Cistanche deserticola se yon plant ki an danje ki itilize pou medikaman ak manje. Objektif nou se eksplore diferans ki genyen nan metabolis ant enfloresans nan pati ki pa medikaman ak tij sukulan nan pati medsin ranfòse aplikasyon an ak devlopman nan pati ki pa medikaman nan C. deserticola. Nou te fè analiz metabolomik atravè LC-ESI-MS/MS sou enfloresans yo ak tij sukulan nan twa ekotip (tè saline-alkali, preri, ak tè sab) nan C. deserticola. Yo te idantifye yon total de 391 metabolit komen nan sis gwoup, ki isorhamnetin O-hexoside (enfloresans) ak rosinidin O-hexoside (tij sukulan) ka itilize kòm makè chimik yo fè distenksyon ant tij sukulan ak enfloresans. Konpare diferans metabolik ant twa ekotip yo, nou te jwenn ke pi fò nan metabolit diferan ki gen rapò ak estrès sèl-alkali yo te flavonoid. An patikilye, nou te trase chemen byosentetik glikozid phenylethanoid (PhGs) epi nou te montre diferans metabolik yo nan sis gwoup yo. Pou pi byen konprann mekanis famakodinamik ak sib C. deserticola, nou te fè tès depistaj 88 konpozan chimik ak 15 sib maladi potansyèl atravè anbache molekilè. Engredyan yo aktif nan C. deserticola gen yon efè remakab debakadè sou objektif yo nan maladi aje tankou osteyopowoz, maladi vaskilè, ak ateroskleroz. Pou eksplore valè itilizasyon enfloresans, nou analize debakadè molekilè metabolit flavonoid inik nan enfloresans la ak objektif enflamasyon. Rezilta yo te montre ke chrysoberyl ak cynarosid te gen pi gwo nòt pou objektif enflamasyon. Etid sa a bay yon baz syantifik pou dekouvèt ak endistriyalizasyon valè resous nan pati ki pa medikaman nan C. deserticola, ak realizasyon an nan devlopman dirab nan C. deserticola. Li bay tou yon estrateji roman pou eksplore endikasyon remèd fèy Chinwa.

Dapre etid ki enpòtan, cistanche se yon zèb komen ke yo rekonèt kòm "zèb mirak ki pwolonje lavi". Eleman prensipal li se cistanoside, ki gen efè divès kalite tankou antioksidan, anti-enflamatwa, ak pwomosyon fonksyon iminitè. Mekanis ki genyen ant cistanche ak blanchiman po manti nan efè a antioksidan nan glikozid cistanche. Melanin nan po moun pwodui pa oksidasyon tirozin ki katalize pa tirozinaz, ak reyaksyon oksidasyon mande pou patisipasyon oksijèn, kidonk radikal oksijèn san yo nan kò a vin yon faktè enpòtan ki afekte pwodiksyon melanin. Cistanche gen cistanoside, ki se yon antioksidan epi li ka diminye jenerasyon radikal gratis nan kò a, kidonk anpeche pwodiksyon melanin.

Klike sou Cistanche pou vann

Pou plis enfòmasyon:

david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501

1. Entwodiksyon

Cistanche deserticola se yon plant manjab ak medsin ke yo rele souvan "ginseng dezè". 1 C. deserticola te premye anrejistre nan Chinese Materia Medica Shen Nong a apeprè 1800 ane de sa e li te lajman itilize kòm yon tonik tradisyonèlman konsiderab nan Lachin ak Japon pou anpil ane. Konpoze yo izole nan C. deserticola yo se glikozid feniletanoid (PhGs), iridoid, lignan, asid gra, alditol, idrat kabòn, ak polisakarid, pami ki PhGs se prensipal engredyan aktif.2 Famasoloji modèn montre ke ekstrè yo nan C. deserticola (tankou glikozid feniletanoid, polisakarid, elatriye) gen yon pakèt fonksyon medsin, espesyalman nan amelyore fonksyon seksyèl, amelyore memwa, règleman iminitè, pwoteksyon fwa, aktivite laksatif, aktivite antioksidan, elatriye3-5 Anplis li yo. valè medsin, C. deserticola gen valè ekolojik pou kontwòl dezè akòz kapasite li pou grandi nan anviwònman arid, osi byen ke anba kondisyon estrès saline-alkali.6 Sepandan, sous sovaj C. deserticola yo te konsidere kòm an danje nan dènye ane yo. ane akòz demann mache rapidman ap grandi ak eksplwatasyon twòp. Li te nan lis kòm youn nan klas II plant yo bezwen pwoteksyon nan Lachin.2 Kontinwe, li se ijan pou efektivman devlope resous C. deserticola ak detèmine anviwònman ki pi bon pou kwasans C. deserticola.

