Camellia Japonica lwil esansyèl anpeche -MSH-pwovoke pwodiksyon melanin ak aktivite tirozinaz nan selil B16F10 melanom.

Kontakte: ali.ma@wecistanche.com

Si Young Ha, Ji Young Jung, ak Jae-Kyung Yang

Lwil esansyèl yo se lwil aromat ekstrè nan fèy yo, tij, kale, petal, ak rasin nan plant aromat grandi nan lanati orgrown nan metòd òganik epi yo gen divès efè medikal kòm sibstans natirèl. Lwil esansyèl ki soti nan grenn Camelliajaponica montre plizyè pwopriyete fonksyonèl; sepandan, litirozinazaktivite inhibitory pa te envestige anpil. -se etid fèt pou mennen ankèt sou konpozisyon chimik ak aktivite inhibition tirosinaz nanCamellia japonicaseed lwil esansyèl(CJS-EO). Hexamethylcyclotrisiloxane (42.36 pousan) ak octamethylcyclotetrasiloxane (23.28 pousan) se de eleman prensipal yo nan CJS-EO, jan yo idantifye atravè gaz chromatografi-spèktrometri mas.The aktivite inhibition nanCJS-EOak positivecontrol arbutin yo evalye plis kont tirozinaz djondjon.ThRezilta yo montre ke CJS-EO ak arbutin anpechetirozinazaktivite. Anplis, CJS-EO siyifikativman inibit melanogenesis nan gwoup la -melanocyte-estimulant òmòn-trete, ak kantite lajan enpòtan nan melanin siprime. Pou rann kont kòz CJS-EO atirozinazefè inhibition ak efè melaninreduction, analiz jenetik ak pwoteyin yo fèt. Dapre rezilta nou yo, nou pwovizwaman konkli saCJS-EOka anpeche melanosit ki soti nan faktè danjere tankou pwoteyin ki gen rapò ak tirozinaz. Rezilta sa yo demontre ke CJS-EO posede aktivite potentantityrosinase epi li ka yon bon po-blanchimanajan.

Klike souCistanche UK pou inhibiteurs tirozinaz yo.

Entwodiksyon

Koulè po afekte pa pigman tankou melanin nan epidèm, emoglobin nan veso sangen dèrm yo, ak karotèn nan tisi lar la. Pami yo, koulè po ekstèn detèmine pa kantite ak distribisyon pigman melanin [1]. Anzim ki enplike nan sentèz inmelanin yo byen li te ye kòmtirozinaz, pwoteyin ki gen rapò ak tirozinaz -1 (TRP-1), ak dopachrome tautomerase (DCT, TRP-2) [2]. Pami yo, tirosinaz se yon anzim nan reyaksyon inisyal la, ki se etap ki detèmine pousantaj nan sentèz melanin, ak oksidasyon tirosinaz nan DOPA kinon [3]. Se poutèt sa, sibstans ki anpechetirozinaz,TRP-1, ak TRP-2 ka anpeche sentèz melanin epi konsa gen yon po-blanchimanfonksyon [4]. Melanin jwe yon wòl enpòtan nan pwoteje po a kont reyon UV ak faktè ekstèn danjere nan po moun. Sepandan, lè li pwodui an plis epi akimile sou po a, li ka lakòz melasma, tach, tach po, elatriye, epi li ka mennen nan lanmò selil akòz toksisite nan précurseur melanin ak maladi tankou kansè po [5-7].

Asid L-ascorbic, arbutin, ak asid laktik yo te devlope kòm inibitè pwodiksyon melanin reprezantan, men itilizasyon yo se entèdi reglemante akòz iritasyon po oswa pwoblèm sekirite. Se poutèt sa, rechèch ap aktivman fèt pou jwenn yon ajan blanchi natirèl ki an sekirite ak efikas [8].

