Envestigasyon sou efè ipètiwoyid sou estrès retikul andoplasmik ak potansyèl reseptè tran siyan chanèl kanon 1 nan ren an

pou plis enfòmasyon:ali.ma@wecistanche.com

Nuriye Ezgi BEKTUR AYKANAT^1,*,Erhan ŞAHİN², Sedat KAÇAR², Rıdvan BAĞCI³, Şerife KARAKAYA²,Dilek BURUKOĞLU DÖNMEZ², Varol ŞAHİNTÜRK²

¹Depatman Istoloji ak Anbrioloji, Fakilte Medsin, Atılım University, Ankara, Turkey²Depatman Istoloji ak Anbrioloji, Fakilte Medsin, Inivèsite Osmangazi, Ankara, Turkey ³Depatman IVF Inite Androloji Laboratwa, Adana City Education and Research Hospital, Adana, Turkey

Background/objektif:Hyperthyroidismki asosye ak rezilta nan ogmante pousantaj filtraj glomerulèr ak ogmante deklanchman renin-angiotensin-aldosterone. Se twoub nan Ca2 plis omeyostazi nan retikul andoplasmik (ER) ki asosye ak anpil maladi, ki gen ladan nefropati dyabetik akipètiwoyid. Kanal potansyèl reseptè tranzitwa 1 (TRPC1) se premye pwoteyin fanmi TRPC klone. Malgre ke li eksprime nan anpil kote nan laren, fonksyon li se ensèten. TRPC1 patisipe nan reglemante Ca2 plis omeyostazi, ak upregulation li yo ogmante nivo ER Ca2 plis, aktive repons lan pwoteyin depliye, ki mennen nan domaj selilè nan la.ren. Etid sa a te envestige wòl TRPC1 nanrennan rat ipètiwoyid an tèm de makè estrès ER ki se glikoz-reglemante pwoteyin 78 (GRP78), aktive transkripsyon faktè 6 (ATF6), (pwoteyin kinaz R (PKR) ki tankou endoplasmic reticulum kinase) (PERK), inositol ki mande anzim 1. (IRE1).

Materyèl ak metòd: Ven rat gason yo te asiyen nan gwoup kontwòl ak ipètiwoyid (n=10).Hyperthyroidismte pwovoke pa ajoute 12 mg / L thyroxine nan dlo pou bwè nan rat pou 4 semèn. Yo te mezire T3 ak T4 (fT3, fT4), TSH, nitwojèn ure nan san (BUN), ak kreyatinin san serom. Analiz istochimik nanrenseksyon pou chanjman mòfolojik ak tou analiz imunohistochimik ak Western blot nan seksyon ren yo te fèt pou GRP78, ATF6, PERK, IRE1, TRPC1 antikò.

Rezilta: TSH, BUN, ak nivo kreyatinin diminye pandan y ap nivo fT3 ak fT4 ogmante nan rat ipètiwoyid la. Analiz mòfolojik la te lakòz epesman manbràn fondamantal kapilè nan glomeruli ak tou lwès blot, ak rezilta imunohistochimik yo te montre yon ogmantasyon nan TRPC1, GRP78, ak ATF6 nan rat ipètiwoyid (p <>

Konklizyon: An konklizyon, nan etid nou an, nou te montre la pou premye fwa ke relasyon ki genyen ant estrès ER ak TRPC1, ak ekspresyon ogmante yo te lakòz domaj ren nan rat ipètiwoyid.

Mo kle:Hyperthyroidism, estrès retikul endoplasmik (ER), reseptè tranzitwa potansyèl kanonik 1 (TRPC1),ren, rat

1. Entwodiksyon

Triyodotironin (T3) ak tiroksin (T4) se òmòn tiwoyid ki nesesè pou devlopman nòmal ògàn ak fonksyon metabolik [1]. Anplis de sa, yo kontwole to kwasans, fonksyon ponp sodyòm/potasyòm, batman kè, tansyon, respirasyon, konsomasyon oksijèn, dijesyon, lipid, idrat kabòn ak metabolis pwoteyin, fonksyon sistèm nève santral, mouvman, ak fonksyon metabolik lòt glann andokrin [2] .

Hyperthyroidismgen anpil efè sou kolestewòl, trigliserid, lipid, oksidasyon, antioksidan, malondialdehyde (MDA), katalis anzim katalaz (CAT), anzim fwa, asid urik, ure, kreyatinin, ak chanjman istopatolojik nan fwa a ak ren [3]. Malfonksyònman tiwoyid afekte fizyoloji ak devlopman ren. Nan ka ipothyroidism kote glann tiwoyid la travay mwens, mas ren (rapò mas ren/kò) diminye, pandan ke nan ka a nanipètiwoyidkote glann nan travay di, mas ren ogmante [4]. Sepandan, ipètiroidism grav lakòz degradasyon pwoteyin ak finalman atrofi ren. Hyperthyroidism lakòz yon ogmantasyon nan sikilasyon san ren (RBF) ak pousantaj filtraj glomerulèr (GFR) [5]. Avèk ipètiwoyid, reabsòpsyon sodyòm nan tibil proximal la, basolateral Na plis /K plis ATPaz [6], apik Na plis /H plis modifye [7], ak Na plis /Pi cotransporter [8] deklanchman ogmante. Epitou, òmòn tiwoyid la aktive Na plus /Ca2 plus modifye a, petèt atravè chemen ki lye ak cAMP la, kidonk amelyore absòpsyon kalsyòm nan.ren[9].

Kalsyòm se yon dezyèm mesaje ki kontwole pi fò nan fonksyon selilè yo, tankou ekspresyon jèn ak omeyostazi selilè [10], lage nerotransmetè ak fonksyon newòn [11], metabolis, ak modulasyon nan lavi selil [12]. Fanmi chanèl potansyèl reseptè pasajè (TRP) se youn nan pi gwo fanmi chanèl kasyon yo. Fanmi TRP a divize an gwoup TRPC (kanonik), TRPM (melastatin), TRPP (polycystin), TRPV (vanilloid), TRPML (bucolik), TRPA (ankyrin), ak TRPN (tankou NOMPC). Li konnen ke TRPC pwoteyin fòme Ca2 plis pèmeyab, chanèl kasyon nonselective e Se poutèt sa jwe yon wòl enpòtan nan Ca2 plis transdiksyon siyal. Fanmi TRPC mamifè a gen sèt manm yo rele TRPC1-TRPC7 [13]. Manm fanmi TRPC yo eksprime nan diferan pati nanren. TRPC1, ki jwe yon wòl espesyalman nan nefropati dyabetik, eksprime prèske tout kote, nan selil ren mezanjyal, glomeruli, selil tubul proximal, ak nan pati mens ki desann nan bouk Henle a, men fonksyon egzak li yo toujou enkoni [14].

