Tranzisyon epithelial-a-mesenchymal pwovoke ipoksi nan selil epitelyal pwoksimal tubulaires atravè MiR-545-3p–TNFSF10
Mar 30, 2022
Mei-Chuan Kuo 1, Wei-An Chang 2,3et al
Résumé:Ipoksi konsidere kòm youn nan mekanis fizyopatoloji nan blesi ren ak plis pwogresyon nan.echèk ren. Tranzisyon epithelial-a-mesenchymal (EMT) nan tubul ren se yon pwosesis kritik nan fibwoz ren. Etid sa a te itilize analiz transcriptom pou mennen ankèt sou EMT ki te pwovoke ipoksi atravè EMT ki modile microRNA (miRNA) nan selil epitelyal proximal tubulaires (PTECs). Sekans RNA revele uit miRNA yo te regilasyon ak twa miRNA yo te downregulated nan PTECs kiltive anba ipoksi konpare ak normoxia. Pami 11 miRNA yo, miR-545-3p gen ekspresyon ki pi wo a nan PTEC yo ekspoze a ipoksi, ak miR-545-3p siprime ekspresyon de ligand apoptoz ki gen rapò ak faktè nekwoz timè (TRAIL/TNFSF10). Ipoksi pwovoke EMT nan PTEC yo atravè miR-545-3p-TNFSF10 modulasyon, ak TNFSF10-EMT atenue ki te lakòz ipoksi oswa miR{-545-3p imite transfeksyon. Konklizyon sa yo te bay nouvo pèsepsyon sou règleman inik nan entèraksyon miR-545-3p-TNFSF10 ak efè potansyèl terapetik yo sou aksidan ren pwovoke pa ipoksi.
Mo kle: ipoksi; miR-545-3p; TNFSF10; tranzisyon epithelial-a-mesenchymal; selil epitelyal proximal tubulaires; analiz transcriptome
Kontakte:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791
benefis cistanche dezè: amelyore fonksyon ren ak soulaje blesi nan ren
1. Entwodiksyon
Maladi rense yon pwoblèm sante mondyal, ki ogmante morbidite ak mòtalite ak vin pi grav anpil fado finansye atravè lemond. Fibwoz ren se yon bòn tè nan pwogresyon pòv nan divès maladi ren, ki mennen nan fen etap maladi ren [1].
Ipoksi jwe yon wòl enpòtan nantisi ren blesiak plis pwogresyon nan fibwoz ren [2]. Ipoksi se yon regilatè ki pisan nan plizyè pwosesis selilè, ki gen ladan metabolis, kwasans, ak siviv selil atravè mekanis yo nan deteksyon oksijèn [3]. Repons transkripsyon yo nan privasyon oksijèn yo sitou medyatè pa faktè ipoksi-induzibl (HIF), ki opere pandan devlopman nòmal ak nan pwosesis patolojik an asosyasyon ak disponiblite oksijèn diminye [4]. Ipoksi kwonik ka deklanche yon repons domaj nan ren ak lakòz irevokabl transfòmasyon fenotip nan selil epitelyal tubulaires, pwovoke fibwoz ren [5,6]. Tranzisyon epithelial-a-mesenchymal (EMT) se yon pwosesis kritik nan fibwoz ren kote selil epitelyal pèdi karakteristik epitelyal yo epi jwenn karakteristik yo mesenchymal [7,8]. Aktivasyon siyal HIF nan selil epitelyal ren yo ka ankouraje fibrogenesis lè li fasilite EMT [9]. Chanjman nan nivo oksijèn ak aktivasyon siyal ipoksik atravè HIF ap parèt kòm deklannche enpòtan ak modulateur EMT [10]. Sepandan, mekanis molekilè ki kache EMT ki pwovoke ipoksi ak fibwoz nan ren yo pa konplètman konprann.
MicroRNAs (miRNAs), kòm faktè regilasyon apre transcription, yo konsidere kòm regilatè pwisan nan ekspresyon jèn ak fenotip selilè. Prèv akimile montre ipoksi modile byogenesis ak aktivite miRNAs [11]. Gen kèk etid ki rapòte diferan ekspresyon miRNA ak enpak yo sou devlopman EMT ak fibwoz nan ren anba ipoksi [12-14]. Du et al. sijere ke downregulation nan miR-34yon EMT ankouraje nan selil epitelyal tubulaires [13]. Xie et al. te endike ke ogmantasyon nan miR -155 te lakòz fibwoz nan tib proximal [14]. Sepandan, si wi ou non miRNAs medyatè chemen siyal patojèn nan EMT ipoksi pwovoke nan selil epitelyal proximal tubulaires (PTECs) pa te byen eksplore lè l sèvi avèk analiz transcriptome.
