SIRT5-Modifikasyon Desuccinylation ki gen rapò kontribye nan pwoteksyon kersetin-induit kont ensifizans kadyak ak kadyomyosit ki gen gwo glikoz ki blese grasa Règleman Siveyans Kalite Mitokondriyo Pati 1

Tanpri kontakteoscar.xiao@wecistanche.compou plis enfòmasyon

Fibwoz myokad reprezante chanjman patolojik prensipal ki asosye ak dyabetikkardyopatiak ensifizans kadyak, epi li mennen nan diminye konfòmite myokad ak fonksyon kadyak diastolik ak sistolik. Quercetin, yon engredyan aktif nan divès plant medsin, egzèse efè terapetik kont maladi kadyovaskilè. Isit la, nou mennen ankèt sou si wi ou non SIRT5- ak IDH2-desuccinvlation ki gen rapò ak mekanis ki kache nan fibwoz myokad nan ensifizans kadyak pandan y ap eksplore dwòg ki terapetik ki gen rapò pou siveyans kalite mitokondriyo. Modèl sourit fibwoz myokad ak ensifizans kadyak, etabli pa konstriksyon aortik transverse (TAC), yo te administre ak quercetin (50 mg / kg) chak jou pou 4 semèn. Selil HL-1 yo te pretrete ak quercetin epi trete ak glikoz ki wo (30 mM) nan vitro. Fonksyon kadyak, Western blotting, PCR quantitative, analiz imunosorbent ki lye ak anzim, ak analiz imunofluoresan yo te anplwaye pou analize siveyans kalite mitokondriyo, estrès oksidatif, ak repons enflamatwa nan selil myokad yo, tandiske nivo succinylation IDH2 yo te detekte lè l sèvi avèk imunoprecipitation. Fibwoz myokad ak ensidans ensifizans kadyak ogmante apre TAC, ak fonksyon ejection kadyak nòmal. Apre tretman ki gen anpil glikoz, aktivite selil HL-1 te anpeche, sa ki lakòz twòp pwodiksyon espès oksijèn reyaktif ak anpèchman aktivite mitokondriyo respiratwa konplèks I/II ak mitokondriyo.antioksidan anzimaktivite, osi byen ke ogmante estrès oksidatif ak repons enflamatwa, dezekilib siveyans kalite mitokondriyo ak omeyostazi, ak ogmante apoptoz. Quercetin inibit fibwoz myokad ak amelyore fonksyon kadyak nan ogmante metabolis enèji mitokondriyo ak reglemante fizyon / fizyon mitokondriyo ak byosentèz mitokondriyo pandan y ap anpeche repons enflamatwa a ak blesi estrès oksidatif. Anplis de sa, TAC inibit ekspresyon SIRT5 nan nivo mitokondriyo ak ogmante succinylation IDH2. Sepandan, quercetin ankouraje desuccinylation IDH2 nan ogmante ekspresyon SIRT5. Anplis, tretman ak si-SIRT5 aboli efè pwoteksyon quercetin sou viabilite selil yo. Pakonsekan, quercetin ka ankouraje desuccinylation nan IDH2 jiska SIRT5, kenbe mitokondriyo.omeyostazi, pwoteje souritkardyomyositanba kondisyon enflamatwa, ak amelyore fibwoz myokad, kidonk diminye ensidans la nan ensifizans kadyak.

Tanpri klike la a pou w konnen plis

1. Entwodiksyon

Ensifizans kadyak se yon kondisyon ki mennen nan ranpli vantrikul oswa fonksyon ekspilsyon pwoblèm akòz divès kalite maladi kè òganik oswa fonksyonèl, epi li reprezante etap nan fen nan divès maladi kadyovaskilè, patikilyèman sa yo ki asosye ak kardyopati dyabetik. Se konsa, ensifizans kadyak refere yo kòm "dènye chan batay la nan maladi kadyovaskilè dyabetik" nan pratik klinik [1]. Nan kèk deseni ki sot pase yo, pifò rechèch te konsantre sou antretyen nan blesi dyabetik myokad, emodinamik kadyak, ak règleman nan sistèm nan islet. Yo montre dyabèt nan pasyan ki gen ensifizans kadyak rive siyifikativman pi bonè pase nan pasyan ki pa gen maladi kè kardyovaskulèr, tansyon wo oswa dyabèt. Fibwoz myokad yo vilnerab a faktè tankou estrès oksidatif, repons enflamatwa, maladi metabolis enèji mitokondriyo, ak aje selilè [2]. Kòm kòz prensipal nan renovasyon ventrikulèr [3], fibwoz myokad ka ankouraje diminye konfòmite myokad ak fonksyon kadyak sistolik ak dyastolik. Alafen, volim alontèm oswa surcharge presyon ka mennen nan ensifizans kadyak. Kidonk, pwogresyon soti nan kardyopati dyabetik rive nan ensifizans kadyak akonpaye pa fibwoz myokad grav oswa ipètrofi kadyak [4,5]. Kòm sa yo, amelyore fibwoz myokad yo te montre reta ensifizans kadyak ak amelyore fonksyon kè epi li te vin tounen yon nouvo apwòch pou trete kadyo-myopati dyabetik ak ensifizans kadyak [6].

