Kontakte:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

Amelyorasyon nan pwodiksyon glikozid phenylethanoid pa yon elicitor chanpiyon nan kilti sispansyon selil nan Cistanche deserticola

Cui-tao Lu¹,∗ & Xing-guo Mei²

Mo kle Cistanche deserticola, elicitor chanpiyon,phenylethanoid glikozid, kilti selil plant

Résumé
Lè, nan 15yèm jou a nan kwasans, yon elicitor soti nanFusarium solanite ajoute nan 40 mg l^-1 pouCistanche deserticolakilti sispansyon selil, sa ki nan echinacoside, acteoside, ak totalglikozid feniletanoid(PeGs) nan selil kiltive yo tout ogmante nan pwochen 27 jou yo pa plis pase 100 pousan a 15 mg g.^-1pwa sèk, 9 mg g-1 pwa sèk ak 57 mg g^-1 sèk wt, respektivman. Byomass final la (1.3 mg sèk wt ml^-1) pa te afekte.

Cistanche deserticola

Entwodiksyon

Cistanche deserticolaMa. (Orobanchaceae), yon zèb natif natal nan Lachin lajman ki itilize nan medikaman tradisyonèl pou plizyè tretman ki gen ladan itilize kòm yon sedatif oswa yon entansifikatè repons iminitè (Hsu et al. 1995, Chang et al. 1995).Glikozid feniletanoid(PeGs) se pi gwo metabolit bioaktif nanCistanche deserticola(Xiong et al. 2000) epi yo konpoze de anpil konpozan tankou echinacoside, acteoside, cisacteoside, isoacteoside, 2-acetylactoside, cistanoside A, ak osmanthuside B (Wang et al. 2000). Avèk demann lan ogmante pou pwodwi sa yo ak n bès rapid nanCistanche deserticolaplant yo, kilti selil ta dwe yon mwayen altènatif atire nan pwodiksyon an. Anpil elicitors (sitou chanpiyon elicitors) ka amelyore pwodiksyon metabolit nan kilti selil plant (Wang et al. 2001). Li et al. (1998) te jwenn ke yon elicitor chanpiyon nan Fusarium solani izole nan sistèm rasin nan tou deCistanche deserticolaak lame li yo, Halaxylon ammodendron, te kapab amelyore sa ki nan sid amine nan calli deCistanche deserticolaMen, chanjman sa yo nan kontni PeGs nan liy callus sa a pa te mansyone nan etid yo. Nan papye sa a, efè yo nan yon elicitor de F. solani sou byosentèz total PeGs ak de prensipal bioaktif PeGs (echinacoside ak acteoside), ak sou chanjman yo nan kwasans selil yo te etidye nan kilti a sispansyon nan.Cistanche deserticola.

Materyèl ak metòd

Kilti selil plant yo
Callus te pwovoke nan balans nanCistanche deserticolaepi konsève sou mwayen Gamborg a B5 (1968) ki konplete ak 0.5 mg endol-3- asid acetic l^-1, 2 mg kinetin l^-1,ak 1 g kazein idrolysat l^-1. Yo te ajiste pH la a 6 anvan esterilizasyon. Tout eksperyans yo te fèt nan flakon souke 250 ml, chak ki gen 100 ml mwayen sou yon shaker rotary (120 rpm ak 25 degre) anba fènwa. Inoculum la te apeprè 100 g fre l^-1.

kontni efikas nan cistanche deserticola --phenylethanoid glikozid

Preparasyon nan elicitor chanpiyon

Separasyon souch chanpiyon, Fusarium solani, ak preparasyon elicitor chanpiyon yo te fèt jan sa dekri deja (Li et al. 1998, Yu et al. 2001). Yo te ajoute plizyè kantite (ekivalan idrat kabòn) nan elicitor chanpiyon nan kilti flakon yo souke sou 15yèm d (peryòd total kilti te 42 d).