Kidonk, nan etid sa a, nou te itilize yon ti analiz sekans RNA nan PTEC yo anba kondisyon normoxia ak ipoksi pou mennen ankèt sou mekanis potansyèl pou reglemante chemen siyal ipoksi yo nan aksidan ren.
cistanche tcmbon pou maladi ren chorik
2. Materyèl ak Metòd
2.1. Kilti selil ak obsèvasyon mòfoloji
PTEC imen (ATCC PCS{{0}}) yo te kiltive nan medyòm fondamantal selil epitelyal ren (ATCC PCS400030™) plis 0.5 pousan serom fetal bovine (FBS), dapre sijesyon manifakti a. Selil HK-2 yo te achte nan men American Type Culture Collection (Manassas, VA, USA). Selil HK-2 yo te kiltive nan keratinocyte-SFM (GIBCO) ak sipleman 2 pousan FBS. Selil yo te kiltive anba normoxia (O2, 21 pousan) ak ipoksi (O2, 1 pousan).
Karakteristik EMT nan PTEC imen yo te idantifye pa seri obsèvasyon chanjman mòfolojik yo lè l sèvi avèk mikwoskopi limyè (Nikon ECLIPSE TE20000-S, Nikon, Tokyo, Japon).
2.2. Analiz Western Blot
Pwoteyin total selil HK-2 yo te ekstrè lè l sèvi avèk tanpon liz RIPA (radio-immunoprecipitation assay) (EMD Millipore, Burlington, MA, USA). Pwoteyin denatire a te separe pa 9-11 pousan elektwoforèz SDS-PAGE epi answit transfere sou yon manbràn PVDF apre bloke ak imunoblotting pa antikò espesifik prensipal ak segondè.
Antikò kont HIF-1 (Catalog #nb100-105, Novus), HIF-2 (Catalog #7096s, Cell Signaling), N-cadherin (Catalog #610921, BD Biosciences), vimentin ( Katalòg #550513, BD Biosciences), E-cadherin (Catalog #610182, BD Biosciences), slug (Catalog #9585s, Cell Signaling), ak GAPDH (Catalog #MAB374, EMD Millipore) te itilize. Siyal blots yo te kaptire lè l sèvi avèk sistèm Proteinsimple plis Fluorchem Q (Alpha Innotech, San Leandro, CA, USA). Densitometry nan blots yo te kalkile lè l sèvi avèk lojisyèl Image J (Bethesda, MD, USA).
2.3. Ti sekans RNA
HK-2 cells were cultured under hypoxia or normoxia conditions for 48 h. NGS was performed to examine the miRNA profiles of HK-2 cells. Trizol® Reagent (Invitrogen, Waltham, MA, USA) was utilized to extract total RNA from the harvested cells, which were isolated for further RNA preparation and small RNA-seq by Welgene Biotechnology Company (Welgene, Taipei, Taiwan). The quality of the extracted RNA was evaluated by an RNA integrity number (RIN), which was measured using an Agilent Bioanalyzer (Agilent Technology, Santa Clara, CA, USA). Samples were prepared to manufacture the small RNA library and then to execute deep sequencing by the Illumina sample preparation kit. PCR amplification was performed to ligate total RNA with 30 and 50 adaptors and to reversetranscription into cDNA. cDNA constructs were separated using 6% polyacrylamide gel Biomolecules 2021, 11, 1032 3 of 14 electrophoreses, and 18–40 nucleotide RNA fragments (140–155 nucleotide in length with both adapters) were extracted. The sequencing of the libraries was performed using an Illumina GAIIx instrument (50 cycle single read) and then the results were processed by the Illumina software. The differentially expressed miRNAs between HK-2 cells treated with normoxia or hypoxia were defined at >2-fold change and >10 lekti pou chak milyon.
2.4. Done Disponibilite
Done sekans RNA ki te pwodwi nan piblikasyon sa a te depoze nan GEO anba aksesyon GSE178810.