Gwo maladi Ca2 plis ka deklanche domaj selil ki te koze pa estrès retikul endoplasmik (ER) an repons a divès kondisyon patolojik [5,15]. Maladi nan Ca2 plis omeyostaz nan ER yo asosye ak anpil maladi [16]. ER se yon òganèl entraselilè ki enpòtan pou reglemante Ca2 plis omeyostazi ak sentèz pwoteyin ak plisman. Modulasyon ekspresyon/fonksyon Ca2 plis chanèl pèmeyab tou enfliyanse konsantrasyon entraselilè Ca2 plis ak konsekans Ca2 plis pwosesis ki gen rapò tankou pwopagasyon selil, estrès ER, apoptoz, ak otofaji. Estrès ER se yon kondisyon ki deranje balans redox ak luminal Ca2 plis omeyostazi, sa ki lakòz akimilasyon pwoteyin depliye / misfolded. Aktivasyon an nan repons pwoteyin depliye (UPR) lakòz yon ogmantasyon nan glikoz-reglemante pwoteyin 78 (GRP78), chaperone nan ER, ki ogmante kapasite nan plisman pwoteyin nan ER la [17]. Aktivasyon nan estrès ER inisye UPR evolisyonèman konsève pa twa siyal transducer prensipal yo nan manbràn ER: PERK, IRE1, ak ATF6. Malfonksyònman selilè ak lanmò selil yo rive nan kondisyon kote estrès ER la kwonik pwolonje epi chaj pwoteyin sou ER la depase anpil. Li konnen youn nan chemen ki lakòz lanmò selil yo obsève nan maladi kwonik tankou ipoksi, blesi iskemi/repèfizyon, neurodegeneration, maladi kè, ak dyabèt se akòz estrès ER [12].

Nan limyè de tout enfòmasyon sa yo, nou vize mennen ankèt sou relasyon ki genyen ant chemen transduction siyal TRPC1 ak ER-estrès nanren, ki afekte jeneralman nanipètiwoyid.

Klike souCistanche itilize pou sentòm maladi ren

2. Materyèl ak metòd

2.1. Bèt

Etid nou an te apwouve pa Eskişehir Osmangazi Inivèsite lokal Animal Etik Komite a (desizyon No. 634 nan reyinyon an No. 117 sou 30.11.2017) epi swiv Gid la pou Swen ak Itilizasyon Bèt Laboratwa pibliye pa Enstiti Nasyonal Sante. Ven adilt (7-8 semèn) Wistar albinos rat gason, yo te jwenn nan Sant rechèch eksperimantal medikal ak chirijikal (TICAM), yo te kenbe nan 24 ± 2 degre ak 55 ± 5 pousan imidite pou 12 èdtan nan yon anviwònman limyè / fè nwa pandan eksperyans la. Bèt yo te mete nan kaj polikarbonat pou 2 semèn anvan eksperyans lan epi yo te pèmèt yo ajiste nan kondisyon anbyen, ak Lè sa a, owaza asiyen nan gwoup kontwòl ak ipètiwoyid. Gwoup kontwòl la (ethyroid) te manje ak yon manje estanda rat ak dlo tiyo pandan eksperyans la. Gwoup ipètiwoyid la te etabli ak yon manje rat estanda pou 4 semèn ak bwè dlo tiyo ki gen 12 mg / L tiroksin [18]. Nan fen katriyèm semèn nan, rat yo te euthanized pa piki nan miskilè ketamin (45 mg / kg) ak xylazine (5 mg / kg). Menm lè a, yo te pran echantiyon san nan tout bèt yo. Tout antyerenyo te retire pa pwosesis nefrektomi. Lè sa a, dwa ak gòchrennan rat yo te koupe longitudinal an de moso. Tou de moso ren dwat ak gòch yo te itilize pou analiz lwès blot ak mikwoskospi limyè

2.2. Analiz byochimik

Yo te santrifuje echantiyon san nan 11,000 rpm pou 10 minit. Sera yo te mete nan tib epi estoke nan -80 degre jiskaske jou analiz la. Lè sa a, yo te mezire nivo T3 san serom (fT3), T4 gratis (fT4), ak òmòn ki ankouraje tiwoyid (TSH) lè l sèvi avèk teknik ELISA dapre pwotokòl manifakti a. Lektè Microplate BioTek 800 (BioTek Instruments, Inc., Winooski, VT, USA) te li nivo ekspresyon Optical Density (OD) nan 450 nm, Lè sa a, rezilta yo te kalkile. Twous komèsyal yo pou fT3 (YLA0127RA), fT4 (YLA0239RA), ak TSH (YLA0047RA) yo te achte nan Shanghai YL Biotech, Lachin. Epitou, Cobas Integra 400 Plus Roche (Roche Diagnostics Ltd., Swis) te mezire nivo nitwojèn ure nan san (BUN) ak nivo kreyatinin ak metòd fotometri absorbans.

2.3. Evalyasyon histolojik

renmoso yo te pran pou egzamine nan nivo mikwoskòp limyè yo te fikse nan 10 pousan fòmaldeyid pou 48 èdtan. Apre pwosesis tisi woutin, yo te jwenn blòk parafin. Lè sa a, yo te pran seksyon seri 5 µm epi yo tache ak teknik peryodik asid-Schiff (PAS). Yo te fè evalyasyon mikwoskopik pou glomeruli ak tib anba yon mikwoskòp Olympus BX-51 (Olympus America, Inc., New York, USA). Seksyon yo te bay nòt nan yon fason avèg, semi-kantitatif lè l sèvi avèk yon echèl nòt etabli. Pou chak rat nan gwoup yo, yo te egzamine omwen 10 gwo pouvwa (×1000). Pousantaj glomeruli ki te parèt epesman manbràn sousòl glomerulè yo te bay nòt jan sa a: 0=okenn, 1 Mwens pase oswa egal a 25 pousan, 2=25 pousan a 50 pousan, 3 =50 pousan a 75 pousan. , 4 Pi gran pase oswa egal a 75 pousan [19]. Epesè manbràn sousòl glomerulè a ​​(µm) te mezire pa ZEISS ZEN 3.0 Microscope Software (Carl Zeiss Microscopy GmbH ZEISS Group, München, Almay).

