Karakterizasyon metabolit, antioksidan, anti-proliferatif ak aktivite inhibition anzim nan Lophira Lanceolata Tiegh. Ekstrè Ex Keay

Kontakte:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Kouadio Ibrahime Sinan a,1, Lara Safti´c Martinovi´cb,1, Zeljka ˇ Perˇsuri´cb, Sandra Kraljevi´c Paveli´cb, Petra Grbˇci´cb, Dario B, Ouattara Katinan Etienne c, Mohamad Fawzi Mahom Matulodally, e, Devina Lobine e, Tapan Behl f, Gokhan Zengin a,*

REZIME

Lophira lanceolata Tiegh. ansyen Keay, yon plant twopikal natif natal nan lwès ak Afrik santral, se yon plant miltifonksyon itilize kòm bwa epi tou eksplwate nan medikaman tradisyonèl nan Lafrik. Etid la prezan prezante pwopriyete famasi yoLophira lanceolatafèy ak tij ekstrè jape prepare nan pwosedi ekstraksyon diferan (perfusion, ekstraksyon omojenize-asistans, maserasyon, soxhlet). Konpozisyon an detay fitochimik, nan vitroantioksidanak tès antiproliferatif, osi byen ke kle aanzim(cholinesterases, tyrosinase, -amylase ak -glucosidase) potansyèl inhibition nan ekstrè yo te evalye. Profilage chimik konfime prezans lanseolatin ak lophirones nan tout pati plant analize yo. Nivo ki pi wo nan fenolik total (156.42 mg asid galik ekivalan (GAE)/g pou maserasyon-dlo), asid fenolik (165.84 mg asid kafeyik ekivalan (CE)/g pou maserasyon-dlo) ak flavanols (101.51 mg katechin ekivalan (CAE) /g pou soxhlet-methanol (MeOH)) yo te obsève nan ekstrè yo jape tij.Antioksidanessais te montre remakab lib radikal scavenging ak diminye aktivite pouvwa pou tout extraits, pami ki tij écorce te montre pi gwo potansyèl. Ekstrè jape tij (valè IC50: 57.55-93.10 ug / ml pou adenokarcinom kolorektal (HT29) ak 78.18-89.58 ug / ml pou liy selil kansè nan tete metastatik (MCF7)) te montre tou pi bon efè antiproliferatif pase fèy (424.18-89.58 ug / ml) pou HT29 ak 374.46-943.09 ug/ml pou MCF7) sou selil kansòm pandan ke yo pwovoke pwopagasyon nan liy selil nòmal imen (fibroblast po nòmal (HFF)). Nan tès inhibition anzim yo, ekstrè methanol tou de pati plant yo te konfime kòm efikas kont AChE, BChE (sèlman ekstrè tij barks) ak -glucosidase.anzim. Konsènan efè anti-tirozinaz, ekstrè fèy metanol yo (122.21-131.17 mg ekivalan asid kojik (KAE) / g) ak tout ekstrè jape tij (94.58-153.21 mg KAE / g) te ekspoze efè inhibition. Konklizyon ki rasanble isit la gen tandans valide itilizasyon tradisyonèl yoL. lanceolataak defann devlopman fito-medikaman ki baze sou ekstrè li yo.

cistanche herbaekstrèse yon antioksidan.

1. Entwodiksyon

Medikaman tradisyonèl Afriken se youn nan pi ansyen ak pi divèsifye nan tout sistèm swen sante (Mothibe and Sibanda, 2019). Pandan plizyè syèk, popilasyon an nan Afrik te eksplwate divèsite plant inik ak rich pou bezwen swen sante yo. Divèsite plant Afriken an, ansanm ak konesans etnobotanik Afriken ki byen anrasinen, te bay plizyè konpoze biyolojik aktif ki se kounye a eleman nan dwòg modèn yo; egzanp remakab yo enkli vinblastine ajan anti-timè yo ak vincristine ki sòti nan Catharanthus roseus (Madagascar bigorno), yohimbine soti nan Pausinystalia Yohimbe ak fizostigmin soti nan pwa kalabar, grenn yo nan Physostigma venosum (Khalid, 2012). Se poutèt sa, ak gwo enterè nan medikaman ki sòti nan plant, Afrik rete yon resous pwomèt pou rekiperasyon nouvo antite chimik ki ka eksplwate pou plis devlopman nan nouvo dwòg (Nafiu et al., 2017).