2.5. Izolasyon RNA, transkripsyon ranvèse, ak PCR an tan reyèl (Q-PCR)
ARN total ki soti nan selil ki kiltive nan kondisyon normoksi oswa ipoksi oswa trete ak HIF-1 inibitè (CAY10585, (3-(2-({4-Adamantan-1-yl-phenoxy) )-acetylamino)-4-hydroxybenzoic asid methyl ester) pou 48 èdtan (10 uM, katalòg #400092, Calbiochem) te izole lè l sèvi avèk TRIzol ak TRIzolLS Reagent (Life Technologies), respektivman. Yo te transkri miRNA yo nan Mir-X ™ MiRNA First-Strand Synthesis Kit (Catalog #638313 Takara, Japon) Yo te itilize SYBR Green pou analize miRNA quantitative ak yon sistèm QuantStudio 3Q-PCR (ThermoFisher Scientific, Foster City, CA, USA). Nivo ekspresyon relatif miRNA a. ak RNA nan selil yo te nòmalize nan kontwòl entèn U6 oswa GAPDH, respektivman.Ekspresyon relatif yo te prezante lè l sèvi avèk metòd la 2−∆∆Ct. Jadendanfan yo itilize yo ki nan lis nan Tablo S1.
2.6. Zouti analiz byoenfòmatik
Objektif miRNA espesifik yo te prevwa lè l sèvi avèk de sit entènèt byoenfòmatik, baz done miRmap [15] ak TargetScan [16], ki ka bay prediksyon sib miRNA pou diferan òganis. Tou de lojisyèl miRmap ak TargetScan klasifye potansyèl sib espesifik miRNA epi endike fòs represyon yon sib miRNA ki baze sou nòt miRmap yo ak percentiles nan Context plus plis nòt [17].
Fonksyon byolojik sib yo chwazi yo te analize lè l sèvi avèk lojisyèl IPA (Ingenuity Systems, Redwood City, CA, USA), ki bay yon "analiz debaz" nan jèn yo / pwoteyin. Yo ka itilize chemen kanon, rezo, ak lis toksisite yo jwenn nan analiz debaz la pou idantifye potansyèl patojèn jèn/pwoteyin yo [18].
2.7. Transfèksyon pasajè
MiR-545-3p imite (200 nM) ak miR-negatif kontwòl mimik la (miR-NC, 200 nM) (GE Healthcare, USA) yo te transfekte nan selil lè l sèvi avèk reyaktif transfeksyon Lipofectamine™ RNAiMAX (Catalog #13778075). , ThermoFisher Scientific, USA) swiv pwotokòl manifakti a. Se sekans miR-545-3p yo itilize yo nan Tablo Siplemantè S1.
2.8. Esè imunosorban ki lye ak anzim (ELISA)
Konsantrasyon TNFSF10 nan supernatant selil HK-2 ki kiltive anba normoksi, ipoksi, oswa apre transfè ak miR-545-3p miR-545-3p nan kondisyon ipoksi pou 48 èdtan yo te mezire ak twous Quantikine1 ELISA ki disponib nan komès la ( Katalòg #DTRL00, R&D Systems) dapre enstriksyon manifakti a, jan sa te deja
dekri.
2.9. Analiz estatistik
Varyab kontinyèl yo te eksprime kòm mwayèn ± erè estanda nan mwayèn (SEM) oswa medyàn (25yèm ak 75yèm percentile) jan sa apwopriye, pandan y ap varyab kategorik yo te eksprime kòm pousantaj. Te korelasyon nan mitan varyab kontinyèl egzamine pa korelasyon Spearman. Siyifikasyon diferans ki genyen nan varyab kontinyèl ant gwoup yo te teste lè l sèvi avèk T-tès Elèv la oswa analiz yon sèl-fason nan divèjans (ANOVA), ki te swiv pa tès la post hoc ajiste ak yon koreksyon Tukey jan sa apwopriye. Biyomolekil estatistik 2021, 11, 1032 4 nan 14 analiz yo te fèt lè l sèvi avèk GraphPad Prism 5.0 (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA). Siyifikasyon estatistik yo te mete nan yon p-valè de-bò nan<>
costanch herba powdergen yon bon efè reparasyon soudomaj ren
3. Rezilta yo
3.1. Ipoksi pwovoke EMT nan PTEC yo
Ipoksi yo te rapòte yo patisipe nan mekanis fizyopatoloji nanblesi nan ren[9]. Pou mennen ankèt sou chanjman fenotip nan PTECs ren imen (RPTECs) ak selil HK-2 nan kondisyon ipoksi, selil yo te kiltive nan kondisyon normoxia (O2, 21 pousan) ak ipoksi (O2, 1 pousan) pou 48 èdtan. Nou te jwenn ke HIF-1 ak HIF-2 ekspresyon yo te elve nan RPTECs ak selil HK-2 nan kondisyon ipoksi pou 6 èdtan (Figi 1A). Mòfoloji selil yo te obsève ak chanje soti nan yon fòm wonn nan yon fenotip long ak mobil nan kondisyon ipoksi konpare ak kondisyon normoxia (Figi 1B).
