Konparezon nan ekspresyon jèn ant Builders ak Foragers

Tanpri kontakteoscar.xiao@wecistanche.compou plis enfòmasyon

Benefis ki asosye ak divizyon travay (DOL) yo diskite kòm pi gwo fòs kondwi ki favorize gwo tranzisyon nan evolisyon, tankou evolisyon selil ekaryotik la oswa òganis miltiselilè. Evolisyon esosyalite souvan konsidere kòm dènye gwo tranzisyon evolisyonè sa yo. Ensèk sosyal yo ofri avantaj pou etidye 'faz tranzisyon yo' paske se pa tout ensèk sosyal yo sipèòganis (sa vle di, espès, kote travayè yo nan yon koloni pa kapab repwodui epi ki esteril), ki ta kalifye kòm te akonpli yon gwo tranzisyon evolisyonè23. Ensèk sosyal yo karakterize tou pa DDL, sètadi ant bèt repwodiktif ak bèt ki pa repwodui nan yon koloni ensèk. Nan Hymenolotera sosyal la, ki gen ladan foumi ak kèk myèl ak gèp, osi byen ke nan termit Blattodean yo, se sèlman youn oswa kèk moun ki nan yon koloni repwodui (renn ak nan termit tou yon wa), pandan ke gwo majorite moun nan yon koloni. , abandone repwodiksyon, omwen tanporèman, epi fè travay travayè oswa sòlda. Nan kas travayè a gen plis DOL souvan ki asosye ak laj travayè (sa vle di, poliethism laj)*. Jèn travayè yo ap fè travay nan nich la, tankou pran swen nich la ak repwodiktif yo, pandan y ap travayè ki pi gran yo fè travay ki pi riske, tankou manje deyò nich la. DOL ki baze sou laj sa yo konsidere kòm adaptasyon -' kòm moun ki pi gran yo jeneralman gen yon esperans lavi redwi, epi kidonk yon valè repwodiktif pi ba (oswa ekivalan kapasite enklizif li) pase jèn travayè yo.

Tanpri klike isit la pou konnen plis

Mekanis molekilè pwoksim ki kache divizyon travay yo te etidye entansif nan Hymenoptera sosyal" 10. Vitellogenins(Vgs) te parèt kòm pi gwo regilatè DOL ant rèn ak travayè-15, osi byen ke ant travayè k ap fè travay diferan 1617.benefis CynomoriumYo se pwoteyin depo ki byen koni pou fonksyon yo kòm précurseur jònze pandan ojenèz nan ensèk fi yo. Pou egzanp, nan ensèk sosyal ki pi byen etidye, Apis mellifera a, tranzisyon an soti nan travay tete andedan kay la nan manje deyò karakterize pa yon chanjman nan ekspresyon nan anpil jèn19. Fizyolojik, chanjman ki gen rapò ak laj soti nan enfimyè nan manje ki asosye ak yon ogmantasyon nan tit la òmòn jivenil emolinf (JH)? 20 ak deklanche pa yon diminisyon nan sikile Vglevels yo1521-23.Sa ki enpòtan, nan travayè myèl yo, ki pa pwodwi ze nan prezans larenn lan, yo te montre Vg gen yon fonksyon iminosenescence-inhibit2.

Konpare ak myèl, anpil mwens konnen sou mekanis molekilè ki kache DOL, epi espesyalman divizyon travay nan mitan travayè nan termites. Termites (infraorder 'Isoptera, ansyen konsidere kòm yon lòd endepandan "se ravèt sosyal, yon liy monofiletik ki nich nan Blattodea a ki te evolye eusociality poukont yo soti nan Hymenoptera sosyal 2526. Menm jan nan Hymenoptera sosyal yo, poliethism laj se komen ak pi gran travayè fè travay ki pi riske tankou manje. oswa defans2728.Li etabli tou (i) ke Vgs jwe yon wòl enpòtan nan DOL ant repwodiktif termite ak travayè yo;2930,(ii)ke tit JH ak ekspresyon Vg yo asosye pozitivman nan termite queens **, ak (iii) keens. gen tit JH konsiderab ki pi wo pase travayè. Termit yo gen twa kopi Vg ki regilasyon irn queens3637 epi omwen nan Cryptotermes Secundus twa kopi Vg sa yo se manm yon rezo ko-ekspresyon jèn ki karakterize fenotip larenn lan (gade tou "Diskisyon")30.jasent dezèRezilta sa yo mennen nou nan ipotèz ke Vgs ak JH pa sèlman anba DOL repwodiktif, men tou kontwole divizyon travay nan mitan travayè termite, menm jan ak nan Hymenoptera sosyal.

