Etid sou Phenylethanol Glycosides nan Cistanche Tubulosa

Résumé: Objektif: Pou konfime glikozid phenylethanoid nan zèb medsin nan Cistanche deserticola (Xinjiang) epi etabli yon metòd segondè-pèfòmans likid kromatografi (HPLC) pou detèminasyon an similtane nan glikozid phenylethanoid. Metòd: ThermoSyncronis C18 chromatographic kolòn (250mm) te itilize × ４．６ｍｍ,５ μ ｍ）; Acetonitrile kòm faz mobil A, 0.1 pousan solisyon asid fosfò kòm faz mobil B, elisyon gradyan (0-10min, 10 pousan A{{10}} pousan A; 10-20min, 15 pousan A-18 pousan A; 20-45min, 18 pousan A-27 pousan A); Pousantaj koule 1.0mL / min; Tanperati kolòn 30 degre; Longèdonn deteksyon an se 330nm; Piki volim 10 μ Ｌ. Rezilta: Cistanche deserticola gen sis glikozid phenylethanol, ki gen ladan echinaside, anthocyanin A, piloside, isopiloside, 2 '- acetylpiloside, ak anthocyanin B, san okenn lòt glikozid phenylethanol; Metòd chromatografi likid segondè-pèfòmans etabli pou separasyon sis glikozid phenylethanol te montre bon rezilta, sòti nan 80.438 a 1287. 000 mg / L, 7.552 a 120.834 mg / L, 28.144 a 450.305 mg / L. 865 a 301.840 mg/L, ak 1.100 a 17.593 mg/L, respektivman Relasyon lineyè a bon nan ranje 0.382 ~ 6.113mg/L (R2 Pi gwo pase oswa egal a 0.9998); RSD nan presizyon, estabilite, ak repetibilite se mwens pase 3.2 pousan; Pousantaj rekiperasyon an mwayèn se ant 97.19 pousan ak 102.51 pousan, ak metòd la se egzat ak serye. Konklizyon: Cistanche deserticola (Xinjiang) gen sis glikozid phenylethanolamine, ki gen ladan echinacoside, anthocyanin A, poolside, isopiloside, 2 '- acetylpiloside, ak anthocyanin B. Metòd ki etabli segondè-pèfòmans likid kromatografi a se senp, rapid, egzat, ak repwodiktif, ka ansanm detèmine kontni an nan sis glikozid phenylethanolamine nan Cistanche deserticola, Sa a ka bay yon baz syantifik pou rechèch la ak kontwòl nan bon jan kalite a nan Cistanche deserticola.

Mo kle: Tubular Cistanche; glikozid feniletanòl; ＨＰＬＣ

Pwodui sa a se yon tij chèch chèch ak fèy kal ki soti nan Cistanchetu hulosa (Schenk) Wish, yon plant nan fanmi Orobaceae. Li gen efè tonifying yang nan ren, sans nourisan ak san, ak mwatir trip yo soulaje konstipasyon. Yo itilize li pou trete defisi Yang nan ren, defisi nan sans ak san, enpotans, ak lakòz, ren fèb ak jenou, misk ak zo fèb, ak sechrès entesten ak konstipasyon. Rechèch modèn yo montre ke eleman chimik prensipal yo nan remèd fèy medsin nan genus Cistanche gen ladan glikozid phenylethanolamine, iridoid, lignans, polisakarid, alkaloid, lwil temèt, ak lòt konpozan [2]. Pami yo, glikozid phenylethanoid se prensipal engredyan aktif nan Cistanche deserticola pou anti-aje li yo, anti-fatig, tonifying ren an ak yang, anti-senil demans, ak lòt efè famasi. Cistanche deserticola sitou gen echinase, ganglioside A, poolside, isopiloside, chrysotile, 2 '- acetyl glycoside, 2' - acetyl poolside, cistanche glycoside A, cistanche glycoside C Phenylethanol glycosides tankou anthocyanin B [3-7]. Etid sa a te itilize HPLC pou idantifye glikozid phenylethanolamine nan Cistanche deserticola (Xinjiang) e li te etabli yon metòd detèminasyon similtane, ki ka itilize pou distenge otantisite ak bon jan kalite Cistanche deserticola, bay yon baz syantifik pou rechèch ak kontwòl kalite Cistanche deserticola.

