulfonylureas (estimulasyon selil pankreyas yo pou sekrete ensilin) ​​efikas nan diminye glisemi. Sepandan, anpil reyaksyon negatif endezirab (ki gen ladan pran pwa, ipoglisemi, IR, ak èdèm) te limite itilizasyon yo (Moller, 2001). Pakonsekan, anpil chèchè yo te chèche konpoze byolojik aktif nan ekstrè plant tradisyonèl pou tretman dyabèt pandan ane ki sot pase yo (Kasangana et al., 2019; Liu et al., 2020).

Cistanchetubulosa(Schrenk) R. Wight (Orobanchaceae) te itilize anpil nan medikaman tradisyonèl Chinwa, ki souvan preskri nan fòmil tradisyonèl pou trete deficiency ren, sterilite fi, ak dyabèt melitu (Li et al., 2016; Han et al., 2017). ; Su et al., 2017). Etid resan yo te rapòte ke akeuz ekstrè nanCistanchetubulosate montre efè ipoglisemi ak ipolipidemi nan sourit db/db ki gen dyabèt tip 2 (T2DM) (Xiong et al., 2013), ak amelyore nivo glikoz nan san, IR, ak peroksidasyon lipid nan streptozotocin (STZ)-nikotinamid-induit rat dyabetik ( Kong et al., 2018). Phenylethanoid glycosides (PhGs) se pi gwo constituants deCistanchetubulosa(Morikawa et al., 2014), ki te ekspoze divès aktivite byolojik tankou antioksidasyon (Xue et al., 2017) ak anti-kansè (Fu et al., 2019). Anplis, PhGs siyifikativman inibit ogmantasyon nan nivo glikoz nan san apre pran nan sourit ki chaje lanmidon (Morikawa et al., 2014), siprime kotransporter glikoz ki depann de sodyòm 1-medyatè absorption glikoz nan selil epitelyal entesten (Shimada et al., 2017), ak anpeche aktivite aldoz reduktaz nan lantiy rat (Morikawa et al., 2019). Sepandan, pa gen okenn rechèch anvan te envestige aktivite a anti-ipèglisemi nan glikozid total deCistanchetubulosa(TGCT).

Nan etid la prezan, pwopriyete antidyabetik TGCT(glikozid total deCistanchetubulosa)yo te evalye nan yon rejim alimantè ki gen anpil grès ak sikwoz (HFSD) ak rat dyabetik STZ-induit. Anplis de sa, aktivite antioksidan ak anti-enflamatwa yo te envestige tou pou byen konprann mekanis potansyèl TGCT.

2 Materyèl ak metòd

2.1. Pwodwi chimik ak reyaktif

STZ te achte nan men Sigma-Aldrich Corp. (Saint Louis, USA). Met te jwenn nan Sino-Ameriken Shanghai Squibb Pharma. Elabscience Biotechnology co, Ltd (Wuhan, Lachin) te founi twous ELISA nan ensilin, C-peptide. Kit ELISA nan glikoz, emoglobin glikozile (HbA1c), kolestewòl total (TC), trisilglisewol (TG), kolestewòl lipoprotein ki ba-dansite (LDL-C), kolestewòl lipoprotein ki wo (HDL-C), superoksid dismutase (SOD) , glutatyon peroksidaz (GSH-Px), malondialdehyde (MDA), faktè nekwoz timè- (TNF), interleukin 1 (IL-1), interleukin 6 (IL{-6) yo te achte nan men Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute . ELISA twous yo nan fosforilasyon pwoteyin kinaz B (p-PKB) ak fosforilasyon glikojèn sintaz kinaz 3 (p-GSK3) yo te akeri nan Shanghai Enzyme-lye Biotechnology Co, Ltd Echinacoside (pite pi gran pase oswa egal a 98 pousan) ak acteoside. (pite Pi gran pase oswa egal a 97 pousan) yo te achte nan men Enstiti Nasyonal pou Kontwòl Manje ak Dwòg. Isoacteoside (pite pi gran pase oswa egal a 98 pousan) te bay Chengdu Must Biotechnology Co., Ltd.