Nou te vize pou teste si divizyon travay nan mitan travayè nan termite yo asosye ak menm mekanis ki kache divizyon travay nan Hymenoptera sosyal. Pou fè sa, nou te chwazi yon espès termite pou ki divizyon travay nan mitan travayè yo te etidye entansif epi ki pi byen dekri, Macrotermes bellicosus Smeathman (Macrotermitinae) 283839. estrikti ki gen ladan jiska yon kèk milyon moun ki divize an kat kas esteril: pi gwo ak minè travayè, ak pi gwo ak minè sòlda年.metòd ekstraksyon flavonoid pdfDOL nan mitan kas esteril sa yo te etidye entansif, espesyalman pou travayè minè283839.Yo se fi e konsa ka konpare ak larenn lan.Anplis de sa, yo fè moute majorite nan moun epi yo gen repètwa konpòtman ki pi divès. Jèn travayè minè pran swen pitit la ak larenn. Ansyen travayè minè fè konstriksyon ak manje. Lèt la pèmèt yo teste kòz divizyon travay nan moun ki gen laj menm jan an, konsa simonte efè a konfonn nan laj kont travay, ki ka rive nan syans adrese divizyon travay ki baze sou laj (sa vle di, poliethism laj). travayè yo ofri yon opòtinite ki ra pou teste si travay ki pi riske yo asosye ak envestisman redwi nan mekanis anti-aje, kèlkeswa laj intrinsèque. Sa a espere soti nan teyori istwa lavi, ki predi ke pi wo mòtalite extrinsèque ki depann de laj pa kòz o aza ka chwazi pou aje pi vit intrinsèques (iesenescence) ki asosye ak mwens envestisman nan mekanis anti-aje4,2.Nan M. bellicosus, tout travayè minè yo se fi; Gason yo vin tounen pi gwo travayè, ki gen travay konplètman diferan nan yon koloni e ki donk yo pa adrese nan etid sa a.

Cistanche ka anti-aje

Nou teste ipotèz ki fè konnen nan travayè minè yo (pou senplisite, apre sa sèlman travayè) fouraj (apre a, fouraj) yo nan pi mal kondisyon fizyolojik pase sa yo ki fè travay konstriksyon andedan kay la (apre, mason). Kidonk, nou menm tou nou te sipoze ke bòs mason yo pi sanble ak renn nan pwofil ekspresyon jèn yo an jeneral pase fouraj. Finalman, nou teste si mason envesti plis nan mekanis anti-aje pase fouraj, lèt la fè fas a pi gwo risk mòtalite ekstèn espesifik pou laj.

Pou teste ipotèz sa yo, nou te pwodwi transcriptom nan tèt ak torax (pou rasyonèl nan chwa tisi, gade Metòd) soti nan bòs mason ak fouraj. Apre nou fin konpare ekspresyon jèn ant travay travayè yo, nou konpare pwofil ekspresyon yo ak pwofil renn yo, ki te pibliye nan yon etid pi bonè ki te envestige diferans ekspresyon jèn ki gen rapò ak laj ak kas nan M. bellicosus43.Pou plis karakterize kondisyon fizyolojik la. syon travayè yo, nou te detèmine ak konpare prezans nan oosit nan bòs mason ak fouraj.flavonoidUrosit yo se youn nan twa kalite selil ki nan kò grès tèmit yo; yo se selil depo pou pwodwi dechè nitwojèn45. Akimilasyon urocytes kapab yon endikatè de 'malèz nan tèmit yo, menm si wòl yo sanble konplèks (pou plis detay, gade Diskisyon)t4-46. Etid nou an te konplete ak mezi andokrin pou konpare si wi ou non fouraj ak builders diferan nan tit emolinf JH.

