Repons iminitè a sekans transplantasyon binokilè nan selil progenitor alojenik retin nan kavite vitre nan sourit

Résumé:

Transplantasyon intravitreyal nan selil progenitor retin imen alojenik (RPC) kenbe pwomès kòm yon tretman pou avegleman koripsyon retin. Travay anvan yo te montre ke progenitors neral yo byen tolere kòm allograft apre piki sèl; sepandan, livrezon sekans selil alojenik ogmante risk potansyèl pou sansibilizasyon lame ak rejè iminitè ki vin apre nan grèf yo. Etid aktyèl la te fèt pou evalye si wi ou non yon repons iminitè ta pwovoke pa repete transplantasyon intravitreyal nan RPC alojenik ki itilize modèl bèt sourit la. Nou te enjekte selil progenitor retin murin (gmRPCs), orijinèlman sòti nan donatè ki gen yon background jenetik C57BL/6, nan sourit moun k ap resevwa BALB/c yo nan lòd yo bay done sekirite sou sa ki ta ka espere apre tretman repete nan pasyan ki gen alogeneic pwodwi selil imen. . Repons iminitè a gmRPC yo te twò grav, ki gen ladan selil T, selil B, netrofil, ak selil asasen natirèl, ak makrofaj klèman dominan. Bèt trete ak dòz repete nan gmRPCs pa t 'montre prèv nan sansibilizasyon, ni te gen iminitè-medyatè destriksyon nan grèf yo. Malgre absans tretman imunosuppressive, grèf gmRPC alojenik yo te siviv apre dòz repete, kidonk bay sipò pou obsèvasyon preliminè ke yo tolere piki alojenik RPCs nan kavite vitreis la nan pasyan ki gen retinit pigmentosa.

cistanche plant-ogmante sistèm iminitè

Klike la a pou w wè pwodwi Cistanche Enhance Immunity

【Mande plis】 Imèl:cindy.xue@wecistanche.com / Whats App: 0086 18599088692 / Wechat: 18599088692

Mo kle: selil souch; tolerans iminitè; privilèj iminitè; rejè grèf; piki intravitreal

1. Entwodiksyon

Retinitis pigmentosa (RP) anglobe yon klas degenerasyon jenetik baton-kòn ak rezilta nan pwoblèm vizyèl pwogresif ak evantyèlman avèg. Pou vas majorite ka yo, pa gen okenn mezi terapetik ki pwouve ki disponib pou prezève oswa retabli vizyon; sepandan, yon estrateji pou adrese bezwen medikal sa a se transplantasyon selil souch. Gwoup rechèch nou an te eksplore piki intravitreyal nan kiltive selil retin progenitor imen (RPC) kòm yon fason pou entèvni nan RP ak objektif terapetik pou estabilize pwogresyon oswa petèt ranvèse kou maladi a. RPG yo ka sòti nan retin frelikè atravè don tisi oswa, pi resamman, nan liy selil pluripotent. Etid nan modèl bèt yo te montre ke selil sa yo kapab sove fotoreseptè nan koripsyon apre piki nan je a epi yo tou kapab diferansye nan fotoreseptè baton nan je lame a. Gen kèk prèv ki soti nan syans sou bèt ki montre hRPC sou fòm piki yo ka vin fonksyonèl, fotoreseptè entegre epi kidonk potansyèlman estabilize retin a lè yo ranplase dirèkteman selil ki mouri yo. Kidonk, hRPC sou fòm piki ta ka trete RP nan tou de yon mòd nerotwofik ak atravè yon mekanis ranplasman selil. Nenpòt fason, apwòch sa a ki baze sou selil ofri yon estrateji rasyonèl pou tretman pasyan ki soufri RP ak, potansyèlman, lòt maladi retin.

Yon lòt atribi favorab nan RPCs, e petèt progenitors neral an jeneral, se tolerans relatif yo bay selil sa yo apre transplantasyon kòm alogref, patikilyèman lè yo delivre nan yon kote ki montre privilèj iminitè tankou retin [1,2]. Sa te di, revizyon ki sot pase nan esè klinik ki fèt nan domèn medikaman rejeneratif kontinye rapòte defi toupatou ak enpòtan ki gen rapò ak enflamasyon ak rejè iminitè [3,4], ki gen ladan pou entèvansyon ki vize je a tankou terapi jèn retin [5], kòm byen ke kèk men se pa tout terapi selil [6]. Malgre ke yon kalite selil lokal, selil epitelyal pigman retin lan (RPE) pa egzante de pwoblèm rejè [7-9]; Se poutèt sa, repwesyon iminitè moun k ap resevwa yo se kounye a yon pratik nòmal [10,11]. RPC imen, nan lòt men an, parèt yo dwe konsiderableman byen tolere kòm allografts [6,12-16], byenke sa a pa pwolonje nan itilizasyon yo kòm xenograft, kote iminitè suppression obligatwa [17]. Baz pou siviv soutni nan RPC alojenik nan je a gen anpil chans pou enplike yon kantite faktè ki gen rapò ak selil yo itilize ak sit la moun k ap resevwa [1,8,18,19]. Nan travay anvan yo itilize sitometri koule, nou te montre ke progenitors neral imen, tou de ki sòti nan sèvo ak ki sòti nan retin, eksprime klas I, men se pa klas II, gwo histocompatibility (MHC) antijèn [20,21]. Mekanis klasik rejè grèf la enplike nan rekonesans ki pa espesifik nan molekil etranje MHC klas II pa CD4+ lenfosit lame [20-25]. Nan fason sa a, yon absans molekil klas II ta ka pèmèt selil progenitor grefon yo evade rejè iminitè medyatè atravè mekanis sa a. Sepandan, estati aparan "privilejye iminitè" hRPC ki enjekte intravitreman pa nesesèman absoli. Pandan ke pitit pitit sistèm nève santral (CNS) pa eksprime molekil detekte klas I oswa klas II MHC nan debaz epi montre privilèj iminitè aparan kòm alogref [1,2,20], selil sa yo ka sibi rejè iminitè nan sèten sikonstans. Etid yo montre ke antijèn MHC yo ka pwovoke nan eksitasyon an nan progenitors CNS ak interferon-gamma (IFN) [1,26]. Zansèt CNS yo ka rejte apre sansibilizasyon yon lame ki te deja grefon. Se poutèt sa, selil CNS progenitor (ki gen ladan RPC) eksprime alloantigens ke sistèm iminitè lame a detekte. Ansanm, sa a vle di ke estati iminitè privilejye selil progenitor grefon yo pwovizwa epi li sijè a modulasyon, pa egzanp, pa cytokin ki prezan nan mikro-anviwònman lokal la, epi ki ka sibi chanjman pandan dejenerasyon tankou RP. Pou tout rezon sa yo, repons iminitè a nan plizyè piki intravitreal RPC difisil pou predi epi yo dwe egzamine espesyalman.