2.2. Resous plant ak preparasyon TGCT(glikozid total deCistanchetubulosa)

Seche tij sukulan nanCistanchetubulosate achte nan men Bozhou Yihongtang Pharmaceutical co, Ltd., (Anhui, Lachin) ak idantifye pa Dr Puyang Gong nan Depatman Botanik famasetik, Sidwès Minzu University. Yo te kraze yon echantiyon bon (No. 20161103) nan yon poud epi depoze nan èrbyòm Jiangsu Kanion Pharmaceutical Co, Ltd. Dapre estanda nasyonal dwòg SFDA "Congrong Zonggan Jiaonang" (YBZ07482005-2011Z), la dwòg brit (1 kg) te ekstrè ak dlo pou twa fwa apre tranpe pou 1 èdtan. Apre filtraj, filtraj la konsantre anba presyon redwi, ajoute alkòl nan solisyon an konsantre jiskaske konsantrasyon etanòl la rive nan 60 pousan. Supernatant likid te konsantre nan pa gen okenn gou alkòl ak Lè sa a, dwe pirifye pa résine macroporous. Premyèman, yo te kolekte eluyan dlo ak 40 pousan eluyan etanòl youn apre lòt pou itilize pita. Dezyèmman, eluyan dlo yo te re-enjekte nan résine macroporous la ak eluye ak dlo. Eluyan dlo a te jete. Twazyèmman, elisyon ak 40 pousan etanòl ak eluyan yo te kolekte pou itilize pita. Finalman, 40 pousan etanòl eluyan yo te konbine ak konsantre pa evaporator rotary, Lè sa a, solisyon an te cheche pa siye espre. Apeprè 60 g pouvwa mawon te jwenn (sa vle di TGCT). Pite TGCT te detekte dapre estanda (YBZ07482005-2011Z), ki rive jiska 853 mg/g. TGCT(glikozid total deCistanchetubulosa)({{0}}.21 mg) ak twa estanda melanje (echinacoside: 131.3 ug, acteoside: 4.2 ug, isoacteoside: 39.4 ug) yo te respektivman fonn nan 1 mL methanol: dlo (50/50, v / v), ak Lè sa a, filtre nan yon manbràn 0.45 μm anvan piki.

2.3. Analiz kalitatif TGCT pa HPLC/Q-TOF-MS

Sistèm HPLC te koòdone ak yon Agilent 6538 Q-TOF-MS (Agilent Corp, USA) ekipe ak ionizasyon electrospray. Analiz la te fèt sou kolòn Zorbax SB-C18 (15 {{10}} mm × 4.6 mm, 5 μm). Faz mobil lan te konpoze de methanol-dlo (ki gen 0.1 pousan H3PO4). Pousantaj koule a te 1.0 mL/min. Pwogram elisyon gradyan yo te rezime jan sa a: 0–20 min, 18 pousan –28 pousan A; 20-50 min, 28 pousan -32 pousan A; 50-60 min, 32 pousan A; 60–70 min, 32 pousan –50 pousan. TOF-MS te fèt nan tou de pozitif ak negatif mòd ion sou m/z 100-3000 anba paramèt operasyon sa yo: vòltaj kapilè 3500 V (ESI-) oswa 4000 V (ESI plis); seche gaz, 10.0 L / min; tanperati gaz, 350 ◦C; presyon nebilizè, 35 psi; vòltaj skimmer, 65 V; fragman oswa vòltaj, 135 V; OCTRFV, 750 V. Tout done yo te kontwole pa Data Acquisition pou TOF/Q-TOF Ver. B.03.01 ak Kalitatif Analiz Ver. B.03.01 (Agilent Technologies, USA) respektivman.

2.4. Kantite analiz de TGCT(glikozid total deCistanchetubulosa)pa HPLC-DAD

Separasyon te fèt sou kolòn Zorbax SB-C18 (15 0 mm × 4.6 mm, 5 μm) nan 50 min (1.0 mL / min). Kondisyon kwomatografik pou HPLC-DAD yo te menm jan ak analiz kalitatif la. Volim piki a, tanperati kolòn, ak longèdonn UV yo te fikse nan 5 μL, 30 ◦C, ak 330 nm, respektivman.

2.5. Bèt eksperimantal

Gason SD rat, ki peze 180 ± 20 g, yo te achte nan Sant Animal laboratwa Nanjing Qinglongshan [Sètifika No SCXK (SU) 2017-0001] ak loje nan Etablisman Swen Animal nan Jiangsu Kanion Pharmaceutical Co., Ltd. (Jiangsu, Lachin). Swen bèt yo ak pwosedi eksperimantal yo te apwouve pa Komite Enstitisyonèl Swen ak Itilizasyon Animal, Huzhou Enstiti pou Kontwòl Manje ak Dwòg (Apwobasyon No 19018), epi yo te fèt dapre Règleman pou Eksperyans Animal nan Lachin. Rat yo te kenbe anba tanperati kontwole (24 ± 2 ◦C) ak imidite (50 ± 10 pousan) ak yon sik limyè 12 h ak fè nwa, akklimatize nan kondisyon lavi pou 7 jou pa manje nòmal laboratwa ak dlo ad libitum.