Plant lwil esansyèl yo konnen yo montre divès kalite pwopriyete fonksyonèl, tankou gwo aktivite anti-bakteri ak efè antiaging ak rejenerasyon po [9, 10]. Cinnamomum cassia lwil esansyèl [4], Polygonum odoratum essentialoil [11], ak Vitex negundo Linn fèy lwil esansyèl [12] yo te rapòte ke yo posede.tirozinazaktivite inhibition.

Camellia japonica (non Japonè "tsubaki") se yon pye bwa popilè kòm yon plant jaden ak yon sous materyèl lwil oliv ak medikaman popilè nan Japon [13]. Nan Kore di, C. japonica se yon pye bwa Evergreen ki fè pati fanmi Theaceae ak genus Camellia [14]. C. japonica grenn lwil oliv gen yon istwa long nan itilize kòm yon pwoteksyon kosmetik asire sante po ak cheve ak kòm yon ajan kalme [15]. Yo te rapòte ke lwil oliv C. japonicaseed montre divès aktivite byolojik, ki gen ladan aktivite antioksidan [16], aktivite anti-bakteri [17], aktivite anti-enflamatwa [18], ak fonksyon baryè po [19]. Malgre itilizasyon toupatou li yo, kèk etid te egzamine efè lwil grenn C. japonica sou po.blanchiman-asosyetirozinazaktivite.

Se poutèt sa, nan etid sa a, konpozisyon chimik nan C. lwil esansyèl grenn japonica (CJS-EO) te envestige lè l sèvi avèk gaz chromatografi-spèktrometri mas (GC-MS), aktirozinazaktivite inhibition nan lwil esansyèl sa a te egzamine. Pou adrese aktivite inhibition sa a, efèCJS-EOsou -MSH-stimile melanogenesis ak anpèchman tirozinaz nan selil melanom B16F10 yo te evalye.

2. Materyèl ak Metòd

2.1. Materyèl Plant yo.

C. japonica grenn yo te achte nan mwa Mas 2021 nan men Seohyeon Herbal Medicine FarmingAssociation, Nonsan, Kore di Sid. Hee-Gon Kang, yon reprezantan ki soti nan forè eksperimantal nan Gyeongsang National University, te idantifye materyèl plant yo.

Cistanche se youn nan medikaman tradisyonèl Chinwa yo

2.2. Reyaktif.

Chanpiyontirozinazyo te achte nan men T-3824 (Sigma–Aldrich, USA), epi yo te achte sourit B16F10 mela noma nan men CRL-6475 (AmericanType Culture Collection, Manassas, VA, USA). Medya ak reyaktif ki nesesè pou kilti selil yo te achte nan Invitrogen (USA), Sigma (USA), ak Nunc (USA). Pou Western blot, yo te itilize yon twous Western blot ak yon sistèm transfè semi-sèk (Bio-Rad, USA), ak rezilta yo te konfime lè l sèvi avèk yon sistèm analiz imaj (Bio-Rad, USA). Antikò yo te achte nan men Santa Cruz Biotech (USA). sulfoxide (DMSO) te achte nan men Sigma-–Aldrich (St. Louis, MO, USA).

2.3. Ekstraksyon ak Preparasyon Egzanp.

Ekstraksyon te fè lè l sèvi avèk yon metòd ki te pibliye deja ak ti modifikasyon [4]. Yon ti tan, grenn C. japonica (500 g) yo te plase nan yon veso ak ekstrè atravè distilasyon lè l sèvi avèk 2000 mL dlo pou 4 èdtan. -e vapè ki te pwodwi te refwadi ak yon sistèm refwadisman fèmen, epi likid ki te lakòz yo te kolekte nan yon veso. -e lwil oliv flote nan direksyon tèt la nan likid la distile, tandiske dlo a rete nan faz ki pi ba nan likid la; pakonsekan,CJS-EOyo te jwenn lè w retire faz anwo likid la, ki te gen lwil oliv la vle a, epi li estoke nan -20 degre jiskaske yo itilize. Yo te itilize yon solisyon 500 ppmstock nan CJS-EO nan DMSO pou cellexperiments yo.