cistanche tubulosa-amelyore sistèm iminitè

Si tretman RPC pwouve klinikman siksè nan RP, pral gen gwo ankourajman pou tretman tou de je nan maladi sa a avegleman bilateral. Pou rezon sekirite omwen, tretman binokilè ta tipikman fèt an sekans, ak yon tan dekalaj enpòtan ant de piki yo. Nòt, livrezon sekansyal selil alojenik sa a ta ka lakòz sansibilizasyon lame an repons a premye piki a, ki kapab lakòz rejè iminitè an repons a dezyèm piki a. Sa ka lakòz pèt grèf nan tou de je yo. Rapò anvan yo ekzamine yon sèl dòz subretin ak hRPCs nan RP [27] oswa redosing ak progenitors neral imen nan bèt [28,29] enkòpore repwesyon iminitè. Se poutèt sa, etid sa a te fèt kòm yon ankèt translasyonèl nan RPC murin kòm alogref sekans nan yon souch sourit iminitè-konpetan ak yon background jenetik disparate. Pandan ke yo pa enkli pwodwi RPC imen, travay sa a te fèt kòm yon pati nan etid ki pèmèt IND yo nan lòd yo bay done bèt adrese sekirite, sa vle di, si iminitè repwesyon ta nesesè pou pasyan k ap resevwa repete tretman alograft RPC nan esè ki anrejistre FDA.

2. Rezilta yo

Pou etidye konsekans iminolojik piki RPC bilateral nan sourit alojenik, yo te enjekte gmRPCs (C57BL/6 background jenetik) nan yon sèl je moun k ap resevwa BALB/c epi yo te enjekte yon dezyèm dòz RPC nan lòt je 2 semèn pita. Yo te chwazi entèval tan 2-semèn nan ase pou pèmèt premye grèf la pwovoke tou de repons iminitè natirèl ak adaptasyon. Okenn nan bèt eksperimantal yo pa te resevwa okenn tretman dwòg iminitè pou yo ka obsève repons iminitè natirèl fizyolojik yo.

2.1.Obsèvasyon klinik ak egzamen oftalmik pa devwale pa gen okenn anomali

Pwa bèt eksperimantal yo te mezire nan moman chak piki gmRPC. Tout bèt eksperimantal yo te montre pran pwa ant premye ak dezyèm piki a, ki konsistan avèk an jeneral bon sante. Bèt ki te sispann nan jou 14 ak jou 28 ± 1 apre dezyèm piki gmRPC yo te egzamine atravè mikwoskòp chirijikal la. Tou de segman yo anvan ak dèyè nan majorite nan je yo egzamine yo te jije yo dwe "nan limit nòmal" (WNL). Pa te gen okenn siy enflamasyon oswa lòt anòmal vizib nan gwoup ki pa trete, ki pa trete ak gmRPC-trete, ki endike ke piki gmRPC intravitreal pa t 'repons ilegal enflamatwa oswa domaj fizik tisi detekte atravè metòd sa a. Gwoup selil ki gen ladan grèf la te vizib nan vitre nan tou de jou 14 ak jou 28 ± 1 apre dezyèm piki gmRPC la (Figi 1). Repete piki nan gmRPCs pa t 'pwovoke chanjman aparan nan gwosè a nan grap selil yo, ki konsistan avèk siviv soutni selil donatè yo. Patoloji brit yo te evalye tou nan pwen final tèminal la epi pa gen okenn boul je elaji (ki endike fòmasyon timè) oswa lòt anomali yo te note.

Figi 1. GmRPC transplante yo vizyalize an vivo atravè fotografi fon atravè yon mikwoskòp chirijikal (tout=je gòch, OS). (A, B), bèt ki te trete yo (sham/sham, S/S); (C, D), bèt ki te kontwole ak je dwat trete sham ki te swiv pa gmRPCs-trete je gòch (sham/selil, S/C), ak bèt ak tou de je trete sekans ak gmRPCs (selil/selil, C/C) yo te. obsève ak imaj atravè mikwoskòp chirijikal la. Panèl anwo a (A, C, E) montre imaj OS yo te pran nan Jou 14 apre dezyèm piki; panèl ki pi ba a (B, D, F) montre imaj OS yo te pran nan jou 28 apre dezyèm piki. Yo te wè alogref yo kòm yon seri selil ki gen koulè pal (flèch) vizib nan vitre nan je gòch selil ki enjekte yo (S/C, C/C) nan tou de pwen tan (Jou 14: (C, D); ak Jou 28: ( E, F)). Apa de grèf, pa te gen okenn enflamasyon evidan oswa anòmal adisyonèl wè nan segman yo antérieure ak dèyè, jan yo wè axial nan fason sa a.

2.2. Etikèt imunofluoresan te montre selil iminitè yo nan vitrey la

Etikèt imunofluoresan pou senk gwo kalite selil iminitè (makrofaj, neutrofil, selil asasen natirèl, selil T, ak selil B) yo te fèt sou cryosections okilè yo ak revele enfiltrasyon selil iminitè pozitif nan je apre piki gmRPC (Figi 2A-F). Selil T (CD3), selil B (CD45R), neutrofil (Ly-6G), ak selil asasen natirèl (CD49b) te montre yon prezans limite nan je yo te enjekte ak gmRPCs, tandiske makrofaj aktive (Iba-1 ) yo te selil iminitè prensipal yo ki te reponn a grèf intravitreyal yo. Tisi ki konparab ki soti nan bèt ki pa trete ak bèt ki te trete yo pa t montre selil iminitè yo nan kriseksyon okilè, sa ki sijere ke enfiltrasyon selil iminitè yo te wè se te yon repons a grèf gmRPC yo. Konfòm ak obsèvasyon sa a, selil iminitè yo te lokalize nan zòn ki antoure grèf gmRPC yo oswa nan grap gmRPC yo tèt yo.

Figi 2. Imuno-etikèt nan selil iminitè enfiltre pa gwoup tretman. Imaj imunofluoresan nan (A) seksyon kontwòl (antikò segondè pou kont li), (B) anti-Iba-1 (aktive makrofaj ak makè mikroglia), (C) anti-Ly-6G (makè netrofil), (D) anti-CD49b (tiyè selil natirèl makè), (E) antikò anti-CD3 (T cell makè), ak (F) anti-CD45R (B cell makè) yo parèt nan figi a. Siyal wouj ki limite prezan yo endike etikèt antikò pozitif pou makè leukosit yo, siyal vèt yo endike grèf gmRPC yo ak siyal ble yo endike etikèt nikleyè DAPI. Jòn se yon sipèpoze siyal ki pa espesifik, ki pi evidan nan segman ekstèn fotoreseptè yo ki montre otofluoresans. Gwoup tretman: trete (UT), tou de je pa trete; S/S, tou de je yo trete (sekans) ak machin; S/C, je dwat enjekte ak machin ki swiv pa je gòch ak 50,000 gmRPCs ak; C/C, tou de je yo enjekte ak 50,000 gmRPCs (sekans) pou chak orè nan Seksyon 4

Nimewo pik chak selil iminitè nan je a varye selon kalite selil (Figi 3A–E). Nan kontras, de-fason ANOVA revele pa gen okenn diferans nan enfiltrasyon selil iminitè lè yo konpare bèt ki te resevwa yon sèl piki gmRPC (imitasyon / selil) ak moun ki te resevwa piki bilateral (selil / selil). Sa a te ka a pou enfiltrasyon nan makrofaj (tach anti-Iba-1) (Figi 3A), netrofil (tach anti-Ly{-6 G) (Figi 3B), selil asasen natirèl (CD49b tach) ( Figi 3C), selil T (CD3 tach) (Figi 3D), ak selil B (CD45R tach) (Figi 3E).

