Evalyasyon konplè nan aktivite antioksidan nan polisakarid Cistanche Deserticola pa endèks miltip
Apr 13, 2023
Junjie1 ,Gao Lianchun1 ,Meng Xinrui1 ,Wang Menghan1 ,Liu Xiaohua1 . 1. Lekòl famasetik, Lanzhou University, Lanzhou 730000, Lachin; 2. Guangzhou Yuming Byolojik teknoloji co, LTD, Guangzhou 511400, Lachin korespondan otè: Liu Xiaohua, E-mail: liuxiaoh@ lzu.edu.cn
【Rezime】 Objektif: Pou evalye aktivite antioksidan polisakarid Cistanche deserticola pa plizyè endèks nan vivo ak vitro. Metòd: Eksperyans antioksidan an vitro konsantre sou to a radikal gratis nan polisakarid Cistanche deserticola ki gen ladan DPPH scavenging, hydroxyl radikal (·OH) scavenging, rediksyon ferricyanide potasyòm ak metòd nitrite scavenging. Pwa kò a ak endèks larat sourit yo te konsène, ak sa ki nan superoksid dismutase (SOD), glutatyon peroksidaz (GSH-Px) ak malondialdehyde (MDA) nan serom, fwa ak tisi nan sèvo yo te detekte nan sourit modèl d-galaktoz aje. Rezilta: C80 te gen pi bon efè DPPH ak OH·scavenging nan vitro. To pran pwa ak endèks larat nan sourit (P)<0.05）were improved,and the SOD,GSH-Px activities and MDA content in serum,liver and brain tissues had significant differences（P＜0.01）using C80 could in mouse aging model,but there was no difference between high and low dose groups（P＞0.05）. Konklizyon: C80 gen bon aktivite antioksidan nan vivo ak vitro.
【Mo kle】cistanche deserticola polisakarid; radikal gratis; clearance; aktivite antioksidan; modèl aje
Nan dènye ane yo, "ekonomi nan bote" te devlope rapidman, ak echèl konsomasyon nan endistri swen po Lachin nan te agrandi ane pa ane. Pwodwi swen pou po anti-aje yo te piti piti vin konsantre nan konsomasyon. Dapre done Euromonitor, gwosè mache anti-aje Lachin nan te rive nan 64.6 milya dola Yuan nan 2020, kontablite pou 28.8 pousan nan pati nan mache swen pou po Lachin nan, epi li se sou depase hydrasyon yo vin pi gwo kategori nan pwodwi swen pou po [1]. Kosmetik anti-aje refere a pwodui kosmetik ki ka reziste aje, reziste oksidasyon, ak reziste ondilasyon, ke yo rele tou pwodwi swen pou po anti-aje.
Antioksidan atifisyèl, tankou butyl hydroxyanisole (BHA) ak butylhydroxytoluene (BHT), ki domine mache a, gen gwo efè segondè toksik epi yo gen efè negatif sou ògàn tankou fwa a, larat, ak poumon, sa ki lakòz domaj. Konpare ak antioksidan sentetik, antioksidan natirèl yo pi an sekirite ak pi fasil aksepte pa piblik la, pandan y ap polisakarid plant yo konsidere kòm antioksidan natirèl ki pi aktif ki ka dirèkteman oswa endirèkteman aji sou radikal gratis [2].
