Pati 1 Doxorubicin paradoksal amelyore enflamasyon timè-pwovoke nan sourit jèn
Mar 11, 2022
Kontakte: ali.ma@wecistanche.com
Ibrahim Y. Abdelgawad et al
Cistanche tubulosa anpeche maladi ren, klike la a pou jwenn lapwodwi ak Cistanche herba
Résumé:
Doxorubicin(DOX) se youn nan ajan chimyoterapi ki pi lajman itilize nan nkoloji pedyatrik. DOX lakòz yon repons enflamatwa nan ògàn miltip, ki kontribye nan efè negatif DOX-induit. Kansè tèt li lakòz enflamasyon ki mennen nan plizyè kondisyon patoloji. Etid aktyèl la envestige repons enflamatwa DOX aktimèlè l sèvi avèk yon EL4-lenfom, iminokonpetan, modèl sourit jivenil. Sourit gason C57BL/6N ki gen kat semèn yo te enjekte anba lar ak selil lenfom EL4 (5 × 104 selil / sourit) nan rejyon flan an, pandan y aptimè-gratis sourit yo te sou fòm piki ak machin. Twa jou apre enplantasyon timè, tou de sourit ki pa gen timè ak sourit ki gen timè yo te enjekte nan peritoneal swa DOX (4 mg / kg / semèn) oswa saline pou 3 semèn. Yon semèn apre dènye piki DOX la, yo te retire sourit yo epi kè yo, fwa yo,ren, ak serom yo te rekòlte. Ekspresyon jèn ak konsantrasyon serik makè enflamatwa yo te mezire lè l sèvi avèk PCR an tan reyèl ak ELISA, respektivman. Tretman DOX siyifikativman siprimetimèkwasans nan sourit ki gen timè epi ki te lakòz gwo atrofi kadyak nan sourit ki pa gen timè ak ki gen timè. Timè EL4 te pwovoke yon gwo repons enflamatwa nan kè, fwa, akren. Enpresyonan, tretman DOX te amelyore enflamasyon timè-induit paradoks nan efè DOX nan sourit san timè, demontre yon efè lajman divergent nan DOXtreatment nan timè-gratis kont sourit ki gen timè.
Mo kle:doxorubicin; timè; enflamasyon
1. Entwodiksyon
Doxorubicin (DOX), ke yo rele tou Adriamycin, se youn nan ajan chimyoterapi ki pi lajman itilize nan nkoloji klinik pedyatrik. Malgre efikasite li nan yon pakèt kansè ki gen ladan lenfom, lesemi, ak lòt kansè pedyatrik, itilite klinik DOX limite akòz toksisite miltip ògàn li yo. Anplis de kadyotoksisite ki make li yo [1], yo te demontre DOX lakòz nefrotoksisite [2-5] ak epatotoksisite [6]. Prèske 50 pousan pasyan kansè timoun yo resevwa DOX kòm yon pati nan pwotokòl tretman yo [7]. Akòz tretman kansè efikas, ki gen ladan DOX, 5-pousantaj siviv timoun yo dyagnostike ak kansè nan ane a te ogmante soti nan mwens pase 60 pousan nan ane 1970 yo a plis pase 80 pousan kounye a [8,9]. Sa a mennen nan yon gwo popilasyon sivivan kansè timoun yo (CCS), yo estime anviwon 400,000. Malerezman, CCS yo gen gwo risk pou yo devlope efè negatif alontèm akòz tretman kansè ak / oswa kansè nan tèt li.
Yo montre DOX deklanche enflamasyon sistemik [10-12] ak repons enflamatwa nan plizyè ògàn ki gen ladan kè a [13],ren[14], ak fwa [15]. Yo te montre repons enflamatwa sa a ankouraje efè negatif DOX-induit [16,17]. Majorite etid sa yo ki rapòte DOX-induit enflamasyon yo te fèt nantimè-Modèl bèt gratis ki pa imite senaryo klinik kote pasyan kansè timoun yo resevwa tretman DOX apre dyagnostik ak kansè. Yo te montre kansè per se tou lakòz enflamasyon kontribye nan plizyè kondisyon patolojik ki ka agrave toksisite DOX-induit [18,19]. Se poutèt sa, gen yon bezwen kritik etabli modèl bèt klinik ki enpòtan pou mennen ankèt sou mekanis DOX-induit toksisite miltip ògàn nan jèn,timè-bearing sourit yo etidye entèraksyon ki genyen ant tretman DOX ak kansè nan tèt li lakòz toksisite sa yo.