Rezilta yo

Comparison of gene expression between builders and foragers. Using a total of 14 head/thorax transcriptomes (builders: N=7; foragers: N=7), we folund 939 differentially expressed genes (DEGs) between builders and foragers (for a full list of genes, see Supplementary Material).In builders,593 genes were signifi-cantly overexpressed (Supplementary Table S1). Amongthe 'builder genes, all three genes encoding termite Vgs were especially highly expressed (log2FC>2)(Tablo Siplemantè S2). Epitou upregulated nan bòs mason yo te senk jèn antioksidan: de jèn ki kode katalaz (Cat) ak twa jèn ki kode superoksid dismutases (SOD) (2 × CuCn, 1 × MnFe kalite). .alè metabolis ATP ak pwosesis glikolitik, ansanm ak tradiksyon, jèn ribosomal, ak jèn ki gen rapò ak transpò pwoteyin (Tablo Siplemantè S3, Figi Siplemantè S1-S3).

Twa san karant-sis jèn yo te siyifikativman twòp eksprime nan fouraj (Tablo Siplemantè S4) men pa gen okenn modèl frape. Foragers yo te karakterize pa tèm GO sa yo: aktivite kinaz pwoteyin, obligatwa eparin, règleman transkripsyon, metabolis RNA, fosforilasyon pwoteyin ak aktivite ADN polymerase (Tablo Siplemantè S3, Fig Siplemantè S 4- S6). Konparezon ekspresyon jèn travayè ki gen rapò ak travay ak 'jenn larenn'. Pou teste si jèn ki regilasyon nan bòs mason yo pi sanble ak jèn ki trè eksprime nan renn, nou te konpare diferans aktyèl ekspresyon travay-espesifik travayè yo ak seri jèn ki espesyalman reglemante nan renn M. bellicosus konpare ak wa ak travayè yo (larenn DEG apre sa. )43.An total 713 DEG yo te larenn espesyalman eksprime43. Soti nan 593 jèn yo ki te reglemante nan bòs mason yo konpare ak fouraj, 108 (18.2 pousan) DEG yo te larenn DEG. Okontrè, nan 346 jèn fouraj yo, se sèlman 18 (5.2 pousan) DEG ki te sipèpoze ak DEG larenn yo. Kidonk, bòs mason yo te pataje anpil jèn ak rèn pase fouraj （x²=24.15,df=1,p=8.94×10-7）. Pami jèn yo ki te pataje ant buildlers ak renn yo te genyen twa jèn vg yo (Fig. 1).

Prezans ovosit ak tit JH nan mason ak fouraj. Malgre ke gwosè echantiyon yo piti, tès depistaj bòs mason ak fouraj pou prezans nan urocytes implique yon efè travay. Tout twa fouraj te gen urosit vizib, alòske （sèlman）6 sou 14 bòs mason te gen yo（analiz enprevi∶ x²=3.24, P=0.072; Siplemantè

Diskisyon

Vitellogenin se yon bagay komen ki kache divizyon travay atravè ensèk sosyal yo. Menm jan ak 24,4647, antsl7), nou te detekte yon downregulation nan ekspresyon Vg sosyal Hymenoptera (egzanp jèn siwo myèl nan travayè termite manje yo konpare ak bòs mason. Sa a komen nan ko-opsyon nan Vg kontwole divizyon travay nan mitan travayè yo atravè linaj, ki yo separe pa plis pase 133 milyon ane*@, se frape.Nou etidye tèt ak tisi thorax. Kidonk, li ta ka sanble etone detekte yon siyal Vg, ki lye ak repwodiksyon. Poutan, nan termit C. Secundus, omwen youn nan jèn Vg sa yo, Neofem3, yo eksprime menm jan an nan tout pati kò yo (tèt, thorax, vant) 2. Anplis de sa, dènye rezilta yo montre ke tèt ak tisi thorax yo trè byen adapte pou etidye karakteristik istwa lavi304, ki gen ladan ekspresyon tout twa jèn Vg. ke nou detekte yo dwe upregulated nan bòs mason konpare ak fouraj.Grès kò, tisi prensipal la li te ye nan sentèz vitellogenin, rive tou nan torax la.