2.4. GC-MS analiz.

Konpozan yo temèt nanCJS-EOyo te analize lè l sèvi avèk GC-MS (Clarus 600 GC-MS, PerkinElmer, Shelton, CT, USA). Kolòn analiz yo itilize te PerkinElmer Elite-5 ms (3{{10}} mm × 0.3 mm × 0.25 μm). Elyòm gaz (1.0 mL/min) te itilize kòm faz mobil. Tanperati fou a te ogmante soti nan 40 degre a 100 degre nan yon vitès 10 degre / min ak Lè sa a, konsève pou 1.0 min. Apre sa, tanperati a te ogmante a 230 degre nan yon pousantaj de 10 degre / min, epi kenbe pou 5 min. -e tanperati a nan injektè a te mete nan 200 degre, ak tanperati a nan detektè a te mete nan 250 degre. -Rezilta analiz yo te idantifye lè l sèvi avèk Pwogram NIST Mass Spectral Search (Vèsyon 2.0 g, National Institute of Standards and Technology, Gaithersburg, MD, USA).

2.5. Kilti Selil.

Selil melanom sourit B16F10 yo te achte nan Korea Cell Line Bank. Kilti selilè yo te fè lè l sèvi avèk DMEM (WELGENE, Daegu, Kore di) ak 10 pousan FBS (serom fetal bovine, WEL GENE, Daegu, Kore di) ak 1 pousan penisilin-streptomycin (Gibco BRL) nan 37 degre ak 5 pousan CO2 kondisyon. Pou rezoud fenomèn twòp dansite ki te koze pa pwoliferasyon nimewo selilè yo, yo te kenbe selil B16F10 kiltive yo nan yon nimewo apwopriye lè l sèvi avèk tripsin (Hyclone, USA).

2.6. Selil Viabilite Essay.

Selil melanom B16F10 yo te simen nan 3 × 104/mL nan yon plak 6-byen pou kilti selil.CJS-EOte trete nan yon konsantrasyon apwopriye (31.25 ppm to 500 ppm) pou chak pwi. -e mwayen yo te retire apre 72 èdtan, ak 200 μL 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-Diphenyltetrazolyum bromur (MTT) solisyon (Promega, Madison, WI, USA) te trete. Reyaktif MTT yo te retire pwòp apre enkubasyon nan yon enkibatè CO2 37 degre pou 2 èdtan. Pou selil ki tache yo, yo te trete 2 mL DMSO pou fonn tout fòmazan ki te pwodwi nan pwi yo. Vitabilite selil yo te mezire pa absòbe nan 540 nm ak yon lektè ELISA (SpectraMax190, Molecular Devices LLC, San Jose, CA, USA).

2.7. Tirozinaz Aktivite Essay.

Tirozinazaktivite te estime pa mezire pousantaj oksidasyon L-DOPA [20]. Selil B16F10 (2 × 105 selil / byen) yo te trete ak òmòn -melanocyte-stimulating (-MSH) akCJS-EOak kiltive pou 3 jou. Selil yo te rekòlte, liz tanpon (1 pousan Triton X-100, 0.1 M PMSF) te ajoute, ak Lè sa a, selil yo te lysed pa reyaji nan 4 degre pou 1 èdtan. -e supernatant te kolekte pa santrifugasyon nan 12,000×g pou 15 minit. Apre quantification nan pwoteyin nan sipènatant kolekte a, yo te ajoute 10 mmol/mL L-DOPA. Apre sa, selil yo te enkube nan yon enkibatè CO2 nan 37 degre pou 30 minit epi yo te anrejistre absòbe a nan 490 nm lè l sèvi avèk yon lektè mikroplak absòbe (SpectraMax 190, Molecular Devices LLC, San Jose, CA, USA). Done yo jwenn yo te kalkile lè l sèvi avèk fòmil sa a: aktivite tirozinaz (pousan) � (OD 490 nan echantiyon/OD490 nan kontwòl) ×100.