Prensipal eleman chimik nan Cistanche deserticola

1 Enstriman, tès dwòg, ak echantiyon

Chromatograph: Ultramate3000 seri segondè-pèfòmans likid chromatography (LPG 3400SDN kwatènèr ponp gradyan, WPS -3000SL echantiyon otomatik, TCC 3000RS bwat tanperati kolòn, VWD 3100 detektè); Kolòn chromatografik: ThermoSyncronisC18 kolòn (4.6mm × ２５０ｍｍ, ５ μ ｍ）; Balans elektwonik: 1/100000 modèl balans elektwonik se Sedoris SQP; Modèl balans elektwonik 1/10000 la se Sedoris SQP. ; Pi dlo/ultra-pi dlo sistèm entegre: PURELABClassicUV, ultra pi sistèm dlo.

Echinoside, prensipal eleman chimik Cistanche deserticola

Echinoside: Lemaitian Pharmaceutical, nimewo pakèt: DST191008-038, kontni 99.9 pousan; Guanhua glycoside A: ChemFace, nimewo pakèt: CFN90669, kontni 98 pousan; Maorui flè glikozid: ATANSYON, nimewo pakèt PS011530, kontni: 94.6 pousan; Isopiloside: ChemFace, nimewo pakèt CFN97049, kontni 98 pousan; 2 '- Acetylpiloside: ChemFace, nimewo pakèt: CFN92452, kontni: 98 pousan. Guanhua glycoside B: Greep, nimewo pakèt: 20120903, kontni 98.57 pousan; Acetonitrile: Fisher kwomatografikman pi bon kalite; Asid fosforik: Fisher, kwomatografikman pi bon kalite; Methanol: medikaman Chinwa, analyse pi bon kalite.

Zèb medsin Guanhua Cistanche te achte nan men Xinjiang Heji Tradisyonèl Chinwa Medsin Tranch Co, Ltd, ak orijin li nan Xinjiang. Li te idantifye kòm Guanhua Cistanche pa tou de Xinjiang Heji tradisyonèl Chinwa medikaman tranch co, Ltd ak Jinpai Zhengtang famasetik co, Ltd.

2 Metòd ak rezilta

2.1 Kondisyon kwomatografik

Sèvi ak octadecylsilane lyez jèl silica kòm yon filler (ThermoSyncronisC18); Sèvi ak asetonitrile (A) -0.1 pousan solisyon asid fosfò (B), elisyon gradyan (0-10min, 15 pousan A → 18 pousan A; 10-20min, 18 pousan A → 2 0 pousan A; 20-45min, 20 pousan A → 27 pousan A); Pousantaj koule 1.0mL / min; Tanperati kolòn 30 degre; Longèdonn deteksyon an se 330nm; Piki volim 10 μ Ｌ. Chromatogram nan solisyon tès la anba kondisyon kwomatografik sa a montre nan Figi 1.

Figi 1 analiz kromatografik solisyon tès Cistanche deserticola

2.2 Preparasyon solisyon

2.2.1 Preparasyon solisyon tès la

Pran yon echantiyon apeprè 0.1g (passe nan 3yèm Van an), peze l avèk presizyon, ajoute 20mL 50 pousan metanol, peze mas la, tranpe pou 30 minit, sonike (500W, 53kHz) pou 40 minit, kite l refwadi, peze mas la ankò, sèvi ak 50 pousan metanol pou ratrape mas pèdi a, byen souke epi jwenn echantiyon an.