2.6. Endiksyon dyabèt

Rat nan gwoup kontwòl nòmal la (NC, n {{0}}) yo te manje ak yon rejim nòmal, tandiske rat eksperimantal yo te manje ak HFSD (yon rejim nòmal sipleman ak 20 pousan sikwoz, 10 pousan grès kochon, 2.5). pousan kolestewòl, ak 1 pousan kolat, 3.95 kcal/g) pou 4 semèn. Apre yon jèn 12 èdtan, yo te enjekte rat yo nan yon sèl dòz STZ (30 mg / kg), ki fonn nan tanpon sitrat frèt (0.1 M, pH 4.5) imedyatman anvan yo itilize. Nan 8yèm jou a nan STZ-enjekte, yo te pran yon echantiyon san nan fen ke a pa jetab san pran zegwi, epi yo te detèmine glikoz plasma a jèn (FPG) pa glikomèt pòtab la (LifeScan, Inc. UK). Rat ki gen sentòm poliuri, polidipsi, ak FPG ki pi gran pase oswa egal a 11.1 mmol/L yo te konsidere kòm rat dyabetik epi yo te divize owaza nan senk gwoup (n =10).

Gwoup I: NC, nouri ak 0.5 pousan sodyòm carboxyl methylcellulose (CMC Na, 10 mL/kg).

Gwoup II: kontwòl dyabetik (DC), nouri ak 0.5 pousan CMC-Na (10 mL/kg).

Gwoup III: TGCT-50, trete ak TGCT (50 mg/kg).

Gwoup Ⅳ: TGCT-100, trete ak TGCT (100 mg/kg).

Gwoup Ⅴ: TGCT-200, trete ak TGCT (200 mg/kg).

Gwoup Ⅵ: Met-200, trete ak Met (200 mg/kg).

Yo te chwazi dòz yo itilize nan etid sa a ki baze sou Chinese Pharmacopeia (edisyon 2015). Tout gwoup yo te administre oralman yon fwa chak jou epi yo te kontinye resevwa rejim respektif yo pou yon lòt 6 semèn.

2.7. Obsève kondisyon jeneral rat yo

Kondisyon fouri, pwodiksyon pipi, ak siviv rat yo te obsève chak jou. Pwa kò (BW) ak konsomasyon kalori yo te kontwole pandan tout eksperyans la. FPG te evalye nan 0, 2yèm, 4yèm ak 6yèm semèn apre tretman ak TGCT.(glikozid total deCistanchetubulosa).

2.8. Tès oral tolerans glikoz (OGTT)

Yo te fè OGTT a sou rat ki fè jèn nan etap tèminal etid la an antye. Se sèlman 6 0 μL echantiyon san yo te kolekte ak yon pipèt kapilè nan sinis òbit la (0 h), epi yo te administre ak TGCT.(glikozid total deCistanchetubulosa)(50 mg/kg, 100 mg/kg, ak 200 mg/kg) oswa Met (200 mg/kg) respektivman. Echantiyon san yo te kolekte nan 0.5 h, 1 h, 2 h apre chaj glikoz (2 g / kg). Rat yo te anestezi ak isoflurane pou kèk minit anvan yo pran san, ak Lè sa a imedyatman peze yo sispann senyen an pa koton emostatik. Tout eksperyans yo te fè ak bon swen pou asire byennèt bèt yo. Konsantrasyon glikoz nan plasma yo te detèmine pa yon twous glikoz ki baze sou metòd glikoz oksidaz peroksidaz la. Yo te kalkile zòn ki anba koub glikoz (AUC-G) pou refere a literati a (Shao et al., 2013).

2.9. Detèminasyon ensilin jèn (FINS) ak endèks sansiblite ensilin (ISI)

Entèval 1 jou apre OGTT, tout rat yo te nan bon kondisyon san okenn sentòm tankou avèg ak enflamasyon. Lè sa a, yo te anestezi ak pentobarbital sodyòm (40 mg / kg, ip) apre jèn pou 12 èdtan ak echantiyon san yo te kolekte nan aorta nan vant ak ak san eparin pou estimasyon byochimik. Serom yo te kolekte nan echantiyon san (san eparin) pa santrifujasyon. FINS te teste pa twous ELISA la. FPG te detèmine lè l sèvi avèk yon twous komèsyal ki baze sou metòd peroksidaz glikoz la. ISI te kalkile an akò ak fòmil la: ISI=1/[FINS (pmol/L) × FPG (mmol/L)] (Wang et al., 2013).

