Etid sou efè anti-aje Calcitriol sou selil asasen moun natirèl nan vitro Ⅱ

3. Rezilta yo

Etid sa a konsantre sou efè anti-aje kalsitriol sou selil NK yo. Rezilta yo te montre ke Calcitrioldiminye ekspresyon de biomarkers ki gen rapò ak aje ki gen ladan CD16, TIM3, PD-1, KIR, akogmante ekspresyon NKG2A nan selil NK yo. li touanpeche pwopagasyon selil NKepiarete yo nan faz G1. Calcitrioldiminye liberasyon faktè enflamatwatankou IL-5, IL-13, IFN- , ak TNF- e li te gen sètenefè antioksidasyon, ki ta ka kontribye nan liefè anti-aje.

Klike la a pou w konnen efè antioksidasyon Cistanche epi jwenn yon echantiyon

3.1 Calcitriol ranvèse ekspresyon makè aje sifas yo, ralanti anplifikasyon selil NK, epi kenbe selil NK yo nan faz G1.

Selil NK senesan yo te montre gwo ekspresyon de biomarkers ki gen rapò ak aje, tankou CD16, PD-1, TIM3, ak KIR, ak ekspresyon ki ba nan NKG2A. Nou te jwenn ke nivo ekspresyon nan biomarkers ki gen rapò ak aje NKG2A yo (Figi 1a) (*P <0.05) ogmante, pandan y ap ekspresyon CD16 (Figi 1b), TIM3 (Figi 1c). ), PD -1 (Figi 1d), ak KIR (Figi 1e) (* P <0.05) te diminye apre tretman ak kalsitriol pou 72 èdtan. Efè ranvèse yo te pozitivman korelasyon ak konsantrasyon nan kalsitriol (figi siplemantè 1).

Nou agrandi selil ki soti nan echantiyon san periferik imen an vitro. Lè sa a, nou izole selil NK yo (CD{{0}}CD56 plis) pa klasman pèl mayetik (figi 1f). Lè sa a, selil NK klase yo te kiltive ak konsantrasyon diferan nan kalsitriol oswa rapamisin pou 72 èdtan. Rezilta tach CCK8 te montre ke to kwasans selil NK trete kalsitriol yo ki gen gwo konsantrasyon (10- [7] M) te pi dousman pase gwoup kontwòl negatif (NC) (*P < {{17). }}.05) (Figi 1g). Anplis de sa, calcitriol reglemante sik selil NK. Apre tretman ak kalsitriol pou 48 èdtan, selil NK yo te montre yon gwo chanjman konsantrasyon kalsitriol nan faz G1 (* P <0.05), pandan y ap pwopòsyon selil yo nan faz G2 (#P <0.05) diminye. Pwopòsyon selil NK ki trete kalsitriol nan faz S la pa montre okenn chanjman, kèlkeswa konsantrasyon kalsitriol (Figi 1h, Figi siplemantè 2). Lè sa a, nou teste si arèstasyon faz G1 ki sòti nan kalsitriol sa a te pwovoke apoptoz selil NK epi li te jwenn ke biomarker apoptotik selil NK, imunoglobulin selil T ak domèn inhibitory tyrosine ki baze sou imunoreseptè (TIGIT), pa montre okenn chanjman enpòtan (P> 0.05). , NS) (Figi 1i). Rezilta sa yo te enplike ke adisyon kalsitriol redwi to kwasans selil NK, diminye pwopagasyon yo, epi pwovoke G1 faz arestasyon selil NK yo olye pou yo lakòz apoptoz.

3.2 Calcitriol diminye liberasyon sitokin enflamatwa nan selil NK ak anpeche sitotoksisite selil NK.

Inflammageing se yon enflamasyon kwonik ki ba-klas. Li akselere aje a nan selil NK, kòm selil NK patisipe nan enflamasyon kwonik sa a. Figi 2a montre ke nivo IL-5, IL-13, IFN-, ak TNF- siyifikativman diminye nan tout gwoup pase nan kontwòl negatif (*P <0.05). IFN- ak TNF- se byen koni cytokin pro-enflamatwa men kèk etid yo te montre tou pwopriyete pro-enflamatwa IL-5. Yo rapòte IL-13 kontribye nan diferan kalite enflamasyon mukozal, tankou opresyon alèjik, kolit ilsè, ezofaj eozinofil, ak plizyè maladi ki gen rapò ak fibwoz.

