Makè podosit urin nan maladi ren

pou plis enfòmasyon:ali.ma@wecistanche.com

Lingfeng Zeng, et al

Résumé

Podocytes jwe yon wòl enpòtan nan antretyen nan fonksyon ren, epi yo se konsantre prensipal la nan anpil mounrenmaladi. Blesi Podocyte rezilta nan koule nan fragman selilè podocyte ki sòti ak sib molekilè podocyte espesifik nan pipi a, ki ka sèvi kòm biomarkers nanrenmaladi. Podosit entak, swa solid oswa mouri, ak microvesicles ki sòti nan podosit yo ta ka quantifye nan pipi a pa divès kalite santrifujasyon, vizyalizasyon, ak metòd kilti. Podocyte-espesifik sib pwoteyin ki soti nan nwayo a, sitoplasm, fant-dyafragm, glomerular kapilè manbràn sousòl, ak sitoskelèt, osi byen ke RNA mesaje korespondan yo (mRNA), nan pipi a, ta ka quantifier pa Western blotting, ELISA, oswa polymerase quantitative. reyaksyon chèn. Malgre ke kèk nan teknik sa yo ka chè oswa travay-entansif kounye a, yo ka vin lajman disponib nan lavni an akòz amelyorasyon nan teknoloji ak automatisation. Aplikasyon an nanurinpodositmakè pou dyagnostik la ak siveyans divès kaliterenmaladiyo te eksplore men done yo pibliye nan zòn sa a yo pa ase sistematik epi yo manke validasyon ekstèn. Plis rechèch ta dwe konsantre sou estandadize, konpare, ak otomatize metòd laboratwa, osi byen ke defini valè ajoute yo nan tès klinik woutin.

Mo kle:Podocyte, Biomarker, mRNA, miRNA, Nephrin, Podocin, Podocalyxin, Synaptopodin,Kwonikrenmaladi

Tij Cistanche ka trete maladi ren kwonik

1. Entwodiksyon

1.1. Epidemyoloji nan maladi ren kwonik

Kwonikrenmaladi(CKD) se yon maladi ki pa kontajye enpòtan ak koute chè [1]. Avèk disponiblite terapi ranplasman ren, depans swen sante yo itilize pou tretman CKD (Ckwonikrenmaladi)te monte sevè apre ane 1960 yo [2,3]. Nan 2015, te gen plis pase 2.5 milyon pasyan ki te resevwa terapi ranplasman ren atravè lemond, e yo prevwa nimewo sa a double pa 2030 [4]. Mwayen efikas pou dyagnostik, tretman, ak siveyans nanrenmaladiyo bezwen anpil.

1.2. Podocyte kòm konsantre nan maladi ren

Fonksyon prensipal ren an se eskresyon dechè metabolik ak dlo kò twòp [5], ki reyalize pa twa pwosesis: (1) filtraj san an sikile nan glomerulus la pou fòme yon ultrafiltrate nan espas Bowman a; (2) reabsòpsyon selektif sibstans itil atravè tubul ren; ak (3) sekresyon selektif lòt dechè metabolik soti nan kapilè peritubular rive nan likid la tubulèr [6]

Malgre ke ren an konsiste de plizyè kalite selil ki ranje nan yon achitekti 3-dimansyon delika, podocyte jwe yon wòl kle nan antretyen fonksyon ren nòmal epi li se konsantre prensipal anpil moun.renmaladi. Podocytes yo se selil trè espesifik tèminal diferansye ki, ansanm ak selil andothelial yo ak manbràn sousòl kapilè glomerulèr (GCBM), konstitye baryè filtraj glomerulè a ​​[7]. Podocytes gen yon kò selil volumineuz ki separe de GCBM a pa yon espas sub-podocyte [8]. Kò selil la bay pwosesis prensipal long ki pwolonje nan direksyon pou GCBM a epi yo apoze sou lèt la pa yon etalaj vaste de pwosesis pye [8].

Podocytes gen plizyè fonksyon fizyolojik. Yo kenbe mòfoloji bouk glomerulè vaskilè, kontwole filtraj glomerulè, epi patisipe nan repons imunolojik ak enflamatwa lokal la. Anplis de sa, podocytes yo an pati responsab pou sentèz la ak woulman nan GCBM la [9], osi byen ke pwodiksyon an nan faktè parakrin tankou faktè kwasans endothelial vaskilè (VEGF), ki enpòtan nan règleman an nan pèmeyabilite ak pwopagasyon nan selil endothelial. [10]. Podocyte malfonksyònman jwe yon wòl esansyèl nan patojèn nan ak pwogresyon nan anpil mounrenmaladi. Mitasyon divès kalite jèn ki gen rapò ak podosit lakòzrenmaladi, ki tipikman prezante klinikman kòm sendwòm nefrotik ki reziste esteroyid ak istolojikman kòm glomerulosclerosis fokal (FGS). Nan lòt men an, akeri malfonksyònman podocyte, ki gen ladan yon rediksyon nan kantite podocyte oswa dansite ak fizyon nan pwosesis pye podocyte, mennen nan andotelyal segondè ak GCBM aksidan, pèt chaj negatif GCBM, anòmal pwoteyin manbràn Hiatal, epi finalman proteinuria atravè divès mekanis. 11,12].