2.8. Esè kontni Melanin.

Selil B16F10 yo te simen nan plak asix-well (2 × 105 selil / byen) pou 12 èdtan apre renouvle mwayen kilti selil yo trete ak konsantrasyon diferan nan CJS-EO ak -MSH pou 48 èdtan ak lave ak PBS de fwa [21]. Selil B16F10 yo te trete ak -MSH akCJS-EOansanm, kiltive pou 3 jou, epi selil yo te rekòlte epi lave de fwa ak saline ki gen tanpon fosfat (PBS). Apre sa, li te trete ak 1N NaOH ki gen 10 pousan DMSO epi li te reyaji nan 80 degre pou 1 èdtan. Pou analiz melanincontent, yo te mezire absorbans la nan 475 nmusing yon lektè microplate absorption (SpectraMax 190, Molecular Devices LLC, San Jose, CA, USA). -e percentagevalue nan selil CJS-EO-trete yo te kalkile ak respè kontwòl negatif la. An detay, yo te itilize BCA Pwoteyin Assay Twous (Thermo Fisher Scientific, Waltham, US) pou detèmine konsantrasyon pwoteyin chak echantiyon. -emelanin kontni te nòmalize a pwoteyin selilè konsantrasyon (absorbans melanin/ug pwoteyin).

2.9. Ankèt sou jèn.

Selil melanom B16F10 yo te inokulasyon nan yon plat 100 mm nan yon dansite 1 × 106 selil nan DMEM (GIBCO, USA) konplete ak 10 pousan bovineserum ak 1 pousan antibyotik; answit, yo te enkube nan 5 pousan CO2 nan 37 degre. Apre chanje nan yon nouvo 10 pousan DMEMmedium,CJS-EOyo te ajoute nan yon plak kilti ak kiltive pou 3 d, ak 1 pousan Amisoft kòm yon surfactant te ajoute nan yon kantite ki koresponn ak 1/1, 000 nan volim nan mwayen. Apre 3 d, 1 mL nan TRIzol (Invitrogen, USA). ) te ajoute nan selil yo pou envestige nivo ekspresyon mRNA nanblanchiman-Jèn ki gen rapò, ak RNA a te izole lè l sèvi avèk metòd izolasyon Invitrogen'sRNA. Apre yo fin mezire kantite RNA nan 260 nm lè l sèvi avèk yon detektè iltravyolèt, yo te fè yon reversetranscription-polymerase chain reaction (RT-PCR). Pou RT-PCR a, yo te itilize yon twous RT-PCR tout-an-yon (Super Bio, Kore di), yo te fè eksperyans nan baze sou enstriksyon manifakti a, ak premye ak kondisyon reyaksyon yo te jan sa a: sekans nan aktin te 5′- GAG ACC TTC AAC ACC CCA GCC-3';antisans, 5′-GGC CAT CTC TTG CTC GAA GTC-3';transkripsyon ranvèse nan 50 degre pou 30 min; transkriptaz ranvèse inaktive nan 96 degre pou 3 min, 94 degre pou 30 s, ak 62 degre pou 1 min, ki te swiv pa 25 sik nan 72 degre pou 1 min. Sekans nantirozinazte 5′-GGC CAG CTT TCA GGC AGA GGT 3'; antisans, 5′-TGG TGC TTC ATG GGC AAA ATC-3';denatire nan 90 degre pou 30 s; transcription ranvèse nan 60 degre pou 30 min; transkriptaz ranvèse inaktive a 94 degre pou 1 minit. Apre sa, yo te fè yon PCR pou 30 sik nan 94 degre pou 30 s, 56 degre pou 30 s, ak 72 degre pou 1 min. -e sekans oftyrosinase ki gen rapò ak pwoteyin 1 (TRP-1) te 5′-GCT GCA GGAGCC TTC TTT CTC-3'; antisans, 5′-AAG ACG CTG CACTGC TGG TCT-3'; denatire nan 90 degre pou 30 s; reversetranscription a 60 degre pou 30 min; transkriptaz ranvèse inaktive nan 94 degre pou 1 minit. Apre sa, yo te fè yon PCR pou 30 sik nan 94 degre pou 30 s, 56 degre pou 30 s, ak 72 degre pou 1 min. -e sekans nantirozinaz-pwoteyin ki gen rapò 2 was5′-TGA CCG TGA GCA ATG GCC -3'; antisans, 5′-CGGTTG TGA CCA ATG GGT GCC -3'; ranvèse transcription at50 degre pou 30 min; inaktivasyon transkriptaz ranvèse nan 96 degre pou 3 min, 94 degre pou 1 min, ak 60 degre pou 1 min. Imedyatman, 72 PCR reyaksyon yo te fèt nan 25 sik pou 1 min.

