Melatonin anpeche enfiltrasyon lenfosit T nan ren rat ipètansif, pwovoke pa yon rejim ki gen anpil sèl, pa anpeche ekspresyon CXCR3 ligand chemokines.
Mar 14, 2022
Pou plis enfòmasyon:ali.ma@wecistanche.com
Ariel Bier1, Rawan Khashab2, Yehonatan Sharabi1,2,3, Ehud Grossman1,2,3ak Avshalom Leibowitz1,2,3,*
1Medsin D, Chaim Sheba Medical Center, Tel-Hashomer 5262000, Izrayèl; arielbier@gmail.com (AB);Yehonatan.Sharabi@sheba.health.gov.il (YS); Ehud.Grossman@sheba.health.gov.il (EG)2 Hypertension Unit, the Chaim Sheba Medical Center, Tel-Hashomer 5262000, Israel;rawankhasbab@gmail.com3Sackler Fakilte Medsin, Inivèsite Tel-Aviv, Tel-Aviv 6997801, Izrayèl*
Résumé: Nan yon etid anvan, nou te demontre samelatoninanpecherendomaj nan yon modèl tansyon wo sèl-induit pa diminye estrès oksidatif. Nou te ipotèz ke efè sa a enplike pwopriyete imunomodulateur melatonin la. In vivo etid-Dahl sèl-sansib (DSS) rat yo te manje manje nòmal, yon rejim ki gen anpil sèl (HSD), oswa yon HSD akmelatonin(30 mg/kg/jou) nan dlo yo pandan uit semèn.renyo te rekòlte pou izòlman lenfosit imedya ak karakterizasyon pa Flow sitometri (CD3 plis CD4 plis ak CD3 plis CD8 plis) ak pou chemoattractant lenfosit (sitou CXCL).chemokines) etid ekspresyon jèn. In vitro etid-rat, selil mesangial (RMC) yo te kiltive nan yon mwayen ki gen anpil sèl san ak akmelatonin. Yon HSD te asosye ak siyifikatif enfiltrasyon ren nan CD4 plis ak CD8 plis lenfosit T konpare ak kontwòl. Melatonin siyifikativman redwi enfiltrasyon lenfosit nan drenal. Yon HSD siyifikativman ogmante ekspresyon mRNA nan CXCLchemokines.Ajoute melatonin nan HSD a aboli efè sa a. Trete selil RMC ak sèl ogmante ekspresyon CXCL10 ak CXCL11 men pa CXCL9. Ajoutemelatoninnan medya kilti yo anpeche ogmantasyon sa a. Trete rat HSD-manje ak melatonin diminye ekspresyon chemoattractantmRNA lenfosit ren epi li asosye ak siyifikativman diminye enfiltrasyon lenfosit T ren. Salt ka gen yon efè dirèk sou selil ren ki pwodui chemokine, ki se blunted pa tretman melatonin.
Mo kle:melatonin; sèl; T-lenfosit; tansyon wo;ren; CXCL 9; CXCL 10; CXCL 11
1. Entwodiksyon
Tansyon wo (HTN) se yon faktè risk kadyovaskilè ki kapab modifye. Akòz aje popilasyon an, prévalence de HTN ap ogmante piti piti, rive jiska 30 pousan nan avanse [1]. Malgre plizyè opsyon terapetik medikal, kontwòl mondyal HTN se pòv.Konsekans HTN san kontwòl yo devaste, kreye yon gwo enpak negatif sou sante piblik [2].
Gen plizyè faktè konpòtman, anviwònman ak jenetik ki enplike nan patojèn HTN. Kontni segondè sèl nan rejim Lwès yo te enplike kòm yon gwo kontribitè nan HTN epi li asosye ak ogmante morbidite ak mòtalite. Gid ak inisyativ piblik yo rekòmande pou diminye konsomasyon sèl pou popilasyon jeneral la. Sepandan, se pa tout moun ki ka benefisye de restriksyon sa a, paske fizyopatoloji ki konekte sansiblite sèl ak HTN pa totalman konprann epi li bezwen yon konpreyansyon mekanis amelyore [3]. Kidonk, nouvo estrateji yo enpòtan anpil pou pi bon konpreyansyon ak kontwòl HTN, fè nouvo paradigm rechèch yon bezwen imedya.
Yo te jwenn enflamasyon ak estrès oksidatif yo patisipe nan patojèn nan HTN esansyèl. Pandan y ap fè rechèch pou deklannche yo kòmanse ak kontinye pwosesis sa yo, anpil modèl eksperimantal HTN sijere patisipasyon repons iminitè adaptatif la [4].
Klike souBenefis Cistanche ak efè segondè pou fonksyon ren
Endikasyon ki konekte iminite adaptasyon ak HTN deja egziste depi ane 1960 yo. Sepandan, sèlman dènyèman, ak yon pi bon konpreyansyon sou sistèm iminitè a, pwogrè te kapab reyalize nan direksyon sa a. Yon etid pyonye pa Guzik et al. te demontre ke angiotensin (Ang) II oswa deoxycorticosterone (DOC) sèl HTN te blunted nan rag1-/-sourit, ki se ensufizant nan lenfosit T ak B, ak transfè adoptif nan T, men pa selil B, te kapab retabli repons lan BP [5]. Depi papye sa a, yo te jwenn divès eleman iminite adoptif ki gen rapò ak patojèn HTN nan pifò modèl bèt komen yo. Yo te etidye anpil wòl selil T nan modèl HTN sèl la. Etid in vitro montre ke sèl ka pouse nayif diferansyasyon selil T nan selil TH17 [6]. Anpil travay in vivo nan rejim alimantè ki gen anpil sèl- (HSD) pwovoke HTN modèl, tankou rat Dhal sèl-sansib (DSS), montre anpil enfiltrasyon selil T ren [7-9].
