Idantifikasyon oksijene idwojèn ki reponn EST ki enplike nan biosentèz glikozid fenylethanoid nan kilti selil Salsa Cistanche

Kontakte: Audrey Hu Whatsapp/hp: 0086 13880143964 Imèl:audrey.hu@wecistanche.com

J. CHEN et al

Résumé
Oksijene idwojèn se yon elisitè abiotik efikas ki ka pwovoke biosentèz metabolit segondè nan plant yo. Nou montre ke nan kilti a sispansyon selil nan yon plant medsin sèl-toleranCistanchesalsa, pwodiksyon konpozan bioaktiffeniletanoidglikozid(PeGs) te ogmante apre tretman H2O2. Pou idantifye jèn ki gen rapò ak PeGs(feniletanoidglikozid)byosentèz ki afekte pa H2O2, nou konstwi yon bibliyotèk ibridizasyon soustraktif soustraksyon nan jèn ki reponn H2O2 lè l sèvi avèk yonCistanchesalsaliy selilè ak idantifye 105 tags sekans eksprime (ESTs) ak 85 jèn. Anòt fonksyonèl bibliyotèk EST ak analiz ontoloji jèn yo te montre jèn ki gen rapò ak repons estrès divès kalite, byosentèz metabolit segondè, ak règleman transcriptional. Pami yo, nou idantifye de jèn ki gen rapò ak PeG yo(feniletanoidglikozid)chemen byosentèz (4-koumarat koanzim A ligaz ak sinamat 4-idroksilaz), ak de faktè transkripsyon kalite WRKY. Ekspresyon jèn chwazi apre tretman H2O2 yo te analize pa RT-qPCR. Byen bonè ogmante transkripsyon PeG(feniletanoidglikozid)jèn chemen byosentèz apre tretman an revele ke H2O2 pwovoke PeGs(feniletanoidglikozid)byosentèz atravè regilasyon nan jèn kle li yo.
Mo kle adisyonèl: sinamat-4-idroksilaz, 4-koumarat koanzim A ligaz, ibridizasyon soustraktif suppression.Cistanchesalsa. feniletanoidglikozid.

Entwodiksyon

Cistanchesalsase yon parazit plant kontinuèl sou rasin Haloxylos ammodendrun, epi li grandi nan zòn dezè nan lwès Lachin. Pandan plizyè syèk,Cistancheespès yo te itilize kòm medikaman tradisyonèl èrbal (Wang et al. 2012). Konpozan bioaktif yofeniletanoidglikozid(PeGs) ki gen yon efè remakab sou espès oksijèn reyaktif (ROS) clearance, pwoteksyon radyasyon, amelyorasyon iminite, ak anti-aje (Nan et al. 2013). PeGs(feniletanoidglikozid)byosentèz nanCistanchese inisye nan fenilalanin (Fig. 1 Suppl.) ak sentèz asid kafeyik se plis glikozile yo fòme divès kalite PeG.(feniletanoidglikozid)(Wang et al. 2012). Twa PeG prensipal yo(feniletanoidglikozid), echinacoside, acteoside, ak 2'-acetylatteoside, yo konsidere kòm eleman ki pi aktif nanCistanche(Kobayashi et al. 1984). Yo nan lòd yo amelyore kontni yo nanCistanchekilti selilè, divès kalite elicitors yo te teste ki gen ladan chitosan, putrescine, Ag plus, ak estrès osmotik (Ouyang et al. 2005a,b, Cheng et al. 2005, 2006, Liu et al. 2007, Liu and Cheng 2008). Sepandan, jèn ki enplike nan PeGs(feniletanoidglikozid)byosentèz nanCistanche, sitou phenylalanine metabolis chemen jèn, yo te raman idantifye. Se sèlman yon jèn ki kode phenylalanine amonyak-lyase (PAL) dènyèman te idantifye nan Cistanche deserticola (Hu et al. 2011). Lòt jèn ki kode, pa egzanp, sinamat-4-idroksilaz (C4H), ki kapab katalize konvèsyon sinamat an asid kumarik, ak 4-koumarat koanzim A ligaz (4CL), yon jèn esansyèl pou lignin ak flavonoid. byosentèz, yo pa te jwenn nanCistanche.
Nou itilize kilti selil la nanCistanchesalsapou etidye PeGs(feniletanoidglikozid)byosentèz ak ekspresyon jèn ki gen rapò. Nou te envestige tou efè yon H2O2 efikas elicitor sou PeGs(feniletanoidglikozid)byosentèz. Anplis de sa, jwenn jèn ki reponn byen bonè ki enplike nan PeGs(feniletanoidglikozid)byosentèz, nou te fè sipresyon soustraktif ibridizasyon (SSH) pou konstwi yon bibliyotèk cDNA nan jèn ki reponn H2O2-.

