tid yo montre ke otofaji jwe yon wòl enpòtan nan règleman an nan depo selilè LD Pati 2

Tanpri kontakteoscar.xiao@wecistanche.compou plis enfòmasyon

2.14. Laktat dehydrogenase (LDH) tès

Dapre enstriksyon manifakti a, selil yo te plake nan yon plak 96-byen nan 5000 selil/pi, epi yo te kolekte yon mwayen kilti pou mezire nivo LDH ak yon twous tès (Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute). Lè sa a, absorpsyon echantiyon yo te detekte pa Multiskan Spectrum (Thermo Fisher Scientific) nan 450 nm.

2.15. BODIPY493/503, BODIPY 581/591 C11, ak MitoTracker gwo twou san fon tach wouj

Selil vivan yo te lave ak PBS epi yo te enkube ak 2 ug/ml BOD-IPY 493/503 (InvitrogenTM, Cat D3922) oswa BODIPY 581/591 C11 (BD-C11）（2.0 μM, InvitrogenTM, Cat D3861）nan PBS pou 15min nan 37 degre.Pou tach MitoTracker Deep Red, selil vivan yo te enkube ak 0.5 ug/ml MitoTracker Deep Red (InvitrogenTM, Cat M22426) nan PBS pou 30 min nan 37 degre. yo te lave de fwa nan PBS ak fiks nan 3.5 pousan PFA pou 10 min ki te swiv pa lave ak counterstaining ak Hoechst 3342 (Sigma, Cat B2261) pou 10 minit anvan yo te kouvri sou glisad an vè pou D.konbyen cistanche pou pranImaj yo te obsève ak foto yo te kaptire pa mikwoskopi fluoresans (Olympus, Tokyo, Japon).

Tanpri klike la a pou w konnen plis

2.16.Hoechst ak PI tach

Selil yo te tache ak Hoechst 33,342（1 ul dilye nan 500ul PBS, Sigma, Cat B2261）ak (oswa）PI （0.1 ul dilye nan 500ul PBS, Solarbio, (cistanche dòmi) pou CA11020 min) Lè sa a, fiks ak obsève pa mikwoskospi fluoresans (Olympus, Tokyo, Japon).

2.17.Flow sitometri

Selil yo te dijere epi rense ak D-hank a Lè sa a, tache ak Annexin V-FITC（5 ul dilye nan 500ul PBS）/PI (0.1 ul dilye nan 500ul PBS) twous apoptoz (CA1020, Solarbio, Beijing, Chian). ) selon pwotokòl manifakti a. Apre, selil apoptotik yo te analize lè l sèvi avèk flow cytometry (guava easyCyterM 8, Millipore, USA). Mitokondriyo ROS ak mezi potansyèl manbràn mitokondriyo yo te fèt jan yo te pibliye 【12】. Selil SH-SY5Y yo te tache ak MitoSOX （2.5 μM, Invitrogen, USA） oswa ak JC1 （10 ug/ml, T-3168, Invitrogen, USA） nan 37 degre pou 30 min. Apre yo fin lave ak PBS de fwa, selil yo te resuspend nan PBS frèt ki gen 1 pousan FBS pou analiz sitometrik koule. Done yo te analize ak lojisyèl FCS Express (Guava Easy CyterM8, Millipore, Hayward, CA, USA).

2.18. Esay respirasyon Seahorse

Fonksyon respiratwa mitokondriyo nan selil SH-SY5Y vivan yo te mezire lè l sèvi avèk analizeur Seahorse ekstraselilè flux (XFe96) (Agi-lent, Santa Clara, USA) atravè chanjman nan pousantaj konsomasyon oksijèn (OCR). Selil SH-SY5Y ki simen nan 3 × 10³ selil/byen yo te pèmèt yo konfòme yo ak plak kilti selil Seahorse yo epi yo rive nan apeprè 80 pousan konfluyans nan moman eksperyans lan. ekspoze a MPP* pou yon lòt 24 èdtan. OCR te detekte nan kondisyon fondamantal ki te swiv pa adisyon sekans nan 1 μM oligomycin, 1 μM FCCP, osi byen ke 1 μM rotenone ak antimycin A.

