Predi wòl LncRNA nan aje ren ki baze sou sekans RNA Ⅱ

Korelasyon lncRNA Gm43360 ak potansyèl mRNA sib li yo

LncRNA Gm43360 te chwazi pou etid paske li konekte de rezo coexpression lncRNA-mRNA. Nivo ekspresyon Adra1a te korelasyon pozitivman (rho=0.8650, p=0.026) ak sa Gm43360, Csnk1a1 (kazein kinaz 1A1) te korelasyon negatif (rho{{12 }}.8084, p=0.0084) (figi 5a). Pou plis verifye korelasyon lncRNA Gm43360 ak potansyèl mRNA sib li yo Adra1a ak Csnk1a1, yo te fèt yon plasmid overexpression nan lncRNA Gm43360 nan etid sa a. Ekspresyon nan Csnk1a1 diminye jan yo espere, ak ekspresyon Adra1a tou diminye, men se pa anpil. Apre sa, nou te frape lncRNA Gm43360 pa siRNA pou detekte si ekspresyon mRNA sib li yo te afekte. Kòm espere, Csnk1a1 te ogmante nan selil knockdown lncRNA Gm43360 parapò ak gwoup kontwòl negatif siRNA (figi 5b). Dis, nou detekte wòl lncRNA Gm43360 nan sik selilè a. Rezilta pou twous konte selil-8 (CCK-8) te montre ke lncRNA Gm43360 ankouraje viabilite selil (Fig. 5c). Rezilta yo te montre ke lncRNA Gm43360 ogmante pousantaj selil faz S ak diminye pousantaj selil faz G1 konpare ak kontwòl negatif la (figi 5d). Pwoteyin p53 ak p21 yo te enplike nan règleman sik selilè a e konsa yo te mak aje selil yo. Nivo ekspresyon p53 ak p21 te siyifikativman diminye nan gwoup la twòp ekspresyon parapò ak gwoup kontwòl la. Nivo ekspresyon p53 ak p21 yo te siyifikativman ogmante nan gwoup siRNA an parapò ak gwoup kontwòl siRNA (figi 5e). Ekspresyon twòp nan lncRNA Gm43360 diminye kantite selil SA - -gal-pozitif, ak selil -gal-pozitif ogmante nan gwoup transfè Gm43360 (figi 5f). Ansanm, rezilta sa yo endike ke lncRNA Gm43360 inibit senesans nan selil epitelyal tubulaires ren yo paanpeche ekspresyon Csnk1a1.

KLIKE LA POU JWENN ÒGANIK NATIRÈL ÈKSTRÈ CISTANCHE AK 25% ECHINACOSIDE AK 9% ACTEOSIDE POU Fonksyon ren.

Diskisyon

Nan etid sa a, nou evalye done ekspresyon mRNA ki soti nan ren sourit jèn ak granmoun epi nou te fè analiz biyo-enfòmasyon ki te divilge fonksyon mRNA yo eksprime aberans. Nou te obsève 347 mRNA regilasyon ak 355 mRNA downregulated osi byen ke 130 lncRNAs upregulated ak 91 lncRNAs downregulated nanren sourit fin vye granmoun konpare ak ren sourit jèn. Anplis de sa, yo te montre mRNA sa yo patisipe nan chemen ki gen rapò ak aje, tankoufosforilasyon oksidatif, chemen siyal AMPK, chemen siyal Wnt, chemen siyal Rap1, ak maladi ki gen rapò ak laj, ki demontre fonksyon mRNAs diferan eksprime nan patojèn nan aje ren.

Long noncoding RNA NEAT1 la se yon faktè pwoteksyon nan pwogresyon fibwoz ren nan selil epitelyal tubulaires ren [21]. Azar, nan rezilta sekans nou yo, lncRNA NEAT1 te eksprime nan pi ba nivo nan ren sourit ki gen laj pase nan sourit jèn, ki konsistan avèk rezilta anvan yo. LincRNA-Gm4419 akselere enfamasyon ak fibwoz pa NF-kB / NLRP3 mekanis inflammasome-medyatè nan nefropati dyabetik [22]. Nan rezilta sekans nou yo, nou te jwenn tou ke ekspresyon Gm4419 te pi wo nan ren sourit ki gen laj pase nan sourit jèn, men pa te gen okenn diferans enpòtan. LncRNA Gm43360 sitiye sou kwomozòm 5 (Chr5:122494022–122,494,908, 2887 bp). Dapre UCSC Genome Browser, Gm43360 sitiye nan entron nan jèn pwoteyin-kode Atp2a2 la. Sepandan, pa gen okenn rapò sou patisipasyon lncRNA Gm43360 nan maladi jiska dat. Nan etid sa a, knockdown lncRNA Gm43360 ankouraje senesans selil epitelyal tubulaires ren. Anplis de sa, nou idantifye anpil lncRNAs diferan eksprime nan rezilta yo sekans epi envestige yo.