Benefis cistanche tubulosa—antioksidan
Klike la a pou w wè pwodwi antioksidan Cistanche deserticola
【Ask for more】 Email: xue122522@foxmail.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692
Cistanche deserticola YCMa, yon plant Orobanchaceae, pran tij chèch chèch ak kal kòm medikaman natif natal. Li se yon medikaman Chinwa souvan itilize pou tonifye ren an ak dinamize Yang la. Li gen fonksyon tonifying ren an, tonifying sans, ak moistening sechrès. Frekans li nan aparans nan ansyen preskripsyon anti-aje se dezyèm sèlman nan jinsang. Rechèch medikal modèn te montre ke polisakarid soti nan Cistanche deserticola gen efè famasi tankou amelyore iminite ak antioksidasyon [2]. Konpozan aktif Cistanche deserticola, tankou glikozid feniletanoid ak polisakarid, gen sèten efè sou retade aje po [3]. Koulye a, rechèch la sou efè a anti-oksidasyon nan polisakarid Cistanche deserticola konsantre sou etid la anti-oksidasyon nan vivo. Atravè modèl eksperimantal aje sourit ki te koze pa D-neneneba galaktoz [5-11], superoksid dismutase (SOD) ak lòt endikatè nan poumon, fwa, kè, ak lòt tisi sourit yo detekte pou verifye si Cistanche deserticola. polisakarid gen yon efè anti-oksidasyon. Polisakarid yo soti nan Cistanche deserticola yo souvan prepare lè l sèvi avèk tradisyonèl ekstraksyon dlo ak metòd presipitasyon alkòl, ki gen to fè ekstraksyon ki ba, solubility pòv, ak difikilte pou pirifye pita. Anplis de sa, polisakarid natirèlman estriktire yo jwenn yo gen gwo pwa molekilè, gwo viskozite, ak ba byodisponibilite.[12].
Efè Cistanche-Antioksidan
Eksperyans sa a te itilize teknoloji ultrason konpoze anzim-asistans [13] pou ekstrè polisakarid nan Cistanche deserticola. Dapre konsantrasyon presipitasyon alkòl la, polisakarid yo te divize an twa pati pou jwenn polisakarid Cistanche deserticola. Eksperyans sa a tou konbine eksperyans antioksidan in vivo ak in vitro pou evalye konplè endikatè miltip ak syantifikman elicide aktivite antioksidan polisakarid Cistanche deserticola.
1 Materyèl ak Metòd
1.1 Enstriman ak dwòg tès
UV vizib spectrophotometer UV-1700 (Shimadzu Company, Japon), mikwoskòp optik BX43 (sistèm imaj DP27) (Olympus Corporation). Cistanche deserticola soti nan Gansu Huiqin Biotechnology Co, Ltd Apre yo te idantifye pa pwofesè Associate Yang Zhigang nan lekòl la nan famasi nan Lanzhou University, pwodui sa a se yon sèk, kal,tij sukulan nan Cistanche deserticola YCMa, yon plant nan fanmi Orobaceae. 1,1-Difenil-2-picrylphenylhydrazine (DPPH), silfat fer, naftalèn etilendiamin idroklorid, rodamin B, asid ascorbic, ak vitamin E yo te achte nan men McLean Biochemical Technology Co, Ltd. Enstiti rechèch byojeni.
Prensipal eleman chimik nan Cistanche deserticola
1.2 Bèt eksperimantal:
50 pwòp-klas gason Kunming sourit, bay nan Animal Center nan Lanzhou University, ak nimewo kalifikasyon bon jan kalite: SCXK (Gan) 2013-0002.
1.3 Preparasyon polisakarid Cistanche deserticola [13]
Poud medsin nan Cistanche deserticola te ekstrè 3 fwa ak acetate etil ak etanòl nan yon rapò de 8, 8, ak 6 fwa, ak degras pou 2 èdtan chak fwa; Apre degrese, ajoute papain (2 pousan), selulaz (2 pousan) ak pèktinaz (0.4 pousan) nan poud lan, ajoute dlo pou fè rapò materyèl ak likid 1 ∶ 20, ekstrè nan twa fwa ( 8, 7, 5 fwa), tanperati 54.1 degre, pH 5.2, enzymolysis pou 2 èdtan, ak Lè sa a, fè ekstraksyon ultrasons, chak fwa pou 45 minit, ekstrè de fwa, filtre ak konbine filtraj la, Lè sa a, santrifuje supernatant la, epi konsantre li nan yon dizyèm nan volim orijinal la. Degoute 95 pousan etanòl nan solisyon an konsantre pandan y ap brase jiskaske konsantrasyon total etanòl filtraj la rive nan 30 pousan. Lè sa a, kite l kanpe epi santrifuje pou jwenn presipite ki koresponn lan. Jele sèk pou jwenn Cistanche deserticola ma polisakarid 1 (C30) ki koresponn lan. Supernatant la kontinye presipite ak etanòl jiskaske konsantrasyon total etanòl filtraj la rive nan 50 pousan. Santrifijye sèk pou jwenn polisakarid Cistanche deserticola 2 (C50), epi kontinye presipite ak etanòl jiskaske konsantrasyon total etanòl filtraj la rive nan 80 pousan, Jwenn polisakarid Cistanche deserticola 3 (C80 pou kout).