Cistanche ka amelyore iminite

2.19. Analiz estatistik

Done yo te prezante kòm mwayen ± SEM. Siyifikasyon diferans lan te detèmine pa tès t Elèv la, analiz de divèjans nan de-fason, oswa analiz divèjans nan yon sèl-fason (ANOVA) ki te swiv pa tès post hoc Tukey la. Diferans lan te konsidere kòm enpòtan nan P<>

3. Rezilta yo

Rezilta 1. Ka retabli malfonksyònman motè ak ogmante nivo dopamine nan striatum nan sourit modèl MPTP/p PD.

Pou envestige efè neuroprotective patojèn Kaon PD, 4-mwa sourit gason C57BL/6 yo te sou fòm piki ak neurotoxin MPTP pou etabli modèl MPTP/p PD epi yo te trete ak Ka (Fig. la). Apre endiksyon modèl, tès rotarod ak tès poto yo te itilize pou evalye pèfòmans motè ak konpòtman sourit nan diferan gwoup yo. Jan yo montre, tan an pèfòmans rotarod te siyifikativman redwi nan sourit MPTP-trete, ak efè sa a te anpeche pa Ka (Fig.1b). (Benefis cistanche tubulosa) Ka tou retabli defisi konpòtman ki pwovoke pa MPTP, jan sa endike nan rediksyon yo nan tan an vire ak tan total nan tès la poto (Fig. 1c ak d), san yo pa afekte pwa kò yo nan sourit yo (Fig. le). Anplis de sa, analiz HPLC te montre ke nivo dopamine nan striatum a te siyifikativman diminye nan MPTP/p-challenged sourit, e nivo sa a te retabli pa tretman Ka (Fig. 1f). (Cistanche tubulosa ekstrè) Ka tretman tou soulaje MPTP/ p-induit rediksyon nan dihydroxy-phenyl asid acetic (DOPAC, yon metabolit nan dopamine) nivo nan striatum a (Fig.1g).devni selèb zèb cistancheRezilta sa yo sijere ke Ka retabli malfonksyònman motè ak ogmante nivo dopamine nan striatum a nan sourit PD MPTP-induit.

Rezilta 2. Ka soulaje pèt newòn DA nan SNpc sourit modèl MPTP/p PD.

Apre sa, pou evalye plis efè neuroprotective Kaon MPTP/p-induced DA newòn andikap, nou egzamine newòn tyrosine hydroxylase (TH) nan SNpc murin pa imunostaining. Jan yo montre nan Fig.2a ak b, MPTP / p pwovoke yon rediksyon enpòtan nan kantite newòn TH, ki te soulaje pa tretman an Ka. Anplis de sa, konte estereolojik nan total newòn nan SNpc a, jan Nissl defini.

Fig.1. Ka tretman soulaje malfonksyònman motè ak ogmante nivo dopamine nan striatum nan sourit modèl MPTP / p PD.

(a) Dyagram chema konsepsyon eksperimantal la.(cistanche tubulosa reddit) (b) Yo te mezire tan sou baton an pou tès rotarod la sou twa jou youn apre lòt. (cd) Yo pran tan pou vire (tan vire) epi desann yon poto (tan k ap monte) te anrejistre pou tès poto a. (e) Yo te mezire pwa kò sourit nan fen etid la. (fg) Dopamine (DA) ak asid dihydroxy-phenyl acetic (DOPAC) nan striatum la te analize pa segondè-pèfòmans likid chromatografi. Done yo eksprime kòm mwayen±SEM.n=9-10 pou chak gwoup nan (b,c,d);n=6-8 pou chak gwoup nan (f,g).ns, pa enpòtan,* P<><><0.001, by="" one-way="" anova="" followed="" by="" tukey's="" post="" hoc="" test.="" mptp,1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridine;="" ka,kaempferol.="" staining,="" verified="" that="" the="" loss="" of="" th+="" cells="" reflected="" cellular="" death="" but="" not="" the="" downregulation="" of="" th="" expression="" and="" showed="" that="" ka="" treatment="" restored="" the="" decrease="" in="" the="" number="" of="" nissl-positive="" neurons="" in="" the="" snpc="" of="" mptp-treated="" mice="" from="" 43.3%="" to="" 25.4%="" (fig.="" 2c="" and="" d).in="" addition,="">benefis bioflavonoidKa siyifikativman amelyore rediksyon MPTP-induit nan ekspresyon pwoteyin TH ak DAT, jan yo mezire pa Western blotting (Fig.2e-g). Prèv sa a konfime efè neuroprotective Kaon nan modèl sourit PD la.

