Elastase ak vin pi grav nan iminite netrofil yo enplike nan manifestasyon milti-visseral COVID--19

Résumé

Background:

Anpil agiman sijere ke netrofil yo ka jwe yon wòl enpòtan nan COVID -19. Sepandan, wòl eleman kle nan iminite natirèl netrofil nan fòm grav nan COVID-19 pa merite atansyon ase. Nou te vize pou evalye patisipasyon netrofil elastase, histon-ADN, ak DNases nan manifestasyon sistemik ak milti-ògàn nan COVID-19.

Kantite ak aktivite netrofil yo se endikatè enpòtan ki reflete estati iminitè kò a. Lè kò a ankouraje pa enfeksyon oswa enflamasyon, netrofil yo ap ogmante rapidman epi antre nan tisi ki domaje a oswa sit enflamatwa, divilge ase anzim ak pwoteyin yo retire sibstans danjere. Kapasite rapid repons sa a fè netrofil yo yon pati enpòtan nan defans iminitè kò a. An menm tan an, netrofil tou patisipe nan pwosesis la nan règleman iminitè. Yo ka kolabore ak lòt selil iminitè yo pou kontwole repons iminitè kò a epi kenbe balans sistèm iminitè a. Nan kèk eta maladi, tankou maladi otoiminitè, reyaksyon alèjik, elatriye, ogmantasyon anòmal oswa aktivite netrofil yo pral negatif afekte sistèm iminitè a nan kò a, deklanche repons enflamatwa nesesè ak domaj tisi yo. Nan lavi chak jou, nou dwe tou peye atansyon sou iminite nou an. Cistanche ka amelyore iminite nou nan lavi chak jou. Polisakarid yo nan vyann ka kontwole repons iminitè a nan sistèm iminitè imen an ak ogmante estrès la nan selil iminitè yo. Kapasite pou amelyore efè bakterisid selil iminitè yo.

Klike sou benefis sante nan cistanche

Metòd:

Nou te fè yon etid multisant nan makè iminite netrofil nan 155 ka youn apre lòt rekrite nan yon sant tès depistaj, lopital lokal yo, ak de lopital rejyonal inivèsite. Ka yo te evalye dapre makè klinik ak byolojik nan severite ak manifestasyon milti-ògàn ak konpare ak 35 kontwòl ki an sante.

Rezilta:

Elastaz netrofil san, ADN histon, ADN myeloperoxidase, ak ADN gratis te ogmante dramatikman, epi aktivite DNaz te diminye pa 10-pliye, konpare ak kontwòl yo. Neutrophil elastase ak histon-DNA yo te asosye ak admisyon nan swen entansif, tanperati kò, domaj nan poumon, makè rezilta kadyovaskilè, ensifizans ren, ak ogmantasyon interleukin-6 (IL{-6), IL-8 , ak CXCR2. Elastaz netrofil se te yon prediktè endepandan sou nòt tomografi òdinatè domaj nan poumon COVID-19 ak kantite ògàn ki afekte yo, nan analiz miltivarye. Ogmantasyon konsantrasyon san yo nan NE ak pyèj ekstraselilè netrofil yo te gen rapò ak vin pi grav nan eksitasyon netrofil atravè IL-8 ak CXCR2 ogmante konsantrasyon ak ogmante DAMP serik, ak degradasyon NETs kòm yon konsekans diminisyon dramatik nan DNase san. aktivite.

Konklizyon:

Rezilta nou yo montre wòl kle nan vin pi grav iminite netrofil nan COVID-19. Neutrophil elastase ak DNase ta ka yon potansyèl biomaketè ak sib terapetik pou manifestasyon sistemik grav nan COVID-19.

REZIME GRAFIK

Nivo san nan elastaz netrofil ak ADN histon yo asosye ak manifestasyon grav ak sistemik ak plizyè ògàn nan COVID-19. Ogmantasyon konsantrasyon san nan elastaz netrofil ak pyèj ekstraselilè netrofil yo gen rapò ak vin pi grav nan eksitasyon netrofil atravè chemen IL-8/CXCR2 aktive. Neutrophil elastase ak DNase ta ka yon potansyèl biomaketè ak sib terapetik pou manifestasyon sistemik grav nan COVID-19.

1|ENTWODIKSYON

Maladi kowonaviris 2019 (COVID-19) pwodui evènman tronboembolic ak manifestasyon milti-ògàn, tankou kè, fwa, ak ren.1,2 Yo lakòz an pati nan patisipasyon twòp nan iminite natirèl3 ak yon tanpèt sitokin ki te pwodwi pa lenfosit ak aktivasyon makrofaj yo.4–6 Agiman yo sijere ke netrofil yo jwe yon wòl enpòtan tou nan fòm maladi a grav ak ki menase lavi yo.6–9 Sepandan, patisipasyon netrofil yo nan rezilta sistemik ak milti-ògàn nan COVID-19 te merite atansyon ase.8

Neutrophils gen yon asenal nan estrateji defans ki gen ladan liberasyon an nan granules antimikwòb ak netrofil elastase (NE), ak fòmasyon nan pyèj netrofil ekstraselilè (NETs). pathogens.6,8 Yon etid rapòte ke de makè NETs, ​​ADN san selil ak ADN myeloperoxidase (MPO)-, yo te ogmante nan pasyan COVID-19 entène lopital yo konpare ak 30 kontwòl epi yo te korelasyon ak pwoteyin C-reyaktif, D-dimer, laktat dehydrogenase, ak absoli konte neutrofil.9

Yon lòt etid nan gwoup nou an te montre ke nivo MPO-ADN ogmante nan premye faz nan enfeksyon grav sendwòm respiratwa egi kowonaviris 2 (SARS-CoV-2), nan ka anbilatwa.10 Omeyostazi NETs sikile yo depann de NE. ak DNase 1 ak DNase 11L3.6 NE ak NET twòp nan san an pwodui blesi vaskilè ak tisi nan nemoni viral egi, ki sanble ak sa yo obsève nan enfeksyon COVID-19.6,11,12 Malgre prèv sa a, kit NE, DNases, ak histon-DNA yo patisipe nan manifestasyon milti-viseral COVID-19 pa te evalye jiska prezan.

Etid prezan an se premye etid la, ki te etidye NE, total aktivite DNase, ak histon-DNA nan ka COVID-19 yo te rekrite nan sant tès depistaj, lopital lokal yo, ak lopital rejyonal yo pou evalye yo selon severite maladi ak plizyè ògàn. manifestasyon. Nou te jwenn ke NE te yon prediktè endepandan nan blesi milti-ògàn ki te pwodwi pa COVID-19. Liberasyon NE ak NET yo te gen rapò ak aktivasyon netrofil pa modèl molekilè ki asosye ak domaj serik (DAMP) ak chemen IL-8/CXCR2.