Yon konsekans karakteristik nan blesi podocyte se entèraksyon an febli ak GCBM, ki akimile nan detachman nan podosit soti nan GCBM. Depi podosit yo gen yon kapasite limite pou rejenerasyon ak konpansasyon fonksyonèl, podosit ki rete yo pa kapab kenbe fonksyon baryè mekanik ak chaj nan GCBM, ki ta ka domaje irevokabl, ak rezilta final la se proteinuria [13]. Tou depan de gravite joure a, domaj nan podosit ka mennen nan pèt nan pwosesis pye yo, fòmasyon vakuol ak pseudocyst, dedifferentiasyon, ak apoptoz. Estrikti vwazen yo ta afekte imedyatman, ki gen ladan pwopagasyon selil epitelyal parietal, kontraksyon nan GCBM, pèt glomerular tuff kapilè, epi finalman glomerulosclerosis [14].

1.3. Metòd revizyon literati

Nou te fè yon revizyon literati ak tèm rechèch ki gen ladan "podocyte", "podocyte-asosye molekil", oswa "biomarker", ansanm ak "kwonikrenmaladi", "blesi egi nan ren", "glomerulonefrit", "nefropati dyabetik", oswa "dyabetikrenmaladi", yo te itilize pou chèche literati ki enpòtan nan Medline, Embase ak Cochrane Library. Referans piblikasyon enpòtan yo te egzamine pou plis papye potansyèl yo. Etid ki elijib yo enkli etid moun ak bèt ki te pibliye anvan Jiyè 2020. Piblikasyon ki gen sijè ki pa enpòtan, tankou biyoloji selil podocyte, fizyoloji manbràn, ak manipilasyon molekilè nan podosit, yo te eskli.

1.4. Podocyte-espesifik objektif kòm biomarqueurs

Blesi podosit mennen nan koule nan divès molekil podocyte ki sòti nan espas pipi a epi li ka sèvi kòm yon byomarker nanrenmaladi(figi 1). Kò selil podosit yo ta ka divize an twa konpatiman anatomik ak fonksyonèl diferan: pati baz la, pati anlè a, ak pati glise-dyafragm (SD) [15]. Pwoteyin espesifik manbràn selilè yo prezan nan chak pati, epi entèraksyon yo ak sistèm sitoplasmik cytoskeleton la responsab pou estabilite estrikti ak fonksyon podosit [16]. Gwo molekil ki sòti nan podosit ki sib potansyèl pou devlopman biomakè yo rezime nan Tablo 1.

Fig. 1. Podocyte blesi ak potansyèl makè podocyte ki sòti nan pipi. Blesi nan podosit rezilta nan 3 pwosesis patolojik ki gen rapò ak: chanjman mòfolojik, apoptoz, ak detachman. Podosit yo ka rete solid men yo manifeste kòm chanjman mòfolojik ki gen konsekans fonksyonèl en, tankou proteinuria ak fibwoz tubulointerstitial. Apoptoz Podocyte ka devlope kòm yon rezilta akimile chanjman mòfolojik oswa dirèkteman nan joure espesifik. Pèt podosit nan glomerul yo (sa vle di podocytopenia) mennen nan chanjman achitekti nan bouk la kapilè glomerulè ak rezilta nan glomerulosclerosis. Podosit, swa apoptotik oswa solid akòz pèt 3 1 entegrin, ka detache nan espas pipi a, yo ka idantifye nan pipi a, epi sèvi kòm makè nanrenmaladi. Vezik, mikropartikul, oswa molekil podocyte-espesifik ki sòti nan podosit blese oswa apoptotik yo ka detekte tou nan pipi a epi sèvi kòm byomarkè. (GCBM, glomerular kapilè manbràn sousòl; AgII, anjyotansin II; TGF-, transfòmasyon faktè kwasans-beta; ROS, espès oksijèn reyaktif).

1.5. Objektif nikleyè ak sitoplasmik

Jèn sipresyon timè Wilms -1 (WT1) se yon faktè transkripsyon zenk ki sanble ak dwèt nan nwayo podosit la epi li se pwobableman makè espesifik pou podosit ki pi souvan itilize pou etid histolojik [17]. Jèn WT1 la konsiste de 10 ekson, nan yo ki ekson 7 a 10 kode 4 dwèt zenk yo nan domèn ADN-obligatwa. WT1 espesyalman eksprime nan podosit epi li pwobableman kontwole ekspresyon nephrin [18]. Mitasyon eterozigot nan ekson 8 ak 9 nan jèn WT1 mennen nan sendwòm Denys-Drash, ki prezante ak sendwòm nefrotik, pseudohermaphroditism gason, ak timè Wilms [19].

Lòt pwoteyin nikleyè ak sitoplasmik nan podosit yo mwens byen etidye kòm byomarkè. Kinaz ki gen domèn aarF -4 (ADCK4) espesyalman prezan nan mitokondri yo nan pwosesis pye podosit rat [20]. ADCK4 responsab pou estabilize konplèks CoQ la epi li nesesè pou fonksyon omeyostaz nòmal podosit [20]. Podocyte-espesifik ADCK4 ablasyon nan sourit rezilta nan pwosesis pye efasman, dezòganizasyon nan fant filtraj la, elaji ak disfonksyonèl mitokondri, ak redwi CoQ10 [21], ak tretman retabli CoQ10, fonksyon mitokondriyo, amelyore mòfoloji podocytes, ak anpeche [21] efasman pwosesis pye. ,22].