Pami anpil pwosesis fizyolojik,melatonin nanpatisipasyon ak règleman tansyon se yon ti jan entwisyon. Modèl sirkadyèn tansyon an ankouraje rechèch ekstansif konsènan melatonin ak HTN. Anpil travay nan tan lontan an, nan imen ak nan modèl eksperimantal, konekte nivo melatonin ki ba ak HTN [10]. Gen kèk done klinik ki sijere ke sipleman melatonin ka trete HTN, sitou pou pasyan ki gen HTN nocturne [11]. Enkonsistans done sa yo, sepandan, poze kesyon sou si pwopriyete melatonin ki pa sirkadyèn yo patisipe tou nan règleman tansyon.
Pwopriyete anti-enflamatwa ak antioksidatif nan melatonin te sijere ke melatonin reyaji ak sistèm iminitè a. Done émergentes yo te enplike wòl siyal melatonin nan devlopman selil T, aktivasyon, diferansyasyon, ak memwa. Gen prèv kemelatoninmanbràn ak reseptè nikleyè yo prezan sou selil T [12,13].Melatoninafekte pwodiksyon anpil sitokin ki enplike nan repons iminitè, tankou entèferon (IFN) - ki se yon regilatè pivot nan repons Th1 [14].
Estrès oksidatif ak repons selil T, dapre kèk chèchè, travay nan konsè pwomouvwa devlopman nan HTN ak domaj ipètansif ògàn [15]. Nan travay anvan nou an, nou te demontre samelatonindiminye estrès oksidatif lokal (ren) epi anpeche fibwoz ren ak proteinuriya ki pwovoke sèl nan yon modèl rat HTN ki sansib pou sèl (modèl DSS la) [16]. Depi estrès oksidatif gen yon wòl esansyèl nan repons iminitè adaptatif ki asosye ak HTN, nou te sipoze ke pwopriyete imunomodulateur melatonin yo responsab pou wòl pwoteksyon li nan HSD pwovoke HSD.
Objektif etid sa a se pou evalye simelatonindiminye repons selil T sèl-induced yo ak elicide mekanis ki responsab efè sa a.
2. Materyèl ak Metòd
2.1. Bèt ak pwotokòl etid
Pwotokòl etid la te apwouve pa komite enstitisyonèl etik bèt nan sant medikal Sheba nan peyi Izrayèl la. Yo te kontwole eta sante yo nan mezire pwa kò yo ak yon obsèvasyon jeneral chak jou pou mouvman ak kondisyon sante pou chak bèt.Gason Dahl sèl-sansib rat, kat semèn fin vye granmoun (RGD Cat # 1582190, RRID: RGD_1582190), yo te Loje nan yon etablisman bèt nan kaj regilye (de rat pou chak kaj) nan 22 ◦C ak yon sik 14 h limyè/10 h fè nwa. Rat yo te kenbe sou yon rejim sèl nòmal epi yo te bay dlo tiyo yo bwè ad libitum pou yon peryòd aklimatasyon nan senk jou. Lè sa a, rat yo te divize an twa gwoup (n=8), dapre rejim alimantè, sou yon peryòd 8 semèn. Dapre komite etik la, bèt ki te montre siy maladi ak soufrans yo te dwe sakrifye.
Gwoup kontwòl la te manje yon rejim alimantè rat chow estanda (2018 SC; Teklad Envigo, Madison, WI, USA) ak dlo tiyo; gwoup rejim alimantè ki gen anpil sèl (HSD) te manje yon rejim alimantè ki gen anpil sèl (4 pousan) (TD.120485; Teklad Envigo, Madison, WI, USA) ak dlo tiyo, akmelatoningwoup yo te manje menm rejim sèl anrichi (4 pousan) ak melatonin (M5250; Sigma, Rehovot, Izrayèl) (30 mg / kg / jou) nan dlo pou bwè. Pwa kò ak konsomasyon dlo yo te mezire detanzantan. Kantite melatonin kòrèk la te fonn nan bezwen dlo matche ak pou chak kaj yo nan lòd yo bay dòz ki kòrèk la pou chak bèt. Jou zewo defini kòm jou kòmanse konsomasyon HSD ak melatonin. Nan fen etid la, rat yo te sakrifye pa anestezi gwo twou san fon ak 3 pousan isoflurane (pwofondè anestezi konfime pa peze pye dèyè) ak la.renyo te rekòlte. Tou de ren yo te retire epi yo te jeze. Yo te pran ren yo pou analiz sitometri koule eksepte pou plizyè pòsyon ki te byen vit retire epi jele nan N2 likid epi estoke nan -80 ◦C. Frozentissues yo te itilize pou fè ekstraksyon RNA.
Sentòm maladi Cistanche-ren
2.2. An tan reyèl Quantitative ranvèse transcription PCR
Nivo ekspresyon mRNA nan jèn yo te detèmine nan larentisi pa an tan reyèl quantitative reverse transcriptase-PCR (qRT-PCR). Total RNA te extrait fromthe tisi ren lè l sèvi avèk yon NucleoSpin RNA Twous (MACHERY-NAGEL, Düren, Almay). Yo te fè transkripsyon ranvèse lè l sèvi avèk yon Applied Biosystems High-Capacity cDNAReverse Transcription Kit (Applied Biosystems, Foster City, CA, USA). Reyaksyon qRT-PCR yo te fèt lè l sèvi avèk Power SYBR Green PCR Master Mix (Applied Biosystems, Warrington, UK) ak sistèm PCR an tan reyèl Applied Biosystems 7500. Kondisyon sikilasyon yo te: yon premye etap sèl nan 95 ◦C pou 0.20 min ak Lè sa a, 40 sik nan etap fonn pou 3 s nan 95 ◦C ak yon etap pwolonje nan 30 s nan 60 ◦C. Nan fen 40 sik yo, yo te fè yon koub fonn. Pwoteyin ribozomal tij lateral souinite P0 (Rplp0) mRNA te itilize kòm yon kontwòl entèn. Premye yo bay lis nan Tablo 1.
Tablo 1. Lis premye rat yo itilize nan etid sa a.