2|MATERYÈL AK METÒD

2.1|Rekritman nan pasyan ak karakteristik klinik nan popilasyon etid la

Etid NICO (Neutrophil innate immunity in COvid-19) te anrejistre pa Komite Revizyon Enstitisyonèl Rechèch Klinik (DRCI) nan Lopital Inivèsite Nancy (No. 2020PI087) epi li te apwouve pa Komite Etik la. Nou te fè yon etid transvèsal youn apre lòt sou 155 pasyan pozitif yo te rekrite apre konsantman enfòme nan yon sant tès depistaj, lopital lokal yo, ak depatman medikaman ak inite swen entansif nan de sant lopital inivèsite nan pi gwo peryòd pandemi COVID-19 nan. Lafrans. Nou te swiv direktiv EQUATOR ak BRISQ pou rapòte done klinik ak byolojik ak itilizasyon espesimèn byolojik yo. Enfeksyon an te karakterize pa RT-PCR sou espesimèn prelèvman nan nen. 34 sijè anbilantè youn apre lòt te ale nan sant tès depistaj la nan premye semèn maladi a, jan sa te dekri anvan an.10 Nou te rekrite 121 pasyan anplis ki te entène lopital pou COVID-19 nan depatman medikal nan lopital lokal nan rejyon Tours (n { {11}}) ak Lopital Rejyonal Inivèsite Marseille ak Nancy (n=78).

Pami yo, 13 yo te trete nan inite swen entansif. Medyàn reta ant aparisyon sentòm yo ak pran echantiyon san yo te 7 jou (IQR: 4-13) nan depatman medikal ak 13 jou (IQR: 4-14) nan inite swen entansif. Nou rapòte karakteristik klinik ak rezilta pasyan entène lopital yo ki nan Tablo S1. Nòt domaj nan poumon yo te evalye pa tomografi òdinatè nan 5 klas (nòt CT), jan sa dekri.13 Gwoup kontwòl la te gen ladann matyè ki an sante, ki pa te rapòte kontak ak ka ki enfekte ak negatif pou depistaj COVID-19.

2.2|Pran echantiyon san ak evalyasyon byolojik

Sera yo te itilize apre yo fin fè tès byochimik klinisyen an te bay lòd. Echantiyon ki rete yo te estoke nan menm kondisyon yo nan mitan gwoup yo, nan -20 degre nan 24 èdtan apre retrè san. Yo te teste makè byochimik woutin nan analizeur Cobas 8000 (Roche Diagnostics, Swis) ak Atellica (Eschborn, Almay).

2.3|Mezi elastase, MPO-ADN, konplèks DNAhistone, dsDNA, ak sitokin nan serom

Nivo sikilasyon konplèks histon-ADN yo te mezire nan serom pa Twous ELISA deteksyon selil lanmò (Roche Diagnostics, Sigma-Aldrich, USA), jan sa dekri anvan.14 Valè yo te rapòte nan inite absorpsyon 450 nm. Konplèks ADN-MPO yo te mezire pa ranplase antikò anti-histone ak yon antikò poliklonal lapen kont myeloperoxidase (Merck, Darmstadt, Almay). Konsantrasyon NE te detèmine lè l sèvi avèk Neutrophil Elastase Human ELISA Kit (Invitrogen, Carlsbad, USA). Valè yo te rapòte nan ng/ml. DsDNA san selil yo te quantifye lè l sèvi avèk Quant-iT PicoGreen® dsDNA Assay Twous, apre soustraksyon background (Invitrogen). IL-6, IL-8, ak CXCR2 te teste pa ELISA Kits ki soti nan Reagentbio Ireland Ltd, Dublin, Iland, IL-1 pa Invitrogen, HMGB1 pa Novus Biologicals (Centennial, USA), ak TNF- pa ELISA Kit ki soti nan R&D Systems Inc. (Minneapolis, USA).

2.4|Aktivite total dezoxyribonukleaz (DNase) nan serom pa yon sèl tès difizyon anzim radial (SRED)

Aktivite DNaz la te mezire sou jèl agarose ki gen 0.13 mg. mL-1 ADN ki soti nan espèm somon nan yon tanpon ki gen 100 mM MES pH 6.5, 20 mM MgCl2, 2 mM CaCl2, ak SYBR Safe DNA Gel Stain (Invitrogen, Life Technology) jan sa dekri a.15,16 De mikrolit serom te lokalize nan pwi. Jèl yo te enkube pou 24 èdtan nan 37 degre nan yon chanm imid. Fluoresans ADN-SYBR te anrejistre ak yon eskanè fluoresans.

2.5|Kantifikasyon NETs selil yo nan netrofil enkubasyon ak serom pasyan yo

Pou detèmine si serik pasyan COVID-19 yo enfliyanse NETs selil yo, yo te melanje san ki soti nan yon sèl donatè ki an sante (1:1 vol/vol) ak sera pasyan yo anvan tretman PMA epi yo te enkube pou 6 èdtan, jan sa dekri.14 Liz selil wouj yo te reyalize pa adisyon a nan 1 ml reyaktif FACS Lyse (BD Biosciences; 1:10 dilution) pou 5 min. Lè sa a, yo te ajoute albumin serik bovin (BSA, 1 ml nan 2 pousan) nan saline tampon fosfat (PBS), epi yo te santrifuje melanj lan nan 1000 g pou 10 min. Yo te analize grenn nan resuspended nan PBS lè l sèvi avèk yon sitomèt koule Gallios (Beckman Coulter, Villepinte, Frans). Estrateji gating an sekans konsantre sou (i) CD66-selil pozitif epi answit (ii) selil H3Cit-pozitif ak MPO-pozitif.

2.6|Esè pou lage ADN NET nan netrofil nan serom pasyan an

Yo te repoze netrofil izole nan RPMI 1640, epi 1 × 105 selil yo te simen nan 96-plak kilti tisi byen, jan sa dekri.14 Plak yo te enkube a 37 degre pou pèmèt selil yo respekte. Apre eksitasyon ak 100 µl nan 0.1 ng/ml PMA pou 4 èdtan, pwi yo te enkube ak 1 U/ml MNase oswa DNase 1 (tou de soti nan Worthington) pou 10 min oswa 10 µl pasyan oswa serom kontwòl pou 6 èdtan, ak Lè sa a, 2 mM. EDTA te ajoute pou sispann aktivite nuclease. Kontni ADN ki te pibliye nan supernatant la te mezire lè l sèvi avèk Quant-iT PicoGreen® dsDNA Assay Twous (Invitrogen). Kantite ADN lage yo te konsidere kòm 100 pousan nan netrofil san stimulation nan donatè ki an sante.