Sepandan, sitotoksisite nan selil NK sitou enplike nan liberasyon nan sitokin enflamatwa ak degranulasyon nan selil yo. Nou make selil K562 ak DIO ak ko-kilti selil DIO-K562 yo ak selil NK kalsitriol-trete pou 4 èdtan. Pousantaj DIO plis PI plis selil yo te pi ba nan tout gwoup rapò efèktè (E)/sib (T) pase nan kontwòl negatif (*P <0.05) (Figi 2b, c). Ekspresyon an dedwi nan gwoup diferansyasyon 107 (CD107) endike pi ba degranulasyon (* P <0.05) (Figi 2d). Rezilta sa yo montre anpèchman nan fonksyon NK-touye pa calcitriol.

3.3 Calcitriol aktive ekspresyon SIRT1- ∆Exon8 ak chemen SIRT1/pERK ki gen rapò ak anti-aje.

Pou mennen ankèt sou efè anti-aje kalsitriol sou selil NK, nou detekte chemen siyal ki gen rapò ak aje pa imunoblot. Yo te fè analiz Western blotting pou evalye nivo ekspresyon VDR, SIRT1-∆Exon8, SIRT1, ak PERK nan selil NK trete kalsitriol yo. Analiz estatistik te montre ke calci triol aktive VDR/SIRT1/pERK aks nan gwo konsantrasyon. Pandan se tan, kalsitriol aktive ekspresyon SIRT 1-∆Exon8 (*P <0.05). (Figi 3a).

Figi 1. Fenotip ki gen rapò ak aje, ekspansyon selil, ak analiz sik selil NK selil yo. (ae) Selil NK imen yo te trete ak kalsitriol oswa rapamisin pou 72 èdtan te montre biomarkers selil sa yo: gwoup asasen natirèl 2 manm A (NKG2A), gwoup diferansyasyon 16 (CD16), imunoglobulin selil T ak pwoteyin 3 ki gen domèn mucin ( TIM3) te pwograme lanmò selil-1 (PD-1), ak asasen reseptè imunoglobulin (KIR), ki te gen rapò ak aje. 50 nM rapamicin (RAPA) te itilize kòm kontwòl pozitif. n=3 pou chak gwoup. *P <0.05 ak **P <0.01 yo te konpare ak gwoup kontwòl negatif (NC). (f) Selil NK (adwat) izole nan selil mononikleyè san periferik moun (PBMCs, agoch) pa klasman mayetik pèl. (g) Analiz pwopagasyon selil yo mezire pa twous konte selil 8 (CCK8). (h) Efè kalsitriol oswa rapamicin sou sis selil la nan klas nk selil apre tretman pou 72 èdtan, wp 0.0, 0.05, ak fp < 0.05 te endike siyifikatif la. diferans nan faz G1, S, ak G2, respektivman. Tout gwoup yo te konpare ak NC, respektivman. n=3. ) Pousantaj T cellimmunoa globulin ak imunoreceptor tyrosine ki baze sou inhibitory motif(M) domèn (TGI)-pozitif NK cels apre tretman ak kalsitriol oswa rapamycin pou 72 h.*p <0.05 ak **p <0.01 yo te konpare ak NC. n=3.

3.4 Calcitriol reziste aje a nan selil NK pwovoke pa estrès oksidatif nan vitro

Li se lajman aksepte ke aje ki te koze pa akimilasyon domaj oksidatif akòz gwo kantite prèv yo te jwenn sou ane yo [31]. Nou kiltive selil NK yo ak diferan konsantrasyon H2O2 pou 24 èdtan epi nou jwenn ke 1{{1{{20}}}}0 μM se konsantrasyon ki pi pre a dòz medyàn letal (LD50) (Figi 3b) . Ekspresyon TIM3 nan popilasyon selil NK la ogmante pa adisyon H2O2, pandan y ap ekspresyon an diminye apre tretman ak kalsitriol (* P <0.05) (Figi 3c). Anplis de sa, selil NK aje yo te tache ble nan prezans -galactosidase. Koulè ble sa a nan selil yo se yon karakteristik espesifik nan selil senesan. Analiz estatistik te demontre ke selil NK ki pa trete yo gen mwens aktivite selilè -galaktozidaz, pandan y ap selil NK yo ekspoze a H2O2 montre aktivite galaktozidaz ki wo. Calcitriol redwi - galactosidase-pozitif popilasyon an, ki endike prezans nan mwens selil aje (* P <0.05) (Figi 3d). Diminye potansyèl manbràn mitokondriyo yo te obsève tou nan yon varyete selil aje ki soti nan plizyè espès mamifè. Nou evalye potansyèl manbràn mitokondriyo selil NK yo nan etid sa a. Rezilta estatistik yo te montre ke H2 O2 siyifikativman diminye aktivite selilè selil NK yo konpare ak selil ki pa trete yo, pandan y ap calcitriol ogmante domaj ki te koze pa H2 O2 (* P <0.05) (Figi 3e).