2.3. Izolasyon Selil T nan ren
Apre retire kapsil la ren, de larenyo te mens ak takine ak plonje a nan yon sereng 2 mL atravè yon filtre selil 100 µm nan RPMI 1640 ki gen 2 mML-glutamin, 10 pousan FBS, 10 ug/mL DNase 1 (Stem Cells Technologies, Cambridge, MA. , USA) ak 0.1 pousan kolagenaz tip IV (CLS 4, Worthington Decatur, AL, USA). Solisyon an te enkube pou 25 min nan 37 ◦C. Solisyon lave (DPBS/2 pousan FBS/2 mM EDTA) te ajoute nan omojèn nan ren pou rive nan 45 mL epi yo te filtre nan yon 70 µm cellstrainer. Solisyon an te santrifuje nan 400 × g / 7 min. epi granules la te sispann nan yon solisyon lave 5 mL epi filtre nan yon filtre selil 40 µm ak recentrifuge nan 400 × g/7 min. Te granules a resuspend nan 3 ml FBS (10 mM EDTA) ak kouch Histopaque -1083 (Sigma, Rehovot, Izrayèl), ak santrifuje nan 20 ◦C nan 400 × g / 30 min ak fren an koupe. Yo te retire kouch selil mononikleyè ki anlè a Histopaque, lave ak solisyon lave de fwa, epi sispann nan yon solisyon lave 5 mL pou analiz flowcytometric.
2.4. Sitometri koule
Soti nan chak gwoup,rensoti nan 5-7 rat yo te analize. Pou chak echantiyon, yo te pran 1 × 106 selil. Selil mononikleyè izole yo te enkube ak makè ekstraselilè: anti-CD3 (Thermo Fisher Scientific Cat # 12-0030-82, RRID:AB_465493) ak kontwòl izotip li yo (Thermo Fisher Scientific Cat # 12-4742-41, RRID :AB_10753770), anti-CD4 (Thermo FisherScientific Cat# 17-0040-80, RRID:AB_1210581) ak kontwòl izotip li yo (Thermo Fisher Scientific Cat# 17-4724-81, RRID: AB_470188), anti-CD8 (Thermo Fisher Scientific Cat# 25-0084-82, RRID:AB_10548361) ak kontwòl izotip li yo (Thermo Fisher Scientific Cat# 25-4714-80,RRID: AB_657914). Tout selil yo te analize pa flow cytometry (BD FACSCalibur Flow Cytometry System, RRID: SCR_000401) lè l sèvi avèk lojisyèl FlowJo (FlowJo, RRID: SCR-008520).
Fonksyon Cistanche-ren
2.5. Kilti Selil
Liy selil rat mezangyal la, RMC (ATCC Cat# CRL{{0}}, RRID: CVCL_0506), te jwenn nan ATCC®. Selil la te kiltive nan mwayen Eagle modifye Dulbecco a (01-055-1A, endistri byolojik, Beit HaEmek, Izrayèl) ak 4 mM L-glutamin ajiste pou genyen 1.5 g/L bikabonat sodyòm ak 4.5 g/L glikoz ak sipleman 0.4 mg/mLG418 ak 15 pousan serom fetal bovine. Melatonin te jwenn nan Sigma (M5250 Rehovot, Izrayèl). Yon 250 mMmelatoninstock te fè nan etanòl. Selil yo te kiltive nan kondisyon nòmal oswa segondè-sèl (ajoute 80 mM NaCl nan mwayen an) kondisyon san oswa ak melatonin (0.5 mM). Tretman Melatonin te kwonometre 45 minit anvan ajoute NaCl nan mwayen an. Tout eksperyans yo te nan 6 plak byen ak 3 × 105 selil pou chak pi epi yo te fèt pa 6 esè endepandan.
2.6. Analiz estatistik
Done yo prezante kòm mwayen ± SEM Analiz estatistik yo te fèt lè l sèvi avèk IBMSPSS Statistics, RRID: SCR_019096. Yon sèl-fason analiz de divèjans (ANOVA) ak metòd posthoc Tukey egzamine diferans ki genyen ant gwoup yo. Yo te analize done qPCR an tan reyèl lè l sèvi avèk DataAssist, RRID: SCR_014969.
3. Rezilta yo
3.1. Melatonin Pwoteje Rat Konsome yon HSD
Laj rat yo pandan etid sa a te 4-13 semèn. Nan laj sa a, byennèt rat yo endike pa pran pwa ki te ekspoze pa gwoup kontwòl la [17]. Sepandan, HSDgroup la rive nan yon plato nan jou 30 ak adisyon amelatoninHSD te amelyore fenomèn sa a (Figi 1A). Gwoup HSD la te montre yon to mòtalite segondè, kote 50 pousan nan rat yo te mouri oswa te gen yon kondisyon klinik ki te egzije etanastik dapre règ komite animalethics yo, pandan peryòd eksperimantal la. Sipleman Melatonin te anpeche mòtalite rat yo anpil, kote sèlman youn sou uit rat te mouri nan jou 58, nan fen peryòd eksperimantal la (Figi 1B).
Figi 1.Melatoninamelyore tansyon ak siviv nan HSD. Rat DSS yo te trete pou 9 semèn ak HSD ak ak san melatonin. Yon rejim ki gen anpil sèl redwi pwa kò soti nan jou 36 ak melatonin modere efè sa a (A). HSD ogmante to mòtalite apati jou 4 0. Trete HSD-fedrats ak melatonin amelyore siviv yo. (B). (n=8) *-p Mwens pase oswa egal a 0.05 sèl ak sèl plis melatonin kont kontwòl. #-p Mwens pase oswa egal a 0.05 sèl kont kontwòl ak sèl plis melatonin. HSD: rejim alimantè ki gen anpil sèl.
3.2. Melatonin anpeche enfiltrasyon selil T nan ren HSD pwovoke
Nou izole selil ki soti nanrenak gated yo nan makè selil T a, CD3. CD3 plis selil yo te fèmen nan CD4 ak CD8. Tou de CD3 plis CD4 plis ak CD3 plis CD8 plis yo te siyifikativman pi wo nan HSD (5.18 ± 1.62 ak 4.6 ± 0.75 pousan, respektivman) konpare ak kontwòl la (0.16 ± {{18} }.{{20}}2 ak 0.95 ± 0.15 pousan, respektivman) akmelatoninsipleman HSD a te redwi tou de CD3 plis CD4 plis ak CD3 plis CD8 plis selil yo tounen nan nivo kontwòl (0.68 ± 0.21 ak 1.37 ± 0.45, respektivman) (Figi 2A–D).
