REZIME

Objektif:Maclura pomifera (Rafin.) Schneider se yon espès toupatou nan mond lan, ki souvan kiltive tou pou rezon dekoratif. Etid anvan yo te revele ke M. pomifera fwi yo rich nan izoflavonoid prenylated, montre aktivite byolojik enpòtan pou remake, epi yo gen benefis pwobab, patikilyèman, lè yo aplike lokalman. Lè ou konsidere ke konpoze fenolik yo se sous esansyèl nan devlopman nan pwodwi kosmetik anti-aje, etid sa a te envestige potansyèl anti-aje M. pomifera 80 pousan ekstrè metanolik (MPM) pa evalye antioksidan ak anzim matrice-degradasyon ekstraselilè anpeche aktivite.

Glycoside nan cistanche ka ogmante tou aktivite SOD nan kè ak tisi fwa, ak siyifikativman redwi kontni an nan lipofuscin ak MDA nan chak tisi, efektivman scavenging divès kalite radikal oksijèn reyaktif (OH-, H₂O₂, elatriye) ak pwoteje kont domaj ADN ki te koze. pa OH-radikal. Cistanche phenylethanoid glikozid gen yon gwo kapasite scavenging nan radikal gratis, yon pi wo kapasite diminye pase vitamin C, amelyore aktivite a nan SOD nan sispansyon espèm, redwi kontni an nan MDA, epi yo gen yon sèten efè pwoteksyon sou fonksyon manbràn espèm. Cistanche polisakarid ka amelyore aktivite SOD ak GSH-Px nan eritrosit ak tisi nan poumon sourit eksperimantal senesan ki te koze pa D-galaktoz, osi byen ke diminye kontni an nan MDA ak kolagen an nan poumon ak plasma, ak ogmante kontni an nan elastin, gen yon bon efè scavenging sou DPPH, pwolonje tan an nan ipoksi nan sourit senesan, amelyore aktivite a nan SOD nan serom, ak retade koripsyon fizyolojik nan poumon nan sourit senesan eksperimantal Avèk koripsyon selilè mòfolojik, eksperyans yo te montre ke Cistanche gen bon kapasite antioksidan. epi li gen potansyèl pou yo dwe yon dwòg pou anpeche ak trete maladi po aje. An menm tan an, echinacoside nan Cistanche gen yon kapasite enpòtan pou elimine radikal gratis DPPH epi li gen kapasite pou elimine espès oksijèn reyaktif epi anpeche degradasyon kolagen an radikal gratis, epi tou li gen yon efè reparasyon bon sou domaj anyon radikal gratis timin.

Klike sou Cistanche Tubulosa Supplement

【Pou plis enfòmasyon:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】

Materyèl ak metòd:Pou etid sa a, yo te evalye potansyèl inhibitor 80 pousan MPM kont diferan anzim ki asosye ak pwosesis aje. Bay wòl inekivok estrès oksidatif nan aje, tès antioksidan an vitro yo te anplwaye tou. Anplis, osajin te detèmine kòm pi gwo izoflavonoid bioaktif nan echantiyon an pa analiz segondè-pèfòmans mens-kouch kromatografi.

Rezilta:Rezilta tès yo mekanikman diferan antioksidan ekspoze potansyèl antioksidan enpòtan nan ekstrè a. Yo te envestige potansyèl anpèchman MPM kont hyaluronidase, kolagenaz, ak anzim elastaz, ki dirèkteman lye ak akselerasyon pwosesis aje a, ak rezilta yo te revele ke MPM inibit anzim ki anwo yo klèman. MPM te gen inik kontni fenolik ak flavonoid; 113.92 ± 2.26 mg asid galik ekivalan/g ak 66.41 ± 0.74 mg QE/g, respektivman. Lè yo te konsidere analiz total de kapasite antioksidan, li posib pou sijere ke MPM se yon ajan anti-aje pwomèt.

Konklizyon:Kòm yon rezilta, etid sa a divilge ke ekstrè nan fwi nan M. pomifera gen gwo potansyèl anti-aje epi yo ka itilize pou objektif sa a.

Mo kle:Maclura pomifera, anti-aje, antioksidan, HPTLC, osajin

ENTWODIKSYON

Menm jan an tou, tout ògàn yo, ki gen ladan po moun sibi divès chanjman fizyolojik ak laj avanse.1 De klas aje egziste: aje intrinsèques kontwole pa jenetik ak aje ekstèn se rezilta natirèl modifikasyon fizyolojik akòz efè domaj nan faktè anviwònman tankou iltravyolèt (UV). ) radyasyon, toksin chimik, ak fimen.1,2 Degradasyon estrikti vaskilè ak glandulè, pèt tisi fib, ak diminye rejenerasyon selilè yo se faktè fondamantal nan aje,3 ki mennen nan ogmantasyon nan koripsyon tisi, ondilasyon, ak diminye nan matris ekstraselilè (ECM). ).4

Kòm pi gwo ògàn nan, po a gen plizyè wòl tankou pwoteksyon, règleman nan tanperati kò a, ak deteksyon nan sans yo. anviwònman.6,7 ECM se pi gwo inite dèrm la epi li sipòte kwasans ak elastisite lè li prezante yon echafodaj estriktirèl.8 Kolagen, elastin, ak fibronectin, ki fòme pa fibroblasts po, konstitye ECM epi yo fusion ak proteoglycans.5 Kolagen se yon pwoteyin debaz ki gen apeprè 25-35 pousan nan tout kontni pwoteyin nan kò a epi li jwenn nan espas ekstraselilè divès kalite tisi konjonktif bèt yo.3 Youn nan pi gwo kòz aje po ak fòmasyon rid se chanjman kolagen an. estrikti.1 Elastin se yon pwoteyin, ki bay yon elastisite fizyolojik inik nan po a epi li prezan nan plizyè tisi konjonktif.6 Idratasyon po a, ak kenbe po a lis, imid, ak wile se faktè enpòtan ki anpeche po aje, ak yon gwo. glycosaminoglycan (GAG), asid hyaluronik, jwe yon wòl enpòtan anpil nan aktivite sa yo.8 Konstitiyan esansyèl sa yo degrade pa hyaluronidase, kolagenaz, ak anzim elastaz, kidonk, ki mennen nan yon akselerasyon aje po. Anplis, ekspoze a mikwo-òganis, polisyon, radyasyon ionize, pwodui chimik, ak toksin mennen nan fòmasyon nan espès oksijèn reyaktif (ROS) epi li se konsekans danjere akselere aje po a.9 ROS ka kòmanse wout molekilè konplèks ak kòm yon rezilta, kolagenaz, elastase , ak aktivite hyaluronidase ka ogmante, ki mennen nan detekte pann ECM ak modifikasyon teksti po.10 Pou rezon ki mansyone, nouvo ajan natirèl, ki diminye fòmasyon ROS ak anpeche ECM degrade proteaz yo, ka retade pwosesis la po-aje.11

