Cirkilè RNA CircDVL1 anpeche pwogresyon kansè selil ren selil klè atravè aks MiR-412-3p/PCDH7

Résumé

Karsinòm selil ren selil klè (ccRCC) se yon kansè nan ren prensipal ki gen gwo fenotip agresif ak yon pronostik trè move. Prèv akimile sijere ke RNAs sikilè (circRNAs) jwe wòl esansyèl nan ensidan an ak devlopman nan divès kalite kansè imen. Sepandan, ekspresyon, siyifikasyon klinik, ak wòl regilasyon circRNAs nan ccRCC rete lajman klè. Isit la nou rapòte ke circDVL1 redwi nan serom yo ak tisi nan pasyan ccRCC, ak negatif korelasyon ak karakteristik ccRCC malfezan. Ekspresyon twòp nan circDVL1 anpeche pwopagasyon, pwovoke G1 / S arestasyon, deklanche apoptoz, ak diminye migrasyon ak envazyon nan diferan selil ccRCC nan vitro. An korespondan, circDVL1 ekspresyon siprime ccRCC tumorigenicity nan yon modèl xenograft sourit. Mekanistikman, circDVL1 sèvi kòm yon eponj pou onkogenic miR-412-3p, kidonk anpeche miR-412-3p-medyatè represyon nan protocadherin sib li 7 (PCDH7) nan selil ccRCC. Ansanm, rezilta nou yo demontre ke circDVL1 egzèse fonksyon timè-sipresyon pandan pwogresyon ccRCC atravè aks circDVL1/miR-412-3p/PCDH7, epi sijere ke circDVL1 ta ka yon nouvo makè dyagnostik ak pronostik ak sib terapetik pou ccRCC.

Mo kle

circDVL1; Kansòm selil ren; miR-412-3p; PCDH7; biomakè

Klike la a pou wè ki benefis Cistanche

Entwodiksyon

Kansòm selil ren (RCC) se yon kansòm malfezan ekstrèmman letal nan sistèm urolojik la epi li afekte anpil sante moun [1]. Ensidans RCC te ogmante nan dènye deseni yo, ak 73,750 nouvo ka dyagnostike nan Etazini yo nan 2020 [2, 3]. Klè selil RCC (ccRCC), subtip ki pi komen ak agresif nan RCC, reprezante 70-75 pousan nan ka RCC [4]. Sa ki enpòtan, plis pase 30 pousan nan pasyan ccRCC yo asosye ak metastaz nan premye dyagnostik la. Anplis, byenke operasyon radikal se opsyon tretman prensipal la pou ccRCC prensipal, toujou anviwon 40 pousan nan pasyan ki gen eksperyans rplonje ak metastaz ak 5-siviv an jeneral nan mwens pase 10 pousan [5, 6]. Dilèm sa yo souliye nesesite ijan pou eksplore mekanis molekilè ki kache devlopman ccRCC, tou de kòm byomarkè dyagnostik ak pronostik ak kòm sib potansyèl terapetik.

RNAs sikilè (circRNAs) se RNAs ki pa kode ak yon sèl chèn fèmen-bouk estrikti ki fè yo trè estab [7, 8]. Etid resan yo te demontre ke circRNA yo abondan nan san [9, 10], saliv [11], ak exosomes [12], ki endike ke yo ta ka sèvi kòm nouvo biomarkers dyagnostik [13]. Etandone ke byopsi likid se mwens pwogrese pase byopsi tisi tradisyonèl [14], circRNA yo te konsidere kòm zouti prediksyon valab pou medikaman presizyon [15-17]. Espesyalman, plizyè circRNAs, tankou cricNOX4, circEGLN3, ak circPRRC2A, ka aji kòm biomarkers potansyèl pou dyagnostik RCC ak / oswa pronostik, ki te rezime nan revizyon resan nou an [18]. Anplis de sa, rechèch aktyèl la sitou konsantre sou altènasyon ekspresyon circRNA nan tisi ccRCC [19, 20], sepandan, nivo yo nan byopsi likid rete lajman enkoni, ki anpeche eksplorasyon potansyèl biomarkers. Anplis de sa, byenke plizyè circRNA, ki gen ladan circHIAT1 [21], circ-AKT3 [22], ak cRAPGEF5 [23], yo te montre yo jwe wòl enpòtan nan inisyasyon ak pwogresyon nan ccRCC [18], ankèt sistematik nan circRNAs ki enplike nan ccRCC. devlopman, osi byen ke mekanis molekilè ki kache yo, yo toujou manke.

Isit la, nou premye detèmine ekspresyon circRNAs nan echantiyon serom ki soti nan pasyan ccRCC ak kontwòl ki an sante lè l sèvi avèk yon microarray circRNA. Siyifikativman, nou te idantifye yon roman ccRCC ki asosye circRNA circDVL1 (ID kadav: hsa_circ_ 0009267), ki kode nan jèn DVL1 la. CircDVL1 siyifikativman redwi nan serom nan pasyan ccRCC, ak ekspresyon li se envès korelasyon ak nòt ccRCC Fuhrman, sijere potansyèl la kòm yon biomarker. Anplis, CircDVL1 diminye nan tisi timè ccRCC. An korespondan, circDVL1 ka anpeche pwopagasyon, pwovoke arèstasyon sik selil, deklanche apoptoz, epi redwi migrasyon selil ccRCC ak envazyon. Mekanistikman, circDVL1 fonksyone kòm yon eponj miR-412-3p pou kontwole ekspresyon PCDH7. Ansanm, rezilta sa yo idantifye circDVL1 kòm yon suppressor timè pou ccRCC epi sijere potansyèl li kòm tou de yon biomarker dyagnostik ak yon sib terapetik.

