N-(4-metoksifenil) Kafeamide-induit mekanis anpèchman Melanogenesis

Background:

Dérivés de kafeyin montre aktivite antioxydant Et antityrosinase. Yo te envestige aktivite ak mekanis N-(4-methoxyphenyl) kafeyin (K36E) sou melanogenesis.

Metòd:

Selil B16F0 yo te trete ak divès konsantrasyon K36E; yo te etidye kontni melanin ak transdiksyon siyal ki gen rapò. Yo te aplike tès Western blotting pou detèmine ekspresyon pwoteyin, epi yo te fè espektrofotometri pou idantifye aktivite tirozinaz la ak kontni melanin.

Rezilta:

Rezilta nou yo te endike ke K36E redwi kontni melanin ak aktivite tirozinaz nan selil B16F0 ki te pwovoke òmòn-melanocyte-stimulating (-MSH). Anplis de sa, K36E anpeche ekspresyon fosfo-siklik adenosine monofosfat (cAMP)-repons eleman-obligatwa pwoteyin, faktè transkripsyon ki asosye ak mikroftalmi (MITF), tirozinaz, ak pwoteyin ki gen rapò ak tirozinaz -1 (TRP{{14} }). K36E aktive fosforilasyon pwoteyin kinaz B (AKT) ak glikojèn sintaz kinaz 3 beta (GSK3), ki mennen nan anpèchman aktivite transkripsyon MITF. K36E atténué -MSH-induit cAMP chemen, kontribye nan ipopigmantasyon.

An menm tan an, nan rechèch la, nou menm tou nou te jwenn yon nouvo aplikasyon nan glikozid total Cistanche deserticola oswa ekstrè a ki gen glikozid fenylethanoid nan Cistanche deserticola ak obsève efè a inhibition nan glikozid total nan Cistanche deserticola sou tirosinaz lè l sèvi avèk pousantaj dopa tirozinaz la. metòd oksidasyon. Tirozinaz se anzim prensipal ki limite pousantaj nan byosentèz melanin po a, epi li se yon konplèks kwiv ak pwoteyin. Li ka hydroxylate tirozin, prensipal materyèl bwit pou pwodiksyon melanin nan kò a, pou pwodwi L-dopa, ak Lè sa a, oksidasyon dopa nan dopaquinone. Dopaquinone sibi yon seri de pwosesis metabolik, reyranje ak polymerizes, epi finalman konbine avèk konbinezon Pwoteyin yo pwodwi yon seri de melanin ki lakòz mawon, kidonk nou te jwenn ke Cistanche deserticola gen yon efè siyifikatif desann-règleman sou tirozinaz.

Klike sou benefis sante nan pwodwi cistanche

Konklizyon:

K36E kontwole sentèz melanin lè li diminye ekspresyon pwoteyin en ki gen ladan p-CREB, p-AKT, p-GSK3, tirozinaz, ak TRP-1, epi li aktive faktè transkripsyon MITF. K36E ka gen potansyèl pou devlope kòm yon ajan blanchi po.

Mo kle:

N-(4-methoxyphenyl) kafeyin, Melanogenesis, Propolis, Mikroftalmi ki asosye ak transkripsyon faktè, cAMP repons eleman-obligatwa pwoteyin, Glycogen synthase kinase 3 beta.

Jan nou koumanse

Melanin jwe yon wòl esansyèl nan anpeche fotodamaj ak fotokarsinogenesis nan po a; sepandan, akimilasyon nòmal nan melanin pwovoke maladi ipèpigmantasyon tankou tach laj ak melasma [1, 2]. Melanogenesis se yon seri de pwosesis konplèks ak anpil faktè k ap patisipe. Fond jenetik se faktè ki pi enpòtan pou pigmantasyon po; plis pase 150 jèn yo te jwenn kontwole byosentèz melanin [3-5].

Anplis, faktè ki pa jenetik, tankou medikaman, chanjman ormon, enflamasyon, aje, ak ekspoze a iradyasyon iltravyolèt (UV), afekte pigmantasyon po [4, 5]. Melanogenesis reglemante pa divès kalite pwoteyin ak anzim ki gen ladan tirozinaz, faktè transkripsyon ki asosye ak mikroftalmi (MITF), pwoteyin ki gen rapò ak tirozinaz-1 (TRP-1), ak pwoteyin ki gen rapò ak tirozinaz-2 (TRP). -2) ​​[4, 6–8]. UV iradyasyon stimul sekresyon nan òmòn -melanocyte-stimulating (-MSH) nan keratinocytes, ki mare nan melanocortin 1 reseptè a (MC1R) ak katalize konvèsyon adenosine trifosfat nan adenosine monofosfat siklik (cAMP) [9]. cAMP stimul pwoteyin kinaz A (PKA), ak PKA transloke nan nwayo a epi aktive cAMP-repons eleman-obligatwa pwoteyin (CREB) [10, 11]. Phospho-cAMP-repons eleman obligatwa pwoteyin (p-CREB) ogmante ekspresyon MITF pou pwovoke ekspresyon tirozinaz, TRP-1, ak TRP-2. Tirozinaz sibi spirasyon ak aktivasyon atravè mekanis miltip, ki gen ladan lye kòb kwiv mete, glikozilasyon, ak fosforilasyon, sa ki lakòz sentèz melanin [12].