Maclura pomifera (Rafin.) Schneider fè pati Moraceae oswa fanmi an sikomò epi li ke yo rele tou pye bwa zoranj osage, kiltive prèske atravè lemond.12 M. pomifera gen plizyè aktivite byolojik tankou anti-bakteri, antifonjik, antiviral, sitotoksik, antitumor, estwojèn, ak antimalaryal13 akòz izoflavon prenyl li yo, sa vle di osajin ak pomiferin, ki konsidere kòm pi gwo metabolit nan fwi yo.14 Nan pwodiksyon kosmetik anti-aje, konpoze fenolik yo se sous natirèl enpòtan. Kidonk, gen yon enterè k ap grandi nan etidye plant ki rich nan konpoze fenolik tankou M. pomifera pou aktivite sa yo. Etid anvan yo te jwenn ke izoflavon nan Maclura ogmante nivo ekspresyon nan kolagen an, elastin, ak fibrilin konparab oswa siperyè konsantrasyon ekivalan nan retinol. Pakonsekan, li ka sipoze ke Maclura isoflavones se pisan ECM pwoteyin stimulants.15 Lè nou konsidere done sa yo, etid sa a gen pou objaktif pou mennen ankèt sou potansyèl anti-aje M. pomifera 80 pousan ekstrè metanolik (MPM) nan eksplore potansyèl li pou byoaktivite antioksidan ak anpeche. ECM degrade anzim. Anplis de sa, analiz quantitative nan pi gwo eleman byoaktif ekstrè a, osajin te mezire pa wo-pèfòmans kouch mens kromatografi (HPTLC), ak total kontni fenolik ak total flavonoid kontni analiz yo te fèt pou yon konpreyansyon pi egzak nan pwofil la fenolik. Rezilta yo montre ke M. pomifera ta ka yon sous valab nan pwodwi anti-aje.

MATERYÈL AK METÒD

Pwodwi chimik yo

Sigma Chemical Co. (St. Louis, MO, USA) te bay tout anzim yo, pwodwi chimik yo, ak referans yo anplwaye nan tès yo. Bon jan kalite a nan tout pwodwi chimik yo te nan klas analyse.

Materyèl plant

Fwi M. pomifera yo te ranmase nan Uşak, Türkiye, nan mwa me 2020. Dr Hilal Bardakcı te fè pwosedi idantifikasyon botanik echantiyon plant yo. Yon echantiyon bon nan plant la te depoze nan Acıbadem University, Herbarium nan Fakilte Famasi (ACUPH 00002).

Preparasyon nan ekstrè

Fwi yo te separe an ti moso epi yo pase nan yon blenndè. Fwi yo (6.45 kg) yo te masere ak 3125 mL 80 pousan metanol (MeOH) lè l sèvi avèk yon aparèy souke pandan twa jou nan tanperati chanm nan yon kote ki fè nwa. Yo te filtre masere a epi yo te repete pwosedi sa a de fwa. Filtrate yo jwenn yo te rasanble ansanm epi, Lè sa a, metanol te evapore nan yon evaporator rotary. Ekstrè metanolik brit la te lyofilize (sede a te 204.37 g, 3.16 pousan) epi estoke nan -20 degre (MPM).

Pwosedi quantifikasyon nan pi gwo konpoze bioaktif pa HPTLC

Tout pwodui chimik ak reyaktif yo te itilize yo te nan klas analyse. Chloroform (CHCl3) ak acetate etil (EtOAc) te achte nan men Sigma-Aldrich. Yo te achte yon estanda osajin ki disponib nan komès nan Sigma-Aldrich (SMB {{10}}0092). Analiz HPTLC yo te fèt sou 20 cm × 10 cm vè HPTLC silica jèl 60 F254 plak (Merck, Darmstadt, Almay). Kontni Osajin nan MPM te detèmine pa yon sistèm analyse CAMAG HPTLC. Faz mobil yo itilize nan etid aktyèl la te deja dekri pa Bozkurt et al.16 pandan izòlman prensip aktif M. pomifera. Yo te itilize 10 mg / mL ekstrè MeOH kòm solisyon tès analiz la. Yo te prepare yon solisyon stock estanda (0.5 mg/mL) osajin lè l sèvi avèk 2 mL asetòn. Yon solisyon k ap travay ak yon konsantrasyon 50 µg/mL nan konpoze estanda te prepare pa dilution ak asetòn nan solisyon an stock. Yo te filtre chak echantiyon atravè yon filtè sereng 0.45 µm. 10 μL nan ekstrè a ansanm ak omwen senk konsantrasyon diferan nan solisyon an estanda (3.3-4.7 μL) yo te aplike nan fòm lan nan bann 8 mm longè sou silica jèl vè HPTLC plak 60 F254 ak CAMAG otomatik. TLC Sampler IV. Devlopman yo te fèt nan Chanm Devlopman Otomatik CAMAG-2 (ADC- 2) ak faz mobil lan te CHCl3: EtOAc [8:2 (v/v)]. Chanm te satire pou 10 minit ak plak la te prekondisyone pou 5 minit anvan devlopman an. Imidite te kontwole pa ADC-2 lè l sèvi avèk MgCl2 (33 pousan RH) pou 10 min. Evalyasyon densitometrik la te fèt lè l sèvi avèk yon eskanè CAMAG TLC IV nan mòd fluoresans. Dimansyon fant la te kenbe nan 5 × 0.2 mm, mikwo, ak vitès la optik te mete nan 20 mm / s. Kontni estanda yo te jwenn lè w konpare zòn ki anba reseptè a fonksyone karakteristik koub (AUCs) ak koub kalibrasyon estanda nan 280 nm. Prezans nan estanda nan ekstrè a te asire pa konparezon an nan tou de faktè retansyon (Rf) ak kouvri spectre UV nan chak ekstrè ak estanda. Kantite osajin te detèmine pa konparezon entansite limyè ki reflete difize soti nan ekstrè a ak fraksyon ak konpoze estanda a.

