Dinamik transkripsyon alkòl espesifik nan rekonsolidasyon memwa ak rplonje Pati 2

Alkòl-memwa rekipere deklanche rapid men pasajè upregulation nan ekspresyon an mRNA nan Arc ak Egr1, men se pa nan Bdnf, nan DH (Fig. 2C-E, I).

Kòm tan ap pase, moun piti piti jwenn yon nouvo konpreyansyon sou mistè a nan bliye. Nan pwosesis sa a, yon nouvo teknoloji rekipere memwa te piti piti vin yon otspo rechèch.

Se konsa, èske gen yon relasyon ant rekipere memwa alkòl ak pèfòmans memwa? Vin gade kounye a! Premye a tout, nou bezwen klè: Rekipere memwa alkòl se pa yon teknoloji separe. Li se yon teknoloji ki afekte newòn nan sèvo atravè alkòl. Pwosesis sa a ka aktive kèk souvni "dòmi" nan sèvo a, ki pèmèt nou rafrechi souvni sa yo.

Dezyèmman, nou bezwen konnen ke amelyore memwa pa senpleman pèmèt nou "sonje" plis bagay, men se yon pwosesis pou rekipere ak rekonstwi memwa nan diferan fason. Pwosesis sa a ka ede nou pi byen konsolide ak konprann konesans nou te aprann yo, kidonk amelyore memwa nou an.

Se poutèt sa, nou ka konkli ke gen yon relasyon ant rekipere memwa alkòl ak pèfòmans memwa. Lè nou itilize teknoloji sa a pou re-ekstrè memwa anvan yo apre nou fin bwè alkòl, nou ap sibi yon pwosesis pou rekonsolide memwa sa yo, kidonk amelyore memwa nou nan yon sèten mezi.

Natirèlman, nou dwe sonje tou ke rekipere memwa alkòl se pa yon teknik ki dire lontan ak serye pou amelyore memwa. Si nou vle gen yon memwa ekselan pou yon tan long, nou bezwen kontinyèlman konsolide ak amelyore memwa nou atravè etid chak jou ak lavi, konbine avèk lòt teknik fòmasyon memwa.

Nan pwosesis sa a, nou bezwen kenbe yon atitid optimis tout tan, pi byen ankouraje motivasyon aprantisaj nou yo ak potansyèl memwa. Se poutèt sa, se pou nou fè fas ak fòmasyon memwa aktivman, dwe tèt nou san rete, epi avanse avèk kouraj sou wout la nan kontinyèlman amelyore memwa! Li ka wè ke nou bezwen amelyore memwa, ak Cistanche deserticola ka siyifikativman amelyore memwa, paske Cistanche deserticola kapab tou kontwole balans nan nerotransmeteur, tankou ogmante nivo yo nan asetilkolin ak faktè kwasans. Sibstans sa yo trè enpòtan pou memwa ak aprantisaj. Anplis de sa, Vyann kapab tou amelyore sikilasyon san ak ankouraje livrezon oksijèn, sa ki ka asire ke sèvo a resevwa ase eleman nitritif ak enèji, kidonk amelyore vitalite nan sèvo ak andirans.

Espesyalman, Arc ak Egr1 nivo mRNA te pik 30 minit apre rekipere memwa alkòl, epi li te retounen nan nivo debaz nan 60 minit apre rekipere memwa, anpil tankou gwoup NoRetrieval la.
Nan mPFC a, rekiperasyon memwa alkòl te lakòz yon regilasyon transient nan Arc ak Egr1 men se pa Bdnf mRNAexpression, menm jan ak modèl ekspresyon yo wè nan DH a (Fig.2G, H, J).

Ogmantasyon nan ekspresyon Arc ak Egr1 mRNA nan DH ak mPFC te anvan pa ogmante fosforilasyon nan faktè transcription cAMP repons eleman-obligatwa pwoteyin (CREB) (Figi S2), deja montre yo kontwole ekspresyon jèn sa yo [53].

Ansanm, rezilta yo montre ke rekipere memwa ki gen rapò ak alkòl te pwovoke yon regilasyon ki depann de tan nan ekspresyon Arc ak Egr1 men pa nan Bdnf nan DH ak mPFC, sa ki ogmante posiblite pou ekspresyon chanjman jèn sa yo ka patisipe nan rekonsolidasyon alkòl. memwa.

Rekipere memwa ki asosye ak alkòl ogmante nivo ARCprotein nan DH la

ARC gen yon wòl byen etabli nan plastisit sinaptik [54] ak kominikasyon newòn [55], epi li te deja montre li jwe yon wòl nan rekonsolidasyon plizyè memwa [5, 22, 46, 47].

