Etid sou efè amelyorasyon nan ekstrè glikozid feniletanoid soti nan Rouchongrong (Cistanche Deserticola) sou metabolis lipid nan fwa nan ApoE - / - Sourit ak rejim alimantè ki gen anpil grès ki baze sou reglemante ekspresyon ACOX1 - CPT2

REZIME Objektif:Pou eksplore laefè ekstrè glikozid Phenylethanoidsoti nanCistanche deserticola(PGCD) sou metabolis lipid nan ApoE- / - fwa sourit pwovoke pa yon rejim ki gen anpil grès. Metòd: 70 maleApoE- / - sourit manje ak rejim alimantè ki gen anpil grès yo te divize an 5 gwoup, gwoup modèl (MOD), gwoup kontwòl pozitif yo te bay Atorvastatin [20 mg / (kg · d)] + Ezetimibe [20 mg / (kg). ·d)](A + E), yo te bay gwoup dòz PGCD ki ba, mwayen ak segondèPGCD[250, 500, 1000 mg / (kg·d)]; yon lòt 14 sourit C57BL / 6J gason ak rejim alimantè achow yo te mete kòm gwoup kontwòl nòmal (CON). Nan fen semèn nan 12yèm, kontni an nan TG ak aktivite yo nan ALT, ak AST nan serom ak tisi fwa yo te detekte dapre enstriksyon yo opere. Tisi fwa fre yo te omojeneize ak sa ki nan asid gra synthase (FAS), acil long chèn - CoA dehydrogenase (LCAD) ak glutatyon peroksidaz (GSH - Px),superoksid dismutase (SOD)aktivite yo te teste pa ELISAmethod, pandan se tan, sa ki nan malondialdehyde (MDA) ak oksijene lipid (LPO) yo te detekte ak kidmethods. Ekspresyon mRNA Acyl-coenzyme A oksidaz 1 (ACOX1) ak carnitine palmitoyltransferase 2 (CPT2) te detekte pa eksperyans RT-PCR.

KLIKE LA POU KONNEN 80%FENYLETHANOID GLYKOSIDESNATIRÈL ÒGANIC CISTANCHE EXTRÈ

Sèvis sipò Wecistanche-Pi gwo ekspòtatè cistanche nan Lachin nan:

Imèl:wallence.suen@wecistanche.com

Whatsapp/Tel:+86 15292862950

Achte pou plis detay espesifikasyon:

https://www.xjcistanche.com/cistanche-shop

Rezilta:Kontrèman ak gwoup modèl la,twa-dòz PGCD tout redwi nivo yo nan TGnan fwa a ak serom nan yon fason ki depann de dòz la, epi redwi aktivite ALT ak AST nan serom. Twa-dòz PGCD tout redwi kontni an nan FAS nan yon mòd dòz-depandan ak ogmante kontni an nan LCAD nan fwa a anpil.PGCD ankourajeaktivite yo nan GSH - Px, ak SODand redwi sa ki nan MDA ak LPO nan fwa a anpil. Eksperyans RT-PCR te montre ke PGCD te ogmante nivo mRNA ACOX1 ak CPT2 nan tisi fwa.

Konklizyon:PGCD ka amelyore metabolis lipid ak repons estrès oksidatif, epi redwi depozisyon lipid nan tisi fwa pa reglemante ekspresyon mRNA ACOX1 ak CPT2.

Mo kle:Phenylethanoid glikozid ekstrè soti nan Cistanche deserticola; ACOX1; CPT2;metabolis lipid;estrès oksidatif; ApoE- / - sourit

Maladi fwa gra ki pa gen alkòl(NAFLD) se youn nan maladi fwa ki pi gaye nan mond lan, ak yon prévalence de prèske 30% nan popilasyon jeneral la. Maladi fwa gra nan Lachin ap grandi nan yon pousantaj anyèl 0.594% [1]. Ensidan an ak devlopman nan NAFLD yo gen rapò sere ak konsomasyon twòp kalori kò a. Rejim alimantè ki gen anpil grès mennen nan akimilasyon twòp nan grès nan fwa a ak pwovoke NAFLD [2], ak premye etap la nan patojèn li yo se depo trisylglycerol (TG) nan selil fwa [2] 3]. Pou dat, pa gen okenn dwòg espesifik ki ka geri ki vize patojèn NAFLD. Jwenn dwòg ki san danje, efikas ak mekanis klè pou prevansyon ak tretman NAFLD vin tounen yon travay enpòtan pou chèchè yo. Cistanche deserticola YC Ma se yon plant parazit nan genus Cistanche nan fanmi Orobanchaceae. Eleman prensipal li yo, glikozid phenylethanoid, gen fonksyon amelyore fonksyon iminitè kò a, anti-aje, anti-radyasyon, antioksidan ak Hepatoprotective, ak lòt efè [4-5]. Etid sa a gen entansyon fè yon etid preliminè sou mekanis nanPhenylethanoid glikozid soti nan Cistanche deserticola(PGCD) nan amelyore metabolis lipid.

1 Materyèl eksperimantal

1.1 Dwòg eksperimantal

Tij yo charnèl nan Cistanche deserticola (kontni imidite 8. 5%) yo te achte nan Hotan Dichen Pharmaceutical Co, Ltd.; phenylethanoid glikozid yo (konpozan prensipal verbascoside ak echinaceaside) sibstans referans (tou de pite> 98%) yo te achte nan men Manster, Chengdu, Sichuan Biotechnology co, Ltd; Atorvastatin: Pfizer Shanghai; Ezetimibe: Merck Pharmaceuticals Co, Ltd.