2.2.2 Preparasyon solisyon referans

Avèk presizyon peze echantiyon kontwòl Echinacetin, Anthocyanin A, Piloside, Isopiloside, 2 '- acetylpiloside, ak Anthocyanin B epi ajoute 50 pousan metanol pou jwenn konsantrasyon 1287. 000mg/L, 120.834mg/L, 45mg. /L, 301.840mg/L, ak 17.593mg/L, respektivman 6.113mg/L solisyon referans melanje jwenn. Chromatogram solisyon referans yo montre nan Figi 2

Figi 2  6 Kwomatogram solisyon referans pou 26 glikozid feniletanoid

2.3 Detèminasyon glikozid phenylethanoid nan Cistanche deserticola (Xinjiang)

Prepare yon solisyon referans pou glikozid phenylethanolamine tankou echinacoside, anthocyanin A, anthocyanin A, se anthocyanin, anthocyanin, 2 '- acetyl anthocyanin, 2' - acetyl anthocyanin A, anthocyanin C, ak anthocyanin echantiyon B, ak achte echantiyon twa anthocyanin. soti nan Heji, Xinjiang (orijin Xinjiang) depi 2017, Prepare solisyon tès la dapre metòd preparasyon "2.2.1", epi analize solisyon estanda a ak solisyon tès la anba kondisyon kwomatografik "2.1". Rezilta yo te montre ke distribisyon an nan pik kwomatografik nan twa lo yo nan echantiyon Cistanche deserticola te konsistan. Lè yo konbine tan an retansyon ak koub absòpsyon longèdonn konplè chak konpoze glikozid phenylethanolamine, yo te idantifye pik kwomatografik echantiyon yo. Rezilta yo te montre ke tout twa pakèt echantiyon Cistanche deserticola te gen sis glikozid phenylethanolamine: echinacoside, anthocyanin A, anthocyanin, se anthocyanin, 2 '- acetyl anthocyanin, ak anthocyanin B, Pa gen okenn lòt pik kwomatografik nan phenylethanoid. Idantifikasyon pik kwomatografi yo montre nan Figi 3.

Prensipal eleman chimik nan Cistanche deserticola

Klike la a pou w wè pwodwi Cistanche

【Mande plis】 Imèl:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

2.4 Revizyon metodoloji

2.4.1 Enspeksyon relasyon lineyè

Delye solisyon referans melanje (1 #) anba "2.2.2" pa 2 fwa, 4 fwa, 8 fwa, ak 16 fwa pou jwenn solisyon referans 2 # -5 #. Pran chak nivo nan solisyon referans la epi analize li dapre kondisyon kwomatografi yo anba "2.1". Sèvi ak konsantrasyon chak nivo solisyon referans kòm aks x ak zòn pik chak nivo kòm aks y pou regression lineyè. Rezilta yo montre nan Tablo 1, ki endike yon bon relasyon lineyè nan mitan eleman yo nan seri lineyè ki koresponn lan.

Tablo 1  6 Relasyon lineyè glikozid feniletanoid

Figi 3 Idantifikasyon pik kwomatografik fenil etanòl glikozid nan Cistanche deserticola

2.4.2 Tès presizyon

Dapre metòd preparasyon solisyon tès la nan "2.2.1", prepare yon pòsyon nan solisyon tès la ak kontinyèlman analize li sis fwa anba kondisyon kwomatografik nan "2.1". Sa ki nan echinacoside, anthocyanin A, anthocyanin, anthocyanin, 2 '- acetyl anthocyanin, ak anthocyanin B nan chak analiz yo te jwenn, ak valè RSD nan 0.3 pousan, 0.3 pousan, ak 0.2 pousan, respektivman, 0.1 pousan, 1.0 pousan, 3.1 pousan, ki endike bon presizyon enstriman.