2.4. Evalyasyon imunohistochimik

Seksyon blòk parafin soti nan chakrentisi yo te pran sou glisad ki chaje pozitivman. Apre deparafinizasyon, glisad yo te transfere nan seri etanòl degrade ak Lè sa a, xylol. Seksyon yo te enkube ak 3 pousan oksijene idwojèn pou anpeche aktivite andojèn peroksidaz. Apre rekipere antijèn ak tanpon sitrat, seksyon yo te delimite pa yon plim pap, lave 3 × 5 min ak saline tampon fosfat (PBS), ak Lè sa a, bloke ak Ultra V-block pou 1 èdtan nan tanperati chanm. Seksyon yo te enkube ak lapen poliklonal ATF6 antikò (ab203119, Abcam Inc., Cambridge, USA), lapen poliklonal IRE1 antikò (YID5384, Shanghai YL Biotech Co, Ltd, Lachin), sourit monoklonal PERK antikò (sc377400, Santa Cruz Biotechnology Inc). ., Heidelberg, Almay) ak sourit monoklonal TRPC1 antikò (sc133076, Santa Cruz Biotechnology Inc.) lannwit lan nan plis 4 degre nan kondisyon imidite. Apre lave 3 × 5 min ak PBS, seksyon yo te enkube ak antikò apwopriye segondè (sc2359, sc2781, Santa Cruz Biotechnology, Inc.) pou 1 èdtan nan tanperati chanm. Lè sa a, yo te lave ankò pou 3 × 5 min ak PBS ak counterstained ak ematoksilin. Slides yo te aplike coverslip lè l sèvi avèk medya ki baze sou dlo. Egzamen mikwoskopik yo te fèt lè l sèvi avèk yon mikwoskòp Olympus BX51 ak sistèm imaj asistans òdinatè (Olympus America, Inc., New York, USA).

Tout seksyon immunostained yo te evalye nan yon fason kode pa otè prensipal la, ki moun ki te avèg nan non an gwoup nan eksperyans. Ekspresyon TRPC1, ATF6, IRE1, ak PERK yo te detekte sitou nan tubul yo ak / oswa glomeruli. Ekspresyon yo te detèmine semiquantitatively selon pousantaj pozitifrenseksyon yo. Entansite tach yo te klase nan kat klas: pa gen okenn ({{0}}), fèb (1), modere (2), ak fò (3). Pousantaj seksyon histolojik pozitif nan ren yo te klase kòm 4 klas: 0 (0 pousan), 1 (1 pousan -10 pousan), 2 (11 pousan -49 pousan) ak 3 (50 pousan -100 pousan). Nòt total la se te yon pwodwi de nòt ak nòt final la nan yon echantiyon te mwayèn nan 10 jaden mikwoskopik. TRPC1, ATF6, IE1, ak PERK te evalye selon metòd rapòte [20].

Fonksyon Cistanche-ren

2.5. Analiz Western blot

Pou detèmine chanjman ki fèt nan kantite pwoteyin espesifik nan larentisi nanipètiwoyidak gwoup kontwòl, ren yo te koupe an ti moso, epi yo te fè omojènizasyon lè yo ajoute lysis tanpon RIPA nan 2 mL tib pèl. Apre omojenizasyon, tib yo te enkube a 4 degre pou omwen 30 min, epi answit lisat tisi yo te santrifuje nan 4 degre, 15,000 g pou 20 min. Supernatant ki gen pwoteyin total yo te transfere nan yon nouvo tib. Yo te fè detèminasyon pwoteyin nan supernatant la ak aparèy Qubit 2.0 (Invitrogen Inc., Waltham, MA, USA). Yo te chaje senkant µg pwoteyin nan chak pi, yo te fè elektwoforèz ak SDS-PAGE Bio-Rad MiniTrans Blot (Bio-Rad Laboratories, Inc., California, USA), epi yo te transfere nan manbràn PVDF ak aparèy Bio-Rad Trans Turbo. Manbràn yo te bloke ak 5 pousan bovine serum albumin (BSA) pou 1 èdtan nan tanperati chanm ak Lè sa a, enkubasyon ak sourit monoklonal GRP78 antikò (sc166490, Santa Cruz Biotechnology Inc.), lapen poliklonal ATF6 antikò (ab203119, Abcam Inc., Cam). pon, USA), lapen polyclonal IRE1 antikò (YID5384, Shanghai YL Biotech Co Ltd, Lachin), sourit monoclonal PERK antikò (sc377400, Santa Cruz Biotechnology Inc.), sourit monoklonal TRPC1 antikò (sc133076, Santa Cruz Biotechnology, Inc.). ) ak antikò monoklonal -actin sourit (sc47778, Santa Cruz Biotechnology, Inc.) (pou kontwòl loading) lannwit lan nan 4 degre. Apre sa, manbràn yo te lave pou 3 × 10 min ak solisyon lave (TBST), ki te swiv pa enkubasyon ak antikò segondè apwopriye (sc2005, sc2030, Santa Cruz Biotechnology Inc.). Apre manbràn yo te lave pou 3 × 10 min ak TBST, nivo ekspresyon nan pwoteyin nan bann imunoreactive yo te kontwole pa sistèm nan D (C-Digit, Licor, Cambridge, UK). Rezilta imaj yo te analize ak pwogram Image J 1.49v.