2.3. ELISPOT pa t montre repons pou sonje antijèn yo

ELISPOT se yon fason pou teste IFN espesifik ki pwodui deklanchman selil T. Tretman Phorbol 12-miristat 13-acetate (PMA) se te yon kontwòl pozitif ki imite dezyèm mesaje a, DAG, pou aktive chemen reseptè selil T a epi, an vire, lakòz deklanchman selil T. Nan Figi 4A-D, gwoup PMA-trete yo te montre pi gwo kantite tach IFN konpare ak gwoup kontwòl ak selil sekouris pou kont yo (sa vle di, lenfosit ki soti nan CLNs, splenosit ki soti nan larat). Lè selil sekouris yo te ko-kilti ak C57BL/6 splenosit (B6 SPL), echantiyon jou 14 yo te konparab ak gwoup selil sekouris yo pou kont yo, ak sèlman yon ti kras pi wo konte tach IFN, ki endike yon mank de aktivasyon selil T (Figi 4A, B).

Figi 3. Kantifikasyon enfiltrasyon selil iminitè apre transplantasyon gmRPC. Selil iminitè enfiltre yo te vizyalize kòm siyal fliyoresan wouj nan jaden an D 'aprè piki gmRPC pou chak kondisyon eksperimantal, konte lè l sèvi avèk ImageJ, epi trase nan graf ba. Done ki soti nan Iba-1 (makè makrofaj aktive ak mikroglia) (A), anti-Ly-6G (makè netrofil) (B), anti-CD49b (makè selil asasen natirèl) (C), antikò anti-CD3 (T cells marker) (D), ak anti CD45R (B cells marker) (E) te parèt nan figi a. Yo te itilize tès ANOVA de-fason pou teste siyifikasyon ant gwoup sham/selil ak selil/selil yo; Valè p yo te: (A) p < {{10}}.4492, (B) p < 0.9376, (C) p < 0.119{{18 }}, (D) p <0.6411, ak (E) p <0.7201 (okenn pa t enpòtan).

Lè yo te teste selil donatè alojenik yo lè l sèvi avèk tès sa a, selil sekouris yo ki soti nan bèt yo te enjekte intraperitoneally ak gmRPCs (gwoup IP) pa t gen repons pou rapèl antijèn paske echantiyon yo pa t montre plis deklanchman selil T pa konte tach IFN yo konpare ak bèt yo pa t janm ekspoze. nan gmRPCs (simul/mantir). Ni bèt yo ki te enjekte intravitreally ak gmRPC yo, swa yon fwa (imitasyon/selil) oswa repete (selil/selil) te montre okenn repons rapèl antijèn. Nan yon ka, repons pou repete dòz gmRPC te parèt plis muet (Figi 4B). Ansanm, rezilta sa yo endike ke gmRPC yo montre antijenisite ki ba anpil. Remake byen ke splenosit C57BL/6 yo te matche ak background jenetik gmRPCs yo. San atann, selil stimulateur altènatif yo, gmRPCs, te ogmante kantite plas IFN nan tout gwoup eksperimantal yo konpare ak gwoup kontwòl negatif yo (Figi 4A-D). Yon eksplikasyon potansyèl ta ka gmRPC yo ki lakòz yon background segondè nan tès sa a. Sa ki enpòtan, pa te gen okenn diferans ant enjeksyon gmRPC ki pa trete, trete sham-trete, ak gwoup piki gmRPC repete, ki ankò endike yon absans repons pou sonje antijèn yo.

Figi 4. Kantifikasyon ELISPOT apre transplantasyon gmRPC. Egzamen ELISPOT yo te etabli kòm gwoup sa yo: kontwòl, selil sekouris poukont yo (lenfosit oswa splenosit ki gen selil T izole nan ganglion lenfatik nan kòl matris (CLN) oswa larat (SPL) nan bèt eksperimantal yo; PMA, selil sekouris yo trete ak phorbol {{1} }myristate 13-acetate (PMA) ak Ca ionophore; B6 SPL, selil sekouris melanje ak splenosit izole nan bèt C57BL/6; gmRPCs, menm selil sekouris yo melanje ak gmRPCs. (A), Selil sekouris yo se splenosit yo. soti nan bèt eksperimantal yo ki te sakrifye nan jou 14 apre dezyèm piki gmRPCs la.(B) Selil sekouris yo te lenfosit ki soti nan CLN bèt eksperimantal yo ki te sakrifye nan jou 14 apre dezyèm piki gmRPCs la.(C) Selil sekouris yo. se te splenosit ki soti nan bèt eksperimantal yo ki te sakrifye nan jou 29 apre dezyèm piki gmRPCs la.(D) Selil sekouris yo te lenfosit ki soti nan CLN bèt eksperimantal yo ki te sakrifye nan jou 29 apre dezyèm piki gmRPCs la. Yo te itilize tès ANOVA de-fason pou teste siyifikasyon (*) ant gwoup sham/selil ak selil/selil yo; Valè p yo te: (A) p < 0.5332, (B) p < 0.0{0 01 (siyifikatif), (C) p < 0.0207 ( enpòtan), ak (D) p <0.3355.

3. Diskisyon 

Te gen yon enterè konsiderab nan teknoloji selil souch kòm yon mwayen pou trete maladi dejeneratif retin ak gwoup nou an te eksplore itilizasyon hRPC alojenik nan RP. Pou rasanble done ki adrese konsekans iminitè potansyèl yo lè yo administre plis pase yon dòz alojenik pwodwi RPC imen atravè piki intravitreal, nou te pote etid bèt prezan an lè l sèvi avèk gmRPC ki soti nan yon background C57BL / 6 kòm grèf ak sourit BALB / c kòm lame. Orijin jenetik diferan sa yo te itilize pou modèl tretman sekans ak hRPC alojenik epi bay done sekirite preliminè anvan tès sou imen.