Fig. 1. Ekspresyon jèn relatif detèmine pa RT-qPCR apre tretman H2O2. CsWRKY1 - WRKY transkripsyon faktè (Contig07), CsC4H1 - sinamat 4-idroksilaz (Contig09), Cs4CL1 - 4-koumarat: ligase (Contig03), CsHSP1 - chalè chòk pwoteyin 70 kDa (Contig 01), ak CsSOD1 - superoksid dismutase (Contig16). Selil yo te trete ak 80 ug dm-3 H2O2 nan yon mwayen likid pou 2 èdtan ak ekspresyon yo te konpare ak yon kontwòl trete ak dlo. Vle di plis - SD nan twa repetisyon byolojik; * - P < 0.05,="" **="" -="" p=""><>

Materyèl ak metòd

Liy selilè CS2001 la te etabli soti nan petal nanCistanchesalsa(CA Mey.) Beck kolekte nan pwovens Neimenggu ak subcultured. Metòd kilti a te sanble ak yon pwotokòl pibliye deja (Liu et al. 2007). Anjeneral, yo te itilize yon mwayen solid Murashige and Skoog (1962; MS) pou subculture ak yon mwayen likid pou PeGs.(feniletanoidglikozid)byosentèz (se te mwayen MS modifye ki te konplete ak 30 g dm-3 glikoz ak 2.0 mg dm-3 endol-3-asid acetic). Pou tretman H2O2, 5.0 ± 0.2 g selil nan yon peryòd kwasans rapid, anjeneral 20 a 30 d apre yo te subcultured nan mwayen solid la, yo te vaksine nan yon mwayen likid 50 cm3 nan yon flacon Erlenmeyer 250 cm3. ak kiltive nan fè nwa a avèk oswa san konsantrasyon H2O2 diferan. PeG yo(feniletanoidglikozid)kontni apre 10 d endiksyon pa H2O2 te analize dapre yon metòd pibliye deja (Liu et al. 2007) ki baze sou ranvèse-faz segondè-pèfòmans likid kromatografi ak elisyon gradyan metanol.

Selil yo 2 èdtan apre tretman H2O2 yo te kolekte nan mwayen an pa papye filtre lè l sèvi avèk yon antonwa Büchner, epi yo te jele nan nitwojèn likid ak tè an poud. Chak 2 g nan poud selil yo te lyzed lè l sèvi avèk yon melanj de 1 cm3 nan 2-mercaptoethanol, 1 cm3 nan 20{0 g dm{{10}} sarkozil, ak 8 cm3 nan yon tanpon GTC (5 M guanidinium isothiocyanate, 62.5 mM Tris-HCl, pH 8.0, 6.25 mM EDTA, pH 8.0, 5 mM thiorea, ak 10 mM dithiothreitol). Lè sa a, selil yo te enkube sou glas pou 15 min, Lè sa a, 1/3 volim nan 8.5 M CH3COOK, pH 6.0, te ajoute, epi selil yo te enkubate sou glas pou 15 min ak Lè sa a, santrifuje nan 15 000 g pou 15 min. . Yo te ajoute supernatant a nan yon volim egal isopropanol pou presipite RNA total. RNA total la te pirifye plis pa yon twous mini RNeasy (Qiagen, Hilden, USA) dapre enstriksyon manifakti a. Messenger RNA te izole nan RNA total lè l sèvi avèk yon twous midi Oligotex mRNA (Qiagen).