Nan etid aktyèl la, nou te envestige repons enflamatwa DOX ak timè a nan yon lenfom EL4-senjenik ki enpòtan pou klinik, imunokonpetan, modèl sourit jivenil. Modèl sa a byen etabli nan rechèch kansè [20] e li enpòtan klinikman pou pasyan kansè pedyatrik yo paske lenfom se youn nan kalite kansè pedyatrik ki pi komen [21]. Itilizasyon sourit syngeneic enpòtan pou etidye repons enflamatwa a tou de DOX ak timè akòz wòl enpòtan sistèm iminitè a nan patojèn enflamasyon [22]. Laj sourit yo te 5 semèn sou DOX administrasyon, ki ekivalan a laj adolesans 10-12 ane nan imen [23]. Anplis de sa, dòz DOX yo administre yo se klinikman ki gen rapò ak dòz pasyan pedyat kansè yo resevwa [24]. Nou te premye detèmine efè DOX sou fonksyon kadyak nan sourit ki pa gen timè ak sourit ki gen timè, depi DOX-induit kadyotoksisite konsidere kòm efè negatif ki pi enpòtan nan klinik DOX, pami lòt toksisite ògàn miltip. Apre sa, nou te detèmine efè DOX, timè a, ak konbinezon yo sou plizyè makè enflamatwa nan kè, fwa, akrennplis de makè serom nan enflamasyon sistemik. Nou te jwenn ke prezans nan timè EL4 a te pwovoke yon repons enflamatwa fò nan ògàn miltip. Enpresyonan, tretman DOX te amelyore enflamasyon timè-induit paradoks nan efè a deja rapòte nan DOX nan sourit san timè.
2. Rezilta yo
2.1. Efè DOX sou pwa kò ak kwasans timè
Etid aktyèl la te etabli nan sourit jivenil yo imite senaryo klinik la nan pasyan kansè pedyat jan sa dekri nan Figi 1A. Pa gen okenn morbidite oswa mòtalite enpòtan yo obsève nan swa sourit ki pa gen timè oswa ki gen timè apre ekspoze a DOX (4 mg / kg / semèn pou 3 semèn), ki an akò ak etid anvan nou an lè l sèvi avèk menm dòz la [25]. Sepandan, ekspoze jivenil nan DOX te lakòz yon ogmantasyon pwa kò siyifikativman redwi konpare ak sourit ki trete saline (Figi 1B). Pou evalye efè antikansè DOX nan modèl lenfom EL4 sa a, nou te mezire pwa timè yo apre necropsy sourit yo. Administrasyon DOX kwonik nan sourit ki gen timè yo te siyifikativman anpeche kwasans timè EL4, sa ki montre efè antikansè rejim dòz sa a nan DOX (Figi 1C).
2.2. Efè administrasyon DOX sou fonksyon kadyak ak mòfometri nan sourit ki pa gen timè ak ki gen timè.
DOX te lakòz atrofi kadyak jan yo demontre pa yon diminisyon enpòtan nan pwa kè a nan longè tibya (HW/TL) (Figi 1D). Remakab, atrofi kadyak ki te koze pa DOX te ogmante nan sourit ki gen timè (Figi 1D). Efè DOX, timè, ak konbinezon tou de sou fonksyon kadyak ak mòfoloji yo te evalye lè l sèvi avèk ekokardyografi transthoracic. Imaj reprezantan M-Mode nan chak gwoup yo parèt nan Figi 2A. Ni DOX ni timè a pa lakòz chanjman enpòtan nan fraksyon ekspilsyon (Figi 2B), pwodiksyon kadyak (Figi 2C), mantèg fraksyon (Figi 2D), mas vantrikulè gòch (LV) (Figi 2E), epesè mi dèyè LV nan dyastole (LVPW '). d) (Figi 2F), oswa LV epesè mi dèyè nan sistòl (LVPW a) (Figi 2G).