1.6. Konplèks pwoteyin fant-dyafragm

Konpozan pwoteyin nan podocyte fant-dyafragm yo te etidye anpil kòm byomarkè nanrenmaladi. Pwoteyin prensipal yo nan gwoup sa a gen ladan nephrin, podocin, CD2-pwoteyin ki asosye (CD2AP), ak podoplanin [23]. Nephrin se yon pwoteyin transmembrane ak domèn ekstraselilè ki fòme nwayo dyafram fant la. Li aji tou de kòm yon baryè Van fizik ak yon echafodaj siyal [24]. Mitasyon jèn nefrin yo te rapòte premye kòz sendwòm nefrotik konjenital nan imen [25]. Podocin ak CD2AP yo responsab pou konekte nephrin ak cytoskeleton aktin anba manbràn selilè a. Podocin se yon pwoteyin tankou epeng nan fanmi stomatin epi li eksprime sèlman nan podosit [26]. Li kode pa jèn NPHS2 ki gen uit ekson epi ki sitiye sou rejyon kwomozòm 1q25-q31 [27]. Mitasyon nan jèn NPHS2 lakòz yon sendwòm nefrotik otozomal resesif ki reziste esteroyid nan tou de pasyan timoun ak granmoun [27,28]. CD2AP se yon molekil echafodaj ki dirèkteman reyaji ak aktin filaman ak lòt pwoteyin manbràn selilè epi li enplike nan remodèl aktin dinamik ak trafik manbràn [29]. Podoplanin se yon ti glikoprotein transmembrane ak yon gwo kantite chèn O-glycoside. Pèt selektif nan podoplanin nan podosit mennen nan proteinuria, ki te swiv pa chanjman nan mòfoloji podocyte nan yon modèl rat nan proteinuriya espontane [30].

Cistance bon pou ren

1.7. Sib ki gen rapò ak GCBM la

Konpozan pwoteyin prensipal yo nan rejyon fondamantal podosit la se 3 1 integrin ak -dystroglycan (-DG). Pwoteyin sa yo jete podosit nan GCBM la epi jwe yon wòl enpòtan nan kenbe pozisyon kòrèk la nan podosit la ak entegrite manbràn filtraj la [31,32]. Entegrin 3 1 la se yon pwoteyin transmembrane ak domèn ekstraselilè ki lye ak domèn G-tankou laminin G (LG) nan laminin 521 nan GCBM a, pandan y ap rejyon sitoplasmik li konekte ak sitoskelèt podosit la pa -actinin{{ 9}}. Pwoteyin glycosylated -DG a konekte ak sitoskelèt la atravè utrofin, ak podosit la ak GCBM atravè entèraksyon li ak laminin 521.

1.8. Sib nan manbràn an tèt la

Podocalyxin se pi gwo pwoteyin transmembrane sou bò apical podocyte la. Li se yon pwoteyin asid sialik chaje negatif ki kontribye nan baryè chaj filtraj glomerulèr [33]. Podocalyxin gen twa fonksyon: (1) anpeche pwoteyin chaje negatif soti nan koule nan pipi a; (2) pou kenbe separasyon podosit adjasan yo; ak (3) pou anpeche adezyon ant selil epitelyal ak bouk kapilè [34]. Podocalyxin konekte ak cytoskeleton aktin pa ezrin ak echanjeur sodyòm-proton faktè regilasyon 2 (NHERF2).

1.9. Objektif ki gen rapò ak Actin

Gen yon kantite pwoteyin espesifik pou podosit ki lye ak sitoskelèt aktin epi kenbe estrikti 3-dimansyon podosit la. Sib ki pi byen etidye nan gwoup sa a se synaptopodin ak -actinin-4. Tou de nan yo mare nan eskèlèt aktin nan kominike avèk manbràn ki asosye guanyl kinaz la ak oryantasyon envèse -1 (MAGI{-1) [35]. Synaptopodin se yon pwoteyin lineyè ki rich ak pwolin ki kode pa jèn SYNPO [36] epi li eksprime nan diferansye podosit lè yo devlope pwosesis pye yo. Kòm yon rezilta, synaptopodin konsidere kòm yon makè nan podosit matirite [37].

2. Metòd etid

2.1. Entra-glomerulaire makè podosit

Malgre ke konsantre nan revizyon sa a se souurinpodositmakè yo, li lojik pou diskite yon ti tan deteksyon makè sa yo nan tisi ren yo. Rediksyon podosit ka absoli (pèt podosit) oswa relatif (redwi kantite podosit pou chak volim glomerulus) [38]. Metòd estanda lò pou quantifier podocytes nan ren se metodoloji estereolojik (mikwoskòp limyè oswa elektwon, mikwoskòp konfokal lazè, ultrason, tomografi òdinatè, oswa imaj sonorite mayetik) [39]. Sepandan, tout nan yo se tan konsome ak travay-entansif. Dènyèman, Venkatareddy et al. te evalye metòd pou estimasyon dansite podocyte pa yon sèl seksyon formalin-embedded parafine, nan ki nwayo podocyte yo te vizyalize pa imunofluoresans endirèk ak antikò kont WT1 oswa transducin-tankou enhancer nan fann [40]. Yon etid ki vin apre te montre ke metòd sa a bay egzat podocyte enimerasyon nan yon modèl sourit transjenik nan rediksyon podocyte selektif, ki konfime ke apwòch sa a bay yon zouti quantitative efikas pou analiz la nan rediksyon podocyte nan glomeruli yo antye [41]. Sepandan, metòd sa a toujou mande byopsi ren e se poutèt sa pa apwopriye pou siveyans seri.

2.2. Quantification podocyte urin ak kilti

Depi podosit yo fikse nan pozisyon fizyolojik yo sèlman pa pwosesis pye yo, yo vilnerab a yo te pèdi kòm selil solid nan pipi a [42]. An reyalite, podosit entak yo detekte nan pipi moun ki an sante ak pasyan ki genrenmaladi[43], ak pèt urin se pwobableman yon mekanis pi gwo nan rediksyon podosit pandan pwogresyon CKD.(Ckwonikrenmaladi)[42]. Metòd tradisyonèl la pou idantifikasyon podocytes nan pipi enplike teknik cytospin ak etid imunofluoresan ak antikò espesifik anti-podocalyxin [44], pou ki automatisation se an pati posib. Sepandan, teknik la gen sansiblite limite ak espesifik akòz kontamine debri selilè nan sediman urin lan.