feniletanoidglikozidnanCistancheSalsa

Yon bibliyotèk SSH te pwodwi nan kontwòl ak 30 pousan H2O2-pwodwi echantiyon selil 2 èdtan apre eksitasyon an lè l sèvi avèk yon twous soustraksyon cDNA PCR-seleksyon (Clontech, Mountain View, USA). Pou konstriksyon bibliyotèk, pwodwi yo te pirifye separeman lè l sèvi avèk yon twous pou pirifye jèl (Qiagen) ak klonaj nan yon vektè pGEM lè l sèvi avèk yon twous klonaj TA (Tiangen, Beijing, Lachin). Plasmid ki soti nan klon endepandan yo te izole ak sekans lè l sèvi avèk T7 Jadendanfan. Tout sekans tag sekans eksprime (EST) ki soti nan bibliyotèk la (ak sekans vektè yo retire) yo te itilize pou kontig asanble ak CAP3 (http://doua.prabi.fr/software/cap3). EST yo te gwoupe nan kontig ak singletons; yo te itilize pou rechèch omoloji lè l sèvi avèk pwogram BLASTx nan NCBI (http://blast.ncbi. nlm.nih.gov). Lè sa a, sekans yo te anote, analize, ak klase dapre tèm ontoloji jèn (GO) lè l sèvi avèk Blast2GO (http://www.blast2go.com).
An tan reyèl kantite reyaksyon chèn polymerase (RT-qPCR) te fèt dapre Bustin et al. (2009). Echantiyon cDNA yo te sentèz lè l sèvi avèk yon twous reyaktif PrimeScript RT (Takara, Dalian, Lachin) ki soti nan 0.5 ug nan RNA total. RT-qPCR te fèt lè l sèvi avèk SYBR Premix Ex Taq II ak ROX plis twous (Takara) sou yon sistèm PCR an tan reyèl ABI 7300 (Applied Biosystems, Foster City, USA) ak twa replika teknik. Premye yo te fèt lè l sèvi avèk lojisyèl Primer3 sou entènèt la dapre enstriksyon Takara te bay la; yo bay primè yo itilize nan etid sa a nan Tablo 1 Suppl. Ekspresyon jèn yo te nòmalize nan 18S RNA, ekspresyon ki te estab nan tout echantiyon yo.

Rezilta yo te analize lè l sèvi avèk R vèsyon 3.1.1, siyifikasyon an nan diferans yo te verifye pa t-tès Elèv la.

Rezilta yo

Oksijene idwojèn pwovoke byosentèz tout twa PeG prensipal yo(feniletanoidglikozid)nanCistanchesalsaselil sispansyon (Tablo 1) men ki pa gen okenn efè evidan sou kwasans selil (Fig. S2). Kontni echinakozid la te ogmante deja apre tretman 10 ug dm-3 H2O2 (P <0.05), yo="" te="" anrejistre="" yon="" ogmantasyon="" pi="" wo="" apre="" 20="" ug="" dm="" la.="" -3="" tretman="" h2o2="" (p=""><0.01), ak="" pi="" gwo="" ogmantasyon="" an="" te="" apre="" 40,="" 80,="" ak="" 160="" ug="" dm-3="" tretman="" h2o2="" yo.="" rezilta="" menm="" jan="" an="" montre="" pou="" acteoside,="" men="" kontni="" li="" yo="" te="" pik="" apre="" tretman="" an="" 80="" ug="" dm-3="" h2o2.="" byosentèz="" 2'-acetylatteoside="" te="" mwens="" sansib="" a="" tretman="" h2o2;="" yon="" ogmantasyon="" siyifikatif="" nan="" kontni="" li="" yo="" (p=""><0.05) te="" nan="" h2o2="" konsantrasyon="" plis="" pase="" 40="" ug="" dm-3.="" apre="" tretman="" 80="" ug="" dm-3="" h2o2,="" kantite="" twa="" peg="" prensipal="">(feniletanoidglikozid)siyifikativman ogmante (P < 0.01)="" sou="" kontwòl="" la.="" se="" poutèt="" sa,="" konsantrasyon="" sa="" a="" te="" itilize="" nan="" plis="">
Pou jenere yon bibliyotèk ki anrichi pou jèn ki reponn byen bonè ki kontwole pa H2O2, nou te itilize cDNA ki soti nanCistanchesalsaselil sispansyon trete ak 80 ug dm-3 H2O2 pou 2 èdtan. Sekans sèl-pase 129 klon recombinant nan bibliyotèk SSH la bay 105 EST pwòp apre esklizyon sekans vektè. EST klè sa yo te itilize pou asanble pa CAP3, epi yo te pwodwi 18 kontig ak 67 singletons (Tablo 2). Kidonk, 85 jèn yo te izole nan bibliyotèk sa a. Longè an mwayèn nan pwòp 105 EST yo te 527 bp, ki se adekwa pou yon klasifikasyon fonksyonèl ki baze sou resanblans sekans.