2.7|Analiz estatistik

Tout varyab quantitative yo montre kòm ranje medyàn ak entèrkwatil (IQR, 25-75yèm percentile), ak varyab kalitatif kòm pousantaj ak 95 pousan entèval konfyans (95 pousan CI). Yo te itilize tès ki pa parametrik lè distribisyon done pa t nòmal. Analiz univariate yo te fèt lè l sèvi avèk tès chi-kare oswa tès egzak Fisher a pou varyab kategorik ak tès Mann-Whitney U ak Kruskal-Wallis ak korelasyon ran Spearman pou varyab kontinyèl. Lè l sèvi avèk tès Conover la, yo te fè konparezon post hoc ant sougwoup yo. Apre sa, nou te fè analiz karakteristik reseptè a (ROC) pou chèche papòt pi bon ki asosye ak rezilta maladi yo.17 Nou te fè analiz karakteristik reseptè a (ROC) pou chèche papòt pi bon ki asosye ak rezilta maladi a, dapre DeLong et al.17. Varyab klasifikasyon yo te itilize nan analiz ROC a se rezilta maladi a etidye.

For each ROC analysis, we reported the area under the receiver operating characteristic curve (AUROC) and the associated p-value. The exact binomial method was applied to estimate the 95% confidence intervals (CIs) of the AUROC. The optimal diagnostic cutoff was defined using the Youden index J. Bias-corrected and accelerated (BCa) bootstrap interval after 10,000 iterations for the Youden index and its associated values was performed.18 Clinical and biological criteria were used to define organ injuries (see the Methods section in this article's Online Repository at www.jacionline.org). Bias-corrected and accelerated (BCa) bootstrap interval after 10,000 iterations for the Youden index and its associated values were performed.18 In step #2, using multivariable logistic regression analysis, we assessed whether the ROC-defined threshold defined for elastase (>593 ng/L) te asosye ak yon "kantite ògàn ki afekte yo ki pi gran pase oswa egal a 2" apre yo fin konte pou konfonn potansyèl yo. Nou te evalye diskriminasyon modèl lè l sèvi avèk analiz ROC (AUROC ak 95 pousan CI) ak kalibrasyon modèl lè l sèvi avèk tès Hosmer ak Lemeshow bonte-of-fit ak estatistik Nagelkerke R2.19

In step #3, we assessed the association between elastase level (>oswa mwens pase oswa egal a 593 ng/L) ak demografik pasyan yo, istwa medikal, ak rezilta maladi. Yo te bezwen yon gwosè echantiyon 7 pasyan pou chak gwoup pou detekte yon ogmantasyon ki pi gran pase oswa egal a 200 pousan ak 38 pasyan pou detekte yon ogmantasyon ki pi gran pase oswa egal a 100 pousan nan elastaz mwayèn ant gwoup yo. , ak 1- nan 80 pousan ak nan 0.05. Analiz estatistik yo te fèt lè l sèvi avèk MedCalc, vèsyon 19.1 (MedCalc Software, Ostend, Bèljik), ak Stata SE, vèsyon 12.1 (College Station, Texas, USA), ki baze sou yon erè tip I de bò ak yon nivo alfa 0.05.

3|REZILTA

3.1|NE, MPO-DNA, ak histon-DNA yo ogmante dramatikman, epi aktivite DNaz yo te diminye anpil nan COVID-19 anbilansye ak entène lopital.

pasyan yo

34 ka anbilatwa yo te gen yon laj mwayèn (plis /-SD) 42 plis /-17 ane ak yon rapò sèks (M/F) nan 0.88. Tout moun te gen omwen de sentòm ki gen ladan lafyèv, tous sèk, ak dispne pou mwens pase yon semèn. Okenn pa te gen yon fòm grav nan etap sa a nan maladi a. Karakteristik klinik 122 ka entène lopital yo rapòte nan Tablo S1, makè byolojik yo, ki gen ladan IL-6, IL-8, CXCR2, TNF-, IL-1, ak HMGB1, yo rapòte. nan Tablo S2, ak karakteristik sa yo nan 35 kontwòl sante yo rapòte nan Tablo S3. Nivo san NE, MPO-DNA, histon-ADN, ak dsDNA pasyan anbilan ak lopital COVID-19 yo rapòte nan Tablo S4. Yo te dramatikman pi wo pase sa yo rapòte nan sijè kontwòl. Kontrèman, aktivite DNase mondyal la te 10-pliye pi ba nan ka COVID-19 (Figi 1A, B).

Konsantrasyon serik konpozan NE ak NET yo pa te asosye ak laj ak sèks nan mitan gwoup yo, epi konsantrasyon serik 1 antitripsin (AAT), prensipal inibitè san NE, te nòmal (Tablo S2). Konsantrasyon nan NE te siyifikativman pi wo nan entène lopital kont ka anbilatwa ak pasyan trete nan swen entansif kont lopital lokal yo ak depatman medikal nan lopital inivèsite (Figi 1A). NE te distribye nan de grap nan konsantrasyon segondè ak pi ba nan ka anbilatwa ak pasyan entène lopital nan depatman medikal yo nan lopital inivèsite rejyonal yo. Gwoup yo ki gen pi gwo konsantrasyon yo te gen menm valè ak sa yo rapòte nan inite swen entansif (Figi 1A). Jan yo obsève pou eleman NE ak NET, konsantrasyon dsDNA te pi wo nan pasyan yo admèt nan inite swen entansif (Figi 1B). Anplis de sa, konsantrasyon nan serom nan eleman NE ak NET yo te asosye ak kantite ògàn ki afekte yo (Figi 1C).

3.2|NE, histon-ADN, ak aktivite total DNase asosye ak severite ak manifestasyon milti-viseral COVID--19

Nou etidye asosyasyon ki genyen ant elastase, myeloperoxidase ADN konjige, konplèks histon-ADN, ak karakteristik klinik ak byolojik pasyan yo (Tablo 1). Nou rapòte korelasyon enpòtan nan NE ak histon-ADN, MPO-ADN, byomarkè severite maladi, SaO2 nan admisyon lopital, lekosit, netrofil, rapò netrofil-a-lenfosit, LDH, makè nan risk kadyovaskilè ak tronbotik, ki gen ladan Troponin-T ( cTnT), fibrinogen, ak D-dimer, ak makè nan echèk ren, ki gen ladan ure ak kreyatinin (Tablo 1 ak Figi 2). Nou te obsève tou yon asosyasyon enpòtan nan NE ak IL-6, IL-8, ak CXCR2, men se pa ak TNF, IL{-1, ak HMBG1 (Figi 3). Yo te rapòte asosyasyon enpòtan histon-ADN ak nòt tomografi òdinatè (nòt CT) domaj nan poumon,13 makè risk kadyovaskilè ak tronbotik,13 (Tablo 1) ki gen ladan cTnT ak fibrinojèn, makè ensifizans renal, ki gen ladan ure ak kreyatinin, ak makè enflamasyon, ki gen ladan pwoteyin C-reyaktif, feritin, ak tanperati kò (Figi S1). Kontrèman, MPO-ADN te asosye sèlman ak lekosit (p=0.005) ak netrofil (p=0.004), ak nan pi fèb siyifikasyon, ak D-Dimer (p=0 .045) ak fibrinogen (p=0.047). Aktivite DNase total te asosye ak fosfataz alkalin (PAL) ak bilirubin total, pandan y ap dsDNA te asosye sèlman ak ferritin (Tablo 1).