Rechèch sibstansyèl te etidye règleman an nan biosentèz melanin pou devlopman nan ajan hypopigmented. Pou anpeche aktivite tirozinaz ak diminye sentèz melanin, plizyè inibitè tirozinaz ki anpeche ipèpigmantasyon yo te devlope nan swa sentèz oswa izolasyon nan sous natirèl [1, 2, 7, 13]. N-(4-methoxyphenyl) kafeyin (K36E; Fig. 1) se yon analòg nan ester fenetil asid kafeyik, yon eleman aktif nan propoli. Nan etid anvan nou an, yon dérivé kafeyin ekspoze pwopriyete antioksidan, anpeche degradasyon kolagen an po apre ekspoze UVB, ak ankouraje sentèz kolagen an nan fibroblasts po moun ak sourit san cheve [14, 15]. Yon lòt dérivé kafeyin ekspoze aktivite anti-melanogenic pa anpeche aktivite tirozinaz ak ekspresyon [16].

Anplis, dérivés asid kafeyik tankou trans-N-caffeoyl tiramin ak trans-N-dihydro-p-hydroxycinnamoyltyramine inibit aktivite tirosinaz nan melanosit [17]. Kidonk, nou te espekile ke K36E inibit melanogenesis. Nan etid aktyèl la, nou te envestige efè aktivite K36E sou sentèz melanin nan selil B16F0, ki se yon modèl byen etabli pou envestigasyon ajan blanchiman po [18-20]. Anplis de sa, nou te envestige si aktivite anti-melanogenic K36E depann de règleman TRP1, AKT/glycogen synthase kinase 3 beta (GSK3)/CREB, ak MITF.

Metòd

Materyèl ak pwodwi chimik yo

K36E te sentèz ak idantifye pa Pwofesè YuehHsiung Kuo ak yon pite 99.9 pousan [21]. -MSH te achte nan men Merck (Darmstadt, Almay). Arbutin, 3,4-dihydroxy-L-phenylalanine (L-DOPA), DL-dithiothreitol, H-89 dihydrochloride idrat, phenylmethanesulfonyl fliyò, ak L-tirosin te achte nan men Sigma-Aldrich Chemical Co. ( Saint Louis, MO, USA). Serom fetal bovine (FBS), Dulbecco's modifyed Eagle's medium (DMEM), ak trypsin-ethylenediaminetetraacetic acid (EDTA) te achte nan men GIBCO Invitrogen Corporation (NY, USA). Yo te jwenn yon antikò ki rekonèt MITF nan Abcam (Cambridge, MA, USA). Yo te achte antikò ki rekonèt p-CREB ak CREB nan Cell Signaling Technology, Inc. (Danvers, MA, USA). Antikò ki rekonèt fosfo-AKT, AKT, ak fosfo-glikojèn synthase kinase 3 beta (p-GSK3) te jwenn nan GeneTex, Inc. (CA, USA). Antikò ki rekonèt aktin, GSK3, TRP-1, ak tirozinaz yo te jwenn nan Santa Cruz Biotechnology, Inc. (Santa Cruz, CA, USA).

Efè K36E sou anpèchman tirozinaz djondjon

Aktivite tirozinaz djondjon yo te detèmine spectrophotometrically ak modifikasyon minè nan pwosedi ki dekri deja [7, 21-23]. Arbutin (2 mM) te yon kontwòl pozitif. Yo te ajoute echantiyon tès la ak L-tirosin nan salin tanpon fosfat (PBS) nan yon 96-mikroplate byen (Nunc, Denmark), epi yo te ajoute tirozinaz djondjon. Apre enkubasyon, yo te detèmine kantite dopachrome ki pwodui nan melanj reyaksyon an nan dansite optik 492 nm lè l sèvi avèk yon lektè microplate (Tecan, Grodig, Otrich).

Kilti selil yo

Selil B16F0 yo te achte nan Sant Koleksyon ak Rechèch Bioresource nan Taiwan epi yo te kiltive nan DMEM ak 10 pousan FBS ak 100 inite/mL penisilin ak streptomycin nan 37 degre nan 5 pousan CO2.

Tès viabilite selilè

Eksperyans kwasans selil yo te fèt lè l sèvi avèk yon tès 3-(4, 5- dimethylthiazol-2-yl){-2, 5-diphenyltetrazolium bromur (MTT) ak ti modifikasyon nan pwosedi dekri deja [7, 8, 24, 25]. Oksijene idwojèn te itilize kòm kontwòl pozitif. Selil yo te kiltive lannwit lan epi trete ak divès kalite konsantrasyon nan K36E pou 48 èdtan, epi yo te ajoute yon solisyon MTT nan chak pi. Apre enkubasyon, yo te ajoute yon solisyon sodyòm dodecyl sulfat (SDS), ki fonn kristal formazan ki pwodui nan selil yo. Dansite optik la te mezire nan 570 nm lè l sèvi avèk yon lektè microplate (Tecan, Grodig, Otrich).

Kontni melanin selilè

Kontni melanin nan selil B16F0 yo te mezire lè l sèvi avèk yon metòd modifye nan etid anvan yo [7, 8, 23]. Selil B16F0 yo te simen nan 6-plak byen nan yon dansite 7 × 104 selil pou chak pi epi yo te enkube lannwit lan. Selil yo te ekspoze a yon mwayen ki gen -MSH ak K36E pou 48 èdtan. Arbutin (1 mM) se te yon kontwòl pozitif. NaOH (2 N) te ajoute nan chak pi pou lyse selil yo, ki te Lè sa a, santrifuje. Kontni melanin nan supernatant la te mezire nan 405 nm lè l sèvi avèk yon lektè ELISA (Tecan, Grodig, Otrich).