Figi 2. Melatonin anpeche selil T enfiltrasyon nan laren. Selil T yo te izole nan ren rat yo epi yo te fèmen pou CD3. Selil pozitif CD3-yo te fèmen pou CD4 ak CD8. Melatonin (C) redwi tou de CD3 plis CD4 plis ak CD3 plis CD8 plis konpare ak HSD san melatonin (B) ki pa gen okenn diferans ak gwoup kontwòl la (A). Yo montre analiz pou tout rat nan (D) (n=7–8). HSD: rejim alimantè ki gen anpil sèl. *-p Mwens pase oswa egal a 0.05 kont kontwòl. #-p Mwens pase oswa egal a 0.05 kont sèl ak melatonin.
3.3. Melatonin diminye sèten chemokin ren ki te kontwole nan HSD
Rekritman nan selil T nan tisi enflamatwa reglemante pa chemokineexpression lokal yo. Se poutèt sa, nou te mezire ekspresyon de fanmi chemokine nan rat laren: fanmi chemokine (CXC motif) ligand (CXCL) ak fanmi chemokine (C-Cmotif) ligand (CCL).
Pou fanmi CXCL, CXCL 9, 10, ak 11 ki atire selil T nan tisi sib yo lè l sèvi avèk reseptè CXCR3 sou selil T yo, yo te siyifikativman regilasyon nan rat HSD. Sipleman nanmelatoninnan HSD a redwi ekspresyon yo tounen nan nivo kontwòl.Te menm modèl la detekte pou CXCL 1 ak 16. Sepandan, pou CXCL12, pa gen okenn upregulationwas detekte nan HSD la (Figi 3A).
Pou fanmi CCL, CCL 2, 4, 12, 17, 19, ak CX3CL1 pa montre okenn regilasyon nan HSD. Pou CCL7, yon regilasyon enpòtan nan HSD a ak yon regilasyon siyifikatif ak adisyon amelatoninnan HSD a te detekte (Figi 3B).
Figi 3. Upregulation nannan renchemokinesnan HSD ak ak san melatonin. Ekspresyon chemokine (CXC motif) ligand (CXCL) fanmi (A), chemokine (CC motif) ligand fanmi, ak CX3CL1 (B) yo te detèmine nan rat yo. (n=7–8) *-p Mwens pase oswa egal a 0.05 kont kontwòl. #-p Mwens pase oswa egal a 0.05 kont sèl ak melatoning. HSD: rejim alimantè ki gen anpil sèl.
3.4. Efè dirèk Melatonin sou liy selil RMC Mesangial la
Lè sa a, nou konsantre sou CXCL9, 10, ak 11 ki atire selil T pa obligatwa nan reseptè CXCR3 la. Nou detèmine ekspresyon sa yochemokinesnan selil RMC ki se yon liy selil mesangyal rat.
Nou trete selil yo ak 80 mM NaCl san ak 0.5 mM.melatonin. Konsantrasyon sa a nan NaCl siyifikativman ogmante ekspresyon CXCR10 pa 2.4 ± 0.26-pliye konpare ak kontwòl la, ak adisyon a nan 0.5 mM melatonin siyifikativman diminye. ekspresyon sa a 1.4 ± 0.{{10}}pliye konpare ak kontwòl la (Figi 4A). Pou CXCL11, 80 mM NaCl siyifikativman ogmante ekspresyon an pa 3 ± 0.48-pliye konpare ak kontwòl la, ak adisyon a nan 0.5 mM melatonin siyifikativman diminye ekspresyon sa a nan 1.8 ± 0.{{22 }} pliye konpare ak kontwòl la (Figi 4B). CXCL9 pa te detekte nan selil RMC.
Figi 4. Sèl te regilasyon ekspresyon CXCL10 ak CXCL11 nan yon liy selil mesanjyal kote tretman melaton te diminye ekspresyon li. RMC (liy selil mesangyal rat yo) yo te trete ak sèl80 mM ak ak san 0.5 mM melatonin. CXCL10 (A) ak CXCL11 (B) yo te ogmante pa tretman sèl ak adisyon a nanmelatonindiminye regilasyon sa a. Grafik yo prezante 6 esè endepandan. *-p Mwens pase oswa egal a 0.001 kont kontwòl #-p Mwens oswa egal a 0.005 kont sèl 80 mM ak melatonin 0.5 mM. $-p Mwens pase oswa egal a 0.05 kont sèl 80 mM ak melatonin 0.5 mM.
4. Diskisyon
Efè a benefisye nanmelatoninsou HTN te demontre nan etid anvan yo e li te sijere kòm yon posib kou nan aksyon pou tretman ki reziste HTN [18]. Nan premye etid nou an, nou konsantre sou estrès oksidatif ak revele ke melatonin diminye estrès oksidatif pwovoke pa HSD. Nan etid prezan an, nou te konsantre sou efè iminitè adaptatif la epi nou te montre ke melatonin amelyore siviv rat ki te manje ak HSD. Efè sa a asosye ak yon rediksyon nan selil T enfiltre ren an ak downregulation nanrenekspresyon chemokine.
Done istorik demontre ke rat DSS ki konsome yon HSD devlope HTN grav epi montre pi gwo pousantaj mòtalite [19]. Dahl li menm te rapòte pandan y ap etabli modèl la ke lè rat DSS yo te mete sou yon HSD (8 pousan NaCl) nan sevraj (21-23 jou ki gen laj), yo rapidman devlope HTN epi yo tout te mouri nan 16yèm semèn nan manje sèl [20]. Lateron, apre kèk modifikasyon souch la, Rapp et al. rapòte ke tout rat yo te mouri nan uit semèn nan HSD a (8 pousan NaCl) [21]. Rat yo nan etid nou an te gen yon gwo pousantaj mòtalite men yo pa t rive nan 100 pousan, pwobableman akòz pousantaj ki pi ba (4 pousan) nan sèl nan rejim yo. Men, li evidan kemelatoninsipleman siyifikativman anpeche mòtalite.