Mitokondri, sant metabolis enèji nan selil yo, pwodui enèji atravè fosforilasyon oksidatif pou satisfè bezwen enèji ki wo nan kè a [7,8]. Anpil aktivite fizyolojik enpòtan ki fèt nan kè a, tankou kontraksyon myokad ak antretyen omeyostazi entraselilè, mande pou ATP [9-11]. Mitokondri yo gen pwòp sistèm kontwòl kalite yo pou kenbe ak retabli estrikti ak metabolis enèji nan reglemante fisyon mitokondriyo, fizyon, byogenesis, ak mitofaji [12,13]. Sistèm siveyans sa a ka pwoteje mitokondri ak kardyomyosit kont eksitasyon estrès [8,13]. Anplis, domaj myokad akòz kardyopati dyabetik ka gen rapò ak malfonksyònman mitokondriyo ki te koze pa yon move balans nan siveyans kalite mitokondriyo.

Cistanche ka amelyore iminite

Se poutèt sa, nòmal fonksyone fizyolojik kadyak mande pou mitokondri entak ak konplètman fonksyone. Vreman vre, pwodiksyon twòp nan espès mitokondriyo reyaktif oksijèn (ROS) oswa domaj nan sistèm antioksidan myokad la ki gen rapò ak ipètrofi vantrikul ak renovasyon miray, ki ka mennen nan fibwoz myokad ak ensifizans kadyak. Etid yo te revele anomali nan mòfoloji ak estrikti nan mitokondri myokad nan pasyan ki gen dyabèt melitus konplike ak ensifizans kadyak ak kardyopati dyabetik. Anplis, domaj manbràn mitokondriyo ak anomali estriktirèl yo te rapòte nan modèl kanin nan ensifizans kadyak. Diminye potansyèl manbràn mitokondriyo, nòmal mitokondriyo pèmeyabilite tranzisyon pò (mPTP) ouvèti, diminye sentèz ATP, ak twòp pwodiksyon ROS yo te detekte tou [14,15]. Pakonsekan, fè siveyans kalite mitokondriyo lè yo vize mas mitokondriyo ak omeyostazi ka itil pou anpeche estrès oksidatif ak repons enflamatwa, kidonk amelyore fibwoz [16]. Estrès oksidatif ak repons enflamatwa yo se faktè enpòtan ki pwovoke fibwoz myokad epi souvan coexist nan menm sit blesi a nan divès maladi kadyovaskilè [16,17]. Lè yon varyete de konplikasyon kadyovaskilè oswa kardyopati metabolik rive akonpaye pa blesi myokad egi oswa kwonik, sistèm iminitè a aktive, lage anpil faktè enflamatwa ki pwovoke blesi estrès oksidatif, aktive fibroblasts myokad, ak lakòz metabolis kolagen an nòmal, nekwoz selil myokad, ak tisi. koripsyon, kidonk finalman mennen nan fibwoz myokad ak ensifizans kadyak [18, 19]. Sirtuin 5 (SIRT5) distribye lajman nan nwayo a, sitoplasm, ak mitokondri. Malgre ke SIRT5 montre aktivite deacetylase, li ka kontwole siksinilasyon lizin [20]. Atravè siyal lokalizasyon N-tèminal peroxisome li yo PTS2, SIRT5 ka antre nan peroxisomes pou redwi pwodiksyon intraselilè H, O, konsa jwe yon gwo wòl nan oksidasyon selilè. Anplis, SIRT5 rapòte ankouraje desuccinylation kòm yon mekanis pwoteksyon nan enfaktis myokad egi [21-23]. Espesyalman, iskemi kadyak egi ak ipoksi ka kontwole ekspresyon SIRT5 atravè chemen PGC-l / PPAR-y, ki mennen nan desuccinylation ki vin apre nan pwoteyin kle ki enplike nan metabolis enèji cardiomyocyte, kidonk egzèse yon efè pwoteksyon sou selil sa yo [24]. Modifikasyon post-tradiksyon nan SIRT5 rive sitou nan mitokondri yo. Epitou ki rive nan mitokondri yo, NADP plis -depandan isocitrate dehydrogenase 2(IDH2) ka afekte operasyon nòmal nan glutathione-(GSH-)ki gen rapò ak sistèm antioksidan mitokondriyo a, ki gen ladan aktivite yo nan glutathione peroxidase (GPX) [25]. Anplis, IDH2 bay NADPH glutathione reduktaz ak thioredoxin reduktaz, kidonk lakòz yon efè regilasyon pou pwoteje mitokondri yo kont estrès oksidatif [26]. Sepandan, kèk etid te evalye règleman SIRT5 ak IDH2 succinylation nan ensifizans kadyak.