Sipleman Cistanche

Materyèl ak Metòd

1. Espesimèn klinik

Etid sa a te apwouve pa Komite Etik nan Premye Lopital Afilye nan Zhejiang University (2021-104). Dizwit echantiyon matche nan ccRCC ak tisi adjasan ki pa timè yo te kolekte nan pasyan ccRCC. Espesimèn yo te byen vit konsève nan nitwojèn likid apre operasyon an epi yo te estoke nan -80 degre jiskaske yo itilize plis. Yo te kolekte echantiyon serom ki soti nan 60 pasyan ccRCC ak 66 kontwòl ki an sante. Apre sa, echantiyon yo te trete ak metòd apwopriye, epi yo te estoke serom yo jwenn nan -80 degre jiskaske yo itilize plis.

2. Liy selilè ak kilti selil yo

Tout liy selil yo te achte nan Koleksyon Nasyonal Kilti Selil Otantifye (Lachin). 786-O ak Caki-1 selil yo te kiltive nan RPMI 1640 (HyClone), selil ACHN yo te kiltive nan MEM (HyClone), ak selil 293T yo te kiltive nan medya DMEM (Gibco). Tout medya kilti selil yo te konplete ak 10 pousan serom fetis bovin (Gibco) ak 1 pousan penisilin ak melanj streptomycin (Gibco). Kilti selil yo te kenbe nan yon enkibatè imidite nan 37 degre ak 5 pousan CO₂.

3. Analiz microarray CircRNA

Profilage microarray CircRNA nan echantiyon serom yo te fèt lè l sèvi avèk yon Arraystar imen CircRNA Array V2 (Capital Biotechnology, Lachin). GeneSpring lojisyèl V13.0 (Agilent Technologies) te itilize pou rezime done, nòmalizasyon, ak kontwòl kalite mikro. CircRNAs ki gen yon papòt chanjman pli yo pi gran pase oswa egal a 2 ak mwens pase oswa egal a -2 ak valè P < 0.05 yo te konsidere kòm estatistik enpòtan. Yo te fè analiz yerarchik gwoup lè l sèvi avèk distans Euclidean estanda ak lyen konplè.

4. RNA sekans (RNA-seq) ak analiz done

Pwochen jenerasyon RNA-seq te pote soti jan detaye deja [24, 25]. Selil miR-412-3p ak kontwòl mimik transfekte 786-0 yo te itilize pou sekans RNA. Konstriksyon bibliyotèk ak analiz byoinformatik done anvan tout koreksyon yo te fèt pa Novogene Co, Ltd (Beijing, Lachin). Done RNA-seq yo te depoze nan Gene Expression Omnibus (GEO) anba nimewo asansyon GSE175492.

5. Ekstraksyon RNA ak RT-PCR quantitative an tan reyèl (RT-qPCR)

RT-qPCR te fèt jan sa dekri deja [26, 27]. RNA total te izole nan serom, selil, ak tisi timè lè l sèvi avèk AG RNAex Pro Reagent (AG, Hunan, Lachin). Pou deteksyon circRNA, 1 ug total RNA te dijere ak RNase R (3 U/ug, Epicenter Technologies, Madison, USA, Cat#RNR07250) nan 37 degre pou 10 minit, ak ADN konplemantè (cDNA) te pwodwi lè l sèvi avèk HiScript II 1st. Strand cDNA sentèz Twous (Vazyme). Nivo ekspresyon CircRNA ak mRNA yo te nòmalize nan -aktin. Pou detèmine ekspresyon miRNA, transkripsyon ranvèse te pote soti ak yon twous miR-XTM miRNA First-strand Synthesis (Takara Bio USA, CA, USA, Cat. #638313) ak ekspresyon U6 (Rnu6-1) kòm yon kontwòl andojèn. Nivo ekspresyon RNA relatif la te detèmine ak metòd 2-ΔΔCt. Tout sekans premye analiz qRT-PCR yo montre nan Tablo S2.

6. Plasmid konstriksyon ak transfèksyon ki estab

Pou konstwi vektè overexpression circDVL1 ak circDVL1-MUT, circDVL1 ak sekans circDVL1 mitasyon yo te klonaj nan vektè pcDNA 3.1(plus) Laccase 2 MCS Exon, ki te kòmande nan Addgene (#69893) [28]. Selil ACHN ak 786-O yo te transfekte ak circRNA ak vektè kontwòl negatif lè l sèvi avèk Lipofectamine 3000 (Invitrogen, Carlsbad, CA). Apre 48 èdtan, selil transfekte ki estab ki eksprime circDVL1 yo te chwazi pa adisyon a nan 800 ug / mL G418 nan mwayen kilti a.

