htLang
Kay / Konesans / Sanisfè

Konesans

Amelyore antimelanogenesis ak efè antioksidan nan polisakarid soti nan Cuscuta Chinensis Lam Grenn apre idwoliz anzimatik

Mar 30, 2023

Résumé

Cuscuta chinensis polysaccharide (CPS) te ekstrè lè l sèvi avèk dlo cho ak anzimatik idrolyse C. chinensis polysaccharide (ECPS) te pwodwi pa pwosesis la mannanase anzimatik idrolyse. Objektif rechèch sa a se te mennen ankèt sou aktivite anti-melanogenic ECPS ak CPS nan selil melanom B16F10. Aktivite antioksidan nan vitro te evalye pa pouvwa fè rediksyon ferrik yo ak aktivite DPPH radikal gratis. Distribisyon mas molekilè polisakarid yo te detèmine lè l sèvi avèk SEC-MALLS-RI. CPS te avèk siksè degrade anzimatik lè l sèvi avèk mannoz ak pwa molekilè mwayèn filaplon CPS ak ECPS yo te 434.6 kDa ak 211.7 kDa. Rezilta yo nan tès aktivite byolojik sijere ke polisakarid anzimatik idrolize a te gen aktivite siperyè anti-melanogenic ak efè antioksidan pase polisakarid orijinal la. ECPS te montre aktivite anti-melanogenic pa reglemante ekspresyon tirozinaz, MITF, ak TRP-1 san efè sitotoksik nan selil melanom B16F10. An konklizyon, ECPS gen potansyèl pou vin yon pwodwi blanchi po. Dapre etid ki enpòtan,sistanchse yon zèb komen ke yo rekonèt kòm "zèb mirak ki pwolonje lavi". Eleman prensipal li se cistanoside, ki gen efè divès kalite tankou antioksidan, anti-enflamatwa, ak pwomosyon fonksyon iminitè. Mekanis ki genyen antsistanchepiblanchiman pomanti nan efè a antioksidan nan glikozid cistanche.Melaninnan po moun se pwodwi pa oksidasyon nan tirozin katalize patirozinaz, ak reyaksyon an oksidasyon mande pou patisipasyon nan oksijèn, kidonk radikal yo san oksijèn nan kò a vin yon faktè enpòtan ki afekte pwodiksyon melanin. Cistanche gen cistanoside, ki se yon antioksidan epi li ka diminye jenerasyon radikal gratis nan kò a, kidonkanpeche pwodiksyon melanin.

Mo kle:Cuscuta chinensis polisakarid; Aktivite antimelanogenic; Polisakarid idroliz anzimatik; Aktivite antioksidan

Entwodiksyon 

Melanin se pwodwi final transfòmasyon L-tirozin, ki se pi gwo detèminan nan koulè cheve ak po epi li jwe yon wòl enpòtan anpil nan pwoteksyon kont blesi radyasyon iltravyolèt (1). Sepandan, akimilasyon melanin ta ka enplike nan pigmantasyon nòmal ak rezilta nan ipèpigmantasyon nan po a, melasma, melanoz solè, ak efelid (2). Byosentèz melanin enplike nan yon sekans nan reyaksyon anzimatik ak oksidatif ak tirozinaz jwe yon wòl enpòtan nan pwosesis la (3). Pwoteyin ki gen rapò ak tirozinaz la (TRP-1) fasilite fòmasyon DHICA oksidaz nan chemen biosentetik melanin (4). Faktè transkripsyon ki asosye ak mikroftalmi intraselilè (MITF) se yon transkripsyon enpòtan

regilatè nan jèn byosentèz melanin. MITF patisipe tou nan reglemante pigmantasyon melanosit, pwopagasyon, ak diferansyasyon (5). siyal reseptè a-MSH-melanocortin 1 rive nan anzim espesifik melanojèn, ki gen ladan TRP-1; tyrosinase tou reglemante pa MITF (5). Anpil ajan blanchiman po fè egzèsis efè anti-melanogenic pa reglemante ekspresyon tirozinaz oswa efè inhibition sou aktivite tirozinaz. Anplis, nivo antioksidan entraselilè ak pwodiksyon radikal gratis tou afekte kontni melanin (6). Se poutèt sa, inibitè tirozinaz ak konpoze antioksidan yo souvan chwazi kòm ajan blanchi po. Cuscuta chinensis Lam., Yo rele TuSiZi nan Chinwa, se yon medikaman tradisyonèl Chinwa jeneralman yo itilize kòm yon manje fonksyonèl ak li te ye pou amelyore kapasite sistèm repwodiktif (7). Nan dènye ane yo, kèk rapò te endike itilizasyon li pou trete freckles ak vitiligo (8). Lòt rapò yo te montre ke li egzèse yon efè pozitif sou pwoteksyon po (9), ak pwovoke anpèchman nan aktivite tirozinaz (10).