2.10. Estimasyon sentèz glikojèn nan fwa ak nan misk

Fwa ak misk gastrocnemius yo te retire, rense, peze, epi estoke nan - 70 ◦C. Glikojèn nan fwa ak misk yo te mezire pa metòd anthrone jan sa dekri deja (Ren et al., 2015). Te kontni an nan glikojèn eksprime kòm mg / g pwa mouye nan tisi. Aktivite hexokinase (HK) ak pyruvate kinase (PK) nan fwa a te detèmine pa twous ki disponib nan komès dapre enstriksyon manifakti a.

2.11. Analiz byochimik

HbA1c nan san antye (ak eparin) te mezire pa yon twous dyagnostik. Serom C-peptide, p-PKB, p-GSK3, TC, TG, LDL-C, HDL-C, SOD, GSH-Px, MDA, TNF-, IL-6, ak IL-1 yo te teste lè l sèvi avèk twous komèsyal yo an akò ak enstriksyon manifakti a.

2.12. Evalyasyon histolojik nan pankreyas

Tisi pankreyas yo te tou retire, rense, epi fikse nan 10 pousan fòmalin net, Lè sa a, dezidrate nan etanòl gradyan (75 pousan, 85 pousan, 95 pousan, ak 100 pousan) ak xylene (100 pousan). Apre pèmeyasyon, yo te entegre nan parafine epi koupe an seksyon 3 μm epè ak yon mikrotom rotary. Seksyon tisi yo te tache ak ematoksilin-eozin (H&E) pou egzamen mikwoskopik limyè (Chen et al., 2014).

2.13. Analiz estatistik

Se SPSS vèsyon 16.0 lojisyèl ki te fè analiz estatistik. Done yo te prezante pa mwayen ± SD. Konparezon estatistik ant gwoup yo te fèt lè l sèvi avèk yon sèl-fason ANOVA ki te swiv pa tès Tukey a ak yon valè de p < 0.05="" te="" pran="" kòm="" estatistik="">

3. Rezilta yo

3.1. Analiz fitochimik nan TGCT(glikozid total deCistanchetubulosa)

Te analiz kalitatif la te pote ak prezante nan materyèl siplemantè yo. Kwomatogram iyon total nan mòd iyon negatif te demontre nan Fig. S1. Done MS yo te pwovizwaman asiyen pa konparezon ak done nan yon rapò anvan (Li et al., 2015) ak rezime nan Tablo S1. Metòd analyse yo pou quantifier makè yo tou yo te valide ak yon ti tan dekri nan materyèl siplemantè yo. Chromatogram HPLC yo te prezante nan Fig. 1. Twa pi gwo konstitiyan (echinacoside, acteoside, ak isoacteoside) nan TGCT.(glikozid total deCistanchetubulosa)yo te idantifye konpare ak sibstans referans yo. Idantifikasyon konpoze yo ak konsantrasyon yo nan TGCT yo te montre nan Tablo 1.

3.2. Efè TGCT sou BW ak konsomasyon kalori

Jan yo montre nan Fig. 2A, rat yo te manje HFSD te montre pwa a ogmante pa yon mwayèn de 41 g konpare ak gwoup NC a apre 4 semèn. Sepandan, STZ evidamman redwi BW nan rat lè yo konpare ak gwoup NC a. Kontrèman, BW nan gwoup TGCT (100 ak 200 mg/kg) te ogmante progresivman ak siyifikativman (p <0.05) pa="" 8.1="" pousan="" ak="" 11.1="" pousan="" respektivman="" konpare="" ak="" gwoup="" dc="" a="" nan="" fen="" peryòd="" eksperyans="" lan.="" ,="" ki="" endike="" ke="">(glikozid total deCistanchetubulosa)ka anpeche twòp pèdi pwa nan kondisyon patolojik. Konsomasyon kalori gwoup NC a te pi ba pase lòt gwoup yo, e pa te gen okenn diferans enpòtan nan konsomasyon kalori ant senk lòt gwoup yo (figi 2B).