Mekanis molekilè ki kache divizyon travay yo reflete mekanis ki kache divizyon travay repwodiksyon an. Egalman frape se lefèt ke vitellogenin yo karakterize tou DOL repwodiktif ant rèn ak travayè nan Hymenoptera sosyal ak termites, ak renn yo te karakterize pa kondisyon nitritif segondè3050. Ipotèz plan òvejyen an5l, ak reformulasyon li kòm ipotèz plan repwodiktif 21,2452, deklare ke modil jenetik molekilè ki regle repwodiksyon nan ensèk solitè yo te ko-opte pandan evolisyon sosyal pou kache DOL repwodiktif. Travayè yo (fizyolojikman) reflete etap pou manje ak swen nivasyon fi ensèk ki pa esosyal yo, pandan y ap rèn ensèk sosyal yo ekivalan fizyolojikman ak ensèk solitè ki repwodui yo. An konsekans, DOL repwodiktif ka reyalize atravè yon dekouplage ak chanjman eterokwonik nan ekspresyon modil jenetik korespondan ki sòti nan zansèt solitè yo. Gen sipò pou ipotèz sa a nan Hymenoptera sosyal (egzanp 53-55), men, yo konnen mwens pou termites. Yon etid resan sou tèmit C. Secundus ki gen mwens konplèks sosyal te dekouvwi yon rezo jèn ko-eksprime, modil santral larenn (QCM), ki karakterize Queens30.itilize hesperidinSa ki enpòtan, QCM a gen jèn ki soti nan tout gwo chemen li te ye pou kontwole karakteristik istwa lavi, ki gen ladan jèn ki lye ak siyal JH, chemen ensilin/ensilin-like growth factorl (IIS), ak fekondite. QCM a tou te genyen orthologues de tout twa Vgs ki karakterize M. bellicosus queens43 e ke nou te jwenn upregulated nan bòs mason konpare ak fourrage. Sa a sipòte konklizyon nou ke divizyon travay reflete mekanis ki kache DOL repwodiktif. Sa a bay premye sijesyon ke ipotèz plan repwodiktif la sanble valab pou termit tou.

Foutaj aliman ak deteryorasyon kondisyon fizyolojik. Menm jan ak lòt etid sou ensèk sosyal ak solitè?6, manje nan travayè M. bellicosus sanble asosye avèk ekspresyon Vg ki ba ak kondisyon fizyolojik pòv (ki endike nan prezans ovosit), menmsi gwosè echantiyon an ba pou lèt la. , ki mande plis etid. Kontrèman, bòs mason yo te karakterize pa tèm GO ki endike sentèz pwoteyin ak metabolis enèji segondè, ki gen ladan pwosesis glikolitik.

Wòl astwosit nan termit yo sanble konplèks e lannwit diferan ant espès * 5.Nan termit Reticulitermes speratus, astwosit yo te dekri kòm yon rezèvwa nitwojèn nan fòm asid urik, ki sipoze kontribye nan siviv tèmit yo lè yo fonksyone kòm. antioksidan. Nan espès Macrotermes, ki gen ladan M bellicosus, ensidan an nan urocytes blan (tankou urat oswa asid urik) te asosye ak estrès oswa laj granmoun8840 Kòm travayè yo etidye yo te nan laj menm jan an, laj se fasil eksplike diferans lan nan prezans nan urocytes. Plis sipò pou yon asosyasyon ak estrès, omwen nan kèk espès, soti nan C. secundus. Pwòp etid ki te swiv moun termite pandan peryòd pwolonje, te montre ke moun nan tout kas yo ka jwenn oosit pandan kondisyon estrès, tankou yon enfeksyon ak ti kòb kwiv oswa bon jan kalite manje pòv. Plis etid yo bezwen pou konprann wòl urocytes nan termites.