rou cong rong whitening

Klike Sou Rou Cong Rong Benefis Pou Blanchiman

Mande plis:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

Polisakarid yo se eleman prensipal ki soti nan ekstrè dlo C. chinensis Lam. grenn, ki konsidere kòm gen anti-apoptoz (11) ak aktivite iminolojik (12). Rezilta analyse anvan yo te endike ke C. chinensis Lam. polisakarid konpoze de fruktoz, mannoz, ksiloz, ak arabinoz; mannoz se eleman prensipal sik la (13). Anpil chèchè te demontre ke viskozite (14), distribisyon pwa molekilè (Mw) (15), ak pwopòsyon monosakarid (16) nan polisakarid gen yon gwo efè sou byoaktivite yo. Anplis, rechèch ki sot pase yo te montre ke polisakarid degrade ak Mw ba montre pi wo aktivite antioksidan ak tirozinaz-anpèchman pase polisakarid orijinal la (17). Kidonk, pwodiksyon an nan yon polisakarid Mw ki ba soti nan C. chinensis Lam. grenn se nesesè yo amelyore byoaktivite li yo. Pami diferan pwosesis degradasyon yo, pi gwo avantaj ki genyen nan degradasyon anzimatik yo se espesifik substra, segondè selektivite, ak kondisyon modere, ki pwodui idrolysat ak estrikti byen defini (18).

Ki baze sou syans famasi sa yo, nou te espekile ke C. chinensis polisakarid (CPS) ak anzimatik idrolize C. chinensis polisakarid (ECPS) ta ka dwòg botanik efikas pou amelyorasyon nan hyperpigmentation. Mannase te itilize pou jwenn ba Mw ECPS nan grenn. Anplis de sa, yo te estime aktivite anti-melanogenesis ak antioksidan nan polisakarid ak diferan Mw, epi yo te envestige relasyon ki genyen ant byoaktivite ak Mw nan polisakarid.

Materyèl ak metòd

Reyaktif

Pwodwi chimik pou aktivite anzim ak antioksidan yo te achte nan men Sigma Co. (USA). Tout lòt reyaktif ak pwodwi chimik yo te achte nan men Aladin (Lachin).

Preparasyon CPS ak ECPS

Materyèl medsin nan grenn Cuscuta chinensis Lam yo te bay Guang Dong Feng Chun Pharmaceutical CO, LTD (Lachin). Apeprè 500 g materyèl sèk yo te an poud, ak tranpe ak 1200 mL 80 pousan etanòl pou 24 èdtan anba tanperati chanm pou retire lipid, oligosakarid, ak materyèl ki gen koulè. Echantiyon yo pretrete yo te enfiltre ak twal, ak Lè sa a, rezidi a sèk yo te ekstrè ak 3000 mL dlo nan 90 degre twa fwa. Ekstrè akeuz yo te separe de rezidi a pa santrifujasyon (4000 g pou 5 min nan 22 degre) ak Lè sa a, konsantre nan 70 degre anba vakyòm; kondansasyon an te presipite ak 60 pousan etanòl nan 3 degre pou 24 èdtan. Finalman, presipite a te deproteinated pa metòd la Sevag, dialyzed ak 3500 Da manbràn, lyophilized, ak Lè sa a, make C. chinensis polisakarid (CPS).

Enzymatically hydrolyzed C. chinensis polysaccharide (ECPS) te jwenn pa idroliz ak mannoz (0.1 pousan nan tanpon acetate sodyòm) nan yon rapò mannoz ak substrate 5:1 (v/w) nan 60 degre, pH. 4.5 pou 6 h. Apre sa, reyaksyon kataliz la te sispann nan dlo bouyi pou 10 minit. Solisyon reyaksyon an te santrifuje nan 10,000 g pou 15 min (4 degre), epi yo te kolekte supernatant la pou dyaliz nan 3 degre pou 3 jou ak yon manbràn 3500 Da pou retire ti sibstans molekilè yo epi yo te lyofilize.

Kontni idrat kabòn yo te teste pa metòd fenol asid silfirik ak glikoz kòm sibstans estanda nan yon koub kalibrasyon.

cistanche tubulosa

SEC-MALLS-RI mezi

Kwomatografi eksklizyon gwosè (Waters, USA) konbine avèk yon detektè limyè lazè milti-ang gaye (Wyatt, USA) ak yon detektè endèks refraktif (Waters, USA) (SEC-MALLS-RI) yo te itilize pou detekte pwa molekilè mwayèn pondéré nan polisakarid. SEC-MALLS-RI te pote soti ak Phenomenex Polysep-GFC-Linear kolòn (8 mm × 3 {{10}} 0 mm); echantiyon (2 mg/mL) yo te fonn ak faz mobil, ki fèt ak klori sodyòm 0.1 M. Volim nan piki te 100 mL ak parèy la te mete nan 0.7 mL / min.