Lophira lanceolata Tiegh. ansyen Keay(Fanmi Ochnaceae), souvan ke yo rekonèt kòm ironwood oswa pye bwadchenn wouj, se yon pye bwa miltip, lajman distribiye nan savann bwa yo nan Lafrik twopikal. Li se repitasyon pou atribi medsin li yo nan medikaman tradisyonèl Afrik Lwès (Dicko et al., 2017; Etuk and Muhammad, 2010; Mapongmetsem, 2007). Plant lan se yon ti pye bwa gwosè mwayen ki ka grandi jiska 12 m nan wotè, ak fèy ki altènatif, long, ak 11-45 cm × 2-9 cm nan gwosè, ak gwoupe nan fen branch kout oswa trese. . Jape tij plant la se gri corky, ki graj, epi li kase an flak pandan y ap jape enteryè a jòn ak wouj mawon. Plant la flè soti nan oktòb rive janvye ak fwi a se konik ak jistis Woody, 0.1 cm an dyamèt ak yon sèl grenn long. Fwi fèt ant fevriye rive avril (Etuk and Muhammad, 2010; L´eandre et al., 2013; Mapongmetsem, 2007).

Grenn yo nanL. lanceolatayo sitou boule pa pèp Afrik Lwès la, kote li se sitou itilize kòm yon lwil manjab ki rele 'lwil oliv meni'. Meni lwil oliv yo itilize pou rezon medsin oswa nan pwodui kosmetik; li se tradisyonèlman itilize pou soulaje dèrmatoz, mal dan ak fatig miskilè epi li se travay nan fè savon. Anplis de sa, lwil sa a ka enkòpore nan labouyl oswa itilize kòm yon tonik pou bay timoun manje (Mapongmetsem, 2007). Nan Nijerya, yo itilize jenn ti branch enfuze pou trete lafyèv, pwoblèm respiratwa ak disantri (Ali et al., 2011). Poud rasin lan ka melanje ak farin ak konsome pou geri konstipasyon, pandan y ap konkoksyon li yo ka itilize pou geri blesi kwonik (Onyeto, 2014). Lòt itilizasyon etnomedicinal nan plant L. lanceolata gen ladan gerizon doulè nan vant, dyare, rimatism, maladi kadyovaskilè, ak maladi poumon (Ali et al., 2011; L´eandre et al., 2013; Mapongmetsem, 2007).

Divès kalite atribi medsin nanL. lanceolatate atire atansyon anpil chèchè e konsa, espès sa a te konsantre nan plizyè syans fitochimik ak famasi. Ankèt fitochimik te revele prezans flavonoid abondan, alkaloid, glikozid, tanen, ak tèrpèn (Audu et al., 2007; Garba and Yaro, 2015; Igboeli et al., 2015). Chèchè yo te pwouve ke L. lanceolata posede anti-malarya (Lopatriello et al., 2019), anti-bakteri (Awachie and Ugwu, 1997), anti-dyare, anti-plasmodial (Igboeli et al., 2015), anti-anthelmintic. (Ndjonka et al., 2014; Samje et al., 2014),antioksidan(Onyeto, 2014; Oussou et al., 2016), antihyperglycemic (Camille et al., 2017), anti-konvulsion (Garba and Yaro, 2015) ak anti-tibèkiloz (Nkot et al., 2018). Anplis de sa, plizyè etid yo te fèt yo nan lòd yo evalye sekirite nan itilizasyon L. lanceolata (Igboeli et al., 2015; Nkot et al., 2018; Onyeto, 2014).

Malgre ke gwo efò yo te mete nan ankèt la nanL. lanceolatakonstitiyan aktif yo ak aktivite byolojik yo, nan pi bon konesans nou an, okenn nan yo pa te fè tès depistaj fitochimik detaye epi eseye evalye efè inhibitor kont kle.anzimki enplike nan patojèn nan maladi kwonik. Nan direksyon sa a, etid prezan an te fèt pou mennen ankèt sou atribi famasi yo ak sa ki nan pwodui chimik nan fèy L. lanceolata ak ekstrè jape tij yo te jwenn lè l sèvi avèk diferan metòd ekstraksyon. Envestigasyon byolojik yo te gen ladann MTT (3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5- diphenyl tetrazolium bromur) tès sitotoksisite,antioksidanak evalyasyon inhibition anzim (kolinesteraz, tirozinaz, -amylase ak -glucosidase). Piki dirèk quadrupole time-of-vol (Q-TOF) ak tès depistaj fitochimik yo te fèt yo nan lòd yo bay Sur nan pwofil yo fitochimik nan ekstrè yo diferan nan L. lanceolata.

2. Materyèl ak metòd

2.1. Materyèl plant ak preparasyon ekstrè

L. lanceolataplant te ranmase nan Cote d'Ivoire (rejyon Gbˆekˆe, vilaj Prikro) e plant sa a te konfime pa yon ko-otè (Dr Ouattara Katinan Etienne). Yo te depoze echantiyon bon an nan Depatman Biyoloji, Fakilte Syans, Selcuk University (KIS-19− 1110). Te seleksyone jape tij plant ak fèy yo seche nan tanperati chanm ak poud pa itilize nan yon moulen laboratwa. Pou preparasyon ekstrè, yo te fè perfusion, Soxhlet (SOX), maserasyon (MAC), ak ekstraksyon omojènize (HAE). Methanol ak dlo yo te itilize kòm solvang nan metòd ekstraksyon yo. Detay yo pou fè ekstraksyon yo te bay nan materyèl siplemantè. Methanol te retire lè l sèvi avèk yon evaporator rotary, pandan y ap perfusion te lyofilize. Tout ekstrè sèk yo te pwoteje nan yon frijidè (plis 4 ◦C) jiskaske yo itilize.