3.3. Efè TGCT sou FPG, OGTT, ak HbA1c

Rat dyabetik STZ-induit te montre yon ogmantasyon remakab nan FPG konpare ak gwoup NC (p <0.01) jan="" yo="" montre="" nan="" fig.="" 3a.="" administrasyon="" oral="" nan="">(glikozid total deCistanchetubulosa)demontre efè ipoglisemi nan yon fason ki depann de tan ak dòz la. TGCT(glikozid total deCistanchetubulosa)(100 ak 200 mg/kg) siyifikativman diminye nivo FPG yo nan 4yèm (22.1 pousan ak 24.8 pousan) ak 6yèm (23.2 pousan ak 56.4 pousan) semèn konpare ak gwoup DC a. Jan yo montre nan Figi 3B ak C, TGCT (100 mg/kg ak 200 mg/kg) evidamman diminye glikoz nan san pa 16.1 pousan ak 22.2 pousan nan 0.5 h ak diminye pa 17.2 pousan ak 26.5 pousan nan 1 h, ak AUC la. -G nan gwoup TGCT yo te redwi tou pa 8.1 pousan, 18.5 pousan, ak 25.4 pousan respektivman. Kòm ilistre nan Fig. 3D, te gen yon ogmantasyon siyifikatif nan HbA1c (93.3 pousan) konpare ak gwoup la NC, pandan ke administrasyon oral nan TGCT (100 mg / kg ak 200 mg / kg) nan rat dyabetik konsiderableman (p <0.05) diminye.="" hba1c="" (26.7="" pousan="" ak="" 37.4="" pousan,="" respektivman)="" konpare="" ak="" gwoup="">

3.4. Kontni glikojèn nan fwa ak nan misk

Kòm demontre nan Figi 4A ak B, nivo glikojèn yo te siyifikativman diminye nan rat dyabetik. Lè diferan konsantrasyon nan TGCT(glikozid total deCistanchetubulosa)yo te administre rat dyabetik pou 6 semèn, glikojèn fwa nan gwoup TGCT (100 mg / kg ak 200 mg / kg) te pi wo (25.2 pousan ak 40.8 pousan) pase sa yo ki nan gwoup la DC (p < 0.05).="" ,="" figi="" 4a).="" yon="" efè="" menm="" jan="" an="" te="" demontre="" nan="" misk="" la="" ki="" glikojèn="" nan="">(glikozid total deCistanchetubulosa)gwoup (100 mg/kg ak 200 mg/kg) te pi wo (40.7 pousan ak 52.6 pousan) pase sa yo ki nan gwoup DC (p <0.05, Fig. 4B).

3.5. Efè TGCT(glikozid total deCistanchetubulosa)sou ensilin serik, C-Peptide, ak ISI

Jan yo montre nan Tablo 2, ensilin ak C-peptide te evidamman (p <{2}}.01) diminye="" nan="" rat="" dyabetik="" konpare="" ak="" gwoup="" nc="" a.="" sepandan,="">(glikozid total deCistanchetubulosa)at all doses caused no significant increase in insulin and C-peptide levels (p >{{0}}.05), menm si ensilin ak C-peptide nan gwoup TGCT-trete yo te yon ti kras pi wo pase sa nan gwoup DC a. Pandan se tan, nou kalkile ISI a nan Fig. 4C. Kontrèman ak sekresyon ensilin lan, ISI te respektivman elve 32.9 pousan ak 37.8 pousan pa TGCT (100 mg / kg ak 200 mg / kg) konpare ak gwoup DC (p <>

3.6. Egzamen istopatolojik nan pankreyas la

Yo nan lòd yo verifye efè a nan TGCT(glikozid total deCistanchetubulosa)sou rejenerasyon nan ilo pankreyas yo, yo te fè analiz istolojik pankreyas la. Nan Fig. 5A, yo te obsève estrikti nòmal istolojik ak ilo gwosè nan gwoup NC a. Kontrèman, STZ-enjekte te lakòz diminye kantite ak dyamèt ilo ak chanjman mikwovesikilè ki make (figi 5B). Tou de TGCT(glikozid total deCistanchetubulosa)ak Met ogmante kantite ak gwosè ilo yo pa fè nòt analiz (figi 5C–F).

3.7. Efè TGCT sou p-PKB, p-GSK3, HK ak PK

Nan Tablo 2, yo te jwenn nivo fosforilasyon PKB ak GSK3 yo te siyifikativman (p < 0.05)="" diminye="" nan="" rat="" dyabetik.="">(glikozid total deCistanchetubulosa)(100 mg/kg ak 20{0 mg/kg) te ogmante konsiderableman konsantrasyon p-PKB (TGCT-100: 13.5 pousan, p <{27}}.05 ak="" tgct-200:="" 16.7="" pousan,="" p="">< 0.05)="" ak="" p="" gsk3="" (tgct-200:="" 18.3="" pousan,="" p="">< 0.01).="" efè="" menm="" jan="" tgct="" sou="" hk="" ak="" pk="" yo="" te="" obsève="" tou.="" gwoup="" tgct="" yo="" te="" ogmante="" aktivite="" hk="" (tgct-100:="" 30.2="" pousan,="" p=""><0.05 ak="" tgct-200:="" 59.1="" pousan,="" p=""><0.01) ak="" pk="" (tgct-200:="" 32.7="" pousan,="" p=""><0.05) pase="" sa="" yo="" nan="" gwoup="">