Egzamen anpèchman tirozinaz djondjon

Anpèchman tirozinaz djondjon (19) te fèt jan yo te deja rapòte ak modifikasyon. Yon ti tan, 25 mL asid kojik (kontwòl pozitif) oswa solisyon echantiyon (25 mL 10 mM L-tirozin, 25 mL 0.5 mM L-DOPA, ak 875 mL 50 mM tanpon fosfat (pH 6.5) solisyon) yo te melanje. Lè sa a, 38 mL nan 2100 U / mL djondjon tirozinaz te ajoute ak vortexed. Apre 0.5-h enkubasyon nan 37 degre, yo te mezire absorbans ak yon lektè microplate nan 475 nm (Thermo Fisher, USA). Pousantaj anpèchman aktivite tirozinaz la te kalkile pa fòmil sa a: pousantaj anpèchman tirozinaz=[(A-kontwòl – A-echantiyon) / A-kontwòl] ×100, kote A-kontwòl reprezante absorpsyon nan 475 nm san yo pa echantiyon ak A-echantiyon reprezante absòbe a nan 475 nm ak echantiyon an.

Kilti selil ak tès viabilite

Selil melanom murin B16F10 yo te achte nan men byochimik ak byoloji selilè (Lachin). Selil yo te kenbe nan Dulbecco a modifye Eagle Medium (DMEM) complétée ak 10 pousan fetal serom bovine (FBS), 100 mg/mL streptomycin, ak 100 IU/mL penisilin nan 37 degre nan yon sikonstans imidite ki gen 5 pousan CO2. Selil yo te simen sou plak kilti ak konplete ak konsantrasyon diferan nan echantiyon ak a-melanocyte eksitan òmòn (a-MSH) pou 72 èdtan pou mezire aktivite a tirozinaz entraselilè ak kantite melanin.

Yo te fè tès 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazolium bromur (MTT) pou teste viabilite selil (20). Yon ti tan, 96-plak byen yo te simen ak selil melanom B16F10 murin yo. Yo te transfere yon volim 50 mL nan 2 mg/ml MTT nan chak pi apre tretman ak 100 mL nan konsantrasyon echantiyon diferan pou 24 èdtan. Apre 4- enkubasyon, reyaksyon an te sispann epi yo te ajoute sulfoksid dimethyl la pou fonn rezilta ensolubl la. Yo te mezire absorpsyon nan 590 nm ak lektè mikroplak la.

Mezi nan kontni melanin

Te deteksyon an nan kontni melanin te pote soti ak yon metòd yon ti kras modifye (21). Apre yo fin lave ak PBS glas, selil melanom (2 × 104 selil pou chak pi) yo te simen nan yon plak 96-byen epi yo te enkube a 37 degre pou 48 èdtan. Lè sa a, yo te ajoute 100 mL NaOH (1N) nan chak pi pou fonn selil melanom nan 80 degre pou 30 min. Lisat la te santrifuje nan 15,000 g pou 15 min (4 degre). Lè sa a, yo te mezire absorbans ak lektè mikroplak la nan 405 nm. Tout eksperyans yo te fèt an triple.

Esè aktivite tirozinaz intraselilè

Entracellular tyrosinase essai aktivite te pote soti dapre literati anvan ak modifikasyon minè (22). Yon ti tan, selil melanom yo te lysed ak tanpon liz (1 mM PMSF, 1 pousan Triton X-100, 20 mM fosfat sodyòm) pa friz-dekonjle. Apre santrifugasyon lisat la nan 15,000 g pou 10 min (4 degre), kontni an pwoteyin nan supernatant la te detèmine pa yon tès asid bicinchoninic (BCA). Pwoteyin supernatant la (10 mg) te transfere nan 100 mL melanj reyaksyon an (0.1 pousan L-DOPA ak 0.1 M tanpon fosfat). Apre 60 minit enkubasyon nan 37 degre, yo te mezire aktivite tirozinaz ak lektè mikroplak la nan 450 nm. Tout eksperyans yo te fèt an triple.

Ferrik fè diminye pouvwa

Yo te fè tès ferrik fè-diminye pouvwa a dapre yon metòd pibliye deja ak modifikasyon minè (23). Konsantrasyon diferan echantiyon yo (2 mL) oswa Vc (yon kontwòl pozitif) yo te melanje ak 2 mL ferricyanide potasyòm (1 pousan, W/V) ak 2 mL tanpon fosfat (0.2 M, pH 6.8). Apre enkubasyon nan 50 degre pou 30 min, yo te transfere 2 mL asid trichloroacetic (10 pousan, W/V) nan melanj reyaksyon an epi santrifuje nan 4000 g pou 15 min (22 degre). Supernatant la (2 mL) te melanje ak melanj ki gen 2 mL dlo distile ak 0.4 mL FeCl3 (0.1 pousan, W/V). Apre 10 min enkubasyon nan 37 degre, yo te mezire absorpsyon an ak lektè mikroplak la nan 700 nm.

DPPH tès aktivite radikal-scavenging

DPPH-scavenging aktivite tès la te pote jan yo te rapòte deja ak kèk modifikasyon (24). Yon ti tan, 2 mL echantiyon an te ajoute nan 2 mL 0.1 mM DPPH solisyon ak vortexed. Apre 30 minit enkubasyon nan fè nwa a, yo te mezire absorbans la ak lektè microplate a nan 517 nm.