2.2. Profilage fitochimik

2.2.1. Depistaj fitochimik

Yo te fè tès depistaj fitochimik kalitatif la pou detèmine prezans metabolit segondè byoaktif pa tès espesifik: konpoze fenolik (tès klori ferik), tèrpenoid (tès Salkowski), alkaloid (tès Mayer a), glikozid (tès Keller-Killiani), estewoyid. Tès Libermann-Buchard) ak saponin (tès kim) dapre Edeoga et al. ak ti modifikasyon (Edeoga et al., 2005). Tout detay yo te bay nan materyèl siplemantè. Total fenolik, asid fenolik, flavanol ak flavonoid nan ekstrè yo te mezire ak metòd detaye yo te dekri nan papye anvan nou an (Vladimir-Kneˇzevi´c et al., 2011; Zengin and Aktumsek, 2014). Yo te detèmine kontni fenolik total lè l sèvi avèk metòd kolorimetrik Folin-Ciocalteu ak absorbances yo te anrejistre nan 765 nm. Kontni total flavonoid yo te mezire ak metòd AlCl3 ak absorbances yo te li nan 415 nm. Kontni total flavanol te detekte lè l sèvi avèk DMACA (p-dimethylaminocinnamaldehyde) ak absorbances yo te li nan 640 nm. Kontni total asid fenolik te detèmine pa reyaktif Arnow la ak absorbances yo te anrejistre nan 490 nm. Estanda, sètadi asid galik (GAE) pou fenolik, asid kafeyik (CE) pou asid fenolik, katechin (CAE) pou flavanol ak rutin (RE) pou flavonoid, yo te itilize pou eksplike rezilta yo. Yo te achte estanda yo nan Sigma-Aldrich (St. Louis, Missouri, USA). Detay eksperimantal yo bay nan materyèl siplemantè.

2.2.2. Piki dirèk quadrupole tan-de-vòl (Q-TOF) analiz

Ekstrè plant yo te fonn nan metanol nan yon konsantrasyon nan 7.5 mg / mL, sonike pou 10 min nan tanperati chanm (Sonorex digitec, Bandelin, Almay) epi apre sa dilye 10 fwa. Pou pwofil fitochimik, yo te itilize yon seri UPLC Agilent 1290 ki ekipe ak yon degazeur, ponp binè, echantiyon oto ak fou kolòn makonnen ak yon espektromèt mas tan-de-vol Agilent 6550 iFunnel ki ekipe ak sous doub AJS ESI (Agilent Technologies). Metòd enjeksyon dirèk Quadrupole Time-Of-Flight (Q-TOF) te deja pibliye nan travay anvan nou an (Safti´c et al., 2019). Idantifikasyon konpoze fenolik yo te fè lè l sèvi avèk Mass Hunter PCDL Manager (Vèsyon B.04.00), MassBank (MassBank, 2019), mzCloud (mzCloud, 2019) ak MassBank nan Amerik di Nò (MoNA) (MassBank of North. Amerik, 2020).

2.3. Esay pou aktivite byolojik

Pou detekteantioksidanpwopriyete yo, nou te itilize plizyè tès chimik ki gen ladan mekanis diferan sètadi, radikal scavenging, diminye pouvwa, ak chelating metal. Trolox (TE) ak asid ethylenediaminetetraacetic (EDTA) yo te itilize kòm konpoze antioksidan estanda. ., 2016). Pou detekte efè inhibition souanzim, nou te itilize tès anpèchman anzim kolorimetrik ak tès sa yo enkli tirozinaz, -glucosidase, -amylase, ak cholinesterases. Gen kèk inhibitiors estanda (galatamin (GALAE), kojic (KAE) asid ak acarbose (ACAE)) yo te itilize kòm kontwòl pozitif. Detay eksperimantal yo bay nan materyèl siplemantè.