FIGIR 1 Elastaz netrofil (NE), myeloperoxidase-DNA (MPO-DNA), histon-DNA, ak (B) dsDNA san selil ak aktivite DNase total nan serom 155 ka pozitif COVID-19-. Yo te rekrite ka senptomatik anbilatwa (n=34) nan sant depistaj ak pasyan ki te entène lopital (n=122) ​​nan lopital lokal yo (n=43) ak depatman medikal (n=65) ak inite swen entansif (n=13) nan de lopital inivèsite rejyonal yo. Valè p nan konsantrasyon NE ant gwoup yo te jan sa a: an sante kont anbilansye<0.0001; healthy versus proximity hospital <0.0001; healthy versus medical department <0.0001; healthy versus intensive care <0.0001; ambulatory versus proximity hospital 0.7870; ambulatory versus medical department 0.0028; ambulatory versus intensive care <0.0001; proximity hospital versus medical department 0.0003; proximity hospital versus intensive care <0.0001; and medical department versus intensive care 0.0239. The p-values of MPO concentrations between groups were healthy versus ambulatory <0.0001; healthy versus proximity hospital <0.0001; healthy versus medical department <0.0001; healthy versus intensive care <0.0001; ambulatory versus proximity hospital 0.1237; ambulatory versus medical department 0.8589; ambulatory versus intensive care 0.1276; proximity hospital versus medical department 0.1463; proximity hospital versus intensive care 0.5811; and medical department versus intensive care 0.1482. 

Valè p nan histon_valè ADN ant gwoup yo te an sante kont anbilatwa.<0.0001; healthy versus proximity hospital <0.0001; healthy versus medical department <0.0001; healthy versus intensive care <0.0001; ambulatory versus proximity hospital 0.0013; ambulatory versus medical department 0.0525; ambulatory versus intensive care <0.0001; proximity hospital versus medical department 0.2740; proximity hospital versus intensive care 0.0.0033; and medical department versus intensive care 0.0003. The thresholds (dotted lines) were evaluated in healthy controls recruited several months before the epidemy. 

Yo te estime papòt NE a nan 73 ng/ml ak sa yo ki nan MPO-ADN nan 0.562 AU (45{0 inite absòbe nm), histon-ADN nan 0.591 AU, aktivite total DNase. nan 9.94 U/ml, ak serik dsDNA nan 95.60 ng/ml (C) NE, MPO-ADN, ak histon-ADN dapre kantite ògàn ki afekte nan COVID-19. Done ki soti nan (A), (B), ak (C) yo te konpare pa tès la Mann-Whitney. Liy tirè yo reprezante limit ki defini nan mwayèn plis 2 devyasyon estanda pou NE, MPO-ADN, ADN histon, ak ADN san selil, ak mwayèn-2 devyasyon estanda pou aktivite DNaz.

3.3|Presizyon dyagnostik nan NE, MPO-ADN, histon-ADN, dsDNA, aktivite DNase, ak sitokin ki gen rapò pou detekte rezilta maladi nan analiz karakteristik reseptè a (ROC)

Nou te fè analiz ROC pou evalye presizyon dyagnostik NE, MPO-ADN, ak histon-ADN pou prediksyon rezilta ki gen rapò ak maladi (Tablo S5 ak trase Forest nan Figi 4). NE te gen papòt enpòtan pou admisyon nan inite swen entansif, ensidan an nan ensifizans respiratwa, saturation oksijèn san.<85%, and the presence of at least two affected organs (Figure 4). The latter was best predicted with a cutoff at 593 ng/ml of NE. Histone-DNA had significant thresholds for admission into intensive care units, kidney injury, and blood oxygen saturation <85%. MPO-DNA had significant thresholds for heart decompensation, kidney injury, respiratory failure, and blood oxygen saturation <85%. The ROC analyses identified also very significant cutoffs for IL-6, IL-8, and CXCR2 for admission into intensive care units, heart decompensation, kidney injury, and respiratory failure. In contrast, we did not observe these associations with IL-1β and TNF-α.

3.4  |  Associations between NE >593 ng/ml ak karakteristik pasyan yo ak rezilta yo

In univariate analyses, NE >593 ng/ml was significantly associated with CT score, blood oxygen saturation, respiratory failure, presence of at least two affected organs, and admission into the intensive care unit (Table S6). We retained chronic kidney disease, diabetes, and hypertension as potential confounders in multivariable analyses (Table S7). In the multivariable models that were used to account for the collinearity issue, NE >593 ng/ml te asosye poukont yo ak nòt CT ak prezans omwen de ògàn ki afekte yo (Tablo S8). Modèl miltivaryab optimal la te gen yon zòn anba karakteristik fonksyònman reseptè (AUROC) 0.876 (95 pousan CI, 0.758–0.950) ak yon pousantaj ka kòrèkteman klase nan 85 pousan. Nou te fè analiz konkordans ant koupe nan NE ak sitokin nan prediksyon nan omwen de ògàn ki afekte yo. Nou rapòte yon konkordans 70.4 pousan ak 72.7 pousan nan NE ak CXCR2 ak IL-6, respektivman (Figi 3).

3.5|Sera pasyan diminye retansyon NET yo epi ogmante liberasyon dsDNA nan netrofil kontwòl izole yo

Nou etidye NETs nan selil netrofil kontwòl enkubasyon ak sera pasyan yo lè l sèvi avèk flow cytometry. Nou te obsève yon retansyon diminye nan selil-bound NETs, ​​ki te reflete yon lage ogmante, soti nan selil enkubasyon ak pasyan kont sera kontwòl (Figi 5A). Nou te etidye plis lage dsDNA soti nan netrofil kontwòl ki te pwodwi pa sera pasyan yo. Nou te obsève yon lage ogmante nan dsDNA soti nan netrofil enkubasyon ak pasyan kont sera kontwòl (Figi 5B). Anpèchman NE ak lòt serin proteaz serik ak 10 μM aprotinin te gen yon efè anpèchman fèb sou lage dsDNA (Figi 5C). Ansanm, done sa yo sigjere ke sera ki soti nan pasyan ogmante liberasyon an nan eleman nan NETs, ​​ak yon wòl limite nan NE.