feniletanoidglikozidnanCistancheSalsa

Tout jèn 85 yo te jwenn nan bibliyotèk la te rekipere pa BLASTx kont baz done pwoteyin GenBank ki pa redondants pou resanblans sekans (Valè E mwens pase oswa egal a 0.001). Ven-yon jèn pa montre okenn frape nan baz done a, yo ta ka espesifik nanCistanchesalsa. Rezilta yo ak BLASThits yo te enpòte nan lojisyèl Blast2GO pou plis analiz anrichisman chemen GO ak KEGG. Nan 64 jèn yo ak frape BLAST yo, 50 yo te anote dapre deskripsyon jèn omològ ki soti nan lòt espès yo. Jèn yo te bay non yo dapre deskripsyon frape BLAST yo. Analiz GO a (Fig. 3 Suppl.) montre ke nan mitan 50 jèn sa yo, te gen 14 jèn ki enplike nan repons a stimuli, ak plis pase 30 jèn ki gen rapò ak pwosesis metabolik (Tablo 1 ak 2). Pami jèn sa yo, yo te izole de omològ jèn chemen biosentèz PeG jan yo espere: 4-coumarate coenzyme A ligase (yo te rele Cs4CL1: Contig03) ak sinnamat 4- hydroxylase (yo te rele CsC4H1: Contig14). Anplis de sa, yo te fè RT-qPCR pou konfime ekspresyon jèn ki soti nan bibliyotèk la apre tretman H2O2 la.

Pou konfime ke jèn esansyèl yo idantifye nan bibliyotèk SSH la te reponn ak tretman H2O2, ekspresyon de PeG yo.(feniletanoidglikozid)Jèn ki gen rapò ak chemen byosentèz (Cs4CL1, CsC4H1), de ROS pwovoke jèn (CsSOD1: Contig 16, CsHSP1: CISTH099), ak yon sèl WRKY fanmi transkripsyon faktè tankou jèn (CsWRKY1: Contig 07) te mezire pa RT-qPCR apre tretman an. ak H2O2 (figi 1). Ekspresyon CsC4H1, Cs4CL1, CsSOD1, ak CsWRKY1 te kontwole plis pase 15-pliye, 3-pliye, 45-pliye, ak 4-pliye, respektivman 2 èdtan apre H2O2 la. tretman. Ekspresyon CsHSP1 te chanje sèlman 1.8 pliye apre tretman H2O2 la.
Tan-kou ekspresyon yo nan CsWRKY1, CsC4H1, ak Cs4CL1 apre tretman an H2O2 te analize plis pa RT-qPCR (Fig. 2). Ekspresyon CsC4H1 ak Cs4CL1 yo te ogmante anpil (plis pase 80-pliye ak 50-pliye, respektivman) apre tretman 16-h epi apre 32 èdtan. Ekspresyon CsWRKY1 te kontwole plis pase 20-pliye nan 4 èdtan ak Lè sa a, diminye soti nan 8 èdtan apre sa (figi 2).

Fig. 2. Ekspresyon relatif CsWRKY1 (A), CsC4H1 (B), ak Cs4CL1 (C) nan diferan moman apre tretman ak 80 ug dm-3 H2O2. Ekspresyon yo te nòmalize nan yon kontwòl; (trete ak dlo). Vle di plis - SD nan twa repetisyon byolojik; * - P < 0.05,="" **="" -="" p=""><>

Diskisyon

Oksijene idwojèn se yon elicitor plant byen li te ye ki montre efè divès kalite sou plant yo. Menm jan ak ROS, li ka pwovoke sistèm ROS scavenging ki konpoze de superoksid dismutase, katalaz, peroksidaz, elatriye, epi li sèvi kòm siyal en nan sèl, osmotik, ak dezidratasyon.

estrès (Wi et al. 2006, Kar 2011, Furlan et al. 2013, Sathiyaraj et al. 2014). Li te sijere ke jenerasyon H2O2 nan plant yo akonpaye pa pwovoke byosentèz segondè-metabolit nanCistanchesalsakilti selilè. Kòm espere, rezilta nou yo revele ke PeGs(feniletanoidglikozid)byosentèz nanCistanche salsakilti selil yo te pwovoke apre tretman H2O2 (Tablo 1). Kontni twa PeG prensipal yo(feniletanoidglikozid)ogmante apre tretman H2O2 ki endike wòl esansyèl li nan byosentèz PeGs. Jèn rich nan bibliyotèk SSH la te sijere plis efè li sou PeGs(feniletanoidglikozid)endiksyon byosentèz nanCistanche salsa.