Rezilta 3. Ka diminye akimilasyon vakuol LD ak estrès oksidatif nan SNpc sourit MPTP/p-trete.

Ogmante prèv te montre patisipasyon LD nan NDDs [10], toujou, travay anvan nou an te idantifye ogmante LD nan SNpc sourit PD MPTP-induit [12].LD yo ka fasilman idantifye epi montre estrikti wonn ki ba-dansite ak omojèn. kontni amorphe [28]. Nòmalman, LD yo ka degrade atravè otofaji pou evite akimilasyon [29].achte cistanchePou envestige si Ka ka kontwole LD nan PD, akimilasyon LD yo te analize pa mikwoskopi elektwonik transmisyon (TEM) nan SNpc nan kontwòl, MPTP/p, ak MPTP/p ＋ Ka sourit. Jan yo montre nan travay anvan nou an [12], kantite ak gwosè LD yo te

ogmante nan sourit MPTP / p konpare ak kontwòl saline-trete (Fig. 3a ak b) epi yo te siyifikativman redwi nan Ka-trete sourit (Fig. 3c-e). Anplis, nan sourit Ka-trete, LD yo te obsève pi souvan tou pre tou, fèmen nan, oswa degrade pa otolysosomes, ki te defini kòm granules lipofuscin elèktron-dans. Pli lwen tach istolojik nan newòn TH ak BODIPY, yon lank ki espesyalman mete etikèt sou lipid net epi ki souvan itilize pou detekte LDs [30], te montre ke tou de kantite ak gwosè BODIPY plis LDs nan SNpc a te pi wo nan sourit PD pase nan kontwòl. epi yo te siyifikativman diminye pa tretman Ka (Fig.3f-h).

Si LD yo pa ka degrade nan yon fason apwopriye, LDs akimile yo ka sibi peroksidasyon epi kontribye nan estrès mitokondriyo ROS-medyatè [4],distanski anplifye nerotoksisite ak pwogresyon maladi. Pakonsekan, nou plis egzamine pwofil ekspresyon jèn ki asosye ak pwoteksyon kont toksisite gratis FA (Gpx8), netralize espès oksidatif, radikal superoksid (Sod3) ak oksijene idwojèn (Cat), ak metabolis FA (Acsbg1 ak Dbi) jan yo rapòte [31] , tout nan yo ki te frapan diminye nan SNpc nan sourit MPTP-trete konpare ak kontwòl, ak efè sa yo te amelyore nan Ka-trete sourit PD (Fig. 3i). Menm jan an tou, MPTP/p ogmante nivo ekspresyon mRNA yo

Fig.2. Ka amelyore pèt newòn DA nan SNpc sourit modèl MPTP/p PD.