Pati tradisyonèl medsin nan plant medsin yo lajman itilize, pandan y ap pati ki pa medikaman yo souvan abandone. Yon gwo kantite etid yo te montre ke kèk pati ki pa medikaman tankou Salvia miltiorrhiza, Paris polyphylla, ak Crocus sativus gen menm konpozisyon chimik ak efè famasi ak pati medsin. Rechèch la sou pati ki pa medikaman se fezab pou ekspansyon resous medikal, espesyalman pou pwoteksyon plant medsin ki an danje.7,8 Qiao et al. itilize teknoloji GC-MS pou idantifye 40 konpozan temèt nan enfloresans C. deserticola.9 Peng et al. itilize transcriptomics ak metabolomics pou analize konplè efè analgesic nan diferan pati nan citronella.10 Yang et al. kalite flavonoid izole nan pati ayeryen Salvia miltiorrhiza epi etidye aktivite antioksidan yo.8 Pati medsin nan C. deserticola se yon tij sukulan, ki lakòz yon gwo kantite enfloresans yo jete chak ane, sa ki lakòz yon fatra gwo resous. .

Metabolit yo, kòm pwodwi final divès pwosesis byochimik ki katalize pa anzim yo, bay bonjan konesans molekilè pou byochimik òganis yo nan yon moman.11 Metabolis gen rapò ak bon jan kalite plant yo. Metabolit prensipal yo afekte kwasans ak devlopman plant yo, epi metabolit segondè yo ka ede plant yo reziste estrès anviwònman an.12 Se poutèt sa, teknoloji metabolomik yo lajman itilize nan evalyasyon kalite plant yo.13–15 Nou te deja entegre transcriptome a ak metabolom pou evalye kalite tij sukulan yo. twa ekotip C. deserticola yo epi eksplore mekanis molekilè varyasyon kalite.16 Nou te jwenn ke 20 -acetylacteoside ka itilize kòm yon makè chimik pou distenge twa ekotip. Wenjing Liu et al. baze sou 1 H NMR ki pa vize estrateji metabolomik ki baze sou LC-MS, te fè yon konparezon apwofondi gwoup chimik nan kat espès Cistanche délisyeu epi idantifye echinacoside, acetonide, betaine, mannitol, 6-deoxycatalpol, sikwoz, epi 8- asid epi-òganik ka itilize kòm makè chimik pou distenge kat espès Cistanche.17 Pingping Zou et al. aplike 1 H RMN ki baze sou metabolomik yo idantifye pati yo anwo ak pi ba nan tij C. deserticola epi li te jwenn ke metabolit prensipal seri, espesyalman idrat kabòn ak metabolit sik asid tricarboxylic, kòm molekil prensipal yo ki gouvène diskriminasyon an.18 HaiLi Qiao et al. ilistre ke yon kontni ki pi wo nan ester ak aromat yo te jwenn nan flè, ki te siyifikativman ogmante an konparezon ak konpoze yo temèt soti nan ti boujon nan analiz GC-MS nan eleman yo temèt nan enfloresans nan C. deserticola. 9 Kounye a, rechèch la sou varyasyon kalite ant tij la délisyeu ak enfloresans nan C. deserticola nan pèspektiv nan metabolis toujou manke.