3.8. Efè TGCT(glikozid total deCistanchetubulosa)sou dislipidemi

Jan yo montre nan Tablo 3, rat yo te trete ak TGCT (100 mg/kg ak 20{0 mg/kg) te miyò amelyore anomali lipid yo. TG yo te redwi pa 19.8 pousan (p <0.05) ak="" 25.9="" pousan="" (p=""><0.01); tc="" yo="" te="" diminye="" pa="" 28.5="" pousan="" ak="" 31.4="" pousan="" (p=""><0.05); ldl-c="" te="" redwi="" pa="" 20.0="" pousan="">< 0.01)="" compared="" with="" dc="" group.="" however,="" the="" suppressed="" hdl-c="" level="" in="" dc="" group="" was="" significantly="" elevated="" by="" 26.8%="" (p="" <="" 0.05)="" in="" tgct-200="">

3.9. Efè TGCT sou estrès oksidatif ak enflamasyon

Nan limyè a nan wòl enpòtan nan estrès oksidatif ak enflamasyon nan fizyopatoloji nan dyabèt, nou evalye kapasite nan TGCT sou estrès oksidatif ak enflamasyon nan rat dyabetik. TGCT(glikozid total deCistanchetubulosa)(100 ak 200 mg/kg) efektivman ogmante (14.7 pousan , p < 0.05 ak 20.5 pousan , p< 0.01)="" the="" activity="" of="" sod,="" remarkably="" elevated="" (16.3%,="" p="" <="" 0.01="" and="" 22.3%,="" p="" <="" 0.01)="" the="" gsh-px="" activity="" and="" significantly="" decreased="" (15.0%,="" p="" <="" 0.05="" and="" 19.7%,="" p="" <="" 0.05)="" the="" mda="" formation="" compared="" with="" dc="" group="" in="" table="" 3.="" similarly,="" tgct="" (200="" mg/kg)="" treatment="" also="" blocked="" the="" stz-induced="" overproduction="" of="" pro-inflammatory="" cytokines="" tnf-α="" (21.8%,="" p="" <="" 0.01),="" il-6="" (14.0%,="" p="" <="" 0.05)="" and="" il-1β="" (15.2%,="" p=""><>

4. Diskisyon

Dyabèt se yon maladi metabolik pwogresif ak kwonik ki sitou karakterize pa ipèglisemi. Kounye a, FPG se yon mezi espesifik nan konsantrasyon glikoz nan san, OGTT se yon kritè deteksyon sansib nan anomali bonè nan jete glikoz, pandan y ap HbA1c lajman itilize kòm yon endèks estanda lò pou kontwòl glisemi reflete nivo glikoz mwayèn sou 120 jou anvan tès la ( Nagy et al., 2018; Gan et al., 2018). FPG, OGTT, ak HbA1c yo itilize klinikman pou dyagnostik ak jesyon nan prediabetes ak dyabèt (Chai et al., 2017). Nan etid nou an, li klè ke FPG nan rat dyabetik trete ak TGCT(glikozid total deCistanchetubulosa)(100 mg / kg ak 200 mg / kg) te siyifikativman diminye konpare ak gwoup la DC. Kòm done yo montre nan OGTT ak AUC-G, tolerans glikoz andikape ak pousantaj absorption glikoz te ranvèse pa TGCT nan rat dyabetik. Pandan se tan, rezilta a te sipòte tou pa mezi kontni HbA1c. Done sa yo endike ke TGCT(glikozid total deCistanchetubulosa)amelyore endèks fizyolojik rat dyabetik pa reglemante omeyostazi glikoz nan san.