(ab) Microphotographs de tyrosine hydroxylase(TH)-pozitif newòn (a) ak stéréologiques de TH-pozitif newòn nan substantia nigra pars compacta (SNpc) (b). Ba echèl yo jan sa endike a. (cd) Mikrofoto selil kresyl vyolèt-pozitif (c) ak konte estereolojik selil vyolèt kresyl pozitif nan SNpc (d). Ba echèl, 120 um. (eg) analiz Western blot nan ekspresyon pwoteyin TH ak DAT nan SNpc (e) ak analiz quantitative (f,g). Done yo kantite yo nòmalize nan gwoup la kontwòl saline. Done yo eksprime kòm mwayen ± SEM.*P<><0.01, by="" one-way="" anova="" followed="" by="" tukey's="" post="" hoc="" test.n="4-5" for="" each="" group.="" ve,="" vehicle,="" ka,="" kaempferol;="" mptp,1-methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydroloyridine..="" (for="" interpretation="" of="" the="" references="" to="" color="" in="" this="" figure="" legend,="" the="" reader="" is="" referred="" to="" the="" web="" version="" of="" this="" article.="" of="" nadph="" oxidase="" subunits="" such="" as="" nox1,="" nox2,="" and="" nox4="" in="" the="" snpc="" of="" mptp/p="" mice,="" which="" were="" further="" blunted="" by="" ka="" treatment="" (fig.="" 3j).="" taken="" together,="" these="" data="" suggest="" that="" ka="" alleviates="" mptp/p-induced="" ld="" accumulation,="" peroxidation,="" and="" ros-mediated="">

Rezilta 4. Ka pwoteje selil SH-SY5Y kont apoptoz MPP plis pwovoke

MPP, metabolit aktif MPTP, inibit anzim mitokondriyo konplèks epi lakòz lanmò selil ki asosye dirèkteman ak PD [32]. Apre sa, nou te envestige si Ka ka anpeche apoptoz newòn MPPt-induit nan vitro. Jan yo montre nan Fig. 4a ak b, MPPt (40 uM, 24h) pwovoke liberasyon an nan LDH nan selil SH-SY5Y, ak Ka (30 ak 60 uM) siyifikativman atenue lage LDH san yo pa afekte siviv selil (Fig. 4a). Depi Ka pwovoke yon efè pwoteksyon sibstansyèl nan yon konsantrasyon 30 μM （Fig. 4b), nou te itilize konsantrasyon sa a nan eksperyans ki vin apre yo. Rezilta yo tach Hoechst / PI te montre tou ke Ka siyifikativman redwi pousantaj selil ki gen kondansasyon chromatin MPPt-induit (figi 4c ak d) ak apoptoz selilè, jan sa evidans entansite fliyoresan Hoechst ogmante (figi 4c) ak pousantaj nan. Selil Hoechst/PI-tache (Hoechst plis /PI')(Fig. 4e). Epitou, jan yo detekte pa sikometri koule, MPP plis pwovoke apoptoz selil, evidans pousantaj ogmante nan selil Annexin V-tache (AV / PI ak AV plis / PI plis) te pwoteje pa Ka (Fig. 4f ak g). Anplis de sa, Ka miyò ranvèse chanjman MPP-induit nan ekspresyon pwoteyin ki gen rapò ak apoptoz, jan sa evidans pa regilasyon Bcl -2, downregulation nan Bax (figi 4hi-j), ak redwi klivaj kaspas -3 (figi 4h, k). Done sa yo sijere ke Ka ka aboli efè prejidis MPPt sou siviv selil.

Rezilta 5. Ka siprime akimilasyon LD MPPt-induit ak peroksidasyon lipid, ki medyatè domaj mitokondriyo nan selil SH-SY5Y.

Dènye etid yo te montre ke akimilasyon LD inatandi ka lakòz ogmante estrès peroksidasyon lipid-medyatè ak akselere malfonksyònman mitokondriyo, ki ankouraje neurodegeneration [10]. Travay anvan nou an te montre tou ke ogmante LD yo nan SNpc la te asosye ak patoloji PD nan sourit [12]. Pou mennen ankèt sou si efè pwoteksyon Ka a te gen rapò ak akimilasyon LD nan vitro, nou te premye fè tach LD-espesifik nan selil SH-SY5Y lè l sèvi avèk BODIPY 493/503 epi obsève ogmante depo LD (nivo amelyore nan lipid net)

Rezilta 6. Ka ankouraje otofaji ak diminye pwodiksyon mtROS nan selil SH-SY5Y ki trete MPP plis.