Etid ki deja egziste yo te itilize rezo simulation nan debakadè molekilè yo eksplore objektif yo ak mekanis nan medikaman Chinwa nan trete maladi.19-21 Jianling Liu et al. envestige konbinezon efikas dwòg ki baze sou sistèm famasi nan mitan konpoze ki soti nan Cistanche tubulosa. Yo te teste preliminèman 61 konpoze ak 43 objektif ki gen rapò ak nero-enflamasyon, ki verbascoside ak tubuloside B ta ka jwe wòl kle nan neuroprotection.22 YingQi Li et al. famasi rezo entegre ak modèl pwason zèb pou mennen ankèt sou konpozan efè doub nan Cistanche tubulosa pou trete tou de osteyopowoz la ak maladi alzayme a.23 Konpozan chimik C. deserticola yo konplèks epi yo gen yon pakèt efè famasi. Sepandan, mekanis terapetik yo poko klè. Li se nan gwo siyifikasyon klarifye sib maladi ak mekanis pou devlopman an plis nan C. deserticola.

Nan etid sa a, nou te itilize metabolomik pou mennen ankèt sou diferans metabolik yo nan enfloresans yo ak tij sukulan nan twa ekotip yo (tè saline-alkali, preri, ak tè sab) nan C. deserticola epi konpare ekotip salin yo ak tè sab. alkali peyi ekotip yo eksplore varyasyon metabolik nan C. deserticola ki afekte pa estrès alkali sèl. Patikilyèman, nou idantifye ak analize metabolit sis gwoup ki enplike nan byosentèz PhG yo. Nou te aplike debakadè molekilè pou detekte konpoze ak sib potansyèl yo epi nou te trase dyagram simulation rezo, ansanm ak analiz anrichisman GO ak KEGG. Konklizyon nou yo bay nouvo apèsi sou diferans metabolik ki genyen ant enfloresans ak tij sukulan twa ekotip C. deserticola.

2. Materyèl ak metòd

2.1 Materyèl Plant ak koleksyon echantiyon

Nou kolekte enfloresans yo (echantiyon nimewo seri sifiks la se "1") ak tij sukulan (echantiyon nimewo seri sifiks la se "2") pou C. deserticola nan etap ègzumasyon (avril rive me 2017) nan twa ekotip diferan: Ebinur Lake. nan Xinjiang (A1 & A2: tè saline-alkali), Vilaj Tula nan Xinjiang (B1 & B2: savann) ak Alxa Left Banner nan Inner Mongolia (C1 & C2: tè sab) nan nòdwès Lachin (Tablo 1 ak Fig. 1a) . Espesimèn bon yo te depoze nan èrbyòm Enstiti pou Devlopman Plant Medsin nan Akademi Chinwa Syans Medikal nan Beijing, Lachin. Echantiyon yo te kolekte nan jaden an epi estoke nan nitwojèn likid byen vit. Aer netwayaj ak PBS, tisi yo tij sukulan yo te koupe an ti moso epi imedyatman estoke nan frizè 80 degre Sèlsiyis jiskaske plis pwosesis. Yo te pran 18 echantiyon (twa replike byolojik pou chak abita, de pati tisi pou chak echantiyon) nan pati epè nan enfloresans la ak tij charnèl pou analiz metabolom.

2.2 Ekstraksyon ak separasyon metabolit

Yo te kraze echantiyon an friz lè l sèvi avèk yon moulen mixer (MM 400, Retsch) ak yon pèl zirkonya pou 1.5 min nan 30 Hz. 100 mg poud te peze ak ekstrè lannwit lan nan 4 degre ak 1.0 mL 70 pousan metanol akeuz. Apre santrifujasyon nan 10 000 g pou 10 min, ekstrè yo te absòbe anvan analiz LC-MS.