Analiz ekspresyon pwoteyin pa Western blot

cistanche supplement whitening

Apre tretman ak diferan konsantrasyon ECPS pou 72 èdtan, selil yo te lave ak PBS epi liz nan tanpon RIPA (150 mM NaCl nan 50 mM pH 8.0 Tris-HCl. , 0.5 pousan deoxycholate sodyòm, 1.0 pousan nondiet P-40, ak 0.1 pousan dodecyl sulfat sodyòm). Apre santrifugasyon nan 10,000 g pou 25 min (4 degre), yo te kolekte supernatant lisat yo. Pwoteyin yo te sibi 12 pousan SDS-PAGE ak Lè sa a, transfere nan yon manbràn polyvinylidene difluoride. Bloke te fèt nan saline Tris-tampon ak Tween-20 ak 2 pousan poud lèt ekreme (TBST), ak Lè sa a, enkube pou 12 èdtan nan 4 degre. Antikò prensipal yo te itilize yo se: anti-aktin (1:5000), anti-TRP-1 (1:500), anti-tirosinaz (1:500), ak anti-MITF (1:1000). Antikò prensipal yo te retire, epi manbràn yo te netwaye de fwa ak TBST. Apre sa, manbràn ak antikò segondè konjige peroksidaz refor (Santa Cruz, USA) yo te enkube pou 60 minit nan tanperati chanm. Bann pwoteyin yo te lave ak TBST ankò epi yo te wè ak yon twous ECL (Amersham Pharmacia Biotech, USA) lè l sèvi avèk sistèm D 'UVP (UVP, USA).

Analiz estatistik

Tout rezilta yo rapòte kòm mwayen ± SD ak eksperyans yo te repwodui twa fwa. Konparezon ant gwoup yo te estime lè l sèvi avèk ANOVA ki te swiv pa tès Dunnett la. Tès Elèv la te fè konparezon sèl ant de gwoup yo. Tout analiz estatistik yo te fè avèk lojisyèl SPSS (vèsyon 16.0). Po0.05 te anjeneral konsidere kòm estatistik enpòtan.

Rezilta yo

Mw ak total polisakarid ECPS ak CPS

Kontni total polisakarid ECPS ak CPS mezire pa phenol-sulfuric acid assay te 89.17 ak 90.26 pousan, respektivman. Pandan se tan, Mw nan ECPS ak CPS yo te mezire pa SEC-MALLS-RI. Mw nan ECPS te 211.7 kDa, ki te pi ba pase CPS (434.6 kDa). Figi 1A montre entansite relatif (RI) pou ECPS ak CPS; apre idroliz anzimatik pa mannoz, tan an retansyon pik nan ECPS te pi long pase sa yo ki nan CPS. Jan yo parèt nan Figi 1B, fraksyon pwa diferans nan polisakarid yo te dekri kòm fonksyon mas molè pou echantiyon yo. Distribisyon an mas molè nan polisakarid chanje anpil pa idroliz anzimatik. Fraksyon pwa diferans nan ECPS nan rejyon ki ba Mw ogmante, sa ki sijere ke CPS la te enzymatikman degrade nan polisakarid Mw ki ba.

rou cong rong benefits

Aktivite antioksidan nan polisakarid

Nan Figi 2A yo rapòte kapasite DPPH pou retire radikal gratis ECPS ak CPS. Aktivite scavenging radikal gratis nan echantiyon polisakarid ak Vc te montre yon aktivite ki depann de dòz la. Nan etid aktyèl la, kapasite CPS pou elimine radikal gratis la te pi ba pase ECPS. Sepandan, tou de te montre yon efè pi ba radikal gratis pase echantiyon pozitif la. Valè IC50 ECPS ak CPS yo te 0.39 ak 0.51 mg/mL, respektivman. Jan yo montre nan Figi 2B, aktivite antioksidan total la ka evalye lè w teste pouvwa fè-diminye fè a. Konsantrasyon yo varye de 0.1 a 1 mg / mL; tou de echantiyon polisakarid ak Vc prezante aktivite antioksidan nan yon fason ki depann de dòz la. Anplis, valè absorbans ECPS te toujou pi wo pase CPS nan menm konsantrasyon.