LncRNA yo te klase nan cis-règleman oswa trans-règleman ki baze sou mekanis regilasyon lncRNA. LncRNAs ki aji Cis ta ka enfliyanse ekspresyon jèn vwazen yo lè yo depann de eleman ki aji cis, tankou pwomotè, améliorateur, ak sekans regilasyon, ki se distans ant lncRNAs ak mRNA ki mwens pase 100 kb. Trans-aji lncRNAs refere a lncRNAs kite sit transfeksyon an epi opere nan sit byen lwen (sa vle di, distans ki genyen ant lncRNAs ak mRNAs se plis pase 100 kb) [23]. LncRNA MAAT ogmante ekspresyon jèn Mbnl1 vwazen an atravè yon modil cis-regilasyon [24]. LncRNA Pnky a jwe yon wòl kòm yon regilatè trans-aji nan devlopman kortik [25]. Nan etid sa a, te gen yon relasyon transregulatory ant lncRNA Gm43360 ak Csnk1a1. Csnk1a1 se yon jèn timè [26] ki kode yon pwoteyin ki patisipe nan sik selilè ak pwosesis divizyon selilè [27]. Csnk1a1 downregulation pwovokesenesans ki asosye enflamatwarepons ak arè kwasans nan timè kolorektal [26]. Csnk1a1 te downregulated lè Gm43360 te upregulated; konsa, li posib ke lncRNA Gm43360 patisipe nanaje renpareglemante ekspresyon Csnk1a1.

Konklizyon

Envestigasyon nou an sou rezo coexpression lncRNA-mRNA nanaje renrevele yon lncRNA, lncRNA Gm43360, ka jwe yon wòl pwoteksyon nan aje ren ak elaji konpreyansyon nou sou mekanis ki enplike nanaje ren

Materyèl ak metòd

Echantiyon sourit C57BL/6J jenn (3-mwa) ak granmoun ({24-mwa) yo te achte nan Sant Experimental Animal nan Xiamen University epi yo te leve nan yon anviwònman estanda. Tout sourit yo te gen aksè gratis nan manje ak dlo. Sourit yo te aklimate nan nouvo etablisman an pou yon mwa anvan yo te sakrifye yo. Sourit yo te anestezi ak uretan pa piki entraperitoneal nan yon dòz 750 mg / kg anvan koleksyon echantiyon. Sourit jèn ak granmoun yo te sakrifye nan menm jou a.ren sourit rezidyèlyo te itilize tisi pou sekans nan chak tès. RNA-seq ak istopatoloji yo te fèt souren separesoti nan sourit la menm. Tisi ren yo te kolekte nan sourit. Yon ren te imedyatman benyen nan fòmalin tanpon net 10% pou seksyon ki vin apre a, epi lòt ren an te divize an plizyè tisi epi imedyatman mete l nan nitwojèn likid epi estoke nan -80 degre. Etid la te sipòte pa Komite Etik nan Premye Lopital Afilye nan Xi'an Jiaotong University (Shaanxi, Lachin) (No. 2018-G-164). Tout metòd yo te pote soti nan direktiv yo etik bèt ak règleman yo. Etid sa a te fèt an konfòmite ak direktiv ARRIVE yo.

Istopatoloji ren

Yo te fikse echantiyon tisi ren jèn ak granmoun sourit nan 10% solisyon paraformaldehyde lannwit lan. Dis, nan seksyon yo te dezidrate, parafine-intègre, ak seksyon nan epesè 4- µm. Yo te fè tach trikromatik PAS ak Masson a lè l sèvi avèk pwotokòl estanda. Imaj yo te kaptire pa kamera a, epi yo te mezire zòn nan tach-pozitif. Yo te kalkile zòn nan pou imaj kamera istopatoloji ak Image-Pro Plus 6.0.

Tach SA--gal

Aktivite SA{{0}}gal la te analize ak yon twous tach SA{- -gal (Cell Signaling Technology #9860) dapre pwotokòl manifakti a. Yo te mezire zòn nan tach pozitif, epi yo te kalkile selil SA- -gal-pozitif lè l sèvi avèk Image-Pro Plus 6.0.