7. Selil viabilite

Yo te detèmine tès viabilite selil ak twous CCK8 la (Dojindo Laboratories, Kumamoto, Japon, Cat # CK04), jan sa te dekri anvan [29]. 786-O ak ACHN circDVL1 overexpressing ak selil kontwòl yo te simen nan 96-plak byen yo. Solisyon CCK8 (10 μL) te ajoute nan moman ki endike a ak enkubasyon nan 37 degre pou 2 èdtan, epi yo te mezire absòbe a lè l sèvi avèk yon espektrofotomèt.

Herba Cistanche

8. Fòmasyon koloni

Yo te fè tès fòmasyon koloni jan sa dekri anvan [24]. ACHN (800 selil/pi) ak 786-O selil (400 selil/pi) yo te kiltive pou 10 jou epi apre sa yo te fikse ak 4 pousan paraformaldeyid pou apeprè 30 minit, ki te swiv pa tach ak 0.1 pousan. solisyon kristal vyolèt pou apeprè 15 min. Klon ki gen plis pase 50 selil yo te konte kòm yon sèl koloni.

9. Analiz sik selilè

Selil yo te senkronize nan mwayen RPMI 1640 san FBS lannwit lan epi yo chanje nan mwayen ak 10 pousan FBS pou pwochen 48 èdtan yo. Selil yo te lave, re-sispann nan 70 pousan etanòl nan PBS, epi estoke nan -20 degre lannwit lan. Apre sa, selil yo te tache ak solisyon propidium yod (PI) ki gen RNase A pou analiz sik selil.

10. Apoptoz analiz

Analiz ACHN ak 786-O selil apoptoz te fèt ak yon twous deteksyon apoptoz Annexin V-FITC/PI (Beijing Biosea Biotechnology, Lachin) swiv enstriksyon manifakti a.

11. Migrasyon selilè ak tès envazyon

Nan vitro, yo te evalye kapasite migrasyon selil yo lè l sèvi avèk chanm transwell ak manbràn polikarbonat pò 8 μm (Millipore, MA, USA). Yo te fè tès envazyon selilè ak chanm transwell kouvwi ak 100 μL Matrigel (BD Biosciences, USA). 786-O selil (2 × 104) oswa selil ACHN (4 × 104) yo te sispann nan 200 μL nan RPMI 1640 san yo pa serom epi yo te simen nan chanm transwell anwo yo, ak Lè sa a, yo te ajoute 600 μL nan mwayen ki gen 20 pousan FBS. nan chanm anba yo. Lè sa a, selil yo te kiltive pou 24 èdtan pou mezire migrasyon an ak pou 48 èdtan pou evalye envazyon an. Selil nan chanm anwo a yo te ak anpil atansyon grate, ak selil ki nan lòj anba a yo te fiks ak 4 pousan paraformaldehyde ak tache ak vyolèt kristal. Yo te jwenn imaj epi yo te konte selil yo ak yon mikwoskòp.

12. Western blot

Pwoteyin total yo te ekstrè, kantite, epi separe sou 10 pousan jèl SDS-PAGE, ak Lè sa a, transfere nan manbràn polyvinylidene difluoride (Millipore, MA, USA), ki te enkube ak prensipal anti-glyceraldehyde 3-fosfat dehydrogenase (GAPDH) (Proteinch, 60004-1-Ig), anti-PCDH7 (Abcam, ab139274) antikò prensipal nan 4 degre lannwit lan.

13. Immunofluorescence tach

Selil yo te simen sou kouvèti pou 24 èdtan epi yo te fikse ak 4 pousan paraformaldehyde, pèmeabilize ak 0.2 pousan Triton X{-100 pou 20 min, epi enkube ak 5 pousan albumin serom bovin. Apre sa, selil yo te enkube ak yon antikò prensipal espesifik pou Ki67 (1:400, ab48027, Abcam) nan 4 degre lannwit lan, epi answit yo te enkube ak yon 488-konjige kabrit anti-lapen IgG (1:150, D110088, Sangon). ) nan 37 degre pou 1 h. Selil yo te tache ak 4′,6-diamidino-2-phenylindole (DAPI), epi yo te jwenn imaj ak yon mikwoskòp fliyoresan Leica (DM4000).

14. In vivo fòmasyon timè ak Ki67 tach

Sis semèn gason BALB/c sourit toutouni (achte nan Shanghai SLAC) yo te divize an 2 gwoup (n=5 pou chak gwoup). Sourit yo te vaksinen ak apeprè 3 × 106 selil kontwòl oswa circDVL1 overexpressing selil ACHN pa piki lar. Gwosè timè yo te mezire ak yon kalib glisman chak 3 jou, kòmanse jou 6 apre piki a. Volim timè yo te kalkile kòm longè × lajè × wotè / 2. Tout eksperyans yo te fèt dapre Gid pou Swen ak Itilizasyon Bèt Laboratwa yo (piblikasyon NIH 80-23, revize 1996) epi yo te apwouve pa Komite Swen Animal nan Zhejiang University, Hangzhou, Lachin.