sistanchpèdi anpi remèd fèy souanti-oksidasyon

2.4. Kilti selil ak evalyasyon efè antiproliferatif ak sitotoksik

Liy selil timè imen: adenokarcinom kolorektal (HT29) ak liy selil kansè nan tete metastatik (MCF7) ansanm ak fibroblast po nòmal (HFF) ki te jwenn nan ATCC (American Type Culture Collection), yo te kiltive nan mwayen Eagle modifye Dulbecco a (DMEM) ki te konplete ak 10 pousan serom fetal bovine (FBS), 2 mM L-glutamin, 100 U/mL penisilin ak 100 ug/mL streptomycin (Capricorn Scientific, Almay) ak 5 pousan CO2 nan 37 ◦C nan yon atmosfè imidite. Echantiyon yo te prepare nan mwayen kwasans selil nan 10 mg / mL konsantrasyon stock ak plis fonn nan beny nan ultrasons pou 30 min anvan eksperyans la. Pou eksperyans la, yo te simen liy selil kansòm yo ak liy selil nòmal imen yo nan 96-plak mikrotiter byen nan yon dansite 5000 selil pou chak pui. Lè sa a, konpoze tès yo te ajoute nan senk, 10-dilusyon pliye (0.0001-1 mg/ml) ki te fèk prepare nan jou tès la nan mwayen kwasans ak enkubasyon pou yon lòt 72 èdtan. Apre sa, yo te itilize tès 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-2,5- diphenyl tetrazolyom bromur (MTT) (Sigma-Aldrich, USA). pou kalkile to kwasans selil la. Pousantaj kwasans te kalkile pa transfòme valè absòbe eksperimantal detèmine lè l sèvi avèk fòmil yo pwopoze pa Enstiti Nasyonal Sante (NIH) ak valè IC50 yo te kalkile. Mezi eksperimantal yo te fèt nan tetraplicates nan de eksperyans endividyèl byolojik.

2.5. Analiz estatistik

Rezilta tout analiz yo te eksprime kòm mwayèn ± devyasyon estanda yo. Premyèman, yo te fè analiz estatistik la pou kalkile diferans ki genyen ant echantiyon yo lè l sèvi avèk yon sèl-fason ANOVA ki te swiv pa tès Tukey post hoc. Lè sa a, done yo te soumèt nan eksplorasyon prensipal eleman miltivarye analiz (PCA) pou idantifye faktè diskriminasyon yo. Yo te fè kat imaj gwoup pou karakterize grap yo jwenn nan PCA. Tout pwosedi yo te fèt anba R lojisyèl v. 3.6.2.

ki kote mwen ka achtesistanchjape poublanchimanpo

3. Rezilta ak diskisyon

3.1. Konpozisyon fitochimik

Anpil konpoze byolojik aktif yo te dokimante ak izole nan plant akòz pwopriyete espesifik ak fò famasi yo (Bursal and Gülçin, 2011; Bursal et al., 2013; Gülçin et al., 2011; Kose ¨ et al., 2015). An patikilye, yo te jwenn konpoze fenolik yo genyen plizyè pwopriyete medsin tankou antimikwòb,antioksidan, anti-enflamasyon, anti-ateroskleroz, anti-aje, cardioprotective, epatoprotective ak anti-kansè (Abbas et al., 2017; Han et al., 2007; Quideau et al., 2011). Nan etid sa a, yo te ekstrè fèy ak tij L. lanceolata lè l sèvi avèk metòd ekstraksyon diferan; perfusion, maserasyon (MAC), Soxhlet (SOX) ak ekstraksyon asistans homogenizer (HAE) lè l sèvi avèk dlo ak metanol kòm solvang. Okòmansman, tès depistaj fitochimik preliminè nanL. lanceolataEkstrè yo te fèt, ak rezilta yo te revele prezans nan konpoze fenolik, estewoyid ak saponin nan chak echantiyon teste (Tablo 1). Ekstrè jape tij yo te genyen tou terpenoid ak glikozid ki pa te detekte nan tout ekstrè fèy yo. Sepandan, sèlman méthanol fèy ekstrè yo te pozitif pou prezans nan alkaloid.

Yon insight pi pwofon nan korelasyon posib ant aktivite farmakolojik ak konpoze byolojik ki prezan nan ekstrè yo te fè nan evalye konpozisyon fitochimik nan.L. lanceolataEkstrè jape fèy ak tij pou kontni total fenolik (TPC), kontni total flavonoid (TFC), total asid fenolik (TPAC), ak kontni total flavonol (TFlvC) ak rezilta yo prezante nan tablo 2. Pou ekstrè fèy yo, la. HAE-MeOH (92.13 ± 1.52 mg GAE/g) ekstrè, ki te swiv pa SOX (81.07 ± 1.64 mg GAE/g) ekstrè yo te jwenn yo gen TPC ki pi wo a, pandan y ap ekstrè a jwenn lè l sèvi avèk Soxhlet la. metòd (116.58 ± 2.78 mg RE/g), ki te swiv pa HAE-MeOH (113.72 ± 3.00 mg RE/g) parèt TFC ki pi wo a. TPaC a varye de 13.42 ± 0.72-48.61 ± 3.58 mg CE/g ak TFlvC a varye de 0.77 ± 0.08-17.77 ± 0.40 mg CAE/g, ak pi wo kontni obsève pou ekstrè HAE-MeOH.