Western blotting te itilize pou evalye EMT nan PTEC yo nan kondisyon normoxia oswa ipoksi. Ipoksi ogmante ekspresyon N-kadherin ak vimentin ak redwi ekspresyon E-kadherin nan PTEC imen (Figi 1C) ak selil HK-2 (Figi 1D) apre yon peryòd 48-h enkubasyon. Se poutèt sa, ipoksi lakòz EMT nan PTECs.
3.2. Idantifikasyon miR-545-3p Patisipe nan EMT Hypoxia-Enduced nan PTECs
Figi 2A montre tablo koule nan eksplorasyon miRNA potansyèl ki pwovoke pa ipoksi. Pwofil ti RNA ki soti nan selil HK-2 kiltive anba normoksi oswa ipoksi pou 24 èdtan pa NGS. Yo te jwenn vennyon miRNA ki gen yon chanjman siyifikatif 2-pliye nan selil HK-2 ki ekspoze a ipoksi konpare ak moun ki kiltive anba normoksi.
Nan 21 miRNA yo, 10 miRNA yo te regilasyon ak 11 miRNA yo te downregulated. Apre eksklizyon miRNA yo ak yon konte lekti anvan tout koreksyon mwens pase oswa egal a 10, 11 miRNA enpòtan (8 regilasyon ak 3 downregulated nan kondisyon ipoksi) yo te parèt pa kat chalè (Figi 2B ak Tablo S1). Nou itilize RT-Q-PCR pou valide ekspresyon miRNA sa yo nan de modèl in vitro, ki gen ladan RPTEC imen ak selil HK-2 nan kondisyon normoksi ak ipoksi. Pami 11 miRNA yo, qT-PCR pa t kapab detekte miR-190a-3p ak miR-1277-3p, epi ekspresyon enkonsistan miR-1269a, miR{ {18}}p, miR- 33b{-5p, miR-33a-5p, ak miR{-219a-5p yo te jwenn nan PTEC imen ak selil HK-2 apre tretman ak ipoksi (Figi 2C-G). Nivo miR-1266-5p, miR-4474-3p, ak miR-5579-3p yo te diminye nan tou de PTEC imen ak selil HK-2 nan kondisyon ipoksi (Figi 2H-J). Ekspresyon miR-545-3p pa sèlman te pi wo a pami 11 miRNA yo nan selil HK-2 ki te ekspoze a ipoksi konpare ak sa yo ki te trete ak normoksi, men tou li te elve nan PTEC imen nan kondisyon ipoksi (Figi 2K). Nou te plis egzamine si HIF-1 patisipe nan règleman ekspresyon miR-545-3p (Figi S1), epi nou te jwenn ke HIF-1 inibitè siprime elevasyon miR{-545-3p nan HK. -2 selil ki pwovoke pa ipoksi (Figi 2L). Konklizyon ki anwo yo te endike ke HIF-1 regle ekspresyon miR{-545-3p nan tib proximal yo nan kondisyon ipoksi.
Dapre ekspresyon ki pi wo nan miR-545-3p nan mitan 11 miRNAs nan selil HK-2 ki ekspoze a ipoksi, fonksyon fizyolojik sib potansyèl ki baze sou miR-545-3p yo, ak yon nòt miRmap. > 90 dapre baz done miRmap, yo te analize lè l sèvi avèk yon analiz debaz nan baz done a IPA. Pi gwo dis wout kanonik analiz IPA a te revele ke fonksyon fizyolojik miR -545-3p enkli règleman EMT pa faktè kwasans (Figi 3A). Analiz lis toks la te endike ke miR-545-3p te gen rapò ak blesi ren ak repons estrès oksidatif (Figi 3B). Dapre rezilta analiz bioenfòmatik la, ipoksi ka pwovoke EMT nan PTEC yo atravè miR-545-3p modulation.