Quercetin se yon flavonoid ki lajman prezan nan lanati. Etid farmakolojik yo te rapòte ke quercetin ka retade domaj fonksyonèl andotelyal vaskilè ak domaj tèminal kadyak [27]. Quercetin tou gen yon wòl regilasyon nan prevansyon fibwoz myokad [28] epi li ka plis kontwole fonksyon islet. Anplis, nou te deja jwenn ke quercetin ka kontwole mitofaji ak estrès retikul andoplasmik atravè SIRT1 / TMBIM6, amelyore metabolis enèji mitokondriyo, ak pwoteje myosit kadyak imen [27]. Sepandan, mekanis regilasyon ki kache efè quercetin sou siksinilasyon SIRT5 ak efè pwoteksyon li sou selil myokad yo rete klè. Se poutèt sa, nou te ipotèz ke suksinilasyon reglemante pa SIRT5 afekte kwasans metabolik selil yo atravè siveyans kalite mitokondriyo ak omeyostazi mitokondriyo. Nou te jwenn ke sipresyon SIRT5 ka mennen nan ogmante succinylation, ki an vire afekte aktivite kardyomyosit ak fibwoz myokad.

2. Materyèl ak Metòd

2.1.Bèt ak Tretman Dwòg.

Tout pwosedi eksperimantal yo te fèt an akò ak Gid NIH pou Swen ak Itilizasyon Bèt Laboratwa yo epi yo te apwouve pa Komite Swen ak Itilizasyon bèt enstitisyonèl Shandong University of Traditional Chinese Medicine. Yon ti tan, yo te jwenn 30 sourit gason sovaj C57BL/6] (8-semèn fin vye granmoun) nan Sant eksperimantal bèt nan Shandong University of Traditional Chinese Medicine ak owaza divize an twa gwoup: (1) operasyon simulation, ( 2)transverse aortic constriction(TAC), ak (3)TAC plis quer-cetin. Gwoup TAC plis quercetin te administre intraperitoneally ak 50mg/kg quercetin chak jou (Shanghai Yuanye Biotechnology Company, Shanghai, Lachin) pou 15 jou. Yo te bay sourit Sham ak TAC ak yon piki entraperitoneal ki koresponn nan saline nòmal.

2.2. Etablisman Modèl bèt la.

Yon modèl ensifizans kadyak konjestif te etabli lè l sèvi avèk TAC [29]. Yon ti tan, sourit yo te anestezi pa piki nan venn nan pentobarbital (50mg/kg; Sigma-Aldrich, St. Louis, MO, USA), epi yo te konekte yon vantilatè apre sa yo te fè torakotomi. Aorta a te ligated ak yon fil swa 8-0 ant atè dwat la ak atè karotid komen gòch epi redwi a 25-30 pousan nan zòn orijinal la kwa ak yon zegwi 27 G.