Pran pwa se yon makè byennèt rat yo nan laj 4-13 semèn. DSS ratsoriginate soti nan Sprague Dawley, ki se yon souch byen karakterize. Nan laj rat yo ke nou te itilize nan eksperyans nou yo, rat yo sipoze pran pwa toujou [22].Nan syans sou bèt anpil, yo konsidere rediksyon pwa kòm youn nan "endpoints" nan eksperyans yo [23]. Soti nan plizyè etid, li klè ke yon HSD nan rat DSS rezilta nan pi ba pousantaj pran pwa konpare ak kontwòl [24,25]. An konkordans ak etid sa yo, nou te tou obsève diferans pwa ant gwoup yo. Isit la, rat yo pa t 'pran pwa apre kat semèn nan HSD. Melatonin te sispann efè HSD a tou, menm jan rat yo te trete ak melatonin te kontinye pran pwa, byenke mwens pase kontwòl yo.
Kapasite nanmelatonindiminye tansyon nan modèl bèt yo te dekouvri nan fen ane swasanndis 20yèm syèk la [26-28]. Depi lè sa a, li te rapòte nan plizyè lòt modèl, tankou ke yon rejim alimantè ki gen anpil fruktoz pwovoke sendwòm metabolik nan rat espontaneman ipètansif [29,30]. Etid nou yo nan domèn sa a se premye moun ki montre ke melatonin jwe yon wòl nan HTN sèl-induit pa anpeche domaj ògàn ak diminye mòtalite.
Nan etid sa a, nou te montre ke yon HSD pwovoke T lenfosit enfiltrasyon nan laren, yon pwosesis ki te dekri nan rat DSS sitou pa gwoup Mattson a [31-33]. Te wòl esansyèl nan pwosesis enfiltrasyon sa a nan modèl la DSS te demontre pa etid rescent ki obsève ke rat DSS T-selil-defisi yo pwoteje kont. HTN pwovoke pa yon HSD ak yon transfè splenosit agrave HTN ki sansib pou sèl [34].
Melatonin ka afekte selil T nan divès aspè (pou revizyon, gade [35]). Etid sa a te montre pou premye fwa samelatonindiminye atraksyon tou de CD4 plis ak CD8 plis Tcells nanrennan HSD. Efè melatonin sa a ka mekanis ki souliye efè benefis li nan modèl sa a.
Kapasite melatonin pou diminye enfiltrasyon selil T yo dekri nan modèl sourit eksperimantal ansefalomielit otoiminitè (EAE). Nan EAE, melatonin te montre pou redwi enfiltrasyon CD4 plis selil T ak selil Th17 nan CNS [36,37].
Atraksyon selil T nan yon tisi espesifik se sitou reglemante pa gwo konsantrasyon lokal yochemokineski se cytokin chemotaktik ki kontwole modèl migratè ak pozisyon selil iminitè yo. De gwo fanmi chemokine ki pwovoke enfiltrasyon selil T yo se CXC motif ligand (CXCL) ak CC motif ligand (CCL) fanmi chemokine [38].
Cistanche pou amelyore malfonksyònman ren
Nan etid nou an, nou pa t jwenn yon modèl konstan nan repons fanmi CCL a nan yon HSD ak nanmelatonin. Soti nan nèf lachemokinesnan fanmi sa a, sèlman CCL7 ak CLL21 yo te obsève ogmante ekspresyon yo akòz HSD, ak sipleman melatonin redwi. Yon HSD ogmante ekspresyon CCL3 a, men pa gen okenn rediksyon detekte nan rat yo trete melatonin. Yon etid resan nan menm modèl la te montre ke yon HSD upregulates CCL2 nan larenlè l sèvi avèk metòd RNA-Seq [39]. Sepandan, etid sa a teste nivo ondays 3 ak 21 apre rejim alimantè a te kòmanse. Nan etid nou an, nou teste nivo yo apre uit semèn. Li posib ke ekspresyon chemokine chanje pandan peryòd HSD la.
Kontrèman, nivo pi fò nan fanmi CXCL, ki gen ladan CXCL 1, 9, 10, 11, ak 16, ogmante nan rat yo trete HSD akmelatoninsipleman aboli sa a enkreman.Sèlman CXCL12 pa montre okenn ogmantasyon an repons a HSD.
CXCL9, CXCL10, ak CXCL11, yo te rele "interferon-inducible CXC chemokine receptor 3 ligands", yo pwovoke pa IFN- epi yo se ligand yo nan CXC chemokine reseptè 3 (CXCR3). Etid in vivo yo te demontre enpòtans yo nan aktivasyon ak rekritman lenfosit T nan ògàn sib la [40-42]. Youn et al. te montre, nan pasyan imen ipètansif, tou de enfiltrasyon ren nan selil T ak nivo ki wo sikile nan tout twa CXCR3 yo.chemokines, sijere ke CXCR3 ak ligand li yo enpòtan pou selil T ki enplike nan HTN imen [43]. Yon lòt etid te demontre ke CXCL10 se elve nan pasyan ipètansif, ak nivo li yo gen rapò ak valè tansyon yo [44].
Akòz etid sa yo, nou konsantre sou CXCL9, CXCL10, ak CXCL11. Nou kiltive liy selil mesangyal rat la epi trete yo ak 80 mM NaCl ak 0.5 mM melatonin.Nou te jwenn ke CXCL 10 ak 11 yo regilasyon nan selil yo ak melatonin aboli elevasyon sa a. Rezilta nou yo endike ke efè sèl nan elve CXCL 10 ak 11, ak efè opoze a.melatonin, yo te tou de dirèkteman detekte nan selil mezanjyal yo. Kontrèman, CXCL9 pa te detekte nan selil sa yo.