Kontni Osajin nan ekstrè plant brit te mezire lè l sèvi avèk HPTLC-densitometri. Yo te jwenn valè Rf estanda osajin la se 0.556. Ensidan an nan osajin nan echantiyon tès yo te verifye pa konparezon nan valè Rf yo ak sipèpoze spectre UV yo (Figi 1). Kantifikasyon te bay lè w konpare AUC echantiyon yo ak koub kalibrasyon yo te jwenn lè l sèvi avèk osajin konpoze estanda a. Fonksyon kalibrasyon an te y=2.268*10-8x. Koefisyan korelasyon (R) ak koyefisyan varyasyon fonksyon kalibrasyon an te 0.998 pousan ak 1.06 pousan, respektivman. Analiz HPTLC te montre ke MPM gen 0.22 pousan (w/w) osajin. Rezilta etid HPTLC yo bay nan Tablo 1.

Esè pwofil fenolik

Total esè kontni fenolik

Yo te fè tès la pou evalye kontni fenolik total echantiyon yo pa metòd Folin-Ciocalteu a, jan Kurt-Celep et al te itilize te deja. 17 20 μL nan solisyon echantiyon frèch dilye yo te melanje ak 75 μL Na2 CO3 (20 pousan). ), ak 100 μL FCR (reyaktif Folin-Ciocalteu) dilye ak H2 O (1:9). Apre enkubasyon pou 30 minit nan 45 degre, absòbe melanj yo te li espektrofotometrik nan 765 nm. Rezilta yo te eksprime kòm mg ekivalan asid galik (GAE) pou chak g ekstrè.

Total tès kontni flavonoid

Mezi total flavonoid sa ki nan fraksyon yo te fè kòm yon metòd deja rapòte pa Bardakci et al.18 Brèf, frèch prepare 1 M CH3 COONa ak 10 pousan AlCl3 yo te melanje ak echantiyon yo. Lè sa a, 30 min nan enkubasyon nan melanj yo te fèt nan tanperati chanm ak nan fè nwa a. Apre pwosesis enkubasyon an, yo te kalkile absorbans nan 415 nm. Rezilta yo te deklare kòm ekivalan mg quercetin (QE) nan 1 g echantiyon.

Detèminasyon nan aktivite antioksidan in vitro

2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH) tès aktivite radikal scavenging

Pou detèmine aktivite DPPH radikal scavenging, yon konbinezon de solisyon echantiyon frèch dilye (divès konsantrasyon prepare soti nan 1 mg / mL solisyon stock) ak solisyon metanolik DPPH (100 mM). Apre entèval enkubasyon nan tanperati chanm pou 45 min, yo te li absòbe a nan 517 nm. Butylated hydroxytoluene (BHT) te itilize kòm yon konpoze referans pou jwenn yon koub kalibrasyon. Valè IC50 rezilta yo te deklare kòm µg/mL.19

Tès Ferrik diminye pouvwa antioksidan (FRAP).

Pou jwenn reyaktif FRAP, 25 mL tanpon acetate 300 mM (pH 3.6), 2.5 mL TPTZ [2,4,6-tris (2-piridil)-s-triazine] , ak 2.5 mL FeCl3 .6H2 O (20 mM) yo te melanje. Apre sa, yo te ajoute 10 mL echantiyon an nan 260 mL reyaktif FRAP epi dilye nan 300 mL ak dlo distile nan yon plak 96 byen. Apre enkubasyon pou 30 minit nan 37 degre, yo te fè mezi absorpsyon nan 593 nm. BHT te itilize kòm yon konpoze referans. Solisyon klori fèr (0.252 mM) te itilize pou jwenn yon koub estanda ak rezilta yo te bay kòm mM FeSO4 nan 1 g ekstrè sèk.20

Tès kapasite antioksidan cuprik-diminye (CUPRAC).

Tès CUPRAC la te estime dapre metòd ki dekri anvan Barak et al.21 Yo te melanje volim egal 10 mM CuSO4, neocupraine, ak tanpon acetate amonyòm (85 mL) nan yon plak 96-byen. Apre sa, 51 mL dlo distile ak 43 mL solisyon echantiyon yo te ajoute nan melanj la, respektivman. Apre enkubasyon pou 20 minit, yo te li absòbe a nan 450 nm. Rezilta yo te deklare kòm mg asid ascorbic ekivalan nan 1 g ekstrè sèk.

Detèminasyon tès kapasite total antioksidan (TOAC).

Tès total kapasite antioksidan te kalkile dapre metòd fosfomolybdenum eksplike pi bonè pa Barak et al.22 Premyèman, jwenn solisyon TOAC; 28 mM fosfat sodyòm monobazik, 4 mM molybdat amonyòm ak 600 mM H2 SO4 yo te melanje. Lè sa a, 300 µL solisyon TOAC te melanje ak 30 µL solisyon echantiyon nan yon plak 96 an sante. Apre peryòd enkubasyon nan 95 degre pou 90 min, yo te li absòbe a nan 695 nm. Yo te itilize asid ascorbic pou jwenn yon koub estanda ak rezilta yo te kalkile kòm ekivalan mg Trolox nan 1 g ekstrè sèk.

Aktivite inhibition sou anzim po ki gen rapò ak aje

Aktivite anti-kolagenaz

Pou mezire aktivite anti-kolagenaz MPM, yo te prepare yon solisyon tanpon tricine 50 mM (pH: 7.5) (400 mM NaCl ak 10 mM CaCl2). Clostridium histolyticum (ChC - EC. 3.4.23.3) te itilize kòm sous la nan kolagenaz, ki te fonn nan solisyon an tanpon 50 mM tricine reyalize yon konsantrasyon inisyal nan 0.8 U / mL. 2 mM N-[3-(2-furyl) acryloyl]-Leu-Gly-Pro-Ala (FALGPA) ki fonn nan tanpon tricine yo te itilize kòm substra. Ekstrè yo te enkube ak anzim kolagenaz nan yon solisyon tanpon pou 15 minit anvan yo ajoute substra a kòmanse reyaksyon an. Melanj reyaksyon final la te gen yon volim total de 150 µL; tanpon tricine, 0.8 mM FALGPA, 0.1 inite ChC, ak 25 μL MPM. Yo te itilize dlo pou rezilta vid yo. Apre adisyon a nan substra a, yo te fè mezi a nan absòbe imedyatman. Kontwòl pozitif te fè epigallocatechin gallate (EGCG).23