2.4.3 Tès estabilite

Dapre metòd preparasyon "2.2.1" solisyon tès la, prepare yon pòsyon nan solisyon tès la, epi analize 6 fwa anba kondisyon kwomatografi "2.1" nan 0, 2, 4.5, 1{{16 }}, 13.5, ak 20 èdtan, respektivman, pou jwenn kontni an nan echinacoside, anthocyanin A, anthocyanin, se anthocyanin, 2 '- acetyl anthocyanin, ak anthocyanin B nan chak analiz, valè RSD nan kontni an. se {{20}}.6 pousan , 0.4 pousan , 0.5 pousan , 0.4 pousan , 1.3 pousan , ak 3.1 pousan , respektivman, ki endike ke solisyon tès la gen bon estabilite nan 20 èdtan.

2.4.4 Tès repetibilite

Dapre metòd preparasyon solisyon tès "2.2.1", prepare 6 echantiyon nan solisyon tès la epi analize yo anba kondisyon kwomatografi "2.1" pou jwenn sa ki nan chak analiz echinacoside, anthocyanin A, anthocyanin A, se anthocyanin, 2 '- acetyl anthocyanin B, ak anthocyanin B, ak valè RSD nan 0.6 pousan, {{10}}.6 pousan, 0.6 pousan, 1.5 pousan, respektivman 1.5 pousan endike bon repetibilite nan metòd sa a.

2.4.5 Tès rekiperasyon etikèt

Pran apeprè {{0}}.05g nan kontni an konnen nan poud medsin, peze li avèk presizyon, epi paralèl peze 9 pòsyon. Ajoute solisyon referans ki ekivalan a 50 pousan, 100 pousan, ak 150 pousan fwa kontni 6 eleman yo dwe teste nan materyèl medsin, epi prepare 3 pòsyon an paralèl. Prepare solisyon tès la dapre metòd "2.2.1", analize li anba kondisyon kwomatografik "2.1", epi kalkile pousantaj rekiperasyon chak eleman, rezilta yo montre nan Tablo 2, ki endike presizyon metòd sa a bon. . 2.5 Egzanp Detèminasyon Kontni: Peze apeprè 0.1g nan diferan pakèt medsin poud (size nan Van No 3), byen peze, prepare solisyon tès la dapre metòd ki dekri nan "2.2.1", mezire selon kondisyon kwomatografik ki dekri. nan "2.1", anrejistre zòn nan pik, epi kalkile kontni an nan sis glikozid feniletanoid lè l sèvi avèk ekwasyon an regression. Rezilta yo montre nan Tablo 3.

3 Diskisyon

3.1 Detèminasyon glikozid phenylethanoid

Twa lo yo nan Cistanche deserticola (Xinjiang) teste tout gen sis glikozid phenylethanoid, sètadi, echinacoside, anthocyanin A, poolside, isopiloside, 2 '- acetylpiloside, ak anthocyanin B, e okenn nan yo pa gen lòt konpozan phenyl etanòl. Sa a endike ke kalite glikozid phenylethanol nan Cistanche deserticola (Xinjiang) yo relativman konsistan, ki gen ladan echinaside, ak piloside Kontni an nan glikozid nan flè a nan Isomeria se pi wo pase 1 pousan.

Phenylethanol glycoside se eleman prensipal aktif nan Cistanche deserticola

3.2 Optimizasyon kondisyon ekstraksyon

Eksperyans sa a te fè yon etid sèl-faktè sou sòlvan an ekstraksyon (10 pousan ~ 90 pousan metanol), epi finalman detèmine 50 pousan metanol kòm sòlvan an pi bon; Yon sèl-faktè envestigasyon te kondi sou tan ekstraksyon à (20-60 minit), e li te jwenn ke 2 '- acetyl poolside te rive nan yon pik nan ranje tan ekstraksyon à 30-40 minit. Sepandan, kontni an diminye apre 60 minit nan ultrason, ak eleman sa a ka domaje akòz tan ultrason pwolonje. Lè w ap pran an kont efè ekstraksyon lòt konpozan, yon ultrason nan 40 minit se tan an ekstraksyon pi bon.