Kontrèman ak Hymenoptera sosyal, sepandan, nou pa t 'detekte diferans nan tit JH ant fouraj ak mason nan M. bellicosus, men gwosè echantiyon an piti espesyalman pou fouraj (Fig.2). . Sepandan, nan etid sou Hymenoptera sosyal travayè manje yo souvan konpare ak travayè enfimyè, ki natirèlman diferan nan laj, si yo pa kontwole nan konfigirasyon eksperimantal la. Yo konnen gwo tit JH yo aliman ak aje nan ensèk solitè57 ak espesyal23.58.59.Kidonk, move kondisyon fizyolojik sanble mennen nan yon chanjman travay nan manje olye ke nivo JH. Sa a te montre prensipalman nan kèk Hymenoptera sosyal (eg21,

Sa a ka mennen nan yon ipotèz ki jan divizyon travay yo ka estab kenbe nan re-anfòse mekanis fidbak ki te koze pa entèraksyon sosyal. Si kondisyon nitrisyonèl ki ba yo deklannche moun yo pou yo manje, epi si yo 'apovri' pou tout tan, si yo ap mande charite, divizyon tank ki estab ka lakòz.

Lide menm jan yo te mete devan

Foragers envesti mwens nan mekanis anti-aje. Done DEG nou yo sipòte ipotèz ke yon ogmantasyon mòtalite ekstèn ki depann de laj aliman ak aje intrinsèque tache42. Gwo mòtalite ekstèn ki depann de laj ka chwazi pou yon vi ki pi kout ak yon envestisman redwi nan mekanis pou anpeche aje. Foragers te gen yon ekspresyon ki pi ba nan jèn anti-oksidan pase bòs mason yo. Jèn sa yo soulaje domaj nan estrès oksidatif ki te koze pa nivo wo ROS (espès oksijèn reyaktif)6 Pou rezime, rezilta nou yo sipòte ipotèz tèmit yo te koopte jèn ki sanble ak Hymenoptera sosyal ki kache divizyon travay nan travayè yo. Anplis de sa, jèn sa yo karakterize DOL repwodiktif nan ensèk sosyal nan yon fason jeneral. Anplis de sa, travayè M.bellicosus yo sanble yo nan yon kondisyon fizyolojik pi mal pase mason ki gen laj menm jan an, jan sa endike, pa egzanp, pa ekspresyon ki pi ba nan jèn vitellogenin yo, prezans nan urocytes, ak ekspresyon ki pi ba nan katalaz ak SOD ki endike. ka kenbe nivo ROS nan chèk. Sa a sipòte ipotèz ke yon eta fizyolojik endividyèl olye ke laj intrinsèques deklannche chanjman nan manje. Finalman, nan liy ak prediksyon ki soti nan teyori istwa lavi ke mòtalite ekstrèm ki depann de laj segondè ka chwazi pou aje pi vit intrinsèques (senesans), fouraj yo sanble envesti mwens nan mekanis anti-aje pase bòs mason, ki gen mwens ekspoze a risk mòtalite ekstèn.

Metòd

Eksperyans transcriptome. Echantiyon ak jenerasyon done transcriptom. Echantiyon M. bellicosus yo te kolekte nan Pak Nasyonal Comoe (kowòdone 8946'N 3 degre 47'W, Cote d'Ivoire). Pou analiz transcriptome yo, nou te itilize 14 travayè minè ki gen laj menm jan an, ke yo estime pa mete mandib, kòm ki dekri anba Jenerasyon JH ak seri done urocyte'*. Chak moun soti nan yon koloni diferan pou bay echantiyon endepandan. Yo te ranmase moun pandan y ap fè travay konstriksyon (n=7) oswa manje (n=7). Transcriptomes yo te pwodwi nan tèt termites yo plis thorax. Etid resan yo montre ke echantiyon tèt ak thorax yo pi apwopriye pou etid transcriptome nan termit kòm pi gwo chemen ki anba règleman nan karakteristik istwa lavi, ki gen ladan fekondite nan renn, yo eksprime nan tisi sa yo *