2.10. Ankèt sou ekspresyon pwoteyin.

Selil B16F10melanoma sourit yo te vaksinen nan yon plat 100 mm nan adensite 5 × 105 selil nan DMEM konplete ak 10 pousan FBS ak 1 pousan antibyotik ak Lè sa a, kiltive nan 5 pousan CO2 nan 37 degre pou 1 d. Imedyatman, yo te echanje ak yon newmedium, akCJS-EOte trete nan diferan konsantrasyon ak kiltive pou 3 d. Yo te ajoute yon solisyon akeuz 1 pousan nan Amisoft kòm asurfactant nan yon volim ki koresponn ak 1/1000 nan volim mwayen an. -e selil kiltive yo te lave ak PBS epi yo transfere nan yon mikwotib 1.5 mL ak Lè sa a, nan yon tanpon selil disruption (40 mM Tris-Cl [pH 7.4], 10 mM EDTA, 120 mM NaCl, 0.1 pousan NP -40, 1 mM). PMSF, ak bwason pwoteaseinhibitor). Apre yo fin detwi selil yo pa adisyon, yo te fè santrifijasyon a 15,000 rpm nan 4 degre pou 10 min, epi yo te refè supernatant la pou separe pwoteyin yo. -e pwoteyin izole yo te quantifye lè l sèvi avèk metòd Sigma'sBCA, epi yo te fè SDS-PAGE. Apre transfere jèl SDS-PAGE la nan manbràn PVDF, pwoteyin lan te make lè l sèvi avèk yon antikò segondè konjige ak yon antikò prensipal ak peroksidaz epi answit ekspoze a yon fim radyografi lè l sèvi avèk yon twous deteksyon Western blot (Intron, Kore di). Apre sa, nivo ekspresyon yo te analize.

3. Rezilta yo

3.1. Konpozisyon chimik CJS-EO.

CJS-EO te jwenn nan yon sede 18 pousan w/w. -e konpozisyon chimik CJS-EO te analize lè l sèvi avèk GC-MS (Tablo 1). -e pik yo te separe nan GC, ak 17 konpoze yo te idantifye atravè MS, ki konstitye 90 pousan nan zòn nan pik total (Tablo 1). -emain konpozan chimik nan laCJS-EOyo te hexamethylcyclotrisiloxane (42.36 pousan), octamethylcyclotetrasiloxane (23.28 pousan), decamethylcyclopentasiloxane (5.81 pousan), asid hexanedioic (5.56 pousan), ak vanilin (2.96 pousan). Nan rechèch anvan yo, analiz GC-MS te detekte hexamethylcyclotrisiloxane nan fèy ak tij ekstrè Bauhinia acuminataLinn [22]. -e konpozan temèt nan Moringa oleifera yo te sitou konpoze de ester, asid, aldeid, ak idrokarbur, ak idrokarbur yo se sitou hexamethylcyclotrisiloxane [23]. Menm jan an tou, nan etid nou an, hexamethylcyclotrisiloxane te konfime kòm eleman prensipal la nan CJS-EO. Youn nan eleman chimik prensipal yo nan CJS-EO, vanilin, te detekte nan lwil esansyèl Eugenia caryophyllata ak Ocimum basilicum [24], Hyssopus officinalis L. (Lamiaceae) lwil esansyèl [25], ak lwil esansyèl Calea clematidea [26]. Nan etid anvan yo, efè inhibition vanilin sou aktivite mono fenolaz ak difenolaz ki genyen nan.tirozinazte deja rapòte [27]. Enteresan, konpoze methylsiloxane temèt ki ba pwasilik molekilè ki gen ladan hexamethylcyclotrisiloxane yo te itilize nan yon varyete pwodui kosmetik ak pwodwi swen pèsonèl ak anpil lòt pwodwi konsomatè [28]. Nan lavni an, konpoze ki responsab pou anpeche pwodiksyon melanin ak aktivite tirozinaz yo dwe ekstrè epi yo ka itilize nan kosmetik natirèl oswa medikaman.