Anplis de sa, analiz rezo sib potansyèl miR-545-3p montre ke miR-545-3p ak TNFSF10, kòm sib ki reglemante pa miR-545-3p, te enplike tou nan pwopagasyon selilè ak selil la. sik (Tablo 3).
MiRmap ak TargetScan (vèsyon 7.1) yo te itilize pou fè prediksyon byoenfòmatik, ki endike 3/ UTR nan TNFSF10 te genyen sekans grenn sib pou lyezon miR-545-3p. Nòt mipmap pwobabilite yo endike pwobabilite pou jèn sib yo prevwa nan miR-545-3p (Figi 3C). Se sekans grenn miR-545-3p ki konsève espès yo nan 3/ UTR TRAIL la montre nan Figi 3D. Tretman ipoksi diminye nivo mRNA TNFSF10 nan PTEC imen (Figi 3E) ak selil HK -2 (Figi 3F). Anplis de sa, yo te jwenn yon diminye nivo TNFSF10 mRNA nan supernatant ki sòti nan selil HK-2 anba ipoksi konpare ak normoksi (Figi 3G). Anplis de sa, transfeksyon miR-545-3p imite redwi ekspresyon mRNA TNFSF10 nan supernatant selil HK-2 (Figi 3H). Inibitè HIF-1 ranvèse ekspresyon mRNA TNFSF10 diminye nan selil HK-2 ki te pwovoke pa ipoksi (Figi 3I). Kidonk, ipoksi-reglemante ekspresyon miR-545, ki answit diminye ekspresyon TNFSF10, ak HIF-1 ta ka modile chemen miR-545-3p-TNFSF10 la.
3.4. Ipoksi pwovoke EMT nan selil HK pa modilizasyon miR-545-3p-TNFSF10
Pou evalye si miR-545-3p modulation EMT ki pwovoke ipoksi nan tib proximal la, nou evalye efè byolojik miR-545-3p ak TNFSF10 nan selil HK-2 yo. Premyèman, tretman ak TNFSF10 (20 ng/mL) pa t afekte viabilite selil HK -2 selil yo (Figi4A). Nou plis egzamine ekspresyon paresseux, kòm youn nan faktè transkripsyon pou règleman EMT. Ekspresyon slug te ogmante nan selil HK-2 apre transfeksyon ak miR-545-3p (Figi4B) epi yo te siprime nan selil HK-2 trete ak TNFSF10 (Figi 4C) nan kondisyon normoxia. Apre transfèksyon miR-545-3p miR-545-3p, ekspresyon E-cadherin te kontwole anba, epi ekspresyon N-kadherin ak vimentin te regilasyon nan selil HK-2 nan kondisyon normoxia (Figi 4D). Sepandan, TNFSF10 ranvèse efè miR-545-3p nan endiksyon EMT nan selil HK-2. Anplis de sa, tretman ak TNFSF10 (20 ng/mL) anpeche E-cadherin downregulation ak siprime N-kadherin ak vimentin upregulation, ak ranvèse EMT nan selil HK-2 pwovoke pa ipoksi nan selil HK-2 (Figi 4E). Konklizyon sa yo te vle di ke ipoksi te kontribye nan EMT nan PTECs atravè modulasyon nan miR-545-3p-TNSF10 chemen an, ak TNFSF10 te kapab diminye EMT nan PTECs pwovoke pa ipoksi ak miR-545-3p.
4. Diskisyon
Ipoksi lakòz malfonksyònman mòfolojik ak fizyolojik nanren, ki mennen ale nan yon bès rapid nanfonksyon ren[16]. Etid sa a te itilize analiz transcriptome pou mennen ankèt sou miRNAs potansyèl k ap patisipe nan pwosesis EMT ki te pwovoke ipoksi a nan PTECs, epi li te demontre ke miR-545-3p te regilasyon nan PTEC yo trete ak ipoksi, ak HIF-1 miR{{ modulation. 4}}p ak ekspresyon TNFSF10. Regilasyon miR-545-3p mennen nan EMT nan PTEC yo anba ipoksi. Anplis de sa, TNFSF10 amelyore EMT nan PTECs trete ak ipoksi. Se poutèt sa, nou te jwenn nouvo pèsepsyon lè nou reyalize règleman inik miR-545-3p-TNFSF10, ki soti nan ki nou ka entèprete pwogresyon maladi ren (Figi 5).