Echantiyon yo te prepare ak pwodwi egzakteman nan etid anvan nou an, kote nou te itilize done ekspresyon larenn yo (ki gen ladan preparasyon echantiyon ak analiz pa menm moun nan)43. Lè sa a, yo te voye nan BGI, Hong Kong sou glas sèk. Preparasyon bibliyotèk te fè pa BGI lè l sèvi avèk TruSeq RNA Twous la swiv pwotokòl preparasyon echantiyon BGI. Ou ka jwenn detay sou chak echantiyon anba Bioproject ID PRJNA727164. Yo te sekans bibliyotèk anplifye sou yon platfòm Illumina HiSeq 4000 ak estrateji lekti 100 bp pè-fen (PE), ki te jenere omwen 4 Gigabaz done anvan tout koreksyon pou chak echantiyon. Apre sekans, sekans endèks ki soti nan lekti machin yo te demultiplexed (klase epi retire) pa yon zouti propriétaire BGI-inhouse.

Pre-pwosesis nan lekti anvan tout koreksyon RNASeq. Lekti kri sekans ki soti nan tout echantiyon BGI bay yo te itilize pou tout etap pi lwen yo. Apre kontwòl kalite ak FastQC v. {{0}}.11.967, lekti sekans anvan tout koreksyon yo te tcheke pou yon longè minimòm de 70 bp ak adaptè (ki gen ladan de adaptè inhouuse BGI) yo te koupe lè l sèvi avèk Trimmomatic v.0.3968. Taye ak lòt etap ki vin apre yo te fasilite pa GNU parallel v.2014102269.

Ekspresyon jèn ak kat jenomik Macrotermes natalensis. Nou te itilize genomic Mac-proteomes natalensis (Haviland 1898) vèsyon 1.0 kòm yon zo do nnapping nan etid nou an ki sèvi byen pou objektif sa a43. Lekti anvan tout koreksyon koupe ak netwaye yo te fè yon ti dòmi kont genòm M. natalensis lè l sèvi avèk pwogram Hisat2 v.2.2.0 ak paramèt default7.Fichye bam ki te lakòz yo te klase pa non jèn lè l sèvi avèk SAMtools （v.1.5）².HTSeq v .0.9.12 Lè sa a, te itilize pou konte lekti anvan tout koreksyon kat yo pou chak jèn （blon=non, tape=gen,mode=union, lòd= non) pou chak echantiyon. Yon tablo tèks klè ki rezime tout echantiyon yo te konpile (Tablo Siplemantè S6).

Analiz ekspresyon jèn. Yo te itilize DESeq2v.1.18.1 nan R v.3.4.4 pou analize ekspresyon jèn diferans ant bòs mason ak fouraj7475. Pou teste diferans ekspresyon par, nou itilize modèl lineyè jeneralize ak distribisyon binòm negatif jan yo aplike nan DESeq2. Nou konpare ekspresyon jèn diferans ant de travay, bòs mason ak fouraj (Tablo SiplemantèS1-S2,S4). FDR-ajiste p-valè (padj) yo te itilize pou korije pou tès miltip. Pou analize resanblans ki genyen ant ekspresyon jèn builder/forager ak larenn, nou konpare sipèpoze lis DEG yo: Nou konpare jèn ki te regilasyon nan renn yo konpare ak tout lòt kas ki soti nan yon etid anvan ak jèn yo ki te kontwole nan bòs mason yo konpare ak fouraj yo. etid aktyèl (Fig.1). Menm jan an tou, nou konpare sipèpoze ki genyen ant jèn larenn ak sa yo ki regilasyon nan fouraj konpare ak bòs mason (Fig.1).

Anotasyon fonksyonèl ak analiz GO. Alnnotation fonksyonèl nan sekans asid amine (AA) nan pwoteyin ki kode jèn M.natalensis yo te fè nan Interproscan v.5.41-78.077. Baz done yo te chèche pfam, panther, cdd, coils, gene3d, hamap, pirsf. , enprime, sfld ak superfamily. Nou extrait anotasyon GO pou chak sekans AA ak antre konbine nan tout baz done pou chak. Nou te itilize NCBI BLASTX v. 2.2.31 plus pou n konpare sekans kodaj genòm M. natalensis ak baz done pwoteyin NCBI nr (aksè nan Novanm 2015)78. Nou te aplike TopGOv.2.30.1**pou konpare builder- ak forager-gènes; nou te egzamine yerachi GO a ak tèm ki gen twòp reprezantasyon e nou te bati reprezantasyon grafik yo. Nou analize Pwosesis Byolojik (BP), Konpozan Selilè (CC) ak Fonksyon Molekilè (MF) (Tablo Siplemantè S3).