Efè ECPS ak CPS sou aktivite tirozinaz djondjon ak viabilite selil

Jan yo montre nan Figi 2C, aktivite inhibition tirozinaz polisakarid (0.1B1 mg/mL) prezante yon relasyon ki depann de dòz la. Anplis, efè inhibition ECPS te toujou pi wo pase CPS nan menm konsantrasyon an. Yo te fè tès MTT la pou evalye efè sitotoksik ECPS ak CPS nan selil melanom B16F10. Jan yo parèt nan Figi 2D, pa te gen okenn chanjman enpòtan nan viabilite selil B16F10 ak konsantrasyon diferan (0B320 mg/mL) nan ECPS ak CPS. Dapre rezilta sa yo, nou te itilize ranje konsantrasyon sa yo nan

plis rechèch.

cistanche for sale

Efè ECPS ak CPS sou aktivite tirozinaz intraselilè ak kontni melanin

Pou konpare efè ECPS ak CPS sou aktivite tirozinaz intraselilè ak melanogenesis nan modèl selil melanom B16F10, puisans inhibition ECPS ak CPS sou kontni melanin ak aktivite tirozinaz nan B16F1{{{{{{) ki stimule ak MSH. 16}} selil yo te egzamine. Jan yo montre nan Figi 3, kontni melanin ak aktivite tirozinaz nan selil B16F10 yo te ogmante siyifikativman lè yo konpare ak selil B16F10 san stimulation (Po 0.01). Nan konsantrasyon nan 40 mg / mL (ECPS) ak 160 mg / mL (CPS), ogmantasyon nan kontni melanin ta ka bese nan yon fason ki depann de dòz (Po0.01 ak Po0.05). Menm jan an tou, tretman ak ECPS (40 mg/mL) ak CPS (160 mg/mL) siprime aktivite tirozinaz selil B16F10 (Po 0.01 ak Po0.05). Anplis, ECPS te montre pi wo aktivite inhibition tirozinaz sou melanogenesis pase CPS. ECPS (160 ak 320 mg/mL) te egzèse yon efè anti-melanogenesis ki konparab ak kontwòl pozitif (asid Kojik), ki lajman itilize kòm yon konpoze bioaktif pou blanchi po.

how to take rou cong rong

Efè ECPS sou nivo pwoteyin tirozinaz, MITF ak TRP{0}} nan selil B16F10

Jan yo montre nan Figi 4, ECPS diminye nivo ekspresyon pwoteyin tirozinaz, MITF ak TRP-1 nan selil B16F10 nan yon fason ki depann de dòz la (Po0.05 ak Po0. 01). Rezilta sa yo montre ke ECPS anpeche ekspresyon tirozinaz la pa reglemante ekspresyon pwoteyin TRP-1 ak MITF.

Diskisyon

Polisakarid natirèl yo soti nan C. chinensis te resevwa atansyon atribiye nan bon efè yo sou anpèchman tirozinaz, gratis radikal scavenging, ak pwoteksyon po (25-27). Sepandan, ti rechèch te konsantre sou aktivite antimelanogenesis nan modifikasyon anzimatik nan polisakarid. Rechèch anvan yo te demontre ke polisakarid degrade pa pwosesis idroliz anzimatik te ekspoze siperyè efè radikal gratis (28). Anplis, aktivite byolojik polisakarid yo gen rapò ak distribisyon Mw yo. Teyorikman, polisakarid Mw ki ba yo pi aktif pase polisakarid Mw wo akòz gwo pwopriyete pénétration yo sou manbràn selilè (29,30). Sepandan, efè antimelanogenesis ECPS sou selil B16F10 pa t 'ankò te etidye. Polisakarid Mw ki ba a te prepare pa idroliz anzimatik ak mannoz.

Estrès oksidatif ka pwodwi twòp radikal gratis ak mennen nan aksidan oksidatif. Etid anvan yo te pwouve ke maladi po a se pre relasyon ak akimilasyon nan radikal gratis (31). Anplis, twòp radikal gratis jwe yon wòl enpòtan anpil nan siprime melanogenesis selil melanom ak kwasans melanosit (32). Tirozinaz se yon anzim oksidan miltifonksyonèl ki gen an kwiv epi li enpòtan anpil nan pwomosyon biosentèz melanin (33). Sepandan, pigmantasyon po ak divès maladi po yo gen rapò ak akimilasyon nan melanin ak lakòz yon pwoblèm estetik grav (34).

Engredyan aktif ak kapasite antioksidan ak anti-tirosinaz ka egzèse pwoteksyon po ak anpeche melanogenesis (35). Rezilta nou yo te demontre ke Mw ki pi ba nan polisakarid enzymatikman modifye montre aktivite antioksidan ak anti-tirozinaz siperyè pase polisakarid orijinal yo nan vitro. Amelyorasyon an atribiye nan pi gwo sifas la ak pi bon solubility dlo, ki te konsistan avèk yon etid anvan (17) ki te montre ke polisakarid la degrade soti nan Sargassum fusiforme posede aktivite siperyè anti-tirozinaz ak aktivite antioksidan pase polisakarid orijinal la.