Pou byen evalye repons yo, bèt lame yo pa t resevwa okenn tretman imunosuppressive. Nou konpare repons iminitè ki te pwodwi pa yon sèl piki gmRPC ak dòz bilateral sekans dapre orè a piki ki dekri. Egzamen oftalmik pa t 'revele enflamasyon oswa nenpòt lòt diferans remakab ant gwoup bèt yo ki te resevwa 1 dòz gmRPCs oswa 2 dòz gmRPCs, sijere ke swa benefisyè yo pa te sansibilize pa premye tretman yo gmRPC, oswa sansibilizasyon an te sibtil. Rezilta imunolabeling yo te revele ke tout senk kalite selil iminitè yo te egzamine, sètadi selil T (CD3), selil B (CD45R), makrofaj (Iba-1), netrofil (Ly{-6G), ak selil asasen natirèl yo ( CD49b), te enfiltre nan je a ak vize grèf RPC yo apre transplantasyon. Men, enfiltrasyon sa a te relativman modere epi, byenke lòt kalite selil yo te detekte, li te sitou konpoze de makrofaj Iba-1 pozitif. Yon kantite trè limite nan selil T, selil B, netrofil, ak selil asasen natirèl yo te prezan. Enteresan, siviv nan demontre pa sèl ak repete grèf RPC te ekivalan, san pèt nan grèf nan nenpòt ka, malgre prezans nan macrophages. An jeneral, sa a sijere ke tou de repons iminitè natirèl ak adaptasyon nan RPCs jenetikman disparate yo te modere, menm si repwesyon iminitè pa te anplwaye. Anplis de sa, rezilta tès ELISPOT te montre pa gen okenn repons rapèl antijèn nan gwoup gmRPC-trete, ki konsistan avèk diskisyon an ke selil T pa jwe yon wòl enpòtan nan rejè a nan grèf gmRPC soti nan sourit C57BL/6. Yon fwa ankò, yo te obsève enfiltrasyon macrophage nan grèf gmRPC, byenke sa a pa te asosye ak destriksyon siyifikatif grèf nan kalite ki asosye ak rejè iminitè klasik [22-24].

benefis cistanche pou gason-ranfòse sistèm iminitè

Ansanm, obsèvasyon sa yo revele yon sitiyasyon ki klèman diferan de mekanis rejè transplantasyon alojenik T ak B selil yo rekonèt nan lòt tisi yo. Plizyè faktè ka kontribye nan sitiyasyon sa a. Sou yon bò, gen nosyon de je a kòm yon sit "privilejye iminitè", menm si nan ki nivo vitrey la pataje karakteristik sa yo ak korn a ak retin se mwens etidye e petèt plis kontwovèsyal. Nan lòt men an, RPC yo tèt yo parèt yo montre diminye iminojenisite kòm allografts, konpare ak kalite selil ki pi souvan etidye. Kòm nou te montre deja, RPC murin yo manke ekspresyon debaz nan MHC klas I ak klas II antijèn, byenke sa yo se inductible atravè eksitasyon cytokine. Absans ekspresyon MHC sa a ka kontribye nan siviv selil sa yo apre transplantasyon. Men, prezans selil iminitè yo nan grèf yo sipòte konsèp ke tolerans grèf nan anviwònman sa a pa pasif ak rezilta nan yon fenomèn imunoregulatwa aktif. Isit la, li ta dwe mete aksan sou ke menm sòt de enfiltrasyon selil iminitè a te deja prezan apre piki sèl epi li pa te vin pi grav nan dòz repete, kidonk souliye konklizyon nou an ke enfiltrasyon selil iminitè a nan grèf yo, patikilyèman pa macrophages, pa t 'rezilta a nan anvan. sansibilizasyon lame. Nan paramèt eksperyans sa a, repete dòz la pa t parèt pou diminye viabilite grèf an jeneral, ki te konsistan avèk posiblite pou efikasite soutni nan kontèks terapetik. Lòt paramèt, tankou diferan entèval entè-piki, ta ka swa ogmante oswa diminye aktivite selil iminitè a nan yon limit ki ta enpòtan pou aplikasyon klinik. Si konstitiyan selilè yo nan enfiltre, ki gen ladan dominasyon makrofaj, ta aplike tou pou moun pa klè. Anplis de sa, siviv alogref sa yo pa ta ka depann de yon retin nòmal ak yon baryè san-retin ki an sante. Moun k ap resevwa BALB/c yo itilize isit la se albinos ak sansib a domaj limyè [30]. Anplis, siviv soutni yo te wè repete nan travay anvan ak divès modèl koripsyon retin (egzanp, [31]).

Konpare ak siviv grèf, viabilite selil ki nan grèf yo prezante yon sitiyasyon pi konplèks. Gen yon pèt li te ye nan selil progenitor CNS ki fèt rapidman apre transplantasyon, gen anpil chans akòz plizyè faktè ki kapab genyen ladan l retrè faktè kwasans brid sou kou. Yon fwa yo etabli nan je a, selil yo dissociated fusion nan esfè-tankou total, sant yo ki parèt yo bay yon mikro-anviwònman ki pa pi bon pou kwasans, petèt akòz mank nan vaskularizasyon ak defi nan difizyon eleman nitritif. Trofism aparan makwofaj yo pou grèf RPC yo ta ka yon repons ki pa espesifik nan prezans selil sa yo ki pa solid nan enteryè grèf yo, ak makrofaj yo ap fonksyone nan wòl yo kòm debri selilè. Altènativman, RPC totalman solid ta ka aktivman atire makrofaj yo, pa egzanp, atravè ekspresyon cytokines chemo-attrayant, lè sa a selil lame yo ta dezyèm fwa rankontre debri ki soti nan selil donatè ki pa solid. Sa ki enpòtan, degre enfiltrasyon makwofaj yo wè nan anviwònman patikilye sa yo pa sanble gen konsekans negatif pou grèf la oswa retin lame a, kontrèman ak repons a allografts selilè nan sit privilejye ki pa iminitè [4]. Finalman, li vo mansyone ke rezilta yo rapòte isit la, byenke restriksyon nan yon modèl murin, ka gen enplikasyon pou travay nan imen. Kontrèman ak sourit la, nou konnen ke RPC imen kiltive eksprime nivo solid nan antijèn MHC klas I nan debaz; Se poutèt sa, konparezon an se vreman pwovizwa. Men, li enteresan sonje ke tès klinik sou grèf hRPC subretinal pa yon gwoup nan peyi Lachin [13], osi byen ke transplantasyon hRPC intravitreal pa gwoup nou an, te imedyatman montre siviv soutni nan allografts yo nan pasyan ki pa imunosupprime ak RP (JC). -01, [32], done ki pa pibliye). Sa a te ka a tou apre piki an sekans nan tou de je (JC-01 Ekstansyon, done ki pa pibliye), analòg ak travay la prezante isit la. Anplis de sa, yo te wè siviv grèf nan yon etid swivi sou JC -02 [33], kote yo te administre dòz repete sekans nan menm je a [34]. Ansanm, konklizyon sa yo endike ke repwesyon iminitè a pa toujou nesesè nan anviwònman an nan transplantasyon progenitor neral, patikilyèman nan je a, byenke limit yo nan fenomèn sa a ak mekanis regilasyon ki kache rete yo dwe klè.