RNA ekstraksyon bibliyotèk konstriksyon ak sekans

Samples (each 5 mice in young and old mice) were used for lncRNA and mRNA expression analyses. Young mice were numbered 3M1, 3M2, 3M3, 3M4, and 3M5, and old mice were numbered 24M1, 24M2, 24M3, 24M4, and 24M5. Total RNA was extracted using Trizol reagent (thermofsher, 15,596,018) following the manufacturer's instruction. The total RNA quantity and purity were analyzed of Bioanalyzer 2100 and RNA 6000 Nano LabChip Kit (Agilent, CA, USA, 5067−1511), and high-quality RNA samples with RIN number>7.0 yo te itilize pou konstwi yon bibliyotèk sekans. Apre ekstraksyon RNA total, mRNA te pirifye nan RNA total (5ug) lè l sèvi avèk Dynabeads Oligo (dT) (Thermo Fisher, CA, USA) ak de jij pou pirifye. Apre pirifikasyon, mRNA an te divize an ti fragman lè l sèvi avèk kasyon divalan nan tanperati ki wo (Modil Fragmantasyon Manyezyòm RNA (NEB, cat. e6150, USA) anba 94 degre 5-7 min). Apre sa, yo te transkri fragman RNA k ap fè fas a pou jwenn cDNA pa SuperScript™ II Reverse Transcriptase (Invitrogen, cat. 1,896,649, USA), ki te annapre yo te itilize pou fè sentèz ADN ki gen etikèt U ki gen dezyèm chenn ak E. coli DNA polymerase I ( NEB, cat.m0209, USA), RNase H (NEB, cat.m0297, USA) ak solisyon dUTP (Termo Fisher, cat.R0133, USA). Lè sa a, yon A-baz te ajoute nan pwent yo blunt nan chak strand, prepare yo pou ligasyon nan adaptè yo endis. Chak adaptè te genyen yon debòde baz T pou ligation adaptè a ak ADN fragmenté A-tailed. Adaptè doub endèks yo te ligated nan fragman yo, epi seleksyon gwosè yo te fèt ak pèl AMPureXP. Apre tretman anzim UDG chalè-labile (NEB, cat.m0280, USA) nan dezyèm ADN ki gen etikèt sou U, pwodwi yo ligated yo te anplifye ak PCR pa kondisyon sa yo: inisyal denaturasyon nan 95 degre pou 3 min; 8 sik denaturasyon nan 98 degre pou 15 s, annealing nan 60 degre pou 15 s, ak ekstansyon nan 72 degre pou 30 s; ak Lè sa a, ekstansyon final nan 72 degre pou 5 min. Longè an mwayèn insert pou bibliyotèk final cDNA yo te 300±50 bp. Finalman, nou te fè sekans 2 × 150 bp (PE150) sou yon Illumina Novaseq™ 6000 (LC-Bio Technology CO., Ltd., Hangzhou, Lachin) dapre pwotokòl manifakti a [28].

Bioinformatics analiz Sekans ak filtraj nan Clean Reads

Yon bibliyotèk cDNA konstwi pa teknoloji ki soti nan RNA nan pisin nanechantiyon rensourit yo te sekans epi kouri ak platfòm sekans Illumina NovaseqTM 6000. Lè l sèvi avèk apwòch RNA-seq Illumina-fen pè, nou sekans transcriptome a, jenere yon total de milyon 2 × 150 bp lekti-fen pè. Lekti yo jwenn nan machin sekans yo gen ladan lekti anvan tout koreksyon ki gen adaptè oswa baz bon jan kalite ki pral afekte asanble sa a ak analiz. Kidonk, pou jwenn bon jan kalite lekti pwòp, li yo te plis filtre pa Cutadapt [29] (https://cutadapt.readthedocs.io/en/stable/, version:cutadapt-1.9). Paramèt yo te jan sa a:

1) retire lekti ki gen adaptè;

2) retire lekti ki gen polyA ak poly;

3) retire lekti ki gen plis pase 5% nukleotid enkoni (N);

4) retire lekti ki pa bon kalite ki gen plis pase 20% bon kalite (valè Q mwens pase oswa egal a 20).