Altènativman, podocytes ta ka idantifye pa deteksyon an nan podocyte-espesifik peptides tryptic ak chromatografi likid makonnen ak espektrometri mas tandem (LC-MS / MS). Malgre ke pri ekipman teknik sa a wo, li gen avantaj ki genyen pou li endepandan operatè a ak trè repwodiktif [45], epi li pral pwobableman ap grandi aplikab nan pratik laboratwa klinik.

Etid anvan yo te montre ke ak teknik imunofluorescence cytospin, moun ki an sante ekskrete mwens pase 0.5 podocytes/mg kreyatinin, tandiske pasyan ki gen maladi glomerulaire aktif ekskrete jiska 400 podocytes/mg kreyatinin [43]. Majorite nanurinpodosityo solid lè yo teste ak esklizyon yòd propidium ak tach TUNEL [43]. Nan teyori, kilti a nan podocytes solid ansyen vivo ta Se poutèt sa amelyore espesifik nan idantifikasyon podocyte pa retire selil mouri ak nonspecific. Sepandan, podocytes pa nòmalman pwopagasyon nan vivo, ak kondisyon espesyal eksperimantal yo mande pou kilti yo ex vivo [46]. Rapò anvan yo te montre ke podosit te kapab premye grandi nan kondisyon kwasans-permisif, kote podosit imòtalize replike [46]. Medya kilti selilè pou objektif sa a jeneralman konsiste de Roswell Park Memorial Institute (RPMI) 1640 oswa Dulbecco a modifye Eagle's medium, ak 10 pousan serom fetis bovine ki konplete ak 20-100 U/ml sourit interferon-gamma (INF- ), ak la. Asyèt kilti yo anjeneral kouvwi ak kolagen tip I pou ankouraje pwopagasyon podosit [46]. Metòd sa a gen gwo valè nan etid tradiksyon ak idantifikasyon sib terapetik, men li twò konplike pou itilizasyon woutin nan klinik.

Cistanche ka amelyore fonksyon ren

2.3. Fragman ki sòti nan podosit pipi

Vezik ekstraselilè (EVs) se kò esferik manbràn ki lage pa divès kalite selil [47]. Nan sistèm pipi a, EV ki gen manbràn apical ak likid entraselilè yo koule nan tout segman nefwon, ki gen ladan podosit, selil epitelyal tubulaires ren, ak selil uroepitelial nan pipi a. EV pipi yo genyen makè pwoteyin malfonksyònman ak blesi estriktirèl nan ren an. Etid ki sot pase yo sijere ke EV yo ka enpòtan pou kominikasyon entèselilè [48]. Anplis de sa, etid anvan yo te montre tou ke fragman manbràn selil apical yo koule soti nan podosit blese nan pipi a [49], epi yo ta ka idantifye kòm podocalyxin-pozitif estrikti granulaire (PPGS) pa mikwoskòp elèktron [49]. Nan modèl sourit dyabetik, ekzosom urin ki soti nan podosit yo ka izole pa seri santrifujasyon, ak mikropartikul yo ka quantitated pa sikometri koule lè l sèvi avèk antikò annexin V (ki detekte tout mikwopartikil), ki te swiv pa antikò pou podocalyxin oswa podoplanin (ki espesyalman idantifye mikwopartikil ki sòti nan podosit). [50,51]. Yo ta ka itilize analiz adisyonèl difizyon limyè a pou detèmine plis gwosè mikropartikil yo [52]. Avèk teknik sofistike sa yo, li te montre ke mikwopatikil ki sòti nan podosit yo ogmante nan sourit lè yo ekspoze a glikoz segondè [51], osi byen ke nan sourit dyabetik anvan aparisyon albuminuria [52]. Nan ansyen ka a, anòmal la te siprime pa yon inibitè Rho-kinase, ki endike ke reyòganizasyon cytoskeletal se pi gwo deklanche lage mikropartikil [51]. Sepandan, aplikasyon teknik sa yo pou mounrenmaladipa te eksplore.

Olye ke mezire kantite ak gwosè EVs podocyte ki sòti ak mikropartikul nan pipi a, dènyèman gen yon enterè k ap grandi nan mezire molekil podocyte-espesifik nan exosomes urin. Pou egzanp, faktè transdiksyon siyal ki sòti nan podosit (PDSTF) nan EVs urin yo te pwopoze kòm yon kandida potansyèl pou evalyasyon blesi podosit [52]. Sepandan, aplikasyon klinik yo rete anba devlopman.

2.4. Urin podocyte-espesifik pwoteyin objektif

Nivo urin plizyè sib pwoteyin espesifik pou podosit yo byen fasil mezire ak wòl yo kòm byomarkè nanrenmaladite etidye. Nivo podokaliksin urin ka mezire pa imunofluoresans endirèk, ELISA, oswa sikometri koule [53], e li te pwopoze kòm yon makè pouurinpodositkonte. Sepandan, yon etid anvan te montre ke podocalyxin urin sitou soti nan manbràn apical nan podosit blese olye ke sa yo entak ki graje nan pipi a, ak nivo li yo ogmante nan blesi ren bonè [49]. Podocalyxin ak nephrin, yon lòt sib enpòtan pwoteyin podocyte espesifik nan pipi, yo pa detekte nan pipi moun ki an sante pa tradisyonèl Western blot [54] men yo detekte pa ELISA konvansyonèl nan pasyan ki gen pre-eklanpsi [55]. Anplis, nivo nephrin urin korelasyon ak gravite proteinuria [56] ak fonksyon ren [57]. Nivo plasma nephrin ta ka mezire tou [57], men enpòtans byolojik oswa klinik li pa te detèmine. Pwoblèm nan pi gwo nan lè l sèvi avèk nivo yo urin nan sib pwoteyin podocyte-espesifik kòm yon biomarker klinik se konsantrasyon ki ba (anjeneral nan seri a nan ng / ml) ak efè a konfonn nan konsantrasyon-dilution pipi.