4. Materyèl ak Metòd

4.1. Kilti Selil

Yo te chwazi gmRPC ki te deja karakterize [31] kòm selil donatè pou etid allojenik sa a. Okòmansman, gmRPC yo te izole nan sourit GFP-transgenic C57BL/6 jenetikman modifye pou eksprime yon pwoteyin fliyoresan vèt ranfòse (GFP). Ekspresyon nan pwoteyin GFP nan gmRPCs yo te nan enterè nan ke li pèmèt vizyalizasyon nan grèf apre piki san yo pa bezwen pou etikèt adisyonèl. Pou etid aktyèl la, gmRPC yo te kiltive nan Advanced DMEM/F12 complétée ak N-2 Sipleman (1:100, Life Technology, Carlsbad, CA, USA), Glutamax-1 (1:100, Life Technology). , Carlsbad, CA, USA), ak EGF (20 ng/mL, recombinant, Imèn, Life Technologies, Carlsbad, CA, USA) ak enkubasyon nan 37 ◦C ak 5% CO2. Selil yo te kenbe nan sispansyon melanje / koloni ki lach tache nan flakon kilti tisi san kouvwi. Selil yo te pase atravè tripsinizasyon ak TrypLE Select CTS (Life Technologies, Carlsbad, CA, USA) dilye 1:5 nan PBS pou yon minit epi netralize pa 10 fwa volim nan tripsin te ajoute. Melanj selil-trypsin lan te santrifuje nan 140 g pou 2 minit nan tanperati chanm, supernatant la retire, epi granules selil la resuspende nan medya fre anvan simen nan flakon kilti tisi nan konsantrasyon an vle. Yo te detèmine konsantrasyon selil ak viabilite atravè tach ble tripan; konte yo te fèt pa Countess (Life Technologies, Carlsbad, CA, USA) ak emocytometer.

Pou piki intravitreal yo, yo te repoze granules selil la nan 50K selil/µL nan BSS PLUS®. Yo te evalye konsantrasyon selilè ak viabilite anvan ak apre piki. Dòz la te enjekte se 50,000 selil pou chak je pou chak piki. Dòz la ak machin yo te chwazi dapre etid anvan nou yo.

4.2. Bèt eksperimantal

Objektif etid aktyèl la se te mennen ankèt sou repons iminitè alojenik potansyèl yo te pwovoke atravè piki intravitreal repete nan RPC alojenik. Bèt moun k ap resevwa yo se sourit BALB/c, ki diferan jenetikman ak sourit C57BL/6 ke gmRPC yo te izole. Yo te konsidere itilizasyon omwen twa bèt pou chak gwoup eksperimantal trete pou chak pwen tan ki nesesè pou pèmèt evalyasyon siyifikasyon estatistik ant gwoup yo anrapò ak varyab rezilta ak pèt potansyèl bèt pandan peryòd eksperimantal la. Anplis de sa, bay anpil faktè adisyonèl ki kapab afekte rezilta eksperimantal la, tankou pwosedi piki selil san siksè oswa potansyèl attrition kòm yon rezilta nan batay bèt, pwosedi piki yo te fèt sou senk bèt pou chak gwoup pou plis asire satisfè kantite minimòm ki nesesè pou analiz estatistik.

cistanche tubulosa-amelyore sistèm iminitè

Tablo 1 montre kat gwoup bèt yo prepare pou chak nan pwen kat fwa yo (4, 7, 14, ak 28 jou) kote yo ta dwe fè evalyasyon istopatoloji, ki gen ladan imunofluoresans. De gwoup adisyonèl bèt yo te enjekte ak 10ˆ6 gmRPCs entraperitonealman te prepare kòm kontwòl pozitif pou chak nan de pwen tan evalyasyon ELISPOT yo (14 ak 28 jou). Tablo 2 rezime evalyasyon yo pwograme pou chak gwoup.

Tablo 1. Gwoup eksperimantal.

Tablo 2. Pwen tan evalyasyon yo.

4.3. Piki intravitreyal

Yo te administre gmRPC yo atravè piki intravitreal. Yon fwa yo te anestezi, Mydriacyl (1% Tropicamide oftalmik solisyon) ak Phenylephrine (2.5% solisyon oftalmik) yo te aplike nan tou de je bèt la yo dwe enjekte. Lè yo te reyalize ase midriasis, yo te kenbe bèt la manyèlman epi tèt bèt la vire pou fè aliman aks okilè nan je yo dwe enjekte ak optik mikwoskòp chirijikal la pou yo ka wè segman dèyè okilè a (sa vle di, vitre ak retin) . Yo te pwopoze je a dousman manyèlman atravè presyon sou po je yo epi yo te itilize yon zegwi 31G sou yon sereng ensilin pou pèse tou dousman sklero a adjasan a limbus nan kadran nen enferyè a. Yon pwent mikropipèt vè poli ki gen selil donatè (oswa kontwòl machin) te avanse nan ensizyon an nan kavite vitreuz la anba vizyalizasyon dirèk. Yo te pran swen pou pa deranje entegrite lantiy la oswa estrikti segman dèyè yo. Selil yo oswa machin yo poukont yo te enjekte nan yon volim 1 mikrolit. Apre plizyè moman nan pran yon poz pou pèmèt ekilib presyon entraokilè, yo te retire pwent pipèt la piti piti nan je a, tout anba vizyalizasyon dirèk. Nenpòt senyen entraokilè te note, ansanm ak kote yo ye. Apre piki a, yo te mete bèt la nan yon kaj pwòp ki aliyen ak yon fre pad jetab oryante ak absorbant-side-up/plastic-side-down, refè. Rekiperasyon an te fasilite lè l sèvi avèk yon pad chofaj epi yo te verifye pa kapasite nan bèt la anbilans. Apre reveye, bèt la te transfere nan kaj apre operasyon an ak aksè ad libitum nan dlo. Bèt yo te vizyèlman kontwole sou yon baz chak jou apre operasyon. Yo te obsève siy minimòm oswa pa gen okenn siy ki gen rapò ak piki intraokilè.

Apre pwosedi a, yo te obsève bèt yo pou fwote je ki te opere a, fouri volan, oswa letaji soutni, tout sa yo te rezon pou etanazi imedya. Te gen de bèt sispann kòm yon rezilta nan blesi sibi nan batay. Tout lòt bèt yo te sispann nan pwen final yo te planifye. Etanazi te fèt atravè rale CO2.

4.4. Egzamen oftalmik

A Leica Ultimate Red Reflex Surgical Microscope was used for ophthalmic examination and photography of experimental mice. Sedation was performed with a Ketamine Hydrochloride/Xylazine Hydrochloride mixture (50–100 mg/mL Ketamine, 5–10 mg/mL Xylazine) administered by intraperitoneal injection. After sedation, topical mydriatics (Tropicamide, Phenylephrine) were applied to the eye(s) to be imaged in 5 min intervals until adequate mydriasis was achieved, as determined via pupil diameter (>2.5 mm) ak repons a eksitasyon limyè. Kòm konpansasyon pou pèt kliyote a, yo te aplike yon solisyon hypromellose (Gonak) lokalman jan sa nesesè nan tou de je yo pou anpeche desiccation korn. Pou pwosedi D ', bèt anestezi yo te mete sou yon pad chofaj epi yo te pozisyone nan koumbe sternal. Nan konklizyon an nan pwosedi a, yo te ranvèse pasyèl nan anestezi reyalize ak administrasyon nan Atipamezole (0.1-1 mg / kg) pa piki intraperitoneal.