Rezilta nou yo te demontre ekspresyon miR-545-3p ki reglemante ak ipoksi nan tib proximal yo. Yo konnen miRNA yo jwe yon wòl enpòtan nan modulasyon ekspresyon jèn oswa aktivite ak plis kontwole mekanis fizyolojik aparisyon oswa pwogresyon maladi [19]. Etid anvan yo te revele miR-545 te sèvi kòm yon pwomotè timè, ki te kontwole pwopagasyon selilè, envazyon, ak migrasyon, ki te lakòz plis kansè epatoselilè [20,21]. miR-545 pwovoke yon pwosesis enflamasyon ak kontribye nan siwoz fwa ki gen rapò ak epatit B nan vize Tim-3 [22]. Kontrèman, miR-545-3p bloke pasyèlman lncRNA XIST la ak amelyore apoptoz myoblast kadyak ki te pwovoke pa ipoksi / reoksijenasyon [23]. Sepandan, si wi ou non miR-545 patisipe nan patojèn maladi ren yo pa byen eksplore. Kèk etid te demontre ke miR-545-3p te patisipe nan blesi ren egi ki gen rapò ak sepsis [24,25]. Tan et al. rapòte ke circ_0091702 sèvi kòm yon eponj nan miR{-545-3p siprime HK-2 selil apoptoz pwovoke pa lipopolysaccharide (LPS) nan tronbospondin 2 upregulation [24]. Hu et al. te jwenn ke twòp ekspresyon kansè nan sansiblite 2 ki pa kode soulaje apoptoz LPS-induit nan selil HK-2 atravè reglemante miR-545-3p/peroxisome proliferator-aktive reseptè-aks [25]. Shi et al. te endike ke circPRKCI te sove blesi enflamatwa pwovoke pa LPS nan selil HK-2 pa siprime miR{-545/zinc dwèt E-box-obligatwa homeobox 2 [26]. Etid sa a premye endike enpak miR-545-3p sou EMT ipoksi pwovoke nan ren an. Ipoksi te ogmante nivo miR-545-3p yo, ak HIF-1 reglemante ekspresyon miR{-545-3p nan PTEC yo. miR-545-3p pwovoke slug elevasyon ak plis ankouraje EMT, ki gen ladan represyon nan ekspresyon miR{-545-3p E-kadherin ak amelyorasyon nan ekspresyon N-kadherin ak vimentin nan PTECs. Nou demontre yon nouvo chemen siyal nan modil pwosesis EMT nan tib proximal anba ipoksi.
Yo te rapòte tou ipoksi modil ekspresyon TNFSF10 ak pwosesis fizyolojik la [27,28]. Fang et al. sigjere ke HIF-1 ogmante TNFSF10-pwovoke apoptoz atravè ogmante ekspresyon TNFSF10 decoy reseptè 1 (DcR1) nan blesi twomatik nan sèvo [27]. Harashima et al. endike ke HIF-2 ogmante sansiblite nan selil kansè pankreyas yo nan TNFSF10 nan kondisyon ipoksi [28]. Men, li pa klè ki jan yo kontwole TNFSF10 atravè post-transkripsyon nan miRNAs, espesyalman nan aksidan ren ipoksi-induit. Konklizyon nou yo bay nouvo konprann ke ipoksi modile ekspresyon TNFSF10 nan tib proximal yo atravè miR-545-3p. Ipoksi ogmante nivo miR-545-3p yo, epi, an vire, siprime ekspresyon TNFSF10 nan PTEC yo ak supernatant yo pou pwovoke pwosesis EMT la. Anplis de sa, nou te jwenn tou ke ipoksi modile chemen miR-545-3p-TNFSF10 nan tubul proximal atravè HIF-1. Sepandan, si wi ou non HIF-2 kontwole chemen sa a nan ren anba yon anviwònman ipoksi pa klè. Plis etid nesesè pou eksplore enpak subtip faktè transkripsyon HIF yo sou règleman miR-545-3p-TNFSF10 nan aksidan ren.