Enfimite sekresyon ensilin ak IR jwe yon wòl enpòtan nan devlopman ipèglisemi. Sible youn nan yo apwopriye pou amelyore kontwòl glisemi ak anpeche T2DM (Szoke and Gerich, 2005; Punthakee et al., 2018). Plizyè chèchè yo te rapòte ke yon konbinezon de yon rejim alimantè ki gen anpil grès ak STZ ki ba-dòz se yon mwayen efikas pou pwovoke T2DM nan eksperyans ak bèt. STZ ki ba-dòz lakòz domaj twò grav nan sekresyon ensilin ki pi sanble ak etap yo pita nan T2DM (Gheibi et al., 2017). Nan etid sa a, TGCT pa ni ogmante siyifikativman sekresyon ensilin lan ni retabli ilo pankreyas rat dyabetik, menm si ensilin ak kantite ilo nan gwoup TGCT trete yo te pi wo pase sa nan gwoup DC a. Konklizyon sa yo nan liy ak etid anvan an nan sourit db / db (Xiong et al., 2013). Rezilta nou yo te montre yon ogmantasyon pwa enpòtan nan rat dyabetik trete ak TGCT(glikozid total deCistanchetubulosa), ki ka eksplike pa yon ti ogmantasyon nan ensilin ki ka anpeche katabolism pwoteyin nan tisi nan misk (Adams et al., 2019). Anplis de sa, rezilta ISI montre ke TGCT evidamman amelyore IR rat dyabetik ki konsistan avèk yon rapò anvan (Kong et al., 2018), ki te bay nouvo prèv konsènan mekanis potansyèl sou efè antidyabetik TGCT.

Kòm nou tout konnen, chemen PKB/GSK3 se youn nan chemen siyal ensilin ki pi enpòtan, yo te sijere pou medyatè sentèz glikojèn ensilin-induit (Zheng et al., 2015). HK ak PK aji kòm sib potansyèl dwòg nan tretman famasi dyabèt. Bese aktivite HK ak PK yo te konfime nan IR, pandan y ap deklanchman HK ak PK lakòz plis rezèv glikojèn oswa glikoliz ki pwodui plis enèji lè w itilize glikoz nan san (Hu et al., 2014). Nan etid sa a, TGCT(glikozid total deCistanchetubulosa)tretman an menm tan ogmante ekspresyon nan pwoteyin fosforilasyon nan PKB ak GSK3, ki mennen nan yon ranvèse enpòtan nan aktivite yo nan HK ak PK, ak ansibleman retabli kontni an glikojèn nan fwa a ak nan misk kòm glikoz la redwi. Rezilta sa yo endike ke TGCT(glikozid total deCistanchetubulosa)aktive anzim kle yo nan chemen an siyal ensilin, ak plis bay prèv ki montre sansiblite ensilin te reyèlman amelyore nan rat dyabetik.

Dyabèt alontèm tou kontribye nan ranfòse LDL-C ak diminye nivo HDL-C ki lakòz disregulasyon lipid (Jayashankar et al., 2016), ak dislipidemi se yon makè etabli pou malfonksyònman andotelyal ak risk kadyovaskilè nan dyabèt (Shahwan et al., 2019). Nan etid nou an, TGCT (200 mg / kg) konsiderableman bese nivo TC, TG, ak LDL-C, ak amelyore nivo HDL-C nan rat dyabetik, ki konsistan avèk rapò anvan yo.Cistanchetubulosaefektivman regle metabolis lipid nan sourit (Shimoda et al., 2009; Xiong et al., 2013). Konklizyon sa yo endike ke TGCT(glikozid total deCistanchetubulosa)ka pi benefik pou moun ki gen dyabèt ak anomali lipid nan san.

STZ se yon antibyotik gwo spectre, ki gen yon efè segondè toksisite selektif sou selil pankreyas yo ki soti nan ogmantasyon nan radikal superoksid, ak pi lwen nan kontwòl glisemi pòv nan vire (Ghosh et al., 2015; Swain et al., 2020). ). Pandan se tan, estrès oksidatif se tou yon kòz enpòtan nan IR nan anpil anviwònman (Taniguchi et al., 2006). IR ak dyabèt yo asosye ak aktivite redwi nan anzim antioksidan, tankou SOD ak GSH-Px (Styskal et al., 2012). Etid anvan yo te enplike ke siprime estrès oksidatif te kapab bese glikoz nan san nan rat dyabetik (Lim et al., 2012; Gao et al., 2016). Nan etid sa a, tretman ak TGCT(glikozid total deCistanchetubulosa)siyifikativman retabli fonksyon yo defans selilè nan SOD ak GSH-Px ak redwi nivo MDA nan rat dyabetik, ki manifeste ke TGCT gen pwopriyete yo nan antioksidasyon.