Cistanche kapsil

15. Fluoresans in situ hybridization (FISH)

Yon sond circDVL1 doub-digoxigenin (DIG) - peroksidaz refor (HRP) (Exon Biotechnology, Guangzhou, Lachin) te sentèz. Kontwòl ak circDVL1 overexpressing ACHN selil yo te kiltive sou kouvèti kouvèti ak enkubasyon ak pwofonde ki make nan 37 degre pou 24 èdtan. Apre lave, glisad yo te enkube nan yon antikò segondè anti-DIG nan 37 degre pou 1 èdtan. Yo te itilize yon metòd anplifikasyon siyal tiramin pou detekte siyal circDVL1, ak selil yo te kontre ak DAPI. Pou ko-FISH, yo te enkube glisad kouvèti ak circDVL1 ki gen DIGlabeled ak miR -412-3p.

16. RNA immunoprecipitation (RIP) tès

Yo te fè tès RIP ak Magna RIP™ RNA-Binding Protein Immunoprecipitation Kit (Millipore, MA, USA). 786-Selil O yo te lysed nan tanpon liz RIP konplè epi answit enkube ak tanpon iminopresipasyon ki gen pèl mayetik ki te konjige ak AGO2 (Abcam, MA, USA) oswa konplèks antikò IgG nan 4 degre lannwit lan. Lè sa a, RNAs imunoprecipitated yo te teste pa RT-qPCR.

17. Doub-luciferase repòtè tès

CircDVL1, PPM1H-3'UTR, ak PCDH7-3'UTR sekans, ki te gen miR-412-3p sit ki gen mitasyon, ak sekans mitasyon ki koresponn yo, yo te sentèz epi answit subklonaj nan repòtè luciferase la. vektè psiCHECK-2 (Promega) pou pwodui circDVL1-WT, circDVL1-Mut1, circDVL1-Mut2, PPM1H-3'UTR-WT, PCDH{ {14}}'UTRWT, PCDH7-3'UTR-Mut1, ak PCDH7-3'UTR-Mut2 vektè. Diferan sekans 3'UTR PPM1H ak PCDH7 yo genyen fragman 500 bp ki genyen sit ki genyen potansyèl miR-412-3p (flanke pa 250 bp). Aktivite lisiferaz relatif la te evalye ak yon tès repòtè doub-luciferase (Promega, USA). Tout tès yo te pote soti nan twa replike endepandan.

18. Analiz estatistik

Analiz estatistik yo te fèt ak GraphPad Prism 7.0 (GraphPad Software, La Jolla, CA). Diferans ki genyen ant gwoup yo te evalye ak T-tès Elèv la oswa analiz yon sèl-fason nan divèjans (ANOVA). Diferans ant gwoup yo te konsidere kòm estatistik enpòtan lè valè P yo te < 0.05.

Diskisyon

Yo te pwopoze ak evalye diferan kalite biomarkers ccRCC eksperimantal, ki gen ladan mRNAs [32], miRNAs [33], lncRNAs [34], ak circRNAs [35]. Sepandan, pa youn nan yo te konfime kòm byomarkè dyagnostik egzat pou itilizasyon woutin klinik nan pasyan ccRCC. Isit la, etid nou an montre ke circDVL1 jwe yon wòl enpòtan nan pwogresyon ccRCC. Premyèman, nou te fè tès depistaj serom nan pasyan ccRCC ak kontwòl ki an sante yo idantifye circRNAs diferan ki eksprime lè l sèvi avèk yon microarray circRNA. Done RT-qPCR yo te revele ke circDVL1 te dramatikman downregulated nan echantiyon ccRCC. Etid anvan yo te montre ke circRNAs te kapab sèvi kòm biomarkers serom inaktif nan diferan kansè [36, 37]. Pou egzanp, Bei et al. te demontre ke exosomal has-circ-0004771 te ogmante nan serom kolekte nan pasyan kansè kolorektal [38]. Men, rechèch sou wòl espesifik circRNA kòm yon biomarker ki pa pwogrese nan ccRCC toujou limite. Etid nou an te revele ke circDVL1 te siyifikativman downregulated nan serom nan pasyan ccRCC e ke ekspresyon nan diminye nan serom circDVL1 ka soti nan timè. Anplis de sa, nivo serik circDVL1 te gen anpil valè dyagnostik nan diskriminasyon ant pasyan ki gen Fuhrman klas I-II ak Fuhrman klas III-IV timè. Se poutèt sa, serik circDVL1 ta ka yon makè dyagnostik pwomèt pou ccRCC. Sepandan, plizyè pasyan an sante te montre nivo ki ba nan circDVL1 nan serom yo, ki endike ke siveyans pasyan sèlman ki baze sou analiz la nan RNA sikile sa a ka lakòz rezilta fo-pozitif. Se poutèt sa, valè circDVL1 kòm yon sèl makè dyagnostik se yon ti jan limite ak yon konbinezon de diferan sikile RNAs ta ka bezwen analize pou jwenn yon prediksyon serye pou devlopman timè ak metastaz.

Kòm yon circRNA ki fèk idantifye, wòl byolojik ak patolojik circDVL1 pa te envestige. Nan etid sa a, nou evalye wòl ak mekanis regilasyon circDVL1 nan ccRCC. Esay fonksyonèl yo te montre ke circDVL1 overexpressed ta ka diminye pwopagasyon selil ccRCC, kapasite fòmasyon koloni, ak potansyèl tumorigenic, gen anpil chans akòz ogmante apoptoz selil in vitro ak siprime devlopman timè nan vivo. Done yo implique ke circDVL1 ta ka gen yon fonksyon suppressor timè nan ccRCC.