Figi 2. Efè kalsitriol sou fonksyon selil NK yo. (a) Analiz de cytokine ki te pibliye pa kalsitriol-trete selil NK yo nan 48 h. b) Rezilta klasman selil ki aktive fluoresans (FACS) yo te montre selil K562 mouri ki make pa 3, 3 -octadecyl-oxacarbocyanineDlO) ak yodid propidium (P). Selil K562 yo te ko-kilti ak diferan rapò selil Nk trete kalsitriol. pou 4h. (C) FACSinalysis nan selil K562 ki mouri nan tès touye. (d) Efè degranulasyon selil Nk trete yo nan tès touye yo. n=3 pou eaciyroup. *p <0.05 ak **p < 0.01 yo te konpare ak NC

3.5 Calcitriol reziste apoptoz selil NK ki te pwovoke pa estrès oksidatif nan vitro

Apre sa, nou mezire kantite selil apoptotik yo. Rezilta sikometri koule yo te montre ke tretman ak 100 μM H2O2 pou 24 èdtan te mennen nan apoptoz enpòtan nan selil NK yo. Sepandan, tretman ak kalsitriol diminye rapò apoptotik (* P <0.05) (Figi 4a). Tout rezilta ki anwo yo te demontre rezistans nan kalsitriol kont estrès oksidatif ki te koze pa H2O2. Sepandan, nou detekte pwoteyin apoptotik nan selil NK anba estrès oksidatif. Anvan tretman ak H2O2, yo te ajoute 10- [7] M calcitriol nan selil NK yo pou 24 èdtan. Nivo pwoteyin ki gen rapò ak apoptoz, kaspas-3 p17 ak kaspas-3 p20, ogmante anpil apre tretman ak H2O2. Calcitriol diminye apoptoz H2O2-sòti ak downregulated ekspresyon de caspase-3, p17, ak kaspase-3 p20 (*P <0.05) (Figi 4b). Rezilta sa yo endike ke calcitriol reziste apoptoz pwovoke pa H2O2.

Figi 3. Laefè anti-ajenan kalsitriol sou selil NK. (a) Ekspresyon reseptè vitamin D (VDR), sirtuin 1 (SIRT1), SIRT1- ∆Exon8, ak pwoteyin kinaz R-like retikul kinaz endoplasmik (pERK) nan selil NK yo te detekte pa analiz Western blot. apre tretman ak kalsitriol pou 48 èdtan. Glyceraldehyde -3-phosphate dehydrogenase (GAPDH) te itilize kòm kontwòl chajman an. Dyagram ba ki montre rezilta blotting lwès yo (n=3). *P <0.{{10}}5 ak **P <0.01 te konpare ak NC (n=3). (b) Koub mòtalite dòz selil NK apre tretman ak oksijene idwojèn (H2O2) pou 24 èdtan. (c) Pousantaj selil TIM3 ki montre gwo ekspresyon apre tretman ak 100 μM H2O2 pou 24 èdtan. (d) Tach galactosidase ki asosye ak senesans ak rezilta analiz yo. Selil senesan yo te tache an ble epi yo te endike pa flèch wouj. Ba echèl, 50 μm. (e) Selil NK yo te tache ak Hoechst ak Chloromethyl-X-Rosamine (CMXRos) pou detèmine kote selil la ak potansyèl manbràn mitokondriyo. Selil ki aje ak apoptotik yo te Hoechst plis CMXRos- epi yo endike pa flèch blan. Ba echèl, 50 μm. Analiz estatistik te montre entansite fluoresans relatif. *P <0.05 ak **P <0.01 yo te konpare ak gwoup H2O2 nan figi C, D, ak E (n=3).