Etid eksperimantal sou Cistanche deserticola
1.4 In vitro oksidasyon metòd eksperimantal
Kapasite radikal gratis DPPH la mezire pa absòbe nan 517nm [14]. Kapasite idwoksil radikal la te detèmine pa rhodamine B-spectrophotometry [15]. Ki baze sou prensip ke idroksil radikal ka rapidman oksidasyon rhodamine B pou fè li fennen, yo te detèmine kapasite antioksidan nan polisakarid nan 545nm dapre degre nan manyak. Fòs rediksyon an te detèmine lè l sèvi avèk metòd rediksyon potasyòm ferrocyanide [16]; Te detèminasyon an nan nitrite-gratis kapasite scavenging radikal te pote soti lè l sèvi avèk metòd la naphthalene ethylenediamine hydrochloride [17].
1.5 Metòd tès antioksidan nan vivo
50 sourit gason Kunming yo te owaza divize an 5 gwoup epi yo te manje adaptiveman pou 7 jou. Yo te peze. Chak maten, sourit yo nan gwoup C80, gwoup modèl, ak gwoup pozitif yo te sou fòm piki ak solisyon D-neneneba galaktoz dapre 150mg / kg fè modèl la aje, pandan y ap sourit yo nan gwoup la vid yo te sou fòm piki ak saline nòmal selon la. menm volim. Chak apremidi, sourit gwoup pozitif yo te gavage ak vitamin E sispansyon nan yon dòz 50mg / kg. Gwoup C80 konsantrasyon segondè te gavaged nan yon dòz 400mg / kg, gwoup C80 dòz ki ba yo te gavaged nan yon dòz 200mg / kg, ak gwoup vid yo ak pozitif yo te gavaged ak saline fizyolojik nan menm volim. Peze a te fèt chak sèt jou, epi eksperyans la te dire pou vennwit jou [18-19].
Sourit yo te itilize pou pran san nan glob je, diseke sourit yo, retire fwa, larat, ak tisi nan sèvo, mezire endèks larat la, epi detekte sa ki nan superoksid dismutase (SOD), glutatyon peroksidaz (GSH Px) ak malondialdehyde (. MDA) nan serom, tisi fwa, ak tisi nan sèvo.
1.6 Metòd estatistik
Yo te itilize lojisyèl estatistik SPSS 20, yo te itilize analiz sèl faktè (ANOVA), epi yo te itilize metòd LSD pou konparezon par. P<0.05 indicates a statistically significant difference.
2 Rezilta
2.1 Rezilta eksperyans nan oksidasyon vitro
Kòm konsantrasyon nan polisakarid Cistanche deserticola ogmante, pousantaj clearance nan C30, C50, C80, radikal DPPH, radikal idroksil, metòd rediksyon potasyòm ferricyanide, ak sodyòm nitrite radikal kapasite scavenging tout ogmante ak ogmantasyon nan konsantrasyon. Konpare ak vitamin C, pousantaj clearance nan radikal gratis DPPH ak radikal gratis idroksil yo te pi bon. Nan menm konsantrasyon an, diferan eksperyans nan vitro antioksidan te montre ke pousantaj clearance nan C80 te siyifikativman pi wo pase sa yo ki nan C50 ak C30, ki endike ke C80 te gen yon pi bon efè gratis radikal scavenging, ki te swiv pa C50. Soti nan analiz konplè kat eksperyans antioksidan vitro, li ka konkli ke C80 gen pi bon aktivite antioksidan vitro. Se poutèt sa, C80 te chwazi pou eksperyans antioksidan in vivo. Gade figi 1-4.