Yo te itilize sistèm LC-ESI-MS/MS (UPLC, Shim-pack UFLC SHIMADZU CBM30Yon sistèm) pou analize ekstrè echantiyon lyofilize a. Kondisyon analyse yo te jan sa a: kolòn UPLC, Waters ACQUITY UPLC HSS T3 C18 (1.8 mm, 2.1 mm × 100 mm); sòlvan, dlo (0.{04 pousan asid acetic): asetonitrile (0.{04 pousan asid acetic); pwogram gradyan, 100 : 0 v/v nan 0 min, 5: 95 v/v nan 11.0 min, 5: 95 v/v nan 12.0 min, 95: 5 v/v nan 12.1 min ak 95 : 5 v/v nan 15.0 min; to koule, 0.40 mL min 1; tanperati, 40 degre; ak volim piki, 2 mL. Efluan an te altènativman konekte ak yon pèlen ESI-trip quadrupole-lineyè ion (Q TRAP)-MS. Nan eksperyans sa a, yo te prepare yon echantiyon kontwòl kalite pa melanje inifòm; pandan analiz la, echantiyon kontwòl kalite yo te kouri chak 10 piki pou kontwole estabilite kondisyon analiz yo.24-26

Yo te jwenn eskanè Linear Ion Trap (LIT) ak trip quadrupole (QQQ) sou yon espektwomèt mas pèlen iyon triple quadrupole-lineary (Q TRAP), API 6500 Q TRAP LC/MS/MS sistèm, ekipe ak yon ESI turbo ion-espre koòdone, opere nan mòd ion pozitif ak kontwole pa lojisyèl analis 1.6 (AB Sciex). Paramèt operasyon sous ESI yo te jan sa a: yon sous ion, espre turbo; tanperati sous 500 degre; ion espre vòltaj (IS) 5500 V; ion sous gaz I (GSI), gaz II (GSII), gaz rido (CUR) yo te mete nan 55, 60, ak 25.0 psi, respektivman; gaz kolizyon an (CAD) te wo (12 psi). Akor enstriman ak kalibrasyon mas yo te fèt ak solisyon 10 ak 100 mmol L 1 polypropylène glycol nan mòd QQQ ak LIT, respektivman. Analiz QQQ yo te akeri kòm eksperyans MRM ak gaz kolizyon (azòt) mete nan 5 psi. Declustering potansyèl (DP) ak enèji kolizyon (CE) pou tranzisyon MRM endividyèl yo te fèt ak plis optimize. Yo te kontwole yon seri tranzisyon MRM espesifik pou chak peryòd ki baze sou metabolit yo eliye nan peryòd sa a.

2.3 Idantifikasyon metabolit ak Quantification

Analiz kalitatif done MS prensipal ak segondè te pote soti nan konparezon iyon yo precurseur (Q1), iyon fragman (Q3) valè (fenèt izolasyon (± 15 Da), tan rete (ms) oswa tan sik (1 segonn)), tan retansyon (RT), ak modèl fwagmantasyon ak sa yo jwenn nan enjekte estanda lè l sèvi avèk menm kondisyon yo si estanda yo te disponib oswa fèt lè l sèvi avèk yon baz done pwòp tèt ou konpile MWDB (NetWare Biological Science and Technology Co., Ltd Wuhan, Lachin) ak piblikman disponib. baz done metabolit si estanda yo pa disponib. Siyal ki repete K plis, Na plis, NH4 plis, ak lòt gwo sibstans pwa molekilè yo te elimine pandan idantifikasyon. Analiz quantitative metabolites te baze sou mòd MRM. Yo te fè tès depistaj iyon karakteristik chak metabolit atravè espektwomèt mas QQQ pou jwenn fòs siyal yo. Entegrasyon ak koreksyon nan pik kwomatografik yo te fèt lè l sèvi avèk Multi Quant vèsyon 3.0.2 (AB SCIEX, Concord, Ontario, Kanada). Kontni metabolit relatif korespondan yo te reprezante kòm entegral zòn pik kwomatografik.

Lojisyèl SIMCA-P (vèsyon 14.1, Sartorius Stedim Biotech, Ume˚a, Syèd) te kalkile valè VIP (varyab enpòtan nan pwojeksyon) echantiyon C. deserticola (twa kopi byolojik) ki baze sou analiz eleman prensipal la ak yon pati nan pi piti orthogonal. analiz diskriminan kare. Nou fikse fold-change $2 oswa #0.5 ak valè VIP $1 kòm papòt pou tcheke metabolit yo diferan anpil. Done metabolit yo te nòmalize, analiz heatmap gwoup yo te fèt sou tout echantiyon yo, epi yo te itilize script pwogram R la pou trase heatmaps grap yo.