4|DISKISYON

Our study showed that NE, global DNase activity, and components of NETs are involved in the early and later steps of COVID-19. NE and histone-DNA were associated with clinical manifestations and biomarkers related to pulmonary damage, cardiovascular manifestations, renal insufficiency, and inflammation. Elastase >593 ng/ml se te yon prediktè endepandan nan blesi milti-ògàn nan analiz miltivarye.

Ogmantasyon dramatik nan nivo san NE ak NETs nan ka anbilatwa montre patisipasyon yo nan repons bonè lame a SARS-CoV-2, jan yo te obsève deja pou lòt nemoni viral.4,6,11,20 Ogmantasyon nan NE. ak NETs toujou obsève nan faz nan pita nan enfeksyon an, jan sa evidan nan ka entène lopital, an patikilye moun ki rekrite nan inite swen entansif la de semèn apre aparisyon nan sentòm yo. Selil epitelyal alveyòl ki soti nan poumon ki enfekte ak viris grip la ankouraje NEToz.21 Sepandan, gen yon deba sou efè prejidis ak pwoteksyon NET nan sendwòm detrès respiratwa egi (ARDS).22,23 H3 sitrulinated ak ADN san selil reflete a. pwodiksyon de pyèj ekstraselilè pa netrofil, granulosit, ak monosit.23,24 Ogmantasyon dramatik nan konsantrasyon san nan NE reflete pi espesifikman aktivasyon an nan neutrophils.24,25 Nan nòt, konsantrasyon NE korelasyon pi byen ak enflamasyon alveolè pase konte netrofil, nan egi. sendwòm detrès respiratwa.25,26.

NE, men pa histone-DNA ak MPO-DNA, se te yon prediktè endepandan domaj milti-ògàn nan pasyan COVID-19. Rezilta sa a reflete wòl enpòtan NE nan liberasyon konpozan NET ak mekanis iminite netrofil natirèl.24 NE distribye nan tisi ak san pa degranulasyon oswa lage ak NETs.24,27-29 Endiksyon ROS pa enfeksyon viral aktive MPO. , ki Lè sa a, aktive liberasyon an nan NE.29,30 Korelasyon ki trè enpòtan ant NE ak histon-ADN ak MPO-ADN montre wòl nan NE nan fòmasyon NET. Sou eksitasyon neutrophil, NE translocates nan nwayo a, kote li patisipe nan degradasyon histon anvan li degaje ak materyèl ADN / chromatin nan NETs.6,30 Sa ki enpòtan, NE ki asosye ak NETs rete aktif epi sove aktivite andojèn anti-protease nan AAT. 31 NE ka pwodui domaj tisi nan poumon, kè, fwa, veso yo, ak ren epi li gen efè prothrombotic nan enfeksyon viral.6,26,31–37.

Degradasyon konpozan matris ekstraselilè (ECM) pa NE pwodui menm blesi nan poumon ak vaskilè ak sa yo obsève nan espesimèn otopsi pasyan COVID-19.34–39 Asosyasyon NE ak histon-DNA ak SaO2 nan admisyon lopital ak Nòt CT nan domaj nan poumon COVID-18 yo konsistan avèk efè yo nan lòt enfeksyon viral nan poumon. COVID-19.39–41 Blesi nan myokad pandan COVID-19 pa byen konprann.42–44 Mekanis yo gen ladan enfeksyon viral dirèk, tronboz, mikwovaskilè, ak aksidan myokad ki gen rapò ak livrezon oksijèn redwi ak divilgasyon nan. cytokines.34,43,45 Ogmantasyon cTnT ki asosye ak NE ta ka segondè nan tronboz kardyovaskulèr ak enfaktis myokad ak/oswa myokardit.34,43,44 NE ak NETs ta ka kontribye tou nan asosyasyon blesi kè atravè efè sistemik nan ren yo. ak lòt ògàn yo.2,45,46 Asosyasyon yo nan NE ak histon-ADN ak ure ak kreyatinin sijere patisipasyon yo nan aksidan ren egi rapòte nan apeprè 30 pousan nan COVID-19 pasyan yo.33,47-49 .

Etid nou an kontribye nan yon pi bon konpreyansyon sou mekanis patolojik COVID-{0}} lè li montre wòl kle nan dezòd iminite netrofil la pandan ak apre replikasyon viral, jan rezime nan rezime grafik la. IL-6, IL-8, ak TNF- konte pou cytokin yo ki asosye sitou ak severite COVID-19.50 Nou konfime asosyasyon sa a pou IL-6 ak IL{{7} }. Ogmante konsantrasyon IL-1 yo te korelasyon pozitivman ak gravite maladi a nan plizyè etid.51 Sepandan, nou pa t jwenn okenn asosyasyon IL-1 ak rezilta severite COVID-19, jan yo te rapòte deja nan yon etid. meta-analiz resan yo.52 Rezilta sa yo konsistan avèk yon etid ki sot pase a gwo gwosè, kote IL-1 te mal detekte epi, kòm yon rezilta, te gen sèlman yon valè prediksyon majinal nan gravite maladi a.50 IL{{17 }} ak IL-8 yo pwodui sou deklanchman NF-κB nan makrofaj alveol ki enfekte yo atravè mekanis ki pwobableman enplike Bruton tyrosine kinase (BTK). grav COVID-19.53 IL-8 aji kòm chemokin ki aktive netrofil atravè lyezon li ak CXCR2, ki se yon gwo reseptè chemokine nan netrofil yo.15 Se poutèt sa, ogmantasyon dramatik nan NE nan grav COVID{{27} }} ka gen rapò ak aktivasyon netrofil pa chemen IL-8/CXCR2.16 LDH, ferritin, ak D-dimer yo trè korelasyon ak NE epi yo ka reflete aktivasyon macrophage COVID-19.49, 54

Kontrèman, NE ak NETs ta ka jwe tou yon wòl nan deklanchman macrophage ak pwosesis la nan pro-enflamatwa cytokines.3,6,36-38 Nou rapòte yon diminisyon dramatik nan aktivite DNase mondyal nan serom, ki ta ka patisipe nan NETosis nan diminye degradasyon nan. sikile fragman ADN chromatin (abstract grafik).55–58 Li enpòtan pou remake ke yon modèl sourit Dnase1–/– Dnase1 l3–/– ekspoze a patojèn pwodui blesi nan poumon menm jan ak sa yo obsève nan pasyan ki gen detrès respiratwa ak/oswa sepsis ak otopsi nan. Pasyan COVID-19.40,59 Toujou, yon etid resan rapòte yon diminisyon aktivite DNase I nan nemoni bakteri ak viral nan timoun yo.60.