CircRNAs ka ankouraje inisyasyon timè ak pwogresyon lè yo aji kòm eponj miRNA. Pakonsekan, nou egzamine si circDVL1 te kapab kontwole byogenesis miRNA pandan kanserojèn ccRCC. Sèvi ak lojisyèl miRanda ak miRWalk, nou te jwenn ke circDVL1 te gen yon sit obligatwa potansyèl pou miR-412-3p. Test repòtè lisiferaz yo montre yon lyen dirèk ant circDVL1 ak miR-412-3p. Etid anvan yo te montre ke miR-412-3p te enplike nan patojèn diferan kansè atravè divès mekanis molekilè [31, 39, 40]. Pou egzanp, miR-412-3p te gen yon wòl onkojenik nan kansè nan kolon, ankouraje migrasyon, envazyon, ak pwopagasyon selil selil souch kansè yo [31]. Anplis de sa, ekspresyon miR-412-3p yo te ogmante nan vesik ekstraselilè ki soti nan pasyan kansè selil squamous oral (OSCC) [39]. Menm jan an tou, rezilta nou yo te sijere ke miR-412-3p te yon pwomotè timè enpòtan nan ccRCC.

Cistanche poud

Anplis de sa, yo te idantifye sib circDVL1/miR-412-3p tou. Protocadherin (PCDHs) se pwoteyin transmembrane ki fè pati superfamiy Cadherin, ki jwe wòl enpòtan nan adezyon selilè ak siyal chemen yo. PCDH7 se yon manm nan fanmi an PCDH e li gen wòl byen etabli nan rekonesans selil-selil ak adezyon selil [41]. Li se jeneralman konnen ke pèt adezyon se yon etap bonè nan envazyon selil timè ak metastaz. Prèv émergentes sijere ke PCDH7 eksprime aberan nan yon varyete kalite timè. Pou egzanp, nan kansè nan poumon moun ki pa ti selil, PCDH7 te souvan overexpressed ak fonksyone kòm yon onkogen pou pwovoke transfòmasyon selilè ak ankouraje tumorigenesis nan poumon lè yo pote siyal MAPK [42]. Okontrè, PCDH7 anpeche migrasyon ak envazyon selil kansè nan gastric atravè E-cadherin [43]. Anplis, yo te jwenn redui ekspresyon PCDH7 nan kansè kolorektal [44] ak nan blad pipi [45]. Done sa yo endike ke PCDH7 te gen plizyè fonksyon nan kalite timè diferan. Nan etid sa a, nou te demontre ke nivo PCDH7 yo te redwi nan espesimèn timè ccRCC. Enteresan, eksperyans sekou fonksyonèl te revele ke pwopriyete sipresyon timè circDVL1 yo an pati akòz efè li sou PCDH7. Etid nou an sijere anpil enpòtans aks regilasyon circDVL1/miR-412-3p/PCDH7 nan pwogresyon ccRCC.

Etid sa a gen plizyè limit. Nou te teste twa siRNA espesifik pou circDVL1 andojèn, men malerezman, tout siRNA sa yo te echwe pou pou frape circDVL1 pwobableman akòz estrikti inik circRNA sa a, osi byen ke ekspresyon fondamantal ki ba li yo nan selil ccRCC. Anplis de sa, rezilta nou yo te montre ke circDVL1 ta ka yon sib ki ka geri nan pasyan ccRCC, syans klinik ak gwo kowòt pasyan yo oblije plis demontre enpòtans klinik li yo. Nan etid nou an, nou pa t 'ankèt sou kòz la nan downregulation nan circDVL1 nan blesi ccRCC. Yo te rapòte ke RNA-obligatwa pwoteyin (RBPs), ki gen ladan tranbleman (QKI), epithelial-splicing regilasyon pwoteyin 1 (ESRP1), ak fusion-nan-sarcoma (FUS) yo patisipe nan fòmasyon nan posttranscriptional nan circRNAs [{{10 }}]. Anplis de sa, gen kèk faktè transkripsyon (egzanp, ZEB1, c-Myb, ak c-Jun) ki enplike tou nan byogenesis espesifik circRNAs [49-52]. Epitou, etid yo montre ke modifikasyon m6A medyatè degradasyon circRNA. Park et al. rapòte ke circRNAs m6A-modifye yo te tou downregulated atravè yon aks YTHDF2- HRSP{12-RNase P/MRP [53]. Si RBP sa yo, faktè transkripsyon ak m6A methylation yo patisipe nan downregulation nan circDVL1 rete ensèten. Nan rechèch nan lavni nou an, nou pral eseye eksplore mekanis regilasyon an en nan circDVL1 nan devlopman ccRCC ak tumorigenesis.

An rezime, nou te demontre ke nivo circDVL1 te redwi nan serom nan pasyan ccRCC. Miyò, nou plis envestige mekanis regilasyon circDVL1 epi demontre ke circDVL1 te siprime ccRCC tumorigenesis pa ankouraje ekspresyon PCDH7 pa eponj miR-412-3p. Se poutèt sa, etid nou an te montre ke circDVL1 ta ka yon sib potansyèl terapetik pou tretman ccRCC nan lavni.