3.3 Optimizasyon kondisyon kwomatografik

Yo te fè eskanè longèdonn konplè (190-400nm) lè l sèvi avèk yon detektè etalaj dyòd, ki endike ke koub absòpsyon longèdonn konplè nan sis glikozid feniletanoid yo te konsistan, ak pik absòpsyon nan 195nm ak 330nm. Longèdonn ki ba yo te afekte gravman pa entèferans absòpsyon faz mobil ak background enpurte, kidonk 330nm te longèdonn absòpsyon optimal. Efè separasyon diferan kolòn kwomatografik yo te envestige, epi li te jwenn ke DiamonsilC18, AgilentZORBAXSB-AqC18, ak ThermoSyncronis C18 kolòn kwomatografik yo te kapab separe sis glikozid feniletanoid sa yo soti nan echantiyon tès Cistanche deserticola, pami ki ThermoSyncronis kolòn C18yncronic. te gen pi bon efè separasyon.

Tablo 2 Rezilta tès rekiperasyon pike

Tablo 3 Kontni 6 glikozid feniletanòl nan Cistanche deserticola (pousan)

4 Konklizyon

Eksperyans sa a te idantifye glikozid phenylethanolamine nan Cistanche deserticola (Xinjiang) e li te etabli yon metòd detèminasyon similtane pou kontni an nan sis glikozid phenylethanolamine nan Cistanche deserticola, ki gen ladan echinaside, anthocyanin A, anthocyanin, isoanthocyanin, 2 '- acetyl anthocyanin, ak sa a anthocyanin. metòd se senp, rapid, egzat, e li gen yon wòl doub nan analiz kalitatif ak quantitative, Sa a bay metòd analyse ak baz syantifik pou efektivman kontwole bon jan kalite a nan Cistanche deserticola.

Cistanche ekstrè poud

referans:

[1] Komisyon Nasyonal Farmakope. Farmakope Repiblik Pèp la nan Lachin [M]. Beijing: China Medical Science and Technology Press, 2020:140-141

[2] Wang Jia, Yang Wen, Wang Dong, et al. Etid konparatif kat espès Cistanche deserticola ki baze sou spèkt karakteristik HPLC [J]. Journal of Pharmaceutical Analysis, 2021, 41 (3): 384-393

[3] Ding Yanxia, ​​Wang Xiaoqin, Zhang Ying. Detèminasyon kontni nan sis glikozid phenylethanolamine prensipal nan remèd fèy medsin nan genus Cistanche ki baze sou segondè-pèfòmans likid chromatografi [J]. Shi Zhen Guoyi Guoyao, 2020, 31 (4): 813-816

Xiong Hui, Liu Yuqi, Qu Wenjia, et al. HPLC karakteristik spectre Cistanche deserticola ak detèminasyon senk phenylethanolamine glikozid ［ J ］. Journal of Pharmaceutical Analysis, 2019, 39 (2): 233-239

[5] Ma Zhiguo, Tan Yongxin. Chanjman nan sis glikozid phenylethanoid nan Cistanche deserticola nan diferan moman nan vapè [J]. medikaman tradisyonèl Chinwa patant ak preparasyon senp, 2011, 33 (11): 1951-1954

［ 6 ］ Ma Xueqin, Dong Yanhong, Guo Qi, et al. Detèminasyon sis glikozid Phenylethanolamine nan remèd fèy Cistanche deserticola pa yon tès metòd evalyasyon miltip ［ J ］. Shi Zhen Guoyi Guoyao, 2018, 29 (10): 2309-2312

[7] Liang Jiansong, Xue Cuili, Wu Menghua, et al. Detèminasyon sis glikozid phenylethanol nan Cistanche deserticola ak Cistanche deserticola pa UPLC ak evalyasyon chimyometrik [J]. Journal of Pharmaceutical Analysis, 2021, 41 (2): 226-235