2.5. MRNA espesifik pou podosit pipi

Mezi nanurinpodosit- Espesifik nivo mRNA te pwopoze kòm yon metòd altènatif pou detèminasyon nan konte podocyte urin. Kantite podocyte-espesifik mRNA nan pipi anjeneral pa ase pou etid tradisyonèl Northern blot la men yo fasilman mezire pa an tan reyèl reyaksyon chèn polymerase quantitative (RT-QPCR). De etid anvan yo te montre ke nivo urin nephrin mRNA te gen yon korelasyon sere ak konte podocyte urin [56,58]. Nan yon modèl sourit nan maladi manbràn sousòl anti-glomerulèr ak yon seri byopsi ren,urinpodosit-nivo mRNA espesifik ki gen rapò ak pousantaj pèt glomerular podocyte [52].

Etid resan yo, sepandan, te deplase konsantre nan endis mRNA urin ki sòti kòm makè ranplasan pou estrès podosit oswa blesi relatif podosit. Nan yon modèl rat, maladi glomerulè pwogresif la te asosye ak nephrin diminye an konparezon ak nivo mRNA podocin, ak rapò mRNA podocin-a-nephrin nan pipi ki gen rapò ak gravite pwogresyon histolojik [59]. Nan yon etid ki vin apre, yo te montre presyon atè mwayen moun ki an sante yo korelasyon ak rapò mRNA podocin urin ak rapò kreyatinin (yon makè detachman podocyte), rapò mRNA podocin-a-nephrin (yon makè estrès podosit), ak podocin urin. -a-akwaporin-2 mRNA rapò (yon makè blesi relatif podocyte kont blesi tubulaires) [60]. Se blesi glomerulè ki asosye espesyalman ak ogmante rapò podocin-a-akwaporin urin-2 ak nephrin-ak-akwaporin-2 mRNA [61].

2.6. Makè miRNA urin espesifik pou podosit

Mikwo-RNAs (miRNAs) se kout RNA ki pa kode ki kontwole anpil chemen byolojik lè yo vize mRNA espesifik [62]. Menm jan ak mRNA, miRNA urin yo byen fasil quantifier pa RT-qPCR [63]. Soti nan pèspektiv nan devlopman biomarker, miRNA gen avantaj pou yo rezistan a degradasyon, ki fasilite itilizasyon klinik li yo ak etid echantiyon achiv yo [63]. Yon kantite chanjman espesifik miRNA yo te obsève nanrenmaladi[9]. Pou egzanp, yo te jwenn pèt miRNA fonksyonèl espesifik pou podosit, ki gen ladan miR-23b, miR-24, ak miR-26a, ki te lakòz yon blesi rapid glomerulè ak tubulèr [64]. Espesyalman, miR-27b kontwole siviv podosit atravè vize reseptè adenozin 2B [65]. Menm jan an tou, nivo miR-21, miR-124, ak miR-192 nan pipi yo te gen rapò ak severite malfonksyònman ren (albuminuria ak estimasyon GFR) akurinpodositmakè (nephrin, synaptopodin, ak podocalyxin) nan pasyan dyabetik [66]. Etid resan yo te idantifye plis chemen espesifik en pou plizyè miRNA ki ka enpòtan pou patojèn oswa pwogresyon.renmaladi. MiR-193a siprime ekspresyon WT- 1, ki afekte diferansyasyon podosit [67] epi ki ka jwe yon wòl nan patojèn maladi glomerulèr [68]. Nan lòt men an, miR-21 inibit ekspresyon an nan inibitè tisi nan metalloproteinase 3 (TIMP3) [69,70], miR-26a inibit transfòmasyon faktè kwasans beta-1 (TGF{{ 11}}) ekspresyon [71,72], miR-23b vize Ras GTPase-aktive pwoteyin SH3 domèn-obligatwa pwoteyin 2 (G3BP2) [73], miR-29c vize omològ Sprouty 1 (Spry1). ) [74]; tout nan yo ki enplike nan pwogresyon nan nefropati dyabetik.

Cistanche pou amelyore fonksyon ren

Sepandan, podocyte kontribye nan sèlman yon ti pwopòsyon nan miRNA urin. Nenpòt chanjman espesifik miRNA yo obsève nan podosit yo ka pa fasil disène nan pipi a, pandan ke nenpòt chanjman nan nivo miRNA urin yo ka reflete chanjman patolojik nan lòt kalite selil ren [75,76]. Pou egzanp, byenke nivo urin miR-155, miR-663, ak miR{-1915 yo diferan anpil ant pasyan ki gen FGS oswa nefropati chanjman minimòm (MCN) ak kontwòl ki an sante [77], li yo pa te montre ke miR-155, miR-663, oswa miR-1915 espesyalman soti nan podosit. Korelasyon enpòtan ant anpil nivo miRNA ak makè blesi tubulaires, tankou nivo pipi N-acetyl- -D-glucosaminidase (NAG) ak molekil blesi ren-1 (KIM-1) [66], yo te rapòte tou. Nan lòt mo, li difisil pou konfime espesifik yo kòm makè aksidan podocyte. Eksepsyon remakab nan règ sa a se miR-26a. Yon etid resan te montre nivo miR-26a nan urin yo te siyifikativman pi wo nan nefrit lupus pase nan kontwòl ki an sante, miR-26a te miRNA ki pi eksprime nan glomerulus nòmal C57BL/6 sourit, epi miR-26a te responsab pou reglemante diferansyasyon podosit ak entegrite cytoskeletal [78]. Sepandan, wòl miR-26a urin kòm yon makè espesifik podosit bezwen valide.

