Administrasyon In Vivo nan Consortia bakteri zantray repwodui Metabotip Urolithin A ak B nan yon modèl rat ki pa pwodui UrolithinⅡ

Rezilta yo

Analiz espesifikasyon ak sansiblite deziye premye yo ak pwofonde pou Ellagibacter ak Enterocloster

Yo te konfime espesifikasyon yo ak sond Ellagibacter ak Enterocloster lè yo telechaje sekans yo sou pwogram aliyman sekans sa yo ProbeMatch.31 Yo montre rezilta yo.nan Tablo 1S ak 2S.† Answit, qPCR te verifye spesifik primè yo ak pwofonde lè l sèvi avèk kondisyon reyaksyon optimised ki dekri nan seksyon Materyèl ak metòd. Espès bakteri reprezantan nan fanmi Eggerthellaceae ak Lachnospiraceae ki gen pi gwo resanblans ak Ellagibacter ak Enterocloster nan sekans jèn rRNA 16S yo te teste anplis lòt espès ki gen rapò sere detekte souvan nan trip imen an (Tablo 1S ak 2S†).Fig. 2 montre trase anplifikasyon ki koresponn ak koub quantification estanda yo.

Klike sou tretman konstipasyon

Valè CT yo te trase kont konsantrasyon bakteri (Co) kòm log 10 ekivalan jenomik / reyaksyon (6.25 × 10-6 ng, pou genoid aploid). Pant koub regression lineyè a, ki te kalkile ak ADN jenomik, te -3.78, epi valè R2 te pi gran pase 0.99. Konsènan sansiblite sistèm qPCR la, 1.5 ekivalan genòm yo te nesesè kòm minimòm pou yon reyaksyon pozitif lè l sèvi avèk mòd TaqMan. Valè CT yo te jwenn ak koub kalibrasyon E. isourolithinifaciens ak E. boulonné te varye ant 15.5± 0.7 a 37.8 ± 0.7, pandan ke pa gen okenn anplifikasyon ADN te detekte pou lòt tansyon yo teste.

Kantifikasyon Ellagibacter ak Enterocloster nan echantiyon fekal rat yo te fè ak metòd sa a (qPCR), konsidere mwayen twa replike. Rezilta yo te eksprime kòm logaritm 10 bakteri pou chak g fes epi yo te konpare ak valè abondans relatif yo te jwenn nan sekans 16S rRNA. Nou te obsève yon korelasyon pozitif ant rezilta yo jwenn nan tou de metòd yo nan Ellagibacter (r=0.660, p <0.001) ak Enterocloster (r=0.459, p< 0.001) (data not shown).

Efè konsòsya bakteri yo administre oralman sou pwodiksyon an nan urolitins

Analiz Uro nan poupou yo te montre ke okòmansman (T{{0}}), rat yo pa t 'pwodwi Uros apre yo fin enjere poud EA (Fig. 3A–C).Sepandan, apre yo fin administre konsòsya bakteri A (Fig. 3A). )ak B (figi 3B), rat te vin kapab pwodui Uro.Pandan twa premye semèn yo, lè rat ki soti nan gwoup A ak B yo te sèlman vale EA poud, konsantrasyon Uro (ranje:0–1.43 µg g−) 1) ak sa ki nan precurseur EA yo (ranje: 0.07-4.54 µg g-1) nan poupou yo te ba. Sepandan, depi jou 21, lè konsomasyon nwaye yo te kòmanse kòm yon dezyèm EAsource, te gen yon ogmantasyon trè siyifikatif nan fekal EA (Fig. 3A–C) ak pwodiksyon Uro nan gwoup A (Fig. 3A) ak B (Fig. 3B). ).