4.5. Istopatoloji

Repons iminitè nan bèt ki resevwa de grèf sekans (yon sèl nan chak je) yo te evalye atravè istopatoloji nan tou de je nan jou 4, jou 7, jou 14, ak jou 28 ± 1 apre piki nan dezyèm je a. Sourit yo ki te trete dapre Tablo 1 yo te sispann dapre orè ki endike nan Tablo 2. Yo te elimine bèt yo lè l sèvi avèk rale gaz kabonik. Perfusion kadyak yo te fèt sou bèt eksperimantal yo ak 2% paraformaldehyde (PFA) nan saline fosfat-tanpon (PBS). Lè sa a, tout boul je yo te kolekte epi yo te pèmèt yo tranpe nan 2% PFA / PBS pou 48 èdtan nan 4 ◦C. Yo te trete boul je fiks yo atravè yon gradyan sikwoz (10% sikwoz nan PBS pou 1 èdtan nan tanperati chanm, 20% sikwoz nan PBS pou 1 èdtan nan tanperati chanm, ak 30% sikwoz nan PBS nan 4 ◦C lannwit lan) anvan yo te entegre nan. Medya OCT pou cryosectioning. Krioseksyon (10 µm) nan je yo te tache ak Harrison ematoksilin ak eozin (H&E) pou vizyalize mikwo-anatomi retin yo epi lokalize selil donatè yo sou fòm piki.

Pou gwoup ki trete gmRPC yo, yo te evalye cryosections lè l sèvi avèk imunofluoresans pou selil GFP + (donatè). Idantifikasyon kalite selil iminitè espesifik ki prezan nan je yo te fèt atravè etikèt ak antikò prensipal espesifik pou bagay sa yo: CD3 (T lenfosit makè) [35], CD45R (B lenfosit makè) [36], Iba -1 (aktive makrofaj ak makè mikroglia) [37], Ly-6G (marker netrofil) [38], ak CD49b (makè selil asasen natirèl) [39]. Cryosections yo te lave nan PBS twa fwa nan tanperati chanm ak bloke ak 0.03% Triton X{-100 ak 10% serom kabrit nòmal nan PBS (NGS; Jackson ImmunoResearch, West Grove, PA, USA) pou 1 h nan tanperati chanm. Rat anti-sourit CD3 (1:100 dilution, BD Biosciences, San Jose, CA, USA), rat anti-sourit CD45R (1:100, BD Biosciences, San Jose, CA, USA), lapen anti-sourit Iba{{ 26}} (1:400 dilution, Wako Chemicals, Richmond, VA, USA), rat anti-sourit Ly-6G (1:100 dilution, BD Biosciences, San Jose, CA, USA), ak rat anti -sourit CD49b (dilution 1:100, BD Biosciences, San Jose, CA, USA) yo te aplike nan echantiyon ak enkubasyon lannwit lan nan 4 degre. Echantiyon yo te lave ankò nan PBS 3 fwa nan tanperati chanm. Antikò segondè konjige Alexa-Fluor (kabrit anti-rat Alexa-Flour-568 ak kabrit anti-lapen Alexa-Flour-568, Life Technologies, Carlsbad, CA, USA) yo te aplike nan echantiyon pou 1 èdtan. nan tanperati chanm. Lè sa a, tout echantiyon yo te lave nan PBS yon lòt twa fwa nan tanperati chanm. Coverslips yo te monte lè l sèvi avèk DAPI Fluoromount-G (Southern Biotech, Birmingham, AL, USA), epi yo te kite glisad yo sèk lannwit lan nan tanperati chanm.

4.6. ELISPOT ak MLR Assays

Selil T memwa RPC-espesifik yo te kontwole nan 2 ak 4 semèn apre premye plasman grèf la atravè yon tès tach imunosorban ki lye ak anzim (ELISPOT). Gwoup eksperimantal yo te etabli jan yo montre nan Tablo 1 ak 2 pou chak pwen tan. Egzamen ELISPOT kaptire pwoteyin ki sekrete sou yon mikroplak antikò espesifik epi yo ka itilize pou detèmine aktivasyon selil T memwa lè yo detekte sekresyon IFN selil T. Lekti eksperimantal la se kantite tach IFN yo sou mikroplak la. Nimewo a nan tach IFN prezan se yon indication de kantite selil T yo te aktive. Yo te evalye frekans selil T aloreaktif yo lè yo fè yon reyaksyon leukosit melanje (MLR) 48 èdtan sou plak 96-byen Multiscreen-IP (Millipore, Burlington, MA, USA). Selil repons yo te lenfosit / splenosit ki gen selil T ki pirifye nan nœuds lenfatik nan kòl matris (CLNs) ak larat nan bèt eksperimantal yo, ak selil stimulateur yo te gmRPC yo orijinèlman sòti nan sourit C57BL / 6. Yo te fè tès ELISPOT yo ki baze sou pwotokòl estanda. 96-byen Plak Multiscreen-IP yo te pre-mouye ak 15 µL etanòl 35% pou chak pi nan kondisyon esteril. Plak yo te lave ak PBS esteril twa fwa anvan yo te aplike 100 µL nan antikò kaptire IFN (klonaj AN-18, eBioscience, San Diego, CA, USA) dilye nan PBS (2 µg/mL) sou plak yo. Plak yo te enkube lannwit lan nan 4 degre anvan tès MLR yo te pote sou plak yo. Plak yo te kouvri ak antikò kaptire yo te lave twa fwa ak PBS epi yo te bloke ak RPMI1640 pou 2 èdtan nan 37 ◦C.