2.4 Docking molekilè

2.4.1 Koleksyon konpoze chimik.Atravè rezilta eksperimantal preliminè gwoup rechèch nou an ak rezilta rechèch literati yo, yo te kolekte yon total de 127 konpoze izole ki soti nan tij sukulan nan C. deserticola epi telechaje sou sit entènèt Chemical Book la oswa itilize ChemDraw pou trase estrikti molekilè 2D la. Anplis de sa, nou te jwenn 4 evite (chrysoberyl, cynarosid, hesperetin, ak homoeriodictyol) detekte sèlman nan enfloresans la atravè rezilta metabolom yo. Yo te konvèti estrikti 2D a nan yon estrikti ki genyen twa dimansyon ak lojisyèl ChemDraw 3D, epi yo te fè optimize preliminè. Lè sa a, Avogadro Software te verifye estrikti ki genyen twa dimansyon optimize preliminè a epi yo te itilize plis optimize enèji pou jenere fòma fichye konpoze final ki nesesè pou anbafe molekilè ki vin apre a.

2.4.2 Koleksyon Koleksyon Sib.Nou te chèche sib pwoteyin maladi atravè literati ak baz done STITCH la. Nou te jwenn objektif jèn korespondan yo lè nou itilize baz done Uniport la epi nou te rekipere ID PDB aplotip pwoteyin ak estrikti ti molekil pa RCSB. Lè n ap detèmine dwòg la pozitif, nou te itilize literati a ak sit entènèt Yaodu pou idantifye preliminèman 45 sib maladi ki gen rapò ki te rapòte, ki gen ladan 10 maladi ki gen rapò ak tij yo sukulan nan C. deserticola nan literati a. Dis maladi sa yo te ateroskleroz, osteyopowoz, demans senil, maladi alzayme a, Parkinson, konstipasyon kwonik, takikardya torsades de pointes ventricular, maladi vaskilè, blesi myokad, ak kansè nan rektal. Anplis de sa, nou kolekte 467 sib ki gen rapò ak enflamasyon ak jwenn 2 sib enpòtan (6KBA ak 7AWC) atravè tès depistaj, ki te itilize pou analiz molekilè nan flavinoid espesifik enfloresans.

2.4.3 Simulation debakadè molekilè.Pou evalye afinite obligatwa nan konpoze nan C. deserticola ak objektif kandida yo, nou te fè yon simulation debakadè molekilè atravè lojisyèl QuickVina 2.0, yon sèvis piblik sous louvri devlope pa gwoup rechèch Alhossary. Pou verifye afinite obligatwa ant sib yo ak konpoze yo, nou kalkile yon nòt demaraj atravè QuickVina 2.0. Nòt docking ki depase dwòg pozitif yo (yo ka jwenn done pou chak dwòg pozitif nan sib korespondan yo nan RCSB oswa nan literati) te endike yon gwo afinite obligatwa ant objektif kandida yo ak konpoze korespondan yo.27–30 Nou te itilize PyMOL (Vèsyon 2.0 Schr¨odinger, LLC) pou trase rezilta demaraj konpoze an ak sib la.

2.4.4 Konstriksyon rezo konpozan-sib-chemen ak analiz fonksyon GO/KEGGKonstriksyon rezo eleman-sib-chemen te fèt lè l sèvi avèk lojisyèl vizyalizasyon rezo Cytoscape. Nan entèraksyon rezo, nœuds reprezante konpozan, sib, ak chemen, tandiske bor reprezante entèraksyon youn ak lòt. Nou itilize valè molekilè anbakadè konpoze an ak jèn sib la kòm yon endikatè koulè koneksyon an. Plis koulè vèt la, se pi gwo valè nòt la. Yon rezo entèraksyon pwoteyin-pwoteyin (PPI) ki asosye ak sib jèn yo te konstwi ak analize ak STRING.31.

Pou plis chèche konnen fonksyon byolojik nan rezo konstwi a, nou te itilize modil annotasyon fonksyonèl nan baz done DAVID29 pou fè analiz Gene Ontology (GO) ak KEGG anrichisman sou jèn sib yo.