2.3. Efè administrasyon DOX sou ekspresyon jèn makè enflamatwa nan kè sourit ki bay timè ak san timè.
Kè yo te rekòlte nan tou de sourit C57BL/6N ki pa gen timè ak sourit EL4 ki gen timè ki gen timè yon semèn apre administrasyon 4 mg/kg/semèn DOX oswa volim ekivalan saline esteril pou 3 semèn (n=8 pou chak semèn). gwoup). Apre ekstraksyon RNA total, ekspresyon mRNA kadyak makè enflamatwa interleukin-1 alfa (IL{-1), interleukin-1 beta (IL{-1), interleukin{{12} } (IL-6), faktè necrosis timè-alfa (TNF-), chemokin enflamatwa monosit chemoattractant pwoteyin-1 (Mcp{-1), ak CX C motif chemokines (Cxcl1, Cxcl9, ak Cxcl10) yo te detèmine pa PCR an tan reyèl. Ekspresyon jèn plizyè makè enflamatwa nan kè a te ogmante siyifikativman nan sourit ki gen timè yo konpare ak sourit ki pa gen timè, ki gen ladan sitokin pro-enflamatwa IL-1 (Figi 3A), IL-1 ( Figi 3B), IL -6 (Figi 3C), ak TNF- (Figi 3D) ak chemokin enflamatwa Mcp -1 (Figi 3E), Cxcl1 (Figi 3F), ak Cxcl10 (Figi 3H). Pandan ke administrasyon DOX nan sourit ki pa gen timè pa t lakòz chanjman enpòtan nan ekspresyon makè enflamatwa nan kè a, administrasyon DOX te anile siyifikativman regilasyon timè IL-1 (Figi 3B), Mcp{{44} } (Figi 3E), Cxcl9 (Figi 3G), ak Cxcl10 (Figi 3H). Sa ki enpòtan, de-fason ANOVA demontre yon efè entèraksyon enpòtan nan tout makè eksepte Cxcl1, Cxcl9, ak Cxcl10, demontre efè yo divèjan ke DOX gen sou makè enflamatwa kadyak nan pote timè konpare ak sourit san timè.
2.4. Efè administrasyon DOX sou ekspresyon jèn makè enflamatwa nan fwa sourit ki pa gen timè ak ki gen timè.
Fwa yo te rekòlte nan tou de sourit C57BL/6N ki pa gen timè ak EL4 lenfom ki gen timè yon semèn apre administrasyon 4 mg/kg/semèn DOX oswa volim ekivalan saline esteril pou 3 semèn (n=8 pou chak semèn). gwoup). Apre ekstraksyon RNA total, ekspresyon mRNA epatik makè enflamatwa IL-1, IL-1, IL-6, TNF-, Mcp{-1, Cxcl1, Cxcl9, ak Cxcl10. yo te detèmine pa PCR an tan reyèl. Sourit ki gen timè yo te ogmante ekspresyon epatik pro-enflamatwa cytokines IL-1 (Figi 4A), IL-1 (Figi 4B), TNF- (Figi 4D), Cxcl9 (Figi 4G), ak Cxcl10 (Figi 4H) konpare ak sourit san timè. Malgre ke mwens remakab, de-fason ANOVA demontre yon efè enpòtan nan timè a sou ekspresyon jèn epatik IL-6 (Figi 4C). De-fason ANOVA demontre yon efè entèraksyon enpòtan ant timè a ak DOX nan Cxcl10 (Figi 4H). Administrasyon DOX te redwi timè-induit upregulation nan IL-1 ak TNF- (Figi 4B, D). Ni DOX ni timè a pa te gen yon efè enpòtan sou ekspresyon epatik chemokin enflamatwa Mcp-1 ak Cxcl1 (Figi 4E, F).