2.6. Analiz estatistik

Tout analiz estatistik yo te fèt ak pwogram pakè estatistik IBM SPSS 21.0 (IBM Corp., Armonk, NY, USA). Eksperyans Western blot la te repete twa fwa pou chak gwoup. Yo te aksepte nivo siyifikasyon an kòm p < 0.05.="" yo="" te="" itilize="" tès="" shapiro-wilk="" pou="" detèmine="" distribisyon="" nòmal="" done="" yo.="" yo="" te="" itilize="" tès="" omojèn="" nan="" (tès="" levene)="" pou="" evalye="" si="" gwoup="" yo="" te="" gen="" divèjans="" egal.="" echantiyon="" endepandan="" t-tès="" te="" fèt="" pou="" done="" ki="" montre="" distribisyon="" nòmal.="" yo="" te="" fè="" tès="" mann-whitney="" u="" pou="" done="" ki="" montre="" distribisyon="" ki="" pa="">

3. Rezilta yo

3.1. Rezilta byochimik

Nivo serik fT3, fT4, ak TSH, BUN serom, ak nivo kreyatinin nan gwoup rat yo montre nan Figi 1. Rezilta yo sijere ke nivo fT3 ak fT4 ogmante anpil nan gwoup ipètiwoyid la konpare ak gwoup kontwòl la (tou de p < {{5="" }}.05).="" anplis="" de="" sa,="" yo="" te="" jwenn="" yon="" diminisyon="" enpòtan="" nan="" nivo="" tsh="" nan="" gwoup="" ipètiwoyid="" la="" konpare="" ak="" gwoup="" kontwòl="" la="" (p=""><{12}}.05) (figi="" 1a).="" nivo="" bun="" serom="" (figi="" 1b)="" ak="" kreyatinin="" (figi="" 1c)="" diminye="" anpil="" nan="" gwoup="" ipètiwoyid="" la="" konpare="" ak="" gwoup="" kontwòl="" la="" (tou="" de="" p=""><>

3.2. Rezilta istochimik

Chanjman histolojik nanrennan gwoup rat yo montre nan Figi 2. Istoloji ren (glomeruli yo, tubules, ak estrikti vaskilè) te tipik nan gwoup kontwòl la (Figi 2A). Sepandan,ipètiwoyidte lakòz epesman manbràn fondamantal kapilè nan glomerulus la (Figi 2B). Glomerular epesè manbràn sousòl ogmante siyifikativman nan gwoup ipètiwoyid la konpare ak gwoup kontwòl la (Figi 3-4), (p <0.05). pa="" te="" gen="" okenn="" diferans="" evidan="" ant="" gwoup="" kontwòl="" ak="" ipètiwoyid="" an="" tèm="" de="" istoloji="">

Figi 1. Triyodotironin gratis (fT3), tiroksin gratis (fT4), ak nivo òmòn ki ankouraje tiwoyid (TSH) nan gwoup rat yo (a). * Diferan ak gwoup kontwòl la (p < 0.05).="" serom="" bun="" (b)="" ak="" kreyatinin="" (c)="" nivo="" gwoup="" rat="" yo.="" *="" diferan="" de="" gwoup="" kontwòl="" la="" (p=""><0.001), yo="" te="" fè="" yon="" tès="" endepandan="" echantiyon="">

Figi 2. Micrographs derentisi kontwòl (A) ak gwoup ipètiwoyid (B). Nan gwoup kontwòl la, istoloji ren tipik yo wè (A). Nan gwoup ipètiwoyid,ipètiwoyidte lakòz epesman manbràn fondamantal kapilè nan glomerulus la. Yo te obsève epesman manbràn fondamantal kapilè nan glomerulus la (flèch) (B). Pa gen okenn diferans evidan nan medulla nan ren nan tou de gwoup rat. (Peryodik asid-Schiff (PAS) tach). Ba yo se 20 µm ak 50 µm.

3.3. Rezilta imunohistochimik

Reyaksyon imunohistochimik TRPC1, GRP78, ATF6, IRE1, PERK, ak ekspresyon yo yo detèmine semi-kantitativman dapre pousantaj pozitif.rennan gwoup rat yo (Figi 5-9). Epitou, varyasyon mwayèn yo montre nan Tablo. Konpare ak gwoup kontwòl TRPC1, GRP78, ATF6, IRE1, ak ekspresyon pwoteyin PERK ogmante siyifikativman nan gwoup ipètiwoyid nan glomerulus ak tubules (Figi 5-9) (p <{8}}, 000).="" rezilta="" yo="" te="" montre="" ke="" trpc1="" te="" eksprime="" nan="" tou="" de="" estrikti="" glomerular="" ak="" echafodaj="" ki="" nan="" gwoup="" kontwòl="" la="" (figi="" 5-1ab)="" ak="" ekspresyon="" li="" te="" ogmante="" nan="" gwoup="" la="" ipètiwoyid="" (figi="" 5-2ab).="" grp78="" pa="" te="" eksprime="" nan="" gwoup="" kontwòl="" la="" (figi="" 6-1="" ab)="" ak="" reyaksyon="" pozitif="" li="" yo="" te="" obsève="" nan="" tou="" de="" tubules="" ak="" glomeruli="" nan="" gwoup="" la="" hyperthyroid="" (figi="" 6-2="" ab);="" tandiske,="" atf6="" pa="" te="" eksprime="" nan="" gwoup="" kontwòl="" la="" (figi="" 7-1="" ab),="" ekspresyon="" li="" yo="" te="" reyaji="" pozitivman="" nan="" tou="" de="" tubules="" ak="" glomeruli="" nan="" gwoup="" la="" ipètiwoyid="" (figi="" 7-2="" ab).="" ire1="" pa="" te="" eksprime="" nan="" gwoup="" kontwòl="" la="" (figi="" 8-1="" ab),="" epi="" yo="" te="" obsève="" reyaksyon="" pozitif="" li="" nan="" tou="" de="" tubules="" ak="" glomeruli="" nan="" gwoup="" ipètiwoyid="" la="" (figi="" 8-2="" ab).="" lè="" nou="" konsidere="" ke,="" perk="" pa="" te="" eksprime="" nan="" gwoup="" kontwòl="" la="" (figi="" 9-1ab),="" ekspresyon="" nan="" perk="" te="" limite="" a="" tubul="" nan="" gwoup="" la="" ipètiwoyid="" (figi="">

Figi 3. Konparezon epesè manbràn glomerular sousòl ant gwoup kontwòl ak ipètiwoyid. * Diferan de gwoup kontwòl la (p < 0.05),="" yo="" te="" fè="" yon="" tès="" endepandan="" echantiyon="">