Anpil jèn ki reponn H2O2-koni, tankou ascorbate peroxidase (CISTH069, Karyotou and Donaldson 2005), h-quinone oxidoreductase (CISTH125, Bello, et al. 2001), CsSOD1, CsHSP1 (Baruah et al. 2014), ak jèn repons rezistans maladi (Contig10, Nanda, et al. 2010), yo te rich nan bibliyotèk SSH la (Table 3, Table 2 Suppl.). Kèk nan jèn sa yo tipik ROS reponn ak yon ekspresyon pwovoke apre tretman H2O2 yo te konfime plis pa RT-qPCR (figi 1 ak 2) ki endike ke yon bibliyotèk SSH kalifye te konstwi isit la. De jèn chemen biosentèz PeG, CsC4H1 ak Cs4CL1, yo te jwenn tou nan bibliyotèk sa a ak de ekspresyon jèn sa yo te pwovoke pa tretman H2O2 nan yon fason ki depann de tan (Fig. 2). Li sijere ke tretman an H2O2 pwovoke PeGs(feniletanoidglikozid)byosentèz nan nivo jenetik atravè règleman an nan jèn chemen PAL. Sepandan, PAL ak lòt jèn biosentèz PeGs en (Wang et al. 2012) pa te idantifye nan bibliyotèk SSH la; li ta ka paske bibliyotèk la pa te sekans ase. Yon relasyon ant CsC4H1 ak Cs4CL1 pwovoke ekspresyon ak yon ogmantasyon biosentèz PeGs apre tretman H2O2 yo ta dwe klarifye pa plis analiz.

Anplis jèn chemen PAL yo te pwovoke pa tretman H2O2, yo te jwenn de faktè transcription fanmi WRKY (CsWRKY1, CsWRKY2) nan bibliyotèk SSH (Tablo 3 ak Tablo 2 Suppl.), epi RT-qPCR te konfime yon ekspresyon CsWRKY1 pwovoke. . Ekspresyon li te reponn ak tretman H2O2 pi bonè pase ekspresyon de jèn chemen PAL, Cs4CL1 ak CsC4H1 (Fig. 2). Soti nan etid anvan yo, yo te obsève ko-ekspresyon kèk faktè transkripsyon WRKY ak jèn chemen PAL nan diri (Gupta et al. 2012). Anplis de sa, ekspresyon jèn PAL kontwole nan yon mutan ekspresyon OsWRKY03 (Liu et al. 2005). De faktè transkripsyon fanmi WRKY ki mansyone anwo yo ta ka patisipe tou nan PeGs(feniletanoidglikozid)byosentèz nanCistanchesalsa. Enteresan, EST ki gen rapò ak dezidratasyon (CISTH067, CISTH064) yo te jwenn nan bibliyotèk SSH la, ki ka sijere ke tretman H2O2 te gen rapò ak ekspresyon jèn ki reponn dezidratasyon nan.Cistanchesalsajan yo obsève nan lòt plant (Schmidt et al. 2013, Zhou et al. 2013). Yon jèn giberellin (GA) ki gen rapò ak siyal, gibberellin reseptè gid1b-like (CISTH092), te idantifye nan bibliyotèk la SSH ki vle di koneksyon an nan siyal GA ak tretman H2O2 nan.Cistanchesalsa, ki te rapòte tou nan lòj (Bahin et al. 2011). Sepandan, plis etid yo bezwen konfime si jèn sa yo gen rapò ak PeGs(feniletanoidglikozid)byosentèz. Lòt pase jèn yo mansyone pi wo a, bibliyotèk SSH konstwi isit la tou prezante jèn ak oswa san frape BLAST. Li amelyore konpreyansyon nou sou efè H2O2 sou C. salsa epi premyeman bay enfòmasyon sou jèn li yo ki enplike nan byosentèz PeGs.