Referans

1.Cheng SK, Chuah KL. Metastaz kansè nan selil ren nan pankreyas la: yon revizyon. Achiv nan patoloji ak medikaman laboratwa. 2016; 140: 598-602.

2. Jonasch E, Walker CL, Rathmell WK. Ontogeny selil ren selil klè ak mekanis letalite. Nat Rev Nephrol. 2021; 17: 245-61.

3. Siegel RL, Miller KD, Jemal A. Estatistik kansè, 2020. CA Cancer J Clin. 2020; 70.

4. Shuch B, Amin A, Armstrong AJ, Eble JN, Ficarra V, Lopez-Beltran A, et al. Konprann variants patolojik nan karsinom selil ren: distile opòtinite terapetik soti nan konpleksite byolojik. uroloji Ewopeyen an. 2015; 67: 85-97.

5. Koul H, Huh JS, Rove KO, Crompton L, Koul S, Meacham RB, et al. Aspè molekilè nan karsinom selil ren: yon revizyon. Am J Kansè Res. 2011; 1: 240-54.

6. Sanchez-Gastaldo A, Kempf E, Gonzalez Del Alba A, Duran I. Tretman sistemik nan kansè nan selil ren: Yon revizyon konplè. Trete kansè Rev 2017; 60: 77-89.

7. Kristensen LS, Andersen MS, Stagsted LVW, Ebbesen KK, Hansen TB, Kjems J. Byogenesis, byoloji, ak karakterizasyon RNAs sikilè. Lanati Reviews Jenetik. 2019; 20: 675-91.

8. Patop IL, Wüst S, Kadener S. sot pase, prezan, ak avni circRNAs. Jounal EMBO a. 2019; 38: e100836.

9. Perez de Acha O, Rossi M, Gorospe M. Circular RNAs in Blood Malignities. Devan Mol Biosci. 2020; 7:109.

10. Zhang SJ, Chen X, Li CP, Li XM, Liu C, Liu BH, et al. Idantifikasyon ak Karakterizasyon RNAs sikilè kòm yon nouvo klas biomarkers putatif nan retinopati dyabèt. Envestigasyon oftalmoloji ak syans vizyèl. 2017; 58: 6500-9.

11. Bahn JH, Zhang Q, Li F, Chan TM, Lin X, Kim Y, et al. Peyizaj la nan microRNA, Piwi-interacting RNA, ak sikilè RNA nan saliv imen. Chimi klinik. 2015; 61: 221-30.

12. Li Y, Zheng Q, Bao C, Li S, Guo W, Zhao J, et al. RNA sikilè anrichi ak ki estab nan exosomes: yon biomarker pwomèt pou dyagnostik kansè. Rechèch selilè. 2015; 25: 981-4.

13. Li S, Han L. Circular RNAs kòm pwomèt biomarkers nan kansè: deteksyon, fonksyon, ak pi lwen. Medikaman genòm. 2019; 11:15.

14. Ye Q, Ling S, Zheng S, Xu X. Byopsi likid nan karsinom epatoselilè: selil timè sikile ak ADN timè sikile. Mòl kansè. 2019; 18:114.

15. Wen G, Zhou T, Gu W. Potansyèl la nan sèvi ak RNA sikilè san kòm yon byomarkè byopsi likid pou maladi imen. Pwoteyin selil. 2020.

16. Zhang Z, Yang T, Xiao J. Sikilè RNAs: Biomarkers pwomèt pou Maladi Imèn. EBioMedicine. 2018; 34: 267-74.

17. Wang S, Zhang K, Tan S, Xin J, Yuan Q, Xu H, et al. RNAs sikilè nan likid kò kòm biomarkers kansè: nouvo fwontyè nan byopsi likid. Mòl kansè. 2021; 20:13.

18. Wang Y, Zhang Y, Wang P, Fu X, Lin W. Sikilè RNAs nan karsinom selil ren: enplikasyon pou tumorigenesis, dyagnostik, ak terapi. Mòl kansè. 2020; 19:149.

19. Chen D, Chen W, Xu Y, Zhu M, Xiao Y, Shen Y, et al. Upregulated iminitè pòs HHLA2 nan selil klè selil ren karsinom: yon nouvo biomarker pronostik ak potansyèl sib terapetik. J Med Genet. 2019; 56: 43-9.

20. Lv Q, Wang G, Zhang Y, Shen A, Tang J, Solèy Y, et al. CircAGAP1 ankouraje pwogresyon timè nan eponj miR-15-5p nan selil ren selil klè. J Exp Clin Cancer Res. 2021; 40:76.

21. Wang K, Solèy Y, Tao W, Fei X, Chang C. Reseptè Androjèn (AR) ankouraje migrasyon selil ren selil klè (ccRCC) ak envazyon atravè chanje circHIAT1/miR-195-5p/29a{{ 4}}p/29c-3p/CDC42 siyal yo. Lèt kansè. 2017; 394: 1-12.

22. Xue D, Wang H, Chen Y, Shen D, Lu J, Wang M, et al. Circ-AKT3 inibit metastaz nan selil ren selil klè lè l chanje siyal miR-296-3p/E-cadherin. Kansè molekilè. 2019; 18:151.