Aktivite anti-elastaz

Evalyasyon MPM pou aktivite anti-elastaz te fèt lè l sèvi avèk solisyon tanpon 0.2 mM Tris-HCl (pH: 8.0). Yo te prepare yon solisyon stock nan elastase (PE, EC 3.4.21.36) ki te jwenn nan pankreyas porsin ak dlo distile nan yon konsantrasyon 3.33 mg/mL. N-Succinyl-Ala-Ala-p-nitroanilide (AAAPVN) yo dwe itilize kòm substra te fonn nan yon solisyon tanpon (1.6 mM). Ekstrè MPM te enkube ak 1 µg/mL PE pou 15 min nan 37 degre anvan adisyon substra. Nan fen 15 min pre-enkubasyon, 0.8 mM AAAPVN substra te ajoute nan melanj anzim ki gen 1 mg/mL ekstrè plant, epi yo te fè enkubasyon ankò pou 15 min nan 37 degre. Pandan w ap itilize 0.25 mg/mL EGCG kòm yon kontwòl pozitif, echantiyon tès sa a gen menm volim EGCG olye de MPM, epi konfigirasyon tès la te repete. Apre peryòd enkubasyon yo, yo te pran mezi nan 4 pwen tan diferan pou 5 a 30 minit pa Thermo Scientific Multiskan SkyHigh Microplate Spectrophotometer nan eksitasyon 365 nm ak emisyon 410 nm.24, 25

Aktivite anti-hyaluronidase

Aktivite anti-hyaluronidase la te fèt pa modifye metòd ki dekri pa Kolayli et al.26 ak Lee et al.3 Pwemyeman, hyaluronidase komèsyal-achte a (EC 3.2.1.35, Sigma-Aldrich) te fonn nan 0. 0Tanpon fosfat 2 M (pH: 3.5) ki gen NaCl ak albumin serom bovin. Lè sa a, asid hyaluronik, yon substrate apwopriye nan anzim la, te prepare nan tanpon acetate (0.1 M, pH: 3.5) epi li te fè pare pou itilize. Melanj tès la ki gen 20 µL MPM nan yon konsantrasyon 1 mg/mL, 10 µL hyaluronidaz, ak 60 µL tanpon acetate 0.1 M te pre-enkube pou 20 min nan 37 degre. Apre tan enkubasyon an, yo te ajoute 10 µL asid hyaluronik nan melanj lan epi enkubasyon ankò nan 37 degre pou 20 min. Nan fen tan total enkubasyon an, mezi yo te fè nan diferan moman pa Thermo Scientific Multiskan SkyHigh Microplate Spectrophotometer nan 600 nm. Gwoup la vid pa t 'gen ladan anzim nan konfigirasyon an eksperimantal, pandan y ap gwoup la kontwòl pa t' gen ekstrè a. Pousantaj aktivite anti-hyaluronidase te kalkile lè l sèvi avèk ekwasyon sa a:

Aktivite anti-aje (pousan)= [(Abs kontwòl - Abs echantiyon)/ Abs kontwòl] × 100

Analiz estatistik

Eksperyans aktivite anti-elastaz, anti-kolagenaz, ak anti-hyaluronidase ki enkli nan etid sa a te repete twa fwa poukont yo. Diferans estatistik yo te analize lè l sèvi avèk t-tès lojisyèl GraphPad Prism 8 la (p mwens pase oswa egal a 0.05).

REZILTA AK DISKISYON

Detèminasyon potansyèl anti-aje

Elastin, kolagen an, ak asid hyaluronik yo konnen sa ki nan ECM, ki gen wòl esansyèl nan aparans la jèn nan po a. Elastin se yon pwoteyin enpòtan anpil pou kenbe pwopriyete elastik po a, kidonk, diminye elastin nan ECM mennen nan akselerasyon nan pwosesis la aje.27 Literati anvan yo endike lyen dirèk ant ondilasyon ak aje nan po a ak bese kantite elastin. Asid hyaluronik se yon molekil GAG idrofob, ki depolymerize atravè hyaluronidaz. Asid yaluronik enpòtan pou kenbe po a lis ak imidite ki estab; pakonsekan, li te montre ke twòp pann mennen nan seche ak pli nan po a.29 Atravè pwosesis la aje ak tan, nivo diminye nan kolagen an lakòz eklèsi sou dèrm la, ki konsidere kòm yon endikasyon diferan anba egzamen mikwoskopik.3{{23 }} Li te jisteman endike ke retade pann nan kolagen an atravè inhibiteur kolagenaz kidonk entèval ridilasyon ak aje nan estrikti po.5 Lè nou konsidere enfòmasyon sa a, sibstans ki anpeche elastase, kolagenaz, ak hyaluronidase gen potansyèl remakab pou pwodwi anti-aje. Etid anvan yo te demontre ke divès kalite izoflavonoid montre siyifikatif byoaktivite inhibitor kont anzim yo mansyone pi wo a. Addotey et al.31 te montre ke kat izoflavonoid diferan inibit hyaluronidase jiska 61.2 pousan. Kim et al.32 te montre ke yon izoflavonoid izole nan Glycyrrhiza uralensis Fisch., licoricidine, gen siyifikatif aktivite inhibition elastase. Valè IC50 nan reglis te kalkile kòm 61.2 ± 4.2 µM pandan y ap asid oleanolik te kalkile kòm 131.4 ± 11.4 kòm yon konpoze referans. Rezilta yo endike ke izoflavonoid ka anpeche anzim elastase. Ki konsistan avèk etid la mansyone pi wo a, Kim et al.33 etidye nèf diferan izoflavonoid prenylated, estrikti ki gen anpil rapò ak osajin, izole nan rasin Flemingia philippinensis Merr. & Rolfe. Chèchè yo te rapòte ke senk nan izoflavon pranilate yo te gen aktivite anpèchman pisan kont elastaz neutrofil, valè IC50 divèsifye ant 1.9-12.0 µM, pandan y ap valè IC50 nan asid oleanolik te 28.4 µM. Nan yon lòt etid, Ergene Öz et al. 34 te envestige aktivite inibisyon vitro senk izoflavonoid izole nan rasin Ononis spinoza L. kont hyaluronidase, kolagenaz, ak elastase. Hyaluronidase inhibition aktivite isoflavones yo te rapòte ke yo ant 22.08-45.58 pousan , pandan ke, nan menm konsantrasyon, asid tannik te montre 88.32 pousan anpèchman. Rezilta anpèchman kolagenaz yo te kalkile ant 20.41- 28.49 pousan epi yo te mezire anpèchman elastaz kòm 20.47-46.88 pousan. EGCG te itilize kòm yon referans pou tou de tès yo ak aktivite anpèchman yo nan menm konsantrasyon yo te mezire kòm 41.18 pousan ak 84.64 pousan, respektivman. Yon lòt etid envestige tretman aktualite nan pomiferin dirèkteman izole nan M. pomifera. 15 Pomiferin se yon izoflavonoid pranil, ki ka jwenn nan fwi M. pomifera ak estrikti molekilè li yo sanble anpil ak osajin. Envestigatè yo rapòte ke pomiferin te montre pisan aktivite eksitasyon pwoteyin ECM lè yo ogmante kolagen an ak elastin ki siperyè oswa ekivalan a konpoze referans, retinol. Tout etid mansyone revele ke izoflavon yo se modere ak pisan inibitè nan anzim sa yo epi yo gen gwo potansyèl kòm materyèl natirèl anti-aje.