Prèv akimile montre ke manm superfamily TNF yo aktivman enplike nan fizyopatoloji devlopman ak pwogresyon maladi ren [29]. Manm superfamily TNF yo kontwole pèfòmans selilè yo, tankou diferansyasyon, pwopagasyon, nekwoz, apoptoz, oswa fibwoz, depann sou diferan etap domaj ren [30,31]. TNFSF10, kòm yon potansyèl ajan terapetik anti-kansè, ta ka anpeche kwasans selil ak amelyore apoptoz selil atravè lyezon nan reseptè spesifik lanmò transmembrane tip I, kidonk ede nan efikasite nan tretman chimyoterapi nan divès kansè [29,32]. Etid resan yo te jwenn yon relasyon negatif ant serik TNFSF10 ak rezilta klinik nan maladi ki pa kansè [33,34]. Sepandan, wòl TNFSF10 nan maladi ren pa te konplètman eksplore. Yo te jwenn ekspresyon ki wo nan TRAIL sikile nan pasyan ki gen kèk maladi ren, tankou maladi ren dyabetik ak maladi chanjman mini-mal [35,36]. Anpeche TNFSF10 atenue domaj nan yon modèl in vivo nan ren ischemi-reperfusion [37]. Kontrèman, sikile TNFSF10 te diminye nan pasyan ki gen maladi ren polikistik otozomal dominan konpare ak moun nòmal [38]. Sinon, efè enkonsistan TNFSF10 sou maladi ren yo te rapòte tou. Kontrèman ak efè apoptotik sou PTEC nan nefropati dyabetik [30], Nguyen et al. rapòte ke TNFSF10 egzèse yon repons enflamatwa ak pwopagasyon selil nan nefrit lupus [39]. Deklarasyon kontradiktwa sa yo ta ka gen rapò ak règleman diferan nan TNFSF10 pami divès kalite ak etap nan maladi ren. Jiska dat, li toujou difisil pou konkli sou wòl aktyèl TNFSF10 nan devlopman ak pwogresyon maladi ren yo. Etid sa a te jwenn ke TNFSF10 pa te afekte viabilite PTEC, sijere ke li pa t 'pwovoke apoptoz nan kalite selil sa a. Ekspresyon twòp nan TNFSF10 ta ka amelyore EMT pwovoke pa ipoksi nan tib proximal, sijere ke potansyèl efè terapetik miR-545-3p-TNFSF10 nan aksidan ren ki gen rapò ak ipoksi.
5. Konklizyon
Etid sa a te demontre ke ipoksi te kontribye nan EMT atravè miR-545-3p– TNFSF10 modulasyon, ak miR-545-3p anpèchman ak TNFSF10 ranvèse EMT ki te pwovoke ipoksi nan PTEC yo. Se poutèt sa, rezilta sa yo bay nouvo apèsi sou règleman inik miR-545-3p-TNFSF10 ak efè potansyèl terapetik yo nan aksidan ren pwovoke pa ipoksi.
sistanchka kontwole kwonikmaladi ren, klike la a pou aprann plis
Referans
1. Liu, M.; Liu, L.; Bai, M.; Zhang, L.; Ma, F.; Yang, X.; Solèy, S. Aks tòde/miR-214/E-cadherin pwovoke aks ipoksi ankouraje tranzisyon mesenchymal selil epitelyal ren ak fibwoz ren. Byochim. Biophys. Res. Komin. 2018, 495, 2324–2330.
2. Heyman, SN; Khamaisi, M.; Rosen, S.; Rosenberger, C. Renal parenchymal ipoksi, repons ipoksi ak pwogresyon nan maladi ren kwonik. Am. J. Nephrol. 2008, 28, 998–1006.
3. Giaccia, AJ; Simon, MC; Johnson, R. Biyoloji a nan ipoksi: wòl nan deteksyon oksijèn nan devlopman, fonksyon nòmal, ak maladi. Genes Dev. 2004, 18, 2183–2194.
4. Movafagh, S.; Crook, S.; Vo, K. Règleman nan faktè ipoksi-inducible -1a pa espès oksijèn reyaktif: Nouvo devlopman nan yon deba fin vye granmoun. J. Cell Biochem. 2015, 116, 696–703.