3.2. Selil Selil Selil Melanom Enduit pa CJS-EO.

Rezilta nou yo te montre ke selil B16F10 melanom murin trete ak yon konsantrasyon 31.25 a 500 ppm nanCJS-EOpou 24 èdtan pa t 'pwovoke okenn chanjman nan viabilite selil yo. Nan yon konsantrasyon de 31.25 a 500 ppm, viabilite selil la te 90 pousan a 100 pousan, ki te endike sitotoksisite ki ba (Figi 1).-Se poutèt sa, tout konsantrasyon (31.25 a 500 ppm) yo te apwopriye pou plis evalye efè CJS-EO soutirozinazaktivite ak sentèz melanin nan selil B16F10.

3.3. Anpèchman Aktivite Tirozinaz Entraselilè CJS-EO.

Efè a nanCJS-EOsou oksidasyon L-DOPA katalize bytyrosinase, osi byen ke arbutin, yon byen li te ye.tirozinazinibitè, te envestige. Jan yo montre nan Figi 2, CJS-EO andarbutin te montre efè inhibitor ki pisan sou L-DOPA oxidaseaktivite nan yon fason ki depann de dòz la. Rezilta yo montre ke CJS-EO ak arbutin te montre aktivite inhibitoryal tirozinaz menm jan an. Ki baze sou analiz estatistik, arbutin te gen yon aktivite inhibition tirozinaz siyifikativman pi wo pase CJS-EO nan 125 ak 500 ppm. Sepandan, nan 31.25, 32.50, ak 250 ppm, efè inhibitor similaires (pa enpòtan) yo te endike sou tyrosinase lè yo konpare ak aktivite inhibition tyrosinase CJS-EO sou byen koni tyrosinase inhibiteur arbutin.

3.4. Efè CJS-EO sou kontni Melanin nan selil B16F10.

Pou konfime si CJS-EO te kontribye nan anpèchman pwodiksyon melanin, diferans lan nan sekresyon melanin apre tretman ak chak konsantrasyon CJS-EO te analize anba yon anviwònman ki ankouraje pwodiksyon melanin pa eksitasyon MSH.CJS-EOyo te trete nan konsantrasyon 31.25, 62.5, 125, 250, ak 500 ppm, nan menm fason ak poutirozinazaktivite. CJS-EO siyifikativman inhibited melanogenesis nan gwoup la -MSH-trete, ak yon kantite lajan enpòtan nan melanin te siprime (Figi 3 (b)).-is te menm jan ak obsèvasyon an nan kontwòl la pozitif, arbutin (Figi 3 (a)). An patikilye, nan konsantrasyon ki pi ba a nan 32.25 ppm nan gwoup la trete, melanincontent la redwi siyifikativman konpare ak gwoup la ki pa trete (0 ppm). Se poutèt sa, li te konkli ke CJS EO efektivman anpeche sentèz la oswa sekresyon nan selil melaninin B16F10. Nan gwoup 31.25, 62.5, 125, 250, ak 500 ppmCJS-EO-trete gwoup yo, kontni an melanin diminye pa 1.1, 1.5, 2.6, 2.7, ak 4.3 fwa, respektivman, konpare ak gwoup la ki pa trete, ki endike yon sekresyon melanin enpòtan. efè. -e tès sitotoksisite, tès tyrosinaseinhibition ak rezilta tès kontni melanin endike ke CJS-EO trè enpòtan kòm yon materyèl natirèl nanblanchimanpwodui kosmetik.