Nòmalman, LD yo lage nan lizozòm atravè otofaji epi yo ka kraze nan FAs pou fè pou evite peroksidasyon. Sepandan, prèv endike ke otofaji gen pwoblèm, ki jwe yon wòl enpòtan nan PD [2]. Lè otofaji enplike nan pòsyon LD yo dwe kraze nan lizozòm (figi 6a), pwosesis la espesyalman rele lipofaji [2]. Pou mennen ankèt sou si otofaji enplike nan efè neuroprotective Ka, nou egzamine nivo pwoteyin ki asosye ak otofaji. Jan yo montre nan Fig. 6b-d, nan kiltive selil SH-SY5Y, nivo a nan chèn limyè pwoteyin mikrotubule-asosye 3 (LC3)-II te ansibleman redwi, pandan y ap ekspresyon de p62 te ansibleman ogmante nan MPP plis -selil trete, jan yo mezire pa imunoblot, ak efè sa a te siyifikativman ranvèse pa Ka. Nou plis egzamine chanjman ki fèt nan otofaji pa imunostaining pou LC3. Pou pèmèt otofagosòm yo akimile nan selil yo, yo te ajoute bafilomicin pou anpeche fizyon otofagosòm ak lizozom. Jan yo montre, yo te detekte nimewo ogmante nan LC3b puncta nan selil MPP * trete, ki endike degradasyon otofajik ki gen pwoblèm, e efè sa a te ranvèse tou pa Ka (figi 6e ak f). Rezilta sa yo endike ke LD nan selil SH-SY5Y yo mobilize pa otofaji pou retire evantyèlman e ke Ka ka ankouraje otofaji pou diminye akimilasyon lipid oksidize. Ogmantasyon peroksidasyon lipid ka agrave domaj mitokondriyo lè yo ogmante estrès oksidatif mitokondriyo [4]. Anplis de sa, tretman Ka siyifikativman redwi jenerasyon mtROS gaya, jan yo detèmine pa tach MitoSOX (figi 6g ak h), ak diminye kantite mitokondri disfonksyonèl, jan yo detèmine pa etikèt mitokondri espesifik yo fè distenksyon ant respirasyon (MitoTracker gwo twou san fon wouj) ak total ( MitoTracker vèt) mitokondri (Fig. 6i ak j). Anplis de sa, pou nou gen yon gade dirèk sou chanjman mitokondriyo, nou te detekte to konsomasyon oksijèn (OCR) pa analizè Seahorse XF la. Jan yo montre nan Fig. 6k, respirasyon mitokondri yo te redwi nan selil MPPt trete, pandan y ap tretman Ka evidamman ranvèse domaj sa a ki te koze pa MPP plis (Fig. 6k).

Rezilta 7. Anpèchman otofaji ranvèse efè sipresyon Kaon LD akimilasyon, malfonksyònman mitokondriyo, ak DA newòn aksidan an vitro.

Pou egzamine si otofaji se youn nan mekanis prensipal yo pa ki ka medyatè DA neropwoteksyon, yo te itilize inhibiteur otofaji 3-MA. Nou te jwenn ke efè inhibition Ka sou MPP #-pwovoke aksidan, ki gen ladan diminye akimilasyon LD (Fig. 7a ak b), redwi pwodiksyon mtROS (Fig. 7c ak d), ak soulaje malfonksyònman mitokondriyo (Fig. 7e ak f) nan Selil SH-SY5Y yo te bloke anpil pa 3-MA. Depi oksidasyon LD ak malfonksyònman mitokondriyo yo asosye byen ak lanmò newòn DA, nou te egzamine pwochen newòn DA ki kiltive prensipal yo. Nou te trete mesencephalon kiltive TH plis newòn ak Ka ak / oswa MPPf ak quantifier kantite ak longè TH plis pwosesis newòn pa imunostaining. Analiz mòfolojik te revele ke kantite ak longè pwosesis newòn yo te siyifikativman diminye pa MPP plis ak pwoteje pa Ka, ak pwoteksyon sa a te ranvèse plis pa 3- MA (Fig.7g-i). Done sa yo endike ke Ka soulaje domaj newòn DA nan fè pwomosyon otofaji.