2.7. Makè podosit sikile

Anpil nan makè podocyte mansyone anwo yo, sitou sib pwoteyin podocyte-espesifik ak mRNAs, ta ka mezire nan sikilasyon sistemik [56,79,80], ak nivo plasma yo kòm yon byomarker nan.renmaladiyo te eksplore [55,81-84]. Sepandan, yon diskisyon konplè sou sijè sa a depase limit revizyon sa a. Yo rezime avantaj ak dezavantaj kle metodoloji yo mansyone anwo a nan Tablo 2.

3. makè podocyte urin nan maladi ren espesifik

3.1. Maladi ren dyabetik

Dyabetikrenmaladi(DKD) se kòz ki pi komen nan CKD(Ckwonikrenmaladi)atravè mond lan, e gen yon richès nan literati sou itilizasyon divès kaliteurinpodositmakè pou dyagnostik ak siveyans DKD. Pou egzanp, Jim et al [14] rapòte ke nivo nephrin urin yo te detekte nan tout pasyan DKD ki gen albuminuria, men se sèlman 54 pousan nan moun ki pa albuminuria. Nivo nefrin nan pipi a korelasyon ak nivo albuminuria, ak envers ak fonksyon ren [14]. Ma et al rapòte ke nivo pipi anjyopoyetin-tankou -4 (Angptl4) te ogmante nan DKD [85]. Nivo podokaliksin pipi a te ogmante nan pasyan dyabetik anvan aparisyon mikroalbuminuria e li te pwobableman pi sansib pase mikroalbuminuria pou deteksyon bonè DKD [86]. Nan DKD etabli, nivo podocalyxin pipi pozitivman korelasyon ak nivo HbA1c ak rapò albumin-a-kreyatinin [87,88]. Ansanm, rezilta ki disponib yo endike ke nivo urin plizyè sib podocyte espesifik yo se endikatè bonè nan DKD, ak nivo podocalyxin urin se makè ki pi pwomèt nan sans sa a [54].

Nivo yo nan sib la podocyte-espesifik nan eleman pipi endividyèl yo te eksplore tou.Pipipodositnivo mikropartikil yo, jan yo detèmine pa sikometri koule, yo te pi wo nan dyabèt tip 1 pase nan kontwòl ki an sante, ak nivo a plis ogmante ak kranpon ipèglisemi [89]. Nivo WT-1 ekzosomal nan pipi a gen rapò ak gravite proteinuria, fonksyon ren, domaj glomerulè, ak pousantaj deperi fonksyon ren nan pasyan dyabetik [58,90]. Nan yon lòt etid, nivo glycogen synthase kinase (GSK) 3 nan selil urin eksfolye yo te pi egzak pase albuminuria nan pasyan dyabetik diskriminasyon ak ak san pwoblèm ren pwogresif [91]. Sepandan, metodoloji tès sa a ankonbran epi li ka pa aplikab pou pratik klinik woutin.

Konsènan makè podocyte-espesifik mRNA nan pipi, yon etid anvan te montre ke nivo mRNA urin nan nephrin, podocin, sinaptopodin, WT-1, ak -aktin-4 te pi wo nan pasyan ki gen DKD pase nan kontwòl nòmal. [92]. Te gen yon diferans enpòtan nan nivo mRNA urin nan nephrin, podocin, -actinin-4, ak CD{2-pwoteyin ki asosye nan pasyan dyabetik ak divès severite albuminuria [93]. Nivo mRNA nan pipi nan nephrin, podocin, sinaptopodin, WT-1, ak -aktin-4 yo te gen rapò tou akurinpodositkonte, nivo nefrin urin, albuminuria, ak gravite defisyans ren [93]. Plis dènyèman, yo te jwenn nivo mRNA espesifik pou podosit urin yo anvan aparisyon mikroalbuminuria nan pasyan ki gen dyabèt tip 2 [94], ak rapò mRNA-a-kreatinin podocin urin, yon makè detachman podosit, ki gen rapò siyifikativman ak pousantaj ki vin apre a. n bès fonksyon ren [94]. Anplis de sa, nivo mRNA sinaptopodin urin te pi ba apre 12 semèn nan inibitè anzim konvèti anjyotansin (ACE) ak anjyotansin reseptè bloke (ARB) terapi konbinezon an konparezon ak monoterapi inibitè ACE [95]. Ansanm, prèv ki disponib yo sijere ke mezi nivo podocyte-espesifik mRNA nan pipi ka gen anpil valè pou stratifikasyon risk ak siveyans repons terapetik nan DKD.