3. Rezilta yo

3.1 Profil metabolik C. deserticola

Pou jwenn yon apèsi sou chanjman metabolik twa ekotip C. deserticola enfloresans ak tij sukulan, yo te fè analiz metabolom lajman vize lè l sèvi avèk LC-ESI-MS/MS. Jan yo montre nan Fig. 1b, enfloresans yo ak tij sukulan nan C. deserticola ki soti nan diferan ekotip te montre separasyon diferan, ak separasyon nan tisi diferan te pi gran pase sa yo ki nan ekotip diferan. Ak twa echantiyon yo replike gen menm nòt PC, ki endike ke C. deserticola metabolites te montre ti separasyon ant echantiyon replike. Anplis, echantiyon kontwòl kalite (melanje) yo rasanble ansanm nan sant konplo nòt PCA yo. Dyagram nan petal (Fig. 1c) ak dyagram fache (Fig. 1d) endike ke te gen 391 metabolit komen nan sis gwoup yo, ak kantite metabolit detekte nan enfloresans la te jeneralman pi wo pase sa ki nan tij la sukulan. Kantite metabolit yo detekte nan enfloresans saline-alkali (A1) te pi gwo a, ak yon total de 515, nan ki 18 metabolit yo te sèlman detekte nan A1. Kantite metabolit detekte nan tij preri sukulan (B2) te pi piti a, ak yon total de 458, san metabolit inik li yo.

Yo te detèmine kontni relatif 578 metabolit, ki gen ladan 35 kategori metabolit (ESI File S1). Metabolit ki pi abondan nan enfloresans yo ak tij sukulan nan tou de twa ekotip yo te lipid, glycerolipids, asid amine, nukleotid, ak dérivés yo, glikozid phenylethanoid (PhGs), ak flavonoid (Fig. S3a, 3b, ak c). Apre nòmalizasyon, kontni pwopòsyonèl chak metabolit te detèmine pa zòn repons pik mwayèn pandan UPLC-MS/MS, jan yo montre nan Fig. 1e ak yon kat chalè, epi li te fè plis ak analiz clustering yerarchize. Plis metabolit segondè te montre nivo konsantrasyon relatif segondè nan A1 ak C2 pase nan lòt gwoup yo. Pami metabolit segondè yo nan tout twa ekotip, kontni relatif nan glikozid phenylethanoid (PhGs) nan tij sukulan yo te pi wo pase nan enfloresans yo, pandan y ap kontni relatif la nan flavonoid nan enfloresans yo te pi wo pase tij sukulan yo.

Nan analiz metabolom sa a, yo te detekte 12 eleman prensipal aktif nan C. deserticola, ki gen ladan 2′-acetylatteoside, acteoside, cistanoside A, coniferin, echinacoside, formononetin -7-O-glucoside, inosine, isoacteoside, ononin, pinoresinol, sereng. , ak uridine. Yon kat jeyografik chalè gwoupman yerarchize (Fig. 1f) te trase pou eleman prensipal aktif nan C. deserticola detekte pa metabolom la, ki montre ke kontni relatif la nan eleman prensipal yo aktif nan tij la sukulan te pi wo pase sa ki nan enfloresans la. Konpare ak tisi diferan, engredyan yo aktif ak kontni relativman wo nan enfloresans yo te 2′-acetylatteoside ak koniferin, pandan y ap engredyan yo aktif ak kontni relativman wo nan tij sukulan yo te acteoside, cistanoside A, echinacoside, ak isoacteoside. Konpare ak diferan ekotip, kontni relativman wo nan engredyan aktif nan tè saline-alkali te 2′-acetylatteoside, acteoside, coniferin, echinacoside, ak isoacteoside. Kontni relativman wo nan savann te echinacoside, ak kontni relativman wo nan tè sab yo te cistanoside A.