Figi 4. Efè anti-apoptotik kalsitriol sou selil NK yo. (a) Efè anti-apoptotik kalsitriol nan H2O2-pwovoke blesi. Analiz FACS te montre pousantaj selil NK apoptotik apre tretman ak 100 μM H2O2 pou 24 èdtan. (b) Nivo ekspresyon caspase -3 p20 ak caspase -3 p17 nan selil NK yo te detekte pa analiz Western blotting apre tretman ak 100 μM H2O2 pou 24 èdtan. GAPDH te itilize kòm kontwòl chajman an. Dyagram ba ki montre rezilta blotting lwès yo (n=3). *P <0.05 te konpare ak gwoup H2O2.

4. Diskisyon

Entèraksyon alontèm ant enflamasyon ak estrès oksidatif se yon faktè enpòtan nan aje. Anplis de sa, enflamasyon ak estrès oksidatif yo se sinèrji [32]. Depase ROS ki te pwodwi pa estrès oksidatif atake selil kò yo. Pandan pwosesis sa a, faktè enflamatwa yo pibliye pa sistèm iminitè a aktive pou touye selil yo nòmal, ki mennen nan plis jenerasyon ROS. Mank kalsitriol ka lakòz maladi otoiminitè, maladi metabolik kwonik, ak timè. Sepandan, yo konnen ti kras sou efè anti-aje kalsitriol sou sistèm iminitè a, espesyalman sou selil NK.

Nan etid sa a, nou te envestige efè anti-aje kalsitriol sou selil NK yo. Nou te jwenn ke calcitriol ogmante ekspresyon NKG2A, pandan y ap diminye ekspresyon KIR nan vitro. CD56− CD16 plis sou-popilasyon selil NK, ki gen rapò ak enflamasyon kwonik, ogmante siyifikativman nan granmoun aje yo [33]. Se poutèt sa, rediksyon nan ekspresyon CD16 pwovoke pa kalsitriol ta ka atribiye a efè anti-enflamatwa li yo. Yo rapòte TIM-3 ak PD-1 yo se reseptè inhibiteur ak deplesyon selil NK yo. Etid nou an te montre ke cal citriol te kontwole nivo ekspresyon TIM-3 ak PD{-1 epi anpeche apoptoz selil NK yo.

Anplis de sa, kalsitriol anpeche ekspansyon selil NK epi kenbe popilasyon selil NK nan faz G1 nan vitro. Sepandan, selil yo nan faz S la pa te afekte. TIGIT, ke yo rekonèt kòm yon faktè pòs nan selil NK, te rete san okenn chanjman. Rezilta sa yo endike ke Figi 4. Efè anti-apoptotik kalsitriol sou selil NK yo. (a) Efè anti-apoptotik kalsitriol nan H2O2-pwovoke blesi. Analiz FACS te montre pousantaj selil NK apoptotik apre tretman ak 100 μM H2O2 pou 24 èdtan. (b) Nivo ekspresyon caspase -3 p20 ak caspase -3 p17 nan selil NK yo te detekte pa analiz Western blotting apre tretman ak 100 μM H2O2 pou 24 èdtan. GAPDH te itilize kòm kontwòl chajman an. Dyagram ba ki montre rezilta blotting lwès yo (n=3). *P <0.05 te konpare ak gwoup H2O2. BIOENGINEERED 6851calcitriol pa te mennen nan lanmò nan selil NK, men li sèlman ralanti vitès ekspansyon selil NK yo.

Li byen konnen ke enflamasyon mennen nan iminosenescence [34,35]. Anplis de sa, nou te jwenn ke kalsitriol redwi nivo IL-5, IL-13, IFN-, ak TNF- nan selil NK yo. Sitotoksisite nan selil NK se an pati medyatè pa liberasyon an nan faktè enflamatwa [36]. Anplis, te gen yon diminisyon nan mòtalite a nan selil timè K562 ak degranulasyon nan selil NK. Rezilta sa yo te nan liy ak atant nou yo. Rapamicin se yon dwòg byen li te ye ki diminye to metabolik la pou anpeche aje [37] ki itilize kòm kontwòl pozitif nan etid sa a. Li lakòz imunosuppresyon ak ogmante risk potansyèl pou timè ak fado timè. Chay sa a te konfime nan modèl sourit kansè nan tete [38]. Si calcitriol montre efè ki sanble ak rapamicin rete enkoni. Plis etid sou bèt ak klinik yo ta dwe fèt pou verifye efè yo nan kò imen an.