cistanche reddit whitening

Melanosit nòmal kouche nan junction epidèm ak dèrm nan po a epi jenere melanin, ki transfere nan keratinosit (36). Nan etid la prezan, selil melanom murin B16F10 yo te itilize paske yo posede mekanis melanojèn, yo konnen yo gen tirozinaz entraselilè, epi yo ka jenere melanin, ki gen rapò ak eksitasyon a-MSH ak melanogenesis (37). Aktivite tirozinaz, kontni melanin, ak viabilite selil yo se te esè in vitro yo itilize pou fè tès antimelanogenesis nan etid prezan an. CPS ak ECPS te montre yon efè inhibition depann de dòz sou aktivite tirozinaz ak sentèz melanin nan selil B16F10. ECPS te montre yon pi fò sentèz anti-melanin ak efè anti-tirozinaz.
Pwoteyin ki gen rapò ak tirozinaz-1 (TRP-1) ak tirozinaz jwe yon wòl enpòtan anpil nan byosentèz melanin ak chemen melanogenesis (38). MITF se yon faktè transkripsyon selilè nan jèn tirozinaz la, ki patisipe nan melanogenesis. Anjeneral, aktivasyon TRP-1 ak tirozinaz amelyore ekspresyon pwoteyin MITF ak lakòz yon ogmantasyon nan sentèz melanin (39). Kidonk, ajan blanchi po yo ka gen pwopriyete pou anpeche chemen siyal ki enplike nan aktivasyon TYP-1 oswa tirozinaz. Se poutèt sa, nou te envestige efè ECPS sou TRP-1, tirozinaz selilè, ak ekspresyon pwoteyin MITF pou etidye mekanis ki kache nan anpèchman aktivite tirozinaz ak melanogenesis. Rezilta tès Western blot la te montre ke ECPS te siprime ekspresyon TRP-1, tirozinaz, ak MITF nan selil B16F10 epi li te implique ke ECPS diminye melanogenesis pa reglemante ekspresyon tirozinaz, MITF ak TRP-1. nan selil melanom B16F10. Rezilta a te soti nan yon etid anvan ki montre ke ekstrè akeuz nan grenn Cuscuta japonica siyifikativman inibit sentèz melanin ak aktivite tirozinaz a-MSH-induit pa siprime fosforilasyon p38 MAPK, anpeche nivo cAMP, epi imedyatman diminye ekspresyon TRP ak MITF (40) .
An rezime, polisakarid enzymatikman modifye a posede siperyè antioksidan ak efè anti-melanogenic pase polisakarid orijinal la. Anplis de sa, efè anti-melanogenic sa a nan ECPS te medyatè pa represyon nan TRP -1, tirozinaz, ak ekspresyon MITF nan selil B16F10 murin yo. ECPS ka aplikab pou itilize nan domèn pwodui kosmetik ak medikal.

Rekonesans

Travay sa a te sipòte pa Fondasyon Nasyonal Syans Natirèl Lachin nan (sibvansyon No 81373640).