3.2 Diferans metabolik ant enfloresans ak tij sukulan nan C. deserticola

Pou konprann diferans ki genyen nan metabolis ant enfloresans ak tij sukulan nan C. deserticola nan twa ekotip, nou analize metabolit yo diferan. Yo te obsève gwo previzibilite (Q2) nan modèl OPLS-DA yo jenere yon konparezon par ant enfloresans kont tij sukulan nan tè saline-alkali (Q2 = 0.996), preri (Q2 = 0.997) , ak tè sab (Q2 = 0.997) (Fig. S1a). Valè Q2 ak R2 yo te pi wo nan tès pèmitasyon an pase nan modèl OPLS-DA (Fig. S1b). Pou idantifye varyab potansyèl yo, nou fikse chanjman-pli ki pi gran pase oswa egal a 2 oswa mwens pase oswa egal a 0.5 ak valè VIP pi gran pase oswa egal a 1 kòm papòt la pou ekran metabolit yo siyifikativman diferan nan chak pè. nan konparezon. Top 10 metabolit diferan nan twa enfloresans ekotip yo ak tij sukulan yo te montre nan Tablo S1. Konpare ak tij sukulan, kontni an relativman wo nan metabolit diferans nan enfloresans yo te flavonoid, tankou flavonol, flavon, ak flavon C-glikozid.

Nan tè saline-alkali, konpare ak enfloresans, tij sukulan te gen 43 metabolit diferans ki regilasyon ak 71 metabolit diferans ki desann (figi 2a). Kat jeyografik chalè a (figi 2b) te montre ke kontni relatif enfloresans yo te pi wo pase tij sukulan yo. Lè w konpare tij sukulan ak enfloresans, metabolit prensipal yo kontwole se te cyanidin 3-O-rutinoside (keracyanin), icariin (kaempferol 3,7-O-diglucoside 8-prenyl derive), asid homovanillic. , Chlorogenic asid methyl ester, ak rosinidin O-hexoside. Pwensipal metabolit diferans ki reglemante anba yo enkli N′, N′′-di-p-coumaroylspermidine, 8-C-hexosyl-luteolin O-hexoside, asid kafeyik, isorhamnetin O-hexoside, ak isorhamnetin 5- O-hexoside (figi 2c). KEGG metabolik chemen anrichisman analiz (figi 2d) klase metabolit diferans yo idantifye nan enfloresans ak tij sukulan nan byosentèz flavonoid, flavon ak flavonol byosentèz, biosentèz izoflavonoid, biosentèz fenilpropanoid, ak metabolis etè lipid.

Nan savann, konpare ak enfloresans, tij sukulan te gen 35 metabolit diferans ki regilasyon monte ak 54 metabolit diferans ki kontwole desann (figi 2a). Kat jeyografik chalè a (figi 2b) te montre ke kontni relatif enfloresans yo te pi wo pase tij sukulan yo. Konpare tij sukulan ak enfloresans, metabolit prensipal yo kontwole yo se l-(plis)-arginin, asid adipik, N-methylnicotinamide, 4-hydroxybenzoic asid, ak dihydromyricetin. Pwensipal metabolit diferans ki kontwole desann yo enkli rosinidin O-hexoside, asid kafeyik, isorhamnetin O-hexoside, vann 5-O-hexoside, ak isorhamnetin 5- O-hexoside (figi 2c). KEGG metabolik chemen anrichisman analiz (figi 2d) klase metabolit diferans yo idantifye nan enfloresans ak tij sukulan nan byosentèz flavonoid, flavon ak flavonol byosentèz, byosentèz diterpenoid, biosentèz izoflavonoid, ak sirkadyèn antrennman.

Nan peyi Sandy, konpare ak enfloresans, tij sukulan te gen 40 metabolit diferans ki regilasyon monte ak 87 metabolit diferans ki kontwole desann (figi 2a). Kat jeyografik chalè a (figi 2b) te montre ke kontni relatif enfloresans yo te pi wo pase tij sukulan yo. Lè w konpare tij sukulan ak enfloresans, metabolit prensipal yo kontwole se te O-feruloyl 4-hydroxylcoumarin, serening, rosinidin O-hexoside, 3-({{4-hydroxyphenyl) propionik asid, ak asid homovanillic. Pwensipal metabolit diferans ki kontwole desann yo enkli chrysoeriol O-rhamnosyl-O-glucuronic asid, C-hexosyl-apigenin O-caffeoylhexoside, vann O-malonylhexoside, isorhamnetin O-hexoside, ak 8- C-hexosyl-luteolin O- hexoside (figi 2c). KEGG metabolik chemen anrichisman analiz (figi 2d) klase metabolit diferans yo idantifye nan enfloresans ak tij sukulan nan flavon ak flavonol byosentèz, byosentèz flavonoid, byosentèz izoflavonoid, byosentèz konpoze diterpenoid, ak degradasyon nan biosentèz aromat.