Anplis de sa, diferans ki genyen nan pwofil Uro yo te obsève ant gwoup A ak B. Nan gwoup A, fekal Uro-C, Uro-M6, Uro-M7, ak metabolit final Uro-A te dominant. Kontrèman, nan gwoup B, twa Uro final yo (Uro-A, UroB, ak IsoUro-A) te prezan, tandiske entèmedyè yo te ra. Sepandan, yo te detekte yon pi wo konsantrasyon fekal nan Uro-G ki te dekri dènyèman nan gwoup B pase nan gwoup A. Anplis de sa, konsantrasyon Uro-B la te pi ba pase sa yo ki nan Uro-A ak IsoUro-A nan gwoup B. Anplis de sa, Uro-A ak IsoUro-A, men se pa Uro-B, yo te pwodwi nan tout rat nan gwoup B (Fig. 3B). Lè nwaye yo te ajoute nan rejim alimantè a nan rat kontwòl (gwoup C) nan jou 21, yon pi wo konsantrasyon fekal nan EA yo te obsève tou. pase anvan konsomasyon zanmann, kote konsantrasyon an fecalEA te ba anpil (figi 3C). Sepandan, ni konsomasyon EApowder ni konsomasyon zanmann ankouraje pwodiksyon Uros nan zantray rat kontwòl (sa vle di, ki pa gen okenn konsòsya bakteri).

Kolonizasyon entesten nan bakteri yo administre oralman Okòmansman, anvan rat nan gwoup A ak B yo te kòmanse konsomasyon nan konsòsya bakteri yo, Gordonibacter oswa Ellagibacter te anba limit deteksyon nan echantiyon fekal yo lè yo te fè analiz sekans metagenomik lè l sèvi avèk platfòm MiSeq-Illumina (figi 3D-F). ). Lè qPCR yo te itilize,Nivo Gordonibacter nan rat yo te ba (<5.8 log bacteria per g faeces), and Ellagibacter levels were under the limit of detection (data not shown). In contrast, Enterocloster was detected using the MiSeq-Illumina and qPCR in the faeces of rats from all groups (A, B, and C) at the baseline (Fig. 3D–F). 

Abondans relatif (mwayèn ± SD) Enterocloster nan gwoup A, B, ak Cwas {{0}}.{03 ± 0.02, {{10 }}.04 ± 0.06, ak 0.13 ± 0.17%, respektivman, men san diferans enpòtan (p=0.570). Administrasyon an nan konsòsya bakteri A ak B te lakòz aparans la ak ogmantasyon gradyèl nan Gordonibacter ak Ellagibacter nan gwoup ki koresponn A ak B poupou, respektivman (figi 3D ak E). Anplis de sa, nivo fekal Enterocloster ogmante pandan tout etid la nan gwoup A ak B (Fig. 3D ak E).

Sepandan, analiz LEfSe te montre diferans ra nan lòt gwoup bakteri zantray lè done metagenomic sekans gwoup A ak B yo te konpare ak gwoup kontwòl la (Fig. 4A ak B). ak B konpare ak gwoup kontwòl la (Fig. 4A ak B). Senk jou apre yo fin sispann administrasyon oral nan konsòsya bakteri yo (fen dat etid la), yo te detekte yon rediksyon nan abondans Ellagibacterand Enterocloster nan gwoup B, ki te tou rezilta yon diminisyon enpòtan nan pwodiksyon Uro (Fig. 3B ak E). Nan gwoup A, yo te obsève yon rediksyon nan abondans Gordonibacter men pa Enterocloster (Fig. 3A), ki te lakòz yon diminisyon nan konsantrasyon Uro men li te mwens pwononse pase nan gwoup B (Fig. 3D ak E). Nan gwoup kontwòl la, Ellagibacter te anba limit deteksyon pandan tout etid la, ak Enterocloster ak Gordonibacter te rete nan nivo ki ba anpil (figi 3F).

Etid sou toksisite nan bakteri yo nan zantray administre oralman

Yo te envestige efè segondè potansyèl ki soti nan enjèstyon nan konsòsyay bakteri yo. Pa gen okenn efè negatif sou kwasans, pran pwa, konsomasyon manje, ak ògàn vital yo te obsève apre 4 semèn nan administrasyon oral pa gavage nan konsòsya bakteri nan rat nan gwoup A ak B konpare ak gwoup kontwòl la. Sepandan, rat gason te pran 107.4 ± 2.4 g, pandan ke rat fi te vin mwens.pwa (25.7 ± 5 g) nan fen etid la san diferans konpare ak gwoup kontwòl la. Konsomasyon manje pa kaj te 63.1 ± 1.4 g pou rat gason ak 33.8 ± 1.8 g pou rat fi.Sepandan, konsomasyon dlo te 136.1 ± 37.2 g ak 76.0 ± 12.6 g, bymale ak fi rat pa kaj respektivman .

