Siyifikasyon nan limit kontni diferan pou konpozan makè nan Cistenche deserticola ak C. tubulofloris nan famasi Chinwa ki baze sou eleman diferans ⅱ

Abstrè

Objektif:Pou etidye konpozan yo diferans ak konpare kontni yo ant Cistanche Tubulosa ak C. Deserticola ak analize siyifikasyon nan limit kontni diferan pou konpozan makè ant de plant yo nan Pharmacopoeia a Chinwa (2020 edisyon). Metòd: konpozan yo diferans yo te idantifye pa likid kromatografi spectrometry konbine avèk multivarye analiz estatistik, ak kontni an nan eleman diferans te detèmine pa pèfòmans segondè kwomatografi likid. Rezilta: konpoze yo diferans yo te cistanoside A, isoacteoside, echinacoside, ak acteoside. Echinacoside te gen kontni ki pi wo nan tou de plant yo, ki te swiv pa Acteoside. Kontni an nan echinacoside, acteoside, ak isoacteoside nan C. tubulosa te pi wo pase sa ki nan C. deserticola (P<0.01), and no cistanoside A was detected in C. tubulosa. Conclusion: There are differences in the chemical composition between C. deserticola and C. tubulosa. Cistanoside A can be taken as a maker component in C. deserticola. Echinacoside and acteoside are the common components in both plants, and they are specified in the Chinese Pharmacopoeia (2020 edition) as the marker components in both plants. The different content limits for the two components between C. deserticola and C. tubulosa reflect the objectivity in the standard.

Mo kle: Cistanche deserticola;Cistanche tubulosa; cistanoside a; isoacteoside;echinacoside; acteoside

 

 

 

 

Cistenche dezètikolase tij la charnèl sèk ak fèy lach nan Cistenche deserticola yc ma oswa cistanche tubulosa (Schenk) wight, yon plant nan fanmi an Orobanchaceae [1]. Li se yon manje Tonik ak medsin, yo konnen kòm "jinsang nan dezè". Li se sitou distribye nan Inner Mongolia, Ningxia, Gansu, Xinjiang ak lòt rejyon [2]. Cistanche dezè se cho nan lanati, dous ak sale nan gou, ak antre nan ren an ak meridyen gwo trip. Li gen efè yo nan nourisan fwa a ak ren, benefisye sans la ak san, ak imidite trip yo ak fasilite mouvman entesten. Li kapab itilize nan trete deficiency ren Yang, fèblès ak lakòz, doulè nan ren an ak jenou, feblès nan tandon yo ak zo, ak konstipasyon ki te koze pa trip sèk [1]. Rechèch modèn montre ke charnèl la tij ak fèy echèl nan dezè Cistenche sitou gen yon varyete de eleman chimik tankou glikozid fenilethanoid, terpèn etè iridoid ak glikozid yo, lyan, ak sik [3]. Pami yo, glikozid fenillethanoid yo se engredyan ki pi enpòtan aktif, ki gen efè famasi tankou anti-aje [4], antioksidan, anti-fatig, ak laksatif [5].
Genyen apeprè 20 espès nan Cistanche nan mond lan, e gen 5 espès nan peyi mwen an: Cistenche deserticola, Cistanche tubulosa, C. salsa (Camey.) G.Beck, C. sinensis G. Beck, ak C. salsa var. Albiflora pf tu et zclou. Edisyon an 2020 nan Pharmacopoeia a nan Repiblik Pèp la nan Lachin (ki rele refere yo kòm "Chinwa Pharmacopoeia a") précis ke de premye espès yo se espès orijinal la nan Cistanche Deserticola [6].