Akimilasyon byomass ak analiz viabilite
Selil ki soti nan yon flakon souke yo te lave ak dlo distile ak friz-seche nan yon pwa konstan. Se konsa, pwa sèk la te detèmine. Vitabilite selil (pousantaj selil solid nan yon popilasyon selil) te detèmine pa rediksyon klori 2,3,5-triphenyl tetrazolyom (Towill & Mazur 1975).

phenylethanoid glikozidnancistanche deserticola

Detèminasyon sa ki nan echinacoside, acteoside, ak totalglikozid feniletanoid(PeGs)
Ekstraksyon PeG yo te fèt dapre metòd Du & Liu (1993). Seche frizCistanche deserticolaselil yo te ekstrè ak 70 pousan (v / v) etanòl. Te fraksyon nan etanòl konsantre, degrese ak acetate etil dlo-satire, ak Lè sa a, lesiv ak dlo-satire n-butanol. Fraksyon n-butanol te konsantre, fonn nan dlo, chaje nan yon kolòn résine macropore (AB -8, pwodui chimik nan Inivèsite Nankai, Tianjin, Lachin), epi elite ak dlo ak metanol, youn apre lòt. Yo te kolekte fraksyon metanol epi yo te detèmine kontni total PeG yo lè l sèvi avèk echinacoside kòm estanda nan 334 nm. Echinacoside ak acteoside yo te detèmine lè l sèvi avèk kolòn Nova Pak C18 (250 × 4.6 mm) nan yon sistèm HPLC (dlo) ak yon detektè UV (334 nm).

Rezilta yo

Efè elicitor chanpiyon sou akimilasyon byomass ak total PeG byosentèz Efè elicitor chanpiyon sou byomass selil ak akimilasyon total PeGs depann de dòz la te ajoute (ekivalan idrat kabòn). Jan yo montre nan Figi 1, pi ba dòz elicitor yo te favorab pou wt sèk laCistanche deserticolaselil yo. Pik la te ak elicitor a nan 20 mg l^-1(bay 1.76 mg sèk wt ml^-1).
Akimilasyon total PeGs te ogmante siyifikativman pa elicitor chanpiyon an nan ant 20 mg l^-1ak 80 mg l^-1. Elicitor nan 40 mg l-1 te jwenn pi gwo pwodiksyon an (57 mg g^-1), ki te plis pase de fwa sa ki te jwenn nan kilti kontwòl ki pa elisitè a. Eksperyans lan plis itilize elicitor chanpiyon an nan 40 mg1^-1.

Fig. 1. Pwa selil sèk ak total PeGs akimilasyon nan kilti selil sispansyon nanCistanche deserticolaan repons a plizyè dòz elicitor chanpiyon. Yo te ajoute yon elicitor chanpiyon nan mwayen an sou 15 d. Yo te pran echantiyon apre yon lòt 27 d. ▲, Pwa final selil sèk; ◆, kontni total PeG. Valè yo vle di rezilta triplike ak ba erè reprezante devyasyon estanda.

Kou tan nan kwasans selil ak byosentèz PeGs
Figi 2 montre kou tan viabilite selil ak PeGs (echinacoside ak acteoside) byosentèz selil sispansyon apre kilti yo te sibi yon 40 mg l.^-1elicitor chanpiyon sou 15 d. Nan 27 d ki vin apre nan kilti, echinacoside ak acteoside, de prensipal PeGs bioaktif nanCistanche deserticola, tou de ogmante konsiderableman. Sou 39 d a, akimilasyon maksimòm tou de te reyalize, rive nan 14.7 mg g^-1sèk pwa ak 8.9 mg g^-1 sèk wt, respektivman. Yo pa te obsève yon diferans enpòtan nan viabilite selil ant kilti yo trete elicitor ak kontwòl la.

Fig. 2. Viabilite selil ak echinakozid ak byosentèz akteozid nan kilti selil sispansyon nanCistanche deserticolaapre tretman pa 40 mg l^-1elicitor chanpiyon. Elicitor chanpiyon te ajoute nan mwayen an sou 15th d.◆, Echinacoside-trete ak elicitor; ◇, echinacoside-kontwòl; ●, acteoside-trete ak elicitor;○,

acteoside-kontwòl; ▲, selil viabilite-trete ak elicitor;△, selil viabilite-kontwòl. Valè yo vle di rezilta triplike ak ba erè reprezante devyasyon estanda.

Diskisyon

Anpil eleman ki sòti nan fongis (fragman miray selil, polisakarid, oligosakarid, glikoprotein, elatriye) yo te itilize kòm divès kalite elicitors chanpiyon nan pwodiksyon metabolit segondè ak anpil espès selil plant. Nan papye sa a, omojene (sitou ki konpoze de polisakarid) ki soti nan souch chanpiyon Fusarium solani izole nan sistèm rasin nan.Cistanche deserticolaak Halaxylon ammodendron te montre yo dwe yon elicitor efikas pou byosentèz PeGs nan kilti selil la nanCistanche deserticola. Itilizasyon elisitè sa a pou ankouraje sentèz PeG nan selil yo pa t sèlman enpòtan, men li te parèt tousuit apre eksitasyon. Konklizyon sa a te dakò ak kèk etid anvan yo sou kilti selil plant (Wang et al. 2001).