Sera pasyan COVID-19 yo te diminye retansyon selil NET yo epi ogmante liberasyon dsDNA netrofil ki soti nan donatè ki an sante yo. Rezilta menm jan an te deja jwenn ak serom COVID-19 lè l sèvi avèk lank selilè SYTOX Green pou quantifier NETs.9 Rezilta sa yo montre ke NETosis la ka deklanche pa estimilis andojèn ki te pibliye nan san pa tisi blese tankou DAMPs, ki gen ladan dsDNA gratis. .61 HMGB1 sanble pa patisipe nan ogmante NEToz, paske konsantrasyon li pa te ogmante nan ka COVID-19, jan yo te rapòte deja.62

Etid nou an ouvè pèspektiv terapetik. Aktivite NE twòp rapòte nan etid nou an sijere evalye itilizasyon nouvo jenerasyon inibitè NE ki pisan, ki gen ladan lonodelestat (POL6014), alvelestat, CHF6333, ak elafin nan COVID-19.8,27 Diminisyon dramatik nan DNase rapòte nan etid nou an sijere tou evalye itilizasyon recombinant deoxyribonuclease I (dornase alfa) ak / oswa DNase 1L3.63-65 Youn nan efè espere se liberasyon an nan NE soti nan NETs degrade, ak ogmante NE gratis nan san ak imedyatman amelyore efikasite nan inibitè NE. 30 Pou rezon sa a, nou panse ke asosyasyon inibitè DNase ak inibitè NE ta dwe konsidere nan tretman COVID-19. Yon lòt opsyon terapetik yo dwe konsidere ta ka itilize nan inibitè nan CXCR2 bloke rekritman netrofil ak aktivasyon. Enfimite NE ak/oswa divilgasyon NET nan premye faz COVID-19 ta ka pwodui benefis men tou risk ki gen rapò ak diminye iminite natirèl lame a. Kontrèman, nou sipoze ke estrateji sa a ta ka diminye manifestasyon sistemik COVID-19 nan faz apre repplikasyon maladi a.

Etid nou an te soufri limit. Nou pa t 'kapab sistematik rapòte tout byomarkè nan tout pasyan yo. Rekritman an ak evalyasyon kwa-seksyonèl pa t 'pèmèt nou etidye sinetik yo nan NE ak NETs pa swiv-up nan pasyan yo. Sepandan, nou te kapab konpare konsantrasyon NE ak NETs nan pasyan anbilatwa sentòm ki te rekrite pandan premye semèn COVID-19 ak pasyan ki te entène lopital pandan dezyèm a katriyèm semèn maladi a. Rekritman miltisantrik nan lopital lokal yo ak lopital rejyonal inivèsite yo se te yon fòs etid nou an pou evalye ka ki gen severite maladi ki gen diferans. Anrejistreman konplè done klinik yo te pèmèt nou fè yon analiz miltivarye nan asosyasyon NE ak NETs ak severite ak domaj milti-ògàn nan COVID-19, apre ajisteman fòse pou istwa medikal.

An konklizyon, etid nou an montre ogmantasyon dramatik nan NE, aktivite DNase, ak NET pandan premye faz COVID-19 ak wòl kle yo nan gravite sendwòm detrès respiratwa egi ak sistèm kadyovaskilè, ren, ak enflamatwa. manifestasyon nan etap ki pita nan maladi a. Yo sijere evalye NE, DNase 1, ak NETs kòm potansyèl objektif terapetik.

REKONÈS

Etid NICO a te anrejistre pa Komite Revizyon Enstitisyonèl Rechèch Klinik (DRCI) nan Lopital Inivèsite Nancy (No. 2020PI087) epi apwouve pa Komite Etik nan Lopital Inivèsite Nancy. Otè yo pa te gen okenn konfli enterè yo deklare.

KONFLI ENTERÈ

Okenn nan otè yo pa te gen okenn relasyon finansye ak tèt yo ak fanmi imedya yo / lòt moun enpòtan.

KONTRIBYON OTÉ

JL Guéant te gen aksè konplè a tout done yo, te sipèvize etid la, epi li pran responsablite pou entegrite ak presizyon analiz done yo. JL Guéant ak V Regnault te vin ansent ak desine etid la. JL Guéant, V Regnault, RM Guéant-Rodriguez, A Oussalah, ak P Lacolley te pran done yo, analize done yo, oswa entèprete done yo. JL Guéant te patisipe nan redaksyon prensipal maniskri a. V Regnault, RM Guéant-Rodriguez, ak A Oussalah te patisipe nan redaksyon pasyèl pati espesifik yo. Tout otè yo te revize maniskri a yon fason kritik. RM Guéant-Rodriguez, Julien Fromonot, ak A Oussalah patisipe nan jesyon baz done. RM Guéant-Rodriguez ak A Oussalah te patisipe nan analiz estatistik.

REFERANS

1. Zhou P, Yang XL, Wang XG, et al. Yon epidemi nemoni ki asosye ak yon nouvo coronavirus ki gen orijin pwobab baton. Lanati. 2020;579:270-273.

2. Grasselli G, Zangrillo A, Zanella A, et al. Karakteristik debaz ak rezilta 1591 pasyan ki enfekte ak SARS-CoV-2 admèt nan ICU nan Rejyon Lombard, Itali. JAMA. 2020;323(16):1574.

3. Azkur AK, Akdis M, Azkur D, et al. Repons iminitè a SARS-CoV-2 ak mekanis chanjman imunopatolojik nan COVID-19. Alèji. 2020;75:1564-1581.

4. McGonagle D, Sharif K, O'Regan A, Bridgewood C. Wòl sitokin ki gen ladan interleukin-6 nan COVID-19-pwovoke nemoni ak maladi deklanchman makwofaj ki sanble ak sendwòm. Autoimmun Rev 2020;19:102537.

5. Mo P, Xing Y, Xiao YU, et al. Karakteristik klinik nemoni refractory COVID-19 nan Wuhan, Lachin. Clin Enfekte Dis. 2020:ciaa270. [Epub devan enprime]. https://doi.org/10.1093/cid/ciaa270

6. Papayannopoulos V. Pyèj ekstraselilè netrofil nan iminite ak maladi. Nat Rev Immunol. 2018;18:134-147.

7. Lagunas-Rangel FA. Rapò netrofil-a-lenfosit ak rapò lenfosit-a-C-reyaktif pwoteyin nan pasyan ki gen maladi coronavirus grav 2019 (COVID-19): yon meta-analiz. J Med Virol. 2020;92(10):1733-1734.

8. Barnes BJ, Adrover JM, Baxter-Stoltzfus A, et al. Vize potansyèl chofè COVID-19: pyèj ekstraselilè netrofil yo. J Exp Med. 2020;217:e20200652.