Selilè tès aktivite tirozinaz

Aktivite tirozinaz selil B16F0 apre tretman K36E te mezire ak yon ti modifikasyon nan metòd ki dekri nan etid anvan yo [7, 26, 27]. Selil B16F0 yo te plake nan 24-byen milti-asyèt epi yo te enkube lannwit lan. Selil yo te trete ak divès kalite konsantrasyon nan K36E epi yo te enkube pou yon lòt 48 èdtan. Yo te lave ak PBS ak lysed ak 1 pousan Triton X-100 melanje nan 100 mM PBS (pH 6.8); melanj ki te lakòz yo te jele pandan enkubasyon nan -80 degre pou 15 min ak dekonjle nan tanperati chanm. Apre sa, echantiyon yo te santrifuje. Yon substra ki fèk prepare (15 mM L-DOPA nan yon tanpon fosfat sodyòm 48 mM pH 7.1) te ajoute nan supernatant la ak enkube. Apre sa, absòbe a te mezire nan 405 nm lè l sèvi avèk yon lektè microplate (Tecan, Grodig, Otrich).

Pousantaj aktivite tirozinaz la te kalkile lè l sèvi avèk ekwasyon sa a:

Analiz Western blot

Yo te itilize analiz Western blot pou demontre efè K36E sou ekspresyon pwoteyin ki gen rapò ak melanogenesis nan selil B16F0 jan yo dekri anvan [7, 8, 22, 28, 29]. Selil B16F{{10}} yo te simen nan yon plat 10-cm pou 24 èdtan epi yo te trete ak -MSH pou kont li (gwoup kontwòl) oswa avèk -MSH plis konsantrasyon divès kalite K36E pou 48 èdtan. Lysates yo te santrifuje epi yo te detèmine kontni an pwoteyin lè l sèvi avèk yon reyaktif Bradford (Bio-Rad, Hercules, CA, USA). Ven mikwogram pwoteyin yo te separe sou yon jèl elèktroforèz sodyòm dodecyl sulfat-polyacrylamid gel (SDS-PAGE) ak efase lè l sèvi avèk yon manbràn polyvinylidene difluoride (PVDF) (Hybond ECL, Amersham Pharmacia Biotech Inc., Piscataway, NJ, USA). Blots yo te bloke ak 5 pousan (w/v) lèt ekreme nan Tris-tampon saline ki gen 0.05 pousan Tween 20 ak antikò espesifik: actin (1:1000), AKT (1:5000), p-AKT (1:5000). ), CREB (1:1000), p-CREB (1:1000), GSK3 (1:500), p-GSK3 (1:500), MITF (1:1000), TRP-1 (1: 500), ak tirozinaz (1:200). Manbràn PVDF yo te enkube ak korespondan konjige anti-imunoglobulin G peroksidaz refor (Santa Cruz Biotechnology, Inc.). Pwoteyin iminoreaktif yo te detekte lè l sèvi avèk yon twous Enhanced Chemiluminescence Plus (Fujifilm, LAS4000), ak fòs siyal yo te quantifye lè l sèvi avèk yon pwogram densitometrik (MultiGauge V2.2). Rezilta analiz Western blot te reprezante omwen twa eksperyans endividyèl.

Analiz estatistik

Valè yo te eksprime kòm mwayèn ± devyasyon estanda nan rezilta yo nan omwen twa eksperyans endividyèl yo. Diferans nan efè divès tretman yo te konpare lè l sèvi avèk Tès Elèv la oswa ANOVA ak tès Scheffe a atravè lojisyèl SPSS (vèsyon 12.0). P valè<0.05 indicated significance. 

Rezilta yo

Anpèchman aktivite tirozinaz djondjon pa K36E

K36E nan 1000 μM redwi siyifikativman aktivite tirozinaz djondjon. Efè inhibiteur tirozinaz djondjon nan 500, 750, ak 1000 μM te 6.8 pousan ± 1.6 pousan, 14.0 pousan ± 7.1 pousan, ak 36.8 pousan ± 1.1 pousan, respektivman. Anplis de sa, pousantaj anpèchman 2 mM arbutin sou aktivite tirozinaz djondjon te 65.3 pousan ± 2.5 pousan.

Efè K36E sou viabilite selil B16F0 yo

Viabilite selil apre tretman ak 1, 1.5, 2, 2.5, 4, 5, 10, 25, ak 50 μM K36E te 92.7 pousan ± 2.0 pousan, 91.7 pousan ± 2.1 pousan, 90.9 pousan ± 2.2 pousan, 87.8 pousan ± 4.2 pousan, 72.8 pousan ± 1.0 pousan, 68.5 pousan ± 2.4 pousan, 54.6 pousan ± 1.6 pousan, ± 38.3 pousan 0.8 pousan, ak 28.4 pousan ± 2.3 pousan, respektivman. Oksijene idwojèn te yon kontwòl pozitif, ak viabilite selil 0.1 μM H2O2 te 48.9 pousan ± 7.5 pousan apre tretman 48 h. Viabilite selil la te akseptab pou devlope materyèl pou pwodui kosmetik. Dapre Òganizasyon Entènasyonal pou Normalisation (ISO) 10993–5:2009 (Evalyasyon Byolojik nan Aparèy Medikal), yo konsidere viabilite selil ki pi wo pase 80 pousan kòm noncytotoxicity. Rezilta yo endike ke tretman ak 0.5 a 2.5 μM K36E pou 48 èdtan pa te gen okenn efè sitotoksik sou selil B16F0 yo.