Figi 4. Konparezon epesè manbràn sousòl glomerulè ki fè nòt ant gwoup kontwòl ak ipètiwoyid. * Diferan ak gwoup kontwòl la (p < 0.05),="" yo="" te="" fè="" tès="" mann–whitney="" u="">

3.4. Rezilta Western blot

Rezilta Western blot (Figi 10) te montre yon ogmantasyon estatistik enpòtan nan ekspresyon TRPC1, PERK, ATF6, ak GRP78 nan gwoup ipètiwoyid la konpare ak gwoup kontwòl la (p <{7}}.05). ogmantasyon="" nan="" ire1="" te="" estatistik="" siyifikatif,="" byenke="" pa="" otan="" ke="" lòt="" nivo="" pwoteyin="" (p=""><>Hyperthyroidismte lakòz yon ogmantasyon nan ekspresyon GRP78 (2.16 pliye), ATF6 (2.82 pliye), PERK (1.95 pliye), IRE1 (1.60 pliye), ak TRPC1 (1.53 pliye) lè yo konpare ak gwoup kontwòl la.

4. Diskisyon

Nan etid sa a, nou sijere pou premye fwa ki jan tisi ren yo afekte nanipètiwoyidan tèm de wòl yo nan estrès ER ak kanal TRPC1 nan pwosesis sa a. Nan etid nou an, ekspresyon TRPC1 ogmante te lakòz yon ogmantasyon nan Ca2 plis konsantrasyon nan selil la, an patikilye, epesman manbràn fondamantal kapilè ak ogmante ekspresyon GRP78 nan tubules, espesyalman nan glomeruli. Nou panse ke estrès ER jwe yon wòl aktif nan pwosesis sa a nan domaj selilè, espesyalman atravè transducer siyal ATF6 ak PERK nan chemen UPR (repons pwoteyin depliye).

Kòm yo wè sa nan anpil etid tankou nan etid nou an [18], fT3 ak fT4 valè ogmante nan ka a nan hyperthyroidism, pandan y ap nivo TSH diminye. Nenpòt malfonksyònman nan tiwoyid la ka afekte pwodiksyon fT3 ak fT4 ki ka lye nan divès patoloji nan tout kò a [21]. Larenjwe yon wòl enpòtan anpil nan eskresyon pwodwi dechè ak toksin tankou ure, kreyatinin, ak asid urik. Evalyasyon fonksyon ren enpòtan nan jesyon pasyan ki gen maladi ren oswa patoloji ki afekte fonksyon ren yo. Tès fonksyon ren yo gen itilite nan idantifye prezans maladi ren, kontwole repons ren yo nan tretman, ak detèmine pwogresyon maladi ren yo. Nivo kreyatinin serik diminye nan hyperthyroidism, pa sèlman akòz yon ogmantasyon nan GFR, men tou yon ogmantasyon nan destriksyon nan misk. Epitou, diminisyon nan konsantrasyon BUN nanipètiwoyidse te panse yo dwe akòz ekspresyon diminye nan akwaporin 1 ak 2. Se poutèt sa, BUN ak nivo kreyatinin diminye nan anpil etid [22] tankou nan etid nou an. Anba kondisyon patolojik, selil yo ka pèdi proteostaz sa ki lakòz akimilasyon nan pwoteyin depliye ak misfolded nan ER a, ki deklanche UPR oswa estrès ER [23].

Figi 5. Tach imunohistochimik pou TRPC1 nan gwoup kontwòl (1A-B) ak ipètiwoyid (2A-B) nanrentisi. Ekspresyon TRPC ogmante nan gwoup ipètiwoyid la konpare ak gwoup kontwòl la (flèch). Ba yo 50 µm. * Diferan ak gwoup kontwòl la (p < 0.000),="" yo="" te="" fè="" tès="" mann–whitney="" u="">

Figi 6. Tach imunohistochimik pou GRP78 nan gwoup kontwòl (1A-B) ak ipètiwoyid (2A-B) nanrentisi. Ekspresyon GRP78 ogmante nan gwoup ipètiwoyid (flèch). Ba yo se 50 µm. * Diferan ak gwoup kontwòl la (p < 0.000),="" yo="" te="" fè="" tès="" mann–whitney="" u="">

Figi 7. Tach imunohistochimik pou ATF6 nan gwoup kontwòl (1A-B) ak ipètiwoyid (2A-B) nanrentisi. Ekspresyon ATF6 ogmante nan gwoup ipètiwoyid (flèch). Ba yo se 50 µm. * Diferan ak gwoup kontwòl la (p < 0.000),="" yo="" te="" fè="" tès="" mann–whit="" ney="" u="">

Figi 8. Tach imunohistochimik pou IRE1 nan gwoup kontwòl (1A-B) ak ipètiwoyid (2A-B) nanrentisi. Ekspresyon IRE1 ogmante nan gwoup ipètiwoyid (flèch). Ba yo se 50 µm. * Diferan ak gwoup kontwòl la (p < 0.000),="" yo="" te="" fè="" tès="" mann–whitney="" u="">

Figi 9. Tach imunohistochimik pou PERK nan gwoup kontwòl (1A-B) ak ipètiwoyid (2A-B) nanrentisi. Ekspresyon PERK ogmante nan gwoup ipètiwoyid (flèch). Ba yo 50 µm. * Diferan ak gwoup kontwòl la (p < 0.000),="" yo="" te="" fè="" tès="" mann–whitney="" u="">

Maladi nan ER ak cytosolic Ca2 plis omeyostaz yo asosye ak anpil maladi, ki gen ladanren. Dezòd nan ER Ca2 plis omeyostazi deklanche UPR, ki anpeche plis akimilasyon nan pwoteyin ki fèk sentèz nan ER. Kidonk, li montre yon mekanis defans prosurvival pa diminye chay la sou ER [24].