Nan etid sa a, in vitro hyaluronidase, collagenase, ak elastase inhibition aktivite MPM yo te envestige pou detèminasyon potansyèl antiaging. Yo te fè yon tès konparatif pou tès anpèchman kolagenaz nan pwen de fwa, pa egzanp 20 ak 40 minit, pou tou de MPM ak konpoze referans, EGCG. Rezilta yo montre ke aktivite anpèchman kolagenaz ogmante ak tan. 1 mg/mL MPM te montre 84.55 ± 1.99 pousan anpèchman, pandan y ap 25{{40}} µg/mL EGCG te montre 84.66 ± 1.83 pousan apre 2{0 min enkubasyon. Byoaktivite inhibitor te anplifye nan tan, apre 40 min MPM ak EGCG inibe kolagenaz 94.68 ± 2.42 pousan ak 94.98 ± 2.81 pousan, respektivman. Konfòm ak literati a, MPM te montre siyifikatif aktivite anpèchman kont elastase. Rezilta yo te mezire pou pwen kat fwa (5, 10, 20, ak 30 min) ak demontre enkreman sou tan (Figi 2). EGCG (250 µg/mL) te itilize kòm yon referans ak aktivite anpèchman ogmante nan chak pwen tan (44.07 ± 0.00 pousan, 52.19 ± 0.00 pousan, 64.69 ± 0.{{41 }} pousan, ak 86.21 ± 0.00 pousan, respektivman). Pandan se tan MPM nan 1 mg/mL konsantrasyon ekspoze pi wo amelyorasyon ak aktivite anpèchman, ki leve soti nan 34.70 ± 0.57 pousan nan 97.40 ± 1.04 pousan soti nan 5 min a 30 min. Menm jan an tou, 1 mg / mL MPM anpeche anzim hyaluronidase siyifikativman apre 40 min enkubasyon. Yo te mezire 83.91 ± 2.36 pousan anpèchman apre 40 min, apre 80 min enkubasyon, to anpèchman anplifye a 97.19 ± 0.45 pousan. Lè yo te konsidere tout tès anpèchman anzim yo, rezilta yo montre ke MPM ka yon ajan natirèl anti-aje ki gen anpil valè epi yo ka itilize nan sa ki nan divès kalite pwodwi anti-aje; konsa, M. pomifera ka genyen plis enpòtans ekonomik.

Detèminasyon potansyèl antioksidan

Anpil faktè ekzojèn ak andojèn mennen nan aje po atravè mekanis divès kalite. Yon majorite nan faktè sa yo dirèkteman oswa endirèkteman afekte pa fòmasyon ROS nan ECM a nan po a.35 Depi po a kouvri pati deyò nan kò nou an, li rankontre kantite siyifikatif nan iradyasyon UV nan lavi chak jou. Kidonk, majorite pwoblèm po yo tankou sunburn, hyperpigmentation, ak kanserojèn po orijine oswa ki gen rapò ak efè dirèk radyasyon UV. Menm jan an tou, foto aje se yon konsekans adisyonèl nan pwopriyete danjere li yo.36 Anplis, limyè UV jenere fòmasyon ROS ak, kidonk, estrès oksidatif nan tisi po, ki se youn nan mekanis ki pi enpòtan ki mennen nan foto aje.37 Li te ipotèz ke depi twòp. Fòmasyon ROS lakòz twò bonè aje po, ajan ki gen yon kapasite antioksidatif enpòtan ka yon zouti valab kont efè danjere nan radyasyon UV. An konsekans, etid klinik yo montre ke itilizasyon antioksidan aktualite gen yon efè pwoteksyon sou po a.38

Apre lyen ki genyen ant itilizasyon antioksidan aktualite ak ranvwaman nan aje po, ki byen etabli nan literati anvan yo, egzamine potansyèl antioksidan vitro nan MPM bay bonjan enfòmasyon pou li se potansyèl anti-aje lè aplike topikman. Literati pi bonè te demontre ke ekstrè ak yon gwo kantite izoflavonoid ta ka antioksidan ki gen anpil valè. Nan yon etid anvan, yon ekstrè ki rich nan izoflavonoid nan ekstrè F. macrophylla redwi domaj UVB-pwovoke sou po lè yo retire ROS.39 Santos ak Silva4{{10}} te endike ke izoflavonoid prenyl yo gen potansyèl antioksidan enpòtan akòz yo. moety flavonoid ak yon efè aditif nan sidechain prenyl. Yo te evalye potansyèl antioksidan ekstrè ak izoflavonoid M. pomifera nan yon etid anvan. Rezilta yo te demontre ke ekstrè idroalkolik la ak pi osajin te montre aktivite enpòtan sou DPPH, FRAP, ak tès TOAC, menm si pomiferin ak fraksyon etil acetate te montre pi gwo aktivite. fèt pou detèminasyon konplè nan potansyèl antioksidan in vitro nan MPM (Tablo 2). MPM te montre siyifikatif aktivite DPPH radikal, kote yo te mezire valè IC50 an 1998.86 ± {{20}}.02. FRAP ak TOAC analiz tou a nan aktivite remakab metal-diminye, 0.191 ± 0.01 mM FeSO4 / DE ak 114.43 ± 0.02 AAE / g DE, respektivman. Konklizyon sa yo te konsistan avèk etid anvan ki te pibliye pa Orhan et al.41 Yo te fè tès CUPRAC sou ekstrè fwi M. pomifera pou premye fwa nou konnen. An korespondan, MPM te montre aktivite redui kòb kwiv mete remakab nan tès CUPRAC, kote rezilta yo te mezire kòm 73.928 ± 0.01 AAE/g DE. Lè yo te konsidere analiz total de kapasite antioksidan, li posib pou sijere ke MPM se yon ajan anti-aje pwomèt.