Anpèchman byosentèz melanin pa K36E nan selil B16F0

Figi 2a montre efè K36E sou biosentèz melanin apre eksitasyon 0.5 μM -MSH nan selil B16F0 yo. Kontni melanin anndan selil la ogmante a 124.6 pousan ± 13.{{10}} pousan apre tretman ak -MSH. K36E nan dòz ki pi wo pase 1.0 μM siyifikativman redwi kontni an melanin, ki diminye a 97.5 pousan ± 1.9 pousan, 96.6 pousan ± 3.3 pousan, 94.4 pousan ± 2.8 pousan, ak 90.8 pousan ± 1.4 pousan (Fig. 2a). Efè K36E sou biosentèz melanin te sanble ak 1 mM arbutin.

Anpèchman aktivite tirozinaz pa K36E nan selil B16F0

K36E siyifikativman anpeche aktivite tirozinaz nan selil B16F 0 apre tretman pou 48 èdtan (figi 2b). Nivo aktivite tirozinaz yo te 83.2 pousan ± 2.1 pousan, 76.3 pousan ± 2.9 pousan, 72.0 pousan ± 5.0 pousan, ak 67.2 pousan ± 4.4 pousan apre tretman ak 1, 1.5, 2. , ak 2.5 μM K36E, respektivman, pou 48 h. Rezilta yo endike ke K36E anpeche kontni melanin nan selil B16F0 atravè anpèchman aktivite tirozinaz la.

Efè K36E sou pwoteyin ki gen rapò ak melanogenesis

K36E desann espresyon tirozinaz ak TRP-1

Pou egzamine si anpèchman melanogenesis pa K36E te gen rapò ak nivo ekspresyon pwoteyin ki gen rapò ak melanogenesis, tankou tirozinaz ak TRP-1, selil B16F0 yo te enkube ak -MSH (0. 5 μM) ak divès kalite konsantrasyon nan K36E (1-2.5 μM) pou 48 h. Malgre ke ekspresyon tirozinaz ekspoze yon ogmantasyon 2.7-pliye konpare ak sa ki nan kontwòl la apre tretman ak -MSH, K36E siyifikativman siprime ekspresyon tirozinaz nan yon fason ki depann de dòz (figi 3). Anplis de sa, K36E siyifikativman redwi ekspresyon TRP -1 ki ankouraje -MSH nan dòz ki pi wo pase 1.5 μM (figi 3).

K36E downregulated ekspresyon MITF

Ekspresyon MITF nan selil B16F0 te montre yon ogmantasyon 1.5-pliye konpare ak sa ki nan kontwòl la apre tretman ak -MSH (Fig. 4). K36E trete pou 4 h depandans dòz inibit ekspresyon MITF ak siyifikativman downregulated ekspresyon MITF nan B16F 0 selil yo nan yon konsantrasyon nan 1 μM (Fig. 4).

K36E downregulated ekspresyon p-CREB

Ekspresyon p-CREB nan selil B16F0 te montre yon ogmantasyon 1.4-pliye konpare ak sa ki nan kontwòl apre tretman -MSH (Fig. 5). K36E siyifikativman anpeche ekspresyon p-CREB nan konsantrasyon ki pi wo pase 1.5 μM epi apre sa downregulated ekspresyon MITF nan selil B16F0 yo.

Efè K36E sou chemen siyal melanogenesis la

Melanogenesis K36E-inhibit te asosye ak règleman PKA

Pou detèmine si melanogenesis K36E-inhibit te asosye ak PKA, selil B16F0 yo te enkube ak 10 μM H{-89, yon inhibiteur PKA [30], ak 2.5 μM K36E pou 48 èdtan. . Tretman ak K36E ak H-89 separeman te lakòz yon diminisyon 1.2- ak 1.5-pliye nan ekspresyon tirozinaz -MSH-induit, respektivman, konpare ak sa ki nan kontwòl la (Fig. 6). ). Anplis de sa, kotreatman ak K36E ak H-89 lakòz yon diminisyon 0.9-pliye nan ekspresyon tirozinaz konpare ak sa ki nan kontwòl la. Anplis de sa, ekspresyon tirozinaz apre tretman an te siyifikativman pi ba pase tretman K36E oswa H-89 separeman. Rezilta yo endike ke chemen PKA a ka patisipe nan efè anti-melanogenic K36E.

K36E anpeche melanogenesis pa upregulating ekspresyon p-AKT ak p-GSK3

Jan yo montre nan Fig. 7, tretman ak 2.5 μM K36E pou 1 h ansibleman ogmante ekspresyon p-AKT ak p-GSK3. Nivo p-AKT rive nan yon maksimòm (yon ogmantasyon 1.{{10}}pliye konpare ak sa ki nan kontwòl la) apre 1 èdtan ak yon ogmantasyon 1.{5-pliye apre 2 èdtan; nivo p-GSK3 te montre tou yon ogmantasyon 1.2-pliye apre 1 èdtan konpare ak sa ki nan kontwòl la, ki sijere ke K36E siprime melanogenesis nan selil B16F0 pa aktive AKT ak GSK3 siyal chemen, sa ki lakòz anpèchman nan. Ekspresyon MITF ak aktivite transkripsyon epi, kidonk, anpeche ekspresyon jèn tirozinaz la.