Yo konnen plizyè faktè pwovoke estrès ER ak deklancherendomaj. Estrès ER nan ren an ka lakòz diferansyasyon selil epitelyal tubulaires pa tranzisyon an mesenchymal soti nan epitelyal la, pèt selil epitelyal tubulaires ren pa apoptoz, epi finalman patoloji ren ki gen ladan pèt nefwon, ki diminye kapasite filtraj nan ren an. Nan etid la nan Dickhout et al., ER estrès pwovoke epithelial-mesenchymal tranzisyon pwosesis nan liy selil ren proximal tubul HK -2 pou maladi ren kwonik yo te montre [25]. Anplis de anpil etid [9] jan yo wè nan etid nou an,ipètiwoyidte lakòz epesman manbràn fondamantal kapilè nan glomerulus la. Li te sigjere ke ogmante epesman manbràn fondamantal kapilè nan glomeruli yo te fòme kòm yon rezilta nan pwosesis tranzisyon epithelial-mesenchymal akòz ekspresyon an ogmante nan GRP78 ak konvètisè siyal ER-estrès. Yo montre enpòtans estrès ER nan kwonikrenmaladi nan anpil kondisyon patolojik. Nan modèl dyabèt strèptozotosin la nan sourit C57BL/6, estrès ER te devlope, ak nefropati grav ki te fèt nan venndezyèm mwa a te asosye ak règleman CHOP/GADD153, youn nan konpozan chemen apoptoz ER estrès medyatè [26]. ]. Nan pasyan ki gen sendwòm nefrotik, nefropati IgA, glomerulonefrit pwoliferatif mezanjyal prensipal, ak nefropati manbràn, ki gen ladan pasyan ki gen minimòm sentòm, GRP78 ak yon molekil endoplasmik endoplasmik (ER) chaperone molekil oksijèn-reglemante pwoteyin 150 (ORP150) te konpare ekspresyon iminitè ogmante kontwòl iminitè. Ekspresyon CHOP / GADD153 te ogmante tou epi yo te obsève lokalizasyon nikleyè nan epithelium tubul proximal pasyan nefrotik. Nan selil ren moun ki ekspoze a nivo segondè nan albumin serik, yo te obsève endiksyon estrès ER epi yo montre yo lakòz apoptoz atravè chemen CHOP/GADD153 [25]. Yo te jwenn repons estrès tubulointerstitial ER a nan maladi glomerulè ak apoptoz selil tubulèr ki asosye ak nefroz puromicin amino nukleozid, surcharge pwoteyin, ak proteinuri ki asosye ak nefropati dyabetik eksperimantal oswa imen [27]. Lorz et al. rapòte ke paracetamol, yon analgesic, ak ajan antipiretik, lakòz domaj tubulaires ren ak apoptoz akòz estrès ER [28]. Paracetamol pwovoke yon repons estrès ER ki gen ladan endiksyon CHOP ak klivaj caspase -12. Akimilasyon twòp nan pwoteyin sekretè pwovoke estrès ER, sa ki lakòz domaj podocyte [29]. Atak konpleman an pwovoke tou estrès ER epi aktive chemen PERK ki mennen nan domaj selil epitelyal glomerulè yo. Tout rezilta sa yo montre ke estrès ER se youn nan kòz prensipal domaj nan ren ak repons estrès ER la se yon mekanis defans kont.rendomaj [30]. Nan etid nou an, nou panse ke 12 mg / L ipètiwoyidis tiwoksin-induit lakòz ER estrès nan tisi ren, ak domaj la ki te koze paipètiwoyidnan tisi ren ki asosye ak règleman espesyalman ATF6 ak PERK.

Premye kanal TRP mamifè klonaj la, kanal iyon TRPC1, yo jwenn nan selil ki nan ER a, manbràn plasma, vesik intraselilè, ak silyè prensipal la. Li eksprime prèske tout kote nan tisi imen ak wonjè. TRPC1 reyaji ak divès gwoup pwoteyin, ki gen ladan subinite chanèl ion, reseptè, ak pwoteyin sitosol pou medyatè efè li sou siyal Ca2 plis. Li aji kòm yon chanèl kation nonselective nan chemen ki kontwole Ca2 plis foul an repons a deklanchman reseptè sifas selil yo. Atravè fonksyon sa a, pwopagasyon, siviv, diferansyasyon, sekresyon, ak migrasyon selil, osi byen ke karakteristik tankou kòn kwasans newòn ak fizyon myoblast nan fonksyon selil kimotwòp espesifik yo disponib tou [12].

Gen anpil etid sou chanjman nan ekspresyon TRPC1 nan anpil kondisyon patolojik ki lakòz estrès ER. Sukumaran et al. te montre ke te gen yon korelasyon ant estrès ER ak ekspresyon TRPC1 ki ta ka chanje siviv selil nan glann saliv la. Yo te eksprime ke ekspresyon TRPC1 diminye anba kondisyon estrès ER epi tou lanmò selil akòz estrès ER te depann sou ekspresyon CHOP. Ogmantasyon estrès ER ak enfiltrasyon nan selil glann saliv nan TRPC 1-/- sourit knock-out yo te obsève [16].

Figi 10. LarenNivo ekspresyon pwoteyin GRP78, ATF6, TRPC1, IRE1, ak PERK ak graf chanjman pliye yo. Ogmantasyon nan tout pwoteyin te estatistik siyifikatif (* p < 0.05),="" yo="" te="" fè="" yon="" echantiyon="" endepandan="" tès="">

Kilèrennan modèl rat dyabetik yo te egzamine, li te rapòte ke ekspresyon mRNA TRPC1 te diminye [31]. Nan pasyan ki gen nefropati dyabetik oswa rat dyabetik Zucker konpare ak kontwòl, diminye ekspresyon TRPC1 sijere ke TRPC1 afekte devlopman nefropati dyabetik [32]. TRPC1 jwe yon wòl enpòtan anpil nan antretyen nan ER Ca2 plis omeyostazi, ak fonksyon redwi mennen nan aktivasyon pwolonje nan chemen UPR la ak deranje aktivasyon nan AKT, ki Lè sa a, mennen nan neurodegeneration. Yo te obsève yon diminisyon nan ekspresyon TRPC1 nan modèl maladi Parkinson sourit neurotoxin-induit. Ogmantasyon ekspresyon TRPC1 ogmante siviv newòn pa reglemante chemen AKT/mTOR, malgre estrès ER ak UPR ki te koze pa neurotoxin [33]. Li et al. rapòte ke ekspresyon TRPC1 te ogmante tou nan Namptin-induced cardiomyocyte hypertrophy depann sou tan. Lè yo te fè jèn TRPC1 an silans, li te lakòz anpèchman ipètrofi kadyak nikotinamid fosforibosil transferaz. Sepandan, pa ekspresyon TRPC1, yo te panse nikotinamid fosforibosiltransferaz pwovoke ipètrofi cardiomyocyte pa yon chemen estrès ER pwovoke. Soti nan pwen de vi sa a, silans nan jèn TRPC1 la ka jwe yon wòl pwoteksyon nan prevansyon ipètrofi kadyak [34]. Nan etid nou an, estrès ER ak TRPC1 te ogmante tou anpil. Sa a sijere ke kapilè manbràn fondamantal epesman ki te koze pa ogmante estrès ER nan tisi ren akòzipètiwoyidse akòz ogmante ekspresyon nan TRPC1.