3.5. Envestigasyon jenetik.

Pou detèmine jèn nanCJS-EOki inibit biosentèz melanin pa afekte ekspresyon jèn ki enplike nan chemen an biosentèz melanin, yo te fè eksperyans lè l sèvi avèk metòd RT-PCR, ak rezilta yo montre nan Figi 4. -MSH te itilize kòm kontwòl anegatif, ak CJS-EO te montre efè inhibition sou ekspresyon de tirozinaz, TRP-1, ak TRP-2 nan tout konsantrasyon. An patikilye, CJS-EO inibit ekspresyon an oftyrosinase pa plis pase 50 pousan nan 125 ppm oswa pi wo. Wediscovered ke efikasite inhibition detirozinaz, ekspresyon TRP-1 ak TRP-2 diminye pandan konsantrasyon CJS EO ogmante. -e rezilta eksperyans sa a sijere ke efè inhibitor themelanogenesis CJS-EO kontribye nan anpèchman ekspresyon tirozinaz, TRP-1, ak TRP-2.

3.6. Ankèt sou ekspresyon pwoteyin.

Efè CJS-EO sou ekspresyon pwoteyin ki enplike nan biosentèz melanin te konfime lè l sèvi avèk Western blotting, ak rezilta yo montre nan Figi 5. Lè CJS-EO te konpare ak gwoup la -MSH-trete, ki te yon gwoup kontwòl negatif, li te. konfime saCJS-EOmontre yon efè inhibition; an reyalite, CJS-EO te montre efè inhibitor ki pi enpòtan sou tirozinaz ak TRP -2. -e degre anpèchman te 46.6 pousan ak 40.7 pousan nan 500 ppm nan tirozinaz ak TRP -2, respektivman, konpare ak gwoup la -MSH-trete. Malgre ke TRP-1endike efè a pi piti inhibition, li te montre yon diminisyon enpòtan konpare ak gwoup la -MSH-trete. Se poutèt sa, analiz pwoteyin lan te montre menm tandans ak analiz jenetik la, epi li te konfime ke CJS-EO ankourajetirozinaz, TRP-1, ak TRP-2 pou pwovoke rediksyon melanin.