Sa ki pi enpòtan, nou te deja montre ke rekipere memwa alkòl ogmante nivo pwoteyin ARC nan amygdala ak mPFC [5]. Koulye a, nou te mande si nivo pwoteyin ARC yo te ogmante tou nan DH a, akòz regilasyon Arc mRNAinduced pa rekipere memwa alkòl (figi 2C).

An konsekans, sourit yo te fòme pou eksprime alkòl-CPP, jan sa dekri pi wo a (FigiS3A, B). Yon jou apre tès CPP a, souvni alkòl yo te rekipere, ak tisi nan sèvo yo te kolekte 60, 120, oswa 360 minit pita.

Nou te jwenn ke nivo pwoteyin ARC nan DH a te ogmante 60 min apre alkòl rekiperasyon memwa, retounen nan nivo debaz nan èdtan pwochen (Figi S3). Ansanm, rezilta sa yo sijere ke rekipere memwa alkòl ogmante tou de Arc mRNA ak ARC ekspresyon pwoteyin nan DH la.

Downregulation nan ekspresyon ARC nan DH a deranje rekonsolidasyon memwa alkòl

Si ogmantasyon nan ekspresyon ARC nan DH apre rekipere memwa alkòl la esansyèl pou rekonsolidasyon memwa alkòl, Lè sa a, downregulation li apre rekipere memwa alkòl ta dwe deranje memwa sa a, sa ki lakòz abolisyon ekspresyon alkòl-CPP.

Pou diminye nivo ARC nan DH la pandan rekonsolidasyon memwa alkòl, nou te itilize antisenseoligodeoxynucleotides (AS-ODN) ki te dirije kont Arc mRNA [56].Knockdown of ARC nan rejyon sèvo ki gen rapò ak memoryconsolidation ak rekonsolidasyon lè l sèvi avèk Arc AS-ODN te deja montre deranje konsolidasyon an. nan memwa aversif ak apetitif [46, 47, 56, 57] ak rekonsolidasyon yo ofear memwa [46, 47, 57], osi byen ke yo afekte morfin ki asosye memwa rekonsolidasyon [22].

Pou teste si wi ou non ARC downregulation deranje rekonsolidasyon memwa alkòl ak aboli chèche alkòl, nou fòme sourit yo pou yo montre alkòl-CPP (Fig. 3B, gade Figi S4 pou done moun).

Jou apre tès CPP 1, sourit yo te resevwa yon antre-ipocampalinfusion nan Arc AS-ODN oswa kontwòl scrambled (SCR)-ODN. Depi AS-ODN te desann nivo pwoteyin ARC 5 èdtan apre perfusion [57](Figi S5, validation AS-ODN), yo te rekipere memwa alkòl 4 apre perfusion, sa ki pèmèt downregulation a rive yon èdtan apre rekipere, nan alantou pik ogmantasyon nan ARC. nivo pwoteyin pwovoke pa rekipere memwa alkòl (Figi S3C).

Lè placepreference yo te teste jou kap vini an, nou te jwenn ke alkòl-CPP te aboli nan sourit ki te resevwa Arc AS-ODN, tandiske SCRODN-trete sourit toujou prezante CPP (Fig. 3B).

Konklizyon nou yo sigjere ke perfusion intra-ipokanp nan Arc AS-ODN te deranje rekonsolidasyon memwa alkòl nan anpeche ogmantasyon nan nivo pwoteyin ARC ki te koze pa rekipere memwa.

Pou plis teste si dezòd memwa sa a te akòz blokaj la nan endiksyon ARC apre rekiperasyon an espesyalman, nou te chwazi yon dezyèm fwa pwen nan teyorik 5-6h [9, 10] "fenèt rekonsolidasyon" pou Arc AS-ODN perfusion.

Etandone ke ogmantasyon nan ekspresyon an nan pwoteyin ARC te pik 1 èdtan apre rekipere memwa epi li te tonbe tounen nan debaz 2 èdtan apre rekiperasyon memwa (jan sa endike nan Figi S3C), nou vize ekspresyon pwoteyin ARC 3 èdtan apre rekipere memwa.

Kidonk, nou enfuze Arc ASODN oswa kontwole SCR-ODN nan DH 2 h anvan rekipere memwa, ki espere diminye nivo ARC 5 èdtan pita, sa vle di, 3 apre rekipere memwa (Figi S5B).

Nan yon tès preferans kote ki te fèt yon jou apre, nou te jwenn ke tou de gwoup pèsiste montre alkòl-CPP (Fig. 3C).

Konklizyon sa yo endike ke downregulation nan nivo ARC pase rekiperasyon-depandans endiksyon li yo pa entèfere ak rekonsolidasyon kontinyèl nan memwa alkòl. Anplis, isit la nou demontre ke "fenèt rekonsolidasyon" ki depann de ARC la pa dire plis pase 3 èdtan apre rekiperasyon memwa.