Etid sa a gen kèk limit. Yo ta ka itilize sourit jenetikman modifye olye pou yo modèl rat ipètiwoyidism ki pwovoke tiwoksin. Avèk pipi kolekte lè l sèvi avèk kaj metabolik, kèkrentès fonksyon ta ka yo te mezire tou nan pipi. Chanjman nan nivo estrès ER yo ta ka envestige lè l sèvi avèk inibitè TRPC1 la.

Kòm yon rezilta nan revizyon literati nou an, efè hyperthyroidism sou relasyon ki genyen ant estrès ER ak kanal TRPC1 nan tisi ren yo te premye demontre nan etid sa a. Li te detèmine keipètiwoyidte lakòz yon ogmantasyon nan ekspresyon TRPC1 ki pwovoke estrès ER. Nou sijere ke diminye ekspresyon TRPC1 ka yon estrateji potansyèl terapetik pou ipètiwoyid-induitrene petèt lòt domaj ògàn.

Referans

1. Kim D, Kim W, Joo SK, Bae JM, Kim JH et al. Ipothyroidism subklinik, ak fonksyon tiwoyid ki ba-nòmal yo asosye ak steatohepatitis ki pa alkòl ak fibwoz. Klinik Gastroenteroloji ak Epatoloji 2018; 16 (1): 123-131. DOI: 10.1016/j.cgh.2017.08.014

2. Bolkiny Y, Toulson E, El-Atrsh A, Akela M, Farg E. Costus rasin ekstrè soulaje san byochimik deranjman nan eksperimantal-induit hypo-akipètiwoyidnan sourit. Anyèl rechèch ak revizyon nan byoloji 2019; 31 (5): 1-10. DOI: 10.9734/arb/2019/v31i530063

3. Sakr S, Abdel-Ghafar FR, Abo-El-Yazid SM. Selenyòm amelyore epatotoksisite carbimazole-induit ak estrès oksidatif nan rat albinos. Journal Coastal Life Medicine 2015; 3 (2): 930-936. DOI: 10.1016/j.jtemb.2010.07.002

4. Vargas F, Moreno JM, Rodríguez-Gómez I, Wangensteen R, Osuna A, et al. Fonksyon vaskilè ak ren nan twoub tiwoyid eksperimantal. Ewopeyen Journal of andokrinoloji 2006; 154 (2): 197-212. DOI: 10.1530/tee.1.02093

5. Rhee CM. Entèraksyon ki genyen ant tiwoyid akrenmaladi: yon BECA de prèv la. Opinyon aktyèl nan andokrinoloji 2016; 23 (5): 407-415. DOI: 10.1097/Med.0000000000000275

6. Wijkhuisen A, Djouadi F, Vilar J, Merlet-Benichou C, Bastin J. Òmòn tiwoyid kontwole devlopman nan anzim metabolis enèji nan rat proximal convoluted tubul. Ameriken Journal of Fizyoloji-Renal Fizyoloji 1995; 268 (4): 634-642. DOI: 10.1152/ajprenal.1995.268.4.F634

7. Baum M, Dwarakanath V, Alpern RJ, Moe OW. Efè òmòn tiwoyid sou kortik ren neonatal Na plis / H plis antiporter. Kidney International 1998; 53 (5): 1254-1258. DOI: 10.1046/j.1523-1755.1998.00879.x

8. Alcalde AI, Sarasa M, Raldúa D, Aramayona J, Morales R et al. Wòl òmòn tiwoyid nan règleman transpò fosfat ren nan rat jèn ak ki gen laj. Andokrinoloji 1999; 140 (4): 1544-1551. DOI: 10.1210/endo.140.4.6658

9. Iglesias P, Bajo MA, Selgas R, Díez JJ. Disfonksyon tiwoyid ak maladi ren: yon aktyalizasyon. Revizyon nan andokrin ak maladi metabolik 2017; 18 (1): 131-144. DOI:

10.1007/s11154-016-9395-710. Selvaraj S, Watt JA, Singh BB. TRPC1 inibit koripsyon selil apoptotik pwovoke pa neurotoxin dopaminergic MPTP/MPP plus. Selil Kalsyòm 2009; 46 (3): 209-218. DOI: 10.1016/j.ceca.2009.07.008

11. Goda Y, Südhof TC. Règleman kalsyòm nan lage nerotransmeteur: fiable enfidèl? Opinyon aktyèl nan Biyoloji selilè 1997; 9 (4): 513-518. DOI: 10.1016/s0955-0674(97)80027-0

12. Sukumaran P, Schaar A, Solèy Y, Singh BB. Wòl fonksyonèl nan chanèl TRP nan modile estrès ER ak otofaji. Selil Kalsyòm 2016; 60 (2): 123-132. DOI: 10.1016/j.ceca.2016.02.012

13. Goel M, Sinkins WG, Zuo CD, Estacion M, Schilling WP. Idantifikasyon ak lokalizasyon chanèl TRPC nan rat laren. Ameriken Journal of Fizyoloji-Renal Fizyoloji 2006; 290 (5): 1241-1252. DOI: 10.1152/ajprenal.00376.2005

14. Chubanov V, Kubanek S, Fiedler S, Mittermeier L, Gudermann T et al. Fonksyon ren chanèl TRP nan sante ak maladi. Nan: Emir TLR (editè). Nerobyoloji nan chanèl TRP. 1ye ed. Boca Raton, Florid, USA: CRC Press/Taylor & Francis; 2017. pp 187-212.