9. Zuo Y, Yalavarthi S, Shi H, et al. Pyèj ekstraselilè netrofil nan COVID-19. JCI. Insight. 2020;5:e138999.

10. Gueant JL, Fromonot J, Gueant-Rodriguez RM, Lacolley P, Guieu R, Regnault V. Blood Myeloperoxidase-DNA, yon biomarker nan repons bonè a SARS-CoV-2 enfeksyon? Alèji. 2020. [Epub devan enprime]. https://doi.org/10.1111/all.14533

11. Cortjens B, de Boer OJ, de Jong R, et al. Pyèj ekstraselilè netrofil yo lakòz obstruction nan chemen pou respire pandan maladi viris respiratwa syncytial. J Pathol. 2016;238:401-411. 12. Twaddell SH, Baines KJ, Grainge C, Gibson PG. Wòl émergentes nan pyèj ekstraselilè netrofil nan maladi respiratwa. Pwatrin. 2019;156:774-782.

13. Li K, Fang Y, Li W, et al. CT imaj vizyèl evalyasyon quantitative ak klasifikasyon klinik maladi coronavirus (COVID-19). Eur Radiol. 2020;30:4407-4416.

14. Popovic B, Zannad F, Louis H, et al. Endothelial-kondwi ogmantasyon nan jenerasyon tronbin plasma karakterize yon nouvo fenotip hypercoagulable nan ensifizans kadyak egi. Int J Cardiol. 2019;274:195-201.

15. Uddin M, Watz H, Malmgren A, Pedersen F. NETopathic enflamasyon nan maladi kwonik obstriktif poumon ak opresyon grav. Avant Immunol. 2019;10:47.

16. Didangelos A. COVID-19 hyperinflammation: e netrofil yo? mSphere. 2020;5:e00367-e00420.

17. DeLong ER, DeLong DM, Clarke-Pearson DL. Konpare zòn ki anba de oswa plis reseptè ki gen rapò koub karakteristik fonksyone: yon apwòch nonparametric. Byometrik. 1988;44:837-845. 18. Efron B, Tibhirani RJ. Yon entwodiksyon nan bootstrap la. CRC Press 1994.

19. Nagelkerke NJD. Yon nòt sou yon definisyon jeneral nan koyefisyan detèminasyon an. Byometrika. 1991;78:691-692.

20. Funchal GA, Jaeger N, Czepielewski RS, et al. Pwoteyin fizyon viris respiratwa syncytial fè pwomosyon fòmasyon pyèj ekstraselilè netrofil ki depann de TLR-4-nan netrofil imen. PLoS Youn. 2015;10:e0124082.

21. Pillai PS, Molony RD, Martinod K, et al. Mx1 revele chemen natirèl nan rezistans antiviral ak maladi grip letal. Syans. 2016;352:463-466.

22. Bendib I, de Chaisemartin L, Mekontso Dessap A, Chollet-Martin S, de Prost N. Konprann wòl pyèj ekstraselilè netrofil nan pasyan ki gen nemoni grav ak ARDS. Pwatrin. 2019;156:1278-1280.

23. Granger V, Faille D, Marani V, et al. Monosit san moun ka fòme pyèj ekstraselilè. J Leukoc Biol 2017;102:775-781.

24. Kettritz R. Neutral serine proteases of neutrophils. Immunol Rev. 2016;273:232-248.

25. Lengas A, Poletti V, Pacifico L, di Domizio C, Patelli M, Spiga L. Enflamasyon nan poumon egi: elastaz neutrofil kont netrofil nan lavaj bronchoalveolar-elastaz netrofil reflete pi bon entansite enflamatwa. Swen Entansif Med. 1994;20:354-359.

26. Polverino E, Rosales-Mayor E, Dale GE, Dembowsky K, Torres A. Wòl inibitè netrofil elastase nan maladi nan poumon. Pwatrin. 2017;152:249-262.

27. Korkmaz B, Moreau T, Gauthier F. Neutrophil elastase, proteinase 3 ak cathepsin G: pwopriyete fizikochimik, aktivite, ak fonksyon fizyopatolojik. Biochimie. 2008;90:227-242.

28. Faurschou M, Borregaard N. Granules Neutrophil ak vesik sekretè nan enflamasyon. Mikwòb Enfekte. 2003;5:1317-1327.

29. Papayannopoulos V, Metzler KD, Hakkim A, Zychlinsky A. Neutrophil elastase ak myeloperoxidase kontwole fòmasyon pyèj ekstraselilè netrofil yo. J Cell Biol. 2010;191:677-691.

30. Kolaczkowska E, Jenne CN, Surewaard BGJ, et al. Mekanis molekilè fòmasyon NET ak degradasyon revele pa D intravital nan vaskilè fwa a. Nat Commun. 2015;6:6673.

31. Taylor S, Dirir O, Zamanian RT, Rabinovitch M, Thompson AAR. Wòl netrofil ak elastaz netrofil nan tansyon wo atè nan poumon. Front Med (Lausanne). 2018;5:217.

32. Nakazawa D, Marschner JA, Platen L, Anders HJ. Pyèj ekstraselilè nan maladi ren. Kidney Int. 2018;94:1087-1098.

33. Doring Y, Libby P, Soehnlein O. Pyèj ekstraselilè neutrofil patisipe nan maladi kadyovaskilè: resan eksperyans eksperimantal ak klinik. Circ Res. 2020;126:1228-1241.

34. Bwonz-da-Rocha E, Santos-Silva A. Neutrophil elastase inhibiteurs ak maladi ren kwonik. Int J Biol Sci. 2018;14:1343-1360.

35. Alam SR, Newby DE, Henriksen PA. Wòl nan inibitè a elastaz andojèn, elafin, nan blesi kadyovaskilè: soti nan epithelium andothelium. Biochem Pharmacol. 2012;83:695-704.

36. Clancy DM, Henry CM, Sullivan GP, ​​Martin SJ. Pyèj ekstraselilè netrofil yo ka sèvi kòm platfòm pou trete ak aktivasyon cytokines fanmi IL-1. FEBS J. 2017;284:1712-1725.

37. Alfaidi M, Wilson H, Daigneault M, et al. Elastaz netrofil ankouraje sekresyon beta interleukin-1nan andotelyo kowonè imen an. J Biol Chem. 2015;290:24067-24078.

38. Korkmaz B, Horwitz MS, Jenne DE, Gauthier F. Neutrophil elastase, proteinase 3, ak cathepsin G kòm sib ki ka geri nan maladi imen. Pharmacol Rev. 2010;62:726-759.

39. Ackermann M, Verleden SE, Kuehnel M, et al. Itit andotelyal vaskilè poumon, tronboz, ak anjojenèz nan Covid-19. N Engl J Med. 2020;383:120-128.