The stem bark extracts showed notable TPC, with MAC-water extract, followed by SOX extract displaying the highest content (Table 2). The TFC varied from 1.65 ± 0.40 (MAC-Water) and 33.73 ± 1.35 mg RE/g (MAC-MeOH). A significant amount of TPaC was observed in all the stem bark extracts in the following order: MAC-Water > infusion > SOX > HAE-MeOH > MAC-MeOH >HAE-Dlo. Pou TFlvC, SOX-MeOH (101.51 ± 2.56 mg CAE/g), HAE-MeOH (92.12 ± 1.03 mg CAE/g) ak MAC-MeOH (88.33 ± 0.69 mg CAE/g) genyen montre TFlvC remakab kòm konpare ak lòt ekstrè jape tij etidye. An jeneral, ekstrè yo jape tij yo te jwenn yo posede yon nivo ki pi wo nan konpoze fenolik.

Klèman, rezilta yo te jwenn yo endike ke kantite total konpoze bioaktif depann sou metòd ekstraksyon yo itilize ak solvang. Anjeneral, metòd la fè ekstraksyon homogenizer-asistans ta ka konsidere kòm pi bon teknik pou prepare ekstrè soti nanL. lanceolata. Dapre konklizyon nou yo, plizyè otè rapòte ke teknik omojenize a te teknik ki pi efikas ak tan ekstraksyon kout (Dall'Acqua et al., 2020; Rocchetti et al., 2019; Sinan et al., 2020; Zheleva-Dimitrova. et al., 2020). Anplis de sa, metanol te pi aktif pase dlo nan teknik ekstraksyon yo itilize. Reyalite sa a te sipòte tou pa plizyè chèchè ki te note metanol kòm pi bon sòlvan ekstraksyon (Barbouchi et al., 2020; Sarikurkcu et al., 2020). Osi lwen ke sondaj literati nou an te kapab rann kont, nou obsève kèk etid sou konpoze total byoaktif nan ekstrè L. lanceolata. Pami etid yo, nivo total fenolik ekstrè etanòl fèy nanL. lanceolatate jwenn 414.07 mg GAE / g ekstrè pa Kalmob'e et al. (2017). Nivo fenolik la te pi wo pase rezilta nou yo. Diferans sa a ta ka eksplike pa diferans anviwònman ak klima. Anplis de sa, nan dènye tan yo, metòd espektrofotometrik pou konpoze bioaktif total yo te gen plizyè dout. Pou egzanp, reyaktif Folin-Ciocalteu a ka reyaji ak peptides oswa lòt pwodui chimik ak fenolik (Sanchez-Rangel et al., 2013). Kidonk, tès la pa t 'kapab reflete nivo egzat nan fenolik nan ekstrè yo teste. Kidonk, syans fitochimik yo ta dwe enkli omwen yon metòd kwomatografik pou kalifikasyon ak quantification nan konpoze bioaktif.

Apre sa, yo te detekte fitochimik endividyèl yo nan ekstrè yo lè l sèvi avèk analiz QTOF dirèk perfusion (Tablo 3). Dapre done eksperimantal yo, yo te idantifye 23 konpoze ak majorite nan yo se flavonoid ak bioflavonoid. Dérivés Orientin, isovitexin, saporanin, scoparin (yon flavon), vitexin ak dérivés li yo te idantifye sèlman nan ekstrè fèy yo. Lanceolatin A te detekte sèlman nan ekstrè fèy MAC-dlo ak, perfusion ak ekstrè jape tij MAC-MeOH, pandan y ap biflavonoid Lanceolatin A te prezante sèlman nan ekstrè jape SOX-MeOH tij ak nan tout ekstrè fèy (eksepte HAE-MeOH la). Yo te obsève prezans lanseolatin B nan tout ekstrè tou de pati plant eksepte nan ekstrè fèy enfuze ak HAE-MeOH. Lanseolatin B bioflavonoid la te detekte nan tout ekstrè eksepte nan ekstrè jape tij masere a. Tout Ekstrè yo, eksepte HAE-MeOH ak HAE-Dlo ekstrè fèy ki genyen lanseolatin C. Done jwenn tou revele ke ekstrè yo te rich nan lophirones. Lophirones A, D, E, I, J ak L yo te detekte nan pi fò nan ekstrè yo nan tou de pati plant yo. Rezilta nou yo nan liy lan ak literati kote ensidan an nan biflavanoids lophirones nanL. lanceolatate deja rapòte pa Lopatriello et al. (Lopatriello et al., 2019). Biflavanoids lophirones yo pwodui byogenetikman nan dimerizasyon chalcones ak diferan regiochemistry (Ghogomu et al., 1987; Lopatriello et al., 2019; Tih et al., 1989, 1994). Prezans flavonoid tankou orientin ak vitexin dérivés sèlman nan ekstrè fèy yo korelasyon ak yon nivo ki pi wo nan kontni flavonoid total.