23. Chen Q, Liu T, Bao Y, Zhao T, Wang J, Wang H, et al. CircRNA cRAPGEF5 anpeche kwasans ak metastaz nan kansòm selil ren atravè chemen miR-27a-3p/TXNIP. Lèt kansè. 2019; 469: 68-77.

24. Guo X, Lin W, Wen W, Huyghe J, Bien S, Cai Q, et al. Idantifye nouvo jèn sansiblite pou risk kansè kolorektal nan yon etid asosyasyon transcriptome-lajè nan 125,478 sijè. Gastroenteroloji. 2021; 160.

25. Wang J, Nie W, Xie X, Bai M, Ma Y, Jin L, et al. MicroRNA-874-3p/ADAM (A Disentegrin and Metalloprotease) 19 Medyatè Aktivasyon Makwofaj ak Fibwoz Ren apre Aksidan ren Aigu. Tansyon wo. 2021; 77: 1613-26.

26. Kun-Peng Z, Chun-Lin Z, Jian-Ping H, Lei Z. Yon roman k ap sikile hsa_circ_0081001 aji kòm yon biomarker potansyèl pou dyagnostik ak pronostik osteosarcoma. Int J Biol Sci. 2018; 14: 1513-20.

27. Yuan Y, Bao J, Chen Z, Villanueva AD, Wen W, Wang F, et al. Analiz milti-omik pou idantifye jèn sansiblite pou kansè kolorektal. Hum Mol Genet. 2021.

28. Kramer MC, Liang D, Tatomer DC, Gold B, Mas ZM, Cherry S, et al. Kontwòl konbinatoryal nan ekspresyon RNA sikilè Drosophila pa repete entwonik, hnRNPs, ak pwoteyin SR. Genes Dev. 2015; 29: 2168-82.

29. Guo X, Lin W, Bao J, Cai Q, Pan X, Bai M, et al. Yon analiz konplè cis-eQTL te revele jèn sib nan Loci sansiblite kansè nan tete yo idantifye nan etid asosyasyon ki gen tout jenom. Am J Hum Genet. 2018; 102: 890-903.

30. Zhong S, Wang J, Zhang Q, Xu H, Feng J. CircPrimer: yon lojisyèl pou anote circRNAs ak detèmine espesifik nan primè circRNA. BMC Bioinformatics. 2018; 19:292.

31. Zhu K, Wang Y, Liu L, Li S, Yu W. Long ki pa kode RNA MBNL1-AS1 kontwole pwopagasyon, migrasyon, ak envazyon nan selil souch kansè nan kansè nan kolon lè yo kominike avèk MYL9 atravè sponging microRNA. -412-3p. Klinik ak rechèch nan epatoloji ak gastroenteroloji. 2020; 44: 101-14.

32. Schrödter S, Braun M, Syring I, Klümper N, Deng M, Schmidt D, et al. Idantifikasyon transpòtè dopamine SLC6A3 kòm yon byomarkè pou pasyan ki gen karsinom selil ren. Kansè molekilè. 2016; 15:10.

33. Ran L, Liang J, Deng X, Wu J. miRNAs nan Prediksyon nan pronostik nan Klè selil ren selil karsinom. Biomed Res Int. 2017; 2017: 4832931.

34. Li JK, Chen C, Liu JY, Shi JZ, Liu SP, Liu B, et al. Long noncoding RNA MRCCAT1 ankouraje metastaz nan selil ren selil klè nan anpeche NPR3 ak aktive siyal p38-MAPK. Kansè molekilè. 2017; 16:111.

35. Sheng JQ, Liu L, Wang MR, Li PY. RNAs sikilè nan kansè nan sistèm dijestif: potansyèl byomarkè ak objektif ki ka geri ou. Am J Kansè Res. 2018; 8: 1142-56.

36. Vea A, Llorente-Cortes V, de Gonzalo-Calvo D. Circular RNAs in Blood. Adv Exp Med Biol. 2018; 1087: 119-30.

37. Vo JN, Cieslik M, Zhang Y, Shukla S, Xiao L, Zhang Y, et al. Peyizaj la nan RNA sikilè nan kansè. Selil. 2019; 176.

38. Pan B, Qin J, Liu X, Li B, Wang X, Pan Y, et al. Idantifikasyon Serum Exosomal has-circ-0004771 kòm yon Nouvo Biomarker dyagnostik nan kansè kolorektal. Devan Genet. 2019; 10:1096.

39. Gai C, Camussi F, Broccoletti R, Gambino A, Cabras M, Molinaro L, et al. MiRNAs ki asosye ak vesikèl ekstraselilè kòm byomaketè potansyèl nan karsinom selil squamous oral. BMC kansè. 2018; 18:439.

40. Lenherr SM, Tsai S, Silva Neto B, Sullivan TB, Cimmino CB, Logvinenko T, et al. Pwofil ekspresyon MicroRNA Idantifye timè nan blad pipi ki pa anvayisan nan misk, ki gen gwo risk pou yo pwogrese nan yon fenotip anvayisan. Genes (Basel). 2017; 8.

41. Yoshida K. Fòm selil fibroblast ak adezyon an vitro chanje pa twòp ekspresyon nan izoform 7a ak 7b nan protocadherin 7, men se pa izoform 7c la. Cell Mol Biol Lett. 2003; 8: 735-41.