2.3. Kilti Selil.

Sant eksperimantal Shandong University of Traditional Chinese Medicine te bay HL{{0}} myosit. Selil yo te kiltive nan yon mwayen Claycomb ki gen 10 pousan serom fetis, 100U/mL penisilin/streptomycin, 0.1 mM noradrenalin, ak 2mM L-glutamin. Selil yo te kiltive nan 37 degre ak 5 pousan CO, [30]. Glikoz te achte nan men Sigma-Aldrich. Quercetin te jwenn nan Shanghai Yuanye Biotechnologie Konpayi an. Selil yo te randomized nan kat gwoup eksperimantal: (1) kontwòl, (2) gwo glikoz (HG), (3) HG plis querce-tin, ak (4) HG plis quercetin plis si-SIRT5. Selil HL-1 yo te trete ak glikoz ki wo (30mmol/L) ak quercetin (150mg/L). Pou ti transfè RNA entèferans (siRNA), yo te itilize Lipofectamine RNAiMAX (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA) pou transfè 50nM siRNA nan selil HL-1 24h anvan tretman an. Tout siRNA yo te jwenn nan Jikai Biyoloji (Shanghai, Lachin).

2.4. Sitometri koule.

Pou analize nivo apoptoz la, selil HL-1 yo te resuspend nan saline ki gen tanpon fosfat (Gibco, Grand Island, NY, USA), yo te fikse ak 70 pousan etanòl pou 24 èdtan, yo te lave yo, epi yo te mete yo nan 50ug/mL yòd propidium. solisyon. Apre 30min, selil yo te resuspend, epi yo te fè sitometri koule pou detekte apoptoz jan sa dekri anvan an.

2.5.Essay Viabilite Selil.

Yo te evalye viabilite selil HL-1 yo lè l sèvi avèk yon tès MTT. Selil yo te simen nan 12-plak pi nan yon dansite 50,000 selil/pi. Apre 22h, selil yo te konplete ak mwayen kwasans fre ak enkubasyon pou 24h, apre sa yo te detèmine viabilite selil yo pa tès MTT [31].

2.6.Anzim-Linked Immunosorbent Assay.

Yo te itilize yon twous tès imunosorban ki lye ak anzim (ELISA) pou analize quantitativement aktivite anzim antioksidan ak faktè enflamatwa nan omojene tisi myokad sourit ak selil HL-1. Yon ti tan, yo te kolekte omojene tisi myokad yo ak sispansyon selil HL-1.

2.7.Toute konsomasyon oksijèn.

Pousantaj konsomasyon oksijèn selil HL-1 nan diferan gwoup yo te mezire lè l sèvi avèk yon twous tès presyon mitokondrial Seahorse XF (Agilent Technologies, Santa Clara, CA, USA), alòske yo te mezire to asidifikasyon ekstraselilè ak yon glikoliz Seahorse XF. twous tès to (Agilent Technologies). Tou de tès yo te fèt dapre enstriksyon manifakti a. 2.8. An tan reyèl PCR Quantitative. Total RNA te ekstrè lè l sèvi avèk TRIzol reyaktif, ak entegrite RNA te analize pa elektwoforèz jèl agarose. Premye-seksyon cDNA te sentèz lè l sèvi avèk yon iScript "cDNA sentèz twous (1 μL RNA total; Bio-Rad, Hercules, CA, USA) nan yon volim total de 20μL. Yo te itilize yon sistèm CFX96 RT-PCR (Bio-Rad). analize nivo cDNA de fwa lè l sèvi avèk 500 × 10-nM primè espesifik. Nan chak eksperyans, yo te itilize kontinyèlman dilye cDNA melanje pou evalye efikasite analiz PCR la. Ekspresyon jèn yo te quantifye parapò ak mwayen jeyometrik jèn k ap okipe kay la. ekspresyon anplifye nan menm echantiyon ak jèn etid la, epi ekspresyon jèn yo te detèmine lè l sèvi avèk 2-AACT la.

2.9.Estatistik analiz.

Done yo eksprime kòm mwayen an ± devyasyon estanda nan mwayèn nan. Yo te itilize analiz yon sèl-fason nan divèjans pou verifye diferans ki genyen ant plizyè gwoup, epi yo te fè tès post hoc Student-Newman-Keuls. De-tailed t-tès yo te itilize pou konpare de gwoup. Yo te fè analiz estatistik ak lojisyèl SPSS 22.0 (SPSS, Inc., Chicago, IL, USA). Siyifikasyon estatistik te fikse nan P<>