Diskisyon

Tirozinaz ak aktivite li yo jwe yon gwo wòl nan kontwole melanogenesis [31-33]. Ajan oswa pwodwi ki anpeche aktivite tirozinaz yo te itilize nan pwodui kosmetik blanchi po ak pwodui kosmetik [1, 2, 34]. Quercetin ak asid vanilik anpeche -MSH pwovoke ekspresyon MITF, tirozinaz, TRP-1, ak TRP-2, sa ki lakòz anpèchman melanogenesis [35, 36]. Dérivés resveratrol yo anpeche sentèz melanin atravè anpèchman ekspresyon anzim melanojèn tankou tirozinaz ak TRP -1 [37]. Rezilta nou yo endike ke K36E inibit aktivite tirozinaz ak ekspresyon pwoteyin -MSH-induit, kidonk siprime biosentèz melanin. Anplis de sa, K36E anpeche pwoteyin ki gen rapò ak melanogenesis tankou TRP -1. TRP -1 konsidere kòm jwe yon wòl enpòtan tou de kòm yon pwoteyin estriktirèl ak anzim katalitik nan chemen an eumelanic nan melanosom [38, 39]. Rezilta yo mansyone pi wo a sijere ke diminisyon nan melanogenesis nan K36E ta ka reyalize nan anpèchman li yo nan chemen an siyal ki kontwole ekspresyon tirozinaz ak aktivite.

MITF se faktè transkripsyon ki pi kritik ki kontwole melanogenesis pa pwovoke ekspresyon jèn melanojèn [5, 40]. Aktivasyon MITF kontwole ekspresyon tirosinaz ak TRP -1, epi kidonk li ogmante sentèz melanin. Nan etid sa a, K36E siprime melanogenesis pa anpeche -MSH pwovoke ekspresyon MITF. Chemen cAMP la jwe yon wòl enpòtan nan melanogenesis -MSH-induit.

Nan yon etid anvan, ajan kAMP-elevasyon anpeche PI3K / AKT. GSK3 ka ankouraje lyezon MITF nan sekans sib li yo pou ankouraje ekspresyon anzim melanojèn ak fasilite pwodiksyon melanin [41]. cAMP anpeche fosforilasyon PI3K ak AKT ak aktivite, epi redwi fosforilasyon GSK3 pou ankouraje aktivite li yo. Aktivasyon transdiksyon siyal cAMP rezilta nan lyezon MITF ak pwomotè tirozinaz la, kidonk ki mennen nan eksitasyon melanogenesis [41, 42]. Aktivasyon nan chemen an AKT siprime sentèz melanin pa diminye anzim melanogenic [41]. Yo te rapòte ke Cordycepin anpéché -MSH ak IBMX-pwovoke biosentèz melanin pa anpeche anzim ki gen rapò ak sentèz melanin, tankou tirozinaz, TRP-1, ak TRP{-2, siprime CREB ak MITF aktivite, ak aktive PI3K la. /AKT chemen nan selil melanom B16F10 [43]. Nan rezilta nou yo, K36E anpeche fosforilasyon CREB. K36E elve ekspresyon p-AKT ak p-GSK3, petèt diminye transkripsyon MITF pou siprime ekspresyon jèn tirozinaz. Etid anvan yo te rapòte ke aktivasyon an nan AKT inibit melanogenesis nan melanosit [33, 44]. Kidonk, K36E anpeche -MSH pwovoke ipèrpigmantasyon ki te koze pa aktivasyon AKT ak GSK3, epi imedyatman downregulated MITF, CREB, tirozinaz, ak TRP -1 pwodiksyon (Fig. 8).

Ekspozisyon UV stimul sekresyon -MSH nan keratinosit. -MSH mare nan MC1R nan melanosit, sa ki lakòz pwodiksyon cAMP ak aktivasyon PKA [10]. Transdiksyon siyal ki gen rapò ak chemen cAMP la, ki gen ladan aktivasyon faktè transkripsyon PKA ak CREB, mennen nan regilasyon MITF [45]. Answit PKA fosforil CREB pou aktive ekspresyon jèn MITF [46, 47]. Hydroxamate asid nikotinik te anpeche sentèz melanin atravè aktivasyon chemen siyal MEK/ERK ak AKT/GSK3 nan selil melanom B16F10 [48]. Poud konsantrasyon grenad sèk egzèse efè blanchiman pa efektivman diminye aktivite tirozinaz ak pwodiksyon melanin nan selil B16F10 atravè inaktivasyon p38 ak PKA / CREB siyal chemen nan selil B16F10 [49]. cAMP-induit PI3K anpèchman diminye fosforilasyon AKT ak aktivasyon li yo. Nan etid la prezan, ekspresyon MITF-MSH-induit te inibit pa K36E ak H-89, ki se yon inibitè PKA. Anplis de sa, cotreatment ak K36E ak H-89 siyifikativman atenue rediksyon K36E-induit nan sentèz melanin. Rezilta nou yo sijere ke aktivite anti-melanogenic K36E asosye ak chemen PKA a e konsa mennen nan downregulation MITF (Fig. 8).