3.2. Pwopriyete antioksidan

Nan etid prezan an, laantioksidanpotansyèl nan ekstrè yo diferan nanL. lanceolatafèy ak tij jape lè l sèvi avèk fosfomolibdèn, gratis radikal scavenging (DPPH ak ABTS), diminye pouvwa (CUPRAC ak FRAP), ak fèr-ion chelating esè yo te evalye. Ki baze sou rezilta eksperimantal yo (Tablo 3), tout ekstrè etidye yo te montre remakab radikal gratis scavenging ak diminye pouvwa. Pou ekstrè fèy yo, yo te obsève pi gwo aktivite gratis nan HAE MeOH (DPPH: 93.82 ± 0.23 ak ABTS: 132.25 ± 0.09 mg TE/g) , ki te swiv pa enfuze (pou DPPH: 93.81 ± 0.43 mg TE / g) ak SOX-MeOH (pou ABTS: 132.09 ± 0.07 mg TE / g) ekstrè. Ekstrè HAE-MeOH la te montre pi wo pouvwa rediksyon kuprik ak ferrik la, ak valè 287.73 ± 21.98 ak 231.21 ± 0.57 mg TE/g, respektivman.

Pami ekstrè jape tij yo, SOX-MeOH (DPPH: 195.18 ± 0.55 ak 265.04 ± 0.99 mg TE) te montre aktivite ki pi wo a asouvisman radikal gratis. / g), ki te swiv pa HAE-MeOH (DPPH: 194.83 ± 0.21and 264.43 ± 0.13 mg TE / g) ekstrè. Kapasite remakab diminye te parèt nan tout ekstrè yo teste tij jape, ak ekstrè yo akeuz yo jwenn lè l sèvi avèk maserasyon (CUPRAC: 853.99 ± 13.27 ak FRAP: 853.99 ± 13.27 mg TE/g) ak homogenizer asistans (CUPRAC: 683.57 ± 8.31.506.4 ± RAP: . ± 3.86 mg TE/g) metòd yo se sous siperyè ajan rediksyon nan tou de CUPRAC ak FRAP tès. Modès totalantioksidankapasite te parèt pa ekstrè fèy yo ak tij jape teste. Konsènan pwopriyete chelating metal, aktivite a varye ant 6.76 ± 1.76 (HAE-Dlo) ak 22.68 ± 0.74 (HAE-MeOH) mg EDTAE/g ak 2.09 ± 0.45 ( MAC-MeOH) ak 6.15 ± 1.12 mg EDTAE/g pou ekstrè jape fèy ak tij, respektivman.

Osi lwen ke literati a te kapab jistifye, gen kèk etid konsènan pwopriyete yo antioksidan nanL. lanceolata(Onyeto, 2014; Oussou et al., 2016). Klèman, rezilta antioksidan yo jwenn yo nan liy ak kontni total fenolik yo obsève nan ekstrè yo. Reyalite sa a endike ke konpoze fenolik yo ta ka konsidere kòm kontribitè prensipal nan pwopriyete yo obsève antioksidan. Reyalite sa a te jwenn tou pa analiz korelasyon Pearson a ak rezilta yo bay nan Fig. 1. Dapre rezilta nou yo, plizyè chèchè rapòte yon korelasyon pozitif ant kontni fenolik total akantioksidanpwopriyete (Chu et al., 2020; Ribeiro et al., 2020; Thummajitsakul et al., 2020). Anplis analiz korelasyon, prezans flavonoid (dérivés lanceolatin) ak bioflavonoid (dérivés lophirone) nan ekstrè yo teste yo ka atribiye a pwopriyete antioksidan yo. Menm jan an tou, Ajiboye et al. (2014) rapòte ke lophirone B ak C te montre siyifikatif pwopriyete antioksidan nan DPPH ak redwi tès pouvwa.