3. Rezilta yo

3.1. Quercetin soulaje ipètrofi myokad ak malfonksyònman kadyak apre TAC. C57BL/6J sourit gason yo te owaza divize an twa gwoup (kontwòl, operasyon TAC, ak TACoperation plis quercetin). Quercetin te administre nan gwoup TAC plis quercetin (50mg/kg, chak 12h). Sèt semèn apre TAC, apeprè 20 pousan sourit nan gwoup modèl TAC ak 10 pousan nan gwoup tretman quercetin te mouri. Konpare ak sa ki nan gwoup operasyon simulation, fonksyon kadyak nan gwoup TAC deteryore konsiderableman apre 3 semèn (Figi 1 (a) -1 (i)). Sepandan, fonksyon kadyak nan sourit trete ak quercetin te amelyore konpare ak sourit ki pa trete ak quercetin (Figi 1(a)-1()).

Lè sa a, nou evalye ipètrofi myokad nan sourit TAC apre TAC plis tretman quercetin lè l sèvi avèk ematoksilin ak eozin, WGA, ak tach TUNEL 8 semèn apre TAC (Figi 1(j)-1(m)). Konpare ak sa ki nan gwoup operasyon simulation, degre nan ipètrofi kadyak ak ipèrtrofi kardyomyosit oswa lanmò nan sourit TAC te siyifikativman ogmante (Figi 1 (j) -1 (m)); sepandan, efè sa a te siyifikativman diminye apre tretman quercetin (Figi 1 (j) -1 (m)).

3.2. Quercetin diminye fibwoz myokad ak nivo enflamatwa apre TAC.

Nou detekte nivo kolagenaz I nan myokardium diferan gwoup pa imunohistochimi. Nivo kolagenaz I/II nan myokad gwoup modèl la te ogmante siyifikativman apre TAC (Figi 2 (h) -2 (i)); efè sa a te ranvèse pa quercetin (Figi 2(h)-2(I). Nou te evalye tou degre nan fibwoz myokad nan diferan gwoup pa tach Masson. Degre nan fibwoz myokad nan gwoup modèl la te).

siyifikativman ogmante apre TAC; tretman ak quercetin ranvèse fenomèn sa a ak pwoteje tisi myokad la (Figi 2 (a) ak 2 (b)).

Fibwoz myokad se yon pwosesis patolojik konplèks ki te koze sitou pa twòp presyon alontèm ak reyaksyon enflamatwa. Anpil faktè pro-enflamatwa, tankou TGF-, TNF-, IL-13, IL{-18, ak MMPs, ka patisipe nan fibwoz myokad. Pakonsekan, nou te detekte abondans nan chwazi faktè pro-enflamatwa (TNF-, IL-13, ak IL{-18) ​​pa ELISA, pandan y ap nivo transkripsyon nan TGF- ak MMP{-9 yo te detekte pa RT-PCR. Nivo ekspresyon TNF-, IL-13, ak IL-18 ak nivo mRNA nan TGF- ak MMP-9 nan gwoup modèl la te pi wo pase sa yo nan gwoup kontwòl la (Figi 2( c)-2(g)). Quercetin ranvèse fenomèn sa a ak anpeche enflamasyon (Figi 2(c)-2(g)).Pou verifye si mekanis terapetik quercetin gen rapò ak SIRT5 ak IDH2, nou detekte mRNA ak ekspresyon pwoteyin SIRT5 ak IDH2. Nivo ekspresyon mRNA ak pwoteyin yo te siyifikativman anpeche apre TAC (Figi 2(m)-2(p). Quercetin ranvèse efè sa yo, ki endike ke quercetin vize SIRT5 ak IDH2 pou pwoteje kont fibwoz myokad ak ensifizans kadyak (Figi 2(). m)-2(p)).

Pou plis verifye mekanis pwoteksyon quercetin sou fibwoz myokad oswa yon blesi myokad apre TAC, nou te envestige pwodiksyon ROS nan tisi myokad la epi nou te jwenn ke li te siyifikativman ogmante apre TAC (Figi 2 (k) ak 2 (I), tandiske quercetin inibe). ROs overproduction(Figures 2(k) ak 2()).Rezilta sa yo sijere ke efè pwoteksyon quercetin sou fibwoz myokad oswa blesi myokad ki gen rapò ak règleman omeyostaz redox.