15. Jeschke MG, Gauglitz GG, Song J, Kulp GA, Finnerty CC et al. Kalsyòm ak ER estrès medyatè apoptoz epatik apre aksidan boule. Journal of Cellular and Molecular Medicine 2009; 13 (8b): 1857-1865. DOI: 10.1111/j.1582-4934.2009.00644.x

16. Sukumaran P, Solèy Y, Zangbede FQ, Nascimento da Conceicao V, Mishra B et al. Ekspresyon TRPC1 ak fonksyon anpeche estrès ER ak lanmò selil nan selil glann saliv. FASEB BioAdvanc es 2019; 1 (1): 40-50. DOI: 10.1096/fab.1021

17. Zhao Y, Yan Y, Zhao Z, Li S, Yin J. Chanjman dinamik makè chemen estrès retikul andoplasmik GRP78 ak CHOP nan ipokanp sourit dyabetik. Brain Research Bulletin 2015; 111: 27-35. DOI: 10.1016/j.brainresbull.2014.12.00618. Araujo A, Schenkel P, Enzveiler A, Fernandes T, Partita W et al. Wòl nan siyal redox nan ipètrofi kadyak pwovoke pa eksperimantalipètiwoyid. Journal of Molekilè andokrinoloji 2008; 41 (6): 423-430. DOI: 10.1677/JME-08-002419. Wang Z, fè Carmo JM, Aberdein N, Zhou X, Williams JM et al. Entèraksyon sinèrjetik nan tansyon wo ak dyabèt nan fè pwomosyon aksidan ren ak wòl nan estrès retikul andoplasmik. Tansyon wo 2017; 69 (5): 879-891. DOI: 10.1161/hyper tensionaha.116.08560

20. Zhang LY, Zhang YQ, Zeng YZ, Zhu JL, Chen H et al. TRPC1 anpeche pwopagasyon ak migrasyon kansè nan tete reseptè estwojèn pozitif epi li bay yon pi bon pronostik lè yo anpeche chemen PI3K/AKT la. Rechèch ak Tretman kansè nan tete 2020; 182 (1): 21-33. DOI: 10.1007/s10549-020-05673-8

21. Aldubayan MA. Proanthocyanidin grenn rezen soulaje estrès oksidatif ak apoptoz ki enplike nan fwa sourit ipètiwoyid. Anyèl rechèch ak revizyon nan byoloji 2019: 1-11. DOI: 10.9734/arb/2019/v33i630138

22. Sonmez E, Bulur O, Ertugrul DT, Sahin K, Beyan E et al.Hyperthyroidismenfliyanse fonksyon ren. Andokrin 2019; 65 (1): 144-148. DOI: 10.1007/s12020-019-01903-2

23. Yan M, Shu S, Guo C, Tang C, Dong Z. Estrès retikul endoplasmik nan ischemik ak nefrotoksik egirenblesi. Annals Medsin 2018; 50 (5): 381-390. DOI: 10.1080/07853890.2018.1489142

24. Bezprozvanny I, Mattson MP. Manyaj kalsyòm newòn ak patojèn maladi alzayme a. Tandans nan nerosyans 2008; 31 (9): 454-463. DOI: 10.1016/j.tins.2008.06.005

25. Dickhout JG, Carlisle RE, Austin RC. Interrelation ant ipètrofi kadyak, ensifizans kadyak, ak maladi ren kwonik: estrès retikul endoplasmik kòm yon medyatè patojèn. Rechèch sikilasyon 2011; 108 (5): 629-642. DOI: 10.1161/circresaha.110.226803

26. Wu J, Zhang R, Torreggiani M, Ting A, Xiong H et al. Endiksyon dyabèt nan sourit C57B6 ki gen laj rezilta nan nefropati grav: yon asosyasyon ak estrès oksidatif, estrès retikul andoplasmik, ak enflamasyon. Jounal Ameriken Patoloji 2010; 176 (5): 2163-2176. DOI: 10.2353/ajpath.2010.090386

27. Cybulsky AV. Estrès retikul andoplasmik nan maladi ren proteinuric.renEntènasyonal 2010; 77 (3): 187-193. DOI: 10.1038/ki.2009.389

28. Lorz C, Justo P, Sanz A, Subirá D, Egido J et al. Paracetamolinduced ren blesi tubulaires: yon wòl pou ER tèt chaje. Journal of the American Society of Nephrology 2004; 15 (2): 380-389. DOI: 10.1097/01.asn.0000111289.91206.b0

29. Inagi R, Nangaku M, Onogi H, Ueyama H, Kitao Y et al. Patisipasyon nan estrès retikul endoplasmik (ER) nan blesi podosit pwovoke pa akimilasyon twòp pwoteyin.renEntènasyonal 2005; 68 (6): 2639-2650. DOI: 10.1111/j.1523-1755.2005.00736.x

30. Yoshida H. ER estrès ak maladi. Jounal FEBS 2007 la; 274 (3): 630-658. DOI: 10.1111/j.1742-4658.2007.05639.x

31. Nesin V, Tsiokas L. TRPC1. Nan: Nilius B, Flockerzi V (editè). Mamifè Tranzitwa Reseptè Potansyèl (TRP) Chanèl Cation. 24yèm ed. Bèlen, Heidelberg, Almay: Springer; 2014. pp 15-51.

32. Li F, Peng F, Xia X, Zhao C, Luo Q et al. MiR-135a ankouraje fibwoz ren nan nefropati dyabetik lè li regle TRPC1. Diabetologia 2014; 57 (8): 1726-1736. DOI: 10.1007/s00125-014-3282-0

33. Selvaraj S, Solèy Y, Watt JA, Wang S, Lei S et al. Neurotoxin pwovoke estrès ER nan newòn dopaminergic sourit enplike downregulation nan TRPC1 ak anpèchman nan siyal AKT / mTOR. Journal of Clinical Investigation 2012; 122 (4): 1354-1367. DOI: 10.1172/JCI61332

34. Li J, Wu W, Zhao M, Liu X. Patisipasyon TRPC1 nan Nampt pwovoke cardiomyocyte hypertrophy atravè aktivasyon an nan estrès ER. Biyoloji selilè ak molekilè 2017; 63 (4): 33-37. DOI: 10.14715/CMB/2017.63.4.6