5. Manotham, K.; Tanaka, T.; Matsumoto, M.; Ohse, T.; Inagi, R.; Miyata, T.; Kurokawa, K.; Fujita, T.; Ingelfinger, JR; Nangaku, M. Transdifferentiation nan kiltive selil tubulaires pwovoke pa ipoksi. Kidney Int. 2004, 65, 871–880.
6. Amann, LG; Bandyopadhyay, D.; Norman, JT Èske gen yon mekanis komen pou pwogresyon diferan kalite maladi ren lòt pase proteinuria? Nan direksyon tèm inifye nan ipoksi kwonik. Kidney Int. Suppl. 2000, 75, S22–S26.
7. Li, Y.; Kang, YS; Dai, C.; bo, LP; Wen, X.; Liu, Y. Tranzisyon epithelial-a-mesenchymal se yon chemen potansyèl ki mennen nan malfonksyònman podocyte ak proteinuria. Am. J. Pathol. 2008, 172, 299–308.
8. Yamaguchi, Y.; Iwano, M.; Suzuki, D.; Nakatani, K.; Kimura, K.; Harada, K.; Kubo, A.; Akai, Y.; Toyoda, M.; Kawaguchi, M.; et al. Tranzisyon epithelial-mesenchymal kòm yon eksplikasyon potansyèl pou rediksyon podosit nan nefropati dyabetik. Am. J. Kidney Dis. 2009, 54, 653–664.
9. Higgins, DF; Kimura, K.; Bernhardt, WM; Shrimanker, N.; Akai, Y.; Hohenstein, B.; Saito, Y.; Johnson, RS; Kretzler, M.; Cohen, CD; et al. Ipoksi ankouraje fibrogenesis nan vivo atravè eksitasyon HIF-1 nan tranzisyon epithelial-a-mesenchymal. J. Clin. Investig. 2007, 117, 3810–3820.
10. Haase, VH Oksijèn kontwole tranzisyon epithelial-a-mesenchymal: Insights nan mekanis molekilè ak enpòtans nan maladi. Kidney Int. 2009, 76, 492–499.
11. Nallamshetty, S.; Chan, SY; Loscalzo, J. Hypoxia: Yon regilatè mèt nan byogenesis microRNA ak aktivite. Radik gratis. Biol. Med. 2013, 64, 20–30.
12. Zell, S.; Schmitt, R.; Witting, S.; Kreipe, HH; Hussein, K.; Becker, JU Hypoxia pwovoke ekspresyon jèn mesenchymal nan selil epitelyal tubulaires ren yo: yon modèl in vitro nan fibwoz transplantasyon ren. Nephron Extra 2013, 3, 50–58.
13. Du, R.; Solèy, W.; Xia, L.; Zhao, A.; Yu, Y.; Zhao, L.; Wang, H.; Huang, C.; Solèy, S. Hypoxia-induit down-regulation of microRNA-34a ankouraje EMT pa vize chemen an siyal Notch nan selil epitelyal tubulaires. PLoS ONE 2012, 7, e30771.
14. Xie, S.; Chen, H.; Li, F.; Wang, S.; Guo, J. Hypoxia-induced microRNA-155 ankouraje fibwoz nan selil tubul proximal yo. Mol. Med. Rep 2015, 11, 4555–4560.
15. Disponib sou Entènèt:
16. Disponib sou Entènèt:
17. Tsai, YC; Kuo, MC; Hung, WW; Wu, LY; Wu, PH; Chang, WA; Kuo, PL; Hsu, YL segondè glikoz pwovoke apoptoz selil mesanjyal atravè miR-15b{-5p ak ankouraje nefropati dyabetik pa livrezon Vesicle ekstraselilè. Mol. La. 2020, 28, 963–974.
18. Lewington, AJ; Cerda, J.; Mehta, RL Ogmante konsyantizasyon sou aksidan ren egi: Yon pèspektiv global sou yon asasen an silans. Kidney Int. 2013, 84, 457–467.
19. Chitwood, DH; Timmermans, MC Target imite modile miRNAs. Nat. Genet. 2007, 39, 935–936.
20. Changjun, L.; Feizhou, H.; Dezhen, P.; Zhao, L.; Xianhai, M. MiR-545-3p/MT1M aks kontwole pwopagasyon selilè, envazyon, ak migrasyon nan karsinom epatoselilè. Biomed. Pharmacother. 2018, 108, 347–354.