Nan etid anvan an nan Li et al. (1998), lè yo te ajoute yon elicitor chanpiyon ki soti nan F. solani nan mwayen kilti a, callus pwovoke nan grenn yo nan.Cistanche deserticolate kapab rete vivan nan subculture ki vin apre alontèm, ak pwodiksyon iridoids yo te kapab amelyore. Li te endike ke selil kiltive yo ka sentèz metabolit segondè nan rezistans maladi lè yo atake pa mikwo-òganis. Menmsi iridoid yo pa te detèmine nan eksperyans nou an, nou te montre ke polisakarid ki soti nan F. solani ta ka itilize kòm efikas elicitors chanpiyon nan pwodiksyon an nan PeG akCistanche deserticolaselil yo.

kontni efikas nan cistanche deserticola --phenylethanoid glikozid

Soti nan: ' Amelyorasyon nanglikozid feniletanoidpwodiksyon pa yon elicitor chanpiyon nan kilti sispansyon selilè nanCistanche deserticola' pa Cui-tao Lu¹,∗ & Xing-Guo Mei²

----Biotechnology Letters 25: 1437–1439, 2003. © 2003 Kluwer Academic Publishers. Enprime nan Netherlands.

Referans

Chang Y, Wu H, Wang SN, Cheng HC (1995) Etid sou efè fò nanCistanche deserticolaMa., Cistanche salsa (CA Mey) G. Beck. ak Cistanche tubulosa (Schenk) R Wight. Lachin J. Chin. Mater. Med. 26: 143–146.
Du NS, Liu JL (1993) Detèminasyon nanglikozid feniletanoidnanCistanche deserticolapa espektrofotometri rezin macrovesicular. Nat. Prod. Res. Devlope. 5:30–33.

Gamborg OL, Miller RA, Ojima K (1968) Kondisyon eleman nitritif nan kilti sispansyon nan selil rasin soya. Eksp. Selil Res. 50: 151–158.

Hsu WH, Chu SH, Sheng LC, Yuan KW, Mao CN (1995) Etid sou konstitiyan chimik yo ak efè famasi nanCistanche deserticolaMa. ak Cistanche salsa (CA Mey) G. Beck. Manton. Tradit. Zèb. Dwòg 26: 143–146.

Li S, Wu X, Dong XC, Zheng X, Zheng JH, Lou ZC (1998) Efè elicitor Fusarium solani sou sa ki nan asid amine.Cistanche deserticolacallis. Lachin J. Northwest Pharm. 13: 247–248.
Towill LE, Mazur P (1975) Etid sou rediksyon klori 2,3,5-triphenyltrazolyom kòm yon tès viabilite pou kilti tisi plant yo. Kapab. J. Bot. 53: 1097–1102.
Wang CG, Wu JY, Mei XG (2001) Amelyorasyon nan pwodiksyon Taxol ak eskresyon nan kilti selil Taxus Chinensis pa elicitation chanpiyon ak renouvèlman mwayen. Appl. Microbiol. Biotechnol. 55: 404–410.
Wang YM, Zhang SJ, Luo GA, Hu YN, Hu JP, Liu L, Zhu Y, Wang HJ (2000) Analiz dephenylethanoid glikozidnan ekstrè nan remèd fèy Cistanchis pa LC/ESI- MS/MS. Acta Pharm. Sin. 35: 839–842.
Xiong QB, Yasuhiro Tezukay, Takuji Kaneko, Li HY, Le Quan Tran, Koji Hase, Tsuneo Namba, Shigetoshi Kadota (2000) Anpèchman nan oksid nitrique pa phenylethanoids nan makrofaj aktive. Lajan ewo. J. Pharm. 400: 137–144.
Yu LJ, Lan WZ, Qin WM, Xu HB (2001) Efè asid salisilik sou peroksidasyon manbràn-lipid pwovoke chanpiyon elicitor ak pwodiksyon Taxol nan kilti sispansyon selil Taxus Chinensis. Pwosedi. Byochim. 37: 477–482.