Finalman, nou etidye efè kalsitriol sou senesans antioksidan. Resveratrol, yon dwòg ki byen koni anti-aje, ka downregulate chemen NF-κB a pa aktive SIRT1/PERK aks la. Yo te montre downregulation sa a tou benefisye nan maladi neurodegenerative ak maladi kadyovaskilè [39]. SIRT1 deacetylation asosye ak kontwòl metabolik ak byogenesis mitokondriyo. Nan kalite règleman sa a, nivo SIRT1 ki wo yo ka ankouraje akimilasyon reseptè gamma coactivator -1 alpha (PGC-1) ki aktive peroxisome proliferatè nan nwayo a, ki lakòz transkripsyon jèn ki nesesè pou fonksyon mitokondriyo [40]. Anplis de sa, SIRT1 siprime sib mamifè rapamicin (mTOR) siyal chemen an, ki ka pwoteje nè yo ak reziste aje nan sèvo nan sourit [41]. Nan etid sa a, nou idantifye yon wout regilasyon menm jan an pou calcitriol. Calcitriol aktive SIRT1 atravè VDR epi ogmante aks SIRT1/pERK.

Anplis de sa, nou jwenn kalsitriol ogmante ekspresyon SIRT 1-∆Exon8. Estrès yo konnen kòm yon faktè regilasyon nan SIRT1-∆Exon8. Malgre ke SIRT1-∆Exon8 tèt li montre aktivite deacetylation p53 redwi, li egzèse yon efè aditif deacetylation sou p53 lè eksprime ansanm ak tout longè SIRT1 [42]. Efè sa a endike fonksyon anti-apoptotik kalsitriol sou selil NK yo. Sepandan, wòl SIRT1-∆Exon8 nan chemen ki gen rapò ak laj rete yo dwe pi byen konprann. Depi n bès nan SIRT1 ta ka akòz domaj oksidatif [43], nou te etabli yon modèl selil NK ki aje grav nan vitro lè l sèvi avèk H2O2. Aje oksidatif ki pwovoke pa H2O2 ogmante ekspresyon TIM3 ak aktivite -galactosidase nan selil NK yo. Nou te jwenn ke calcitriol reziste domaj oksidatif epi li kenbe aktivite mitokondriyo ak viabilite selil NK selil yo pandan y ap anpeche apoptoz selil. Sepandan, calcitriol poko idantifye kòm yon dwòg anti-aje nan medikaman klinik kòm plis prèv ki nesesè konsènan efè anti-aje dwòg sa a nan vivo. An rezime, nou bay prèv preliminè pou enplike efè anti-aje kalsitriol sou selil NK nan vitro. Nou kwè ke efè dwòg sa a ta dwe plis eksplore nan pwochen bèt ak etid klinik.

5. Konklizyon

Nan etid sa a, nou te demontreefè anti-ajenan kalsitriol sou selil NK. Calcitriol ranvèse ekspresyon debiomarqueurs ajesou selil NK. Li ralanti anplifikasyon NK epi li kenbe yo nan faz G1. Anplis de sa, kalsitriol inibit liberasyon an nan sitokin enflamatwa ak desann-reglemante degranulation nan selil NK. Aktivasyon SIRT1-∆Exon8 ak VDR/SIRT1/pERK aks pa calcitriol ta ka mekanis prensipal efè anti-aje kalsitriol ki baze sou tout sa ki anwo yo. Finalman, calcitriol reziste senesans oksidatif nan selil NK nan vitro. Plis etid yo ta dwe konsantre sou bèt ak rechèch klinik.

Pwen esansyèl

(1) Calcitriol diminye ekspresyon biomaketè ki gen rapò ak laj ki gen ladan CD16, TIM3, PD-1, KIR, epi ogmante ekspresyon NKG2A selil NK yo. (2) Calcitriol te kapab anpeche pwopagasyon selil NK epi arete yo nan faz G1. (3) Calcitriol diminye liberasyon gwo faktè enflamatwa tankou IL-5, IL{-13, IFN- ak TNF- nan selil NK.(4) Efè anti-aje kalsitriol sou selil NK kapab kapab reyalize atravè chemen siyal Sirt1- pERK.

Rekonesans Nou ta renmen remèsye tout manm pèsonèl yo nan gwoup nou an pou sipò yo ak Komite Shenzhen Syans ak Teknoloji Inovasyon pou sipò finansman yo pou etid sa a.