Konklizyon

K36E redwi ekspresyon MITF pa anpeche fosforilasyon CREB. Anplis de sa, K36E inibi ekspresyon MITF pa upregulating fosforilasyon nan AKT ak GSK3, ki imedyatman inibit ekspresyon de tirozinaz ak TRP -1 epi kidonk redwi biosentèz melanin. Melanosit nòmal ak etid in vivo yo ka aplike pou plis envestigasyon sou efè K36E sou melanogenesis. An konklizyon, K36E ka yon kandida pou règleman melanogenesis e li gen anpil chans pou gen plizyè aplikasyon pou po blanchiman pwodwi nan fiti.

Rekonesans

Rechèch sa a te sipòte pa sibvansyon Ministè Syans ak Teknoloji (NSC100-2320-B-039-002-MY3; MOST104-2320-B{-039-006), CMU anba Aim for Top University Plan. nan Ministè Edikasyon, Taiwan, ak Taiwan Ministè Sante ak Byennèt Klinik Esè ak Sant Rechèch Ekselans (MOHW105-TDU-B{-212-133019), ak Lachin Medical University (CMU102- AZI-18).

Disponibilite done ak materyèl

Ansanm done ki sipòte konklizyon atik sa a yo enkli nan atik la.

Kontribisyon otè yo

YHK, CYL, ak HMC te responsab pou konsepsyon etid la ak pou bay finansman rechèch la. PYW, CSW, ak PJS te fèt eksperyans yo epi yo te bay konsèy teknik. CCC ak HMC te fè operasyon eksperimantal la. YHK, YHK, CYL, ak HMC te ekri papye a. Tout otè li epi apwouve maniskri final la.

Enterè konpetisyon

Otè yo deklare ke yo pa gen okenn enterè konpetisyon.

Konsantman pou piblikasyon

Pa aplikab.

Apwobasyon etik ak konsantman pou patisipe

Etid sa a te itilize liy selil ki disponib nan komès; konsa, apwobasyon etik pa te obligatwa.

Detay otè

1 Depatman Syans famasetik Chinwa ak Resous Medsin Chinwa, Inivèsite Medikal Lachin, Taichung 404, Taiwan. 2 Depatman Biotechnologie, Inivèsite Azi, Taichung 413, Taiwan. 3 Depatman Cosmeceutics, Lachin Medical University, Taichung 404, Taiwan. 4 Depatman dèrmatoloji, Lachin Medical University Hospital, Taichung 404, Taiwan. 5 Lekòl Medsin, Lachin Medical University, Taichung 404, Taiwan. 6 National Museum of Marine Biology and Aquarium, Pingtung 944, Taiwan.

Referans

1. Solano F, Briganti S, Picardo M, Ghanem G. Ajan Hypopigmenting: yon revizyon mete ajou sou aspè byolojik, chimik ak klinik. Pigman selil Res. 2006;19(6):550–71.

2. Chiang HM, Chen HW, Huang YH, Chan SY, Chen CC, Wu WC, Wen KC. Melanogenesis ak ajan ipopigmantasyon natirèl. 2012.

3. Costin GE, Tande VJ. Pigmantasyon po moun: melanosit modile koulè po an repons a estrès. FASEB J. 2007;21(4):976–94.

4. Kondo T, Tande VJ. Mizajou sou règleman an nan fonksyon melanosit mamifè ak pigmantasyon po. Ekspè Rev Dermatol. 2011;6(1):97–108.

5. Yamaguchi Y, Tande VJ. Faktè fizyolojik ki kontwole pigmantasyon po. Biofaktè. 2009;35(2):193–9.

6. Tande VJ. Milestones nan melanosit/melanogenesis. J Invest Dermatol. 2011;131(E1):E1.

7. Chiang HM, Chien YC, Wu CH, Kuo YH, Wu WC, Pan YY, Su YH, Wen KC. Ekstrè idroalkolik nan Rhodiola rosea L. (Crassulaceae) ak idrolysat li yo anpeche melanogenesis nan selil B16F0 pa reglemante chemen CREB/MITF/tirosinaz la. Food Chem Toxicol. 2014;65:129–39.

8. Wen KC, Chang CS, Chien YC, Wang HW, Wu WC, Wu CS, Chiang HM. Tirosol ak analogue li yo anpeche melanogenesis alfa-melanocyte-estimile òmòn-induit. Int J Mol Sci. 2013;14(12):23420–40.

9. Cui R, Widlund HR, Feige E, Lin JY, Wilensky DL, Igras VE, D'Orazio J, Fung CY, Schanbacher CF, Granter SR, et al. Wòl santral p53 nan repons bronze ak ipèpigmantasyon patolojik. Selil. 2007;128(5):853–64.

10. Hocker TL, Singh MK, Tsao H. Jenetik Melanoma ak apwòch terapetik nan 21yèm syèk la: deplase soti nan plaj la nan kabann lan. J Invest Dermatol. 2008;128(11):2575–95.

11. Drira R, Sakamoto K. Isosakuranetin, yon flavonoid 4′-O-methylated, stimul melanogenesis nan selil B16BL6 melanom murin. Lavi Sci. 2015;143:43–9.

12. Chou TH, Ding HY, Lin RJ, Liang JY, Liang CH. Anpèchman melanogenesis ak oksidasyon pa asid protocatechuic soti nan Origanum vulgare (origan). J Nat Prod. 2010;73(11):1767–74.

13. Yeom GG, Min S, Kim SY. 2,3,5,6-Tetramethylpyrazine nan Ephedra sinica kontwole melanogenesis ak enflamasyon nan yon UVA-induit melanom / keratinocytes ko-kilti sistèm. Int Immunopharmacol. 2014;18(2):262–9.