Pwofil fenolik ak analiz HPTLC

Isoflavonoid yo se sibstans fenolik, ke yo rekonèt kòm konstitiyan plant ki responsab pou divès kalite aktivite byolojik ki enpòtan pou remake tankou antioksidan, antikansè, ak kont pwoblèm jinekolojik. ak pomiferin kòm engredyan prensipal yo nan fwi M. pomifera yo, ki se prensipalman responsab pou li se aktivite byolojik.12 Osajin ak pomiferin yo se trè menm jan izoflavonoid prenylated ki diferan sèlman ak yon gwoup idroksil.44 Rapò anvan yo demontre rezilta konfli pou kontni osajin ak pomiferin. nan M. pomifera fwi. Kartal et al.45 devlope yon metòd LC-MS pou detèminasyon osajin ak pomiferin nan M. pomifera, ki te ranmase nan pwovens Ankara nan Türkiye. Rezilta yo te demontre ke kontni pomiferin te yon ti kras pi wo pase kontni osajin nan diferan pati nan echantiyon fwi yo. Nan yon lòt etid, M. pomifera echantiyon fwi yo te kolekte nan diferan rejyon nan Midwès la ak Sid Etazini ak osajin ak pomiferin kontni yo te mezire atravè yon nouvo metòd analiz HPLC. Rezilta yo te montre ke diferans jeyografik mennen nan chanjman enpòtan nan kantite izoflavonoid nan echantiyon.46 Tsao et al.47 detèmine kontni osajin ak pomiferin nan fwi yo kolekte nan Kanada epi li te jwenn ke kontni pomiferin te yon ti kras pi wo pase kontni osajin. Nan contrast, Hwang et al.48 rezime plizyè etid ki te jwenn kantite osajin ki pi wo pase kantite pomiferin nan ekstrè divès kalite. Li ka reklame ke osajin ak pomiferin sa ki nan fwi M. pomifera yo eksepsyonèlman varyab ak diferans jeyografik ak teknik ekstraksyon akòz estrikti chimik desideman analogue yo. Pou etid sa a, yo te mezire kantite MPM atravè analiz HPTLC, pou premye fwa nou konnen. Rezilta analiz la te montre ke osajin se engredyan prensipal MPM ki te kolekte nan pwovens Uşak, 0.22 pousan echantiyon an te konpoze de osajin (Tablo 1). Anplis de sa, pou reyalize plis evalyasyon pwofil fenolik MPM yo, yo te fè analiz total fenolik ak total flavonoid. Rezilta yo te montre ke MPM te gen kontni fenolik ak flavonoid remakab jan sa a; 113.92 ± 2.26 mg GAE/g ak 66.41 ± 0.74 mg QE/g, respektivman. Rezilta evalyasyon pwofil fenolik yo te montre ke MPM ta ka yon kandida enpòtan kòm yon nouvo ajan natirèl anti-aje.

KONKLIZYON

Menmsi etid ki mennen ankèt sou aplikasyon an aktualite nan fwi M. pomifera yo relativman nouvo, atansyon nan fason sa a ap ogmante ak rapò ankouraje. Se poutèt sa, etid sa a te vize a dekri yon evalyasyon konplè sou posib potansyèl anti-aje M. pomifera ekstrè fwi. Yo te itilize analiz HPTLC pou fwi M. pomifera pou detèminasyon kontni izoflavonoid la pou premye fwa nan konesans nou, ansanm ak etid in vitro pou detèmine pwofil fenolik total la. Rezilta yo te montre ke osajin se pi gwo engredyan nan echantiyon yo. Anplis de sa, yo te evalye potansyèl antioksidan an vitro nan ekstrè a ak kat analiz diferan ak rezilta demontre yon potansyèl antioksidan enpòtan nan MPM. Anplis de sa, aktivite inhibition kont anzim yo, ki gen rapò ak pwosesis la aje, yo te mezire epi li te wè ke MPM te gen aktivite remakab anpèchman anzim. An konklizyon, etid sa a bay enfòmasyon, ki ka mennen nan pwodiksyon an nan nouvo pwodwi swen pou po.

Etik

Apwobasyon Komite Etik:Apwobasyon komite etik pa obligatwa pou etid la.

Konsantman Enfòme:Pa nesesè.

Revizyon kanmarad:Eksteryèman revize kanmarad.

Kontribisyon otè

Konsèp: THB, TBŞ., HB, Konsepsyon: THB, İ.KC, EC, Koleksyon Done oswa Pwosesis: THB, İ.KC, HB, Analiz oswa Entèpretasyon: THB, İ.KC, Rechèch Literati: THB, TBŞ., Ekri: THB, EC

Konfli enterè:Otè yo pa te deklare okenn konfli enterè.

Divilgasyon finansye:Etid sa a te sipòte pa Acıbadem Mehmet Ali Aydınlar University Commission of Scientific Projects (pa: 2020/02/07).

REFERANS

1. Hwang E, Park SY, Yin CS, Kim HT, Kim YM, Yi TH. Efè antiaging nan melanj Panax ginseng ak Crataegus pinnatifida nan fibroblasts po imen ak po moun ki an sante. J Ginseng Res. 2017;41:69-77.

2. Ganceviciene R, Liakou AI, Theodoridis A, Makrantonaki E, Zouboulis CC. Estrateji anti-aje po. Dermatoendocrinol. 2012;4:308-319.

3. Lee H, Hong Y, Tran Q, Cho H, Kim M, Kim C, Kwon SH, Park S, Park J, Park J. Yon nouvo wòl pou ginsenoside RG3 a nan antiaging atravè fonksyon mitokondri nan iltravyolèt-iradyasyon po imen imen. fibroblasts. J Ginseng Res. 2019;43:431-441.

4. Rouvrais C, Bacqueville D, Patrick B, Haure MJ, Duprat L, Coutanceau C, Castex-Rizzi N, Duplan H, Mengeaud V, Bessou-Touya S. Evalyasyon pwopriyete antiaging retinaldehyde, delta-tocopherol glikozid, ak glizilglisin. konbinezon oleamid. J Invest Dermatol. 2017;137(Suppl 2):S303.