Referans

1. Riley PA. Melanogenesis ak melanom. Pigman Cell Research 2003; 16: 548–552, doi: 10.1034/j.1600-0749. 2003.00069.x.
2. Ortonne JP, Bissett DL. Dènye Sur nan hyperpig-mantasyon po. J Investig Dermatol Symp Proc 2008; 13: 10–14, doi: 10.1038/jidsymp.2008.7.
3. Arung ET, Kuspradini H, Kusuma IW, Shimizu K, Kondo R. Validasyon fèy Eupatorium triplinerve Vahl, yon zèb swen pou po soti nan Kalimantan lès, lè l sèvi avèk yon esè Melanin Biosynthesis. J Acupunct Meridian Stud 2012; 5: 87–92, doi: 10.1016/ j.jams.2012.01.003.
4. Kobayashi T, Urabe K, Winder A, Jiménez-Cervantes C, Imokawa G, Brewington T, et al. Pwoteyin 1 ki gen rapò ak tirozinaz (TRP1) fonksyone kòm yon oksidaz DHICA nan biosentèz melanin. EMBO J 1994; 13: 5818–5825.
5. Costin GE, Tande VJ. Pigmantasyon po moun: melanosit modile koulè po an repons a estrès. FASEB J 2007; 21: 976–994, doi: 10.1096/fj.06-6649rev.
6. Galván I, Alonso-Alvarez C. Yon antioksidan intraselilè detèmine ekspresyon yon siyal ki baze sou melanin nan yon zwazo. PLoS One 2008; 3: e3335, doi: 10.1371/journal.pone. 0003335.
7. Yang J, Wang Y, Bao Y, Guo J. Flflavon total ki soti nan Semen auscultate ranvèse rediksyon nan nivo testostewòn ak ekspresyon jèn nan reseptè androjèn nan ren-yang ensufizant sourit. J Ethnopharmacol 2008; 119: 166–171, doi: 10.1016/j.jep.2008.06.027.
8. Donnapee S, Li J, Yang X, Ge AH, Donkor PO, Gao XM, et al. Cuscuta chinensis Lam.: Yon revizyon sistematik sou etnofarmakoloji, fitochimik ak famasi nan yon medikaman èrbal tradisyonèl enpòtan. J Ethnopharmacol 2014; 157: 292–308, doi: 10.1016/j.jep.2014.09.032.
9. Nisa M, Akbar S, Tariq M, Hussain Z. Efè ekstrè dlo Cuscuta chinensis sou 7, 12-dimethylbenz [a] papillom po anthracene-induit ak karsinom nan sourit. J Etnophar macol 1986; 18: 21–31, doi: 10.1016/0378-8741(86)90040-1.
10. Wang TJ, An J, Chen XH, Deng QD, Yang L. Evalyasyon efè grenn Cuscuta chinensis sou melanogenesis: Konparezon dlo ak fraksyon etanòl nan vitro ak nan vivo. J Ethnopharmacol 2014; 154: 240–248, doi: 10.1016/j.jep. 2014.04.016.
11. Solèy SL, Guo L, Ren YC, Wang B, Li RH, Qi YS, et al. Efè antiapoptoz nan polisakarid izole nan grenn Cuscuta chinensis Lam sou cardiomyocytes nan rat aje. Mol Biol Rep 2014; 41: 6117–6124, doi: 10.1007/s11033- 014-3490-1.
12. Wang Z, Fang JN, Ge DL, Li XY. Karakterizasyon chimik ak aktivite iminolojik yon polisakarid asid izole nan grenn Cuscuta chinensis Lam. Acta Pharmacol Sin 2000; 21: 1136–1140.
13. Yang S, Xu X, Xu H, Xu S, Lin Q, Jia Z, et al. Pirifikasyon, karakterizasyon, ak efè byolojik nan ranvèse defisi nan ren-yang nan polisakarid soti nan Semen miskilè. Carbohydr Polym 2017; 175: 249–256, doi: 10.1016/j.carbpol. 2017.07.077.
14. Katayama S, Nishio T, Nishimura H, Saeki H. Pwopriyete imunomodulateur yon ekstrè polisakarid trè gluan ki soti nan alg Gagome (Kjellmaniella crassifolia). Plant Manje Imèn Nutr 2012; 67: 76–81, doi: 10.1007/s11130-011- 0271-z.
15. Pengzhan Y, Ning L, Xiguang L, Gefei Z, Quanbin Z, Pengcheng L. Efè antihyperlipidemic nan diferan pwa molekilè silfate polisakarid soti nan Ulva pertusa (Chlorophyta). Pharmacol Res 2003; 48: 543–549, doi: 10.1016/ S1043-6618(03)00215-9.
16. Jiang Y, Qi X, Gao K, Liu W, Li N, Cheng N, et al. Relasyon ant pwa molekilè, konpozisyon monosakarid, ak aktivite imunobyolojik nan polisakarid Astragalus. Glycoconj J 2016; 33: 755–761, doi: 10.1007/ s10719-016-9669-z.
17. Chen BJ, Shi MJ, Cui S, Hao SX, Hider RC, Zhou T. Amelyore aktivite antioksidan ak anti-tirosinaz nan polisakarid soti nan Sargassum fusiforme pa degradasyon. Int J Biol Macromol 2016; 92: 715–722, doi: 10.1016/j.ijbiomac. 2016.07.082.
18. McCleary BV. Modifikasyon anzimatik nan polisakarid plant yo. Int J Biol Macromol 1986; 8: 349–354, doi: 10.1016/ 0141-8130(86)90054-1.
19. Baurin N, Arnoult E, Scior T, Do QT, Bernard P. Depistaj preliminè kèk plant twopikal pou aktivite anti-tirozinaz. J Ethnopharmacol 2002; 82: 155–158, doi: 10.1016/S0378- 8741(02)00174-5.
20. Mosmann T. Rapid tès kolorimetrik pou kwasans selilè ak siviv: Aplikasyon nan pwopagasyon ak cytotoxicity essais. J Immunol Methods 1983; 65: 55–63, doi: 10.1016/0022- 1759(83)90303-4.
21. Hosoi J, Abe E, Suda T, Kuroki T. Règleman nan sentèz melanin nan selil melanom sourit B16 pa 1 alfa, 25-dihydroxy vitamin D3 ak asid retinoik. Kansè Res 1985; 45: 1474–1478.
22. Wang HM, Chen CY, Wen ZH. Idantifye inibitè melanogenesis soti nan Cinnamomum subavenium ak sistèm tès depistaj in vitro ak in vivo pa vize tirozinaz imen an. Exp Dermatol 2011; 20: 242–248, doi: 10.1111/j.1600-0625. 2010.01161.x.

23. Berker KI, Güc ¸lü K, Tor I˙, Apak R. Evalyasyon konparatif Fe(III) diminye tès kapasite antioksidan ki baze sou pouvwa nan prezans fenantrolin, bat-ho-phenanthroline, tripyridyltriazine (FRAP), ak ferricyanide. reyaktif. Talanta 2007; 72: 1157-1165, doi: 10.1016/j.talanta.2007.01.019.

24. Parejo I, Codina C, Petrakis C, Kefalas P. Evalyasyon aktivite scavenging evalye pa Co(II)/EDTA-induit luminol chemiluminescence ak DPPH ● (2,2-diphenyl-1 picryl hydroxyl ) tès radikal gratis. J Pharmacol Toxicol Metòd 2000; 44: 507–512, doi: 10.1016/S1056-8719(01)00110-1.