Chak nan plak tès yo enkli kontwòl sa yo: pwi ki pa gen selil, pwi ki gen selil yo san eksitasyon, ak pwi ki gen selil yo ak tretman phorbol {{0}}miristat 13-acetate (PMA) ak Ca ionophore kòm kontwòl pozitif. Tretman PMA sèvi kòm yon kontwòl pozitif nan imite dezyèm mesaje a, DAG, aktive chemen an reseptè selil T ak nan vire lakòz deklanchman selil T, ak Ca ionophore fasilite antre nan iyon kalsyòm nan selil yo. Plak yo te enkube pou 36 èdtan nan 37 ◦C anvan reyaksyon koulè a. Plak yo te lave ak PBS ki gen {{10}}.{01% Tween 20 sis fwa epi answit 100 µL antikò deteksyon (klonaj R64A2, eBioscience, San Diego, CA, USA), dilye. nan PBS (0.5 µg/mL) te aplike nan chak pi. Plak yo te enkube a 37 ◦C pou yon lòt 2 èdtan. Plak yo te lave ankò ak 0.01% Tween 20 nan PBS. Yo te aplike 100 µL Streptavidin-AP (1:1000 dilution, Invitrogen) pou chak pi epi yo te enkube plak yo pou 45 minit nan tanperati chanm. Tout plak yo te lave twa fwa ankò ak 0.01% Tween 20 nan PBS ak PBS pou kont li pou yon lòt twa fwa. Finalman, 100 µL BCIP/NBT (Sigma Aldrich, Minik, Almay) te ajoute nan chak pi pou kolorasyon. Tout plak yo te lave anpil ak dlo tiyo epi yo seche anvan analiz done yo.

cistanche tubulosa-amelyore sistèm iminitè

5. Konklizyon

Etid sa a montre ke grèf binokilè sekans nan RPC alojenik nan kavite vitreuz la pa pwovoke rejè iminitè klasik nan sourit la. Pandan ke yo rekonèt ke etid alojenik sa yo pa t 'kapab fèt ak pwodwi klinik RPC imen, done yo parèt ki konsistan avèk rezilta yo nan yon etid sekirite klinik (jCyte, JC-01E, done ki pa pibliye) kote pasyan ki gen retinit. pigmentosa te resevwa piki bilateral ki pa kontanporen san tretman imunosuppressive. Pandan ke li difisil pou konpare de etid yo dirèkteman, li enpòtan pou remake ke rezilta yo an jeneral nan tou de te montre resanblans an tèm de siviv allograft.

Referans

1. Hori, J.; Ng, TF; Shatos, M.; Klassen, H.; Streilein, JW; Young, MJ Neural selil progenitor manke iminojenisite ak reziste destriksyon kòm allografts. Stem Cells 2003, 21, 405–416. [CrossRef] [PubMed]

2. Klassen, H.; Schwartz, PH; Ziaeian, B.; Nethercott, H.; Young, MJ; Bragadottir, R.; Tullis, GE; Warfvinge, K.; Narfstrom, K. Précurseurs neral izole nan sèvo chat devlope montre entegrasyon retin apre transplantasyon nan retin chat distrofik la. Veterinè. Oftalmol. 2007, 10, 245–253. [CrossRef] [PubMed]

3. Salado-Manzano, C.; Perpina, U.; Straccia, M.; Molina-Ruiz, FJ; Cozzi, E.; Rosser, AE; Canals, JM Èske repons iminolojik la se yon pwoblèm pou terapi selilè nan maladi newodejeneratif? Devan. Neurosci selil. 2020, 14, 250. [CrossRef]

4. Petrus-Reurer, S.; Romano, M.; Howlett, S.; Jones, JL; Lombardi, G.; Saeb-Parsy, K. Konsiderasyon imunolojik ak defi pou terapi rejeneratif selilè. Komin. Biol. 2021, 4, 798. [CrossRef]

5. Bucher, K.; Rodriguez-Bocanegra, E.; Dauletbekov, D.; Fischer, MD Repons iminitè nan terapi jèn retin lè l sèvi avèk ade pa gen okenn vektè viral ki asosye-Enplikasyon pou siksè tretman ak sekirite. Pwog. Retin. Je Res. 2021, 83, 100915. [CrossRef]

6. Singh, MS; Park, SS; Albini, TA; Canto-Soler, MV; Klassen, H.; MacLaren, RE; Takahashi, M.; Nagiel, A.; Schwartz, SD; Bharti, K. transplantasyon selil souch retin: Balanse sekirite ak potansyèl. Pwog. Retin. Je Res. 2020, 75, 100779. [CrossRef]

7. Kamao, H.; Mandai, M.; Okamoto, S.; Sakai, N.; Suga, A.; Sugita, S.; Kiryu, J.; Takahashi, M. Karakterizasyon moun ki pwovoke pluripotent souch selil ki sòti nan retin pigman epithelium fèy selil ki vize pou aplikasyon klinik. Rep. Selil Stem 2014, 2, 205–218. [CrossRef]

8. Sugita, S.; Kamao, H.; Iwasaki, Y.; Okamoto, S.; Hashiguchi, T.; Iseki, K.; Hayashi, N.; Mandai, M.; Takahashi, M. Anpèchman nan aktivasyon T-selil pa selil epitelyal pigman retin ki sòti nan selil souch pluripotent pwovoke. Investig. Oftalmol. Vis. Sci. 2015, 56, 1051–1062. [CrossRef]

9. McGill, TJ; Stoddard, J.; Renner, LM; Messaoudi, I.; Bharti, K.; Mitalipov, S.; Lauer, A.; Wilson, DJ; Neuringer, M. Allogeneic iPSC-Derived RPE Gref Selil Echèk Apre Transplantasyon Nan Espas Subretinal nan Primates NonHuman. Investig. Oftalmol. Vis. Sci. 2018, 59, 1374–1383. [CrossRef]

10. Sugita, S.; Mandai, M.; Kamao, H.; Takahashi, M. Aspè imunolojik nan transplantasyon selil RPE. Pwog. Retin. Je Res. 2021, 84, 100950. [CrossRef]

11. Nair, DSR; Thomas, BB Estrateji tretman ki baze sou selil souch pou maladi dejeneratif retin lan. Curr. Stem Cell Res. La. 2022, 17, 214–225. [CrossRef] [PubMed]

12. Martinez Velazquez, LA; Ballios, BG Pwochen Jenerasyon Molekilè ak Selilè Terapi pou Maladi Retin Eritye. Ent. J. Mol. Sci. 2021, 22, 11542. [CrossRef]

13. Liu, Y.; Chen, SJ; Li, SY; Qu, LH; Meng, XH; Wang, Y.; Xu, HW; Liang, ZQ; Yin, ZQ Sekirite alontèm nan transplantasyon selil retin progenitor imen nan pasyan retinit pigmentosa. Stem Cell Res. La. 2017, 8, 209. [CrossRef] [PubMed]

14. Wang, Y.; Tang, Z.; Gu, P. Tij / progenitor transplantasyon selil ki baze sou pou koripsyon retin: Yon revizyon nan esè klinik. Lanmò selil Dis. 2020, 11, 793. [CrossRef] [PubMed]

15. Alman, OL; Vallese-Maurizi, H.; Soto, TB; Rotstein, NP; Politi, LE Retina selil souch, espwa ak obstak. World J. Stem Cells 2021, 13, 1446–1479. [CrossRef]

16. Karamali, F.; Behtaj, S.; Babaei-Abraki, S.; Hadady, H.; Atefi, A.; Savoj, S.; Soroushzadeh, S.; Najafian, S.; Nasr Esfahani, MH; Klassen, H. Estrateji potansyèl terapetik pou koripsyon fotoreseptè: chemen an retabli vizyon. J. Transl. Med. 2022, 20, 572. [CrossRef]