Figi 1 DPPH to scavenging radikal gratis nan polisakarid Cistanche deserticola
Figi 2 Hydroxyl radikal scavenging pousantaj nan polisakarid Cistanche deserticola
Figi 3 Potasyòm ferrocyanide rediksyon metòd nan polisakarid Cistanche deserticola
Figi 4 To clearance nan nitrite sodyòm nan polisakarid Cistanche deserticola
2.2 Rezilta eksperyans antioksidan an vivo
2.2.1 Efè C80 sou pousantaj pran pwa ak endèks larat nan sourit.
Te gen yon diferans estatistik enpòtan nan pousantaj pran pwa ak endèks larat ant gwoup yo (P<0.01). The weight gain rate of the blank group was significantly higher than that of the model group, and the difference was statistically significant (P. After administering the medication, the weight of each group of mice increased. The spleen is an important immune organ in mice. Compared with the spleen index of the model group, the spleen index of the blank group is higher, and the difference is statistically significant (P<0.01), indicating successful modeling. The spleen index of each administration group significantly increased compared to the model group (P<0.01), indicating that C80 has a certain recovery effect on the immune function of aging model mice. See Table 1.
Tablo 1 Pousantaj pran pwa ak endèks larat sourit yo
Nòt: Konpare ak gwoup modèl la, * P<0.05, * * P<0.01
2.2.2 Efè C80 sou kontni MDA, GSH-Px, ak SOD nan serom.
Nan serom, te gen diferans estatistik enpòtan nan MDA, GSH-Px, ak SOD ant gwoup yo (P<0.01). Compared with the model group, the blank group showed a significant increase in the activity of SOD and GSH-Px in the serum, while the level of MDA was significantly reduced, with statistical significance (P<0.01), indicating the successful construction of the anti-aging model in mice. Compared with the model group, the activity of SOD and GSH-Px in the high and low concentration groups of C80 significantly increased, while the level of MDA significantly decreased, and the difference was statistically significant (P<0.01); Compared with the positive group, the high-dose, and low-dose C80 groups showed better enhancement of SOD, GSH-Px activity, and decreased MDA levels compared to the low-dose C80 group. This indicates that C80 in serum has good antioxidant activity in mice, and the effect of high concentrations is better. See Table 2.
Tablo 2 Efè C80 sou nivo MDA, GSH-Px, ak SOD nan serom
Nòt: Konpare ak gwoup modèl la, * P<0.05, * * P<0.01
2.2.3 Efè C80 sou kontni MDA, GSH-Px, ak SOD nan fwa a.
Nan fwa a, te gen diferans estatistik enpòtan nan MDA, GSH-Px, ak nivo SOD ant gwoup yo (P<0.05). Compared with the model group, there was a statistically significant difference in the content of SOD, GSH-Px, and SOD in the liver homogenate between the blank group and the model group (P<0.01). The enzyme activity increased and the MDA level decreased, and there was a statistical difference (P<0.01), indicating that the construction of the anti-aging model in mice was successful. The SOD and GSH-Px enzyme activities in the liver of each treatment group were significantly increased compared to the model group (P<0.05), while the MDA level was significantly reduced (P<0.05). Compared with the positive group, there was a significant difference in the model group, while there was no difference between the high-dose group and the low-dose group (P>0.05). Se poutèt sa, li ka konkli ke C80 ka kontwole konsantrasyon an wo ak move balans nan espès oksijèn reyaktif nan tisi a fwa nan sourit modèl aje, e li gen bon pwopriyete antioksidan.
Tablo 3 Efè C80 sou MDA, GSH-Px, ak kontni SOD nan fwa a
Nòt: Konpare ak gwoup modèl la, * P<0.05, * * P<0.01
2.2.4 Efè C80 sou kontni MDA, GSH-Px, ak SOD nan tisi nan sèvo.
Nan tisi nan sèvo, te gen diferans estatistik enpòtan nan MDA, GSG-Px, ak SOD (P<0.01). In brain tissue, compared with the model group, the activity of SOD and GSH-Px enzymes in the blank group increased, while the level of MDA decreased, with significant differences (P<0.01), indicating the successful construction of the anti-aging model in mice. Compared with the model group, the activity of SOD and GSH-Px enzymes in the brain homogenate of each treatment group increased, while the level of MDA decreased, with significant differences (P<0.01). Comparison between each administration group, model group, and the positive group showed significant differences between the model group and the positive group, while there was no difference between the high-dose group, low-dose group, and positive group. This indicates that C80 and vitamin E have similar therapeutic effects, both have good antioxidant activity and can pass the blood-brain barrier. See Table 4.