Rezilta 8. Silans Atg5 aboli prevansyon Ka-medyatè pèt newòn nan vivo

Pou plis konfime ke Ka pwoteje kont MPTP/p-induit TH plis pèt newòn nan yon fason ki depann de otofaji, nou silans Atg5 pa mikwo-enjekte yon viris adeno-asosye (AAV) - eksprime yon shRNA deja karakterize kont Atg5 nan mesencephalon bilateral la (figi). .8a) jan yo dekri deja [25].Nan eksperyans preliminè, nou obsève ke Atg5 shRNA transfeksyon pou 2 semèn reyalize ase ekspresyon GFP nan TH plis newòn (Fig. 8b) ak inibit ekspresyon ATG5 nan SNpc nan sourit yo sou fòm piki (Fig. 8c). Nou te jwenn ke Atg5-knockdown ranvèse efè neropwotektif Ka a, jan sa pwouve pa ekspresyon nan pwoteyin upregulated nan TH (figi 8d ak e) ak ogmante kantite TH plis newòn (figi 8f ak g). Done sa yo plis sipòte kontribisyon otofaji nan efè pwoteksyon Ka nan sourit PD. An konklizyon, nou konfime ke Ka pwoteje kont MPTP / p-pwovoke aksidan pa diminye oksidasyon LD ak malfonksyònman mitokondriyo pa ankouraje otofaji.

4. Diskisyon

Etid la te montre ke ti molekil natirèl Ka a te yon faktè kle kote siyal otofajik te kapab anpeche toksisite oksidatif lipid. Rezilta nou yo te demontre ke wout otofaji a se yon bouk regilasyon kle nan ki Ka soulaje peroksidasyon LD ak domaj mitokondriyo ki vin apre yo epi konsantre sou wòl toksisite LD otofaji-reglemante nan soulaje domaj mitokondriyo pandan y ap pre-ventile neurodegenerasyon akòz estrès oksidatif twòp (Fig. 9).

LD yo se sit intraselilè nan depo net lipid [5] epi yo kritik pou metabolis lipid ak omeyostazi enèji, pandan y ap malfonksyònman LD yo te lye nan anpil maladi [16]. Prèv akimile te sijere ke wòl LD yo jwe nan byoloji ak patoloji yo siyifikativman pi laj pase te panse deja. Nan CNS la, prèv yo montre ke ogmante LD nan newòn ak glia yo enplike nan patoloji neurodegenerative [10,36].An detay, LD yo te detekte tou de nan axons yo nan newòn Aplysia kiltive nan vitro [37] ak nan seksyon nan sèvo soti nan. Modèl maladi Huntington [38].Anplis de sa, li te montre ke newòn yo patikilyèman sansib a toksisite lipid, ak akimilasyon nan LDs ki pa ka retire nan yon fason apwopriye mennen nan peroksidasyon LD akselere epi yo ka bay monte nan neurodegeneration [17].

Akimilasyon lipid nan newòn ipèaktif se toksik pa sèlman akòz sansiblite lipid sa yo nan peroksidasyon. Anplis, sa ki depase LD yo ka antre nan chemen metabolik ki pa oksidatif, sa ki lakòz twòp pwodiksyon seramid, ki toksik pou selil yo [39]. Dènye etid yo te montre tou ke nan selil LD ki defektye, FA yo ka konvèti nan acilcarnitines, ki Lè sa a, lakòz malfonksyònman mitokondriyo ak pwodiksyon ROS [40]. Pwosesis sa yo gen anpil chans pou yo gen konsekans espesifik ak pwofon nan newòn ipèaktif paske mitokondri disfonksyonèl konpwomi kapasite pou konsomasyon FA, ak pwodiksyon mtROS plis lakòz peroksidasyon lipid manbràn.