5. Bravo K, Alzate F, Osorio E. Fwi nan plant seleksyone nan bwa ak kiltive andin kòm sous nan konpoze potansyèl ak aktivite antioksidan ak anti-aje. Ind Crops Prod. 2016;85:341-352.

6. Yepes A, Ochoa-Bautista D, Murillo-Arango W, Quintero-Saumeth J, Bravo K, Osorio E. Grenn fwi pasyon koulè wouj violèt (Passiflora edulis f. edulis Sims) kòm yon sous pwomèt nan ajan anti-aje po: anzimatik , antioksidan ak etid enfòmatik milti-nivo. Arab J Chem. 2021;14:102905.

7. Rittié L, Fisher GJ. UV-limyè-pwovoke siyal kaskad ak aje po. Aging Res Rev. 2002;1:705-720.

8. Duque L, Bravo K, Osorio E. Yon apwòch holistic anti-aje aplike nan chwazi plant medsin kiltive: yon gade nan fotopwoteksyon nan po a pa mekanis diferan. Ind Crops Prod. 2017;97:431-439.

9. Manjia NJ, Njayou NF, Joshi A, Upadhyay K, Shirsath K, Devkar VR, Moundipa FP. Potansyèl anti-aje plant medsin nan KamewounHarungana madagascariensis Lam. ak Psorospermum aurantiacum Engl. anpeche in vitro iltravyolèt B limyè-induit domaj po. Eur J Integr Med. 2019;29:100925.

10. Pujimulyani D, Suryani CL, Setyowati A, Handayani RAS, Arumwardana S, Widowati W, Maruf A. Cosmeceutical potansyèl Curcuma mangga Val. ekstrè nan fibroblast BJ imen kont MMP1, MMP3, ak MMP13. Heliyon. 2020;6:e04921.

11. Stavropoulou MI, Stathopoulou K, Cheilari A, Benaki D, Gardikis K, Chinou I, Aligiannis N. NMR pwofil metabolik nan echantiyon grèk propoli: evalyasyon konparatif nan konpozisyon fitochimik yo ak ankèt sou pwopriyete anti-aje ak antioksidan yo. J Pharm Biomed Anal. 2021;194:113814.

12. Filip S, Djarmati Z, Lisichkov K, Csanadi J, Jankov RM. Izolasyon ak karakterizasyon Maclura (Maclura pomifera) ekstrè yo te jwenn pa ekstraksyon likid superkritik. Ind Crops Prod. 2015;76:995-1000.

13. Saloua F, Eddine NI, Hedi Z. Konpozisyon chimik ak karakteristik pwofil nan osage zoranj Maclura pomifera (Rafin.) Schneider grenn ak lwil grenn. Ind Crops Prod. 2009;29:1-8.

14. Veselá D, Kubínová R, Muselík J, Zemlicka M, Suchý V. Aktivite antioksidatif ak EROD nan osajin ak pomiferin. Fitoterapia. 2004;75:209-211.

15. Gruber JV, Holtz R, Sikkink SK, Tobin DJ. Egzamen an vitro ak ex vivo nan tretman pomiferin aktualite. Fitoterapia. 2014;94:164-171.

16. Bozkurt İ, Dilek E, Erol HS, Çakir A, Hamzaoğlu E, Koç M, Keleş ON, Halici MB. Envestigasyon sou efè pomiferin nan Maclura pomifera sou ilsè gastric indomethacin-induit: yon etid eksperimantal nan rat. Med Chem Res. 2017;26:2048-2056.

17. Kurt-Celep İ, Celep E, Akyüz S, İnan Y, Barak TH, Akaydın G, Telci D, Yesilada E. Hypericum Olympic L. refè domaj ADN ak anpeche MMP-9 aktivasyon pwovoke pa UVB nan po imen. fibroblasts. J Etnopharmacol. 2020;246:112202.

18. Bardakci H, Cevik D, Barak TH, Gozet T, Kan Y, Kirmizibekmez H. Segondè metabolit, karakterizasyon fitochimik ak aktivite antioksidan nan ekstrè diferan nan Sideritis congesta PH Davis et Hub.- Mor. Biochem Syst Ecol. 2020;92:104120.

19. Celep E, Seven M, Akyüz S, İnan Y, Yesilada E. Enfliyans metòd ekstraksyon sou anpèchman anzim, pwofil fenolik ak kapasite antioksidan Sideritis trojan Bornm. Sid Afriken J Bot. 2019;121:360–365.

20. Bardakcı H, Barak TH, Özdemir K, Celep E. Efè materyèl enplikasyonJwi ak aditif divès kalite sou konpozisyon polifenolik ak byoaktivite antioksidan nan komèsyal Tilia platyphyllos Scop. perfusion. J Res Pharm. 2020;24:133-141.

21. Barak TH, Celep E, İnan Y, Yesilada E. Enfliyans nan dijesyon in vitro imen sou byodisponibilite nan kontni fenolik ak aktivite antioksidan nan ekstrè fwi Viburnum opulus L. (Cranberry Ewopeyen an). Ind Crops Prod. 2019;131:62-69.

22. Barak TH, Celep E, İnan Y, Yeşilada E. In vitro simulation dijesyon imen nan byodisponibilite ak aktivite antioksidan nan fenolik soti nan Sambucus ebulus L. ekstrè fwi. Biosci manje. 2020;37:100711.

23. Ersoy E, Eroglu Ozkan E, Boga M, Yilmaz MA, Mat A. Anti-aje potansyèl ak aktivite anti-tirozinaz nan twa espès Hypericum ak yon konsantre sou konpozisyon fitochimik pa LC-MS / MS. Ind Crops Prod. 2019;141:111735.

24. Lee KK, Kim JH, Cho JJ, Choi JD. efè inhibition nan 150 ekstrè plant sou aktivite elastase, ak efè anti-enflamatwa yo. Int J Cosmet Sci. 1999;21:71-82.

25. Itoh S, Yamaguchi M, Shigeyama K, Sakaguchi I. Potansyèl anti-aje ekstrè soti nan Chaenomeles sinensis. Kosmetik 2019;6:21.