Yo te verifye dis kalite sekans lè l sèvi avèk FastQC [30] (http://www.bioinformatics.babraham.ac.uk/projects/ fastqc/, 0.11.9). ki gen ladan kontni Q20, Q30, ak GC nan done pwòp yo. Apre sa, yon total de G bp nan netwaye, pè-fen lekti yo te pwodwi. Done sekans anvan tout koreksyon yo te soumèt bay ansanm done NCBI Gene Expression Omnibus (GEO) ak nimewo aksè GSE154223.

Genòm referans/anotasyon an te Mus_musculus.GRCm38. Sous ak vèsyon annotasyon jèn yo te itilize pou analiz yo te Ensembl_v88.

Transkripsyon asanble

Premyerman, Cutadapt [29] te itilize pou retire lekti ki te genyen kontaminasyon adaptè, baz ki pa bon, ak baz ki pa detèmine. Dis kalite sekans te trè-manje lè l sèvi avèk FastQC (http://www.bioinformatics.Babra ham.ac.uk/projects/fastqc/). Nou itilize Bowtie2 [31] ak Hisat2 [32] pou kat lekti sou genòm sourit la. Lekti kat echantiyon yo te rasanble lè l sèvi avèk StringTie [33]. Dis, tout relve nòt soti nanechantiyon renyo te fizyone pou rekonstwi yon transcriptom konplè lè l sèvi avèk scripts Perl. Apre yo te fin pwodwi transcriptome final la, yo te itilize StringTie [33] ak edgeR [34] pou estime nivo ekspresyon tout transkripsyon yo.

Idantifikasyon LncRNA

Premye a tout, transkripsyon ki sipèpoze ak mRNA li te ye ak transkripsyon ki pi kout pase 200 bp yo te jete. Lè sa a, nou itilize CPC [35] ak CNCI [36] pou predi relve nòt ki gen potansyèl kodaj. Tout relve nòt ak nòt CPC<-1 and CNCI score<0 were removed. The remaining transcripts were considered as lncRNAs.

Analiz gènes analiz diferan eksprime (DGEs).

StringTie [33] was used to perform expression levels for mRNAs and lncRNAs by calculating FPKM [37]. Genes differential expression analysis was performed by DESeq2 software between two different groups (and by edgeR between two samples) [34, 38]. The genes with the parameter of q value below 0.6 and absolute fold change>2 yo te konsidere kòm jèn diferan eksprime.

Sib prediksyon jèn ak analiz fonksyonèl nan lncRNAs

Pou eksplore fonksyon fonksyon lncRNAs, nou prevwa jèn cis-sib lncRNAs yo. LncRNA yo ka jwe yon wòl cis nan aji sou jèn sib vwazen yo. Nan etid sa a, script Perl te chwazi jèn kodaj nan 100,000 en ak en. Lè sa a, nou te montre yon analiz fonksyonèl nan jèn yo sib pou lncRNAs lè l sèvi avèk scripts yo BLAST2GO [39]. Lyen yo kòmandman konplè nan domèn piblik la te Jie-Li/README.md nan prensipal · dandan-li/Jie-Li (github.com).

Kategori ontoloji jen (GO) ak analiz Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG)

Analiz byoinformatik pou sekans RNA te fèt lè l sèvi avèk zouti OmicStudio (http://www.omicsudio.cn/tool). Gene Ontology (GO) analiz fonksyonèl anrichisman ak Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) [37-39] analiz anrichisman yo te itilize pou analize fonksyon byolojik jèn yo prevwa. Analiz GO klarifye pwosesis byolojik prensipal yo atravè twa aspè: konpozisyon selil, fonksyon molekilè, ak pwosesis byolojik (http://www.geneontology. org/). Analiz la premye mete tout jèn ki eksprime diferan ak jèn background nan baz done GO a. Yo trase chak atik, yo kalkile kantite jèn nan chak atik, epi yo itilize distribisyon ipèjometrik pou fè tès ipotèz pou jwenn valè P rezilta anrichisman an. Plis valè P pi ba a, se plis rezilta anrichisman enpòtan an. KEGG se yon resous baz done ki analize mRNA yo eksprime diferan pa byoloji jenetik pou eksplore chemen enpòtan ki gen rapò ak jèn sib (https://www.genome.jp/kegg/). Rezilta yo eksprime pa valè p; Plis pi ba valè p la, se plis rezilta anrichisman enpòtan an.

qRT-PCR

GAPDH te itilize kòm kontwòl andojèn. Lè sa a, yo te kalkile nivo ekspresyon relatif jèn enkoni yo. Tout primè yo te fèt ak sentèz espesyalman pou eksperyans sa a. Jadendanfan pou GAPDH yo te komèsyalize. Espesifik primè Adra1a ak Csnk1a1 te idantifye pa pik sèl nan koub la fonn.