Tablo 4 Efè C80 sou kontni MDA, GSH-Px, ak SOD nan tisi nan sèvo
Nòt: Konpare ak gwoup modèl la, * P<0.05, * * P<0.01
3 Diskisyon
Polisakarid plant yo te atire gwo atansyon akòz aktivite iminitè inivèsèl ak ekselan yo ak toksisite relativman ba. Ekstraksyon dlo tradisyonèl ak metòd presipitasyon alkòl yo te itilize pou jwenn polisakarid nan Cistanche deserticola, ki, kòm konpoze makromolekilè, gen ba byodisponibilite apre administrasyon oral [20]. Kontrèman ak ekstraksyon dlo tradisyonèl ak metòd presipitasyon alkòl, eksperyans sa a te itilize yon konbinezon de anzim konpoze ak yon metòd fizik ultrasons kraze chèn pou ekstrè polisakarid soti nan Cistanche deserticola, ak Lè sa a, itilize presipitasyon alkòl gradye pou jwenn twa kalite polisakarid: C30, C50, ak. C80. Akòz ekstraksyon ultrasons, chenn polisakarid ultra-long yo te kase epi yo te tounen polisakarid kout chèn, se konsa C80 fasil janbe baryè san-sèvo nan sourit, ki ka jwe avantaj li yo.
Cistanche te-Antioksidan
Nan etid sa a, yo te fè eksperyans nan vitro antioksidan pou ekran aktivite antioksidan twa polisakarid ki soti nan Cistanche deserticola lè l sèvi avèk kat metòd eksperimantal: radikal gratis DPPH, radikal gratis idroksil, metòd rediksyon ferrikyanid potasyòm, ak metòd rediksyon nitrit. Twa polisakarid yo te montre efè enpòtan sou DPPH radikal gratis ak idroksil radikal gratis, ak Cistanche deserticola C80 polisakarid fè pi bon an, ki te swiv pa C50. Dapre rezilta eksperyans antioksidan an vitro, yo te chwazi C80 pou konstwi modèl estrès oksidatif sourit galaktoz D-neneneba. San, fwa, ak tisi sèvo sourit yo te kolekte, epi yo te detekte sa ki nan MDA, GPH Px, ak SOD. Rezilta yo te montre ke C80 te gen yon fonksyon reparasyon sou sourit oksidatif estrès ki blese, e li te gen pi bon aktivite antioksidan nan vivo.
Eksperyans sa a konbine metòd chimik in vitro ak eksperyans bèt in vivo epi evalye aktivite antioksidan polisakarid Cistanche deserticola ki te jwenn nan anzim konpoze konbine avèk metòd ultrason lè l sèvi avèk plizyè endikatè. Rezilta yo montre ke C80 jwenn nan pwosesis sa a gen bon aktivite antioksidan. Anzim konpoze an konbine avèk metòd ultrason an gen avantaj tankou yon pwosesis senp, operasyon rapid, ak konsomasyon enèji ki ba, e li gen bon kandida aplikasyon nan ekstraksyon engredyan efikas nan plant natirèl.