42. Zhou X, Updegraff BL, Guo Y, Peyton M, Girard L, Larsen JE, et al. PROTOCADHERIN 7 Aji atravè SET ak PP2A pou ranfòse siyal MAPK pa EGFR ak KRAS pandan Tumorigenèz nan poumon. Kansè Res. 2017; 77: 187-97.

43. Chen HF, Ma RR, Li JY, Zhang H, Liu XL, Guo XY, et al. Protocadherin 7 inibit migrasyon selil ak envazyon atravè E-cadherin nan kansè nan gastric. Biol timè. 2017; 39: 1010428317697551.

44. Bujko M, Kober P, Mikula M, Ligaj M, Ostrowski J, Siedlecki JA. Chanjman ekspresyon jèn selil-selil ki gen rapò ak adezyon nan timè kolorektal. Oncol Lett. 2015; 9: 2463-70.

45. Lin YL, Wang YL, Fu XL, Li WP, Wang YH, Ma JG. Ekspresyon ki ba nan protocadherin7 (PCDH7) se yon potansyèl biomarker pronostik pou kansè nan blad pipi prensipal ki pa nan misk pwogrese. Oncotarget. 2016; 7: 28384-92.

46. ​​Conn SJ, Pillman KA, Toubia J, Conn VM, Salmanidis M, Phillips CA, et al. Tranbleman nan pwoteyin obligatwa RNA kontwole fòmasyon circRNAs. Selil. 2015; 160: 1125-34.

47. Errichelli L, Dini Modigliani S, Laneve P, Colantoni A, Legnini I, Capauto D, et al. FUS afekte ekspresyon RNA sikilè nan newòn motè ki sòti nan selil souch anbriyon murin yo. Nat Commun. 2017; 8: 14741.

48. Yu CY, Li TC, Wu YY, Yeh CH, Chiang W, Chuang CY, et al. RNA sikilè circBIRC6 patisipe nan sikwi molekilè ki kontwole pluripotans imen an. Nat Commun. 2017; 8:1149.

49. Lee YH, Kim HS, Kim JS, Yu MK, Cho SD, Jeon JG, et al. C-my kontwole otofaji pou vitalite kaka nan estrès oksidatif glikoz. J Dent Res. 2016; 95: 430-8.

50. Li Q, Wang Y, Wu S, Zhou Z, Ding X, Shi R, et al. CircACC1 kontwole asanble ak aktivasyon konplèks AMPK anba estrès metabolik. Selil Metab. 2019; 30.

51. Ren C, Zhang Z, Wang S, Zhu W, Zheng P, Wang W. Circular RNA hsa_circ_0001178 fasilite envazyon an ak metastaz nan kansè kolorektal atravè upregulating ZEB1 atravè eponj miltip miRNAs. Biol Chem. 2020; 401: 487-96.

52. Zeng K, Chen X, Xu M, Liu X, Hu X, Xu T, et al. CircHIPK3 ankouraje kwasans kansè kolorektal ak metastaz nan eponj miR-7. Lanmò selil Dis. 2018; 9:417.

53. Park OH, Ha H, Lee Y, Boo SH, Kwon DH, Song HK, et al. Endoribonucleolytic Cleavage nan mA ki gen RNA pa RNase P/MRP Complex. Mol selil. 2019; 74.

Ying Wang1,2, Yunjing Zhang1,2, Xinwan Su3, Qiongzi Qiu4, Yuan Yuan2, Chunhua Weng2, Sailan Zou5, Yan Tian5, Weidong Han6, Pengyuan Liu4, Xingyi Guo7, Jianhua Mao8, Xianghui Fu5, Ping Wang1, Weiqiang

1. Katriyèm Lopital Afilye a, ak Enstiti Entènasyonal Medsin, Zhejiang University School of Medicine, Jinhua 322000, Zhejiang, Lachin.

2. Sant Maladi ren, Premye Lopital Afilye, ak Enstiti Medsin Translational, Zhejiang University School of Medicine, Hangzhou 310003, Zhejiang, Lachin.

3. Depatman Uroloji, Premye Lopital Afilye, Zhejiang University School of Medicine, Hangzhou 310003, Zhejiang, Lachin.

4. Depatman Medsin Respiratwa, Sir Run Run Shaw Hospital ak Enstiti Medsin Translational, Zhejiang University School of Medicine, Hangzhou 310016, Zhejiang, Lachin.

5. Divizyon andokrinoloji ak metabolis, Eta kle laboratwa nan byoterapi ak kansè sant, West Lachin Lopital, Sichuan University ak Collaborative Innovation Center nan byoterapi, Chengdu 610041, Sichuan, Lachin.

6. Depatman Nkoloji Medikal, Sir Run Run Shaw Hospital, Zhejiang University School of Medicine, Hangzhou 310016, Zhejiang, Lachin.

7. Divizyon Epidemyoloji, Depatman Medsin, Vanderbilt Epidemiology Center, ak Vanderbilt-Ingram Cancer Center, Vanderbilt University School of Medicine, Nashville 37203, TN, USA.

8. Depatman Nefroloji, Sant Nasyonal Rechèch Klinik pou Sante Timoun, Lopital Timoun yo, Lekòl Medsin Inivèsite Zhejiang, Hangzhou 310003, Zhejiang, Lachin.