40. Bikdeli B, Madhavan MV, Jimenez D, et al. COVID-19 ak maladi tronbotik oswa tronbo-anbolik: enplikasyon pou prevansyon, terapi antitronbotik, ak swivi: revizyon dènye modèl JACC. J Am Coll Cardiol. 2020;75:2950-2973.

41. Driggin E, Madhavan MV, Bikdeli B, et al. Konsiderasyon kadyovaskilè pou pasyan yo, travayè swen sante yo ak sistèm sante yo pandan pandemi COVID-19. J Am Coll Cardiol. 2020;75:2352-2371.

42. Babapoor-Farrokhran S, Gill D, Walker J, Rasekhi RT, Bozorgnia B, Amanullah A. Blesi myokad ak COVID-19: mekanis posib. Lavi Sci. 2020;253:117723. 43. Doyen D, Moceri P, Ducreux D, Dellamonica J. Myocarditis nan yon pasyan ki gen COVID -19: yon kòz ogmante troponin ak chanjman ECG. Lancet. 2020;395:1516.

44. Renu K, Prasanna PL, Valsala GA. Patojèn kowonaviris, komorbidite ak domaj milti-ògàn—Yon revizyon. Lavi Sci. 2020;255:117839. https://doi.org/10.1016/j.lfs.2020.117839

45. Libby P. Kè nan COVID-19: sib prensipal oswa moun k ap gade segondè? JACC Basic Transl Sci. 2020;5(5):537-542.

46. ​​Cheng Y, Luo R, Wang K, et al. Maladi ren asosye ak lanmò nan lopital pasyan ki gen COVID-19. Kidney Entènasyonal. 2020. 97:829-838.

47. Oussalah A, Gleye S, Clerc Urmes I, et al. Itilizasyon alontèm ACE Inhibitor/ARB asosye ak malfonksyònman ren grav ak blesi ren egi nan pasyan ki gen COVID grav-19: rezilta nan yon gwoup sant referans nan nòdès Lafrans. Clin Enfekte Dis. 2020;71(9):2447-2456.

48. Cheng Y, Luo R, Wang K, et al. Maladi ren asosye ak lanmò nan lopital pasyan ki gen COVID-19. Kidney Int. 2020;97:829-838.

49. Liu T, Zhang J, Yang Y, et al. Wòl interleukin-6 nan kontwole ka grav maladi coronavirus 2019. EMBO Mol Med. 2020;12:e12421.

50. Del Valle DM, Kim-Schulze S, Hsin-Hui H, et al. Yon siyati sitokin enflamatwa ede predi COVID-19 severite ak lanmò. Nat Med. 2020;26:1636-1643.

51. Gao YD, Ding M, Dong X, et al. Faktè risk pou pasyan COVID-19 grav ak grav: yon revizyon. Alèji. 2020; https://doi. org/10.1111/all.14657.

52. Akbari H, Tabrizi R, Lankarani KB, et al. Wòl pwofil cytokine ak sou-ansanm lenfosit nan gravite maladi coronavirus 2019 (COVID-19): yon revizyon sistematik ak meta-analiz. Lavi Sci. 2020;258:118167.

53. Roschewski M, Lionakis MS, Sharman JP, et al. Anpèchman Bruton tirozin kinaz nan pasyan ki gen COVID grav -19. Sci Immunol. 2020;5(48):eabd0110.

54. Colafrancesco S, Alessandri C, Conti F, Priori R. COVID-19 ale move: yon karaktè nouvo nan spectre sendwòm hyperferritinemia? Autoimmun Rev 2020;19:102573.

55. Takeshita H, Yasuda T, Nakajima T, Hosomi O, Nakashima Y, Kishi K. Sourit deoxyribonuclease I (DNase I): karakterizasyon byochimik ak imunolojik, estrikti cDNA ak distribisyon tisi. Biochem Mol Biol Int. 1997;42:65-75.

56. Ueki M, Takeshita H, Fujihara J, et al. Alèl ki espesifik nan Caucasian nan polimorfism nukleotid sèl ki pa sinonim nan jèn ki kode deoxyribonuclease I-like 3, ki kapab gen rapò ak otoiminite, pwodui yon anzim inaktif. Clin Chim Acta. 2009;407:20-24.

57. Ueki M, Kimura-Kataoka K, Takeshita H, et al. Evalyasyon tout polimorfism nukleotid sèl ki pa sinonim (SNPs) nan jèn yo ki kode deoxyribonuclease imen I ak I-like 3 kòm yon SNP fonksyonèl ki kapab enplike nan otoiminite. Jounal FEBS la. 2014;281:376-390.

58. Keyel PA. Dnaz nan sante ak maladi. Dev Biol. 2017;429:1-11.

59. Jiménez-Alcázar M, Rangaswamy C, Panda R, et al. Host DNases anpeche okluzyon vaskilè pa pyèj ekstraselilè netrofil yo. Syans. 2017;358:1202-1206.

60. Chen D, Yang XL, Shen ZB, et al. Siyifikasyon pèlen ekstraselilè netrofil ak makè li yo nan dyagnostik bonè nan nemoni nan kominote a akeri nan timoun yo. Zhongguo Dang Dai Er Ke Za Zhi. 2019;21:868-875.

61. Denning NL, Aziz M, Gurien SD, Wang P. DAMPs ak NETs nan Sepsis. Avant Immunol. 2019;10:2536.

62. Chen L, Long X, Xu Q, et al. Nivo serik ki wo S100A8/A9 ak HMGB1 nan admisyon nan lopital yo gen rapò ak rezilta klinik enferyè nan pasyan COVID-19. Selil Mol Immunol. 2020;17:992-994.

63. Zitter JN, Maldjian P, Brimacombe M, Fennelly KP. Respire Dornase alfa (Pulmozyme) kòm yon tretman non-invasive nan atelectasis nan pasyan mekanikman ayere. J Crit Care. 2013;28(218):e1-e7.

64. Pottecher J, Noll E, Borel M, et al. Pwotokòl pou TRAUMADORNASE: yon pwospè, randomize, miltisant, doub-avèg, ak plasebo-kontwole esè klinik nan aerosolize dornase alfa pou diminye ensidans la nan ipoksemi modere a grav nan pasyan chòk ayere. Esè. 2020;21:274.

65. Fuchs TA, Jimenez-Alcazar M, Göbel J, Englert H.Engineered DNAse anzim ak itilizasyon nan terapi. 2019.

ENFÒMASYON SIPÒ

Ou ka jwenn plis enfòmasyon sipò sou Entènèt nan seksyon Enfòmasyon Sipò.

Pou plis enfòmasyon:1950477648@nn.gmail.com