3.3. Quercetin diminye blesi enflamasyon HL-1 ki gen gwo glikoz nan reglemante estrès oksidatif. Rezilta eksperimantal yo mansyone pi wo a te montre kercetin ka amelyore fonksyon kadyak ak anpeche nivo fibwoz myokad nan sourit apre TAC. Efè pwoteksyon li ta ka gen rapò ak règleman an nan SIRT5 ak faktè anti-enflamatwa; sepandan, si wi ou non evènman sa yo rive atravè yon mekanis regilasyon dirèk rete klè. Pou etidye mekanis regilasyon quercetin nan kondisyon ki gen gwo glikoz, nou pwovoke HL-1 blesi selil pa glikoz segondè, trete selil sa yo ak quercetin, epi frape SIRT5 ak siRNA. Aktivite selilè yo te detekte lè l sèvi avèk MTT ak CCK-8 esè, nivo apoptoz yo te detekte lè l sèvi avèk sitometri koule, ak aktivite superoksid dismutase (SOD), GSH, TrxR, ak malondialdehyde (MDA) yo te detekte lè l sèvi avèk ELISA. Nou itilize CCK-8 pou analize viabilite selil HL-1 yo anba diferan konsantrasyon glikoz. Jan yo montre nan Figi 3 (j), viabilite selil yo diminye anpil nan yon konsantrasyon wo-glikoz nan 30mM. MTT ak flow cytometry revele ke kondisyon ki wo glikoz inibit aktivite selil, ogmante apoptoz ak pwodiksyon ROS, ak akselere lanmò selil (Figi 3 (a) -3 (e)). Konpare ak sa ki nan gwoup kontwòl la, eksitasyon ki wo glikoz ogmante aktivite MDA ak anpeche aktivite anzim antioksidan, tankou SOD, GSH, ak TrxR (Figi 3(f)-3(i)).

Quercetin inibit aktivite MDA, ogmante aktivite SOD, GSH, ak TrxR (Figi 3(f)-3(I), anpeche apoptoz ak pwodiksyon ROS (Figi 3(a)-3(e)) )), ak amelyore aktivite selil (Figi 3 (c)). Sepandan, si-SIRT5 plis tretman quercetin plis amelyore aktivite MDA a, ogmante nivo apoptoz ak pwodiksyon ROS, ak anpeche aktivite selilè (Figi 3 (a) { {8}}(i)). Ansanm, rezilta sa yo montre kercetin kontwole move balans nan eta redox ki ankouraje pa glikoz ki wo epi li pwoteje kardyomyosit HL-1. Efè regilasyon sa a ka gen rapò dirèkteman ak SIRT5.

3.4. Quercetin Diminye HL-1 Enflamasyon Enflamasyon Pwovoke Gwo Glikoz nan Pwomosyon Modifikasyon Desucinylation ki gen rapò ak SIRT5-.

Estrès oksidatif afekte dirèkteman estrikti ak fonksyon selil myokad yo epi li ka dirèkteman aktive molekil siyal ki asosye ak fibwoz myokad, tankou MMPs, ki mennen nan ipètrofi ak apoptoz nan selil myokad, ki gen rapò ak pwodiksyon twòp nan ROS, akonpaye pa yon reyaksyon enflamatwa. . Pwodiksyon ROS depase ka domaje makromolekil mitokondriyo nan oswa toupre sit fòmasyon yo. Domaj estriktirèl mitokondriyo ak efondreman fonksyonèl nan ensifizans kadyak yo gen rapò ak nivo ogmante nan ROS, prensipalman manifeste kòm ogmante oksijene lipid mitokondriyo ak diminye aktivite anzim nan konplèks respiratwa mitokondriyo I, III, ak IV. Sepandan, metabolis enèji nan

Figi 2: Quercetin(Que) diminye fibwoz myokad ak nivo enflamatwa apre konstriksyon aortik transverse (TAC). (a) Tach Masson. (b) Zòn fibrotik (pousan). (ce) Nivo ekspresyon IL-18, TNF-, ak IL-13 yo te detekte lè l sèvi avèk ELISA. (f, g) ekspresyon mRNA nan MMP_9 ak TGF-B te detekte lè l sèvi avèk RT. -PCR.(hj)Ekspresyon collagenase(collage) mwen/malad te detekte lè l sèvi avèk imunohistochimi. (k, I) Chanjman ROS. (mp) Pwoteyin / RNA ekspresyon SIRT5 ak IDH2 te detekte.Mean± SD; *P<>

mitokondri yo reglemante pa suksinilasyon. Rezilta eksperimantal anvan yo te etabli ke efè terapetik quercetin sou fibwoz myokad ak ensifizans kadyak gen rapò ak SIRT1.