An konklizyon, nou evalye efè H2O2 sou PeGs(feniletanoidglikozid)endiksyon nanCistanchesalsakilti selilè. Bibliyotèk SSH la te konstwi apre tretman H2O2, e RT-qPCR te konfime ekspresyon jèn yo. Yo te idantifye de jèn ki gen rapò ak chemen biosentèz PeG ak lòt jèn ki reponn ak H2O2-. Rezilta sa yo pral pwolonje konpreyansyon nou sou H2O2-PeGs pwovoke(feniletanoidglikozid)byosentèz nanCistanchesalsanan nivo molekilè, bay enfòmasyon pou manipilasyon jèn nanCistanchesalsakilti selil yo pou amelyore PeG yo(feniletanoidglikozid)pwodiksyon.

Soti nan: 'Idantifikasyon ESTs ki reponn a oksijene idwojèn ki enplike nan biosentèz glikozid fenilethanoid nan kilti selil Cistanche salsa' paJ. CHEN et al.

--- BIOLOGIA PLANTARUM 59 (4): 695-700, 2015 J. CHEN et al. DOI: 10.1007/s10535-015-0541-y

Referans

Bahin, E., Bailly, C., Sotta, B., Kranner, I., Corbineau, F., Leymarie, J.: Crosstalk ant espès oksijèn reyaktif ak chemen siyal ormon kontwole dòmi grenn nan lòj. - Plant Cell Environ. 34: 980-993, 2011.
Baruah, K., Norouzitallab, P., Linayati, L., Sorgeloos, P., Bossie, r P.: Espès oksijèn reyaktif ki te pwodwi pa yon pwoteyin chòk chalè (Hsp) pwovoke pwodwi kontribye nan pwodiksyon Hsp70 ak Hsp{{1} }medyatè iminite pwoteksyon nan Artemia franciscana kont vibrio patojèn. - Dev. Konp. Imunol. 46: 470-479, 2014.
Bello, RI, Gomez-Diaz, C., Navarro, F., Alcain, FJ, Villalba, JM: Ekspresyon NAD(P)H: kinon oksidoreductase 1 nan selil HeLa  wòl oksijene idwojèn ak faz kwasans. - J. biol. Chem. 276: 44379-44384, 2001.
Bustin, SA, Vandesompele, J., Pfaffl, MW: Normalisation de qPCR ak RT-qPCR. - Genet. Eng. Biotechnol. Nouvèl 29: 40-43, 2009.
Cheng, XY, Wei, T., Guo, B., N, I W., Liu, CZ:Cistanchekilti sispansyon selil deserticola:feniletanoidglikozidbyosentèz ak aktivite antioksidan. - Pwosesis Biochem. 40: 3119-3124, 2005.
Cheng, XY, Zhou, HY, Cui, X., Ni, W., Liu, CZ Amelyorasyon nanfeniletanoidglikozidbyosentèz nanCistanchekilti sispansyon selil deserticola pa elicitor chitosan. - J. Biotechnol. 121: 253-260, 2006.
Furlan, A., Llanes, A., Luna, V., Castro, S.: Asid abscisik medyatè pwodiksyon oksijene idwojèn nan pistach pwovoke pa estrès dlo. - Biol. Plant. 57: 555-558, 2013.
Gupta, SK, Ra,i AK, Kanwar, SS, Chand, D., Singh, NK, Sharma, TR: Se sèl jèn fonksyonèl rezistans eksplozyon Pi54 aktive yon mekanis defans konplèks nan diri. - J. eksp. bot. 63: 757-772, 2012.
Hu, GS, Jia, JM, Hur, YJ, Chung, YS, Lee, JH, Yun, DJ, Chung, WS, Yi, GH, Kim, TH, Kim, DH: karakterizasyon molekilè nan fenilalanin amonyak-lyase jèn soti nanCistanchedeserticola. - Mol. Biol. Rep. 38: 3741-3750, 2011.
Kar, RK: Repons plant nan estrès dlo: wòl espès oksijèn reyaktif. - Konpòtman siyal plant 6: 1741-1745, 2011.
Karyotou, K., Donaldson, RP: Ascorbate peroxidase, yon scavenger oksijene idwojèn nan manbràn glyoxysomal. - Arc h. Byochim. Biophys. 434: 248-257, 2005.
Kobayashi, H., Karasawa, H., Miyase, T., Fukushima, S.: Etid sou konstitiyan yo nansistanchse herba. 4. Izolasyon ak estrikti 2 nouvo glikozid fenilpropanoid, cistanoside-C, ak cistanoside-D. - Chem. Pharm. Toro. 32: 3880-3885, 1984.