Diferans ematolojik yo te obsève ant gason ak fi nan kèk varyab, tankou distribisyon eritrosit (RDW, p {{0}}.005), lekosit (p=0}.005), lajè distribisyon plakèt (PDW, p). =0.005), ak kontni emoglobin retikulosit (CHr, p=0.013) (Tablo 2). Toujou, pa gen okenn diferans obsève pou nenpòt varyab ant gwoup ki konsome konsòsya bakteri yo (gwoup A ak B) ak gwoup kontwòl la (gwoup C). Yo te analize valè byochimik yo tou, epi yo te detekte diferans sèlman ant gason ak fi nan kèk varyab tankou endèks kreyatinin (p <0.001), fosfò (p{11}}.007), fosfataz alkalin (ALP) (p {{13). }}.003), ak tiroksin (T4) (p=0.002) (Tablo 3). Sepandan, pa gen okenn diferans ki te obsève pou nenpòt nan varyab ant gwoup yo ki te konsome konsòsya bakteri yo (gwoup A ak B) ak gwoup kontwòl la (gwoup C).

Medikaman èrbal natirèl pou soulaje konstipasyon-Cistanche

Cistanche se yon genus plant parazit ki fè pati fanmi Orobanchaceae. Plant sa yo konnen pou pwopriyete medsin yo epi yo te itilize nan Medsin Tradisyonèl Chinwa (TCM) pandan plizyè syèk. Espès Cistanche yo jwenn sitou nan rejyon arid ak dezè nan Lachin, Mongoli, ak lòt pati nan Azi Santral. Plant Cistanche yo karakterize pa tij charnèl yo, jòn epi yo trè apresye pou benefis potansyèl sante yo. Nan TCM, yo kwè ke Cistanche gen pwopriyete tonik epi li souvan itilize pou nouri ren an, amelyore vitalite, ak sipòte fonksyon seksyèl. Yo itilize li tou pou adrese pwoblèm aje, fatig ak byennèt an jeneral. Pandan ke Cistanche gen yon istwa long nan itilize nan medikaman tradisyonèl yo, rechèch syantifik sou efikasite li yo ak sekirite se kontinyèl ak limite. Sepandan, li gen plizyè konpoze byoaktif tankou glikozid fenilethanoid, iridoid, lignan, ak polisakarid, ki ka kontribye nan efè medsin li yo.

Wecistanche apoud cistanche, tablèt cistanche, kapsil cistanche, ak lòt pwodwi yo devlope lè l sèvi avèkdezèsistanchkòm matyè premyè, tout nan yo ki gen yon bon efè sou soulaje konstipasyon. Mekanis espesifik la se jan sa a: Cistanche kwè gen benefis potansyèl pou soulaje konstipasyon ki baze sou itilizasyon tradisyonèl li yo ak sèten konpoze li genyen. Pandan ke rechèch syantifik espesyalman sou efè Cistanche a sou konstipasyon limite, yo panse ke li gen plizyè mekanis ki ka kontribye nan potansyèl li yo soulaje konstipasyon. Efè laksatif:Cistanchedepi lontan yo te itilize nan Medsin Tradisyonèl Chinwa kòm yon remèd pou konstipasyon. Yo kwè ke li gen yon efè laksatif twò grav, ki ka ede ankouraje mouvman entesten ak pwovoke konstipasyon. Efè sa a ka atribiye a divès konpoze yo te jwenn nan Cistanche, tankou glikozid fenilethanoid ak polisakarid. Imidite entesten yo: Ki baze sou itilizasyon tradisyonèl yo, Cistanche konsidere kòm gen pwopriyete idratan, espesyalman vize entesten yo. Pwomosyon idratasyon ak wilaj nan trip yo ka ede adousi zouti ak fasilite pasaj pi fasil, kidonk soulaje konstipasyon. Efè anti-enflamatwa: Konstipasyon ka pafwa asosye ak enflamasyon nan aparèy dijestif la. Cistanche gen sèten konpoze, ki gen ladan glikozid phenylethanoid ak lignan, ke yo kwè gen pwopriyete anti-enflamatwa. Pa diminye enflamasyon nan trip yo, li ka ede amelyore regilarite mouvman entesten ak soulaje konstipasyon.