17. Semo, M.; Haamedi, N.; Stevanato, L.; Carter, D.; Brooke, G.; Young, M.; Coffey, P.; Sinden, J.; Patel, S.; Vugler, A. Efikasite ak Sekirite Selil Progenitor Retin Imèn. Transl. Vis. Sci. Teknoloji. 2016, 5, 6. [CrossRef]

18. Mochizuki, M.; Sugita, S.; Kamoi, K. omeyostazi imunolojik nan je a. Pwog. Retin. Je Res. 2013, 33, 10–27. [CrossRef]

19. Yamasaki, S.; Sugita, S.; Horiuchi, M.; Masuda, T.; Fujii, S.; Makabe, K.; Kawasaki, A.; Hayashi, T.; Kuwahara, A.; Kishino, A.; et al. Iminojenisite ki ba ak pwopriyete imunosuppressive nan retin imen ESC ak iPSC ki sòti. Rep. Selil Stem 2021, 16, 851–867. [CrossRef]

20. Klassen, H.; Schwartz, MR; Bailey, AH; Young, MJ Surface makè ki eksprime pa miltipotan imen ak sourit selil progenitor neral gen ladan tetraspanin ak epitop ki pa pwoteyin. Neurosci. Lett. 2001, 312, 180–182. [CrossRef]

21. Klassen, H.; Ziaeian, B.; Kirov, II; Young, MJ; Schwartz, PH Izolasyon selil retin yo nan tisi imen post-mortem ak konparezon ak pitit pitit otològ nan sèvo. J. Neurosci. Res. 2004, 77, 334–343. [CrossRef]

22. Ingulli, E. Mekanis rejè selilè nan transplantasyon. Pedyatr. Nefròl. 2010, 25, 61–74. [CrossRef]

23. Issa, F.; Schiopu, A.; Wood, KJ Wòl selil T nan rejè grèf ak tolerans transplantasyon. Ekspè Rev Clin. Imunol. 2010, 6, 155–169. [CrossRef] [PubMed]

24. Nasr, M.; Sigdel, T.; Sarwal, M. Avans nan dyagnostik pou rejè transplantasyon. Ekspè Rev Mol. Dyagnostik. 2016, 16, 1121–1132. [CrossRef] [PubMed]

25. Klassen, H.; Imfeld, KL; Ray, J.; Young, MJ; Gage, FH; Berman, MA Pwopriyete iminolojik selil ipokanp granmoun yo. Vis. Res. 2003, 43, 947–956. [CrossRef] [PubMed]

26. Weinger, JG; Weist, BM; Plaisted, WC; Klaus, SM; Walsh, CM; Lane, TE MHC dezekilib rezilta nan rejè selil progenitor neral apre transplantasyon mwal epinyè nan yon modèl demyelinasyon viral-induit. Stem Cells 2012, 30, 2584–2595. [CrossRef] [PubMed]

27. ReNeuron, L. Premye nan faz imen I/IIa, Open-Label, Etid Pwospektiv sou Sekirite ak Tolerabilite nan Subretinally Transplanted Moun Retin Progenitor Cells (hRPC) nan Pasyan ki gen Retinitis Pigmentosa (RP). Esè klinik # NCT02464436. Disponib sou Entènèt: https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT02464436 (aksede sou 27 fevriye 2023).

28. Lu, B.; Lin, Y.; Tsai, Y.; Giman, S.; Adamus, G.; Jones, MK; Shelley, B.; Svendsen, CN; Wang, S. Yon transplantasyon progenitor neral imen ki vin apre nan retin dejenere pa konpwomèt siviv inisyal grèf oswa efikasite terapetik. Transl. Vis. Sci. Teknoloji. 2015, 4, 7. [CrossRef] [PubMed]

29. Jones, MK; Lu, B.; Giman, S.; Wang, S. Selil ki baze sou estrateji terapetik pou ranplasman ak prezèvasyon nan maladi dejeneratif retin. Pwog. Retin. Je Res. 2017, 58, 1–27. [CrossRef] [PubMed]

30. Bell, BA; Kaul, C.; Bonilha, VL; Rayborn, ME; Shadrach, K.; Hollyfield, JG Sourit BALB/c a: Efè ekleraj vivarium estanda sou patoloji retin pandan aje. Eksp. Je Res. 2015, 135, 192–205. [CrossRef]

31. Klassen, HJ; Ng, TF; Kurimoto, Y.; Kirov, mwen; Shatos, M.; Coffey, P.; Young, MJ Multipotent retin progenitors eksprime makè devlopman, diferansye nan newòn retin, ak prezève konpòtman limyè medyatè. Investig. Oftalmol. Vis. Sci. 2004, 45, 4167–4173. [CrossRef]

32. jCyte, Inc. Sekirite yon sèl, Intravitreal piki nan selil progenitor retin imen (jCell) nan retinit pigmentosa. Esè klinik # NCT02320812. Disponib sou Entènèt: https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT02320812 (aksede sou 24 fevriye 2023).

33. jCyte, Inc. Sekirite ak Efikasite nan Enjeksyon Entravitreyal nan Selil Progenitor Retin Imèn nan Adilt ak Retinitis Pigmentosa. Esè klinik # NCT03073733. Disponib sou Entènèt: https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT03073733 (aksede sou 24 fevriye 2023).

34. jCyte, Inc. Sekirite Repete Enjeksyon Entravitreyal Selil Progenitor Retin Imèn (selil) nan Sijè Adilt ki gen Retinitis Pigmentosa. Esè klinik # NCT04604899. Disponib sou Entènèt: https://clinicaltrials.gov/ct2/show/NCT04604899 (aksede sou 24 fevriye 2023).

35. Oudejans, JJ; van der Valk, P. Immunohistochemical klasifikasyon nan selil T ak neoplasm selil NK. J. Clin. Patòl. 2002, 55, 892. [CrossRef] [PubMed]

36. Tostanoski, LH; Chiu, YC; Gammon, JM; Simon, T.; Andorko, JI; Bromberg, JS; Jewell, CM Repwogram Mikwo-anviwònman lokal lenfatik la ankouraje tolerans ki se sistemik ak antijèn espesifik. Rep. selil 2016, 16, 2940–2952. [CrossRef] [PubMed]

37. Jurga, AM; Paleczna, M.; Kuter, KZ Apèsi sou Jeneral ak Diskriminasyon Makè nan Fenotip Mikroglia Diferans. Devan. Neurosci selil. 2020, 14, 198. [CrossRef] [PubMed]

38. Li, JC; Zou, XM; Yang, SF; Jin, JQ; Zhu, L.; Li, CJ; Yang, H.; Zhang, AG; Zhao, TQ; Chen, CY pyèj ekstraselilè Neutrophil patisipe nan devlopman tronboz ki asosye ak kansè nan pasyan ki gen kansè nan gastric. Mondyal J. Gastroenterol. 2022, 28, 3132–3149. [CrossRef]

39. Kee, BL Devlopman Selil Asasen Natirèl ak ILC1. Encycl. Immunobiol. 2016, 1, 140–148.