4. Diskisyon

Tirozinazse yon anzim ki enplike nan pwodiksyon melanin atravè yon chemen oksidatif anzimatik, ki detèmine koulè po a, cheve, ak je, osi byen ke mawon sèten manje [29]. Yo te itilize ajan chimik ki demontre aktivite antitirozinaz nan medikaman klinik pou tretman maladi dèrmatolojik ki asosye ak ipèpigmantasyon melanin [30]. Pwodiksyon Melanin ka kontribye nan kèk nan karakteristik istopatolojik yo eksklizif nan kansè malfezan [31]. Se poutèt sa, sibstans antityrosinase ka fasilite tretman kansè po. Nan dènye ane yo, itilizasyon pwodwi natirèl olye pou yo pwodui chimik oswa konpoze sentetik te vin pi plis enterè paske yo pi ekonomik, zanmitay anviwònman an ak an sekirite [32]. Anplis, rechèch ak devlopman teknoloji vèt ak matyè premyè ki ba pri enpòtan pou theindustry osi byen ke pou amelyore itilizasyon resous plant yo.Dènyèman, aktivite antityrosinase sèten plant yo te rapòte [33]. Sepandan, done ki gen rapò ak lwil esansyèl nan plant natirèl yo ra. Se poutèt sa, idantifikasyon lwil esansyèl plant ki genyen gwo aktivite antitirozinaz te rasanble yon enterè enpòtan. -e etyoloji nan pigmantasyon pa byen konprann. Biosentèz melanin katalize pa anzim melanosit espesifik tankou TRP-1 ak TRP-2 [34].Tirozinazli enpòtan anpil pou melanosit melaninbiosentèz epi li te konnen pou plizyè deseni [34]. Se poutèt sa, tirozinaz se yon endèks enpòtan pou tretman pigmantasyon. Nan etid nou an, CJS-EO diminye melaninsenthesis ak afekte aktivite antityrosinase; Se poutèt sa, nou te konkli ke antimelanogenesis pa CJS-EO ka asosye ak lòt anzim (TRP-1 ak TRP-2). Sibstans volatil yo te rapòte yo montre gwo aktivite antioksidan [35]. Kòm temèt, CJS-EO karakterize pa odè apungent. Li se sentetize pa plant kòm metabolit segondè e li te lajman itilize akòz bakterisid, virusid, fonjisid, antikansè, antioksidan, ak aktivite antidyabetik [36]. -e CJS-EO envestige nan etid sa a te konpoze prensipalman ak hexamethylcyclotrisiloxane, ki te konstitye 42.36 pousan nan kontni total chimik la. Nan etid nou an, gwo konsantrasyon nan CJS-EO endike sèlman ti tay efè sitotoksik onmelanocytes. Se poutèt sa, yo te obsève efè inhibitory CJS-EO sou pwopagasyon selil B16F10-MSH-induit. rezilta yo te montre ke pretreatment ak CJS-EO redwi pwopagasyon selil -MSH-induit nan yon fason ki depann de dòz (Figi 3), ak rezilta sa yo te menm jan ak purearbutin itilize kòm yon kontwòl pozitif. Nan pifò lwil esansyèl natirèl yo itilize nan medikaman tradisyonèl yo, yo itilize ekstrè ki gen konpoze konplèks olye pou yo konpoze pi bon kalite. Lwil esansyèl natirèl sa yo anjeneral pa genyen konpoze volatilité ak byoaktivite trè espesifik men konpoze volatilite ak entèraksyon pi laj [38]. Se poutèt sa, li difisil pou CJS-EO, ki gen anpil eleman, gen yon efè antimelanogenesis ki pi wo pase arbutin pi. Nan lavni, li nesesè pou separe konpozan temèt ki genyen nanCJS-EOepi etidye efè antimelanogenesis sou yon sèl eleman ki separe. Dapre rezilta nou yo, nou eseye konkli ke CJS-EO ka anpeche melanosit soti nan faktè danjere tankou TRP -1 (Figi 4 ak 5).Thse poutèt sa, nou te sipoze ke hexamethylcyclotrisiloxane te pi gwo konpoze biyolojik aktif nan CJS-EO. Etid ki egziste konsènan lablanchimanpwopriyete CJS-EO se ensifizan; Se poutèt sa, li ka itilize kòm done debaz nan futurestudies ki gen rapò ak engredyan prensipal ki montre whiteningefficacy.

5. Konklizyon

Dapre sa nou konnen, sa a se premye etid ki rapòte efikasite CJS-EO nan anpeche pwodiksyon melanin nan selil B16F10melanoma yo. Obsèvasyon nou yo te endike ke CJS-EOinhibited -MSH-induit melanogenesis nantirozinazinaktivasyon ak repwesyon similtane ekspresyon pwoteyin ki enplike nan biosentèz melanin nan selil melanom B16F10.CJS-EOse konnen li an sekirite, epi nou konfime ke li pa sitotoksik nan etid sa a.ThSe poutèt sa, CJS-EO ka potansyèlman dwe anplwaye kòm yon po efikas.blanchimanajan pou devlopman nan lavni nan medikaman konplemantè ak altènatif ki baze sou aromaterapi.