Etid nou an gen limit. Nan rezilta FACS nou yo, anpil nan CD3 plis yo te doubnegatif pou tou de CD4 ak CD8. Menm rezilta yo te wè nan etid Mattson a soti nan 2010 [31]. Sepandan, nan etid ki pi resan nan gwoup Mattson a, CD3 plis CD4-CD{8-selil yo te trè kèk [32,33,45,46]. Siyifikatif diminisyon nan selil doub CD3 negatif yo ta ka yon rezilta nan ajoute makè CD45 la epi sèlman analize selil yo ki te CD45pozitif, ki se sa ki te pote soti nan etid yo pita nan Mattson. Li posib ke gwo popilasyon CD3 plis CD4-CD8- se yon zafè. Sepandan, pa gen okenn zafè ki konnen pou popilasyon selil CD3 plis CD4 plis ak CD3 plis CD8 plis.
5. Konklizyon
An konklizyon, se yon rejim ki gen anpil sèl ki asosye ak enfiltrasyon selil T nanrennan rat DSS. Sèl tou te ogmante ekspresyon de espesifik T cell chemoattractants nan ren. Tretman akmelatonin(30 mg / kg / jou) aboli efè sa yo (melatonindiminye enfiltrasyon HSD-induit nan selil T nan ren yo ansanm ak yon rediksyon nan ekspresyon chemokine ligand CXCL3).
Etid in vitro nou an demontre ke sèl ak melatonin ka kontwole ekspresyon chemoattractant lè yo afekte dirèktemanrenselil yo.
Kontribisyon otè: Conceptualization, AL; analiz fòmèl, AB ak RK; ankèt, RK;metodoloji, AB ak AL; ekriti—bouyon orijinal, AB ak AL; ekri—revizyon ak koreksyon, YSand EG Tout otè yo te li epi dakò ak vèsyon ki te pibliye maniskri a.
Finansman: Rechèch sa a pa resevwa okenn finansman ekstèn.
Deklarasyon Komisyon Konsèy Revizyon Enstitisyonèl: Komite enstitisyonèl animalethics te apwouve pwotokòl etid la nan sant medikal Sheba, pwotokòl nimewo 1219/19/ANIM ak pwotokòl Ministè Sante nimewo 16418.
Deklarasyon Konsantman Enfòme: Pa aplikab.
Deklarasyon Done Disponibilite: Done yo prezante nan etid sa a disponib sou demann nan men otè korespondan an.
Rekonesans: Otè yo remèsye Zehava Shabtai pou sipò teknik ekselan li ak Michael Kanovsky pou sèvis editoryal li yo.
Konfli enterè: Otè yo pa deklare okenn konfli enterè.
Referans
1. Olsen, MH; Angell, SY; Asma, S.; Boutouyrie, P.; Burger, D.; Chirinos, JA; Damasceno, A.; Delles, C.; Gimenez-Roqueplo, AP;Hering, D.; et al. Yon apèl a aksyon ak yon estrateji kou lavi pou adrese fado mondyal tansyon wo sou jenerasyon aktyèl ak pwochen: Komisyon Lancet sou tansyon wo. Lancet 2016, 388, 2665–2712. [CrossRef]
2. O'Brien, E. Komisyon Lancet sou tansyon wo: Abòde fado mondyal tansyon wo sou jenerasyon aktyèl ak pwochen. J. Clin. Hypertens 2017, 19, 564–568. [CrossRef]
3. O'Donnell, M.; Mente, A.; Yusuf, S. Sodyòm konsomasyon ak sante kadyovaskilè. Cirk. Res. 2015, 116, 1046–1057. [CrossRef]
4. Schiffrin, EL Mekanis nan renovasyon nan ti atè, terapi antihypertensive ak sistèm iminitè a nan tansyon wo.Clin. Investig. Med. 2015, 38, E394–E402. [CrossRef]
5. Guzik, TJ; Hoch, NE; Brown, KA; McCann, LA; Rahman, A.; Dikalov, S.; Goronzy, J.; Weyand, C.; Harrison, DG Wòl Tcell la nan jenèz tansyon wo anjyotansin II-induit ak malfonksyònman vaskilè. J. Exp. Med. 2007, 204, 2449–2460. [CrossRef][PubMed]
6. Kleinewietfeld, M.; Manzel, A.; Titze, J.; Kvakan, H.; Yosef, N.; Linker, RA; Muller, DN; Hafler, DA klori sodyòm kondi maladi otoiminitè pa endiksyon selil patojèn TH17. Nature 2013, 496, 518–522. [CrossRef]
7. Mattson, DL; Lund, H.; Guo, C.; Rudemiller, N.; Geurts, AM; Jacob, H. Mitasyon jenetik nan rekonbinasyon aktive jèn 1 inDahl sèl-sansib rat atenye tansyon wo ak domaj ren. Am. J. Physiol. Regul. Nonb antye relatif. Konp. Fizyol. 2013, 304, 407–414.[CrossRef]
8. Mattson, DL Enfiltre selil iminitè nan larennan tansyon wo sansib sèl ak aksidan ren. Am. J. Physiol. Ren. Physiol.2014, 307. [CrossRef] [PubMed]
9. Lu, X.; Crowley, SD Enflamasyon nan Tansyon wo Sèl-sansib ak domaj ren. Curr. Hypertens Rep. 2018, 20. [CrossRef][PubMed]