Finansman Travay sa a te sipòte finansyèman pa Shenzhen Syans ak Teknoloji Inovasyon Komite (JCYJ20170412155231633), Shenzhen Key Medical Discipline Construction Fund (No SZXK062), Chengdu Wecistanche Biotech, ak Sanming Pwojè Medsin nan Shenzhen (No SZSM202011010); Shenzhen Syans ak Teknoloji Inovasyon Komite [JCYJ20170412155231633]; Shenzhen kle medikal disiplin konstriksyon fon [No. SZXK062]; Sanming Pwojè Medsin nan Shenzhen [No. SZSM202011010].

Apwobasyon etik Tout pwosedi yo te apwouve pa Komite Etik nan Lopital Shenzhen Luohu Pèp la (ZLNK 12/2019, Shenzhen, Lachin). Yo te jwenn konsantman enfòme pou eksperimantasyon ak echantiyon imen.

Deklarasyon divilgasyon Tout otè yo te apwouve soumèt maniskri sa a. Otè yo deklare ke yo pa gen okenn enterè finansye konkiran oswa relasyon pèsonèl ki te kapab enfliyanse travay yo rapòte nan papye sa a.

Referans

[1] Ovadya Y, Landsberger T, Leins H, et al. Siveyans iminitè ki gen pwoblèm akselere akimilasyon selil senesan ak aje. Nat Commun. 2018;9 (1):5435.

[2] López-Otín C, Blasco MA, Partridge L, et al. Karakteristik yo nan aje. Selil. 2013;153:1194–1217.

[3] Hodgins JJ, Khan ST, Park MM, et al. Killers 2.0: Terapi selil NK ki nan pi devan nan kontwòl kansè. J Clin Invest. 2019;129(9):3499–3510.

[4] Zhu H, Blum RH, Bjordahl R, et al. Selil NK ki sòti nan selil souch pliripotan ak CD16a ki pa clivable ki gen gwo afinite amelyore aktivite antitumoral. San. 2020;135(6):399–410.

[5] Mandal A, Viswanathan C. Natural killer cells: in health and disease. Hematol Oncol Stem Cell Ther. 2015;8(2):47–55.

[6] Le Garff-Tavernier M, et al. Selil NK imen yo montre gwo chanjman fenotip ak fonksyonèl pandan lavi a. Selil ki aje. 2010;9(4):527–535.

[7] Le Garff-Tavernier M, Béziat V, Decocq J, et al. Modèl ekspresyon nan NKG2A, KIR, ak CD57 defini yon pwosesis pou CD56dim NK-selil diferansyasyon dekonekte ak edikasyon NK-selil. San. 2010;116 (19):3853–3864.

[8] Manser AR, Uhrberg M. Chanjman ki gen rapò ak laj nan repètwa selil asasen natirèl: enpak sou fonksyon selil NK ak siveyans iminitè. Kansè Immunol Immunother. 2016;65(4):417–426. [9] Bi J, Tian Z. NK Cell Fatigation. Avant Immunol. 2017;8:760.

[10] Furman D, Campisi J, Verdin E, et al. Enflamasyon kwonik nan etyoloji maladi pandan tout lavi a. Nat Med. 2019;25(12):1822–1832.

[11] Liu Y, et al. Yon antikò peptide-espesifik cytomegalovirus chanje omeyostazi selil asasen natirèl epi li pataje nan plizyè maladi otoiminitè. Mikwòb lame selilè. 2016;19(3):400–408.

[12] Campus X, Pera A, Solana R, et al. Selil NK nan aje ki an sante ak maladi ki asosye ak laj. J Biomed Biotechnol. 2012;2012:195956.

[13] Liu Y, Mu R, Gao YP, et al. Efè aje sou popilasyon selil nk ak pwopagasyon yo nan kondisyon kilti ansyen vivo. Patòl Selil Anal (Amst). 2018;2018:7871814.

[14] Sintov AC, Yarmolinsky L, Dahan A, et al. Efè farmakolojik nan vitamin D ak analog li yo: dènye devlopman yo. Dwòg Discov Jodi a. 2014;19 (11):1769–1774. [15] Halicka HD, Zhao H, Li J, et al. Atténuation de konstititif DNA domaj siyal pa

Mande plis:

Imèl:wallence.suen@wecistanche.com whatsapp: plis 86 15292862950