14. Chiang HM, Chen CW, Lin TY, Kuo YH. N-phenethyl kafeyin ak fotodamage: Pwoteje po pa anpeche degradasyon prokolagen tip I ak eksitan sentèz kolagen an. Food Chem Toxicol. 2014;72C:154–61.

15. Kuo YH, Chen CW, Chu Y, Lin P, Chiang HM. Etid In Vitro ak In Vivo sou aksyon pwoteksyon N-Phenethyl Kaffeamide kont Photodamage nan po. PLoS Youn. 2015;10(9):e0136777.

16. Shimoda H, Shan SJ, Tanaka J, Maoka T. beta-Cryptoxanthin supprime UVB-induit melanogenesis nan sourit la: patisipasyon nan anpèchman nan prostaglandin E2 ak melanosit-stimulan chemen òmòn. J Pharm Pharmacol. 2012;64(8):1165–76.

17. Okombi S, Rival D, Bonnet S, Mariotte AM, Perrier E, Boumendjel A. Analogues de N-hydroxycinnamoylphenalkylamides kòm inhibiteurs de moun melanocyte-tyrosinase. Bioorg Med Chem Lett. 2006;16(8):2252–5.

18. Bellei B, Pitisci A, Izzo E, Picardo M. Anpèchman melanogenesis pa klas konpoze pyridinyl imidazole: posib patisipasyon Wnt/beta-catenin siyal chemen an. PLoS Youn. 2012;7(3):e33021.

19. Wang L, Lu AP, Yu ZL, Wong RN, Bian ZX, Kwok HH, Yue PY, Zhou LM, Chen H, Xu M, et al. Efè melanogenesis-inhibitory ak fòmilasyon perkutane ginsenoside Rb1. AAPS PharmSciTech. 2014;15(5):1252–62.

20. Suwannalert P, Kariya R, Suzu I, Okada S. Efè Salacia reticulata sou oksidan anti-selilè ak anpèchman melanogenesis nan alfa-MSH-stimule ak UV iradyasyon B16 selil melanom. Nat Prod Commun. 2014;9(4):551–4.

21. Chou YC, Sheu JR, Chung CL, Chen CY, Lin FL, Hsu MJ, Kuo YH, Hsiao G. Anpèchman nikleyè sible nan NF-kappaB sou pwodiksyon MMP-9 pa N-2- ( 4-bromofenil) etil kafeyin nan selil monositik imen yo. Chem Biol Interact. 2010;184(3):403–12.

22. Chiang HM, Lin JW, Hsiao PL, Tsai SY, Wen KC. Hydrolysates nan plant Citrus estimile melanogenesis pwoteje kont UV-pwovoke domaj po. Phytother Res. 2011;25(4):569–76.

23. Chiang HM, Ko Y, Shih mwen, Wen K. Devlopman gato diven kòm yon ajan blanchi po ak Humectant. J Manje Dwòg Anal. 2011;19(2):223–9.

24. Chiang HM, Chen HC, Lin TJ, Shih IC, Wen KC. Michelia alba ekstrè atenue ekspresyon UVB-induit nan metaloproteinas matris atravè chemen an kinaz MAP nan fibroblasts po imen. Food Chem Toxicol. 2012;50(12):4260–9.

25. Salucci S, Burattini S, Battistelli M, Buontempo F, Canonico B, Martelli AM, Papa S, Falcieri E. Tyrosol anpeche apoptoz nan keratinosit iradyasyon. J Dermatol Sci. 2015;80(1):61–8.

26. Zhang Y, Helke KL, Coelho SG, Valencia JC, Hearing VJ, Sun S, Liu B, Li Z. Wòl esansyèl nan molekilè chaperone gp96 nan reglemante melanogenesis. Pigman Cell Melanoma Res. 2014;27(1):82–9.

27. Park H, Song KH, Jung PM, Kim JE, Ro H, Kim MY, Ma JY. Efè inhibition apigenin soti nan Fructus Arctii ekstrè sou sentèz Melanin atravè represyon nan ekspresyon tirozinaz. Evid Baze Konpleman Altènatif Med: eCAM. 2013; 2013:965312.

28. Chiang HM, Lin TJ, Chiu CY, Chang CW, Hsu KC, Fan PC, Wen KC. Ekstrè Coffea arabica ak elektè li yo anpeche fotoaging pa siprime ekspresyon MMPs ak chemen kinaz MAP. Food Chem Toxicol. 2011;49(1):309–18.

29. Chiang HM, Chiu HH, Liao ST, Chen YT, Chang HC, Wen KC. Isoflavonoid-Rich Flemingia macrophylla èkstre atenue domaj UVB-pwovoke po pa Scavenging espès oksijèn reyaktif ak anpeche MAP Kinase ak ekspresyon MMP. Evid Based Complement Alternat Med. 2013;2013:12.

30. Bertolotto C, Bille K, Ortonne JP, Ballotti R. Règleman ekspresyon jèn tirozinaz pa cAMP nan selil melanom B16 enplike de motif CATGTG ki antoure bwat TATA a: enplikasyon pwodwi jèn mikroftalmi an. J Cell Biol. 1996;134(3):747–55.

31. Korner A, Pawelek J. Tirozinaz mamifè katalize twa reyaksyon nan byosentèz melanin. Syans (New York, NY). 1982;217(4565):1163–5.

32. Tripathi RK, Hearing VJ, Urabe K, Aroca P, Spritz RA. Kat jeyografik mutasyon nan aktivite katalitik nan tirozinaz imen. J Biol Chem. 1992;267(33):23707–12.