3.3 Diferans metabolik ki gen rapò ak estrès saline-alkali nan twa ekotip C. deserticola

Pou atrab karakteristik metabolik inik twa ekotip peyi saline-alkali nan C. deserticola, nou te fè tès depistaj metabolit yo diferan nan tè saline-alkali kont preri ak tè sab kont tè saline-alkali. Yo te obsève gwo previzibilite (Q2) nan modèl OPLS-DA yo jenere yon konparezon par ant tè saline-alkali kont preri nan enfloresans (Q2 = 0.997) ak tij sukulan (Q2 = 0.991) . Pandan se tan, gwo previzibilite (Q2) nan modèl OPLS-DA yo ant tè sab kont tè saline-alkali nan enfloresans (Q2 = 0.988) ak tij sukulan (Q2 = 0.995). Valè Q2 ak R2 yo te pi wo nan tès pèmitasyon an pase nan modèl OPLS-DA (figi S2).†). Pou idantifye varyab potansyèl yo, nou mete chanjman-pli ki pi gran pase oswa egal a 2 oswa mwens pase oswa egal a 0.5 ak valè VIP pi gran pase oswa egal a 1 kòm papòt la pou ekran metabolit siyifikativman diferan nan chak pè. nan konparezon. Tablo 2 te montre metabolit diferan nan enfloresans ak tij sukulan ki gen rapò ak estrès saline-alkali (tè saline-alkali kont salin ak tè sab ak tè saline-alkali), klase pa kategori metabolit, epi li te demontre ke klas ki pi metabolit yo te flavonoid. . Pami yo, kontni relatif nan anthocyanins, flavonoid, flavonol, flavanone, catechin, ak dérivés yo, ak izoflavon yo se pi wo a nan peyi saline-alkali. Anplis de sa, heatmap la (figi 3d) te montre ke gwoup yo ki gen pi wo kontni relatif nan metabolit diferans nan flavonoid yo te A1 ak C1. Kontni relatif la nan anthocyanins te pi wo nan gwoup A2 a, ak kontni relatif nan flavonoid ak flavonol te pi wo a nan gwoup la A1.

Kat vòlkan yo (figi 3a) te montre ke kantite metabolis diferans ki kontwole nan tè saline-alkali pi wo pase sa yo ki nan preri ak tè sab, kit nan enfloresans oswa tij sukulan. Top 20 metabolit diferans yo nan chak konparezon yo te montre nan Fig. 3b. Nan tè saline-alkali kont savann, chemen KEGG yo nan metabolit diferans nan enfloresans yo te sitou anrichi nan byosyntèz flavonoid, flavonol, ak biosentèz flavonol, biosentèz diterpenoid, biosentèz izoflavonoid, ak biosentèz biosynthesis. Anplis de sa, wout KEGG yo nan metabolit yo diferan nan tij la sukulan yo te sitou rich nan sinaps dopaminergic, metabolis purin, byosentèz flavonoid, metabolis pirimidin, ak antrennman sirkadyèn. Nan tè saline-alkali kont savann, chemen KEGG yo nan metabolit diferans nan enfloresans yo te sitou anrichi nan biosentèz isoflavonoid, byosentèz metabolit segondè, flavon, ak byosintez flavonol, ajan antineoplastics soti nan pwodwi natirèl, ak opresyon. Anplis, chemen KEGG yo nan metabolit yo diferan nan tij la sukulan yo te sitou rich nan biosentèz aminoacyl-tRNA, dijesyon pwoteyin ak absòpsyon, metabolis kabòn santral nan kansè, byosentèz asid amine, ak byosentèz fenilpropanoid (figi 3c).

Pou plis enfòmasyon: david.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501