Jenerasyon JH ak seri done urocyte. Moun M. bellicosus yo te ranmase nan jaden an nan Pak Nasyonal Comoe (gade pi wo a). Kantite urocytes te estime nan jaden an kòm wo oswa ba selon prezans evidan oswa absans gwo urocytes. Yo vizib kòm 'kristal'/pwen blan nan kò grès la atravè kutikul transparan termites yo. Nan menm moun sa yo, yo te pran echantiyon emolinf pou mezi JH. Pou fè sa, vant yo te twou ak yon peny, ak ti gout ki vle pèse anvlòp nan emolinf yo te absòbe nan kapilè vè kalibre (5 μL pipèt kapilè yon sèl-itilize, Neolab, Hirschmann, Eber-stadt, Almay) (pou plis detay gade 35). Pou mezi JH, alikòt emolinf nan yon sèl moun nan 1 uL yo te imedyatman fonn nan 0.5 mL asetonitrile. Echantiyon sa yo te estoke nan -20 degre (eksepte pou transpò soti nan jaden an nan laboratwa a) nan flakon an vè bouchon vis ki gen bouchon Teflon. Rete moun ki mouri yo te estoke nan etanòl pou detèminasyon laj nan laboratwa a lè yo etidye mete mandib anba yon mikwoskòp diseksyon. Pakonsekan, nou te konnen sèlman nan retwouve laj moun yo epi nou te oblije rejte echantiyon yo, ki te twò granmoun (mandib trè chire; sitou fouraj) oswa twò jèn (mandib lajman ki pa itilize; kèk bòs mason). Sa a te redwi ak patipri gwosè echantiyon nou an pou ke nou te gen nan fen echantiyon emolinf ki soti nan 14 ansyen travayè minè bilding ak 3 ansyen travayè minè manje. Chak moun soti nan yon koloni diferan pou bay yon echantiyon endepandan.

JH te ekstrè apre yon pwotokòl separasyon faz likid8, jan sa dekri nan³5. Pwotokòl RIA a, dilusyon nan antiserom espesifik JH a, konsantrasyon radyoaktivite [10-3H(n)]-òmòn jivenil III (aktivite espesifik 19.4). Ci/mmol Perkin Elmer Life Sciences, Waltham, MA), ak seri koub estanda a (50-10 ng)etabli ak òmòn jivenil III san etikèt (Fluka, Buchs, Swis), menm jan ak nan etid anvan nou an35. Titre JH nan echantiyon yo te kalkile baze sou yon regresion ki pa lineyè kat paramèt sou valè koub estanda (Fèy kalkil ImmunoAssay Kalkil, Bachem, Bubendorf, Swis) epi yo eksprime kòm ekivalan JH-III （pg/μL emolinf）. JH-III se sèl pyès JH ki pwodui pa termite corpora allata epi detekte nan emolinf la **

Yo te analize ovosit yo ak seri done JH yo lè l sèvi avèk estatistik ki pa parametrik. Nou konpare frekans nan ensidan an nan oosit ant fouraj ak bòs mason lè l sèvi avèk analiz enprevi, pandan y ap kantite titer JH ant fouraj ak mason te analize ak Mann Whitney U-tès. Tout tès yo te de-ke epi analiz estatistik yo te fè ak IBM SPSS 23.082. Nou teste pouvwa sa yo lè l sèvi avèk G*Power 3.1.9.783.84. Done disponiblite

Done sekans anvan tout koreksyon yo itilize nan piblikasyon sa a yo te depoze nan achiv NCBI SRA anba aksesyon PRJNA727164. Done yo itilize pou jenere figi yo bay nan papye sa a.

Atik sa a soti nan https://doi.org/10.1038/s41598-021-97515-w