Liu, CZ, Cheng, XY: Amelyorasyon nanfeniletanoidglikozidbyosentèz nan kilti selil yoCistanchedeserticola pa estrès osmotik. - Plant Cell Rep. 27: 357-362, 2008.
Liu, JY, Guo, ZG, Zeng, ZL: Amelyore akimilasyon nanfeniletanoidglikozidpa précurseur alimentation pou sispansyon kilti deCistanchesalsa. - Byochim. Eng. J. 33: 88-93, 2007.
Liu, XQ, Bai, XQ, Qian, Q., Wang, XJ, Chen, MS, Chu, CC: OsWRKY03, yon activator transcriptional diri ki fonksyone nan chemen siyal defans en nan OsNPR1. - Selil Res. 15: 593-603, 2005.
Murashige, T., Skoog, F.: Yon mwayen revize pou kwasans rapid ak byoessai ak kilti tisi tabak. - Fizyol. Plant. 15: 473-497, 1962.
Nan, ZD, Zeng, KW, Shi, SP, Zhao, MB, Jiang, Y., Tu, PF:Phenylethanoidglikozidak aktivite anti-enflamatwa soti nan tij yo nanCistanchedeserticola kiltive nan dezè Tarim. - Fitoterapia 89: 167-174, 2013.
Nanda, AK, Andrio, E., Marino, D., Pauly, N., Dunand, C.: espès oksijèn reyaktif pandan entèraksyon bonè plant-mikwo-òganis. - J. Integr. Plant Biol. 52: 195-204, 2010.
Ouyang, J., Wang, XD, Zhao, B., Wang, YC: Enhanced pwodiksyon defeniletanoid glikozidpa precurseur manje nan kilti selil la nanCistanchedeserticola. - Pwosesis Biochem. 40: 3480-3484, 2005a.
Ouyang, J., Wang, XD, Zhao, B., Wang, YC: amelyore pwodiksyon defeniletanoidglikozidpaCistancheselil deserticola yo kiltive nan yon byoreaktè avyon an bouk entèn ak rize sifter. - Anzim Microbiol. Teknoloji. 36: 982-988, 2005b.
Salcedo-Morales, G., Jimenez-Aparicio, AR, Cruz-Sosa, F., Trejo-Tapia, G.: Karakterizasyon anatomik ak istochimik nan haustorium vitro soti nan rasin Castilleja tenuiflora. - Biol. Plant. 58: 164-168, 2014.
Sathiyaraj, G., Srinivasan, S., Kim, YJ, Lee, OR, Parvin, S., Balusamy, SR, Khorolragchaa, A., Yang, DC: Aklimatasyon oksijene idwojèn amelyore tolerans sèl pa aktive pwoteyin ki gen rapò ak defans nan Panax ginseng CA Meyer. - Mol. Biol. Rep. 41: 3761-3771, 2014.
Schmidt, R., Mieulet, D., Hubberten, HM, Obata, T., Hoefgen, R., Fernie, AR, Fisahn, J., Segundo, BS, Guiderdoni, E., Schippers, JHM, Mueller-Roeber, B.: SALTRESPONSIVE ERF1 kontwole siyal ki depann de espès oksijèn reyaktif pandan premye repons a estrès sèl.
nan diri. - Plant Cell 25: 2115-2131, 2013.
Wang, T., Zhang, XY, Xie, WY:Cistanchedeserticola YC Ma, "Dezè Ginseng": yon revizyon. - Amer. J. manton. Med. 40: 1123-1141, 2012.
Wi, SG, Chung, BY, Kim, JH, Lee, KS, Kim, JS Modèl depo oksijene idwojèn nan djenn fèy diri anba estrès sèl. - Biol. Plant. 50: 469-472, 2006.
Zhou, XF, Jin, YH, Yoo, CY, Lin, XL, Kim, WY, Yun, DJ, Bressan, RA, Hasegawa, PM, Jin, JB: CYCLIN H1 kontwole repons estrès sechrès ak limyè ble pwovoke stomatal ouvèti pa anpeche akimilasyon espès oksijèn reyaktif nan Arabidopsis. - Plant Physiol. 162: 1030-1041, 2013.