3.2. Chanjman minimòm nan nefropati ak glomerulosclerosis fokal

MCN ak FGS yo souvan konsidere kòm maladi podocyte, ak wòl nanurinpodositsib yo te teste. Zhou et al. [96] rapòte ke nivo WT-1 ekzosomal urin, jan yo mezire pa teknik imunoblotting, te siyifikativman pi wo nan pasyan FGS pase nan moun ki gen sendwòm nefrotik esteroyid-sansib (SSNS) oswa volontè ki an sante. Nivo WT-1 ekzosomal urin yo te diminye anpil apre tretman kortikoterapi ak remisyon FGS oswa SSNS [96]. Nan yon lòt etid, nivo nephrin urin, jan yo mezire pa yon tès ELISA konvansyonèl, te siyifikativman pi wo nan adilt ki gen FGS pase nan lòt kòz sendwòm nefrotik [97].

Nivo pipi nan mRNA espesifik podocyte yo te etidye tou. Yon etid bonè te montre ke nivo nephrin urin ak podocin mRNA pa t siyifikativman diferan ant pasyan ki gen MCN ak volontè ki an sante, ak nivo yo te siyifikativman pi ba pase pasyan DKD [98]. Yon etid ki vin apre te montre ke nivo nephrin urin ak podocin mRNA yo te pi ba nan pasyan ki gen MCN pase nan FGS oswa kontwòl ki an sante, ak grandè rediksyon an korelasyon ak degre nan proteinuria [99]. Nan etid sa a, nivo sinaptopodin urin mRNA yo te jwenn korelasyon ak pousantaj ki vin apre nan n bès fonksyon ren nan pasyan FGS [99], sijere ke yon chanjman kalitatif nan podosit FGS ta ka idantifye nan pipi a.

3.3. Nefropati manbràn

Malgre ke prensipal chanjman patolojik nan nefropati manbràn (MGN) se depo yon konplèks iminitè nan espas subepitelial la, ki lakòz chanjman nan baryè filtraj glomerulè a, etid souurinpodositmakè nan MGN yo ra. Nivo mRNA sediman urin nan nephrin, podocin, ak synaptopodin te siyifikativman elve nan MGN, men nivo yo te fè diferans MGN seryezman ak lòt kòz sendwòm nefrotik [98]. Plis dènyèman, Lu et al [100] rapòte ke nimewo a nanurinpodosit-mikwopatikil ki sòti diminye ansanm ak amelyorasyon nan paramèt klinik apre terapi imunosuppressive, sijere yon wòl nan siveyans nan MGN.

3.4. Nefropati IgA

Malgre ke nefropati imunoglobulin A (IgAN) se sitou yon maladi mezanjyal, wòl nanurinpodositkonte kòm yon biomarker te eksplore. Miyò, Shen et al [101] te jwenn ke pasyan IgAN te gen yon ogmantasyon nan pèt podosit urin, mwens podosit nan glomeruli yo, ak fizyon pwosesis pye pi grav nan espesimèn byopsi ren yo. Nan etid sa a, podocyte urin te idantifye pa etid endirèk imunofluoresan podocalyxin, ak la.urinpodositkonte ki gen rapò ak kreyatinin serik ak proteinuria [101]. Yon etid ki vin apre te montre ke kantite podosit urin nan pasyan IgAN ki gen paralezi segmantal te pi wo pase nan moun ki pa gen esklewoz segmantal [102]. Nan timoun ki gen IgAN oswa Henoch-Sch¨ sou entènèt purpura nefrit, Hara et al [103] te montre ke pèt kimilatif nan podosit nan pipi a te gen rapò ak gravite domaj istoloji ak degre nan glomerulosclerosis nan byopsi ren, ak pasyan ki gen pèsistan.urinpodositekskresyon te gen yon pwogresyon rapid histolojik.

Etid yo sou molekil podocyte-espesifik nan pipi kòm biomarkers nan IgAN yo fragmenté ak enkonplè. Nivo podocalyxin urin siyifikativman korelasyon ak gravite blesi kapilè siplemantè egi nan IgAN adilt [102]. Nivo mRNA podocin urin yo te rapòte reflete gravite blesi glomerulè aktif nan byopsi ren epi li bay enfòmasyon pronostik konplemantè ak nivo proteinuria [104]. Piske IgAN se glomerulonefrit prensipal ki pi komen atravè mond lan, gen plis etid nesesè nan domèn sa a.

Anplis IgAN, wòl nanurinpodositmakè yo te eksplore nan lòt glomerulopati mezanjyal. Pa egzanp,urinpodositpèt ogmante ansibleman nan tou de fòm éréditèr ak akeri nan esklewoz mesangyal difize [102]. Sepandan, zòn sa a mwens byen etidye, pwobableman akòz eterojenite nan klasifikasyon patolojik li yo.

3.5. Nefrit lupus

Pipipodosityo te etidye koule nan nefrit lupus. Yon rapò anvan te montre ke pi gwo nanurinpodositan pasyan ki gen nefrit lupus aktif yo te solid men dedifferentiated, ak pwopòsyon nan podosit apoptotik nan pipi te siyifikativman pi ba pase sa yo ki nan kontwòl ki an sante [105]. Nan etid sa a, podokaliksin urin, sinaptopodin, podocin, nephrin, ak WT-1 nivo (jan yo mezire pa Western blotting) te ogmante siyifikativman nan lupus sistemik, espesyalman nan nefrit lupus aktif, ak nivo yo siyifikativman korelasyon ak severite proteinuria. ak aktivite istolojik [105]. Yon etid ki vin apre te rapòte ke nivo mRNA urin nan nephrin, podocin, ak sinaptopodin yo te siyifikativman pi wo nan pasyan ki gen nefrit lupus aktif pase nan lupus trankil [106]. Espesyalman, nivo mRNA nephrin urin te gen rapò ak proteinuria ak aktivite maladi sistemik, men se pa klas istolojik nefrit lupus, pandan y ap nivo mRNA podocin urin te yon prediktè endepandan nan n bès fonksyon ren ki vin apre [107].