Bati rezo ko-espresyon mRNA-lncRNA

Transregulasyon te baze sou rechèch, ak Lè sa a, enèji trans la te kalkile. Pi piti enèji trans la te, se pi gwo posiblite pou obligatwa. Lè sa a, yo te kalkile koyefisyan korelasyon mRNA-lncRNA tou. Rezo mRNA-lncRNA te konstwi lè w te chwazi yon koyefisyan korelasyon Spearman ki depase 0.9. Rezo koexpresyon mRNA-lncRNA te konstwi lè l sèvi avèk lojisyèl Cytoscape (v3.7.1).

Kilti selilè

Sourit ren proximal tubulaires epithelial selil yo (MRPT-EpiCs) yo te kiltive nan selil epitelyal medyòm-animal (EpiCM-a, Cat. #4131) ki gen 2% serom fetis bovine (FBS, Cat. #0010) ak Epithelial Cell Growth Supplement-animal (EpiCGS-a, Cat. #4182) san antibyotik nan yon enkibatè imidite nan 37 degre ak 5% CO2. Mwayen kilti a te chanje chak 2-3 jou. Selil yo nan faz kwasans logaritmik yo te sub-kilti lè kwasans lan te rive nan 90%. Sispansyon selil tripsin dijere a te simen nan 6-plak pi ki gen 2*104 -5*104 selil nan chak pi. Selil yo te itilize pou transfeksyon yo tout te ant jenerasyon 2 ak 5.

Konstriksyon plasmid ak transfeksyon selilè

GeneChem (Shanghai, Lachin) te konstwi plasmid overexpression lncRNA Gm43360 la. Zo rèl do plasmid la te GV658, ak pwomotè CMV a te kondwi ekspresyon lncRNA. Yo bay sekans nukleotid klone nan materyèl siplemantè a. Pou lncRNA Gm43360 knockdown, twa lncRNA ENS DWE00000197656-sib siRNAs (lncRNA Gm43360- siRNA1, 5'-CCUUCACUCCAGCUGGUAATT-3'; lncRNA Gm43360-siRNA2, 5'-CCCUGUCACUCA UGAAGUUTT-3'; ak lncRNA Gm43360-siRNA3, 5'-GGUCAAAUAACUCAAUGGGTT-3') yo te fèt ak sentèz nan GenePharma (Shanghai, Lachin). Dapre pwotokòl manifakti a, selil yo te transfekte ak 2500 ng plasmid oswa 100 pmol siRNA ak 6 µl Lipofectamine™ 2000 Transfection Reagent (Invitrogen, USA) pou chak pwi. Nivo ekspresyon RNA ak pwoteyin yo te detekte nan 48 èdtan apre transfeksyon, epi yo te repete chak eksperyans omwen twa fwa. Yo te itilize PCR quantitative an tan reyèl pou valide efikasite lncRNA Gm43360 twòp ekspresyon ak knockdown.

Analiz Western blot

Selil kiltive yo te lave ak PBS glas frèt, yo te ajoute 120 µl tanpon RIPA (Kè, Lachin), epi yo te ajoute inibitè proteaz ak PMSF (Kè, Lachin) pou 30 minit sou glas. Apre yo fin kolekte selil nan diferan tib mikrosantrifij, yo te quantifye konsantrasyon nan pwoteyin. Tanpon chaje te ajoute nan chak echantiyon ak Lè sa a, bouyi pou 7 min. Yo te separe trant mikrogram echantiyon an pa 12% SDS-PAGE (Beyotime, Lachin) ak elektwotransfè nan manbràn PVDF (Thermo Fisher, USA). Lè sa a, manbràn yo te bloke ak 5% lèt. Manbràn yo te enkube ak antikò prensipal espesifik: anti-p21 (1:1000, Abcam, ab109199), anti-p53 (1:1000, Proteintech, 10442-1-AP), ak anti-GAPDH (1:3000, Profintech). , 60004-1-Ig) lannwit lan nan 4 degre. Apre lave ak TBST, manbràn yo te enkube ak yon antikò segondè pou 1 èdtan nan tanperati chanm. Gwoup pwoteyin yo te obsève lè l sèvi avèk yon twous kimiluminesans (Millipore, USA). Ekspresyon GAPDH yo te itilize pou nòmalize nivo pwoteyin yo.