Nan etid aktyèl la, analiz de nivo mRNA SIRT5 ak IDH2 nan selil HL-1 ki gen gwo glikoz ak iminopresipitasyon te montre ekspresyon IDH2 nan selil HL-1 yo te siyifikativman anpeche apre eksitasyon ki gen anpil glikoz, tandiske nivo suksinilasyon IDH2 te ogmante anpil (Figi 4(a)-4(d)). Anplis, apre entèvansyon quercetin, ekspresyon mRNA SIRT5 ak IDH2 ak nivo desuccinylation IDH2 ogmante (Figi 4 (a) -4 (d)). Pou plis verifye efè siksinilasyon SIRT5-medyatè sou chèn respiratwa mitokondriyo a, nou te evalye konplèks respiratwa mitokondriyo I, III, ak IV. Apre eksitasyon ki gen anpil glikoz, nivo konplèks sa yo te diminye; sepandan, quercetin ranvèse fenomèn sa a (Figi 4(e)-4(g)).

Efè regilasyon quercetin sou konplèks respiratwa mitokondriyo ak succinylation IDH2 te tou anpeche apre tretman si-SIRT5 (Figi 4 (a) -4 (g)). Se poutèt sa, SIRT5-desuccinylation nan IDH2 ka yon mekanis regilasyon enpòtan nan fibrosis myokad ak ensifizans kadyak. Anplis, quercetin ka amelyore repons enflamatwa a ak blesi estrès oksidatif atravè SIRT 5-desuccinylation nan IDH2; sepandan, mekanis regilasyon nan omeyostazi mitokondriyo mande pou plis analiz.

3.5. Quercetin diminye blesi enflamasyon HL-1 ki gen gwo glikoz pa reglemante metabolis enèji mitokondriyo ak NLRP3.

Se metabolis enèji mitokondriyo reglemante pa suksinilasyon. Sepandan, ensifizans kadyak oswa fibwoz myokad ki te koze pa divès faktè enplike nan yon mekanis patolojik enpòtan nan estrès oksidatif ak maladi metabolis enèji mitokondriyo nan eta a enflamatwa. Se poutèt sa, nou verifye efè regilasyon quercetin sou metabolis enèji mitokondriyo ak omeyostazi. Analiz imunofluoresan te montre ke NLRP3 te eksprime trè apre eksitasyon wo-glikoz, ki te ranvèse pa quercetin (Figi 5 (f) ak 5 (g)). Anplis, tretman si-SIRT5 elimine efè regilasyon quercetin sou NLRP3 (Figi 5 (f) ak 5 (g)).

Règleman omeyostaz mitokondriyo gen rapò ak deklanchman NLRP3. An reyalite, NF-xB ka limite aktivasyon NLRP3 lè li elimine mitokondri ki domaje [33, 34]. Nou te jwenn kercetin afekte omeyostazi mitokondriyo pa reglemante NLRP3. HL ki gen anpil glikoz -1

selil yo montre maladi grav nan metabolis enèji mitokondriyo. Nivo ATP, respirasyon fondamantal, respirasyon maksimòm, ak rezèv respiratwa nan mitokondri yo te redwi anpil. Anplis, ouvèti mPTP a te ogmante anòmalman (Figi 5(a)-5(e)). Quercetin ranvèse efè sa yo ak retabli metabolis enèji mitokondriyo ak fèmti mPTP (Figi 5 (a) -5 (e)). Sepandan, tretman si-SIRT5 ranvèse règleman ki pwovoke pa quercetin sou metabolis enèji mitokondriyo ak mPTP (Figi 5 (a) -5 (e)). Se poutèt sa, pwodiksyon depase ROS akonpaye pa enflamasyon ak estrès oksidatif ka mennen nan mitokondriyo blesi estrès oksidatif, ak NLRP3 ka kominike avèk metabolis enèji mitokondriyo. Mitokondri yo ka "cheval Trojan" nan enflamasyon, ki se ki konsistan avèk rezilta yo nan yon etid anvan [35].

Atik sa a soti nan Hindawi Oxidative Medicine and Cellular Longevity Volim 2021, Atik ID 5876841, 17 paj https://doi.org/10.1155/2021/5876841