3.6. Antikò sitoplasmik anti-netrofil (ANCA) ki asosye ak vaskulit

Malgre ke podosit yo pa sib prensipal nan blesi ren nan glomerulonefrit ki asosye ak ANCA, dansite podozit intra-glomerular se karakteristik redwi [108]. Zou et al [108] te jwenn ke pousantaj nan detachman podocyte nan pipi predi ki vin apre pèt fonksyon ren nan glomerulonefrit ki asosye ak ANCA, ak Minakawa et al [109] rapòte ke podocin urin rapò mRNA nephrin, yon makè ranplasan nan podocyte intra-glomerulaire. estrès, ki gen rapò ak pousantaj fòmasyon kwasan [109]. Nan etid la dènye, pasyan ki gen nivo segondè nanurinpodositmRNA-derived te gen yon rezilta ren favorab, prezimableman akòz pi bon rezèv glomerular podocyte ak potansyèl pou revèsiblite [109].

3.7. Lòt CKD

Itilite a nanurinpodositmakè an espesifikrenmaladise rezime nan Tablo 3. Yo te eksplore yon kantite makè podocyte-espesifik nan pipi tou kòm makè jenerik nan CKD.(Ckwonikrenmaladi). Pa egzanp,urinpodosit-mikwovesikul ekstraselilè ki sòti yo, jan yo te mezire pa flow cytometry, yo te ogmante siyifikativman nan pasyan ipètansif ki gen pwoblèm fonksyon ren pase nan moun ki pa gen pwoblèm ren [110]. Nivo sinaptopodin pipi, jan yo detèmine pa Western blotting, ki gen rapò ak fonksyon ren nan tou de CKD dyabetik ak ki pa dyabetik.(Ckwonikrenmaladi), kèlkeswa degre albuminuria, sijere ke sinaptopodin pipi se yon makè jenerik nan domaj podosit [110]. Pami yon panèl sib mRNA urin podocyte espesifik, nivo mRNA faktè neurotrophic ki sòti nan sèvo (BDNF) te gen pi bon korelasyon ak molekil blesi ren urin -1 (KIM-1), ki se yon makè jenerik. domaj nan ren [111]. Pou sib miRNA, nivo miR-21 ekzosomal urin yo te ogmante nan modèl bèt nan blesi podosit ak CKD.(Ckwonikrenmaladi)pasyan [112], men orijin selilè miR-21 pa t detèmine nan etid sa a.

Sepandan, li enpòtan sonje ke se pa toutrenmaladigen blesi podosit. Yon ogmantasyon nanurinpodosityo te rapòte pèt nan divès maladi glomerulèr men se pa nan polikistik otozomal dominanrenmaladi(ADPKD) [113]. Sa ki pi enpòtan, asosyasyon ki genyen ant podocyturia ak proteinuria varye ansibleman ant diferan maladi glomerulèr, sijere keurinpodositmakè yo ta dwe pi byen konsidere kòm maladi espesifik [113].

4. Konklizyon

Blesi Podocyte jwe yon wòl enpòtan nan patojèn ak pwogresyon anpil mounrenmaladi. Fragman selilè podocyte ki sòti ak sib molekilè podocyte espesifik nan pipi a gen yon gwo potansyèl pou devlope kòm byomarkè pou dyagnostik ak siveyansrenmaladi. Pwosesis devlopman biomarker gen ladan idantifikasyon makè espesifik, detèminasyon metodoloji mezi, ak desizyon sou kontèks klinik pou aplikasyon an (figi 2). Avèk avanse nan konpreyansyon nou sou biyoloji podocyte ak disponiblite nouvo teknoloji,urinpodositmakè yo espere gen yon dimansyon aplikasyon elaji, tou de akòz idantifikasyon an nan nouvo sib ak devlopman nan metòd nouvo pou quantification yo. An retou, validasyon makè podosit urin yo ka fè limyè sou konpreyansyon nou sou fizyopatoloji.renmaladi. Gen yon richès nan metòd pou quantification de podocyte ak plizyè podocyte-espesifik makè nan pipi. Nan deseni kap vini an, efò rechèch yo ta dwe konsantre sou estandadize, konparezon, ak otomatize metòd laboratwa, osi byen ke defini valè ajoute yo nan tès klinik woutin yo.

Fig. 2. Aspè yo dwe konsidere pou devlopman biomaketè ki gen rapò ak podosit urin pourenmaladi. (GCBM, glomerular kapilè manbràn sousòl; CKD,kwonikrenmaladi; DKD, dyabetikrenmaladi; FGS, glomerulosclerosis fokal).

Deklarasyon enterè konpetisyon

Otè yo deklare ke yo pa gen okenn enterè finansye konkiran oswa relasyon pèsonèl ki ta ka parèt enfliyanse travay yo rapòte nan papye sa a.

Rekonesans

Etid sa a te sipòte pa Richard Yu Chinese University of Hong Kong (CUHK) PD Research Fund, ak kont rechèch CUHK 6905134 ak 8601286. Fonksyonè yo pa te gen okenn wòl nan konsepsyon etid la, koleksyon done, ak analiz, desizyon pou pibliye, oswa preparasyon maniskri a. Otè yo pa deklare okenn lòt konfli enterè. Rezilta yo prezante nan papye sa a pa te pibliye anvan an antye oswa an pati.

Amelyore maladi ren--Cistanche actoside

Soti nan: 'Makè podosit urin nanrenmaladi'paLingfeng Zeng, et al

---Clinica Chimica Acta 523 (2021) 315–324