Cistenche dezètikola

Anvan edisyon an 2005 nan Pharmacopoeia a Chinwa, sèl Cistenche deserticola-sòti orijin nan te Cistenche Deserticola. Akòz gwo demann nan mache domestik ak entènasyonal yo ak mank resous yo, yo te ajoute Cistanche Tubulosa kòm orijin legal la. Sepandan, pri yo nan de orijin yo nan Cistanche deserticola nan mache a yo trè diferan, ak pri a nan Cistanche Tubulosa ke yo te sèlman 1/4 a 1/6 nan sa yo ki an Cistanche Deserticola [7]. Diferans ki genyen nan konpozisyon an ak efè famasi nan de orijin sa yo vo alontèm rechèch an pwofondè ak itilizasyon. An tèm de diferans ki genyen nan ki kalite engredyan, Huang Xiongmei et al. [8] te jwenn ke Cistancheside A te prensipal engredyan an diferansye nan etid la spectre karakteristik nan de orijin yo. An tèm de diferans lan nan kontni eleman, Gao Yan et al. [9; Zhu Nailiang et al. [10;
Gwoup rechèch nou an te itilize likid kwomatografi-mas spectrometry konbine avèk analiz estatistik multivarye yo konpare diferans ki genyen nan kalite eleman chimik ant cistanche deserticola ak cistanche tubulosa, idantifye makè diferans ak detèmine sa yo, se konsa yo bay yon referans pou idantifye orijin nan nan klinik. Anplis de sa, pa konpare diferans ki genyen nan sa ki nan konpozan yo endèks farmakope (echinacoside ak verbascoside) nan de cistanches orijinal yo, nesesite pou mete limit yo konbine nan de eleman yo nan cistanches ak cistanches tubulosa respektivman te eksplike.

 

1 materyèl

1.1 Enstriman

Ultim 3 000 Ultra-segondè pèfòmans likid faz-elektwostatik jaden tandem ion pyèj-wo rezolisyon mas spèktromètr (UPLC-LTQ Orbitrap XL, Thermo Fisher syantifik, USA); 2695 segondè pèfòmans likid kromatograf, 2489 detektè iltravyolèt (Waters, USA); BT125D 1/100,000 Balans elektwonik (Sistèm Enstriman Sartorius, Almay); KQ -500 de CNC Cleaner Ultrasonic (Kunshan Ultrasonic Instrument co, Ltd.); PL2002 Balans elektwonik [Mettler-Toledo Enstriman (Shanghai) co, Ltd].

 

Cistanche tubulosa

1.2 Tès Dwòg

Sibstans ki sou referans Echinacoside, Cistancheside A, Verbascoside, ak Isoverbosaside (pite ki pi gran pase 98%, pakèt nimewo PS000867, PS010950, PS000683, ak PS001059, respektivman) te achte nan men Chengdu Pusi Biotechnology Co., LTD; mas spectrometry klas methanol (Fisher); mas spectrometry klas asid fòmik (pite: 99%, Sigma Aldrich); Dlo te Watsons dlo distile.

 

1.3 Echantiyon

10 lo nan tranch dezè cistenche ak 10 lo nan tranch tubulosa cistanche yo te idantifye pa Pwofesè Li Xiangri nan Beijing University of Medsin Chinwa kòm tij yo charnèl charnèl ak fèy echèl nan Cistanche deserticola Ycma ak Cistanche tubulosa (Schenk) Wight, Wight, Wight, Wight, Wightes, Wightes, Wightes, Wightes, Wightes, Wightes, Wightes, Wightes, Wightes, Wightes, Wightes, Wightes, Wightes, Wightes, Wightes, Wightes, Wightes, Wightes, tubulosa. Yo montre enfòmasyon detaye nan tablo 1.

 

2 metòd

2.1 Etid sou eleman yo diferan nan Cistanche Deserticola soti nan orijin diferan

2.1.1 Preparasyon nan solisyon tès la

Pran sou 0. 2 g nan poud echantiyon sèk (pase nan No 4 Van), avèk presizyon peze epi mete yo nan yon 50 ml flakon mawon jo Pran filtraj la jwenn.

 

2.1.2 Kondisyon kwomatografik

Waters Acquity UPLCTM BEH C18 Kromatografik kolòn (1 0 0 mm × 2.1 mm, 1.7 µm), tanperati kolòn nan 35 degre, echantiyon chanm tanperati a 1 0 degre, echantiyon piki nan 3 μl {. Solisyon (b) kòm faz mobil (0 min, 10%a; 0 ~ 4 min, 10%~ 26%a; 4 ~ 18 min, 26%~ 40%a; 18 ~ 24 min, 40%~ 100%a; 24 ~ 28min, 100%a), deteksyon longèdonn nan 330 nm, to koule nan 0.3 ml · min - 1.

 

2.1.3 Kondisyon spectrometry mas

Sous ion electrospray (ESI) te itilize, optik mòd ion negatif, tanperati kapilè te 350 degre, to koule gaz volim gaz te 30 ARB, oksilyè gaz volim koule to te 10 ARB, espre vòltaj te 3 kV, kapilè vòltaj te –35 V, optik ranje te M/Z100 ~ 1000, ak done akizisyon done X (3000, ak done yo te genyen M/Z100 ~ 1000, ak done ACCURS, ak done yo te genyen.