Esè pwopagasyon selilè

Kapasite pwopagasyon selil yo te detèmine pa tès selil konte -8 (CCK-8). Karant-uit èdtan apre transfeksyon, yo te ajoute 90 µl nouvo mwayen ak 10 µl solisyon CCK-8 nan chak pi (Beyotime, C0042). Selil yo te enkube pou 1-4 èdtan nan 37 degre nan 5% CO2 ak mezire nan 450 nm pa yon lektè microplate inivèsèl (Bio-Tek, USA).

Analiz sitometrik koule

Selil yo te plake nan 6-plak byen jou anvan transfeksyon an. Karant-uit èdtan apre transfeksyon, selil yo te trypsinize ak santrifuje nan 1000 rpm pou 5 min. Lè sa a, selil yo te fiks nan 70% etanòl nan 4 degre pou omwen 4 èdtan. Apre santrifujasyon, yo te ajoute solisyon tach RNase A ak propidium iodide (PI) nan selil yo, epi selil yo te enkube pou 30 minit nan tanperati chanm nan fè nwa. Te-tache selil yo te analize lè l sèvi avèk yon NovoCyte ACEA (Biosyans, USA).

Analiz estatistik

Done mezi yo pa distribisyon nòmal yo prezante kòm mwayen ± SD. Diferans ki genyen ant de gwoup diferan yo te detèmine lè l sèvi avèk T-tès Elèv ki pa pè de ke, epi yon valè p < 0.05 te konsidere kòm estatistik enpòtan. Tout kalkil yo te fèt lè l sèvi avèk GraphPad Prism 8 (GraphPad Software, Inc., USA).

Referans

1. Docherty MH, O'Sullivan ED, Bonventre JV, Ferenbach DA. Senesans selilè nan ren an. J Am Soc Nephrol. 2019;30(5):726–36.

2. Partridge L, Deelen J, Slagboom PE. Fè fas ak defi mondyal yo nan aje. Lanati. 2018;561(7721):45–56.

3. Pan JX. LncRNA H19 ankouraje ateroskleroz pa reglemante chemen siyal MAPK ak NF-kB. Eur Rev Med Pharmacol Sci. 2017;21(2):322–8.

4. Wasson CW, Abignano G, Hermes H, Malaab M, Ross RL, Jimenez SA, Chang HY, Feghali-Bostwick CA, Del Galdo F. Long ki pa kodaj RNA HOTAIR kondui EZH 2-depandan activation myofibroblast nan sistemik sclerosis atravè miRNA 34a-depandan aktivasyon nan NOTCH. Ann Rheumatic Dis. 2020;79(4):507–17.

5. Luo J, Wang K, Yeh S, Solèy Y, Liang L, Xiao Y, Xu W, Niu Y, Cheng L, Maity SN, et al. LncRNA-p21 chanje diferansyasyon neroendokrin kansè pwostat enzalutamide antiandrojèn nan atravè modil siyal EZH2/STAT3. Nat Commun. 2019;10(1):2571.

6. Wang Y, Yang L, Chen T, Liu X, Guo Y, Zhu Q, Tong X, Yang W, Xu Q, Huang D, et al. Yon nouvo lncRNA MCM3AP-AS1 ankouraje kwasans kansòm epatoselilè lè li vize aks miR-194-5p/FOXA1. Mòl kansè. 2019;18(1):28.

7. Wu YY, Kuo HC. Wòl fonksyonèl ak rezo RNA ki pa kode nan patojèn maladi neurodegenerative. J Biomed Sci. 2020;27(1):49.

8. Li Z, Wang Z. Aging Kidney ak Maladi ki gen rapò ak aje. Adv Eksperyans Med Biol. 2018;1086:169–87.

9. Wang X, Vrtiska TJ, Avula RT, Walters LR, Chakkera HA, Kremers WK, Lerman LO, Rule AD. Laj, fonksyon ren, ak faktè risk yo asosye yon fason diferan ak volim kortikal ak medulè nan ren an. Kidney Int. 2014;85(3):677–85.

10. Lin Q, Hou S, Dai Y, Jiang N, Lin Y. LncRNA HOTAIR vize miR-126-5p pou ankouraje pwogresyon maladi Parkinson la atravè RAB3IP. Biol Chem. 2019;400(9):1217–28.

Sèvis sipò Wecistanche-Pi gwo ekspòtatè cistanche nan Lachin nan:

Imèl:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel:+86 15292862950

Achte pou plis detay espesifikasyon:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-boutik