Kidonk, omeyostaz LD ta dwe byen kontwole nan newòn, ki se kritik pou evite toksisite epi finalman kenbe sante nan sèvo a. Nan etid la prezan, nou te jwenn ke ti molekil natirèl Ka a anpeche toksisite newòn LD ki manifeste kòm ogmante akimilasyon LD, peroksidasyon lipid ki wo, ak ekspresyon jèn ki gen rapò ak toksisite lipid ki gen rapò ak MPP #-ensilte selil SH-SY5Y yo. Sa ki pi enpòtan, nou te montre tou ke tretman Ka diminye 45].Nan etid aktyèl la, nou te obsève otofaji/lipofaji ki defektye nan selil newòn ki blese MPPt, ki gen ladan nivo redwi LC3-II ak ekspresyon p62 ki wo, ak yon ogmante kantite LC3B puncta depoze nan selil yo. Lipofaji ki defektye nan selil SH-SY5Y ki blese yo te ranvèse pa tretman ak Ka. Kòm yon konsekans, Ka diminye akimilasyon nan LDs oksidize, mitokondri domaje, ak jenerasyon mtROS nan selil SH-SY5Y trete MPP# yo. Sa ki enpòtan, anpèchman otofaji pa 3-MA aboli eliminasyon Ka-medyatè nan LDs oksidize ak mitokondri domaje ak soulajman nan blesi newòn DA nan vitro. Anplis, anpèchman otofaji pa Atg5 knockdown nan vivo ranvèse efè pwoteksyon Kaon DA koripsyon newòn nan modèl sourit PD MPTP-induit. Ansanm, rezilta sa yo endike ke Ka inibit domaj mitokondriyo ki gen rapò ak toksisite LD pa ankouraje otofaji nan yon modèl eksperimantal PD.

Prèv akimile endike ke ogmante jenerasyon mtROS se yon karakteristik prensipal nan newòn ki gen gwo aktivite e yo te obsève nan anpil NDD, ki gen ladan PD [46]. Rapò sou si ROS se yon kòz oswa konsekans fòmasyon LD yo kontradiktwa [47,48]. Enteresan, rezilta in vitro nou yo te demontre ke anpèchman famasi nan peroksidasyon LD ak o-tokoferol anpeche jenerasyon mtROS ak anomali potansyèl manbràn mitokondriyo ak soulaje rediksyon mitokondriyo, jan sa evidans Tomm20 tach nan selil SH-SY5Y, ki sipòte lide ke peroksidasyon LD jwe yon wòl kozatif nan malfonksyònman mitokondriyo MPP-induit ak jenerasyon mtROS. Sepandan, li posib ke ROS elve okòmansman akselere fòmasyon LD, epi imedyatman, LD yo pwovoke plis jenerasyon ROS ak agrave nivo ROS intraselilè ak mitokondriyo.

Nan etid la prezan, nou te montre ke sourit ki gen MPTP-induit PD te gen nivo segondè nan akimilasyon LD, ki te akonpaye pa pèt la ogmante nan newòn DA, akselere estrès ROS-medyatè, ak defisi konpòtman. Tretman Ka anpeche LD toksisite nan vitro ak amelyore pèt newòn DA ak defisi konpòtman nan modèl sourit PD a, ak efè sa yo te depann de otofaji. Se poutèt sa, li rezonab pou konkli ke Ka ankouraje otofaji, ak otofaji amelyore sa a diminye akimilasyon LD oksidize, diminye pwodiksyon mtROS, ak soulaje domaj mitokondriyo nan newòn DA, ki kontribye nan anpèchman toksisite LD, kidonk diminye patoloji PD (figi). . 9).

Finansman

Rechèch sa a te sipòte pa sibvansyon ki soti nan Fondasyon Nasyonal Syans Natirèl Lachin nan (No 81903587), Pwojè a finanse pa Fondasyon Syans Postdoktoral Lachin nan (No.2019M661807), Fondasyon Syans Natirèl nan pwovens Jiangsu (No. BK20190120), ak la. Louvri Pwojè Chinwa Materia Medica Disiplin Premye Klas Nanjing University of Chinese Medicine (No. 2020YLXK006), ak Pwojè Inovasyon Medikaman Gwo (No.2018ZX09711001-003-007).

Atik sa a soti nan Redox Biology 41 (2021) 101911