3.2.1. Pwopriyete inhibition anzim

Laanzimpwopriyete inhibitor nanL. lanceolataEkstrè jape fèy ak tij nan direksyon cholinesterases (AChE ak BChE), -amylase, -glucosidase, ak tirozinaz yo te envestige, ak done eksperimantal yo ilistre nan tablo 4. Pami ekstrè fèy yo, sèlman ekstrè yo metanol (HAE-MeOH: 4.4{{ 6}} ± 0.10, SOX-MeOH: 4.22 ± {{2{0}}.21 ak MAC-MeOH: 4.01 ± { {63}}.30 mg GALAE/g) yo te inibitè ki pisan nan AChE, pandan ke okenn nan ekstrè yo te aktif kont BChE. Tout ekstrè jape tij yo te montre aktivite inhibition kont AChE ak valè ki sòti nan 1.93 ± 0.19 (perfusion) a 5.18 ± 0.03 (HAE-MeOH) mg GALAE / g, pandan y ap sèlman metanol ekstrè (HAE-MeOH: 7.87 ± 1.68, SOX-MeOH: 8.66 ± 1.75 ak MAC-MeOH: 7.31 ± 1.33 mg GALAE/g) te pisan kont BChE. Efè remakab anti-tirozinaz yo te parèt pou ekstrè fèy metanol yo, ak aktivite ki pi wo a anrejistre pou ekstrè jwenn lè l sèvi avèk metòd ekstraksyon Soxhlet (131.17 ± 1.96 mg KAE/g). Pa gen okenn aktivite inhibition kont tirozinaz parèt pa ekstrè HAE-Water ak MAC-Water. Tout ekstrè jape tij yo te montre gwo pisans inhibition kont tirozinaz nan lòd sa a: MAC-MeOH > SOX-MeOH > HAE-MeOH > Perfusion > MAC -Dlo > HAE-Dlo. Konsènan efè anti-dyabetik, tout ekstrè fèy ak tij jape teste yo te montre aktivite modès kont anzim -amylase epi sèlman ekstrè metanol nan tou de pati plant yo te efikas nan anpeche -glucosidase, ak valè ki sòti nan 2.77 ± 0.01-2.{62 }} ± 0.16 mmol ACAE / g pou ekstrè fèy ak 2.74 ± 0.01-2.76 ± 0.01 mmol ACAE / g pou ekstrè jape tij.

Dapre sa mwen konnen, pretannanzimrezilta inhibitory yo se premye rapò pouL. lanceolata. Nan pwen sa a, rezilta etid sa a ta ka bay yon dat debaz ki gen anpil valè pou envestigasyon nan lavni. Kòm ka wè nan Fig. 1, nou obsève yon korelasyon enpòtan (R> 0.5) ant fenolik total ak tès inhibition anzim (eksepte pou glikozidaz). Anplis de sa, yo te jwenn gwo valè koyefisyan korelasyon ant flavanol total ak tès anpèchman anzim yo. Konklizyon sa yo te endike ke aktivite byolojik nan ekstrè yo teste yo te fòtman lye ak pwofil chimik yo. Konklizyon nou yo pa konsistan ak papye anvan yo te fè pa plizyè chèchè, ki te rapòte yon relasyon lineyè ant konpoze total byoaktif akanzimefè inhibitory (Ali Reza et al., 2018; Kaewnarin et al., 2016; Llorent-Martínez et al., 2020; Muddathir et al., 2017; Wu et al., 2020). Ansanm,L. lanceolatata ka konsidere kòm yon sous potansyèl inhibiteur anzim natirèl (Tablo 5).

3.3. Evalyasyon aktivite antiproliferatif ak sitotoksik

Aktivite antiproliferatif ak sitotoksik nan jape fèy ak tijL. lanceolataEkstrè yo te evalye sou de liy selil karsinom, HT29 ak MCF7, ak sou yon liy selil fibroblast imen ki pa transfòme (HFF-1). Ekstrè fèy perfusion ak maserasyon-dlo te montre modès aktivite anti-proliferasyon epi yo te pi efikas sou tout liy selil yo teste (Tablo 6). Lòt ekstrè te montre menm aktivite modès sèlman sou liy selil kansòm pandan y ap pwovoke pwopagasyon fibroblast (Figi S1). Efè antiproliferatif ki pi pisan yo te remake nan tout ekstrè jape tij yo, ki montre menm efè antiproliferatif ki pa selektif sou liy selil kansè yo, kèlkeswa metòd ekstraksyon yo itilize (Tablo 6). Enteresan, efè antiproliferatif ki pi pwononse sa a te akonpaye pa yon gwo aktivite proliferatif yo obsève sou liy selil fibroblast ki pa transfòme (Figi S2). Tou de fèy ak tij ekstrè jape pa t 'sitotoksik sou liy selil teste yo. Rezilta sa yo endike yon potansyèl pou plis devlopman nan ajan antiproliferatif ak ba cytotoxisite sistemik ki baze sou plant la L. lanceolata ki ta ka enteresan nan zòn nan nan devlopman dwòg kansè.

Nan yon etid anvan Ajiboye et al. (2014), yo te envestige efè cytotoxik L. alata ak lophirones B ak C sou selil Ehrlich ascites, kidonk pwopriyete antikanse enpòtan yo te anrejistre. Otè yo te rapòte tou ke prezans lophirones B ak C yo te fòtman lye ak efè sitotoksik ekstrè tès la. Dapre enfòmasyon sa yo, bioflavonoid yo (dérivés lophirone) ta ka responsab pou kapasite yo obsève antikansè nanL. lanceolatanan papye prezante a.