10. Baker, J.; Kempinski, K. Wòl nanmelatoninnan règleman tansyon: Yon ajan adjwen anti-ipètansif. Clin. Eksp. Pharm.Physiol. 2018, 45, 755–766. [CrossRef] [PubMed]
11. Grossman, E.; Laudon, M.; Zisapel, N. Efè melatonin sou tansyon nocturne: Meta-analiz de esè kontwole owaza. Vasc. Jere Risk Sante. 2011, 7, 577–584. [CrossRef] [PubMed]
12. Pozo, D.; Delgado, M.; Fernandez-Santos, JM; Calvo, JR; Gomariz, RP; Martin-Lacave, I.; Ortiz, GG; Guerrero, JM Ekspresyon nan mRNA reseptè Mel1a-melatonin nan T ak B souse nan lenfosit ki soti nan timus rat ak larat. Faseb J. Off. Piblik. Fed.Am. Soc. Eksp. Biol. 1997, 11, 466–473. [CrossRef]
13. Guerrero, JM; Pozo, D.; García-Mauriño, S.; Osuna, C.; Molinero, P.; Calvo, JR Patisipasyon reseptè nikleyè yo nan pwodiksyon amelyore IL-2 melatonin nan selil Jurkat yo. Ann. NY Acad. Sci. 2000, 917, 397–403. [CrossRef] [PubMed]
14. Farez, MF; Mascanfroni, ID; Méndez-Huergo, SP; Yeste, A.; Murugaiyan, G.; Garo, LP; Balbuena Aguirre, ME; Patel, B.;Ysrraelit, MC; Zhu, C.; et al.MelatoninKontribye nan Sezonalite nan rechute esklewoz miltip. Cell 2015, 162, 1338–1352.[CrossRef] [PubMed]
15. Kirabo, A.; Fontana, V.; de Faria, APC; Loperena, R.; Galindo, CL; Wu, J.; Bikineyeva, AT; Dikalov, S.; Xiao, L.; Chen, W.;et al. Pwoteyin DC isoketal modifye aktive selil T yo epi ankouraje tansyon wo. J. Clin. Investig. 2014, 124, 4642–4656. [CrossRef][PubMed]
16. Leibowitz, A.; Volkov, A.; Voloshin, K.; Shemesh, C.; Barshack, mwen .; Grossman, E. Melatonin anpecherenblesi nan yon modèl tansyon wo saltdiet-induit pa diminye estrès oksidatif. J. Pineal Res. 2016, 60, 48–54. [CrossRef] [PubMed]
17. Hawkins, P.; Morton, DB; Burman, O.; Dennison, N.; Honess, P.; Jennings, M.; Lane, S.; Middleton, V.; Roughan, JV; Wells, S. et al. Yon gid pou defini ak aplike pwotokòl pou evalyasyon byennèt bèt laboratwa yo: Onzyèm rapò BVAAWF/FRAME/RSPCA/UFAW Joint Working Group on Rafinement. Laboratwa. Anim. 2011, 45, 1–13. [CrossRef]
18. Simko, F.; Reiter, RJ; Paulis, L.Melatoninkòm yon altènatif rasyonèl nan tretman an konsèvatif nan tansyon wo rezistan.Hypertens Res. 2019, 42, 1828–1831. [CrossRef] [PubMed]
19. Rapp, JP Dahl sèl-sansib ak sèl-rezistan rat. Tansyon wo 1982, 4, 753–763. [CrossRef]
20. Dahl, LK; Knudsen, KD; Heine, MA; Leitl, GJ Efè kwonik enjèstyon sèl depase. Modifikasyon eksperimantal tansyon wo nan rat la pa varyasyon nan rejim alimantè a. Cirk. Res. 1968, 22, 11–18. [CrossRef] [PubMed]
21. Rapp, JP; Dene, H. Devlopman ak karakteristik nan tansyon ensanbre nan Dahl sèl-sansib ak sèl-rezistan rat. Hypertens 1985,7, 340–349. [CrossRef]
22. Brower, M.; Grace, M.; Kotz, CM; Koya, V. Konparatif analiz de karakteristik kwasans nan rat Sprague Dawley jwenn nan diferan sous. Laboratwa. Anim Res. 2015, 31, 166–173. [CrossRef]
23. Talbot, SR; Biernat, S.; Bleich, A.; van Dijk, RM; Ernst, L.; Häger, C.; Hilgers, SOA; Koegel, B.; Koska, mwen; Kuhla, A.; et al.Defini rediksyon pwa kò kòm yon pwen final imen: Yon evalyasyon kritik. Laboratwa. Anim 2020, 54, 99–110. [CrossRef] [PubMed]
24. Geschka, S.; Kretschmer, A.; Sharkovska, Y.; Evgenov, OV; Lawrenz, B.; Hucke, A.; Hocher, B.; Stasch, J.-P. Eksitasyon guanylatecyclase soluble anpeche renovasyon tisi fibrotik ak amelyore siviv nan rat Dahl ki sansib a sèl. PLoS ONE 2011, 6,e21853. [CrossRef] [PubMed]
25. Wang, Y.; Mu, JJ; Liu, FQ; Ren, KY; Xiao, HY; Yang, Z.; Yuan, ZY Sèl-induit epithelial-a-mesenchymal tranzisyon nan Dahlsalt-sansib rat depann sou tansyon wo. Braz. J. Med. Biol. Res. Rev Bras. Pesquisa Med. E Biol. 2014, 47, 223–230.[CrossRef]
26. Holmes, SW; Sugden, D. Pwosedi: Efè a nan melatonin sou tansyon wo pineaectomi-induit nan rat la. Br. J. Pharm.1976, 56, 360P–361P.