1.2 Bèt eksperimantal

6 a 8 semèn sourit gason C57BL/6J ak sourit ApoE-/-, pwa kò (20 ± 2) g, achte nan men Changzhou Cavins Experimental Animal Co., Ltd., nimewo lisans: SCXK (Su) 2016-0010 , 12 h / 12 h sik limyè, tanperati (22 ± 1) degre, imidite 50% ~ 60%, konsomasyon gratis nan manje ak dlo. Anvan eksperyans lan, sourit yo te manje yon rejim alimantè estanda pou 1 semèn pou adapte yo. Tout swen bèt ak eksperyans swiv règleman yo nan Komite Etik Animal Eksperimantal nan Shandong First Medical University (Etik No .: W202107080303).

1.3 Re eksperimantalajan yo

Manje ki gen anpil grès: Harlan Teklad; TG, ALT, AST twous: Beijing Solebao Biotechnology co, Ltd.; FAS, LCAD twous: Shanghai Langton Biotechnology co, Ltd.; GSH-Px twous: Shanghai Jining Biotechnology co, Ltd.; SOD, MDA, LPO, BCA twous: Nanjing Jiancheng Biotechnology co, Ltd.; Twous Trizol: Invitrogen, Carlsbad, CA; ACOX1 ak CPT2 primè: fèt pa Sangon Bioengineering (Shanghai) Co., Ltd.

1. 4 Eksperyans Enstriman Hei - VAP Ekspè Rotary Evaporator: Almay

Heidolph; Varioskan LUX lektè microplate multifonksyonèl: ThermoFisher; FD8508 vakyòm friz seche rad: Ilshin, Kore di sid; F6/10 homogenizer: Shanghai Fluoroco; Agilent1260 segondè-pèfòmans likid chromatograph, Cary 3500 UV spectrophotometer: Agilent Technologies Ltd.; Quant studio5RT - PCR enstriman: Thermo Fisher Biochemicals, Inc.

2.3.1 Mas kò ak endèks fwa

Nan fen semèn nan 12yèm, sourit yo te jèn epi peze. Sourit yo te anestezi ak pentobarbital sodyòm epi yo te sakrifye. Fwa yo te rekòlte pou kalkile endèks fwa a.

2.3.2 Deteksyon endikatè serom

Pran serik la epi detekte serik aspartate aminotransferaz (AST) ak aktivite alanine aminotransferaz (ALT) an sekans dapre operasyon twous la; BCA detèmine kontni an pwoteyin nan serik la epi detekte kontni an TG.

2.3.3 Deteksyon faktè ki gen rapò ak metabolis lipid nan tisi fwa

Anba kondisyon 4 degre, peze yon kantite ki apwopriye nan fwa fre epi omojeneize li nan PBS, santrifuje (reyon santrifujeur 7.5 cm, 3 000 r/min) omojene a pou 1 minit, pran supernatant la, epi mezire kontni an pwoteyin nan 4 degre. tisi fwa pa BCA. Kontni TG nan tisi, ELISA metòd pou detekte asid gra synthase (FAS) ak long-chèn Acyl-CoA dehydrogenase (LCAD) kontni nan tisi fwa.

2.3.4 Deteksyon faktè oksidatif ki gen rapò ak tisi fwa

Anba kondisyon 4 degre, peze yon kantite ki apwopriye nan fwa fre epi omojeneize li nan PBS, santrifuje omojene a (reyon santrifujeur 7.5 cm, 3 000 r/min) pou 15 minit, pran supernatant la, epi mezire kontni an pwoteyin nan 4 degre. tisi fwa ak BCA. Swiv reyaktif yo Enstriksyon bwat yo detekte aktivite sipèoksid dismutaz (SOD) ak glutatyon peroksidaz (GSH-Px), epi ansanm detekte nivo malondialdehyde (MDA) ak oksijene lipid (LPO).

2. 3. 5 RT-PCR deteksyon

Ekspresyon mRNA ACOX1/CPT2 nan tisi fwa: Pran yon kantite ki apwopriye nan tisi fwa fre, sèvi ak yon twous Trizol pou ekstrè mRNA total nan tisi fwa, sèvi ak transkriptaz ranvèse MuLV pou fè sentèz cDNA, epi sèvi ak cDNA kòm yon modèl pou fè fluoresans an tan reyèl. PCR (Qpcr) deteksyon. , kondisyon reyaksyon yo te: pre-denaturasyon nan 95 degre pou 2 min; denaturasyon nan 95 degre pou 10 s, recuit: 60 degre pou 30 s, ekstansyon nan 72 degre pou 35 s, 34 sik, epi finalman ekstansyon nan 72 degre pou 5 min, ak quantification an tan reyèl pa yon analizeur otomatik. Ekspresyon mRNA ACOX1 ak CPT2. Rotor-gène Q lojisyèl. 1.7 (Qiagen) te itilize pou analiz done, epi metòd 2-△△Ct te itilize pou konte nivo relatif mRNA ak GAPDH. Chak gwoup eksperyans te fèt an paralèl > 3 fwa. Sekans premye yo se jan sa a: GAPDH, en: 5' - GCCACCC AGAAGACTGTG - 3', en: 5' - ATGTAGGCCATGAGGTCCAC - 3'; ACOX1, en: 5' -CGCCACCTT CAATCC AGAGT - 3' en: 5' -TCTGCGATGCCAAATTCCCT - 3'; CPT2, en: 5'- TCCTCCTACTC AGGACGCAA - 3' en: TTGGGATCTTCCGCTCACAC.

2.4 Metòd estatistik

SPSS 20.0 Yo te itilize lojisyèl estatistik pou analize done yo. Done mezi yo te eksprime kòm (x ± s). Yo te itilize analiz yon sèl-fason nan divèjans pou konparezon ant gwoup yo. P <0.05 te konsidere kòm yon diferans estatistik enpòtan.