referans
[1] Micro hotspot rechèch enstiti. Vèsyon final la: Rapò analiz atansyon rezo sou endistri swen po anti-aje [R/OL] (. 2021-12-27) [2022-12-30]. www.doc88. com
[2] Meng Qinglong, Jinsha, Liu Yajing, et al. Pwogrè rechèch sou efè famasi polisakarid plant [J]. Syans ak Teknoloji endistri manje, 2020, 41 (11): 335-341
[3]Ma Jingmei, Song Xinbo, Zhang Lijuan, et al. Pwogrè rechèch sou fonksyon anti-aje Cistanche deserticola [J]. Journal of Food Safety and Quality Testing, 2021, 12 (11): 4429-4437
[4]Hao Shanshan, Chen Sumei, Yan Donghai, et al. Pwogrè rechèch sou aplikasyon Cistanche deserticola nan pwodui kosmetik Daily Chemical Science, 2021, 44 (9): 36-41
[5] Yan Lei, Hu Jiangping, Sun Xiaodong, et al. Etid sou efè a anti fatig ak mekanis nan polisakarid Cistanche deserticola sou sourit aje pwovoke pa D-neneneba galaktoz [J]. Hebei Traditional Chinese Medicine, 2019, 41 (1): 96-100
[6] Wu Bo, Fu Yumei. Efè polisakarid Cistanche deserticola sou peroksidasyon lipid nan sourit ki aje [J]. Journal of Guangzhou Medical College, 2004, 32 (4): 27-28
[7] Solèy Yun, Xu Feng, Yang Xuanxuan, et al. Efè polisakarid Cistanche deserticola sou oksid nitrique nan poumon ak apoptoz selil nan sourit ki aje [J]. Chinese Pharmacological Bulletin, 2003, 19 (6): 683-686
[8] Solèy Yun, Wang Dejun, Zhu Jin, et al. Efè polisakarid Cistanche deserticola sou relasyon ki genyen ant kontni pwoteyin nan poumon ak fonksyon antioksidan nan sourit ki aje [J]. Chinese Pharmacological Bulletin, 2001 (1): 101-103 9]
[9]Xu Hui, Wei Xiaodong, Ouqin, et al. Etid sou efè a anti-aje nan diferan eleman nan Cistanche deserticola [J]. Syans Medikal Heilongjiang, 2011, 34 (1): 1-2
[10] Xu Hui, Wei Xiaodong, Zhang Pengxia, et al. Etid sou efè pwoteksyon Cistanche deserticola polisakarid sou mitokondri fwa nan rat ki aje [J]. Chinese Journal of Gerontology, 2008, 28 (9): 866-867
[11] Zhang Hongquan, Li Yuan, Song Yuanyuan. Efè polisakarid Cistanche deserticola sou selil iminitè ak aktivite telomeraz nan sourit ki aje [J]. Chinese Journal of Pharmacy, 2011, 46 (14): 1081-1083
[12] Yang Xiuyan, Xue Zhiyuan, Yang Yafei, et al. Etid sou anzim konpoze konbine avèk pwosesis ekstraksyon ultrason, pwopriyete fizikochimik, ak aktivite antioksidan polisakarid Astragalus [J]. Chinese Journal of Traditional Chinese Medicine, 2018, 43 (11): 2261-2268
[13] Liu Xiaohua, Chen Xinping, Cheng Shihong, et al. Yon metòd pou ekstrè polisakarid nan Cistanche deserticola ak aplikasyon li yo: ZL202011059609.8 [P]. 30 septanm 2020
[14] Xue Zhiyuan. Etid konparatif sou efè kont maladi osteyopowoz la, antioksidan ak anti fwa nan Hongqi ak Huangqi [D] Lanzhou: Lanzhou University, 2018
[15] Li Xiang, Wang Hongqing. Spectrophotometric detèminasyon nan aktivite antioksidan nan legim ak butyl rhodamine B-Fe2 plis - H2O2 sistèm ［ J ］. Journal of Xinyang Agricultural College, 2007 (173): 120-121.
[16] Wu Shiyun, Zhang Xiaowei, Yao Liya, et al. Etid sou aktivite antioksidan Terminalia chebula [J]. Jiangsu Syans Agrikòl, 2011, 39 (1): 368-370
[17] Mo Xiaoning, Li Ai, Yu Qiming, et al. Etid sou pwosesis la ekstraksyon ultrasons ak aktivite nitrite scavenging nan ginkgo biloba polisakarid [J]. Syans ak Ekonomi Manje, 2019, 44 (2): 90-93
[18] Ye Wenbin, He Yupeng, Gong Zhengrong, et al. Efè antioksidan nan polisakarid aktif soti nan fatra pwosesis nan Astragalus membranaceus ak Astragalus membranaceus sou sourit aje [J]. Journal of Anhui Agricultural University, 2020, 47 (6): 887-893
[19] Lei Fengfeng, Yue Shuqin, Sun Ligang, et al. Efè regilasyon total polisakarid Astragalus membranaceus sou radikal lib ak kapasite antioksidan nan rat aje [J]. Shandong Medical Journal, 2015, 55 (11): 11-13
[20] Qi Yun, Cai Runlan, Wang Xiangyan, et al. Etid sou absòpsyon ak transpò polisakarid ki soti nan Cistanche deserticola nan vitro lè l sèvi avèk bioassay [J]. Chinese Journal of Traditional Chinese Medicine, 2010, 45 (7): 527-530