27. Zanoboni, A.; Zanoboni-Muciaccia, W. tansyon wo eksperimantal nan rat pinealectomized. Lavi Sci. 1967, 6, 2327–2331. [CrossRef]
28. Zanoboni, A.; Forni, A.; Zanoboni-Muciaccia, W.; Zanussi, C. Efè pinealectomy sou tansyon atè ak konsomasyon manje ak dlo nan rat la. J. Endocrinol. Investig. 1978, 1, 125–130. [CrossRef] [PubMed]
29. Pechánová, O.; Zicha, J.; Paulis, L.; Zenebe, W.; Dobesová, Z.; Kojsová, S.; Jendeková, L.; Sládková, M.; Dovinová, I.; Simko, F.;et al. Efè a nan N-acetylcysteine ak melatonin nan rat adilt espontaneman ipètansif ak tansyon wo etabli. Lajan ewo. J.Pharmcol. 2007, 561, 129–136. [CrossRef] [PubMed]
30. Leibowitz, A.; Peleg, E.; Sharabi, Y.; Shabtai, Z.; Shamiss, A.; Grossman, E. Wòl nanmelatoninnan patojèn nan tansyon wo nan rat ak sendwòm metabolik. Am. J. Hypertens 2008, 21. [CrossRef] [PubMed]
31. De Miguel, C.; Das, S.; Lund, H.; Mattson, DL T lenfosit medyatè tansyon wo akrendomaj nan Dahl sèl-sensiverats. Am. J. Physiol. Regul. Nonb antye relatif. Konp. Fizyol. 2010, 298, R1136–R1142. [CrossRef] [PubMed]
32. Evans, LC; Petrova, G.; Kurth, T.; Yang, C.; Bukowy, JD; Mattson, DL; Cowley, AW Ogmante Presyon Perfusion Drives Enfiltrasyon Renal T-Selil nan Rat Dahl Sel-Sensitive. Tansyon wo 2017, 70, 543–551. [CrossRef]
33. Abais-Battad, JM; Alsheikh, AJ; Pan, X.; Fehrenbach, DJ; Dasinger, JH; Lund, H.; Roberts, ML; Kriegel, AJ; Cowley, AWJ;Kidambi, S.; et al. Efè dyetetik sou tansyon wo Dahl ki sansib pou sèl, domaj ren, ak transcriptom T lenfosit la.Hypertens 2019, 74, 854–863. [CrossRef] [PubMed]
34. Fehrenbach, DJ; Dasinger, JH; Lund, H.; Zmaj, J.; Mattson, DL Splenocyte transfè agrave sèl-sansib tansyon wo inrats. Eksp. Fizyol. 2020, 105, 864–875. [CrossRef] [PubMed]
35. Ren, W.; Liu, G.; Chen, S.; Yin, J.; Wang, J.; Tan, B.; Wu, G.; Bazer, FW; Peng, Y.; Li, T.; et al. Siyal Melatonin nan selil T: Fonksyon ak aplikasyon. J. Pineal Res. 2017, 62. [CrossRef]
36. Álvarez-Sánchez, N.; Cruz-Chamorro, I.; López-González, A.; Utrilla, JC; Fernández-Santos, JM; Martínez-López, A.; Lardone,PJ; Guerrero, JM; Carrillo-Vico, A. Melatonin kontwole eksperimantal ansefalomyelit otoiminitè pa chanje balans T effector / regilasyon. Konpòtman nan sèvo. Iminitè. 2015, 50, 101–114. [CrossRef]
37. Chen, S.-J.; Huang, S.-H.; Chen, J.-W.; Wang, K.-C.; Yang, Y.-R.; Liu, P.-F.; Lin, G.-J.; Sytwu, H.-K.Melatoninamelyore ekspresyon interleukin 10 ak siprime chemotaxis pou anpeche enflamasyon nan plas epi redwi gravite eksperimantal otoiminitè ansefalomielit. Ent. Immunopharmacol. 2016, 31, 169–177. [CrossRef] [PubMed]
38. Griffith, JW; Sokol, CL; Ekla, ADChemokinesak reseptè chemokine: selil pwezante pou defans lame ak iminite.Annu. Rev Immunol. 2014, 32, 659–702. [CrossRef] [PubMed]
39. Alsheikh, AJ; Dasinger, JH; Abais-Battad, JM; Fehrenbach, DJ; Yang, C.; Cowley, AWJ; Mattson, DL CCL2 medyatè earlyrenal leukocyte enfiltrasyon pandan tansyon wo sansib sèl. Am. J. Physiol. Ren. Fizyol. 2020, 318, F982–F993. [CrossRef][PubMed]
40. Liu, L.; Callahan, MK; Huang, D.; Ransohoff, RM Chemokine reseptè CXCR3: Yon enigm inatandi. Curr. Top. Dev. Biol.2005, 68, 149-181. [CrossRef] [PubMed]
41. Veterinè cheval, JR; Ekla, AD CXCR3 ligands: fonksyon redondants, kolaborasyon ak antagonis. Imunol. Selil Biol. 2011, 89,207–215. [CrossRef] [PubMed]
42. Van Raemdonck, K.; Van den Steen, PE; Liekens, S.; Van Damme, J.; Struyf, S. CXCR3 ligand nan maladi ak terapi. CytokineGrowth Factor Rev 2015, 26, 311–327. [CrossRef] [PubMed]
43. Youn, J.-C.; Yu, HT; Lim, BJ; Koh, MJ; Lee, J.; Chang, D.-Y.; Choi, YS; Lee, S.-H.; Kang, S.-M.; Jang, Y.; et al. Immunosenescent CD8 plis selil T ak CXC chemokine reseptè tip 3chemokinesyo ogmante nan tansyon wo imen. Hypertens 2013, 62, 126–133.[CrossRef] [PubMed]
44. Stumpf, C.; Auer, C.; Yilmaz, A.; Lewczuk, P.; Klinghammer, L.; Schneider, M.; Danyèl, WG; Schmieder, RE; Garlichs, CDSerum nivo Th1 chemoattractant entèferon-gama-inducible pwoteyin (IP) 10 yo ogmante nan pasyan ki gen tansyon wo esansyèl. Hypertens Res. 2011, 34, 484–488. [CrossRef] [PubMed]
45. Rudemiller, NP; Lund, H.; Priestley, JRC; Endres, BT; Prokop, JW; Jakòb, HJ; Geurts, AM; Cohen, EP; Mattson, DL Mitasyon nan SH2B3 (LNK), yon kandida etid asosyasyon-lajè genomic pou tansyon wo, atenue Dahl sèl-sansib tansyon wo via modulation enflamatwa. Hypertens 2015, 65, 1111–1117. [CrossRef] [PubMed]
46. Wade, B.; Petrova, G.; Mattson, DL Wòl faktè iminitè nan tansyon wo anjyotansin II-pwovoke ak domaj ren nan rat Dahlsalt-sansib. Am. J. Physiol. Regul. Nonb antye relatif. Konp. Fizyol. 2018, 314, R323–R333. [CrossRef] [PubMed]