26. Kolayli S, Can Z, Yildiz O, Sahin H, Karaoglu SA. Yon etid konparatif nan anti hyaluronidase, antijèl, antioksidan, antimikwòb ak pwopriyete fizikochimik nan diferan degre unifloral nan siwo myèl chestnut (Castanea sativa Mill.). J Enzyme Inhib Med Chem. 2016;31(Suppl 3):96-104.

27. Korkmaz B, Horwitz MS, Jenne DE, Gauthier F. Neutrophil elastase, proteinase 3, ak cathepsin G kòm objektif terapetik nan maladi imen. Pharmacol Rev. 2010;62:726-759.

28. Akazaki S, Nakagawa H, Kazama H, Osanai O, Kawai M, Takema Y, Imokawa G. Chanjman ki gen rapò ak laj nan ondilasyon po evalye pa yon roman analiz mòfometrik twa dimansyon. Br J Dermatol. 2002;147:689- 695.

29. Barla F, Higashijima H, Funai S, Sugimoto K, Harada N, Yamaji R, Fujita T, Nakano Y, Inui H. Efè inhibitif nan gallat alkil sou hyaluronidase ak kolagenaz. Biosci Biotechnol Biochem. 2019;73:2335-2337.

30. Chung JH, Kang S, Varani J, Lin J, Fisher GJ, Voorhees JJ. Diminye kinaz ekstraselilè-siyal-reglemante ak ogmante aktivite kinaz MAP ki aktive estrès nan po moun ki gen laj nan vivo. J Invest Dermatol. 2000;115:177-182.

31. Addotey JN, Lenger's I, Jose J, Gampe N, Béni S, Petereit F, Hensel A. Isoflavonoids ak efè inhibition sou imen hyaluronidase -1 ak norneolignan clitorienolactone B soti nan Ononis spinosa L. ekstrè rasin. Fitoterapia. 2018;130:169-174.

32. Kim KJ, Xuan SH, Park SN. Licoricidin, yon izoflavonoid izole nan Glycyrrhiza uralensis Fisher, anpeche UVA-induit photoaging nan fibroblast imen po. Int J Cosmet Sci. 2017;39:133-140.

33. Kim JY, Wang Y, Uddin Z, Song YH, Li ZP, Jenis J, Park KH. Konpetitif neutrophil elastase inhibitor izoflavon soti nan rasin yo nan Flemingia philippinensis. Bioorg Chem. 2018;78:249-257.

34. Ergene Öz B, Saltan İşcan G, Küpeli Akkol E, Süntar İ, Bahadır Acıkara Ö. Isoflavonoid kòm ajan geri blese soti nan Ononidis radix. J Etnopharmacol. 2018;211:384-393.

35. Azevedo Martins TE, de Oliveira Pinto CAS, de Oliveira AC, Robles Velasco MV, Gorriti Guitiérrez AR, Cosquillo Rafael MF, Huamani Tarazona JP, Retuerto-Figueroa MG. Kontribisyon antioksidan aktualite pou kenbe po an sante-yon revizyon. Sci Pharm. 2020;88:27.

36. Krutmann J, Schroeder P. Wòl mitokondri nan fotoaging nan po moun: modèl la pisan mezon dachaj ki defektye. J Investig Dermatol Symp Proc. 2009;14:44-49.

37. Dong KK, Damaghi N, Picart SD, Markova NG, Obayashi K, Okano Y, Masaki H, Grether-Beck S, Krutmann J, Smiles KA, Yarosh DB. Domaj ADN pwovoke UV inisye liberasyon MMP-1 nan po moun. Ekspè Dermatol. 2008;17:1037-1044.

38. Oresajo C, Pillai S, Manco M, Yatskayer M, McDaniel D. Antioksidan ak po a: konpreyansyon fòmilasyon ak efikasite. Dermatol Ther. 2012;25:252-259.

39. Chiang HM, Chiu HH, Liao ST, Chen YT, Chang HC, Wen KC. Isoflavonoidrich fleming macrophylla ekstrè atenue domaj UVB-pwovoke sou po a lè yo retire espès oksijèn reyaktif ak anpeche MAP kinaz ak ekspresyon MMP. Evid Based Complement Alternat Med. 2013;2013:696879.

40. Santos CMM, Silva AMS. Aktivite antioksidan prenylflavonoids. Molekil. 2020;25:696.

41. Orhan IE, Sezer Senol F, Demirci B, Dvorska M, Smejkal K, Zemlicka M. Potansyèl antioksidan nan kèk dérivés flavonoid natirèl ak semi-sentetik ak ekstrè yo soti nan Maclura pomifera (Rafin.) Schneider (osage zoranj) ak esansyèl li yo. konpozisyon lwil oliv. Tik J Biochem. 2016;41:403-411.

42. Křížová L, Dadáková K, Kašparovská J, Kašparovský T. Isoflavones. Molekil. 2019;24:1076.

43. Su Z, Wang P, Yuan W, Grant G, Li S. Fenolik soti nan fwi Maclura pomifera. Nat Prod Commun. 2017;12:1743-1745.

44. Orazbekov Y, Ibrahim MA, Mombekov S, Srivedavyasasri R, Datkhayev U, Makhatov B, Chaurasiya ND, Tekwani BL, Ross SA. Izolasyon ak evalyasyon byolojik nan flavonoid prenyl soti nan Maclura pomifera. Evid Based Complement Alternat Med. 2018;2018:1370368.

45. Kartal M, Abu-Asaker M, Dvorska M, Orhan I, Zemlicka M. LC-DAD-MS metòd pou analiz de pomiferin ak osajin, pi gwo izoflavon nan Maclura pomifera (Rafin.) Schneider. Chromatographia 2009;69:325-329.

46. ​​Darji K, Miglis C, Wardlow A, Abourashed EA. Detèminasyon HPLC nan nivo izoflavon nan osage zoranj soti nan Midwès la ak sid Etazini. J Agric Food Chem. 2013;61:6806-6811.

47. Tsao R, Yang R, Young JC. Isoflavon antioksidan nan zoranj osage, Maclura pomifera (Raf.) Schneid. J Agric Food Chem. 2003;51:6445-6451.

48. Hwang HS, Winkler-Moser JK, Tisserat B, Harry‐O'kuru RE, Berhow MA, Liun SX. Aktivite antioksidan nan ekstrè zoranj osage nan lwil soya ak lwil pwason pandan depo. J Am Oil Chem Soc. 2021;98:73-87.

【Pou plis enfòmasyon:george.deng@wecistanche.com / WhatApp:86 13632399501】