33. Slominski A, Tobin DJ, Shibahara S, Wortsman J. Melanin pigmantasyon nan po mamifè ak règleman ormon li yo. Physiol Rev 2004;84(4):1155–228.

34. Fu YT, Lee CW, Ko HH, Yen FL. Ekstrè nan Artocarpus communis diminye melanogenesis alfa-melanocyte-estimile òmòn-induit atravè aktivasyon nan chemen siyal ERK ak JNK. ScientificWorldJournal. 2014; 2014:724314.

35. Chou TH, Ding HY, Hung WJ, Liang CH. Karakteristik antioksidan ak anpèchman nan alfa-melanocyte-estimile òmòn-ankouraje melanogenesis nan vanilin ak asid vanilik soti nan Origanum vulgare. Ekspè Dermatol. 2010;19(8):742–50.

36. Kumar KJ, Yang JC, Chu FH, Chang ST, Wang SY. Lucidone, yon inibitè melanin roman ki soti nan fwi Lindera erythroderma Makino. Phytother Res. 2010; 24(8):1158–65.

37. Liu Q, Kim C, Jo YH, Kim SB, Hwang BY, Lee MK. Sentèz ak Evalyasyon Byolojik nan Dérivés Resveratrol kòm Inibitè Melanogenesis. Molekil (Basel, Swis). 2015;20(9):16933–45.

38. Jimenez-Cervantes C, Solano F, Kobayashi T, Urabe K, Tande VJ, Lozano JA, Garcia-Borron JC. Yon nouvo fonksyon anzimatik nan chemen melanogenic la. 5,6-dihydroxy indole-2-aktivite oksidaz asid carboxylic nan pwoteyin ki gen rapò ak tirozinaz-1 (TRP1). J Biol Chem. 1994;269(27):17993–8000.

39. Kobayashi T, Urabe K, Winder A, Jimenez-Cervantes C, Imokawa G, Brewington T, Solano F, Garcia-Borron JC, Tande VJ. Pwoteyin 1 ki gen rapò ak tirozinaz (TRP1) fonksyone kòm yon oksidaz DHICA nan biosentèz melanin. EMBO J. 1994;13(24):5818–25.

40. Gaggioli C, Busca R, Abbe P, Ortonne JP, Ballotti R. Faktè transkripsyon ki asosye ak mikroftalmi (MITF) obligatwa men li pa ase pou pwovoke ekspresyon jèn melanojèn yo. Pigman selil Res. 2003;16(4):374–82.

41. Khaled M, Larribere L, Bille K, Aberdam E, Ortonne JP, Ballotti R, Bertolotto C. Glycogen synthase kinase 3beta se aktive pa cAMP epi li jwe yon wòl aktif nan règleman an nan melanogenesis. J Biol Chem. 2002;277(37):33690–7.

42. Khaled M, Larribere L, Bille K, Ortonne JP, Ballotti R, Bertolotto C. Faktè transkripsyon ki asosye ak mikroftalmi se yon sib chemen kinaz fosfatidilinositol-3-. J Invest Dermatol. 2003;121(4):831–6.

43. Shao YY, Chen CC, Wang HY, Chiu HL, Hseu TH, Kuo YH. Konstitiyan chimik nan kanfor Antrodia submerged nan bouyon antye. Nat Prod Res. 2008;22(13):1151–7.

44. Oka M, Nagai H, Ando H, Fukunaga M, Matsumura M, Araki K, Ogawa W, Miki T, Sakaue M, Tsukamoto K, et al. Regilasyon melanogenesis atravè chemen fosfatidilinositol 3-kinase-Akt nan selil melanom G361 imen yo. J Invest Dermatol. 2000;115(4):699–703.

45. Busca R, Ballotti R. Cyclic AMP yon mesaje kle nan règleman an nan pigmantasyon po. Pigman selil Res. 2000;13(2):60–9.

46. ​​Shibahara S, Takeda K, Yasumoto K, Udono T, Watanabe K, Saito H, Takahashi K. Faktè transkripsyon ki asosye ak mikroftalmi (MITF): miltiplisite nan estrikti, fonksyon, ak règleman. J Invest Dermatol Symp Proc/Soc Invest Dermatol, Inc [ak] Eur Soc Dermatol Res. 2001;6(1):99–104.

47. Lee JY, Choi HJ, Chung TW, Kim CH, Jeong HS, Ha KT. Kafeyik Asid Phenethyl Ester Inhibit Alpha-Melanocyte Stimulation òmòn-pwovoke Melanin sentèz nan Siprime Aktivite Transactivation nan Faktè Transcription MicrophthalmiaAssociated. J Nat Prod. 2013;76(8):1399–405.

48. Huang GJ, Huang SS, Lin SS, Shao YY, Chen CC, Hou WC, Kuo YH. Efè analgesic ak mekanis anti-enflamasyon nan ergostatrien-3beta-ol soti nan kanfor Antrodia submerged bouyon antye nan sourit. J Agric Food Chem. 2010;58(12):7445–52.

49. Tsai TC, Tung YT, Kuo YH, Liao JW, Tsai HC, Chong KY, Chen HL, Chen CM. Efè anti-enflamatwa nan kanfor Antrodia, yon medikaman èrbal, nan yon modèl ischemi po sourit. J Etnopharmacol. 2015;159:113–21.

For more information:1950477648nn@gmail.com