25. Rout S, Banerjee R. Free radikal scavenging, anti-glycation ak pwopriyete anpèchman tirozinaz nan yon fraksyon polisakarid izole nan krout la soti nan Punica granatum. Bioresour
Teknoloji 2007; 98: 3159–3163, doi: 10.1016/j.biortech.2006. 10.011.
26. Yu P ak Solèy H. Pirifikasyon nan yon fucoidan soti nan polisakarid varech ak sinetik inhibition li yo pou tirozinaz. Polymers idrat kabòn 2014; 99: 278-283, doi: 10.1016/ j.carbpol.2013.08.033.
27. Wei X, Liu Y, Xiao J, Wang Y. Efè pwoteksyon nan polisakarid te ak polifenol sou po. J Agric Food Chem 2009; 57: 7757–7762, doi: 10.1021/jf901340f.
28. Xu J, Xu LL, Zhou QW, Hao SX, Zhou T, Xie HJ. Amelyore nan vitro aktivite antioksidan nan polisakarid soti nan Enteromorpha proliferasyon pa degradasyon anzimatik. J Food Biochem 2016; 40: 275–283, doi: 10.1111/jfbc.12218.
29. Zhou J, Hu N, Wu Yl, Pan Yj, Solèy CR. Etid preliminè sou karakterizasyon chimik ak pwopriyete antioksidan nan polisakarid asid soti nan Sargassum fusiforme. J Zhejiang Univ Sci B 2008; 9: 721–727, doi: 10.1631/jus. B0820025.
30. Wu Q, Zheng C, Ning ZX, Yang B. Modifikasyon nan polisakarid ki ba pwa molekilè soti nan Tremella fuciformis ak aktivite antioksidan yo nan vitro. Int J Mol Sci 2007; 8: 670–679, doi 10.3390/i8070670.
31. Yasui H, Sakurai H. Jenerasyon ki depann de laj nan espès oksijèn reyaktif nan po rat san cheve vivan ekspoze a limyè UVA. Exp Dermatol 2003; 12: 655–661, doi: 10.1034/ j.1600-0625.2003.00033.x.
32. Yamakoshi J, Otsuka F, Sano A, Tokutake S, Saito M, Kikuchi M, et al. Efè eklere sou pigmantasyon iltravyolèt pwovoke nan po kochon Gine pa administrasyon oral nan yon ekstrè proanthocyanidin ki rich nan grenn rezen. Pigman Cell Res 2003; 16: 629–638, doi: 10.1046/j.1600-0749. 2003.00093.x.
33. Strothkamp KG, Jolley RL, Mason HS. Quaternary estrikti nan tirozinaz djondjon. Biochem Biophys Res Commun 1976; 70: 519–524, doi 10.1016/0006-291X(76)91077-9.
34. Parvez S, Kang M, Chung HS, Bae H. Inibitè tirozinaz ki rive natirèlman: mekanis ak aplikasyon nan sante po, pwodui kosmetik, ak endistri agrikilti. Phytother Res 2007; 21: 805–816, doi: 10.1002/ptr.2184.

35. Perluigi M, De Marco F, Foppoli C, Coccia R, Blarzino C, Luisa Marcante M, et al. Tyrosinase pwoteje melanosit imen soti nan konpoze ROS-génération. Biochem Biophys Res Commun 2003; 305: 250–256, doi: 10.1016/S0006- 291X(03)00751-4.

36. Hirobe T. Ki jan yo kontwole pwopagasyon ak diferansyasyon melanosit yo? Pigman Cell Melanoma Res 2011; 24: 462–478, doi: 10.1111/j.1755-148X.2011.00845.x.
37. Buscà R, Ballotti R. Cyclic AMP yon mesaje kle nan règleman an nan pigmantasyon po. Pigman selil Res 2000; 13: 60–69, doi: 10.1034/j.1600-0749.2000.130203.x.
38. Slominski A, Tobin DJ, Shibahara S, Wortsman J. Melanin pigmantasyon nan po mamifè ak règleman ormon li yo. Physiol Rev 2004; 84: 1155–1228, doi: 10.1152/physrev. 00044.2003.
39. Shibahara S, Yasumoto KI, Amae S, Udono T, Watanabe KI, Saito H, et al. Règleman ekspresyon jèn pigman selil espesifik pa MITF. Pigman selil Res 2000; 13: 98-102, doi: 10.1034/j.1600-0749.13.s8.18.x.
40. Jang JY, Kim HN, Kim YR, Choi YH, Kim BW, Shin HK, et al. Yon fraksyon akeuz ki soti nan grenn Cuscuta japonica siprime sentèz melanin atravè anpèchman p38 mitogen-aktive pwoteyin kinaz siyal chemen an nan selil B16F10. J Ethnopharmacol 2012; 141: 338–344, doi: 10.1016/j.jep. 2012.02.043.
Ou ka renmen tou