3.4. Analiz miltivarye

Analiz estatistik univarye konfime diferans ki genyen nan kontni fitochimik la,antioksidanaktivite ak in vitroanzimaktivite inhibition nanL. lanceolataechantiyon. Plis jisteman, diferans sa yo te obsève ant tou de pati plant etidye, osi byen ke ant diferan teknik-sòlvan yo itilize pou fè ekstraksyon. Li se konesans komen ke distribisyon an nan molekil nan plant chanje soti nan yon pati nan plant nan yon lòt, kidonk afekte aktivite byolojik. Anplis de sa, plizyè etid mete aksan sou enpak teknik-sòlvan yo itilize pou fè ekstraksyon sou prezans ak konsantrasyon final nan konpoze fitochimik nan enterè yo. Dapre enfòmasyon sa a, li te enpòtan pou estime nivo enpak tou de faktè sou aktivite byolojik analize yo. Nan sans sa a, analiz miltivarye eksploratwa sa vle di analiz eleman prensipal parèt apwopriye pou objektif sa a.

PCA redwi deskriptè yo an de PC prensipal ki fèmen 90.1 pousan nan varyab la (figi 2A). PC1, eleman ki pi enpòtan ak 66.7 pousan nan varyasyon eksplike, te asosye pozitivman ak antioksidan (phosphomolybdenum (PPBD), 2,2′-azino-bis(3-ethylbenzothiazoline-6- sulphonic acid (ABTS),) antioksidan rediksyon kuprik (CUPRAC), 2,2- difenil-1-picrylhydrazil (DPPH) ak rediksyon ferrikantioksidanpouvwa (FRAP)) ak tès -amylase. PC2 yo te jwenn pozitivman mare nan -glucosidase ak fèr chelating kapasite tès (figi 2B). Yo te obsève de gwoup prensipal diskriminatwa ki reprezante chak pati plant etidye sou PC1. Anplis de sa, echantiyon chak pati plant yo te separe ansanm PC2, an relasyon ak sòlvan yo itilize nan pwosesis ekstraksyon an (figi 3A).

Ekstrè jape tij yo te karakterize pa pi fò aantioksidanpwopriyete yo, tandiske ekstrè fèy yo te gen pi wo abilite chelating fèr (figi 3B). Anplis de sa, sèlman kèk ekstrè jape tij yo te jwenn fè egzèsis yon efè inhibition sou butyrylcholinesterase (BChE)anzimaktivite. Biosentèz metabolit segondè nan plant yo se yon pwosesis enfliyanse pa plizyè faktè, kèk nan yo ki gen rapò ak plant nan tèt li ak kèk enfliyanse pa anviwònman an. Pou faktè ki asosye ak plant nan tèt li, li te montre ke distribisyon an ak konsantrasyon nan fitokonstitiyan nan plant yo varye anpil depann sou devlopman ontojenetik yo ak pati plant yo (Feduraev et al., 2019).

Anplis de sa, yo te mete aksan sou enfliyans sòlvan ekstraksyon an sou aktivite byolojik L. lanceolata. Efè sa a pi aparan sou fèy yo (figi 4B). Anplis de sa, rezilta nou yo te montre ke metanol te yon sòlvan ki pi adekwat pou fè ekstraksyon nan konstitiyan byoaktif kòm li te bay kalitatif ak quantitatively ekstrè pi rich. Ka konklizyon sa a dwe atribiye a solubility nan pi wo nan konpoze fitochimik nanL. lanceolatanan metanol, sijere nati lipofil yo. Ansanm, rezilta sa yo rekonèt jape tij L. lanceolata kòm pati ki pi rich nan plant nan fitonutriman ak metanol kòm sòlvan apwopriye pou fè ekstraksyon li yo.

4. Konklizyon

Etid sa a rapòte karakterizasyon fitochimik nanL. lanceolataEkstrè fèy ak tij ak evalyasyon efè antioksidan, inhibiteur anzim ak antiproliferatif/sitotoksik. Lanseolatin ak lophirones yo te jwenn nan tout pati plant analize, tandiske plizyè apigenin ak luteolin glikozid yo te jwenn sèlman nan ekstrè fèy yo. An jeneral, ekstrè a te montre tou enteresanantioksidanaktivite kote ekstrè yo jape tij te montre pi bon efè antiproliferatif nan direksyon pou liy selil kansè yo, kidonk defann plis etid yo demontre potansyèl li nan jesyon kansè. Anpèchman nan klinik kleanzimte montre tou potansyèl ekstrè yo nan jesyon alzayme a, ipèpigmantasyon, ak dyabèt melitus. Konklizyon sa yo te pwouve saL. lanceolatase yon sous pwomèt nan elektè byoaktif ak yon aplikasyon potansyèl prevwa nan fòmilasyon ton po. Sepandan, plis etid (efikasite, toksisite, byodisponibilite, elatriye) sou L. lanceolata ta dwe fèt ak objektif pou devlope roman.antioksidanak inibitè anzim ak pwopriyete amelyore sou sa yo sentetik.

Sa yo secistanche herbatranch. Klike sou foto a epi jwenn detay yo.