Pi gwo elektè nan TGCT(glikozid total deCistanchetubulosa)se PhGs ak kontni total echinacoside, acteoside ak isoacteoside se plis pase 661 mg/g. Plant ki genyen eleman antioksidan segondè, tankou PhGs, jeneralman yo te pwouve yo gen efè ipoglisemi (Morikawa et al., 2014; Shimada et al., 2017; Spínola et al., 2019). Se poutèt sa, nou espekile ke efè a anti-dyabetik nan TGCT(glikozid total deCistanchetubulosa)ta ka an pati atribiye a aktivite anti-oksidan nan PhGs. An konsiderasyon kontni echinakozid nan TGCT, plis etid yo oblije mennen ankèt sou efè echinakozid sou IR ak dyabèt nan modèl vivo ak vitro.

Li se lajman rekonèt ke dyabèt melitus se yon maladi enflamatwa. Sitokin enflamatwa tankou TNF-, IL-6, ak IL{-1 ka entèfere ak chemen siyal reseptè ensilin lan, epi plis mennen nan IR (Bastard et al., 2006). Enflamasyon parèt tankou yon sib dwòg solid nan tretman an nan IR, ak pa ekstansyon dyabèt (Chen et al., 2015). Nan etid aktyèl la, TGCT(glikozid total deCistanchetubulosa)te kapab diminye nivo TNF-, IL-6, ak IL-1, ki te demontre efè anti-enflamatwa. Sa a ka yon lòt mekanis anti-dyabetik nan TGCT nan rat dyabetik.

Prèv ki akimile montre ke glikoz ki wo ki pèsistan bay monte nan anomali nan estrikti a ak fonksyon nan sikile pwoteyin ak lipid, ki mennen nan glikoksidasyon ak peroksidasyon, ak Lè sa a, ankouraje pwodiksyon an nan sitokin enflamatwa. Menm jan an tou, ogmante cytokins enflamatwa lakòz pwodiksyon an nan espès oksijèn reyaktif ak lòt moeties reyaktif, ki ankouraje estrès oksidatif ak domaj oksidatif. Rezilta sa a nan yon sik visye (Aghadavod et al., 2016; Domingueti et al., 2016). Se poutèt sa, diminye glikoz nan san ak lipid ka kontribye nan efè antioksidan ak anti-enflamatwa TGCT.(glikozid total deCistanchetubulosa). Nan yon sèten mezi, mekanis antidyabetik egzak la pa konplètman klè epi li bezwen plis envestigasyon.

5. Konklizyon

An rezime, etid sa a endike ke TGCT(glikozid total deCistanchetubulosa)se te yon ajan efikas pou trete ipèglisemi ak ipèlipidemi nan rejim alimantè / STZ-induit rat dyabetik. Anplis de sa, efè a antidyabetik ta ka lajman ki gen rapò ak pwopriyete antioksidan ak anti-enflamatwa nan TGCT. Etid sa a ta mete devan posiblite pou entwodwi TGCT(glikozid total deCistanchetubulosa)nan tretman dyabèt. Sepandan, detaye mekanis antidyabetik TGCT(glikozid total deCistanchetubulosa)rete ensèten, ak plis etid nan vivo ak nan vitro yo nesesè.

Kontribisyon otè

Konsepsyon ak konsepsyon: ZQM, KNZ, ak WX. Preparasyon TGCT(glikozid total deCistanchetubulosa), analiz eleman chimik yo, ak validasyon metodoloji: RG, ZKX, ak WJL. Endiksyon dyabèt ak tretman chak jou: KNZ ak HF. Preparasyon echantiyon pou analiz byochimik: KNZ, HF, ak ZQM. Analiz done ak redaksyon maniskri: KNZ, ZQM, ak YST. Validasyon done ak revizyon maniskri: WZH, GD, ak YST.

Deklarasyon enterè konpetisyon

Otè yo te deklare pa gen okenn konfli enterè.

Rekonesans

Etid sa a te sipòte finansyèman pa National Science & Technology Gwo Pwojè Kle Nouvo Dwòg Kreyasyon ak Faktori Pwogram, Lachin (Grant No. 2013ZX09402203), ak Syans ak Teknoloji Pwojè Huzhou, Zhejiang Pwovens (Grant No. 2018GZ03). Nou remèsye Madam Ning Su ak Madam Sha Liu nan Jiangsu Institute of Medicine pou asistans yo nan etid tisi yo. Jinfeng Wu ak Xuefei Zhang elatriye yo te rekonesan nan rechèch sa a.

Anèks A. Ou ka jwenn done siplemantè nan atik sa a sou entènèt nan https://doi. org/10.1016/j.jep.2021.113991.

Soti nan: 'Efè ipoglisemi ak ipolipidemi nan glikozid total deCistanchetubulosanan rejim / streptozotocin-induit rat dyabetik' byKuiniu Zhu, et al

---Journal of Ethnopharmacology 276 (2021) 113991