Cistanche tubulosa

2.1.4 analiz eleman prensipal (PCA)

Apre jwenn matris la ki genyen de dimansyon nan egzat mas retansyon tan done pè, panèl la enstriman ap montre tout otomatikman enpòte enfòmasyon egzat tan retansyon, ak metòd la PCA nan modil la estatistik pwolonje yo pral itilize pou analiz.

 

2.1.5 orthogonal pasyèl pi piti kare-diskriminan analiz (OPLS-DA)

Pa fè analiz de dimansyon done ak OPLS-DA, yo te jwenn yon gwo kantite spèktr orthogonalized, ki ka montre klèman diferans ki genyen ant de gwoup yo nan echantiyon yo. Nan fòma S-trase a, mas retansyon mas done yo pè nan tou de bout nan koub la ki gen fòm S reprezante iyon yo karakteristik ki pi serye nan chak gwoup echantiyon.

 

2.2 Detèminasyon nan eleman diferans

 

2.2.1 Preparasyon nan solisyon referans melanje

 

Pran kantite lajan ki apwopriye nan echinacoside, cistancheside A, verbascoside, ak isoverascoside nan yon 1 0 ml mawon volim flakon, fonn ak delye a make la ak 5 {{4}. 0.384, ak 0.312 mg · ml - 1, respektivman.

 

2.2.2 Preparasyon nan solisyon tès la

 

Metòd la se menm jan ak nan 2.1.1.

 

2.2.3 Kondisyon kromatografik

Agilent Eclipse XDB-C18 kolòn (25 0 mm × 4.6 mm, 5 μm) te itilize, ak methanol (a) -0. 15 ~ 20 min, 21%~ 25%a;

 

2.2.4 Envestigasyon metodolojik

2.2.4.1 Envestigasyon relasyon lineyè

Jisteman pipèt {{0}}. 1, 0. Enjekte echantiyon an pou detèminasyon, sèvi ak zòn nan pik kwomatografik kòm òdone a (Y) ak konsantrasyon an kòm absis la (x), trase yon konplo gaye ak fè analiz retou annaryè jwenn ekwasyon yo retou annaryè lineyè nan sibstans ki sou referans diferan.

 

2.2.4.2 Eksperyans Precision

Pran solisyon an referans melanje nan echinacoside, cistancheside A, verbascoside ak isoverbaccoside, enjekte li 6 fwa kontinyèlman, anrejistre zòn nan pik nan echinacoside, cistancheside A, verbascoside ak referans isoverbaccoside, ak kalkile valè RSD nan chak eleman respektivman.

 

2.2.4.3 Eksperyans Estabilite

Pran menm Cistanche deserticola a (nimewo pakèt: 16 0 901) solisyon tès, enjekte li nan 0, 2, 4, 8, 12, 24 h, detèmine kontni an nan echinacoside, cistancheside A, verbascoside ak isuncbaccoside nan solisyon an tès, ak kalkile valè a RSD nan chak nan tout konpozan nan tout bagay yo respekte nan tout eleman nan tout bagay nan tout eleman nan tout bagay nan tout eleman yo respekte a nan solisyon an, epi kalkile valè a chak bagay nan tout bagay nan RSD nan chak konpozan nan tout bagay nan tout bagay nan tout eleman nan RSD nan tout bagay nan RSD nan tout bagay nan RSD nan tout bagay nan RSD nan tout bagay nan RSD nan tout bagay nan RSD nan tout bagay nan RSD nan chak respekte.

 

2.2.4.4 Eksperyans repetabilite

Pran echantiyon an menm (nimewo pakèt: 160901) poud, prepare 6 solisyon tès dapre metòd la anba 2.1.1, enjekte ak mezire, kalkile kontni an nan echinacoside, cistancheside A, verbascoside ak isoverbascoside nan chak solisyon tès, ak kalkile valè a RSD nan chak eleman.

 

2.2.4.5 Eksperyans rekiperasyon echantiyon

Peze avèk presizyon 6 echantiyon nan dezè Cistanche (nimewo pakèt: 160901) ak kontni li te ye, ajoute solisyon referans ekivalan a kontni an li te ye nan echinacoside, cistancheside A, verbascoside ak isoverbascoside, prepare solisyon tès dapre metòd la anba 2.1.1, enjekte ak mezire, ak kalkile echantiyon an mwayèn.