2.5. Efè administrasyon DOX sou ekspresyon jèn makè enflamatwa nan ren sourit ki pa gen timè ak ki gen timè.
Yo te rekòlte ren nan tou de sourit C57BL/6N ki pa gen timè ak sourit EL4 ki gen timè ki gen timè yon semèn apre administrasyon 4 mg/kg/semèn DOX oswa volim ekivalan saline esteril pou 3 semèn (n=8 pou chak semèn). gwoup). Apre ekstraksyon RNA total, ekspresyon mRNA ren nan makè enflamatwa IL-1, IL-1, IL-6, TNF-, Mcp{-1, Cxcl1, Cxcl9, ak Cxcl10. yo te detèmine pa PCR an tan reyèl. Nan liy ak chanjman yo obsève nan kè a ak fwa a, sourit ki gen timè te ogmante siyifikativman ekspresyon ren nan sitokin pro-enflamatwa IL-1 (Figi 5A), IL-1 (Figi 5B), TNF- (Figi 5D), ak Mcp-1 (Figi 5E) konpare ak sourit san timè. Anplis de sa, de-fason ANOVA demontre yon efè enpòtan nan timè a sou ekspresyon jèn ren nan Cxcl1 (Figi 5F), Cxcl9 (Figi 5G), ak Cxcl10 (Figi 5H). Administrasyon DOX nan sourit ki gen timè yo te amelyore siyifikativman regilasyon IL -1 (Figi 5B), IL-6 (Figi 5C), TNF- (Figi 5D), ak Mcp{{43}. } (Figi 5E). Nan makè sa yo, ANOVA de-fason te demontre tou yon entèraksyon enpòtan ant DOX ak timè a ki demontre efè diferan ke DOX genyen sou makè enflamatwa ren nan ki bay timè konpare ak sourit san timè.
2.6. Efè Administrasyon DOX sou Karakteristik istopatolojik nan kè, fwa, ak ren sourit san timè ak sourit ki gen timè.
Kè, fwa, ak ren yo te rekòlte nan yon sèl kòwòt sourit san timè ak EL4 lenfom ki gen timè C57BL/6N sourit jivenil yon semèn apre administrasyon 4 mg/kg/semèn DOX oswa volim ekivalan saline esteril pou 3 semèn ( n=4 pou chak gwoup). Evalyasyon istopatolojik la pa montre okenn gwo chanjman patolojik nan kè a (Figi 6A). Sèlman enfiltrasyon selil enflamatwa minimòm, demontre kòm fokis ki ra nan enflamasyon minimòm selilè melanje (mononukleyè ak netrofil), yo te obsève nan tisi yo fwa rekòlte nan DOX-trete timè-gratis (twa sou kat sourit), saline-trete timè-pote. de sou kat sourit), ak DOX-trete sourit ki gen timè (twa sou kat sourit) (Figi 6B). Evalyasyon istopatolojik nan ren yo te demontre pa gen okenn gwo chanjman patolojik nan tout gwoup eksepte sourit ki gen timè ki trete DOX (Figi 6C), ak de sou kat sourit yo nan gwoup sa a ki demontre rejyon rejenerasyon tubulaires plen epesè, fibwoz, ak entèrstisyal twò grav. enflamasyon ki afekte apeprè 5 pousan nan zòn tisi total.
2.7. Efè divèjan DOX sou sitokin enflamatwa serom nan sourit ki pa gen timè parapò ak sourit ki gen timè.
Nou te deja rapòte ke administrasyon egi DOX te pwovoke yon repons enflamatwa sistemik nan sourit adilt C57BL / 6N [11]. Isit la, nou detèmine efè administrasyon DOX kwonik sou nivo serik makè enflamatwa IL-6 ak TNF-, nan sourit jivenil ki pa gen timè ak ki gen timè. Sourit ki gen timè ki te trete ak saline yo te demontre yon ogmantasyon nan serik IL-6 (Figi 7A) ak TNF- (Figi 7B) ki te make, byenke estatistik ensiyifyan, konpare ak sourit ki pa gen timè. Sa ki enpòtan, ANOVA de-fason demontre yon entèraksyon enpòtan ant administrasyon DOX ak timè a sou nivo serik IL-6 ak TNF-. Vreman vre, administrasyon DOX nòmalize timè-induit upregulation nan IL -6 nan yon nivo menm jan ak kontwòl sourit san timè (Figi 7A).