"fenèt rekonsolidasyon", sa vle di, plis pase 5-6 èdtan apre memoryretrieval [9, 10], pa ta afekte ekspresyon memwa ki vin apre.

Pou teste ipotèz sa a, nou enfuze Arc AS-ODN oswa kontwòl SCRODN nan DH 4 h apre rekiperasyon memwa (figi 3D), ki espere afekte ekspresyon pwoteyin ARC 9 èdtan apre rekiperasyon memwa (sa vle di, 5 èdtan pita; Figi S5).

Tès yon jou apre te revele ke tou de gwoup yo te demontre preferans fò pou lòj la alkòl pè. Konklizyon sa yo endike ke downregulation nan ekspresyon pwoteyin ARC plizyè èdtan apre rekipere memwa (sa vle di, deyò fenèt rekonsolidasyon ARC-depandan) pa afekte memwa ki kache ekspresyon alkòl-CPP.

Ansanm, rezilta sa yo sijere ke regilasyon ipokanp nan ekspresyon pwoteyin ARC yo obsève yon ti tan apre rekipere memwa alkòl nesesè pou rekonsolide memwa alkòl, kòm anpèchman ogmantasyon nan nivo ARCprotein ki te lakòz rekiperasyon sa yo te mennen nan pèt alkòl-chèche, gen anpil chans pa deranje pwosesis rekonsolidasyon memwa a.

Lè yo fin rekipere, memwa apetitif ki asosye ak alkòl ak ki pa alkòl pataje menm dinamik transkripsyon Arc ak Egr1.

Konklizyon nou yo ki enplike ekspresyon Arc ak Egr1 nan konsolidasyon memwa alkòl yo nan liy ak etid anvan yo ki montre IEG sa yo enplike nan rekonsolidasyon diferan kalite memwa [19, 22, 46, 47, 57].

Nou te sipoze ke transkripsyon ak tradiksyon IEG sa yo pa espesifik pou alkòl, epi pito yo ka jwe yon pati nan mekanis debaz komen pou trete memwa reaktive, ki gen ladan memwa apetitif [16]. Pou plis eksplore posiblite sa a, wetested si rekipere memwa ki pa alkòl, ki asosye ak sikwoz atravè yon pwotokòl CPP ki sanble ta chanje ekspresyon Arc ak / oswa Egr1mRNA, menm jan li te fè ak memwa ki gen rapò ak alkòl.

Pou sa, nou premye antrene sourit nan yon pwosedi sikwoz-CPP ki sanble ak pwosedi alkòl-CPP yo itilize pi wo a, ansanm yon sèl lòj nan aparèy CPP a ak konsomasyon volontè nan granules sikwoz (figi 4A, konsepsyon eksperimantal).

Apre kat pè, sourit yo te montre yon gwo preferans pou lòj ki asosye ak sikwoz la (Fig.4B). Apre sa, memwa ki asosye ak sikwoz la te rekipere pa reexposition nan lòj la pè sikwoz. Tisi nan sèvo ki soti nan gwoup kontwòl Retrieval ak Pa gen rekiperasyon yo te kolekte 10, 30, oswa 60 minit apre rekipere memwa. Lè sa a, yo te evalye nivo Arc ak Egr1 mRNA nan theDH ak mPFC.

Nou te jwenn ke rekipere memwa sikwoz te lakòz rapid ak transient upregulation nan ekspresyon mRNA Arc ak Egr1 nan tou de DH ak mPFC (figi 4C-F). Jan liy tire yo montre nan Fig.

4C–F, modèl regilasyon ekspresyon mRNA nan tou de rejyon sèvo yo, ki te pwovoke pa rekipere memwa sikwoz, te sanble ak regilasyon jèn sa yo obsève sou rekipere memwa alkòl.

Konklizyon sa yo sijere ke ogmantasyon rapid ak pasajè nan ekspresyon mRNA Arc ak Egr1 nan DH ak mPFC asosye ak rekipere tou de souvni alkòl ak sikwoz ki asosye.

Karakterizasyon dinamik transcriptional espesifik alkòl pou rekipere memwa: yon analiz transcriptomic

Etandone nou jwenn ke Arc ak Egr1 transkripsyon yo te chanje lè rekipere tou de memwa alkòl ak ki pa alkòl ki asosye, nou te chèche idantifye siyati transcriptomic espesifik pou rekipere memwa alkòl lè nou fè RNA-seqanalysis nan DH ak mPFC (Fig. 5A, Eksperimantal). konsepsyon).

Pou sa, apre fòmasyon alkòl-CPP (Fig. 5B), yo te rekipere memwa ki asosye ak alkòl (ak yon gwoup kontwòl pa gen okenn rekiperasyon). TheDH ak mPFC yo te kolekte 30 minit pita epi trete pou analiz RNAseq (Fig. 5C, D).

For more information:1950477648nn@gmail.com